一種檢測黑白輪枝菌的實(shí)時(shí)熒光pcr檢測試劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測黑白輪枝菌的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑，以待檢測樣品DNA為模板，用檢測黑白輪枝菌的引物和探針進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR，檢測擴(kuò)增產(chǎn)物熒光信號(hào)，檢測簡單、快速、靈敏、準(zhǔn)確、特異，與模板互補(bǔ)配對的熒光探針提高了特異性，有效地避免假陽性和假陰性，檢測時(shí)熒光信號(hào)自動(dòng)收集，避免普通PCR反應(yīng)后電泳分析中人為因素干擾，檢測過程完全閉管，不需PCR后處理，消除了PCR產(chǎn)物的污染。
【專利說明】
—種檢測黑白輪枝菌的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及黑白輪枝菌的檢測，具體涉及一種檢測黑白輪枝菌的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑。

【背景技術(shù)】
[0002]植物病原性輪枝菌主要包括:黑白輪枝菌Reinke andBerthold (1879)、大_輪枝菌 K dahliae Klebahn (1913)、三體輪枝菌 K tricorpusIsaac (1953)、變黑輪枝菌 K nigrescens Pethybridge (1919)、云狀輪枝菌 K nubHumPethybridge (1919) >V.theobromae (Turconi) Mason and Hughes (1951)等。它們多能引起植物維管束病害，造成植物葉片黃化、落葉等癥狀，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致植物死亡。這些輪枝菌可產(chǎn)生多種休眠形態(tài)，如微菌核、厚垣孢子或休眠菌絲等，長時(shí)間在土壤中存活。由于其嚴(yán)重危害性，其中的一些種類，如大麗輪枝菌和黑白輪枝菌已經(jīng)被列為我國重要植物檢疫對象。由黑白輪枝菌所引起的苜蓿黃萎病可對苜蓿生產(chǎn)造成毀滅性危害，隨進(jìn)口種苗進(jìn)入我國并在我國的種植區(qū)定殖可能性極大。黑白輪枝菌檢測有傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法和PCR方法(如
【發(fā)明者】段維軍, 郭立新, 陳先鋒 申請人:寧波檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院