專利名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制基質(zhì)金屬蛋白酶從而可用于治療病態(tài)的哺乳動物的化合物及其可藥用的鹽，這些化合物及其可藥用的鹽通過抑制這類金屬蛋白酶而減輕哺乳動物的病態(tài)。
基質(zhì)金屬蛋白酶(“MMPs”)是一族涉及結(jié)締組織的降解和重建的蛋白酶。這族內(nèi)肽酶的成員存在于位于結(jié)締組織內(nèi)或與結(jié)締組織有關(guān)的各種細胞類型中，如成纖維細胞、單核細胞、巨噬細胞、內(nèi)皮細胞以及入侵的或轉(zhuǎn)移性腫瘤細胞。這些酶的作用是特異地降解細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)成份，如膠原、粘蛋白(蛋白質(zhì)核心)、纖維結(jié)合素和層粘連蛋白，在這些酶起作用的局部組織環(huán)境中，生長因子和細胞活素會刺激MMP的表達。這些普遍存在的胞外基質(zhì)成份存在于關(guān)節(jié)的襯里(內(nèi)表面)、間隙結(jié)締組織、基底膜以及軟骨中。MMPs對胞間基質(zhì)的過度降解與很多疾病的發(fā)病機理有關(guān)，這些疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、牙周疾病、異常血管生長、腫瘤入侵和轉(zhuǎn)移、角膜潰瘍，并且MMPs對基質(zhì)的過度降解與糖尿病的并發(fā)癥有關(guān)。因此，抑制MMP被認(rèn)為是一個好的治療干預(yù)的目標(biāo)。
MMPs具有一些特征，包括鋅和鈣依賴性、分泌物作為酶原、以及40-50％的氨基酸序列同源。MMP族包括膠原酶、間質(zhì)溶解素(stromelysins)、明膠酶和基質(zhì)溶解素(matrilysins)，更詳細地討論如下。
間質(zhì)膠原酶催化天然膠原I、II、III和X型的最初的以及限速裂解。膠原，哺乳動物的主要結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，是很多組織如軟骨、骨、腱和皮膚的基質(zhì)的基本成份。間質(zhì)膠原酶是非常特殊的金屬蛋白酶，其裂解膠原產(chǎn)生兩個片段，這兩個片段在生理溫度下自發(fā)變性，從而對特異性較差的酶裂解敏感。膠原酶的裂解會導(dǎo)致目的組織失去結(jié)構(gòu)上的完整性，這實質(zhì)上是一個不可逆的過程。
明膠酶包括兩種不同的但非常相關(guān)的酶一種由成纖維細胞以及很多其他類型的細胞分泌的72-kD酶，以及一種由單核吞噬細胞、嗜中性白細胞、角膜上皮細胞、腫瘤細胞和角質(zhì)形成細胞釋放的92-kD酶。已證實這些明膠酶降解明膠(變性的膠原)、膠原IV型(基底膜)和V型、纖維連蛋白和不溶的彈性蛋白。
已經(jīng)證實間質(zhì)溶解素(1和2)裂解各種基質(zhì)底物，包括層粘連蛋白、纖維連蛋白、粘蛋白以及膠原IV和IX型的非螺旋區(qū)域。
近來將基質(zhì)溶素(推斷金屬蛋白酶或PUMP)描述為基質(zhì)金屬蛋白酶族的成員。已證明基質(zhì)溶素降解各種基質(zhì)底物，包括粘蛋白、明膠、纖維連蛋白、彈性蛋白以及層粘連蛋白。已證明它在單核吞噬細胞、鼠子宮外植塊并且偶爾在腫瘤中表達。
抑制MMPs為與胞外基質(zhì)過度降解相關(guān)的疾病提供了有效的治療，這些疾病如關(guān)節(jié)炎(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎)、骨吸收疾病(如骨質(zhì)巰松)、與糖尿病、牙周疾病、角膜潰瘍、皮膚潰瘍、腫瘤侵入和轉(zhuǎn)移以及異常血管發(fā)生相關(guān)的增強的膠原蛋白破壞。
對設(shè)計和應(yīng)用MMP抑制劑已有描述，例如，在“酶抑制雜志”(J.EnzymeInhibition)(1987)，第2卷，第1-22頁；“藥物新聞和展望”(Drug News &Prospectives)(1990)，第3卷，第8期，453-458頁；“關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕病”)(Arthritis and Rheumatism)(1993)，第36卷，第2期，181-189頁；“關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕病”(Arthritis and Rheumatism)(1991)，第34卷，第9期，1073-1075頁；“關(guān)節(jié)炎與風(fēng)濕病論文集”(Seminars in Arthritis andRheumatism)(1990)，第19卷，第4期，增補本1(2月)，16-20頁；“未來的藥物”(Drugs of Future)(1990)，第15卷，第5期，495-508頁；以及“酶抑制雜志”(J.Enzyme Inhibition)(1987)，第2卷，1-22頁。MMP抑制劑也是各種專利和專利申請的主題，例如，美國專利5,189,178(Galardy)和5,183,900(Galardy)、歐洲已公布的專利申請0 438 223(Beecham)0 276436(F.Hoffman-La Roche)，以及PCT國際申請92/21360(Merck)、92/06966(Beecham)和92/09563(Glycomed)。
本發(fā)明提供了新的可用作基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑并且在治療以基質(zhì)金屬蛋白酶過度活性為特征的疾病狀態(tài)中有效的化合物。
因此，本發(fā)明的一個方面的目的是式(I)的化合物和其可藥用的鹽(本文中t-Bu表示叔丁基，Bn表示芐基)
其中R1是巰基、乙酰硫代、羧基、羥基氨基甲酰基、N-羥基甲酰基氨基、烷氧基羰基、芳氧羰基、芳烷氧羰基、芐氧基氨基甲?；蛘呦率降幕鶊F
其中R6是芳基或雜芳基；R2是烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基或雜芳基；R3是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基；R7是芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基；X是式-(CH2)m-Y-(CH2)n-的基團，其中Y是O、S或單鍵，m是0-4的整數(shù)，n是0-4的整數(shù)，并且m+n是0-4的整數(shù)；以當(dāng)p不為0時R2-X是二苯基烷基為條件，p是0-4的整數(shù)。
本發(fā)明的另一方面提供了合成式(I)的化合物和鹽的方法。
在又一方面，本發(fā)明的目的是式(I)的亞屬，即如下式(II)單個立體異構(gòu)體或其混合物的化合物，以及它的可藥用的鹽
其中R1是巰基、乙酰硫代、羧基、羥基氨基甲酰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、芐氧基氨基羰基，或下式的基團
其中R6是芳基或雜芳基；R2是烷基、芳烷基或環(huán)烷基烷基；R3是環(huán)烷基、烷基(被環(huán)烷基、羥基、巰基、烷基硫代、芳氧基、羧基、氨基、烷基氨基、胍基、氨基甲?；?、吡啶基或吲哚基任選取代的)或者芳烷基(被羥基、羧基、烷基或烷氧基任選取代的)；R4是硝基、氨基、氰基、羥基、烷氧基、羧基、烷氧基羰基、烷基磺酰基、鹵代烷基、烷氧羰基烷基、四唑基、氨基甲酰基(被烷基或二烴基氨基烷基任選取代的)，或者氨基磺?；?被烷基任選取代的)；并且R5是氫、鹵代或羥基；本發(fā)明的再一方面的目的是下式的化合物
其中R2是烷基、芳基或雜烷基；并且X是式-(CH2)m-Y-(CH2)n-的基團，其中Y是O、S或單鍵，m是0到4的整數(shù)，n是0到4的整數(shù)，并且m+n是0到4的整數(shù)；或者R2與X同為低基鏈烯基。
本發(fā)明還有一方面的目的是合成下式的化合物的方法
其中R2是芳基或雜芳基，通過下列方法制備(a)在有鈀/碳催化劑存在下，使下式的化合物氫化；或者
(b)使下式的化合物
與六甲基二硅疊氮化鈉(sodiumhexamethyl disilazide)和溴乙酸叔丁酯接觸。
本發(fā)明的其他方面的目的是下式的化合物(其中R2是芳基或雜芳基)
和一種通過下述步驟合成這些化合物的方法(a)在吡啶中把下式的化合物(其中R2是氫、芳基或雜芳基)
和過量的甲磺酰氯接觸，再于堿性條件下回流，并且(b)在步驟(a)中R2是氫時，使步驟(a)的產(chǎn)物在有堿和鈀催化劑存在下與芳基鹵或雜芳基鹵反應(yīng)。
本發(fā)明還有一個方面的目的是抑制哺乳動物體內(nèi)的基質(zhì)金屬蛋白酶活性的方法，該方法包括向需要治療的哺乳動物給藥治療有效劑量的如上定義的式(I)的化合物，該化合物以單一的立體異構(gòu)體、其混合物或其可藥用的鹽的形式給藥。
本發(fā)明的還有一個方面的目的是可用于抑制哺乳動物中基質(zhì)金屬蛋白酶的藥用組合物，該組合物包括治療有效劑量的如上定義的式(I)的化合物，該化合物作為單個的立體異構(gòu)體或其混合物的形式；或者該組合物包括其可藥用的鹽；并且包括可藥用的賦形劑。定義如說明書和所附的權(quán)利要求書中所應(yīng)用的，除非相反地規(guī)定，以下術(shù)語具有指定的含義“BOC”指叔丁氧羰基。
“CBZ”指芐氧羰基(芐酯基)。
“DCC”指N，N-二環(huán)己基碳化二亞胺“DMAP”指N，N-二甲基氨基吡啶。
“DMF”指N，N-二甲基甲酰胺。
“EDCI”指N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺。
“HOBT”指1-羥基苯并三唑。
“羥基”指-OH。
“氨基”指-NH2。
“乙酰硫代”指-SC(O)CH3。
“鹵代”指溴、氯或氟代。
“氨基甲?；敝?(CO)NH2。
“羧基”指-(CO)OH。
“羥基氨基”指-NHOH。
“羥基氨基甲?；敝?(CO)NHOH。
“N-羥基甲?；被敝?N(OH)(CO)H。
“芐氧基氨基甲?；敝?(CO)N(H)OCH2C6H5。
“脂?；被敝?NHC(O)Ra，其中Ra是烷基。
“巰基”指-SH。
“烷基”指直鏈的或支鏈的一價基，它完全由碳和氫組成，不具有不飽和鍵并且有1到10個碳原子，例如，甲基、乙基、正丙基、2-甲基丙基(異-丁基)、1-甲基乙基(異-丙基)、正丁基，以及1，1-二甲基乙基(叔丁基)、庚基等，它們可以選擇地被環(huán)烷基、羥基、巰基、烷基硫代、芳烷氧基、羧基、氨基、單和二烷基氨基、胍基、N，N-二烷基胍基、氨基甲酰基、芳基和雜芳基取代。
“鏈烷-二基”或“亞烷基”指直鏈的二價基團，它們?nèi)坑商己蜌浣M成，不含有不飽合鍵，有1到5個碳原子，例如，亞甲基、亞乙基、亞丙基(或丙烷-1，3-二基)等等。
“低級鏈烯基”指直鏈的一價烴基，它們具有2到6個碳原子，并且含有至少1個不飽合鍵，例如，丙-2-烯基、戊-4-烯基等等。
“烷基氨基”指式-NHRa的基團(其中Ra是如上定義的烷基)，例如，甲氨基、乙氨基、異丙氨基、正丁氨基等等。
“鹵代烷基”指式-RaRd的基團，其中Ra是如上定義的、且被如上定義的一個或多個鹵代基(Rd)取代的烷基，例如，2-氯乙基、2-溴乙基、三氟甲基等等。
“二烷基氨基烷基”指式-RaN(Ra)2的基團，其中每個Ra是相互獨立的如上定義的烷基，例如二甲基氨基乙基、二乙基-正丙基、二乙基氨基-正丙基等等。
“氨基磺酰基”指-(SO)2NH2。
“烷基磺?；敝甘?S(O)2Ra的基團，其中Ra是如上定義的烷基，例如，甲磺?；?、乙磺?；惐酋；鹊取?br> “烷基亞磺?；敝甘?S(O)Ra的基團，其中Ra是如上定義的烷基。
“烷基硫代”指式-SRa的基團，其中Ra是如上定義的選擇取代的烷基，例如，甲硫基、乙硫基、異丙硫基、正丁硫基等等。
“烷氧基”指式-ORa的基團，其中Ra是如上定義的烷基，例如，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等等。
“烷氧羰基烷基”指式-RaC(O)Rb的基團(其中Ra是如上定義的烷基，Rb是如上定義的烷氧基)，例如，甲氧羰基乙基、乙氧羰基乙基、甲氧羰基異丙基等等。
“芳基”指一價的不飽和芳香碳環(huán)，其具有一個單環(huán)(如苯基)、二個稠環(huán)(如，萘基)或三個稠環(huán)(如，菲基或芴基)，它們可以選擇地被一個或多個任選于下列基團的取代基取代烷基、羥基、羧基、鹵代基、氰基、氨基、硝基、四唑基、雜芳基、氨基烷氧基、烷基硫代、鹵代烷基、烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷基磺酰基、烷基亞磺酰基、選擇地被烷基取代的氨基磺?；⑦x擇地被烷基或二烷基氨基烷基取代的氨基甲?；⒒蛘呷〈梢允侨缥闹卸x的另外的芳基基團(如，形成一個選擇地取代的二苯基基團)。
“芳氧基”指式-ORb的基團(其中Rb為如上定義的芳基)，例如，苯氧基、喹啉-2-基氧基、萘-1-基氧基或萘-2-基氧基。
“芳烷基”指式-RaRb的基團(其中Ra是如上定義的烷基，并且Rb是如上定義的芳基)，例如，芐基、苯乙烯基、3-苯丙基等等。
“芳烷氧基”指式-ORaRb的基團，其中Ra是如上定義的烷基，且Rb是如上定義的芳基，例如，芐氧基、3-萘-2-丙氧基等等。
“烷氧羰基”指式-C(O)Rb的基團，其中Rb是如上定義的烷氧基，例如，甲氧羰基、乙氧羰基、叔丁氧羰基等等。
“芳烷氧羰基”指式-C(O)Rc的基團，其中Rc是如上定義的芳烷氧基，例如，芐氧羰基等。
“環(huán)烷基”指一種單價環(huán)基，它全部由碳和氫原子組成，不含有不飽和鍵，并且具5-7個碳原子，例如，環(huán)戊基、環(huán)己基以及環(huán)庚基。
“環(huán)烷基烷基”指式-RcRa的基團(其中Ra是如上定義的烷基，并且Rc是如上定義的環(huán)烷基)，例如，環(huán)己基甲基、環(huán)己基乙基、環(huán)戊基甲基等等。
“雜芳基”指一種單價不飽和的芳香碳環(huán)基團，其具有至少有一個雜原子如N、O、S的單環(huán)或多個稠環(huán)(例如，吡啶基、喹啉基、吲哚基、咔唑基、氧芴基、硫芴基、菲啶基)能選擇地被一個或多個獨立選自下列基團的取代基取代烷基、羥基、羧基、鹵代基、氰基、氨基、硝基、四唑基、芳基、氨基烷氧基、烷基硫代基、鹵代烷基、烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷基磺?；⑼榛鶃喕酋；⑦x擇地被烷基取代的氨基磺?；?，以及選擇地被烷基或二烷基氨基烷基取代的氨基甲酰基。
“雜芳基烷基”指式-RaRb的基團，其中Ra為如上定義的烷基，并且Rb是如上定義的雜芳基。
“雜環(huán)烷基”指單價的飽和的碳環(huán)基，其具有至少有一個雜原子如N、O、S的單環(huán)或多個稠環(huán)(如，嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基)。
“選擇的”或“選擇地”意指隨后所描述的情況的事件可以發(fā)生或可以不發(fā)生，并且該描述包括所述事件或情況發(fā)生的情況和不發(fā)生的情況。例如，“選擇地取代的喹啉-2-基”意指喹啉-2-基可以或者可以不被取代，并且該描述既包括取代的喹啉-2-基也包括沒有取代的喹啉-2-基。
文中所用的“氨基保護基“指那些意欲在合成過程中保護氮原子以免有不希望有的反應(yīng)的有機基團，并且包括芐基、?；?、乙?；?、芐氧羰基(芐酯基)、對-甲氧芐氧羰基、對-硝基芐氧羰基、叔丁氧羰基、三氟乙?；鹊?，但不限于這些基團。
文中所用的“堿”既包括如氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化銨、碳酸鉀等的強堿，也包括如吡啶、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、三乙胺、二甲基氨基吡啶等的有機堿。
“可藥用的鹽”指那些保持游離酸或游離堿的生物效用和特性的鹽，并且它們在生物學(xué)或其他方面不是不理想的。如果該化合物以游離堿存在，可以通過本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所知的方法來制備所需的鹽，例如，用如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸處理該化合物；或者用如乙酸、丙酸、乙醇酸、三聚氰酸、乙二酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、苯基-2-丙烯酸、苯乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、對-甲苯磺酸、鄰羥基苯甲酸等。如果該化合物以游離酸存在，也可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法來制備所需的鹽，如用無機堿或有機堿處理該化合物。由無機堿衍生的鹽包括鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽和鋁鹽等，但不限于這些鹽。由有機堿衍生的鹽包括伯胺鹽、仲胺鹽和叔胺鹽，以及包括有天然取代胺、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂的取代胺的鹽，如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、三甲胺、二環(huán)己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡堿、普魯卡因、醇胺(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、亞乙基二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可堿(3，7-二甲基黃嘌呤)、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺酯類等。
“哺乳動物”包括人和所有家養(yǎng)的和野生的動物，無限制地包括牛、馬、豬、綿羊、山羊、狗和貓等。
“治療有效劑量”指在向需要服藥的哺乳動物給藥式(I)的化合物時，其劑量對如下定義的用于通過抑制基質(zhì)金屬蛋白酶活性(如間質(zhì)溶素、明膠酶、基質(zhì)溶素和/或膠原酶)而減輕病癥的治療是足夠的。構(gòu)成“治療有效劑量”的式(I)的化合物的量會根據(jù)該化合物、疾病狀態(tài)和其嚴(yán)重性、以及要治療的哺乳動物來變化，但可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員根據(jù)他自己的知識和本公布按常規(guī)決定。
文中所用的“治療(動詞)”或“治療(名詞)”包括對哺乳動物的、尤其是人的疾病狀態(tài)的治療，該疾病狀態(tài)由通過抑制基質(zhì)金屬蛋白酶活性如間質(zhì)溶素、明膠酶、基質(zhì)溶素和/或膠原酶的活性而減輕，并且包括(i)防止哺乳動物的疾病狀態(tài)的發(fā)生，尤其是在預(yù)計該動物有該疾病狀態(tài)但還未診斷患病時；(ii)抑制該患病狀態(tài)，即遏制其發(fā)展；或者(iii)減輕該患病狀態(tài)，即使患病狀態(tài)消退。
“立體異構(gòu)體”指有相同的分子式和性質(zhì)，或相同的鍵的順序，但原子的空間排列不同的化合物。
式(I)的化合物或其可藥用的鹽在其結(jié)構(gòu)中至少有2個不對稱碳原子，并且因此可以以單一的立體異構(gòu)體、外消旋物以及以對映體和非對映體的混合物的形式存在。所有這些單一立體異構(gòu)體、外消旋物和其混合物都要包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在命名式(I)的化合物的單一的立體異構(gòu)體時，可以根據(jù)Cahn.Ingold和Prelog的“順序原則”的方法規(guī)定，式中的手性碳原子具有確定的描述符R或S。命名原則文中所用的命名原則是國際純粹化學(xué)和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(I.U.P.A.C.)命名原則的修正形式，其中把本發(fā)明的化合物命名為肽衍生物。當(dāng)式(I)的R3是一個氨基酸殘基時，包括有R3和鄰近的氮原子(以下以相對于N′氮的N氮來說明和命名)的那部分化學(xué)結(jié)構(gòu)和羰基被命名為相應(yīng)的氨基酸。以下就式(I)的代表性的化合物來說明本發(fā)明的化合物命名和編號。
例如，以下式(I)的化合物
其中R1是羧基；R2是二苯基；R3是4-(氰基)-芐基硫代異丙基；R7是苯基；X是丙烷-1，3-二基；并且p是0；被命名為N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)-戊酰基)-L-S-((4-氰基苯基)-甲基)-青霉胺-N′-(苯基)-甲酰胺。該化合物的另一名稱是N-(5-(二苯-4-基)-2R-羧甲基戊?；?-L-S-((4-氰基苯基)-甲基)-青霉胺-N′-(苯基)-甲酰胺。為便于參考，把該結(jié)構(gòu)的各個部分與相應(yīng)的命名原則聯(lián)系起來。
式(I)的幾種其他的具有代表性的化合物的結(jié)構(gòu)和名稱如下。
把以上化合物命名為N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)-戊?；?-L-叔丁基甘氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺。叔亮氨酸一詞可以和叔丁基甘氨酸互換。以上化合物的另一命名是N-(5-二苯-4-基-2R-羧甲基-戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)-甲酰胺。
把以上化合物命名為N-(2R-羧甲基-5-(7-(甘氨?；?-氨基-芴-2-基)-戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺。該化合物的另一命名是N-(5-(7-(甘氨?；?-氨基-芴-2-基)-2R-羧甲基-戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺。
以上化合物被命名為N-(2R-羧甲基-5-(苯基)-戊?；?L-6-(N，N′-二乙基胍基)-賴氨?；?N′-(4-(乙氧羰基)-苯基)甲酰胺?？蓪ⅰ癵uanidino”一詞和“guanido”互換著使用。該化合物的另一命名是N-(5-苯基-2R-羧甲基-戊?；?-L-6-(N，N′-二乙基胍基)-賴氨?；?N′-(4-乙氧羰基苯基)甲酰胺。
以上化合物被命名為N-(2R-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-4-((3-氯，5-嗎啉基)-苯-1-基)氧丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(吲哚-5-基)丁基)甲酰胺。該化合物的另一命名是N-(4-((3-氯，5-嗎啉基)-苯-1-基)-2R-(N″-甲酰基-N″-羥基氨基)-甲氧基-丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(吲哚-5-基)丁基)甲酰胺。
效用、試藥和給藥效用式(I)的化合物抑制哺乳動物基質(zhì)金屬蛋白酶，如間質(zhì)溶素、明膠酶、基質(zhì)溶素、和膠原酶，因而可用來治療與MMP引起的哺乳動物內(nèi)的基質(zhì)和結(jié)締組織的過度降解有關(guān)的疾病，如關(guān)節(jié)炎(風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎)、骨吸收疾病(如骨質(zhì)巰松)、與糖尿病、牙周疾病、角膜潰瘍、皮膚潰瘍、腫瘤入侵和轉(zhuǎn)移以及異常血管生成有關(guān)的膠原蛋白破壞增強。試藥可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的各種體外和體內(nèi)檢測法來證實式(I)的化合物能抑制基質(zhì)金屬蛋白酶活性，如間質(zhì)溶素、明膠酶、基質(zhì)溶素和/或膠原酶的活性，這些檢測法如在“分析生物化學(xué)”(Anal.Biochem.)(1985)，第147卷，437頁中的檢測法以及在“歐洲生物化學(xué)學(xué)會聯(lián)合會通訊”(FEBS)(1992)，第296(3)卷，263頁中的MMP酶檢測法或其改進的形式。給藥以純凈物的形式或以適宜的藥用組合物形式來給藥式(I)的化合物或其可藥用的鹽，可以通過任何用于類似用途的可接受的給藥方式或劑型來進行。因此，可以如下給藥，例如，口服、經(jīng)鼻、非腸道、外用、穿皮、或經(jīng)直腸；以固體劑型、半固體劑型、凍干粉劑型、或以液體劑型，如片劑、栓劑、丸劑、軟膠囊和硬膠囊、粉劑、溶液、懸浮劑或者氣霧劑等，優(yōu)選以適于簡易給藥精確劑量的單位劑量的劑型。該組合物包括一種常用的藥用載體或賦形劑和作為該/一種活性劑的式(I)的化合物，并且，也可以包括有其它藥用制劑、藥劑、載體和輔藥等。
通常，根據(jù)所要的給藥形式，可藥用的組合物可含有1％到大約99％重量的式(I)的化合物或其可藥用的鹽，以及99％到1％重量的適宜的藥用賦形劑。優(yōu)選該組合物是大約5％到75％重量的式(I)的化合物或其可藥用的鹽，其余成份是適宜的藥用賦形劑。
優(yōu)選的給藥途徑是口服、并且用一種可根據(jù)要治療的疾病狀態(tài)的嚴(yán)重程度進行調(diào)節(jié)的適宜的日用劑量劑型。對于這樣的口服給藥，含有式(I)的化合物或其可藥用的鹽類的可藥用的組合物可以通過摻入任何正常使用的賦形劑來制備，這些賦形劑如甘露醇、乳糖、淀粉、預(yù)先膠化的淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素醚的衍生物、葡萄糖、明膠、蔗糖、檸檬酸和棓酸丙酯等。這樣的組合物采取溶液、懸浮劑、片劑、丸劑、膠囊、粉劑、持續(xù)釋放的配方等劑型。
這樣的組合物優(yōu)選采取膠囊、caplet或片劑的形式，因而也可含類似乳糖、蔗糖、磷酸二鈣等的稀釋劑，類似croscarmellose sodium或其衍生物的崩解劑，類似硬脂酸鎂等的潤滑劑，以及類似淀粉、阿拉伯樹膠、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、纖維素醚衍生物等的粘合劑。
也可將式(I)的化合物或其可藥用的鹽配成栓劑來使用，例如，將大約0.5％到50％的活性成份分配到在體內(nèi)緩慢溶解的載體中去，這些載體如，聚氧乙二醇和聚乙二醇(PEG)，例如PEG 1000(96％)和PEG 4000(4％)。
例如，可以通過把式(I)的化合物(大約0.5％到20％)或其可藥用的鹽以及任選的藥用輔助劑溶解、分散(等)到如水、鹽水、含水葡萄糖、甘油、乙醇等載體中以形成溶液或懸浮液，來制備液體的可藥用的組合物。
如果有必要，本發(fā)明的藥用組合物也可以含有少量的助劑，如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑、抗氧化劑等，例如檸檬酸、山梨醇單月桂酸酯、三乙醇胺油酸鹽、丁基化羥基甲苯等。
實際制備這些劑型的方法是已知的，或者對于那些本領(lǐng)域的技術(shù)人員會是明白的，例如，參見Remington的“藥物科學(xué)”(Pharmaceutical Sciences)，第18版(Mack出版公司，Easton Pennsylvania，1990)?？傊?，根據(jù)對本發(fā)明的講述，給藥的組合物都含有治療有效劑量的用于治療通過抑制基質(zhì)金屬蛋白酶而減輕疾病的化合物(I)和其可藥用的鹽。
以治療有效劑量來給藥式(I)的化合物或其可藥用的鹽，該劑量將根據(jù)各種因素而有所變化，這些因素包括所用的特定的化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時間、年齡、體重、整體健康狀況、性別、膳食、給藥的方式和時間、排泄頻率、藥物組合、特定疾病狀態(tài)的嚴(yán)重性以及正進行治療的病人。通常，治療有效的每日劑量是每天大約0.14mg-14.3mg/kg體重的式(I)的化合物或其可藥用的鹽；優(yōu)選為每天大約0.7mg-10mg/kg體重，最優(yōu)選為大約1.4mg-7.2mg/kg體重。例如，向一個70kg的人給藥時，劑量范圍將為每天大約10mg-1.0g的式(I)的化合物或其可藥用的鹽，優(yōu)選為每天大約50mg-700mg，最優(yōu)選是每天大約100mg-500mg。優(yōu)選實施方案優(yōu)選的是X為鏈烷-二基并且p為0、2或3的式(I)的化合物。
