一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，包括以下步驟：（1）粉碎干燥鎖陽待用；（2）加水，提取后過濾得到濾液；（3）將所得的濾液上D101大孔吸附樹脂交換樹脂，用上柱液洗脫，收集洗脫液并濃縮；（4）將濃縮洗脫液反復(fù)萃取，然后濃縮上層萃取液，得到根皮苷粗品；（5）用乙酸乙酯溶解根皮苷粗品，加入弱酸性活性炭，趁熱過濾，冷卻結(jié)晶得到根皮苷粗結(jié)晶；（6）往根皮苷粗結(jié)晶中加入乙酸乙酯，濃縮冷卻結(jié)晶得到根皮苷產(chǎn)品。本發(fā)明在整個分離過程中對環(huán)境條件要求不高，分離時間較短，純度很高。分離材料易得便宜，分離操作過程簡單，易控制，采用乙酸乙酯結(jié)晶和重結(jié)晶，純化效率高，使用試劑無毒。
【專利說明】一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明具體為一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]根皮苷屬于植物多酚類化合物。國外對于根皮苷相關(guān)生理功能的研究較多。根皮苷能降火，其中蜂窩蛋白激酶對細胞無序增生有抑制作用，是一種抗誘變因子，可用于皮肝癌及其他腫瘤的輔助治療。根皮苷含量相關(guān)性研究顯示，根皮苷可有效減緩結(jié)腸癌細胞核、肝臟腫瘤細胞的增值生長；有極強的抗氧性，對油脂的抗氧化濃度在10-30ppm之間；根皮苷具有顯著降壓、降脂作用，被人譽為是“天然降壓藥”，對于高血壓病人或高脂血癥患者尤為適宜；根皮苷外用能阻止糖類成分進入表皮細胞，從而抑制皮腺的過度分泌，治療分泌旺盛型粉刺；根皮苷能抑制黑色素細胞活性，對各種皮膚色斑有淡化作用等。從未成熟的青蘋果中提取的根皮苷可有效抑制組胺的游離和透明質(zhì)酸的活性，起到抗過敏的作用，此外，抗齲齒、降低膽固醇以及防治血管疾病的功效均有報道。根皮苷由于其獨特的生理活性和保健功效近幾年來在歐美的食品工業(yè)、化妝品工業(yè)及醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域都有應(yīng)用，已成為一種暢銷的保健品。到目前為止，已在多種植物中發(fā)現(xiàn)了根皮苷，如蘋果樹皮的根、皮、葉，海棠、荔枝果皮、櫻桃等薔薇科的植物等。目前根皮苷的來源主要是從蘋果根皮中提取，含量極為有限。蘋果根皮中的根皮苷的含量被認為是最高的，達2%-4%。以蘋果等薔薇科植物為原材料進行提取根皮苷，現(xiàn)在面臨分離困難的問題。鎖陽是鎖陽科植物鎖陽的干燥肉質(zhì)莖，一種不含葉綠素的全寄生植物，主要分布于中國西北地區(qū)，如青海、甘肅、新疆、內(nèi)蒙古、寧夏等地區(qū)的半荒漠或荒漠地帶.傳統(tǒng)中藥中，鎖陽性味甘溫有力，有補腎陽、益精血、補血、潤腸通便之功效，用于腰膝痿軟、陽痿滑精、腸燥便秘；現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明:鎖陽提取物對人免疫缺陷病毒、抗丙型肝炎病毒、人成神經(jīng)細胞瘤有抑制作用，還可用于治療婦女絕經(jīng)期癥狀等.目前，已從鎖陽中分離出有機酸、酚類、留體、脂肪酸、黃酮、三萜、氨基酸、蛋白質(zhì)及多種維生素，多酚和黃酮等是鎖陽的主要活性成分，而且有利于綜合開發(fā)鎖陽的副產(chǎn)品，更有利于替代蘋果根皮。因而，對鎖陽進行深加工意義非凡。探索從鎖陽中提取根皮苷，其意義相當遠大，不但可以解決根皮苷生產(chǎn)原料問題，還可以增加鎖陽的綜合利用開發(fā)，服務(wù)該中藥的廣泛栽培的地方經(jīng)濟。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于提供一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，以解決上述【背景技術(shù)】中提出的問題。
[0005]為了達到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn):
一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，包括以下步驟:
(1)粉碎干燥鎖陽50份-100份，待用；(2)加水，提取2次，第一次溶劑用量按其體積配比為原料的8倍，加熱至沸騰，提取時間為3小時；第二次溶劑用量按其體積配比為原料的6倍，加熱至沸騰，提取時間為2小時；合并兩次提取液，過濾得到濾液；
(3)將所得的濾液上D101大孔吸附樹脂交換樹脂，上柱吸附30min后，用上柱液20%乙醇洗脫，流出液體收集重新上柱使用，再用上柱液70%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至原體積的1/15 ；
(4)將濃縮洗脫液用石油醚反復(fù)萃取，待上清液無色為止；然后濃縮上層石油醚萃取液，得到根皮苷粗品；
