一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置制造方法
【專利摘要】本實用新型提供了一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置，該裝置包括：離子交換柱、超濾器、脫鹽柱和干燥器；其中，在從上游至下游的方向上，所述離子交換柱與所述超濾器之間連接有帶閥門的液體管路，所述離子交換柱與所述脫鹽柱之間連接有帶閥門的液體管路，所述超濾器與所述干燥器之間連接有液體管路，所述脫鹽柱與所述干燥器之間連接有液體管路。本實用新型能夠高收率地更全地獲得大麗輪枝菌分泌蛋白。
【專利說明】 一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及農(nóng)業(yè)生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地，涉及一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]大麗輪枝菌(Verticillium dahlia),屬于半知菌亞門輪枝菌屬真菌。大麗輪枝菌的寄主范圍極廣，可為害38科660種植物，其中農(nóng)作物184種，雜草153種。在中國，大麗輪枝菌的寄主植物至少涉及20科80種，例如向日葵、爺子、辣子、番茄、煙草、馬鈴薯、甜瓜、西瓜、黃瓜、花生、菜豆、綠豆、大豆、棉花、芝麻、甜菜等大田作物。其中，大麗輪枝菌能夠引發(fā)棉花的黃萎病，因此研究大麗輪枝菌的生物學(xué)特征具有重大意義。
[0003]在大麗輪枝菌的研究過程中，需要制備大麗輪枝菌分泌蛋白的全蛋白，而大麗輪枝菌的分泌蛋白在其培養(yǎng)液中的含量較低，且粘性較大，現(xiàn)有的制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置都各有優(yōu)缺，不能夠?qū)崿F(xiàn)分泌蛋白的全息化提取。
實用新型內(nèi)容
[0004]針對上述存在的問題和解決方法的不足，本實用新型將研發(fā)一種新的制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置，其適合用于制備大麗輪枝菌分泌蛋白的全蛋白，以實現(xiàn)高收率地更全地獲得大麗輪枝菌分泌蛋白的目的。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本實用新型提供了一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置，該裝置包括:離子交換柱、超濾器、脫鹽柱和干燥器；其中，在從上游至下游的方向上，所述離子交換柱與所述超濾器之間連接有帶閥門的液體管路，所述離子交換柱與所述脫鹽柱之間連接有帶閥門的液體管路，所述超濾器與所述干燥器之間連接有液體管路，所述脫鹽柱與所述干燥器之間連接有液體管路。
[0006]優(yōu)選地，所述離子交換柱包括依次連接的陰離子交換柱和陽離子交換柱。
[0007]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少一個液體管路。
[0008]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個液體管路。
[0009]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個帶閥門的液體管路。
[0010]優(yōu)選地，所述閥門為切斷閥。
[0011]優(yōu)選地，連接所述超濾器與所述干燥器的液體管路連接在超濾器的截留側(cè)。
[0012]優(yōu)選地，所述干燥器為冷凍干燥器。
[0013]通過上述技術(shù)方案，本實用新型能夠高收率地更全地獲得大麗輪枝菌分泌蛋白。
[0014]本實用新型的其他特征和優(yōu)點將在隨后的【具體實施方式】部分予以詳細(xì)說明。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1為本實用新型特別優(yōu)選的一種實施方式的裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
[0016]附圖標(biāo)記說明[0017]I陰離子交換柱2陽離子交換柱
[0018]3超濾器4脫鹽柱
[0019]5干燥器11帶閥門的液體管路
[0020]12帶閥門的液體管路13帶閥門的液體管路
[0021]31帶閥門的液體管路41帶閥門的液體管路
【具體實施方式】
[0022]以下對本實用新型的【具體實施方式】進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的【具體實施方式】僅用于說明和解釋本實用新型，并不用于限制本實用新型。
[0023]本實用新型提供了一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置，該裝置包括:離子交換柱、超濾器、脫鹽柱和干燥器；其中，在從上游至下游的方向上，所述離子交換柱與所述超濾器之間連接有帶閥門的液體管路，所述離子交換柱與所述脫鹽柱之間連接有帶閥門的液體管路，所述超濾器與所述干燥器之間連接有液體管路，所述脫鹽柱與所述干燥器之間連接有液體管路。
[0024]優(yōu)選地，所述離子交換柱包括依次連接的陰離子交換柱和陽離子交換柱。其中，所述離子交換柱可以為蛋白純化領(lǐng)域常規(guī)使用的離子交換柱，例如購自GE公司的Hitrap TMCapto SP/Q離子交換柱。
[0025]其中，所述超濾器可以為蛋白純化領(lǐng)域常規(guī)使用的超濾器，例如購自Millipore公司的Cogent μ Scale超濾器。
[0026]其中，所述脫鹽柱可以為蛋白純化領(lǐng)域常規(guī)使用的脫鹽柱，例如購自？ GE公司的Sephadex脫鹽柱。
[0027]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少一個液體管路。離子交換柱入口上的液體管路用于通入含有大麗輪枝菌分泌蛋白的樣品(例如大麗輪枝菌培養(yǎng)液)、離子交換洗滌液(例如水)和洗脫液(例如高鹽溶液)中的至少一種。
[0028]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個液體管路；它們分別用于通入含有大麗輪枝菌分泌蛋白的樣品(例如大麗輪枝菌培養(yǎng)液)、離子交換洗滌液(例如水)和洗脫液(例如高鹽溶液)。
[0029]優(yōu)選地，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個帶閥門的液體管路；它們分別用于通入含有大麗輪枝菌分泌蛋白的樣品(例如大麗輪枝菌培養(yǎng)液)、離子交換洗滌液(例如水)和洗脫液(例如高鹽溶液)。