在p是2或3的化合物中；特別優(yōu)選的是那些化合物，其中R1是羧基、R2是二苯基、R3是環(huán)己基，并且R7是任選取代的苯基[尤其是4-(氨基磺酰基)-苯基]或N-嗎啉基。
在p是0化合物中，特別優(yōu)選的一組化合物的R2是烷基、任選地取代的苯基，或下式的基團
并且R7是4-吡啶基或任選取代的苯基。
在這一類化合物中，優(yōu)選的亞類化合物的R1是羧基、羥基氨基甲?；?、或N-羥基甲?；被?；R2是苯基、二苯基、4-(吡啶基)-苯基、或2-甲基丙基；R3是叔丁基、4-氨基丁基、烷基氨基丁基、二烷基氨基丁基、4-(N，N′-二乙基-胍基)-丁基、丙基、2-甲基丙基、1-羥基異丙基、1-羥基乙基或環(huán)己基；并且X為單鍵、亞乙基或丙烷-1，3-二基。
在這一亞類中，優(yōu)選的一組化合物的R2是二苯基、R3是叔丁基，并且R7是4-吡啶基；特別優(yōu)選的是那些R1是羧基、N-羥基甲酰基氨基或羥基氨基甲?；幕衔铩?br> R2是下式的基團的這一亞類化合物也是優(yōu)選的
其中A是CH2；R10是H或酰胺；R11是H；R7是任選取代的苯基，并且X是丙烷-1，3-二基。
在這一亞類中，優(yōu)選的化合物的R1是羧基、羥基氨基甲?；騈-羥基甲酰基氨基；R3是烷基(特別是2-甲基丙基)；并且R7是烷氧羰基苯基[特別是4-(甲氧羰基)苯基]。
在這一類化合物中，也是優(yōu)選的一個亞類化合物的R1是羧基，R2是苯基，R3是烷基[特別是4-(氨基)丁基和4-(二乙基胍基)N-丁基]或環(huán)烷基(尤其是環(huán)己基)，并且R7是任選取代的苯基[尤其是4-(乙氧羰基)-苯基或4-(二烷基氨基乙基氨基磺?；?苯基]，并且，X是亞乙基或丙烷-1，3-二基。
在這類化合物中，也是優(yōu)選的一個亞類的化合物的R1是巰基、羧基、羥基氨基甲酰基或N-羥基甲?；被?，R2是2-甲基丙基，R3是烷基(尤其是丙基、2-甲基丙基)、環(huán)烷基(尤其是環(huán)己基)或雜芳基(尤其是3-甲基吲哚基)，R7是任選取代的苯基[尤其是4-甲氧苯基、4-羧基苯基、4-(甲氧羰基)-苯基或4-(二甲基氨基乙基氨基甲?；?苯基]，并且X是單鍵。
在這類化合物中，也為優(yōu)選的一個亞類的化合物的R1是羧基，R2是4-(2-羥乙基)苯基、4-(2-羥基-丙基)苯基、4-(2-羥基丁基)苯基、4-(吡啶基)苯基、二苯基、4′-(氨基乙氧基)二苯基、4′-(氰基)二苯基或4′-(羥基)二苯基，R3是2-甲基丙基，R7是4-(甲氧羰基)苯基，并且X是丙烷-1，3-二基。
特別優(yōu)選的是R2為二苯基、尤其是R7為任選取代的苯基的那個亞類的化合物。
在這一特別優(yōu)選的亞類中，優(yōu)選的化合物的R1是羧基，R3是烷基或環(huán)烷基(尤其是環(huán)己基、4-(氨基)丁基、4-(異丙基氨基)丁基、1-羥基異丙基或叔丁基)，X是丙烷-1，3-二基，并且R7是苯基、4-(羥基乙基-氨基磺?；?苯基、4-(二甲基氨基乙基氨基磺?；?苯基、4-(乙氧羰基)-苯基、4-(N-嗎啉基丙基氨基磺?；?苯基、4-(甲基氨基磺?；?-苯基、4-(羥基乙基氨基磺?；?-苯基或4-(甲基亞磺酰基)苯基。
另一類優(yōu)選的、特別是用于抑制基質(zhì)溶素的化合物是式(II)的化合物，特別是那些R1是巰基或乙酰硫代的化合物。
在該第二類中，一個優(yōu)選的亞類化合物的R2是烷基、芳烷基、環(huán)烷基烷基，R3是環(huán)烷基或烷基(任選被環(huán)烷基、羥基、芳烷氧基、烷基硫代、吡啶基或吲哚基取代的)，R4是氰基、羧基、羥基、烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基烷基、氨基甲?；?任選地被芳烷基氨基烷基取代的)或氨基磺酰基(任選地被烷基取代的)，并且R5是氫。
在這一亞類中，一組優(yōu)選的化合物的R2是烷基；R3是環(huán)己基、烷基(選擇地被環(huán)己基、羥基、芐氧基、甲基硫代、吡啶基或吲哚基取代的)，并且R4是羧基、烷氧羰基和氨基磺?；?。
在這組化合物中，優(yōu)選的是R2為2-甲基丙基的化合物。特別優(yōu)選的是R3是2-甲基丙基的化合物。
用于抑制基質(zhì)溶素的第三類優(yōu)選的化合物是那些R1為羧基的式(II)的化合物。
在該第三類化合物中，優(yōu)選的亞類的那些化合物的R2為烷基、芳烷基、環(huán)烷基烷基，R3是環(huán)烷基或烷基(任選被環(huán)烷基、羥基、芳烷氧基、烷基硫代、吡啶基或吲哚基)，R4是氰基、羥基、烷氧基、羧基、烷氧羰基、烷氧羰基烷基、氨基甲?；?任選地被芳烷基氨基烷基取代的)，或氨基磺?；?任選被烷基取代的)，并且R5是氫。
在這一亞類中，優(yōu)選的一組化合物的R2是烷基，R3是環(huán)己基、烷基(任選被環(huán)己基、羥基、芐氧基、甲基硫代、吡啶基或吲哚基取代的)，并且R4是羧基、烷氧羰基和氨基磺?；?。
在這一組化合物中，優(yōu)選的是那些R2為2-甲基丙基的化合物。特別優(yōu)選的那些化合物的R3是環(huán)己基、2-甲基丙基、吡啶-3-基-甲基、1-芐氧乙基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、1-羥基乙基和吲哚-2-基甲基；并且R4是甲氧羰基。
用來抑制基質(zhì)溶素的第四類優(yōu)選的化合物是那些R1為羥基氨基甲?；氖?II)的化合物。
在第四類中，一個優(yōu)選的亞類的化合物的R2是烷基、芳烷基、環(huán)烷基烷基， R3是環(huán)烷基或烷基(任選被環(huán)烷基、羥基、芳烷氧基、烷基硫代、吡啶基或吲哚基取代的)，R4是氰基、羥基、烷氧基、羧基、烷氧羰基、烷氧羰基烷基、氨基甲?；?任選被芳烷基氨基烷基取代的)，或氨基磺?；?任選被烷基取代的)，并且R5是氫。
在這一亞類中，優(yōu)選的一組化合物的R2是烷基，R3是環(huán)己基、烷基(任選被環(huán)己基、羥基、芐氧基、甲基硫代、吡啶基或吲哚基取代的)，并且R4是羧基、烷氧羰基和氨基磺?；?。
在這一組中，優(yōu)選的化合物是那些R2為2-甲基丙基的化合物。特別優(yōu)選的那些化合物的R3是環(huán)己基、2-甲基丙基、吡啶-3-基甲基、1-芐氧乙基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、1-羥基乙基和吲哚-2-基甲基。
目前，最優(yōu)選的式I的化合物如下N-(2R-(N″-羥基氨基甲?；?甲基-4-(甲基)戊酰基)-L-色氨酸-N′-(4-(羧基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N″-羥基氨基甲?；?甲基-4-(甲基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺.
N-(2R-(N″-羥基氨基甲?；?甲基-4-(甲基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(羧基)戊基)甲酰胺；N-(2R-巰基甲基-4-(甲基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-乙酰硫代甲基-4-(甲基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-4-(甲基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰
N-(2R-(N″-羥基氨基甲?；?甲基-4-(甲基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N″-羥基氨基甲?；?甲基-4-(甲基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲?；?甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺；N-(N″-甲酰基-N″-羥基氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R，S)-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-4-(甲基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4R，S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(3-嗎啉-4-基)丙基氨基磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-羥基乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N″-羥基氨基甲酰基)-甲基-4-(甲基)戊?；?-D，L-正纈氨酸-N′-(4-(二甲基氨基乙基氨基甲酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(苯基)戊?；?-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-(N∈-異丙基)賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基)-4-(苯基)丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(N″，N″-二甲基氨基乙基氨基磺?；?-苯基)甲酰胺；和N-(2R-羧甲基-5-(苯基)戊?；?-L-(N′，N′-二乙基胍基)賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺。
合成式(I)的化合物如以下描述來制備式(I)的化合物，例如，參考反應(yīng)流程

圖1-7，除非另外指明，其中所指明的取代基(R1、R2等)有在本發(fā)明概要中所描述的含義。某些反應(yīng)流程說明3式(I)的結(jié)構(gòu)，其中p是0，R7是任選取代的苯基(在本發(fā)明的概要中已對與式(II)相關(guān)的取代基R4和R5進行了描述)。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員會認(rèn)識到的，雖然能夠以類似方法合成相應(yīng)的p是1-4且R7為其它定義的化合物，只有在式(I)的取代基和/或變量結(jié)合形成穩(wěn)定的化合物時，這些結(jié)合才是允許的。
作為單一立體異構(gòu)體或其混合物的式(I)的化合物以及其可藥用的鹽，都是肽衍生物，或者部分可由α-氨基酸衍生物成份制備。在下述文獻中已對形成肽鍵的標(biāo)準(zhǔn)方法進行了說明M.Bodanszky等人，“肽合成實踐”(ThePractice of Peptide Synthesis)(1984)，Springer-Verlag)；M.Bodanszky，“肽合成的原理”(Principles of Peptide Synthesis)(1984)，Springer-Verlag；J.P.Greenstein等人；“氨基酸化學(xué)”(Chemistry of the Amino Acids)(1961)，第1-3卷，John Wiley and Sons Inc.；G.R.Pettit，“合成肽”(SyntheticPeptides)(1970)，第1-2卷，Van Nostrand Reinhold Company。
合成反應(yīng)的參數(shù)“溶劑”、“惰性有機溶劑”或“惰性溶劑”等詞意指在本文所描述的反應(yīng)條件下為惰性的溶劑[包括，例如，苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃(“THF”)、二甲基甲酰胺(“DMF”)、氯仿、亞甲基氯(或二氯甲烷)、二乙醚、甲醇、吡啶等]。除非另外指明，本發(fā)明的反應(yīng)中所用的溶劑都是惰性有機溶劑。
“定量”一詞意指加入某一劑量，它足以完成一種一定的作用，如使溶液有所需的體積。
除非另外指明，文中所述的反應(yīng)是在大氣壓力下、在5℃-100℃的溫度范圍(優(yōu)選10℃-50℃；最優(yōu)選在“室溫”或“環(huán)境溫度”下，如20℃)內(nèi)發(fā)生。此外，除非另外指明，要使反應(yīng)時間和條件大約為，例如，在大約大氣壓力下、大約5℃-100℃(優(yōu)選大約10℃-50℃；最優(yōu)選大約20℃)的溫度范圍內(nèi)、大約1-10小時(優(yōu)選大約5小時)的條件下進行。要將實施例中給定的參數(shù)看成是具體的，而不是大約的。
用于生成式(I)的化合物的酰胺偶合劑通常是通過碳化二亞胺方法，利用類似二環(huán)己基碳化二亞胺或N′-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺(EDCI)的反應(yīng)劑，在1-羥基苯并三唑(HOBT)存在下、于惰性溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)中而進行的。其它的形成酰胺或肽鍵的方法包括通過酰氯、?；B氮化物、混合的酐或活化的酯如硝基苯酯的合成途徑，但不限于這些途徑。一般，使用有或無肽片段的溶液相酰胺偶合劑。
對用于制備式(I)的化合物中所用的端氨基或羧基的保護基團的選擇，部分由特定的酰胺或肽偶合條件決定，并且部分地由偶合中涉及的氨基酸和/或肽成份決定。通常利用的氨基保護基包括那些本領(lǐng)域熟知的基團，例如對甲氧基芐氧羰基、芐氧羰基(也稱為芐酯基或CBZ)、對硝基苯氧羰基、叔丁氧羰基(BOC)等。優(yōu)選把或者是BOC或者是CBZ用作α-氨基保護基，這是因為用弱酸[例如，在乙酸乙酯中用三氟乙酸(TFA)或鹽酸]或者用催化加氫反應(yīng)把它們除去時相對容易一些。
如果有必要，可以通過任何合適的分離或純化方法，如過濾、萃取、結(jié)晶、柱色譜、薄層色譜或厚層色譜或者這些方法的組合來完成本文中所述的化合物和中間體的分離和純化作用。根據(jù)下文的實施例，可以對適宜的分離和離析進行具體說明。不過，當(dāng)然也可以采用其他等效的分離和離析方法。
利用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法如選擇結(jié)晶或色譜和/或本文中所公開的方法，可以使式(I)化合物的各個立體異構(gòu)體彼此分離。制備式(E)的化合物式(E)的化合物是在制備式(I)的化合物中使用的中間體，如反應(yīng)流程圖1中所示來制備，其中R12是甲磺?；蚣妆交酋；磻?yīng)流程圖1
原材料可以根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法(例如，參見已公布的歐洲專利申請0276436)或者可以根據(jù)以下實施例1中所述的方法來制備式(Ea)的化合物。可以從市場上購買到或者可以根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法來制備式(Ed)的化合物。
式(Eb)的化合物-通常，通過首先于0-15℃(優(yōu)選0℃)下在有堿(優(yōu)選二異丙基乙胺和雙-(三甲基甲硅烷基)-乙酰胺和多聚甲醛)存在下，在非質(zhì)子傳遞溶劑中處理式(Ea)的化合物，來制備式(E)的化合物。使得到的溶液的溫度達到25-37℃(優(yōu)選為37℃)，持續(xù)18小時。再通過標(biāo)準(zhǔn)方法，優(yōu)選通過蒸發(fā)溶劑、萃取和過濾來分離式(Eb)的醇。
式(Ec)的化合物-把溶于非質(zhì)子傳遞溶劑(優(yōu)選為二氯甲烷)的式(Eb)的醇冷卻至大約-20℃-0℃，優(yōu)選至大約-20℃，然后通過標(biāo)準(zhǔn)的處理醇的方法，用至少等于大約過量100％的化學(xué)計量的甲磺酰氯或甲苯磺酰氯進行酯化反應(yīng)。在-20℃下，酯化反應(yīng)進行一段起始時間(優(yōu)選3.5小時)，然后是于室溫下進行第二段時間(優(yōu)選3.5小時)。再通過標(biāo)準(zhǔn)分離方法，優(yōu)選為萃取、過濾和蒸發(fā)把式(Ec)的酯從反應(yīng)混合物中分離出來。
式(Ee)的化合物-把質(zhì)子惰性溶劑(優(yōu)選為DMF)中的式(Ec)的酯與式(Ed)的鹽[優(yōu)選為由式(Ed)的化合物和氫化鈉在質(zhì)子惰性溶液(優(yōu)選為DMF)中反應(yīng)形成的鈉鹽]反應(yīng)大約16-20小時，優(yōu)選大約18小時，最初是在大約0℃溫度下，并且緩慢加熱至室溫。通過標(biāo)準(zhǔn)的分離技術(shù)，如萃取、蒸發(fā)和快速色譜法，分離所得到的式(Ee)的巰基化合物。
式(E)的化合物-然后于堿性條件下，優(yōu)選在有氫氧化鈉存在下，把式(Ee)的化合物水解，生成式(E)的化合物，以標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)把式(E)的化合物從反應(yīng)混合物中分離。
制備式(Ia)的化合物式(Ia)的化合物是其中R1為下式基團的式(I)的化合物
(其中，在R6為芳基時，這一基團優(yōu)選為萘-1-基、萘-2-基或苯基；并且在R6是雜芳基時，R1優(yōu)選是吡啶基或喹啉-2-基；R2優(yōu)選為烷基；R5優(yōu)選為氫)，如反應(yīng)流程2中所述的來制備該化合物。
反應(yīng)流程2
原材料可以從市面上買到N-保護的式(A)的氨基酸和式(B)的化合物，或者可以根據(jù)本領(lǐng)域中普通技術(shù)人員所知的方法來制備這些化合物。參考反應(yīng)流程1，如所述的來制備式(E)的化合物。
式(C)的化合物-通常，通過首先在標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合條件下，使式(A)的化合物和式(B)的化合物[或者與另外的式H2N(CH2)p-R7的化合物]偶合，制備式(Ia)的化合物，再生成式(C)的化合物。例如，向冷的(0-5℃)的式(A)的化合物和摩爾數(shù)過量的DMF中的HOBT溶液中，加入摩爾數(shù)過量的EDCI。在0-5℃(優(yōu)選為0℃)下，把所得的溶液攪拌大約1-2小時，優(yōu)選大約1小時。再在有堿(優(yōu)選為DMAP)存在下，向這一冷的溶液中加入等摩爾數(shù)的式(B)的化合物的溶液。于室溫(優(yōu)選25℃)下，把所得的混合物攪拌12-24小時，優(yōu)選為24小時。再用標(biāo)準(zhǔn)的肽分離技術(shù)把式(C)的化合物從反應(yīng)混合物中分離。
式(D)的化合物-然后在弱酸性條件下，優(yōu)選在有三氟乙酸存在下，除去式(C)的化合物的氨基保護基團，生成式(D)的化合物。
式(D)的化合物的其他制備方法-特別是在R3為叔丁基、其他β-支鏈氨基酸側(cè)鏈或環(huán)己基，P為0，并且R7是芳基或雜芳基時，其它的合成式(D)化合物的方法使用了中間體(A-1)，其制備方法見反應(yīng)流程圖2A。特別是在R3為1-羥基異丙基或另外的β-羥基氨基酸側(cè)鏈，并且R7是芳基或雜芳基時，采取了另外的制備式(D)的化合物的方法，在反應(yīng)流程圖2B中進行了說明。
反應(yīng)流程圖2A
如反應(yīng)流程圖2A中所示，在0℃下，有DCC存在時，把式(A)的化合物和大約1摩爾當(dāng)量的乙腈中的N-羥基琥珀酰亞胺偶合。于0℃-25℃下在攪拌進行反應(yīng)8-16小時，生成相應(yīng)的式(A-1)的N-羥基琥珀酰亞胺酯。然后將把該酯和惰性溶劑中的式(B)的化合物或其它的式H2N-(CH2)p-R7的化合物在100℃下優(yōu)選反應(yīng)3小時，分離得到的式(C)的化合物并去保護，生成如以上于反應(yīng)流程圖2中所描述的式(D)的化合物。
反應(yīng)流程圖2B
如反應(yīng)流程圖2B中所述，在低于10℃的溫度(優(yōu)選0℃)下，于惰性無水溶劑如THF中把式(C-1)的化合物和丁基鋰攪拌大約1小時，再冷卻至大約-70℃，并且和3摩爾當(dāng)量的丙酮反應(yīng)。通過標(biāo)準(zhǔn)方法，把式(C-2)的化合物(以外消旋物的形式)分離并純化。接著氫解除去CBZ保護基后，得到式(D-1)的化合物。
式(Ia)的化合物-如反應(yīng)流程圖2中所描述的，在標(biāo)準(zhǔn)的肽偶合條件下，把式(D)的化合物和式(E)的化合物偶合。例如，向冷的(0-5℃，優(yōu)選為0℃)的惰性溶劑(優(yōu)選THF)中的式(D)的化合物溶液中加入1，1′-羰基二咪唑。于0-5℃(優(yōu)選0℃)下，把得到的混合物攪拌60-90分鐘，優(yōu)選為75分鐘，再與式(E)的化合物反應(yīng)大約12-17小時，優(yōu)選大約15小時。然后通過標(biāo)準(zhǔn)的肽分離技術(shù)例如，萃取和反相高效液相色譜(HPLC)，把得到的式(Ia)的化合物從反應(yīng)混合物中分離。
制備式(F)的化合物式(F)的化合物
其中，R8是叔丁基，式(F)的化合物為如以下反應(yīng)流程(4)中所示的制備式(I)的化合物中所用的中間體。如反應(yīng)流程圖3中所示來制備式(F)的化合物。
反應(yīng)流程圖3
原材料可從市面上買到式(Fa)的化合物，或者可以根本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法，例如，通過以下實施例11中所描述的方法來制備。例如，可從Aldrich購買到L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺和D-(-)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺。
式(Fb)的化合物-通常，通過首先把式(Fa)[其中R2包括式(I)的“X”基，并可以是例如，二苯基亞丙基或芴基亞丙基]的化合物和L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺縮合制備式(F)的化合物(以該合成反應(yīng)所得的一或兩種異構(gòu)物來進行說明)，再生成式(Fb)的化合物。
式(Fc)的化合物-利用六甲基二硅疊氮化鈉來生成陰離子，持續(xù)1小時，用叔丁基溴乙酸鹽使反應(yīng)立即停止，生成相應(yīng)的式(Fc)的酯。
式(F)的化合物-在堿性條件[如過氧化氫鋰(由過氫氧化鋰和過氧化氫于原位反應(yīng)生成)]下，最初于低溫(優(yōu)選0℃)下持續(xù)15分鐘，溫?zé)嶂潦覝夭⒊掷m(xù)2小時。把混合物冷卻回0℃，在攪拌下加入亞硫酸鈉和碳酸氫鈉的含水混合物，然后使混合物恢復(fù)至室溫，中和pH，生成式(F)的化合物的單一的立體異構(gòu)體，其中與-X-R2基團相連的碳原子處于(R)構(gòu)型。以類似的方法，但用D-(-)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺代替L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，可以制備相應(yīng)的S構(gòu)型的單一的立體異構(gòu)體。式(F)的化合物的其他制備方法另一種制備式(F)的立體異構(gòu)體的方法利用了市場上能購買到的手性化合物，4S-苯甲基噁唑烷酮，見以下反應(yīng)流程圖3A[原材料部分的后面，說明了制備式(Fa′)的原材料的化合物]。原材料如反應(yīng)流程圖3A-1中所示的制備式(Fa′)(其中X為-O-CH2-CH2-)的化合物(圖中Et表示乙基)。
反應(yīng)流程圖3A-1
在0℃-室溫下，在如DMF的溶劑中，在化學(xué)計算當(dāng)量的氫化鈉存在下，把市場上能購買到的醇(a)和4-溴巴豆酸乙酯(b)反應(yīng)；或者在原材料是酚(a)的情況下，在過量碳酸鉀存在下與丙酮中的(b)回流數(shù)小時。在鉑/碳存在下，通過加氫將得到的不飽和酯(c)轉(zhuǎn)化成飽和的酯(d)，然后用乙醇中的氫氧化鈉水溶液把酯(d)皂化成酸(e)。在室溫至50℃溫度范圍內(nèi)，通過草酰氯的作用把酸(e)轉(zhuǎn)化為酰氯(Fa′-1)。
如反應(yīng)流程圖3A-2中所述制備式(Fa′)(其中X是-S-CH2CH2-)的化合物。
反應(yīng)流程圖3A-2
于室溫下，把從市場上購買的某硫醇(f)和DMF中的氫化鋰反應(yīng)數(shù)小時，生成硫醇鋰。加入過量的丁內(nèi)酯(g)，并在氬氣氣氛中加熱使其回流，生成酸(h)。如前所述，再把用草酰氯把酸(h)轉(zhuǎn)化成?；?Fa′-2)。
根據(jù)反應(yīng)流程圖3A-3中所述的制備式(Fa′)(其中X為-CH2CH2-O-)的化合物。
反應(yīng)流程圖3A-3
在很多情況下，式(l)和(k)的化合物都是市場上能夠買到的。買不到時，如下制備這些化合物。于回流溫度且有催化的四(三苯膦)鈀存在下，于甲苯中用乙烯基-三丁基錫烷(可從Aldrich Chemical Co.購買到)處理數(shù)小時把式(j)(其中R2是芳基或雜芳基)的化合物轉(zhuǎn)化為烯烴(k)。在0℃至室溫下，通過用THF中的甲硼烷進行數(shù)小時硼氫化作用，再把烯烴(k)轉(zhuǎn)化成醇(1)，然后用堿性的過氧化氫氧化。在升高的溫度(優(yōu)選60℃)下，用氯乙酸和DMF中的過量氫化鈉處理，把醇(l)轉(zhuǎn)化成酸(m)。如前所述，用草酰氯把酸(m)轉(zhuǎn)化成酰氯(Fa′-3)。
根據(jù)反應(yīng)流程圖3A-4制備式(Fa′)(其中X為-CH2CH2-S-)的化合物。
反應(yīng)流程圖3A-4
在0℃下，通過向由三膦和THF中的二乙基偶氮碳酸鹽生成的反應(yīng)劑中加入硫代乙酸，把醇(l)轉(zhuǎn)成硫代乙酸酯(n)。有氯代乙酸存在下，用甲醇中的碳酸鉀處理，把硫代乙酸酯(n)轉(zhuǎn)化成酸(p)。如前所述，用草酰氯把酸(p)轉(zhuǎn)化成酰氯(Fa′-4)。
反應(yīng)流程圖3A
式(Fb′)的化合物-首先在標(biāo)準(zhǔn)條件下，把式(Fa′)的化合物和4S-苯基甲基噁唑烷酮縮合，生成相應(yīng)的式(Fb′)的化合物。
式(Fc′)的化合物-向如THF的惰性溶劑中的式(Fb′)的化合物中加入大約等摩爾劑量的六甲基二硅疊氮化鈉。反應(yīng)于-80℃至-95℃下進行大約15分鐘。向該混合物中過量加入溴乙酸叔丁酯，并于-90℃至-60℃下把該溶液攪拌大約2小時，生成式(Fc′)的單一的立體異構(gòu)體，通過標(biāo)準(zhǔn)的有機化學(xué)方法來純化這一產(chǎn)物。
式(F′)的化合物-在堿性條件下，除去式(Fc′)的噁唑烷酮基，生成式(F′)的單一的立體異構(gòu)體，例如，如參考反應(yīng)流程圖3中式(F)化合物的制備所述的。在以下的合成中，式(F′)的那些化合物可以和式(F)的化合物替換著使用。
其他的制備式(F)的化合物的方法-如參考反應(yīng)流程圖3B所描述的，來制備式F的化合物。
反應(yīng)流程圖3B
原材料如參考到反應(yīng)流程圖3A所述的，可以如制備式(Fc′)的化合物一樣，通過用烯丙基化合物替換相應(yīng)的式(Fa′)的化合物(其中標(biāo)明為X的基團是丙-2-烯基，且R2是H)來制備式(Fc″)所示的化合物。
式(Fc″-1)的化合物-在有堿和鈀催化劑存在下，通過加入芳基或雜芳基鹵(優(yōu)選為溴化物或碘化物)，并于大約100℃下把反應(yīng)混合物加熱大約2-4小時(優(yōu)選4小時)，進行式(Fc″)化合物的芳基化或雜芳基化作用，生成式(Fc″-1)的化合物。
式(Fc″-2)的化合物-式(Fc″-1)的烯丙基化合物的催化加氫反應(yīng)(Pd/C)，生成相應(yīng)的式(Fc″-2)的烷基化合物。
式(F)的化合物-把式(Fc″-2)的化合物置于堿性條件，如有過氧化氫鋰(于原位由氫氧化鋰和過氧化氫制得)的條件下，最初于低溫(優(yōu)選為0℃)下持續(xù)15分鐘，加溫至室溫并持續(xù)2小時。把混合物冷卻回到0℃，在攪拌下加入亞硫酸鈉和碳酸氫鈉的含水混合物，在使混合物恢復(fù)至室溫后，中和pH值，通過標(biāo)準(zhǔn)分離(方法)得到式(F)的化合物。
制備式(Ib)、(Ic)、(Id)和(Ie)的化合物式(Ib)、(Ic)、(Id)和(Ie)的化合物分別代表R1取代基變化的式(I)的化合物的亞類，如反應(yīng)流程4中所述的來依次制備R8為叔丁基的這些化合物。在式(Ib)的化合物中，R1是烷氧羰基或芳烷氧羰基。式(Ic)的化合物中，R1是羧基。式(Id)的化合物中，R1是芐氧氨基甲?；?。式(Ie)的化合物中，R1是羥基氨基甲?；?。
反應(yīng)流程4
原材料如參考反應(yīng)流程圖2、2A和2B所述的制備式(D)的化合物。如參考反應(yīng)流程圖3和3A所述的來制備式(F)的化合物。鄰-芐基胲可以從市場上購得，例如，如可從Aldrich Co.作為氫氯化物的鹽的形式買到。
式(Ib)的化合物-在標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合條件下，使式(F)的化合物和式(D)的化合物偶合，生成式(Ib)的化合物。例如，向質(zhì)子惰性溶劑(優(yōu)選為DMF)式(F)的化合物的溶液(該溶液含有摩爾數(shù)稍微過量的HOBT)中，加入摩爾數(shù)過量的EDCI。于0-5℃(優(yōu)選于0℃)下，攪拌得到的混合物1-2小時(優(yōu)選為1小時)。再在有堿(優(yōu)選為DMAP)存在下，向冷的溶液中加入等摩爾量的式(D)的化合物。然后把得到的混合物于室溫(優(yōu)選25℃)攪拌12-24小時(優(yōu)選24小時)。再通過標(biāo)準(zhǔn)的肽分離技術(shù)，例如，蒸發(fā)溶劑、萃取、快速色譜和/或高效液相色譜，把式(Ib)的化合物從反應(yīng)混合物中分離出來。
式(Ic)的化合物-在弱酸性條件下，優(yōu)選用三氟乙酸，水解式(Ib)的化合物，生成式(Ic)的化合物。
式(Id)的化合物-再于標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合條件下，用鄰-芐基胲處理式(Ic)的化合物，生成式(Id)的化合物。例如，用摩爾數(shù)過量的EDCI處理冷(0-5℃)的惰性溶劑(優(yōu)選為DMF)中的式(Ic)的化合物和HOBT的溶液。于0-5℃(優(yōu)選于0℃)下，把所得的溶液攪拌30分鐘-1小時后，加入等摩爾量的鄰-芐基胲。使反應(yīng)混合物加溫并于室溫下保存過夜(8-16小時)。然后用標(biāo)準(zhǔn)的分離技術(shù)，例如，用萃取和快速色譜把式(Id)的化合物從反應(yīng)混合物中分離出來。
式(Ie)的化合物-在催化加氫反應(yīng)條件(Pd/C)下除去羥基保護基(芐基)，生成式(Ie)的化合物。
其他的制備式(Ie)的化合物的方法-其他的制備式(Ie)(特別是R4為含硫的殘基，如烷基亞磺?；?方法是，在DMF溶劑中的叔胺堿(如N-甲基嗎啉)存在下，在胲的氫氯化物和一種肽偶合劑(優(yōu)選是苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸酯)處理相應(yīng)的式(Ic)的化合物。用標(biāo)準(zhǔn)的分離技術(shù)，例如，用萃取和濃縮，從反應(yīng)混合物中分離生成的式(Ie)的化合物。
其他制備式(Ib)的方法-在R2是芳基或雜芳基，并且X(未標(biāo)明)是丙-1，3-二基和p(未標(biāo)明)是0時，特別優(yōu)選的制備式(Ib)的化合物的方法見反應(yīng)流程圖4A。
反應(yīng)流程圖4A
原材料可以如參考到反應(yīng)流程圖3A所述的、類似于制備式(Fc′)的化合物，通過用R2為丙-2-烯基的相應(yīng)的丙烯基化合物替代式(Fa′)的化合物來制備式(Fc″)所示的化合物。式(D′)的化合物是式(D)的一種化合物，可以是如反應(yīng)流程圖2中所述的。在制備式(D′-2)的化合物中所用的鹵代芳基或鹵代-雜芳基反應(yīng)物可從市場上購得，或者可根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的方法，例如，如實施例41C中所述的來制備。
通過將式(Fc″)的化合物的噁唑烷酮基的堿性水解，可制備式(F″)的化合物。用標(biāo)準(zhǔn)方法分離后，如參考反應(yīng)流程圖2所述在標(biāo)準(zhǔn)肽偶合條件下使式(F″)的化合物與式(D′)的化合物偶合生成式(D′-1)的化合物。通過加入芳基或雜芳基鹵(優(yōu)選芳基或雜芳基溴、碘或triflate)將式(D′-1)的化合物進行芳基化或雜芳基化，并且于大約100℃下把反應(yīng)混合物加熱大約2小時，生成式(D′-2)的化合物。對式(D′-2)的化合物催化加氫(Pd/C)生成式(Ib′)的化合物。制備式(G)的化合物式(G)的化合物
是制備式(I)的化合物中的中間體，是如以下反應(yīng)流程圖6中所述的來制備的。如反應(yīng)流程圖5中所示來制備式(G)的化合物。
反應(yīng)流程圖5
原材料式(Ga)的化合物和硫代乙酸可從市場上購得，例如，可分別從TCIAmerica Organic Chemicals和Aldrich Company購得。
式(Gb)的化合物-用等摩爾劑量的堿(如氫氧化鉀)水解式(Ga)的化合物，生成式(Gb)的化合物。
式(Gc)的化合物-在堿性條件下(如在三乙胺存在下)，于0-5℃(優(yōu)選于0℃下)，把式(Gb)的化合物去質(zhì)子化，然后與甲醛反應(yīng)，再用水溶性堿處理，優(yōu)選用碳酸鉀處理，生成式(Gc)的化合物，通過標(biāo)準(zhǔn)分離方法把它從反應(yīng)混合物中分離。
式(Gd)的化合物-在堿性條件下(優(yōu)選在氫氧化鋰存在下)，把式(Gc)的化合物水解，生成式(Gd)的化合物。
式(G)的化合物-在惰性氣體中，于90-100℃(優(yōu)選于95℃下)，使式(Gd)的化合物和摩爾數(shù)過量的硫代乙酸反應(yīng)。再用標(biāo)準(zhǔn)的分離技術(shù)，例如，用萃取和蒸發(fā)，把式(G)的化合物從反應(yīng)混合物中分離。制備式(If和式(Ig)的化合物式(If)和式(Ig)的化合物都代表式(I)的化合物的亞種，其中R1取代基是含硫的，如反應(yīng)流程圖6中所述先后制備這兩種化合物。在式(If)的化合物中，R1是乙酰硫代。在式(Ig)的化合物中，R1是巰基。
反應(yīng)流程圖6
式(If)的化合物在標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合條件下，把式(G)的化合物和式(D)的化合物偶合，生成式(If)的化合物。例如，向質(zhì)子惰性溶劑中(優(yōu)選為DMF)的式(G)的化合物和HOBT的溶液中，加入過量摩爾數(shù)的EDCI。然后，加入式(D)的化合物，在室溫下，把得到的混合物攪拌過夜。再用標(biāo)準(zhǔn)的分離技術(shù)，例如，用蒸發(fā)溶劑、萃取和快速色譜把生成的式(If)的化合物從反應(yīng)混合物分離。
式(Ig)的化合物-在堿性條件下，優(yōu)選于非質(zhì)子惰性溶劑(如甲醇)中，在氫氧化氨存在下，水解式(If)的化合物，生成式(Ig)的化合物。制備式(Ih)的化合物式(Ih)的化合物是式(I)的化合物的一個亞種，其中R1是N-羥基甲酰基氨基，如反應(yīng)流程圖7中所示來制備。
反應(yīng)流程圖7
原材料如參考反應(yīng)流程圖3A所述的，通過用相應(yīng)的R2是丙-2-烯基的烯丙基化合物替代式(Fa′)的化合物，可以類似式(Fb′)化合物的制備來制備式(Fb″)的化合物。
式(P-1)的化合物-在降低的溫度(優(yōu)選于0℃)，在堿性條件下，通過與四氯化鈦一起溫育，把式(Fb″)的化合物羥甲基化1到3小時，優(yōu)選1小時，接著通過加入S-三噁烷和四氯化鈦，繼續(xù)于0℃下溫育3-5小時，優(yōu)選4小時。然后用標(biāo)準(zhǔn)方法，例如，萃取和柱色譜，把式(P-1)的化合物分離出來。
式(P-2)的化合物-在降低的溫度(優(yōu)選為0℃)下，把式(P-1)的化合物與摩爾數(shù)過量的鄰-芐基胲和三甲基鋁反應(yīng)。于0℃下，在氬氣中，攪拌使反應(yīng)進行5-7小時，優(yōu)選為6小時。用標(biāo)準(zhǔn)方法把生成的式(P-2)的化合物分離。
式(P-3)的化合物-在0℃下，使過量的甲磺酰氯和吡啶中的式(P-2)的化合物反應(yīng)數(shù)小時，優(yōu)選3小時。在冰上冷卻反應(yīng)混合物，萃取掉有機溶劑，并濃縮。在堿性條件下回流加熱濃縮的萃取物，生成式(P-3)的氮雜環(huán)丁烷酮化合物，用標(biāo)準(zhǔn)方法純化該產(chǎn)物。
式(P-4)的化合物-在堿(如三乙胺)和鈀催化劑(鈀催化劑優(yōu)選是由乙酸鈀(II)和大約2摩爾當(dāng)量的三-鄰甲苯膦反應(yīng)制得)存在下，于惰性溶劑中把式(P-3)的化合物和所需的鹵化的R2基[如，芳基或雜芳基鹵，優(yōu)選為(雜)芳基溴或(雜)芳基碘]反應(yīng)。于100℃下，加熱反應(yīng)混合物15-20小時，優(yōu)選為18小時，用標(biāo)準(zhǔn)方法把相應(yīng)的式(P-4)化合物分離和純化。
式(P-5)的化合物-在堿性條件下，于室溫下裂解式(P-4)的化合物的噁唑烷酮環(huán)，持續(xù)1-3小時，優(yōu)選為1小時。將生成的化合物用有機溶劑萃取、濃縮、再溶于含堿的溶劑(如，吡啶)中、在降低的溫度下(優(yōu)選為0℃下)用甲酸酐羧化，持續(xù)30分鐘，生成相應(yīng)的式(P-5)的化合物，用標(biāo)準(zhǔn)方法分離產(chǎn)物。
式(P-6)的化合物-在標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合的條件下，把式(P-5)的化合物與式(D′)的化合物偶合，生成相應(yīng)的式(P-6)的化合物，用標(biāo)準(zhǔn)分離方法分離該產(chǎn)物。
式(Ih)的化合物-利用Pd/C將式(P-6)的化合物催化加氫，接著通過過濾除去催化劑，生成相應(yīng)的式(Ih)的化合物。鹽的制備此外，可以通過分別用適宜的無機堿或有機堿，或者用適宜的有機酸或無機酸處理，把所有的以游離酸或者游離堿存在的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成其可藥用的鹽的形式。也可以把式(I)的化合物的鹽轉(zhuǎn)化成游離酸或游離堿的形式，或者轉(zhuǎn)化為另一種鹽。例如，可以通過加入1當(dāng)量醇溶劑中的NaOH或KOH，接著蒸發(fā)溶劑，把一個含有羧酸基團的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為羧酸鹽的形式。也可以通過，例如加入1當(dāng)量的有機溶劑中的HCl，然后通過濃縮，把游離堿形式的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為氯化物鹽。優(yōu)選的合成和最后步驟總起來說，式(I)的化合物是通過下述步驟來制備的(A)在堿和酰胺偶合劑存在下，使式(D)的化合物
與式(F)的化合物接觸，生成相應(yīng)的式(I)的化合物；
其中R1是烷氧羰基、芳烷氧羰基、芳基-或雜芳基-硫代甲基膦基或乙酰硫代；或者(B)催化加氫相應(yīng)的、X和R2均為任選被芳基或雜芳基取代的鏈烯基的化合物；或者(C)在弱酸性條件下，處理R1是烷氧羰基或芳烷氧羰基的式(I)的化合物，生成相應(yīng)的R1是羧基的式(I)的化合物；或者(D)把R1是羧基的式(I)的化合物和鄰-芐基胲接觸，生成相應(yīng)的R1是芐氧基氨基甲?；氖?I)的化合物；或者
(E)把R1為芐氧基氨基甲?；氖?I)的化合物催化加氫，生成相應(yīng)的R1為羥基氨基甲?；氖?I)的化合物；或者(F)把R1為羧基的式(I)的化合物和羥胺接觸，生成相應(yīng)的R1是羥基氨基甲?；氖?I)的化合物；或者(G)把其中BnO是芐氧基的下式的化合物催化加氫，
生成相應(yīng)的R1是N-羥基甲?；被氖?I)的化合物；或者(H)用質(zhì)子惰性溶劑中的氫氧化銨處理R1是乙酰硫代的式(D的化合物，生成相應(yīng)的R1是巰基的式(I)的化合物。
一種優(yōu)選的制備R1為N-羥基甲酰基氨基的式(I)的化合物的方法，要求通過堿性水解轉(zhuǎn)化R2為芳基或雜芳基的式(P-4)的化合物；
然后通過甲?；饔茫墒?P-5)的化合物；
把式(P-5)的化合物和式(D)的化合物反應(yīng)，生成式(P-6)的化合物
對式(P-6)的化合物進行催化加氫。
可以通過可測劑量的式(P-3)、(P-4)或(P-6)的化合物中的一種或多種的存在，來驗證通過本發(fā)明的上述方法制備的化合物。雖然眾所周知，在批準(zhǔn)和/或銷售之前，藥物必須達到藥典標(biāo)準(zhǔn)，并且合成試劑(如鄰芐基胲)或前體如式(P-3)、(P-4)或(P-6)的化合物)不應(yīng)超出藥典標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的限度，但通過本發(fā)明的方法制備的最終化合物可能會含有少量，但是以可檢測量(如以50ppm或更低量的范圍)存在的這些物質(zhì)。例如，通過氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)可測得這些含量的式(P-3)的化合物；通過高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)或者通過高效液相色譜(HPLC)和熒光檢測可測得這些含量的式(P-4)的化合物；通過高效液相色譜和熒光檢測，可以測得這些含量的式(P-6)的化合物。由于這些物質(zhì)的存在，監(jiān)控藥物的純度是重要的，本發(fā)明還公開了用于檢測這些物質(zhì)存在的方法。
實施例給出下列制備方法和實施例，使那些本領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實施本發(fā)明。不應(yīng)該認(rèn)為這些實施例限制著本發(fā)明的范圍，它們僅僅是本發(fā)明的說明和示范。
實施例1式(Ea)的化合物1A.于室溫下，在純凈的原甲酸三乙酯(22ml，0.20mol)中把次膦酸晶體(8.4g，0.13mol)攪拌90分鐘。然后通過套管把它轉(zhuǎn)移到已冷卻至0℃10分鐘、攪拌過的異丁基丙烯酸乙酯(8g，0.036mol)和四甲基胍(4.5ml，0.036mol)的溶液中。除去冰浴，把反應(yīng)混合物攪拌4小時。用200ml二乙醚稀釋混合物，用1N HCl(100ml)、水(4×100ml)和鹽水(100ml)洗滌溶液，并于硫酸鎂上干燥。把混合物旋轉(zhuǎn)氣化，生成8.15g淺黃色油狀的2-(乙氧基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯，質(zhì)譜(MS)349(M-H2O)+。1B.以類似的方法，制備以下式(Ea)的化合物2-(乙氧基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；以及2-(乙氧基)膦甲基戊酸乙酯。
實施例2式(Eb)的化合物2A.把粗的2-(乙氧基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯(26g)溶于600mlTHF/CH2Cl2(50/50)中，冷卻至0℃。再向溶液中加入二異丙基乙胺(32ml)和90.8ml 2-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺，在加入多聚甲醛(5.5g)之前，把所得到的混合物攪拌20分鐘。把溶液調(diào)整至室溫，并于37℃下加熱18小時。通過蒸發(fā)除去溶劑，把得到的油溶于200ml乙酸乙酯中。用50ml 1NHCl(2次)、50ml鹽水(2次)洗滌該溶液，在MgSO4上干燥，過濾并蒸發(fā)，產(chǎn)生19.3g淡黃色油狀的2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯，質(zhì)譜(MS)281.2(MH+)。2B.以類似的方法，制備以下式(Eb)的化合物2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-3-環(huán)己基-丙酸乙酯；以及2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基戊酸乙酯。
實施例3式(Ec)的化合物3A.把2-(乙氧基)(羥甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯(5g)溶于20mlCH2Cl2，并冷卻至-20℃(一式兩份)。向溶液中滴加甲磺酰氯(1.5ml)和三乙胺(3.0ml)。15分鐘后，除去冰浴，將反應(yīng)在室溫下放置3.5小時。再用10ml冷的2％HCl、10ml NaHCO3(飽和的)、10ml鹽水洗滌每一溶液，用MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，生成12.8g(總產(chǎn)率)的2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯。3B.以類似的方法，但用對甲苯磺酰氯替代甲磺酰氯，制備2-(乙氧基)-(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-4-甲基-戊酸乙酯。3C.以類似的方法，制備以下的式(Ec)的化合物2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-戊酸乙酯；2-(乙氧基)(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；以及2-(乙氧基)(對甲苯磺酰氧甲基)膦甲基-戊酸乙酯。
實施例4式(Ee)的化合物4A.在0℃下，把氫化鈉(1.52g，(60％))和2-喹啉硫醇(6g)一起在50ml DMF中攪拌。在最初的H2放出平息后，于室溫下，把混合物攪拌2.5小時。然后把混合物冷卻至0℃，通過套管加入溶于10ml DMF中的2-(乙氧基)(甲磺酰氧甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯(12.8g)，然后把得到的混合物攪拌18小時，緩慢加溫至室溫。通過蒸發(fā)除去DMF，把殘余物溶于50ml乙酸乙酯，并用50ml H2O(2次)和鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥，蒸發(fā)，生成黃色半固體物。通過用10％乙酸乙酯/己烷至80％乙酸乙酯/己烷快速色譜法純化溶液，生成10g 2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)-膦甲基-4-甲基戊酸乙酯(比移值Rf0.35，80％乙酸乙酯/己烷)，MS424.1(MH+)。4B.以相似的方法，但用1-萘硫酚、2-萘硫酚或硫代苯酚代替2-喹啉硫醇，制備以下的式(Ee)的化合物2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯；和2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯。4C.以相似的方法，制備以下的式(Ee)的化合物2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；
2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-戊酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-戊酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-戊酸乙酯；2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸乙酯；2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸乙酯；2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸乙酯；2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸乙酯；和2-(乙氧基)(苯基硫代甲基)膦甲基-戊酸乙酯。
實施例5式(E)的化合物5A.把2-(乙氧基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸乙酯(4.5g)溶于100ml THF，12.5ml 2N NaOH和足夠的甲醇一起加入以使溶液均勻。18小時后，通過蒸發(fā)除去THF，用50ml H2O稀釋殘余物，并用50ml乙酸乙酯洗滌。把水相酸化至pH4，用50ml乙酸乙酯(2次)萃取產(chǎn)物。用20ml鹽水洗去乙酸乙酯，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，生成3.8g黃色油狀的2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸，MS368(MH+)。5B.以類似的方法，制備以下的式(E)的化合物2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸；和2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸。5C.以類似的方法，制備以下的式(E)的化合物
2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸；2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸；2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸；2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸；2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-戊酸；2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸；2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸；2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸；2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸；2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-戊酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸；2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-戊酸；2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊酸；2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酸；2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酸；2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙酸；和2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-戊酸。
實施例6式(E)的化合物的拆分把2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸(5.3g)溶于50ml熱的乙醇(無水的)，并加入4.2g(-)-辛可尼定。室溫下30分鐘后，鹽開始沉淀出來。用箔蓋上燒瓶，使其放置2天。再通過吸濾除去鹽，蒸發(fā)濾液成黃色泡沫。把鹽和濾液分別溶于100ml乙酸乙酯，在將pH維持在4以上時，依次用1％HCl洗滌除去辛可尼定。把兩種溶液分別在MgSO4上干燥、蒸發(fā)，生成2.4g單一的一種立體異構(gòu)體，[α]D24＝+10.68°[在甲醇(2ml)中含9.73mg]和2.5g單一的另一種立體異構(gòu)體，[α]D24＝-8.70°[在甲醇(2ml)中含9.88mg]。
實施例7
式(B)的化合物7A.向冷的(0℃)4-乙酰氨基苯磺酰氯(4.0g，17mmol)溶于CH2Cl2(40ml)的溶液中加入吡啶(1.7ml，20mmol)和DMAP(209mg，1.7mmol)。(得到透明的溶液)。在0℃下，把無水甲胺鼓泡通入溶液1小時，于25℃下把溶液攪拌2小時。用1M NaOH(3×15ml)萃取溶液，于0℃下用3M HCl把合并的萃取物調(diào)節(jié)至pH6。把沉淀出來的松散的白色晶體狀的產(chǎn)物過濾并用冷水洗滌，得到3.2g(82％)4-乙酰氨基-N-甲基苯磺酰胺1H核磁共振(1HNMR)(300MHz，甲醇)δ2.35(s，3H)，2.70(s，3H)，7.96(s，4H)。7B.在氬氣中把4-乙酰氨基-N-甲基苯磺酰胺(3.2g，14mmol)和100ml1M HCl的混合物回流加熱3小時。冷卻至25℃后，加入CH2Cl2(10ml)，于0℃下用1M NaOH中和水相。分離水相，用CH2Cl2萃取(2×25ml)。用鹽水(10ml)洗滌合并的有機相、干燥(Na2SO4)，并濃縮得到1.5g(58％)無色固體狀的式(B)的化合物(R4為N-甲基磺酰胺)1H NMR(300MHz，甲醇)δ2.46(s，3H)，6.67-6.72(AA1XX1的AA1部分，2H)，7.48-7.52(AA1XX1的XX1部分，2H)。
實施例8式(C)的化合物8A.分批向冷的(0℃)N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸(1.4g，6.3mmol)和HOBT(1.5g，9.8mmol)溶于DMF(30ml)的溶液中加入EDCI(2.5g，14mmol)。于0℃下攪拌1小時后，用4-氨基苯甲酸甲酯(1.09ml，6.8mmol)和DMAP(0.32g，2.6mmol)處理得到的溶液。于25℃下攪拌24小時后，真空除去DMF。把殘余物溶于CH2Cl2，用飽和的NaHCO3溶液，1MHCl(2次)和鹽水洗滌。在Na2SO4上干燥，真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過在SiO2(20％乙酸乙酯/己烷洗脫液)快速色譜將其純化。得到1.0g(85％)泡沫狀固體的N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，質(zhì)譜(快速原子轟擊)[MS(FAB)]363(M-H)+。8B.以類似的方法，制備以下的式(C)的化合物N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-苯甲基甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-苯基甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-(4-乙氧羰基苯基)甲酰胺；