[0030]優(yōu)選地，所述閥門為切斷閥。
[0031]優(yōu)選地，連接所述超濾器與所述干燥器的液體管路連接在超濾器的截留側(cè)。
[0032]其中，所述干燥器可以為蛋白純化領(lǐng)域常規(guī)使用的干燥器，優(yōu)選地，所述干燥器為冷凍干燥器，如購自德國Christ公司的冷凍干燥器。
[0033]根據(jù)本實用新型的一種特別優(yōu)選的實施方式:如圖1所示，在從上游至下游的方向上，陰離子交換柱I的入口上連接有三個帶閥門的液體管路，分別為帶閥門的液體管路
11、帶閥門的液體管路12和帶閥門的液體管路13，分別用于通入含有大麗輪枝菌分泌蛋白的樣品(例如大麗輪枝菌培養(yǎng)液)、離子交換洗滌液(例如水)和洗脫液(例如高鹽溶液);陰離子交換柱I的出口與陽離子交換柱2的入口之間具有液體管路；陽離子交換柱2的出口與超濾器3之間連接有帶閥門的液體管路31，陽離子交換柱2的出口與所述脫鹽柱4之間連接有帶閥門的液體管路41，所述超濾器3與所述干燥器5之間連接有液體管路，所述脫鹽柱4與所述干燥器5之間連接有液體管路。
[0034]在使用時，先將帶閥門的液體管路12、帶閥門的液體管路13和帶閥門的液體管路41關(guān)閉，將帶閥門的液體管路11和帶閥門的液體管路31開放；通過帶閥門的液體管路11通入含有大麗輪枝菌分泌蛋白的樣品(例如大麗輪枝菌培養(yǎng)液)，該樣品依次進(jìn)入陰離子交換柱I和陽離子交換柱2，樣品中的蛋白中能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白分別掛載在陰離子交換柱I和陽離子交換柱2上，樣品中的蛋白中不能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白通過帶閥門的液體管路31進(jìn)入超濾器3中，超濾器3富集樣品中的蛋白中不能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白，并通入干燥器5中；然后關(guān)閉帶閥門的液體管路11，打開帶閥門的液體管路12，在帶閥門的液體管路12中通入離子交換洗滌液(例如水)，將殘留的不能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白洗滌出來，也進(jìn)入干燥器5中；然后關(guān)閉帶閥門的液體管路12和帶閥門的液體管路31，打開帶閥門的液體管路13和帶閥門的液體管路41，在帶閥門的液體管路13中通入洗脫液(例如高鹽溶液)，將能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白從離子交換柱上洗脫下來，通過帶閥門的液體管路41進(jìn)入脫鹽柱4脫去鹽分，而后進(jìn)入干燥器5 ;干燥器5中混合了超濾器3富集得到的蛋白(即不能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白)和脫鹽柱4脫鹽后的蛋白(即能與離子交換柱結(jié)合的那部分蛋白)，進(jìn)行干燥后即得到了大麗輪枝菌的分泌蛋白。
[0035]以上詳細(xì)描述了本實用新型的優(yōu)選實施方式，但是，本實用新型并不限于上述實施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本實用新型的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對本實用新型的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型，這些簡單變型均屬于本實用新型的保護(hù)范圍。
[0036]另外需要說明的是，在上述【具體實施方式】中所描述的各個具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本實用新型對各種可能的組合方式不再另行說明。
[0037]此外，本實用新型的各種不同的實施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本實用新型的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本實用新型所公開的內(nèi)容。
【權(quán)利要求】
1.一種制備大麗輪枝菌分泌蛋白的裝置，其特征在于，該裝置包括:離子交換柱、超濾器、脫鹽柱和干燥器；其中，在從上游至下游的方向上，所述離子交換柱與所述超濾器之間連接有帶閥門的液體管路，所述離子交換柱與所述脫鹽柱之間連接有帶閥門的液體管路，所述超濾器與所述干燥器之間連接有液體管路，所述脫鹽柱與所述干燥器之間連接有液體管路。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述離子交換柱包括依次連接的陰離子交換柱和陽離子交換柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的裝置，其特征在于，所述離子交換柱的入口上連接有至少一個液體管路。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的裝置，其特征在于，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個液體管路。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的裝置，其特征在于，所述離子交換柱的入口上連接有至少三個帶閥門的液體管路。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述閥門為切斷閥。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，連接所述超濾器與所述干燥器的液體管路連接在超濾器的截留側(cè)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述干燥器為冷凍干燥器。
【文檔編號】C07K1/34GK203558995SQ201320737389
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年11月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月20日
【發(fā)明者】戴小楓, 肖紅利, 陳捷胤, 李蕾, 桂月晶, 包郁明 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所