N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-甲氨基磺酰基)苯基)-甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(3-乙氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(2-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-(1-甲基乙氧基)羰基苯基)-甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(氨基磺?；交?甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基甲基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-吡啶-3-基-丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-異亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-鄰芐基蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(2-二甲基氨基乙基-氨基甲?；?)甲酰胺；和N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(3-二甲基氨基丙基)氨基甲?；?苯基)甲酰胺。8C.以類似的方法，制備以下的式(C)的化合物N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-(4-硝基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-色氨酸-N′-(4-氨基苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-甲磺酰苯基)甲酰胺；N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-乙磺酰苯基)甲酰胺；和N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-(4-四唑基苯基)甲酰胺。
實施例9式(D)的化合物9A.向冷的(0℃)干CH2Cl2(10ml)中的N-叔丁氧羰基-L-亮氨酸-N′-苯基甲酰胺(3.4g，11mmol)的溶液中加入TFA(2ml)。把溶液在25℃下攪拌6小時，并于真空中濃縮。將殘余物在CH2Cl2和H2O中分配，于0℃下用飽和K2CO3溶液堿化水層。分離有機相，用CH2Cl2萃取水層3次。用鹽水洗滌合并的有機層，并在Na2SO4上干燥。濃縮得到L-亮氨酸-N′-苯基甲酰胺。9B.以類似的方法，制備以下化合物L(fēng)-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-色氨酸-N′-苯基甲基甲酰胺；L-色氨酸-N′-苯基甲酰胺；L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-色氨酸-N′-(4-乙氧羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-(N″-甲基氨基磺?；?苯基)甲酰胺；L-丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-甲硫氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(3-乙氧羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(2-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-(1-甲基乙氧基)羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-((氨基磺?；?苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基甲基苯基)甲酰胺；L-吡啶-3-基-丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-螺環(huán)戊基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-異亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-鄰芐基蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-N″-(2-二甲基氨基乙基)氨基甲?；?苯基)甲酰胺；和L-亮氨酸-N′-(4-N″-(3-二甲基氨基丙基)氨基甲?；?苯基)甲酰胺。9C.以類似的方法，制備以下的式(D)的化合物L(fēng)-色氨酸-N′-(4-硝基苯基)甲酰胺；L-色氨酸-N′-(4-氨基苯基)甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-甲基磺?；交?甲酰胺；L-亮氨酸-N′-(4-乙基磺?；交?甲酰胺；以及L-亮氨酸-N′-(4-四唑基苯基)甲酰胺。
實施例10式(Ia)的化合物10A.向冷的(0℃)THF(6ml)中的2-(羥基)(喹啉-2-基-硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酸(0.20g，0.54mmol)的溶液中，加入1，1′-羰基二咪唑(0.12g，0.7mmol)。把混合物在0℃下攪拌75分鐘，再用L-色氨酸-N′-(4-乙氧羰基苯基)甲酰胺(0.22g，0.62mmol)處理，并于25℃下攪拌15小時。蒸發(fā)THF，把殘余物溶于乙酸乙酯(60ml)。用H2O(10ml)、鹽水(10ml)洗滌，并于MgSO4上干燥。用乙腈梯度和50mM NH4OAc(乙酸銨)緩沖液進行反相高效液相色譜后，濃縮得到30mg灰白色固體狀的N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酰基)-L-色氨酸-N′-(4-乙氧羰基苯基)甲酰胺；質(zhì)譜(快速原子轟擊)(FAB)701(M-H)+(非對映體的混合物)。10B.以類似的方法，制備以下的式(Ia)的化合物N-(2-(羥基)(喹啉-2-基-硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)687(M+H)+；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)572(M+H)+；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊酰基)-L-甲硫氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)632(M+H)+；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)614(M+H)+；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(3-乙氧羰基苯基)甲酰胺，1H NMR(300MHz，甲醇)δ0.73-1.01(m，12H)，1.28-2.00(m，14H)，2.4-3.61(m，2H)，4.27-4.45(m，3H)，7.23-7.44(m，3H)，7.65-7.98(m，6H)，8.29(s，0.5H)，8.50(s，0.5H)；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(2-甲氧羰基苯基)甲酰胺，1H NMR(300MHz，甲醇)δ0.78-0.99(m，13H)，1.3-2.4(m，7H)，2.90-3.05(m，1H)，3.5-3.75(m，2H)，3.89，3.90，3.94(3s，3H總數(shù))，4.35-3.50(m，1H)，7.05-8.10(m，11H)，8.32，8.55，8.60(3d，J＝8.7，1H)；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(1，1-二甲基-乙氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)642(MH)+；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-氨基磺?；?苯基)甲酰胺，1H NMR(300 MHz，甲醇)δ0.76(d，J＝6.5，3H)，0.81(d，J＝6.5，3H)，0.85-1.1(m，7H)，1.2-2.1(m，7H)，2.92-2.95(m，1H)，3.45-3.70(m，2H)，4.35-4.45(m，1H)，7.28(d，J＝8.7，1H)，7.45(t，J＝8.7，1H)，7.68(t，J＝8.7，1H)，7.7-7.8(m，3H)，7.87(d，J＝8.7，1H)，7.95-8.1(m，3H)；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基甲基苯基)甲酰胺，MS(FAB)628(MH)+。10C.以類似的方法，制備了以下式(Ia)的化合物N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-1-基硫代甲基)膦甲基-戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-苯基苯酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(萘-2-基硫代甲基)膦甲基-戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-5-苯基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-4-苯基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-苯基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺；N-(2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-3-環(huán)己基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；以及N-(2-(羥基)(苯基硫代甲基)膦甲基-戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺。10D.在25℃下，把N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)-膦甲基-4-甲基戊酰基)-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺溶于THF(2ml)和1M NaOH(1ml)中形成的溶液攪拌24小時。蒸發(fā)有機溶劑，把殘余物溶于乙酸乙酯/H2O。用1M HCl酸化水相，用乙酸乙酯2次萃取分離的水相。以鹽水洗滌合并的有機層，干燥(MgSO4)并濃縮成27mg黃色粉末狀的N-(2-(羥基)-(喹啉-2-基硫代甲基)-膦甲基-4-甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-羧基苯基)-甲酰胺。10E.以類似的方法，但以N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧基-羰基苯基)甲酰胺(30mg，0.048mmol)為原料，在用乙酸乙酯研制后，得到10mg半固體狀的N-(2-(羥基)(喹啉-2-基硫代甲基)-膦甲基-4-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-羧基苯基)-甲酰胺；1H NMR(300MHz，甲醇)0.81-1.02(m，12H)，1.1-2.3(m，10H)，2.82-3.00(m，1H)，3.49，3.56(2s，2H)，3.5-3.8(m，2H)，4.45-4.55(m，1H)，7.09(d，J＝8.2，1H)，7.19(d，J＝8.2，1H)，7.45(t，J＝8.2，1H)，7.45-7.6(m，3H)，7.65-7.80(m，1H)，7.82-7.98(m，2H)，8.10-8.20(m，1H)。
實施例11式(Fa)的化合物11A.向25℃水浴中的4-甲基戊酸(25g，0.215mmol)中緩慢加入亞硫酰氯(20.4ml，1.3g)。然后在50℃下，在氬氣中把混合物加熱3小時(直至氣體發(fā)出已經(jīng)停止)。在大氣壓下蒸餾粗的反應(yīng)混合物，得到4-甲基戊酰氯(25.3g，87.3％)，沸點(b.p.)143℃。11B.以類似的方法，但用5-苯基戊酸(5g)替代4-甲基戊酸，制得無色液體狀的5-苯基戊酰氯(4.4g)，b.p.91°-93℃。
實施例12式(Fb)的化合物12A.在室溫下，在氬氣中，向甲苯(200ml)中的60％NaH(836mg，1.5當(dāng)量)的懸浮液中分批加入L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺(3.0g，13.9mmol)。在室溫下把混合物劇烈攪拌1小時。在0℃下向溶液中小心滴加4-甲基戊酰氯。于室溫下把反應(yīng)物攪拌3小時后，用10ml水停止反應(yīng)，并加入70ml醚。先用0.5N HCl(2×50ml)洗滌反應(yīng)混合物，再用5％K2CO3(3×50ml)、最后用鹽水(1×50ml)洗滌。在MgSO4上干燥有機層、過濾、蒸發(fā)使之干燥。通過柱色譜層析(1∶6乙酸乙酯/石油醚作為洗脫液)得到N-4-甲基戊酰基-L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺(3.39g，78％)。12B.以類似的方法，但用適宜的氯化物替代4-甲基戊酰氯，制備以下的式(Fb)的化合物N-3-苯基丙?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS347(M+)；N-5-苯基戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS375(M+)；N-戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS300(M+H)+。
實施例13式(Fc)的化合物13A.在-78℃下、于氬氣中，5分鐘內(nèi)向75ml干THF中的N-4-甲基戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺(3.39g，10.8mmol)的溶液中滴加NaN(TMS)2[1.0M(溶于THF)，11.34ml，1.05當(dāng)量]。在-78℃下攪拌1小時后，向混合物中加入六甲基磷酰胺(5ml)，再加入溴乙酸叔丁酯(5.2ml，3當(dāng)量)，再一次加入400mg碘化四丁基銨。于-78℃，氬氣中把所得的溶液保存過夜。第二天早晨，用水(100ml)停止反應(yīng)，然后用醚(3×100ml)萃取。用鹽水洗滌合并的醚層，再于Na2SO4上干燥、過濾并濃縮。通過柱色譜(5∶95乙酸乙酯/石油醚-10∶90乙酸乙酯/石油醚用作洗脫液)，產(chǎn)生N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基)戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺(4g，86.5％)。13B.以類似的方法，但用適宜的式(Fb)的化合物替代N-4-甲基戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，制備以下的式(Fc)的化合物N-(3-苯基-2-叔丁氧羰基甲基)丙?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS461(M+)；N-(5-苯基-2-叔丁氧羰基甲基)戊酰基-L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS490.1(M+H)+；N-(2-叔丁氧羰基甲基)戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，MS414(M+H)+。
實施例14式(F)的化合物14A.在0℃下、氬氣中向攪拌過的50％THF(150ml)水溶液中的N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基)-戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺(5.45g，12.7mmol)溶液中加入LiOH·H2O晶體(2.14g，4當(dāng)量)，然后加入30％H2O2(11.5ml)。接著除去冰浴，在得到的乳液變澄清前攪拌3小時。在35℃、減壓條件下，除去大部分THF。再加入CH2Cl2(150ml)，并攪拌加入4N HCl至pH＝2。加入NaCl后，再用CH2Cl2(3×150ml)萃取水層。在35℃、減壓下除去CH2Cl2，再把殘余物溶于乙酸乙酯(150ml)。然后用5％K2CO3(3×150ml)萃取該溶液，把結(jié)合的萃取物用醚(50ml)洗滌。接著向水層中加入CH2Cl2，并攪拌加入NaCl，用CH2Cl2(3×70ml)萃取水層，在Na2SO4上干燥合并的萃取物，過濾并濃縮，產(chǎn)生無色油狀的(2R)-4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基-戊酸(2.95g，定量產(chǎn)率)。14B.以類似的方法，但用適宜的式(Fc)的化合物替代N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基)戊?；?L-(+)-2，10-(2-莰酮)磺內(nèi)酰胺，制備以下的式(F)的化合物(2R)-3-苯基-2-叔丁氧羰基甲基-丙酸，MS265(M+H)+；(2R)-5-苯基-2-叔丁氧羰基甲基-戊酸，MS293.1(M+H)+；(2R)-2-叔丁氧羰基甲基-戊酸，(無色油，1.09g)。14C.把(2R)-3-苯基-2-叔丁氧羰基甲基-丙酸(55mg)溶于冰乙酸(20ml)中，并在乙酸中加入PtO2(25mg)。然后把燒杯放入帕爾高壓氣體貯罐(ParrBomb)中，抽真空，并充入100磅/平方英寸的H2。攪拌3天后，把混合物通過1cm硅藻土(Celite)床吸濾。再把濾液濃縮成黃色油，(2R)-3-環(huán)己基-2-叔丁氧羰基甲基-丙酸(56mg)，MS269.5(M-H)+。
實施例15式(Ib)的化合物15A.向4-甲基-2-叔丁氧羰基-甲基戊酸(0.28g，1.2mmol)溶于含有HOBT(0.22g，1.8mmol)DMF(5ml)形成的溶液中加入EDCI(0.31g，1.8mmol)。于0℃下攪拌混合物1小時，再用L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(1.2mmol)和DMAP(27mg，0.24mmol)處理。于25℃下持續(xù)攪拌24小時，接著蒸發(fā)DMF。把殘余物溶于CH2Cl2(20ml)，用1M HCl(10ml)、飽和的NaHCO3(10ml)、鹽水(10ml)洗滌該溶液，并把它于Na2SO4上干燥。真空中濃縮得到一種油，這種油通過利用20％乙酸乙酯/己烷作洗脫液在SiO2上進行快速色譜而純化。得到0.22g(22％)固體狀的N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基-戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)503(MH)+。15B.以類似的方法，制備以下化合物N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-吡啶-3-基丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-鄰芐基-蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基甲基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-異亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(3-二甲基氨基丙基)氨基甲酰基)苯基)-甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(2-二甲基氨基乙基)氨基甲?；?苯基)-甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-氨基磺?；交?甲酰胺；N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲基氨基磺?；交?甲酰胺；N-(2-叔丁氧羰基甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；
N-(3-苯基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)已基-2-叔丁氧羰基甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-叔丁氧羰基甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；和N-(5-苯基-2-叔丁氧羰基甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。
實施例16式(Ic)的化合物16A.向冷的(0℃)CH2Cl2(2ml)中的N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(70mg，0.14mmol)溶液中加入TFA(0.5ml)。于25℃下攪拌5小時后，在真空中濃縮溶液，通過用乙腈梯度和50mM NH4OAc緩沖液反相高效液相色譜法純化產(chǎn)物，得到44mg(71％)白色固體狀的N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)445(M-H)-。16B.以類似的方法，制備以下化合物N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-異亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)419(M-H)-；N-(4-甲基-2-羧甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)419(M-H)-；N-(4-甲基-2-羧甲基戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-羧甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺，1H NMR(300MHz，甲醇)δ0.84-0.99(m，12H)，1.15-1.82(m，6H)，2.36-2.41(m，1H)，2.52-2.65(m，1H)，2.8-2.95(m，1H)，4.49-4.54(m，1H)，7.4-7.9(m，4H)；N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-氨基磺?；交?甲酰胺，1H NMR(300MHz，甲醇)δ0.85-1.00(m，12H)，1.1-1.3(m，2H)，1.52-1.85(m，4H)，2.31-2.95(m，3H)，4.49-4.55(m，1H)，7.75-7.91(m，4H)；N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲基-氨基磺酰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)459(M-H)-；N-(2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)405(M-H)-；N-(3-苯基-2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)455(M+H)+；N-(3-環(huán)己基-2-羧甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)459(M-H)-；N-(4-苯基-2-羧甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)467(M-H)-；N-(4-苯基-2-羧甲基丁酰基)-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-羧甲基丁?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(5-苯基-2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)481(M-H)-；以及N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-鄰-芐基蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)497(M-H)-。16C.以類似的方法，但用醚研制粗產(chǎn)物，然后傾析醚，產(chǎn)生以下作為TFA鹽的化合物N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-吡啶-3-基丙氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)456(M+H)+；N-(4-甲基-2-羧甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(3-二甲基氨基丙基)氨基甲酰基)苯基)甲酰胺，MS(FAB)491(M+H)+；以及N-(4-甲基-2-羧甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(N″-(2-二甲基氨基乙基)氨基甲酰基)苯基)-甲酰胺，
MS(FAB)491(M+H)+。16D.在1大氣壓下，將乙酸乙酯/THF(1∶1，25ml)中的N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基-戊酰基)-L-鄰-芐基蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(60mg)和Pd/C的混合物氫化過夜。通過硅藻土過濾，濃縮濾液，用醚/乙烷研制殘余物，生成N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基-戊?；?-L-蘇氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺，MS(FAB)407(M-H)-。16E.按照A部分的方法，用以下化合物替代N-(4-甲基-2-叔丁氧羰基甲基-戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)-甲酰胺N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(苯基)戊?；?-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-(N∈-異丙基)賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-(苯基)丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(N″，N″-二甲基氨基乙基氨基磺?；?-苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(苯基)戊?；?-L-(N，N′-二乙基胍基)賴氨酸-N′-(4-乙氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(3-(2-羥乙基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-二苯-4-基)戊酰基)-L-S((4-氰基苯基)甲基)青霉胺-N′-(苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(2-4-(氨基磺?；?苯基乙基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(3-(嗎啉-4-基)丙基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(N″ N″-二甲基氨基乙基氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；和N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((3-(嗎啉-4-基)丙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺。得到以下化合物N-(2R，S)-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-4-(甲基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺，MS434.2(M-H)-388(M-HCO-OH)；N-(2R-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基-4-(甲基)戊?；?-D，L-正纈氨酸-N′-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)苯基)甲酰胺，MS478(M+H)+；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺，MS588.3，(M+H)+；N-(2R-羧甲基-5-(苯基)戊酰基)-L-賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺，MS512.3，(M+H)+；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-(N∈-異丙基)賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺，MS630，(M+H)+；N-(2R-羧甲基-4-(苯基)丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-(N″，N″-二甲基氨基乙基氨基磺酰基)-苯基)甲酰胺，MS586(M+H)+；N-(2R-羧甲基-5-(苯基)戊?；?-L-(N，N′-二乙基胍基)賴氨酸-N′-(4-(乙氧羰基)苯基)甲酰胺，MS610.4，(M+H)+；N-(2R-羧甲基)-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+Na)+計算值(Calc)569.2450實測值(found)569.2461；N-(2R-羧甲基-5-二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(3-(2-羥乙基)苯基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+H)+計算值545.3015；實測值545.3021；N-(2R-羧甲基-5-二苯-4-基)戊?；?-L-S-((4-氰基苯基)甲基)青霉胺-N′-(苯基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+H)+計算值634.2740；實測值634.2749；
N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(2-(4-氨基磺?；?苯基乙基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+H)+計算值634.2951；實測值634.2963；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(3-(嗎啉-4-基)丙基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+H)+計算值578.3594；實測值578.3583；N-(2R-(羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基氨基磺?；?苯基)甲酰胺，1H NMR(300MHz，丙酮-d6)δ9.73(br，s，1H)，7.91(d，2H，J＝9Hz)，7.79(d，2H，J＝9Hz)，7.56(d，2H，J＝8Hz)，7.25-7.45(m，6H)，7.19(d，2H，J＝8Hz)，4.48(d，1H，J＝9Hz)，2.38-3.00(m，9H)，1.43-1.72(m，4H)，1.04(s，9H)；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+Cs)+計算值782.1876，實測值782.1896；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-二甲基氨基)乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺，F(xiàn)AB-MS(M+Cs)+計算值809.2349，實測值809.2369；和N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((3-(嗎啉-4-基)丙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺FAB-MS(M+H)+計算值707.3478，實測值707.3489。
實施例17式(Id)的化合物17A.把干DMF(20ml)中的N-(4-甲基-2-羧甲基苯基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(0.28g，0.6mmol)和HOBT(0.12g)的溶液冷卻至0℃，并用EDCI(0.32g)處理。于0℃下攪拌0.5小時后，加入鄰-芐基胲(0.30ml)，使反應(yīng)加溫至25℃過夜。于真空中除去DMF，把殘余物溶于CH2Cl2中，用5％HCl/5％NaHCO3和鹽水洗滌，把溶液于Na2SO4上干燥。濃縮后，通過快速色譜(SiO2，Rf＝0.6，10％甲醇/CH2Cl2)純化產(chǎn)物。把含有各級分的產(chǎn)物通過與CH2Cl2研制再純化，生成固體狀的N-(4-甲基-2-(N″-芐氧基氨基甲?；?甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，熔點(mp)198-199℃。17B.以類似的方法，制備以下化合物N-(2-(N″-芐氧基氨基甲酰基)甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-(N″-芐氧基氨基甲酰基)甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；以及N-(4-甲基-2-(N″-芐氧基氨基甲酰基)甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。17C.在50-60℃下、在THF(20ml)和甲醇(5ml)中，用1M NaOH(1.4ml)水解N-(4-甲基-2-(N″-芐氧基氨基甲?；?-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(210mg)2小時。蒸發(fā)有機溶劑，將殘余物溶解在水中，并用醚(2×10ml)洗滌。用10％HCl把水相酸化至pH2，并且用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。用鹽水洗滌合并的萃取物、干燥(Na2SO4)、濃縮，生成N-(4-甲基-2-(N″-芐氧基氨基甲酰基)-甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-羧基苯基)-甲酰胺(110mg)。
實施例18式(Ie)的化合物18A.向N-(4-苯基-2-(N″-芐氧基氨基甲?；?甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(25mg)溶于20ml甲醇和10mlTHF的溶液中加入10％Pd/C(20mg)。把懸浮液氫化1小時，然后通過硅藻土吸濾。濃縮得到產(chǎn)物，將產(chǎn)物在硅膠(2.5％甲醇/CH2Cl2)純化，得到8mg N-(4-苯基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基丁酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)482(M-H)-。18B.以類似的方法，制備以下化合物N-(4-甲基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-羧基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-(N″-羥基氨基甲酰基)L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)436(M+H)+；N-(2-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)420(M-H)-；
N-(4-苯基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基丁?；?L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基丁?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-甲基-2-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺，MS(FAB)507(M-H)-；以及N-(4-苯基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。18C.以類似的方法，制備以下化合物N-(3-苯基-2-(N″-羥基氨基甲?；?甲基丙酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(5-苯基-2-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；以及N-(3-環(huán)己基-2-(N″-羥基氨基甲酰基)甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。
實施例19式(Gb)的化合物19A.在30分鐘內(nèi)，向冷的(0℃)150ml乙醇中的異丁基丙二酸二乙酯(21.6g，0.1mol)形成的溶液中緩慢加入KOH(5.89g，0.1mol)溶液。在25℃下把該透明的溶液攪拌60小時。在減壓下除去乙醇，并把固體殘余物溶于50ml水中。用4M HCl把該水溶液酸化至pH2，用醚(2×50ml)萃取。在MgSO4上干燥合并的萃取物、蒸發(fā)，得到19.0g(100％)無色油狀的異丁基丙二酸乙酯。19B.以類似的方法，制備以下式(Gb)的化合物叔丁基丙二酸乙酯；丙基丙二酸乙酯；芐基丙二酸乙酯；以及環(huán)己基甲基丙二酸乙酯。
實施例20式(Gc)和(Gd)的化合物20A.在0℃向純凈的異丁基丙二酸乙酯(25g，0.13mol)中緩慢加入冰冷的二乙胺(15.1ml，0.15mol)。攪拌15分鐘后，滴加甲醛水溶液(11.1ml，37％甲醛水溶液)，并把該混合物于25℃下攪拌3天。用40ml水中的20g K2CO3溶液處理反應(yīng)物，并用醚(2×100ml)萃取。用鹽水洗滌合并的醚層，在MgSO4上干燥，在20℃下在旋轉(zhuǎn)汽化器上蒸發(fā)。把粗產(chǎn)物4-甲基-2-亞甲基戊酸乙酯(含有一些醚)溶于250ml無水乙醇中，用乙腈(250ml)、1MLiOH(9.7g溶于250ml水中，0.23mol)處理。攪拌過夜后，蒸發(fā)有機溶劑，并用乙酸乙酯萃取殘余物(2×150ml)。用鹽水洗滌結(jié)合的萃取物、干燥(MgSO4)、蒸發(fā)、得到10.5g無色油狀的4-甲基-2-亞甲基戊酸。20B.以類似的方法，制備式(Gd)的下列化合物4-苯基-2-亞甲基丁酸；3-環(huán)己基-2-亞甲基丙酸；5-苯基-2-亞甲基戊酸；2-亞甲基戊酸；以及3，3-二甲基-2-亞甲基丁酸。
實施例21式(G)的化合物在95℃下，在氬氣中，把4-甲基-2-亞甲基戊酸(5.0g)和硫代乙酸(25ml)的混合物加熱3天。蒸發(fā)過量的硫代乙酸，并把殘余的油溶于乙酸乙酯(40ml)，用飽和的NaHCO3(3×40ml)萃取。把NaHCO3萃取物合并，并于0℃下用1MHCl酸化至pH2。用CH2Cl2(3×40ml)萃取水層，干燥(MgSO4)合并的有機相、蒸發(fā)，得到3.0g 4-甲基-2-乙酰硫代甲基-戊酸；1H NMR(80MHz，CDCl3)δ0.95(d，J＝8.0，6H)，1.20-1.90(m，4H)，2.35(s，3H)，2.50-3.20(m，3H)，6.7(br，s，1H)。
實施例22式(If)的化合物22A.向含有HOBT(92mg，0.6mmol)和L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(0.6mmol)的干DMF(15ml)中的4-甲基-2-乙酰基硫代甲基-戊酸(204mg，1.0mmol)溶液中，加入EDCI(345mg，1.8mmol)。在25℃下把該溶液攪拌過夜，然后于真空中除去DMF。把殘余物溶于乙酸乙酯(35ml)，用1MHCl、1MNaOH和鹽水洗滌。在MgSO4上干燥、蒸發(fā)，得到半固體物，將半固體物在硅膠(乙酸乙酯1石油醚2)上快速色譜，產(chǎn)生白色固體狀的N-(4-甲基-2-乙?；虼谆祯；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺(190mg)。22B.以類似的方法，制備以下式(If)的化合物N-(5-苯基-2-乙酰基硫代甲基戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-乙?；虼谆□；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-乙?；虼谆；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-乙?；虼谆；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-乙?；虼谆祯；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(5-苯基-2-乙?；虼谆祯；?-L-亮氨酸-N′-(4-氨基羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-乙?；虼谆□；?-L-亮氨酸-N′-(4-羧基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-乙?；虼谆；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲基磺酰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-乙酰基硫代甲基丙酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-氨基甲?；交?甲酰胺；N-(2-乙?；虼谆祯；?-L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺；N-(5-苯基-2-乙酰基硫代甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-乙酰基硫代甲基丁酰基)-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-乙酰基硫代甲基丙酰基)-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-乙酰基硫代甲基丙?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；以及N-(2-乙?；虼谆祯；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。
實施例23式(Ig)的化合物23A.在0℃下，向甲醇(8ml)中的N-(4-甲基-2-乙?；虼谆祯；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺(85mg，0.19mmol)溶液中，加入濃縮的HN4OH(0.4ml)。在0℃下攪拌5小時后，蒸發(fā)甲醇，加入乙醚(30ml)。用0.5M HCl、鹽水洗滌該醚溶液，用MgSO4干燥。濃縮得到定量產(chǎn)率的白色泡沫狀的N-(4-甲基-2-巰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基-苯基)甲酰胺，MS(FAB)407(M-H)-。23B.以類似的方法，制備以下式(Ig)的化合物N-(5-苯基-2-巰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-巰基甲基丁酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-巰基甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-巰基甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(2-巰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。
N-(5-苯基-2-巰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-氨基羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-巰基甲基丁?；?-L-亮氨酸-N′-(4-羧基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-巰基甲基丙?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲基磺酰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-巰基甲基丙酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-氨基甲?；?甲酰胺；N-(2-巰基甲基戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-氰基苯基)甲酰胺；N-(5-苯基-2-巰基甲基戊?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(4-苯基-2-巰基甲基丁?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-苯基-2-巰基甲基丙?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；N-(3-環(huán)己基-2-巰基甲基丙?；?-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺；以及N-(2-巰基甲基戊酰基)-L-色氨酸-N′-(4-甲氧羰基苯基)甲酰胺。
實施例24式(Fc″)的化合物于-95℃下氬氣中，向50ml干THF中的6.48g(25.0mmol)N-(4-戊?；?-4S-苯基甲基-2-噁唑烷酮溶液中用注射器以一定速率加入27.5ml(27.5mmol)THF中的1.0M六甲基二硅疊氮化鈉(sodiumhexamethyldisilazide)，使反應(yīng)溫度保持在-75℃下。于-80℃至-95℃下15分鐘后，通過注射器在1分鐘內(nèi)加入5.65ml(6.83g，35mmol)的溴乙酸叔丁酯，該溴乙酸叔丁酯在用堿性氧化鋁過濾后立即使用。在-90℃至-60℃下把溶液攪拌2小時，接著溶液在己烷(100ml)和稀的NaHSO4水溶液之間分配。用含有少量1M磷酸鹽緩沖液(pH 7)的飽和的NaCl水溶液洗滌有機層，用Na2SO4干燥并濃縮。從75ml己烷中再結(jié)晶殘余物，得到5.56g(60％)作為淺黃色針狀體的N-(2R-叔丁氧羰基(甲基-4-戊?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮，mp75-76℃。元素分析C21H27NO5的計算值C，67.54；H，7.29；N，3.75；實測值C，67.76；H，7.34；N，3.87。
實施例25R2為二苯基的式(Fc″-1)的化合物在氬氣氣氛中，向10ml無水DMF中的4.75g(12.7mmol)N-(2R-叔丁氧羰基)-甲基-4-戊烯?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮、3.73g(16.0mmol)4-溴二苯、0.234g(0.77mmol)三-鄰甲苯基膦和2.22ml(1.62g，16.0mmol)三乙胺的溶液中，加入0.086g(0.385mmol)乙酸鈀(II)。在100℃下，把溶液加熱4小時，冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋。通過過濾除去沉淀，濾液在150ml 2∶1乙酸乙酯∶己烷和含少量亞硫酸鈉的50ml pH7磷酸鹽緩沖液(0.5M)之間分配。用0.2N硫酸氫鈉的水溶液和鹽水/pH7磷酸鹽緩沖液洗滌，用硫酸鈉干燥，并濃縮。把殘余物溶于50ml乙酸乙酯，用250ml異辛烷稀釋，放入(seed)少量產(chǎn)物的晶體。通過過濾除去固體，從250ml 4∶1異辛烷∶乙酸乙酯再結(jié)晶，產(chǎn)生4.20g(63％)細白色針狀體狀的產(chǎn)物，即N-(2R-叔丁氧羰基)甲基-(5-二苯-4-基)-4-戊烯?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮，mp118-119℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)7.25-7.60(m，14H)，6.47(d，1H，J＝16Hz)，6.25(dt，1H，J＝16和8Hz)，4.65-4.70(m，1H)，4.34-4.44(m，1H)，4.11(dd，1H，J＝9和2Hz)，4.01(t，1H，J＝8Hz)，3.33(dd，1H，J＝14和3Hz)，2.89(dd，1H，J＝17和11Hz)，2.76(dd，1H，J＝14和10Hz)，2.40-2.57(m，3H)，1.43(s，9H)。元素分析，C33H35NO5的計算值C，75.40；H，6.77；N，2.66。實測值C，75.17；H，6.84；N，2.58。
實施例26R2是二苯基的式(Fc″-2)的化合物在室溫下、在1大氣壓的氫氣中、在500mg 10％的Pd/C上，把50ml乙酸乙酯中的5.23g(10.00mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-(5-(二苯-4-基)-4-戊烯?；?-4S-苯基甲基-2-噁唑烷酮溶液氫化2小時。用硅藻土過濾除去催化劑，把濾液濃縮到大約20ml，再用大約75ml異辛烷稀釋。向該溶液中放入少量產(chǎn)物的晶體，把溶液濃縮至大約50ml，再冷卻至-20℃。過濾沉淀，產(chǎn)生4.91g(94％)白色粉末狀的N-(2R-叔丁氧羰基)甲基-(5-(二苯-4-基)戊酰基)-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮mp75-76℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)7.22-7.59(m，14H)，4.61-4.70(m，1H)，4.18-4.24(m，1H)，4.14(d，2H，J＝5Hz)，3.34(dd，1H，J＝13和3Hz)，2.57-2.89(m，4H)，2.48(dd，1H，J＝13和5Hz)，1.65-1.83(m，3H)，1.50-1.60(m，1H)，1.42(s，9H)。元素分析，C33H37NO5的計算值C，75.11；H，7.07；N，2.65。實測值C，75.34；H，7.11；N，2.69。
實施例27R2為二苯基的式F的化合物在0℃下，向60ml THF中的4.02g(7.62mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-(5-(二苯-4-基)戊?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮溶液中，加入2.8ml 30％過氧化氫的水溶液，然后加入8.0ml 2N的氫氧化鋰的水溶液。在0℃下把混合物劇烈攪拌15分鐘，然后使之加溫至室溫。2小時后，把混合物冷卻至0℃，加入20ml 2N亞硫酸鈉水溶液和30ml飽和的碳酸氫鈉水溶液。在0℃下10分鐘后，在室溫下再把混合物攪拌1小時，然后把其倒入1M pH7的磷酸鹽緩沖液中。加入固體硫酸氫鈉把水相酸化至pH6，再用1∶1乙酸乙酯∶己烷(200ml)萃取。用鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，并濃縮。把殘余物在125g硅膠上色譜層析，用20％-30％的含有0.5％乙酸的乙酸乙酯∶己烷洗脫。把含有產(chǎn)物的級分濃縮，再和甲苯共沸幾次，產(chǎn)生2.93g(＞100％)稠漿狀的產(chǎn)物，2R-(叔丁氧羰基)-甲基-(5-(二苯-4-基)戊酸，其在-20℃下貯藏時能緩慢固體mp44-45℃(在真空中干燥固體后)；1H NMR(300 MHz，CDCl3)7.22-7.59(m，9H)，2.82-2.90(m，1H)，2.59-2.75(m，3H)，2.40(dd，1H，J＝14和5Hz)，1.55-1.80(m，4H)，1.42(s，9H)。
元素分析C23H28NO4的計算值C，74.97；H，7.66；實測值C，75.08；H，7.76。
實施例28式(A-1)的化合物向0℃下的40ml乙腈中的5.00g(21.6mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸和2.50g(21.7mmol)N-羥基琥珀酰亞胺溶液中，滴加40ml乙腈中的4.12g(20mmol)二環(huán)己基碳化二亞胺溶液。在0℃至室溫下把混合物攪拌過夜，然后過濾混合物以除去沉淀的二環(huán)己脲。濃縮濾液，并把殘余物和乙酸乙酯/二氯甲烷研制，產(chǎn)生5.06g(80％)白色固體狀的N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸，N-羥基琥珀酰亞胺酯mp 136-137℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.07(br d，1H)，4.43(d，1H，J＝10Hz)，2.84(s，4H)，1.46(s，9H)，1.10(s，9H)。
實施例29R3為叔丁基且R7是4-吡啶(替代所述的苯基)的式(C)的化合物在100℃下，把2.00g(6.32mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸，N-羥基琥珀酰亞胺酯和2.98g(31.6mmol)4-氨基吡啶溶于20ml二噁烷中形成的溶液加熱3小時。將反應(yīng)冷卻至室溫，并濃縮。在硅膠上色譜層析來純化殘余物，用5％-10％二氯甲烷的甲醇洗脫，得到1.06g(54％)白色固體狀的N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.47(d，2H，J＝6Hz)，8.35(寬s，1H)，7.50(d，2H，J＝6Hz)，5.23(寬d，1H)，4.00(寬d，1H)，1.44(s，9H)，1.05(s，9H)。FAB-MS(M+H)+計算值308.1974，實測值308.1970。
實施例3030A.R3為叔丁基且R7是4-吡啶(替代所述的苯基)的式(D)的化合物向2ml二氯甲烷中的132mg(0.43mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸-N_(吡啶-4-基)甲酰胺的溶液中，加入1ml三氟乙酸。在室溫下1小時后，用大約5ml甲苯稀釋并濃縮。在甲苯/二氯甲烷/甲醇中重復(fù)稀釋，濃縮，最后得到190mg(100％)白色固體狀的L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺雙(三氟乙酸酯)；1H NMR(300MHz，DMSO(二甲基亞砜)-d6)δ11.58(br(寬的)s，1H)，8.68(d，2H，J＝6Hz)，8.35(br s，2H)，7.91(d，2H，J＝6Hz)，3.81(s，1H)，1.04(s，9H)，F(xiàn)AB-MS(M+H)+計算值308.1500；觀察值208.1496。30B.式(D)的化合物，其中R3是叔丁基且R7是4-(甲基硫代)苯基以類似于A部分的方法，制備L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.02(s，1H)，7.49(d，2H，J＝6.5Hz)，7.23(d，2H，J＝6.5Hz)，3.23(s，2H)，2.44(s，3H)，1.03(s，9H)。
實施例3131A.式(Ib)的化合物，式中R2是二苯基(X是丙烷-1，3-二基)，R3和R8是叔丁基，且R7是4-吡啶(替代所述的苯基)向357mg(0.97mmol)2R-(叔丁氧羰基)甲基-(5-(二苯-4-基)戊酸、422mg(0.97mmol)L-叔亮氨酸-N′-(4-(吡啶-4-基)甲酰胺雙(三氟乙酸酯)以及0.50ml(3.6mmol)三乙胺溶于5ml DMF中形成的溶液中，加入422mg(1.00mmol)苯并三唑-1-基-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽。4小時后，反應(yīng)物在乙酸乙酯和水之間分配。用乙酸乙酯把水層萃取2次，用水和鹽水洗滌合并的有機層，于硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物，用己烷中的25％-75％的乙酸乙酯洗脫，得到360mg(66％)的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.52(s，1H)，8.42(d，2H，J＝6Hz)，7.54(d，2H，J＝7Hz)，7.40-7.48(m，6H)，7.32(d，2H，J＝8Hz)，7.13(d，2H，J＝8Hz)，6.62(d，1H，J＝9Hz)，4.35(d，1H，J＝9Hz)，2.58-2.68(m，4H)，2.40(dd，1H，J＝16和3Hz)，1.40-1.75(s覆蓋m，被H2O所遮蔽，13H)，1.08(s，9H)。31B.R7不同的式(Ib)的化合物按照A部分的方法，用以下化合物替代L-叔亮氨酸-N′-(4-(吡啶-4-基)甲酰胺雙(三氟乙酸酯)L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；L-叔亮氨酸-N′-(4-甲基硫代)苯基)甲酰胺；得到以下化合物N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨磺酰基)苯基)甲酰胺熔點92℃；1H NMR(300 MHz，甲醇-d4)δ7.80(s，4H)，7.51(d，2H，J＝7Hz)，7.41(d，2H，J＝7Hz)，7.36(d，2H，J＝8Hz)，7.28(t，1H，J＝7Hz)，7.14(d，2H，J＝8Hz)，4.47(s，1H)，3.47(t，2H，J＝6Hz)，2.85-2.95(t覆蓋m，3H)，2.52-2.62(m，3H)，2.32(dd，1H，J＝16.5和5Hz)，1.48-1.62(m，4H)，1.41(s，9H)，1.09(s，9H)；元素分析C37H49N3O7S計算值C，65.37；H，7.26；N，6.18；S，4.72；實測值C，65.13；H，7.33；N，6.22；S，4.63。
N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.79(s，1H)，7.53(d，2H，J＝7Hz)，7.31-7.44(m，7H)，7.19(d，2H，J＝9Hz)，7.13(d，2H，J＝8Hz)，6.58(d，1H，J＝9Hz)，4.36(d，1H，J＝9Hz)，2.55-2.67(m，4H)，2.34-2.40(s覆蓋m，4H)，1.38-1.75(s覆蓋m，13H)，1.07(s，9H)；元素分析C36H46NO4S°0.25 H2O的計算值C，71.19；H，7.72；N，4.61；S，5.28。實測值C，71.20；H，7.78；N，4.58；S，5.28。
實施例3232A.式(Ic)的化合物，式中R2是二苯基(且X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，并且R7是4-吡啶(替代所述的苯基)向4ml二氯甲烷中的360mg(0.64mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)-甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺溶液中，加入2ml三氟乙酸。在室溫下1小時后，用甲苯稀釋溶液，并濃縮。把殘余物溶于乙酸乙酯(15ml)，并用0.5M pH4的檸檬酸鹽緩沖液(2×15ml)洗滌。以乙酸乙酯(2×15ml)萃取合并的水層，用鹽水洗滌合并的有機層，于硫酸鈉上干燥并濃縮。把殘余物用乙酸乙酯/己烷研制，得到230mg(71％)白色固體的N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺mp198-201℃；1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ8.32(d，2H，J＝7Hz)，7.64(d，2H，J＝5Hz)，7.45(d，2H，J＝7Hz)，7.24-7.38(m，7H)，7.10(d，2H，J＝8Hz)，4.42(s，1H)，2.85-3.00(m，1H)，2.33-2.65(m，4H)，1.40-1.62(m，4H)，1.02(s，9H)。
元素分析C30H36N3O4·0.5H2O·0.5乙酸乙酯(溶劑化物)的計算值C，69.29；H，7.27；N，7.58。實測值C，69.46；H，7.09；N，7.55。30B.R7變化的式(Ic)的化合物按照A部分的方法，用以下化合物來替代N-(2R-叔丁氧羰基)-甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-(吡啶-4-基)甲酰胺N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4R/S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(芴基-2-基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(7-甘氨酰)氨基芴-2-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-β-羥基-纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(2-羥乙基)苯基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4′-羥基二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4′-氰基二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4′-(2-氨基乙氧基)二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊酰基)-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-羥基乙基)氨基磺?；?-苯基)-甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(2-氟二苯-4-基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-((二苯-4-基)硫代)丁?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(2-氨基吡啶-5-基)苯基)戊酰基)-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(2-羥基二苯-4-基)戊?；?-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4′-氰基二苯-4-基)戊?；?-L-(反-4-羥基環(huán)己基)甘氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-(4-羥基四氫吡喃-4-基)甘氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；和N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(2R/S-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊?；?-L-(環(huán)己基)甘氨酸-N′-(4S-(4-((2-羥基乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺；得到下列化合物N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥基乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺；
1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ7.80(s，4H)，7.50(d，2H，J＝7Hz)，7.25-7.42(m，5H)，7.15(d，1H，J＝8Hz)，4.47(s，1H)，3.47(t，2H，J＝6Hz)，2.89-3.00(m，1H)，2.87(t，2H，J＝6Hz)，2.49-2.70(m，3H)，2.39(dd，1H，J＝16和5Hz)，1.46-1.67(m，4H)，1.07(s，9H)；元素分析C33H41N3O7S·0.5 H2O的計算值C，62.64；H，6.69；N，6.64； S，5.07。實測值C，62.61；H，6.80；N，6.31；S，4.97。
N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4R/S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ8.03(d，1H，J＝9Hz)，7.76(d，2H，J＝9Hz)，7.57(dd，2H，J＝9和2Hz)，7.44(d，2H，J＝7Hz)，7.36(t，2H，J＝7Hz)，7.23-7.28(m，3H)，7.10(d，2H，J＝8Hz)，4.45(d，1H，J＝9Hz)，2.85-2.98(m，1H，J＝8Hz)，2.44-2.64(m，7H)，2.35(dd，1H，J＝16和5Hz)，1.43-1.62(m，4H)，1.03(s，9H)。
N-(2R-羧甲基-5-(芴-2-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp188-190℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ12.06(s，1H)，10.30(s，1H)，8.19(d，1H，J＝8Hz)，7.86(d，2H，J＝9Hz)，7.68-7.77(m，3H)，7.62(d，1H，J＝8Hz)，7.48(d，1H，J＝7Hz)，7.20-7.35(m，3H)，7.10(d，1H，J＝7Hz)，4.48(m，1H)，3.76(s，3H)，3.70(s，2H)，2.15-2.75(m，5H)，1.35-1.75(m，5H)，0.90-0.99(m，4H)；元素分析C34H38N2O6的計算值C.71.56；H，6.71；N，4.91；實測值C，71.51；H，6.97；N，4.84。
N-(2R-羧甲基-5-(7-(甘氨酰)氨基芴-2-基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp 222-224℃，F(xiàn)AB-MS(M+H)+C40H51N4O7的計算值699.3758；觀測值(Obseved)699.3770；N-(2R-羧甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，d4-甲醇)δ8.52(d，2H，J＝5.5Hz)，7.92(d，2H，J＝9.19Hz)，7.67(d，2H，J＝8.82Hz)，7.58(d，2H，J＝6.25Hz)，7.46(d，2H，J＝8.45Hz)，7.20(d，2H，J＝8.46Hz)，4.6-4.4(m，1H)，3.84(s，3H)，2.83-2.59(m，4H)，2.38(dd，1H，J＝16.7和5Hz)，1.71-1.57(m，7H)，0.96(dd，6H，J＝9.92和6.3Hz)。
N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.73(s，1H)，8.07(d，1H，J＝8.09Hz)，7.52-7.25(m，11H)，7.10(t，1H，J＝7.54Hz)，6.97(d，2H，J＝8.08Hz)，4.41(d，1H，J＝8.45Hz)，3.02-3.00(m，1H)，2.75(dd，1H，J＝16.55和8.45Hz)，2.53-2.51(m，2H)，2.44(dd，1H，J＝17.1和4.6Hz)，1.85-1.47(m，4H)，1.45(s，3H)，1.21(s，3H)；元素分析C3H3N4O4的計算值C，71.69；H，6.82；N，5.57；實測值C，71.65；H，6.86；N，5.53。
N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基-磺?；?苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ8.10(d，1H，J＝9Hz)，7.84(s，4H)，7.47(d，2H，J＝8Hz)，7.25-7.40(m，5H)，7.13(d，2H，J＝8Hz)，4.48(d，1H，J＝9Hz)，2.95(s，3H)，2.44-2.70(m，4H)，2.36(dd，1H，J＝16和5Hz)，1.47-1.63(m，4H)，1.06(s，9H)；N-(2R-羧甲基-5-(4-(2-羥乙基)苯基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ7.91(d，2H，J＝9Hz)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，6.96(s，4H)，4.47-4.51(m，1H)，3.84(s，3H)，3.63(t，2H，J＝7Hz)，2.68(t，2H，J＝7Hz)，2.46-2.75(m，4H)，2.37(dd，1H，J＝16和5Hz)，1.51-1.73(m，7H)，0.93和0.89(2d，6H，J＝7Hz)；N-(2R-羧甲基-5-(4′-羥基-二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp 195-197℃；FAB-MS(M+H)預(yù)計值(expected)575.2757；觀測值(observed)595.2750N-(2R-羧甲基-5-(4′-氰基二苯-4-基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ10.02(s，1H)，8.37(d，1H，J＝7Hz)，7.87(d，2H，J＝8Hz)，7.71(d，2H，J＝8.5Hz)，7.64(d，4H，J＝9Hz)，7.35(d，2H，J＝8Hz)，7.16(d，2H，J＝8Hz)，4.50-4.53(m，1H)，3.81(s，3H)，2.49-2.78(m，4H)，2.35(dd，1H，J＝16和5Hz)，1.46-1.72(m，7H)，0.88和0.90(2d，2H，J＝7Hz)；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp191-193℃；N-(2R-羧甲基-5-(4′-(2-氨基乙氧基)二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺FAB-MS(M+H)+，計算值618.3179；實測值618.3189；N-(2R-羧甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(2-氟二苯-4-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-4-((二苯-4-基)硫代)丁酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(4-(2-氨基吡啶-5-基)苯基)戊?；?-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(2-羥基二苯-4-基)戊酰基)-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(4′-氰基二苯-4-基)戊?；?-L-(反-4-羥基環(huán)己基)甘氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-(4-羥基四氫吡喃-4-基)甘氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；以及N-(2R-羧甲基-5-(2R/S-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊?；?-L-(環(huán)己基)甘氨酸-N′-(4S-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺。
實施例3333A.式(Ie)的化合物，式中的R2是二苯基(X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，且R7是4-吡啶(替代所述的苯基)向室溫下的127.4mg(0.200mmol)N-(2R-羧甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺和40μl的N-甲基嗎啉溶于1.0ml DMF形成的溶液中，加入115mg(0.26mmol)的苯并三唑-1-基-三(二甲基氨基)-鏻六氟磷酸鹽。15分鐘后，一次加入42mg(0.60mmol)鹽酸胲，然后加入另外的70μl N-甲基嗎啉。在室溫下把混合物攪拌24小時，然后將混合物在30ml乙酸乙酯和25ml 0.5M碳酸氫鈉水溶液之間分配。用另外的碳酸氫鈉水溶液和鹽水/pH7緩沖液洗滌有機層，于硫酸鈉上干燥，并濃縮。從乙酸乙酯再結(jié)晶，得到42.2mg N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺。濃縮濾液并通過徑向色譜法(1mm板，5％-10％乙醇∶二氯甲烷)純化，從2∶1乙酸乙酯∶己烷再結(jié)晶后，產(chǎn)生另外的21.0mg產(chǎn)物?？偖a(chǎn)量為63.1mg(61％)白色粉末狀的N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.45(s，1H)，10.34(s，1H)，8.68(s，1H)，8.38(d，2H，J＝7Hz)，8.04(d，1H，J＝9Hz)，7.25-7.60(m，9H)，7.12(d，2H，J＝7Hz)，4.39(d，1H，J＝9Hz)，2.86-2.97(m，1H)，2.36-2.60(m，2H，與DMSO-d5共振而模糊)，2.14(dd，1H，J＝15和7Hz)，2.02(dd，1H，J＝15和8Hz)，1.30-1.53(m，4H)，0.94(s，9H)；元素分析，C30H36N4O4·0.25 H2O的計算值C，69.14；H，7.06；N，10.75；實測值C，69.15；H，7.23；N，10.56。33B.R2、R3和R7變化的式(Ie)的化合物按照A部分的方法，并用以下化合物替代N-(2R-(羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺N-(2R-(羧甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(羧甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(4S-甲基亞磺?；?苯基甲酰胺；以及N-(2R-(羧甲基-4-甲基戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(羧甲基-(5-(4-(2S-羥丙基)苯基)戊酰基)-L-(反-4-羥基環(huán)己基)甘氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(羧甲基-5-(4-(2-甲基噻唑-4-基)苯基)戊酰基)-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；以及
N-(2R-(羧甲基-5-(4-(2R/S-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊?；?-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；得到如下化合物N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-蘇氨酸-N′-(4S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲?；?甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊酰基)-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(4S-甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-4-甲基戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(4-(2S-羥基丙基)苯基)-戊?；?-L-(反-4-羥基環(huán)己基)甘氨酸)-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲?；?甲基-5-(4-(2-甲基噻唑-4-基)苯基)戊酰基)-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲?；?甲基-5-(4-(2R/S-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊?；?-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-(5-(4-(2S-羥基丙基)-苯基)-戊?；?-L-(反式-4-羥基環(huán)己基)甘氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(4-(2-甲基噻唑-4-基)苯基戊酰基)-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；以及N-(2R-(N-羥基氨基甲酰基)甲基-5-(4-(2R/S-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊酰基)-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺。
實施例3434A.R3是叔丁基且R4與R5是H的式(C)的化合物把9ml已蒸餾的苯胺中的2.00g(6.32mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸N-羥基琥珀酰亞胺酯溶液攪拌，并于100℃下加熱30分鐘。使混合物冷卻至室溫，用40ml乙酸乙酯稀釋。用4×50ml 1N硫酸氫鈉的水溶液洗滌該溶液，以25ml乙酸乙酯萃取合并的水層。用鹽水洗滌合并的有機層，于硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過于硅膠(2％-10％二氯甲烷中的乙酸乙酯)純化殘余物，得到1.36g(74％)白色固體狀的N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸-N′-苯基甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.49(d，2H，J＝8Hz)，7.31(t，2H，J＝8Hz)，7.11(t，1H，J＝7Hz)，5.30-5.36(m，1H)，3.95(d，1H，J＝9Hz)，1.44(s，9H)，1.07(s，9H)。34B.式(C)的化合物，其中R3是叔丁基、R4是4-甲基硫代基且R5是H以與A部分類似的方法，制備N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.65(br s，1H)，7.42(d，2H，J＝8.5Hz)，7.21(d，2H，J＝8.5Hz)，5.32(br d，1H)，3.95(d，1H，J＝8.5Hz)，2.45(s，3H)，1.44(s，9H)，1.06(s，9H)；元素分析，C18H23N2O3S的計算值C，61.33；H，8.01；N，7.95；S，9.09；實測值C，61.34；H，8.06；N，8.00；S，9.18。
實施例35具有一個三氟乙酰保護基的式(C)的化合物，其中R3是叔丁基，并且R4和R5是H向10ml二氯甲烷中的1.36g(4.4mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-叔亮氨酸-N′-苯基甲酰胺溶液中加入5ml三氟乙酸。于室溫下45分鐘后，用甲苯稀釋該溶液，并濃縮。把殘余物從甲苯中濃縮2次以上，以除去多余的三氟乙酸，然后于真空(大約1mmHg)下干燥。再把殘余物溶于15ml二氯甲烷，并依次用吡啶(0.90ml，11mmol)和三氟乙酸酐(0.70ml，4.84mmol)處理。30分鐘后，混合物在二氯甲烷(25ml)和1N硫酸氫鈉的水溶液之間分配。用另外的硫酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌有機層，于硫酸鈉上干燥，濃縮得到1.22g(91％)白色固體狀的N-(三氟乙?；?-L-叔亮氨酸-N′-苯基甲酰胺mp201-203℃，1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.50(d，2H，J＝8Hz)，7.36(t，2H，J＝8Hz)，7.17(t，1H，J＝7Hz)，4.43(d，1H，J＝9Hz)，1.10(s，9H)；元素分析C14H17F3N2O2的計算值，C，55.62；H，5.67；N，9.27；實測值C，55.57；H，5.60；N，9.18。
實施例36具有一個三氯乙?；Ｗo基的式(C)的化合物，其中R3是叔丁基，R4是4-(2-羥乙基)氨基磺酰基，且R5是H。
向5ml氯仿中的250mg(0.83mmol)N-(三氟乙酰基)-L-叔亮氨酸-N′-苯基甲酰胺溶液中，加入0.4ml(6mmol)氯磺酸。把混合物加熱使之回流35分鐘，然后冷卻至0℃，并用乙酸乙酯稀釋。加入乙醇胺(1.5ml)，并于0℃下攪拌混合物15分鐘?；旌衔镌谒鸵宜嵋阴ブg分配，用1N硫酸氫鈉水溶液洗滌有機層，于硫酸鈉上干燥，濃縮得到140mg(40％)N-(三氟乙?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥基乙基)氨基-磺?；?苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.84(d，2H，J＝9Hz)，7.67(d，2H，J＝9Hz)，7.15(br d，1H)，4.90(br t，1H)，4.49(d，1H，J＝9Hz)，3.70(t，2H，J＝5Hz)，3.11(q，2H，J＝5Hz)，1.12(s，9H).
實施例37式(D)的化合物，其中R3是叔丁基，R4是4-(2-羥基乙基)氨基磺酰基，且R5是H向8ml乙醇中的257mg(0.6mmol)N-(三氟乙?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥基乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺溶液中加入227mg(6mmol)的硼氫化鈉。把混合物加熱至55℃，持續(xù)15分鐘，使之冷卻至室溫，并用10％甲醇中的氫氧化銨停止反應(yīng)。于室溫下20小時后，過濾混合物，并把濾液吸收到硅膠上。色譜(二氯甲烷至90∶9∶1二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨)得到110g(56％)油狀的L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.48(br s，1H)，7.81(d，2H，J＝9Hz)，7.72(d，2H，J＝9Hz)，3.67(t，2H，J＝5Hz)，3.30(s，1H)，3.08(q，2H，J＝5Hz)，1.06(s，9H)；FAB-MS(M+H)+預(yù)計值330.1488，觀測值330.1480。
實施例38式(Ib)的化合物，其中R2是二苯基(X是丙烷-1.3-二基)，R3是叔丁基，R4是4R/S-甲基亞磺酰基，且R5是H。
向-78℃下的2ml二氯甲烷中的60.3mg(0.100mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?L-叔亮氨酸-N′-(4-(甲基硫代)苯基)甲酰胺溶液中，加入26mg(0.15mmol)1ml二氯甲烷中的間-氯過苯甲酸溶液。把反應(yīng)于-78℃攪拌50分鐘，然后加入0.2ml二甲基硫。使混合物加溫至室溫，然后混合物在二氯甲烷和飽和的碳酸氫鈉的水溶液之間分配。用鹽水洗滌有機層，于硫酸鈉上干燥，并濃縮得到59.6mg(96％)白色固體狀的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4R/S-(甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.46(br s，1H)，7.32-7.68(m，11H)，7.14(d，2H，J＝8Hz)，6.63(d，1H，J＝9Hz)，4.42(d，1H，J＝9Hz)，2.36-2.72(m，8H)，1.42-1.76(s覆蓋m，13H)，1.09(s，9H)。
實施例39式(F″)的化合物向0℃下的30ml THF中的2.779g(7.50mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)-甲基-4-戊酰基)-4S-苯基甲基-2-噁唑烷酮溶液中，加入2.55ml(22.5mmol)30％過氧化氫水溶液，隨后加入7.5ml(15mmol)2.0N氫氧化鋰的水溶液。在0℃下把混合物攪拌2小時，再在室溫下攪拌0.5小時。把混合物再冷卻至0℃后，加入15ml 2M亞硫酸鈉的水溶液和飽和的23ml碳酸氫鈉水溶液。在0℃下，再將水混合物攪拌30分鐘，然后于真空中通過濃縮除去大部分的THF。殘余物在CH2Cl2和H2O之間分配，用另外的CH2Cl2萃取水層。用碳酸氫鈉的水溶液萃取合并的有機層，再用碳酸氫鈉把合并的水層酸化至pH2。把得到的混合物用乙酸乙酯萃取2次，用飽和的NaCl水溶液洗滌合并的有機層，用0.25體積的己烷稀釋，并在Na2SO4上干燥，濃縮得到1.47g(92％)無色油狀的2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-戊酸1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.68-5.82(m，1H)，5.07-5.15(m，2H)，2.86-2.96(m，1H)，2.60(dd，1H，J＝18和10Hz)，2.25-2.52(m，3H)，1.43(s，9H)。
實施例40式(D′-1)的化合物，式中R3是叔丁基，R7是4-(甲氧羰基)苯基。
以類似于實施例31的方法，用2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-戊酸代替2R-(叔丁氧羰基)甲基-(5-(二苯-4-基)戊酸，用L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺代替L-叔亮氨酸-N′-(4-(吡啶-4-基)甲酰胺，制備N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-戊烯?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp118-119℃(環(huán)己烷)；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.96(s，1H)，7.95(d，2H，J＝9Hz)，7.57(d，2H，J＝9Hz)，6.32(d，1H，J＝7Hz)，5.63-5.77(m，1H)，4.95-5.08(m，2H)，4.52-4.60(m，1H)，3.88(s，3H)，2.36-2.77(m，4H)，2.14-2.27(m，1H)，1.60-1.87(m，3H)，1.45(s，9H)，0.97(d，3H，J＝7Hz)，0.91(d，3H，J＝7Hz).元素分析C25H36N2O6的計算值C，65.20；H，7.88；N，6.08；實測值C，65.04；H，7.80；N，6.06。
實施例4141A.式(D′-2)的化合物，式中R2是芴-2-基(X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，且R7是4-(甲氧羰基)苯基。
在氬氣中，向167mg(0.36mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)-甲基-4-戊烯酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)-甲酰胺、108mg(0.44mmol)2-溴芴、21mg(0.07mmol)的三-鄰甲苯基膦和69μl(50mg，0.50mmol)三乙胺溶于1.0ml DMF的溶液中，加入8.0mg(0.035mmol)二乙酸鈀。在100℃下把溶液加熱2小時，冷卻至室溫，然后混合物在3∶1乙酸乙酯∶己烷和水之間分配。用1N硫酸氫鈉的水溶液和鹽水/pH7緩沖液洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，濃縮。以快速色譜(20g硅膠，5％-10％的二氯甲烷中的叔丁基甲基醚)得到185mg(82％)的固體產(chǎn)物，由薄層色譜法(TLC)可知產(chǎn)物固體中有痕量雜質(zhì)。從叔丁基甲醚/異辛烷中再結(jié)晶，得到115mg(51％)細白色針狀體狀的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(芴-2-基)-4E-戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺熔點189-192℃；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.79(d，2H，J＝8Hz)，7.72(d，1H，J＝8Hz)，7.57(d，1H，J＝8Hz)，7.45-7.53(m，3H)，7.36(t，1H，J＝7.5Hz)，7.25-7.32(m，2H)，7.17(d，1H，J＝7Hz)，4.52-4.60(m，1H)，3.75(s，5H)，2.33-2.87(m，5H)，1.60-1.90(m，3H)，1.45(s，9H)，0.92(明顯的t，6H)；元素分析，C38H44N2O6·0.5H2O的計算值C，72.01；H，7.16；N，4.42。實測值C，71.87；H，7.07；N，4.32。41B.式(D′-2)的化合物，其中R2是7-(N-(芐氧羰基)甘氨酰)-氨基芴-2-基(X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，R7是4-(甲氧羰基)苯基。
向10ml無水吡啶中的600mg(2.31mmol)2-氨基-7-溴芴和483mg(2.31mmol)N-(芐氧羰基)甘氨酸的溶液中，加入442mg(2.31mmol)EDC氫氯化物。在60℃下把反應(yīng)物加熱4天，然后濃縮該溶液。殘余物在乙酸乙酯和1N鹽酸水溶液之間分配，用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，濃縮得到813mg(78％)褐色固體狀的N-(芐氧羰基)-甘氨酸-N′-(7-溴芴-2-基)甲酰胺mp194-195℃。
通過按照A部分的方法并用N-(芐氧羰基)甘氨酸-N′-(7-溴芴-2-基)甲酰胺替代2-溴芴，得到N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(7-(N-(芐氧羰基)甘氨?；?氨基芴-2基)-4E-戊烯酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp213-214℃，F(xiàn)AB-MS(M+Cs)+C48H54N4O9·Cs的計算值963.2945；觀察值963.2960。元素分析C47H54N4O9的計算值C，69.40；H，6.51；N，6.75；實測值C，69.47；H，6.51；N，6.70。41C.式(D′-2)的化合物，式中R2是4-(吡啶-4-基)苯基(X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，且R7是4-(甲氧羰基)苯基。
把2M碳酸鈉的水溶液(3ml)加入到2ml苯中的400mg(2.0mmol)4-溴吡啶的懸浮液中，產(chǎn)生2個透明的相，將氬氣鼓泡通入混合物幾分鐘，然后加入115mg(0.10mmol)四(三苯膦)鈀。向得到的混合物加入1ml乙醇中的200mg(1.00mmol)4-溴苯基硼酸溶液，在回流溫度下加熱混合物4小時。冷卻至室溫后，混合物在乙酸乙酯(25ml)和水(25ml)之間分配。在硫酸鈉上干燥有機層，并且濃縮。通過硅膠色譜來純化殘余物，用25％-50％的己烷中的乙酸乙酯洗脫，得到193mg(82％)白色固體狀的4-(4-溴苯基)吡啶mp124-126℃。
按照A部分的方法，并且用4-(4-溴苯基)吡啶替代2-溴芴，得到N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)-4E-戊烯?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.64(d，2H，J＝6Hz)，7.85(d，2H，J＝8.5Hz)，7.49(d，2H，J＝9Hz)，7.45(d，2H，J＝6Hz)，7.19(d，2H，J＝8Hz)，6.40(d，1H，J＝16Hz)，6.33(d，1H，J＝8Hz)，6.09-6.17(m，1H)，4.54-4.57(m，1H)，3.80(s，3H)，2.38-2.81(m，5H)，1.48-1.84(m，3H)，1.44(s，9H)，0.90和0.94(2d，6H，J＝7Hz)。
實施例4242A.式(Ib′)的化合物，式中R2是芴-2-基(X是丙烷-1，3-二基)，R3是叔丁基，且R7是4-(甲氧羰基)苯基。
將7ml 4∶3乙酸乙酯∶乙醇中的111mg(0.177mmol)N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(芴-2-基)-4-戊?；?L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺溶液，在1個大氣壓的氫氣壓力下在30mg 10％Pd/C氫化3小時。用硅藻土過濾來除去催化劑，并濃縮濾液。把濾液用叔丁基甲醚研制，得到110mg(99％)白色固體狀的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(芴-2-基)戊?；?L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp166-167℃(在161℃下軟化)；元素分析，C37H46N2O6的計算值C，72.29；H，7.54；N，4.56；實測值C，72.32；H，7.54；N，4.62。42B.R2變化的式(Ib′)的化合物按照A部分的方法，并用以下化合物替代N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(芴-2-基)-4-戊烯?；?L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(7-(N-(芐氧羰基)甘氨酰)氨基芴-2-基)-4E-戊烯?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺以及N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)-4E-戊烯酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺；得到下列化合物N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(7-(甘氨酰)氨基芴-2-基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺快速原子轟擊質(zhì)譜(FAB-MS)(M+H)+C40H51N4O7的計算值699.3758；觀測值699.3770；以及N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊酰基)-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺mp174-176℃；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.85(s，1H)，8.63(d，2H，J＝5Hz)，7.95(d，2H，J＝8Hz)，7.57(d，2H，J＝9Hz)，7.41-7.47(m，4H)，7.07(d，2H，J＝8Hz)，6.19(d，1H，J＝7Hz)，4.53-4.56(m，1H)，3.85(s，3H)，2.37-2.66(m，5H)，1.45-1.83(m，7H)，1.42(s，9H)，0.91和0.95(2d，6H，J＝7Hz)。
實施例43R4和R5是H的式(C-1)的化合物在0℃下向55ml二氯甲烷中的已攪拌過的4.18g(20.0mmol)N-(芐氧羰基)甘氨酸、2.73ml(2.79g，30mmol)苯胺以及110mg(1.0mmol)4-二甲基氨基吡啶溶液中，一次加入6.53g(22mmol)EDC甲碘化物。在室溫下把混合物攪拌18小時，然后將混合物在200ml 3∶1乙酸乙酯∶己烷和水之間分配。用1N硫酸氫鈉水溶液、飽和的碳酸氫鈉水溶液、并且最后用鹽水/pH7磷酸鹽緩沖液洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，并濃縮。從1∶1乙酸乙酯∶異辛烷再結(jié)晶，產(chǎn)生3.69g(65％)N-(芐氧羰基)甘氨酸-N′-苯基甲酰胺熔點143-144℃。
實施例44R4和R5是H的式(C-2)的化合物在-5℃下向35ml干THF中的已攪拌的1.42g(5.00mmol)N-(芐氧羰基)-甘氨酸-N′-苯基甲酰胺溶液中，用注射器以一定速率加入己烷中的6.15ml(16.0mmol)2.6M正丁基鋰溶液，使反應(yīng)溫度維持在10℃下。已加入大約2/3正丁基鋰后，溶液開始持續(xù)呈黃色，停止加入大約10分鐘，再以滴加方式繼續(xù)加入以使反應(yīng)維持在大約0℃。加入結(jié)束后，在0℃下把該桔黃色溶液攪拌45分鐘，然后冷卻至-70℃。用注射器一次加入丙酮(1.10ml，15mmol)。10分鐘后，反應(yīng)液在1M pH7磷酸鹽緩沖液和3∶1乙酸乙酯∶己烷之間分配。用鹽水洗滌有機層，并將其在硫酸鈉上干燥，濃縮。通過在75g硅膠上色譜法純化殘余物，用40％乙酸乙酯∶己烷洗脫。首先洗脫下來的是純的產(chǎn)物級分(池#1)，然后是含有產(chǎn)物和原來的N-甘氨酰苯胺的級分(池#2)。把池#2的殘余物從乙酸乙酯∶異辛烷再結(jié)晶，得到幾乎純粹的固體狀的原料，以及基本上含有產(chǎn)物的母液。把由濃縮母液所得的殘余物通過徑向色譜(4mm板，30％乙酸乙酯∶己烷)純化，把產(chǎn)物級分和池#1的合并起來，將膠質(zhì)殘余物用己烷/叔丁基甲醚研制后得到423mg(25％)淺黃色固體狀的N-(芐氧羰基)-DL-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺mp128-129℃；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.30(br s，1H)，7.39(d，2H，J＝8Hz)，7.18-7.28(m，7H)，7.06(t，1H，J＝7Hz)，5.83(br d，1H)，5.05(s，2H)，4.04(d，1H，J＝9Hz)，3.73(s，1H)，1.33(s，3H)，1.16(s，3H)；元素分析，C19H22N2O4的計算值C，66.65；H，6.48；N，8.18；實測值C，66.66；H，6.57；N，8.14。
實施例45R4和R5是H的式(C-2)的化合物將10ml乙酸乙酯中的400mg(1.17mmol)N-(芐氧羰基)-DL-β-羥基纈氨酸-N′-苯基甲酰胺溶液，在1個大氣壓氫氣壓力下50mg 10％的Pd/C上氫化1.5小時。用硅藻土過濾來除去催化劑，并將濾液濃縮得到259mg(＞100％)的DL-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺，它不經(jīng)過進一步純化而使用mp97-99℃；元素分析C11H16N2O4的計算值C，63.44；H，7.74；N，13.45；實測值C，63.52；H，7.79；N，13.40。
實施例46式(Ib)的化合物，式中R2是二苯基，R3是羥基叔丁基，且R4和R5是氫。
向2.5ml DMF中的203mg(0.55mmol)2R-(叔丁氧羰基)-甲基(5-(二苯-4-基)戊酸、104mg(0.50mmol)的DL-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺以及90μl(0.65mmol)三乙胺的溶液中加入265mg(0.60mmol)的苯并三唑-1-基-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸酯。24小時后，反應(yīng)物在3∶1乙酸乙酯∶己烷和大約0.2N碳酸氫鈉的水溶液之間分配。用1N碳酸氫鈉的水溶液和鹽水/pH7緩沖液洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過徑向色譜(4mm板)純化殘余物，用25％-30％己烷中的乙酸乙酯洗脫。首先洗脫的是121mg(43％)的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-D-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺(非對映體)；然后是140mg(50％)膠質(zhì)半固體狀的N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺，根據(jù)NMR分析，它含有大約1摩爾當(dāng)量的異辛烷(最終樣品從中濃縮出的溶劑)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.77(s，1H)，7.24-7.56(m，11H)，7.03-7.14(m，3H)，6.89(d，1H，J＝8.5Hz)，4.46(d，1H，J＝8.5Hz)，4.17(s，1H)，2.52-2.70(m，4H)，2.36(br d，1H，J＝12.5Hz)，1.50-1.70(m，4H)1.43(s，3H)，1.40(s，9H)，1.25(s，3H)。
實施例47式(P-1)的化合物在0℃下向8ml二氯甲烷中的510mg(1.97mmol)N-(4-戊烯?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮溶液中，加入2.2ml(2.2mmol)1M二氯甲烷中的四氯化鈦。15分鐘后，向該粘稠的漿液中加入0.42ml(2.4mmol)二異丙基乙胺，產(chǎn)生深紅色的溶液。在0℃下1小時后，通過套管加入2ml二氯甲烷中的216mg(2.4mmol)S-三噁烷，然后再加入2.2ml的1M二氯甲烷中的四氯化鈦。置于0℃下4小時后，溶液在氯化銨的水溶液和二氯甲烷之間分配。用1N HCl水溶液、含pH7磷酸鹽緩沖液的鹽水洗滌有機層，將有機層在硫酸鈉上干燥，并濃縮。在20g硅藻土上色譜法純化殘余物，用30-40％的己烷中的乙酸乙酯洗脫。從叔丁基甲醚/異辛烷中再結(jié)晶純化的產(chǎn)物，得到404mg(71％)的N-(2R-羥甲基-4-戊?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮mp71-72℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.22-7.37(m，5H)，5.78(dddd，J＝10，7，4和3Hz)，5.03-5.15(m，2H)，4.69(dddd，1H，J＝10，6，4和3Hz)，4.17-4.24(m，2H)，4.02-4.10(m，1H)，3.85-3.91(m，2H)，3.29(dd，1H，J＝4和3Hz)，2.82(dd，1H，J＝14和10Hz)，2.44(dt，1H，J＝14和7Hz)，2.31(dd，1H，J＝14和7Hz)，2.17(br s，1H)。
實施例48式(P-2)的化合物在0℃下、氬氣中向50ml THF中的4.09g(25.1mmol)鄰-芐基胲氫氯化物懸浮液中，加入11.4ml(22.8mmol)2M甲苯中的三甲基鋁。加入結(jié)束后，使溶液加溫至室溫。15分鐘后，在0℃下、氬氣中，通過套管把該溶液加入到100ml THF中的2.40g(8.30mmol)N-(2R-羥甲基-4-戊烯?；?-4S-苯甲基-2-噁唑烷酮溶液中。在0℃下把反應(yīng)物攪拌6小時，然后反應(yīng)物在1N HCl/鹽水和乙酸乙酯/二乙醚之間分配。用1M pH7的磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌有機層，把它在硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過在硅膠上色譜法純化殘余物，用35％-45％己烷中的乙酸乙酯洗脫，用4S-苯甲基-2-噁唑烷酮洗脫后，得到2.01g產(chǎn)物。從乙酸乙酯∶異辛烷中再結(jié)晶得到1.90g(97％)白色粉末狀的N-芐氧基-2R-羥甲基-4-戊烯酰胺mp58-59℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.38(m，5H)，5.71(m，1H)，5.03-5.06(m，1H)，4.91(dd，1H，J＝16和12Hz)，3.73(m，1H)，2.20(m，2H)；元素分析，C13H17NO3的計算值C，66.36；H，7.28；N，5.95；實測值C，66.15；H，7.32；N，5.99。
實施例49式(P-3)的化合物在0℃下向10ml無水吡啶中中的1.92g(8.17mmol)N-芐氧基-2R-羥甲基-4-戊烯酰胺溶液中，加入1.24ml(16.3mmol)甲磺酰氯。3小時后，把反應(yīng)物潑到冰上，將混合物在乙酸乙酯和1N硫酸氫鈉的水溶液之間分配。用另外的硫酸氫鈉洗滌有機層，并用乙酸乙酯萃取合并的水層。把合并的有機層在硫酸鈉上干燥并濃縮。將殘余的油溶于30ml丙酮中，加入3.38g粉狀碳酸鉀。在回流溫度下加熱混合物3小時，然后冷卻至室溫。用硅藻土過濾來除去沉淀，用乙酸乙酯徹底洗滌濾餅。濃縮濾液，通過在硅膠上色譜法純化殘余物，用25％己烷中的乙酸乙酯洗脫，得到1.64g(93％)淡桔紅色油狀的N-芐氧基-3R-(2-丙烯-1-基)-2-氮雜環(huán)丁烷酮1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.37-7.42(m，5H)，5.65-5.75(m，1H)，5.00-5.06(m，1H)，4.93(s，2H)，3.32(ddd，1H，J＝5，4和2Hz)，2.95(m，2H)，2.40-2.47(m，1H)，2.20-2.28(m，1H)；元素分析，C13H15NO2的計算值C，71.86；H，6.96；N，6.45；實測值C，71.59；H，6.88；N，6.37。
實施例50R2是二苯基的式(P-4)的化合物將434mg(2.00mmol)N-芐氧基-3R-(2-丙烯-1-基)-2-氮雜環(huán)丁烷酮、583mg(2.5mmol)4-溴二苯、0.34ml(2.5mmol)三乙胺、35mg(0.11mmol)三(鄰甲苯基)膦和14mg(0.06mmol)二乙酸鈀溶于7ml DMF中的溶液在100℃下加熱18小時。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫，將它在乙酸乙酯和水之間分配。用水洗滌有機層，將它在硫酸鈉上干燥，濃縮。在硅膠上色譜層析殘余物，用25％己烷中的乙酸乙酯洗脫，得到稍微不純的產(chǎn)物，將其從乙酸乙酯/異辛烷中再結(jié)晶得到315mg(43％)的小白色薄片的N-芐氧基-3R-(3-(二苯-4-基)-2-丙烯-1-基)-2-氮雜環(huán)丁烷酮mp109-110℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.31-7.61(m，14H)，6.43(d，1H，J＝15Hz)，6.18(ddd，1H，J＝15，9和7Hz)，4.94(s，2H)，3.36(dd，1H，J＝10，和5Hz)，3.00-3.04(m，2H)，2.60-2.75(m，1H)2.20-2.50(m，1H)；元素分析，C25H23NO2的計算值C，81.27；H，6.28；N，3.79；實測值C，81.09；H，6.31；N，3.71。
實施例51R2為二苯基的式(P-5)的化合物向已攪拌過的5ml 4∶1 THF∶乙醇中的62.0mg(0.168mmol)的)N-芐氧基-3R-(3-(二苯-4-基)-2-丙烯-1-基)-2-氮雜環(huán)丁烷酮溶液中，加入2ml 1N的氫氧化鋰的水溶液。于室溫下把混合物劇烈攪拌1小時后，用10ml 0.5M pH4檸檬酸鹽緩沖液稀釋。混合物在20ml叔丁基甲醚和鹽水之間分配，將有機層干燥，在用大約5ml已烷稀釋后，在硫酸鈉上干燥有機層，將其濃縮為殘余的玻璃狀物。立即將該殘余物溶于5ml二氯甲烷，冷卻至0℃，并加入0.10ml吡啶，接著加入1.2ml二氯甲烷中的甲酸酐溶液，該溶液是通過將297mg(1.00mmol)EDC甲碘化物和80μl(2.00mmol)溶于5ml二氯甲烷的甲酸于0℃下反應(yīng)15分鐘來制備的。30分鐘后，反應(yīng)物在二氯甲烷和0.5M pH3檸檬酸鹽緩沖液之間分配。在硫酸鈉上干燥有機層并濃縮。在5g硅膠上色譜層析殘余物，用5％-10％二氯甲烷中的乙醇梯度洗脫，得到58mg(83％)玻璃狀物的N-((N″-甲酰基-N″-芐氧氨基)甲基-5-(二苯-4-基)-4-戊烯酸。在室溫下，CDCl3中進行1H NMR譜表明有酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的寬峰。
實施例52式(P-6)的化合物，式中的R2是二苯基，R3是叔丁基、R7是4-吡啶基，并且p是0。
向4ml DMF中的99.6mg(0.24mmol)N-((N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酸、125mg(0.288mmol)L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)羧基胺雙(三氯乙酸酯)和0.125ml(0.90mmol)三乙胺的溶液中加入133mg(0.30mmol)苯并三唑-1-基-三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽。在室溫下16小時后，反應(yīng)物在乙酸乙酯和大約0.5M碳酸氫鈉的水溶液之間分配。用1M pH7的磷酸鹽緩沖液和鹽水洗滌有機層，在硫酸鈉上干燥，并濃縮。通過色譜法純化殘余物，用40％-75％己烷中的乙酸乙酯洗脫，接著從乙酸乙酯/異辛烷中再結(jié)晶，得到97.4mg(67％)N-((N″-甲酰基-N″-芐氧基氨基)甲基-5-(二苯-4-基)-4-戊烯?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺mp215-216℃。
實施例5353A.式(Ih)的化合物，式中R2是二苯基、R3是叔丁基、R7是4-吡啶基且p是0。
將5ml 3∶2乙酸乙酯∶乙醇中的87.1mg(0.143mmol)N-((N″-甲酰基-N″-芐氧氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺溶液在一大氣壓氫氣壓力下、25mg 10％Pd/C上氫化6小時。用硅藻土過濾除去催化劑，并濃縮濾液。從乙酸乙酯中再結(jié)晶得到59.0mg(80％)的白色粉末狀的N-((N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺mp190-191℃；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.52(br s，1H)，9.97(br s，1H)，9.53(br s，1H)，8.38(d，2H，J＝7Hz)，7.20(br s，1H)，7.14(br d，1H，J＝8Hz)，7.23-7.60(m，9H)，7.12(d，2H，J＝7Hz)，4.41(d，1H，J＝9 Hz)3.40-3.62(m，2H)，2.90-3.10(m，1H)，2.4-2.6(m，2H，由于DMSO-d5共振而部分模糊)，1.28-1.52(m，4H)，0.94(s，9H)；元素分析C30H36N4O4·0.5 H2O的計算值C，68.55；H，7.10；N，10.66；實測值C，68.48；H，7.04；N，10.63。58B、R2、R3和R7變化的式(Ih)的化合物用類似于實施例50-52的方法，得到下列式(P-6)的化合物N-(2R-(N″-甲酰基-N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(2RS-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)-4-戊烯?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(咪唑-4-基)-4-戊烯酰基)-L-蘇氨酸-N′-((4S-甲基亞磺?；?苯基)-甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(2RS-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)-4-戊烯?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)-甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(咪唑-4-基)苯基)-4-戊烯酰基)-L-蘇氨酸-N′-((4S-甲基亞磺?；?苯基)-甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(吡啶-4-苯基)-4-戊烯?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)-氨基磺?；?苯基)羥基酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)-4-戊烯?；?-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(4S-甲基亞磺?；?苯基)甲酰胺；N-(2R，S-(N″-甲酰基-N″-芐氧氨基)甲基-(4-(甲基)-4-戊烯?；?-L-亮氨酸-N′-(4-甲氧羰基)苯基)甲酰胺；以及N-(2R-(N″-甲?；?N″-芐氧氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺，然后，用這些化合物取代實施例53A的方法中的N-((N″-甲酰基-N″-芐氧基氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺，分別生成以下化合物N-(2R-((N″-甲酰基-N′-羥基氨基)甲基-5-(4-(2RS-羥基-3，3，3-三氟丙基)苯基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(吡啶-4-基)甲酰胺；N-(2R-((N″-甲酰基-N″-羥基氨基)甲基-5-(4-(咪唑-4-基)苯基)戊?；?-L-蘇氨酸-N′-((4S-甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)戊?；?-L-叔亮氨酸-N′-(4-((2-羥乙基)氨基磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-5-(4-(吡啶-4-基)苯基)-戊?；?-L-(β-羥基)纈氨酸-N′-(4S-甲基亞磺酰基)苯基)甲酰胺；N-(2R，S-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-(4-甲基)戊?；?-L-亮氨酸-N′-(4-(甲氧羰基)苯基)甲酰胺MS(M-H)-434.2；(M-CO，H2O)388；以及N-(2R-(N″-甲?；?N″-羥基氨基)甲基-5-(二苯-4-基)戊酰基)-L-環(huán)己基甘氨酸-N′-(4-((2-二甲基氨基)乙基)氨基磺?；?苯基)甲酰胺。
實施例54-59這些實施例對制備一種典型的含有式(I)的活性化合物(如N-(2R-羧式甲基-5-(二苯-4-基)戊?；?-L-β-羥基纈氨酸-N′-(苯基)甲酰胺)的藥物制劑或其可藥用鹽進行了說明。式(I)的其它的化合物可以作為活性化合物用于這些實施例的制劑的制備。
實施例54這一實施例說明了典型的口服藥物制劑的制備。
A 成分 ％重量/重量式(I)的化合物20.0％乳糖 79.5％硬脂酸鎂 0.5％把以上成分混合，并分散到每個盛100mg的硬殼膠囊中，一個膠囊將近似整個日劑量。
B 成分 ％重量/重量式(I)的化合物 20.0％硬脂酸鎂 0.9％淀粉 8.6％乳糖 79.6％PVP(聚乙烯吡咯烷酮)0.9％把除硬脂酸鎂的上述成分結(jié)合，用水作為成粒液進行粒化。然后將制劑干燥、和硬脂酸鎂混合，用合適的壓片機制成片劑。
C 成分 重量式(I)的化合物 0.1g丙二醇20.0g聚乙二醇400 20.0g多乙氧基醚(Polysorbate 80)1.0g水足量至100ml把式(I)的化合物溶于丙二醇、聚乙二醇400和多乙氧基醚。然后在攪拌下加入足量的水，得到100ml溶液，把該溶液過濾并裝瓶。
D 成分 ％重量/重量式(I)的化合物 20.0％花生油 78.0％山梨糖醇酯60 2.0％把以上成分熔化、混合并裝入軟彈性膠囊中。
實施例55本實施例說明用于不經(jīng)腸給藥的藥物制劑的制備。
成分式(I)的化合物 0.02g丙二醇 20.0g聚乙二醇40020.0g多乙氧基醚 1.0g0.9％的鹽水溶液足量100ml把式(I)的化合物溶于丙二醇、聚乙二醇400和多乙氧基醚中。然后在攪拌下加入足量的0.9％鹽水溶液，制成100ml靜脈注射用溶液，把它通過0.2μ膜濾器過濾，并在無菌條件下包裝。
實施例56本實施例說明典型的栓劑形式的藥物制劑的制備。
成分 ％重量/重量式(I)的化合物 1.0％聚乙二醇100074.5％聚乙二醇400024.5％在蒸氣浴上把各成分熔化在一起并混合，倒入模具中，每一模具可盛裝2.5g總量的制劑。
實施例57本實施例說明典型吹入用的藥物制劑的制備。
成分 ％重量/重量微粉化的式(I)的化合物1.0％微粉化的乳糖 99.0％把各成分壓碎、混合，并用配料泵裝入吹入器中。
實施例58本實施例說明了典型的噴霧狀的藥物制劑的制備。
成分％重量/重量式(I)的化合物 0.005％水 89.995％乙醇 10.000％把式(I)的化合物溶于乙醇，并和水摻合。再用配料泵把制劑裝入氣霧器中。
實施例59
本實施例對制備有典型的煙霧劑型的藥物制劑進行了說明。
成分 ％重量/重量式(I)的化合物0.10％推進劑11/12 98.90％油酸 1.00％把式(I)的化合物分散到油酸和推進劑中。然后用計量閥把得到的混合物倒入氣霧劑容器中。
實施例60體外基質(zhì)溶素分析通過藍-瓊脂糖和鋅-螯合瓊脂糖柱，然后在MONO S柱進行快速蛋白質(zhì)液相色譜，從克隆的哺乳動物細胞培養(yǎng)物純化基質(zhì)溶素。在35-37℃下，與1mmol APMA溫育來激活該酶。
把式(I)的化合物溶于DMSO，并將其加入到盛有1ml TC緩沖液(20mMTris，5mM CaCl2，pH7.5)中的0.4μg基質(zhì)溶素的比色杯中(DMSO的最終濃度為2％)。選擇式(I)的化合物的濃度，使每20％活性變化至少有一個數(shù)據(jù)點。允許把酶和化合物在37℃下預(yù)溫育3分鐘。為引發(fā)反應(yīng)，把N-(7-二甲基氨基-4-甲基-3-香豆?；?順丁烯二酰亞胺(“DACM”)(Sigma)和硫肽(酰基-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-S-“亮氨酸”-亮氨酸-甘氨酸-OC2H5，Bachem Bioscience Inc.)分別加至20μM。分別用395和485nm的激發(fā)波長和發(fā)射波長來記錄熒光增加。每一數(shù)據(jù)點是重復(fù)試驗的平均值。采用適合程序Enzfitter的IC50來分析至少六個數(shù)據(jù)點(表示為每分鐘的熒光變化與化合物濃度之間的關(guān)系)。
在該檢測中試驗時，式(I)的化合物顯示出抑制基質(zhì)溶素的能力。
實施例61體外檢測該檢測測定式(I)的化合物是否抑制35S標(biāo)記的葡糖氨基聚糖(GAG′S)從軟骨外植體的釋放。
從新宰殺的牛膝關(guān)節(jié)制備小的軟骨外植體(3mm直徑)，并用35SO4標(biāo)記。響應(yīng)誘導(dǎo)軟骨細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP′S)(包括基質(zhì)溶解素和膠原酶)的rhIL-1-α的加入，35S標(biāo)記的葡糖氨基聚糖(GAG′S)釋放到培養(yǎng)介質(zhì)中去。以沒有rhIL-1-α?xí)r的自發(fā)釋放來校正標(biāo)記了的GAG′S的抑制百分?jǐn)?shù)。每組的結(jié)果代表著5個外植體的平均值±標(biāo)準(zhǔn)平均誤差。
在檢測中測試時，式(I)的化合物表現(xiàn)出能夠抑制35S-標(biāo)記的GAG′S從軟骨外植體釋放。
實施例62體外分析用體外的胎鼠長骨模型來研究式(I)的化合物的抗骨吸收效果。用牛的甲狀旁腺素(PTH)來體外誘導(dǎo)骨吸收作用。以由45鈣預(yù)標(biāo)記的胎鼠長骨釋放到培養(yǎng)基中的45鈣的量來表示骨的吸收作用。用平均抑制百分?jǐn)?shù)±標(biāo)準(zhǔn)平均誤差來表示式(I)的化合物對牛的PTH誘導(dǎo)的骨吸收作用的抑制效果。
把45鈣預(yù)標(biāo)記的胎鼠長骨(來自前臂)解剖，在37℃下、Linbro皿中BGJb培養(yǎng)基上培養(yǎng)過夜，補充1mg/ml BSA(牛族血清白蛋白)。每組有5對骨。在第一天先將式(I)的化合物溶于乙醇，然后稀釋至各種不同濃度，同時以1×108M濃度加入牛的PTH(1-34)?；衔锶芤褐械囊掖紳舛刃∮?.05％，其不影響分析。在第3天改變培養(yǎng)基使檢測在第6天結(jié)束。
在每次改變培養(yǎng)基結(jié)束時，對培養(yǎng)基中存在的45鈣計數(shù)。用0.1N HCl消化留下來的骨，對骨消化液中存在的45鈣也進行計數(shù)。結(jié)果表示為每對骨釋放的全部45鈣的％。1×10-8M時，牛PTH對骨吸收的誘導(dǎo)達到最高水平，將這一水平定為100％，并把此濃度用作標(biāo)準(zhǔn)。把僅在培養(yǎng)基存在下的基線骨吸收規(guī)定為0％。把所有化合物處理過的組和1×10-8M的牛的PTH(1-34)相比較。將化合物抑制骨吸收達50％的濃度定義為IC50。
在本次檢測中，式(I)的化合物顯示出能夠抑制牛的PTH誘導(dǎo)的骨吸收作用。
實施例63體外間質(zhì)溶素分析63A。利用MCA肽底物7-甲氧基香豆素-4-基-乙?；?脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-亮氨酸-3-(2，4-二硝基苯基)-L-2，3-二氨基丙酰基-丙氨酸-精氨酸-胺，通過共振能量傳遞熒光產(chǎn)生分析來測量間質(zhì)溶素的酶催化活性。底物甘氨酸-亮氨酸鍵的裂解導(dǎo)致向2，4-二硝基苯基團的共振能傳遞的損失和MCA(7-甲氧基香豆素-4-基-乙?；?基團的熒光增加。
分析是在37℃下，在含有50mM麥黃酮、pH 7.5，10mM CaCl2、200mMNaCl、1％DMSO和1.4nM間質(zhì)溶素的緩沖液中進行的。MCA底物在1.6ml的終體積中的濃度是10或20μM。在要測試抑制活性的化合物不存在時，或者在有非慢結(jié)合抑制劑存在時，用Perkin-Elmor LS-5B和LS-50B分光熒光計，以λ激發(fā)＝328nm且λ發(fā)射＝393nm在3-5分鐘時間段內(nèi)測量熒光，并使數(shù)據(jù)與一條直線相符合。對于慢性結(jié)合的抑制劑，在45分鐘至1小時內(nèi)采集抑制數(shù)據(jù)。通過使曲線與含有一個直線相的單指數(shù)衰減的等式相符合，并將直線相的符合值作為穩(wěn)態(tài)比率，來計算熒光變化的穩(wěn)態(tài)比率。
對式(I)的化合物進行測試，發(fā)現(xiàn)在本次分析中該化合物作為MMP活性的抑制劑是有效的。63B.通過用0.063nM基質(zhì)溶解素或0.030nM明膠酶A替代間質(zhì)溶解素，也可以將MCA分析用于其它基質(zhì)金屬蛋白酶，如基質(zhì)溶解素或明膠酶A。
雖然根據(jù)本發(fā)明的特定實施方案，已對本發(fā)明進行描述，但本領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員應(yīng)該明了的是在不偏離本發(fā)明的真正精神和范圍的情況下可以作各種變化并替換等價物。此外，也可以作一些修改，以使特定的條件、原料、物質(zhì)的組成、方法、工藝步驟或過程與本發(fā)明的目標(biāo)、精神和范圍相適合。
權(quán)利要求
1.下式的化合物或其可藥用的鹽
其中R1是巰基、乙酰硫代、羧基、羥基氨基甲?；-羥基甲酰氨基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧羰基、芐氧氨基甲?；蛳率降幕鶊F
其中R6是芳基或雜芳基；R2是烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基或雜芳基；R3是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基；R7是芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基；X是式-(CH2)m-Y-(CH2)n-的基團，其中Y是O、S或單鍵，m是0-4的整數(shù)，n是0-4的整數(shù)，且m+n是0-4的整數(shù)；p是0-4的整數(shù)，條件是p不為0時R2-X是二苯基烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物或鹽，其中，R1為羧基；R3是環(huán)己基；R7是任選取代的苯基或N-嗎啉代；X是丙烷-1，3-二基，且p是2或3。
3.權(quán)利要求2的化合物或鹽，其中R7是4-(氨基磺?；?或N-嗎啉代。
4.權(quán)利要求1的化合物或鹽，其中R2是烷基、任選取代的苯基或下式的基團
其中A是CH2、O、NH、S、CH2-CH2或NH-CH2；R10是H、烷基、烷氧基、烷基氨基或酰胺；且R11是H或鹵素；R7是4-吡啶基或任選取代的苯基；并且p是0。
5.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中R1是羧基、羥基氨基甲?；騈-羥基甲?；被?；R2是苯基、二苯基、4-(吡啶基)苯基或2-甲基丙基；R3是叔丁基、4-氨基丁基、二甲基氨基丁基、4-(N，N′-二乙基胍基)丁基、丙基、2-甲基丙基、1-羥基異丙基、1-羥乙基或環(huán)己基；并且X是單鍵、亞乙基或丙烷-1，3-二基。
6.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中R2是二苯基。
7.權(quán)利要求6的化合物或鹽類，其中R1是羧基、N-羥基甲?；被蛄u基氨基甲?；籖3是烷基；并且R7是4-吡啶基。
8.權(quán)利要求7的化合物或鹽，其中R3是叔丁基，并且X是丙烷-1，3-二基。
9.權(quán)利要求8的化合物或鹽，其中，R1是羧基、N-羥基甲?；；蛄u基氨基甲?；?。
10.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中，R2是下式的基團
其中A是CH2；R10是H或酰氨基；并且R11是H；R7是任選取代的苯基；并且X是丙烷-1，3-二基。
11.權(quán)利要求10的化合物或鹽，其中R1是羧基、羥基氨基甲?；騈-羥基甲?；被籖3是烷基；并且R7是烷氧羰基苯基。
12.權(quán)利要求11的化合物或鹽，其中R1是羧基；R3是2-甲基丙基；并且R2是4-(甲氧羰基)苯基。
13.權(quán)利要求6的化合物或鹽，其中R7是任選取代的苯基。
14.權(quán)利要求13的化合物或鹽，其中R1是羧基，R3是烷基或環(huán)烷基；并且X是丙烷-1，3-二基。
15.權(quán)利要求14的化合物或鹽，其中R3是環(huán)己基；且R7是4-(羥乙基氨基磺?；?苯基，或者4-(二甲基氨基乙基氨基磺酰基)苯基；或者R3是4-(氨基)丁基或4-(異丙基氨基)丁基；且R7是4-(乙氧羰基)苯基；或者R3是1-羥基異丙基；且R7是苯基；或者R3是叔丁基。
16.權(quán)利要求15的化合物或鹽，其中R7是4-(N-嗎啉代丙基氨基磺酰基)苯基、4-(甲基氨基-磺?；?苯基、4-(羥乙基氨基磺?；?苯基或者4-(甲基亞磺酰基)苯基。
17.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中R1是羧基；R2是苯基；R3是烷基或環(huán)烷基；且R7是任選取代的苯基。
18.權(quán)利要求17的化合物或鹽，其中，R3是4-(氨基)丁基；R7是4-(乙氧羰基)苯基；并且X是丙烷-1，3-二基；或者R3是(N，N′-二乙基胍基)N-丁基；R7是4-(乙氧羰基)苯基；且X是亞丙基，或R3是環(huán)己基；R7是4-(N″，N″-二甲基氨基乙基氨基磺酰基)苯基；并且X是亞乙基。
19.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中R1是巰基、羧基、羥基氨基甲酰基或N-羥基甲?；被?；R2是2-甲基丙基；R3是烷基、環(huán)烷基或雜芳烷基；R7是任選取代的苯基；并且X是單鍵。
20.權(quán)利要求19的化合物或鹽，其中R1是羥基氨基甲酰基；R3是丙基、2-甲基丙基、環(huán)己基或3-甲基吲哚基；且R7是4-(甲氧基)苯基、4-(羧基)苯基、4-(甲氧羰基)苯基或4-(二甲基氨基乙基氨基甲?；?苯基。
21.權(quán)利要求20的化合物或鹽，其中R7是4-(二甲基氨基乙基氨基甲?；?苯基，或者R7是4-(甲氧羰基)苯基。
22.權(quán)利要求19的化合物或鹽，其中R1是N-羥基甲酰基氨基；R3是2-甲基丙基；且R7是4-(甲氧羰基)苯基；或者R1是羧基；R3是環(huán)己基或2-甲基丙基；且R7是4-(甲氧羰基)苯基；或者R1是巰基；R3是2-甲基丙基；且R7是4-(甲氧羰基)苯基。
23.權(quán)利要求4的化合物或鹽，其中R1是羧基；R2是4-(2-羥乙基)苯基、4-(2-羥基丙基)苯基、4-(2-羥基丁基)苯基、4-吡啶基苯基、二苯基、4′-(氨基乙氧基)二苯基、4′-(氰基)二苯基或者4′-(羥基)二苯基；R3是2-甲基丙基；R7是4-(甲氧羰基)苯基；并且X是丙烷-1，3-二基。
24.權(quán)利要求23的化合物或鹽，其中R2是4-(吡啶基)苯基。
25.一種藥用組合物和一種可藥用的賦形劑，其中藥用組合物含有權(quán)利要求1的化合物或鹽。
26.一種抑制哺乳動物體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶活性的方法，它包括向需要治療的哺乳動物給藥治療有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或鹽。
27.一種治療由基質(zhì)金屬蛋白酶引起的疾病的方法，這些疾病選自關(guān)節(jié)炎、不正常的創(chuàng)傷愈合、組織潰瘍、骨吸收疾病、糖尿病、腫瘤侵入、腫瘤轉(zhuǎn)移以及牙周疾病，該方法包括向需要治療的哺乳動物給藥有效劑量的權(quán)利要求1的化合物或鹽。
28.下式的化合物
其中R2是烷基、芳基或雜芳基；且X是式-(CH2)m-Y-(CH2)n的基團，其中Y是O、S或單鍵，m是0-4的整數(shù)，n是0-4的整數(shù)；并且m+n是0-4的整數(shù)；或者R2和X同為低級鏈烯基。
29.一種制備下式化合物的方法
其中R2是芳基或雜芳基，所述的方法包括在鈀/碳催化劑存在下把下式的化合物氫化
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述的下式的化合物
是通過在堿和鈀催化劑存在下把N-(2R-(叔丁氧羰基)甲基-4-戊烯?；?-4S-苯基甲基-2-噁唑烷酮和R2-鹵化物接觸來制備的。
31.一種用于制備下式的化合物的方法
其中R2是芳基或雜芳基，所述方法包括把下式的化合物
與六甲基二硅疊氮化酸鈉和溴乙酸叔丁酯接觸。
32.下式的化合物
其中R2是芳基或雜芳基。
33.一種制備下式的化合物的方法
其中R2是芳基或雜芳基，所述方法包括(a)下式的化合物，
其中R2是氫、芳基或雜芳基；在吡啶中把該化合物和過量的甲磺酰氯接觸，接著在堿性條件下回流加熱；和(b)當(dāng)步驟(a)中的R2是氫時，在堿和鈀催化劑存在下把步驟(a)的產(chǎn)物和芳基鹵或雜芳鹵接觸。
34.一種制備式(I)的化合物的方法，
其中R1是巰基、乙酰硫代、羧基、芐氧基氨基甲酰基、羥基氨基甲?；-羥基甲?；被⑼檠豸驶?、芳烷氧基羰基、芐氧基氨基甲?；蛳率降牧虼谆戊⒒鶊F
其中R6是芳基或雜芳基；R2是烷基、芳基或雜芳基；R3是烷基、環(huán)烷基、芳烷基或雜芳烷基；X是式-(CH2)m-Y-(CH2)n的基團，其中Y是O、S或單鍵，m是0-4的整數(shù)，n是0-4的整數(shù)，并且m+n是0-4的整數(shù)；R7是芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基；且p是0-4的整數(shù)；所述方法包括(A)在堿和酰胺偶合劑存在下，把式(D)的化合物
和式(F)的化合物接觸，生成相應(yīng)的式(I)的化合物；
其中R1是烷氧羰基、芳烷氧羰基、芳基-或雜芳基-硫代甲基亞膦基或乙酰硫代；或者(B)把相應(yīng)的化合物催化氫化，該化合物中X和R2同為任選的芳基或雜芳基取代的鏈烯基；或者(C)在弱酸性條件下，處理R1是烷氧羰基或芳烷氧羰基的式(I)的化合物，生成相應(yīng)的R1是羧基的化合物；或者(D)把R1是羧基的式(I)化合物和鄰-芐基胲接觸，生成相應(yīng)的R1是芐氧基氨基甲?；氖?I)化合物；或者(E)把R1是芐氧基氨基甲?；氖?I)的化合物催化氫化，生成相應(yīng)的R1是羥基氨基甲酰基的式(I)的化合物；或者(F)把R1是羧基的式(I)的化合物和羥基胺接觸，生成相應(yīng)的R1是羥基氨基甲?；幕衔?；或者(G)把其中BnO是芐氧基的下式的化合物催化氫化，
生成相應(yīng)的R1是N-羥基甲?；被氖?I)的化合物；或者(H)在質(zhì)子惰性溶劑中，把R1是乙酰硫代的式(I)的化合物用氫氧化銨處理，生成相應(yīng)的R1是巰基的化合物。
全文摘要
式(Ⅰ)的化合物和其可藥用的鹽抑制基質(zhì)金屬蛋白酶,如間質(zhì)溶素、明膠酶、基質(zhì)溶素和膠原酶,其可用來治療患病的哺乳動物,這些疾病是通過抑制這類基質(zhì)金屬蛋白酶而減輕的。
文檔編號C07F9/36GK1173170SQ95197409
公開日1998年2月11日 申請日期1995年11月21日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月22日
發(fā)明者阿林多·L·卡斯特爾哈諾, 斯蒂文·L·本德, 朱迪思·G·迪爾, 斯蒂芬·霍恩, 陸圣炎, 袁征宇 申請人:辛太克斯(美國)公司, 阿戈龍藥品公司