(5)用乙酸乙酯溶解根皮苷粗品，加熱至40°C攪拌待充分溶解后，加入弱酸性活性炭，間歇攪拌脫色3h，趁熱過濾，濾液濃縮至原體積的1/15，冷卻結(jié)晶12h，過濾得到根皮苷粗
結(jié)晶;
(6)往根皮苷粗結(jié)晶中加入乙酸乙酯，加熱至40°C攪拌充分溶解，濃縮至原體積的1/15，放置冷卻結(jié)晶12h，待析出白色針狀結(jié)晶，過濾得到結(jié)晶，經(jīng)真空干燥后即得到純度大于99%的根皮苷產(chǎn)品。
[0006]進一步，步驟(2)中所述的水必須是純化水。
[0007]進一步，步驟(2)中所述的過濾過程具體為一種陶瓷膜過濾。
[0008]進一步，步驟(4)中所述的石油醚溶劑沸點為30_60°C,使用體積為待萃取液體體積的35倍。
[0009]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯和弱酸性活性碳，兩者體積比重量之比為40-50:1。
[0010]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯必須是乙酸乙酯重結(jié)晶。
[0011]有益效果:
本發(fā)明在整個分離過程中對環(huán)境條件要求不高，分離時間較短，純度很高。分離材料易得便宜，分離操作過程簡單，易控制，采用乙酸乙酯結(jié)晶和重結(jié)晶，純化效率高，使用試劑無毒。
【具體實施方式】
[0012]為了使本發(fā)明的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、工作流程、使用方法達成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合本發(fā)明的具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。
[0013]實施案例一:
一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，包括以下步驟:
(1)粉碎干燥鎖陽50份，待用；
(2)加水，提取2次，第一次加入溶劑400份，加熱至沸騰，提取時間為3小時；第二次加入溶劑300份，加熱至沸騰，提取時間為2小時；合并兩次提取液，過濾得到濾液；
(3)將所得的濾液上100份的D101大孔吸附樹脂交換樹脂，上柱吸附30min后，用100份上柱液20%乙醇洗脫，流出液體收集重新上柱使用，再用200份上柱液70%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮得到15份；
(4)將濃縮洗脫液用石油醚反復(fù)萃取，待上清液無色為止；然后濃縮200份的上層石油醚萃取液，得到根皮苷粗品6份；(5)用240份的乙酸乙酯溶解一份根皮苷粗品，加熱至40°C攪拌待充分溶解后，加入
2.4份弱酸性活性炭，間歇攪拌脫色3h，趁熱過濾，濾液濃縮至20份，冷卻結(jié)晶12h，過濾得到根皮苷粗結(jié)晶4份；
(6)往根皮苷粗結(jié)晶中加入120份乙酸乙酯，加熱至40°C攪拌充分溶解，濃縮至10份，放置冷卻結(jié)晶12h，待析出白色針狀結(jié)晶，過濾得到結(jié)晶2.5份，經(jīng)真空干燥后即得到根皮苷產(chǎn)品。[0014]進一步，步驟(2)中所述的水必須是純化水。
[0015]進一步，步驟(2)中所述的過濾過程具體為一種陶瓷膜過濾。
[0016]進一步，步驟(4)中所述的石油醚溶劑沸點為30_60°C，使用體積為待萃取液體體積的35倍。
[0017]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯和弱酸性活性碳，兩者體積比重量之比為40-50:1。
[0018]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯必須是乙酸乙酯重結(jié)晶。
[0019]實施案例二:
一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，包括以下步驟:
(1)粉碎干燥鎖陽80份，待用；
(2)加水，提取2次，第一次加入溶劑640份，加熱至沸騰，提取時間為3小時；第二次加入溶劑420份，加熱至沸騰，提取時間為2小時；合并兩次提取液，過濾得到濾液；
(3)將所得的濾液上150份的D101大孔吸附樹脂交換樹脂，上柱吸附30min后，用160份上柱液20%乙醇洗脫，流出液體收集重新上柱使用，再用320份上柱液70%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮得到25份；
(4)將濃縮洗脫液用石油醚反復(fù)萃取，待上清液無色為止；然后濃縮320份的上層石油醚萃取液，得到根皮苷粗品10份；
(5)用400份的乙酸乙酯溶解一份根皮苷粗品，加熱至40°C攪拌待充分溶解后，加入4份弱酸性活性炭，間歇攪拌脫色3h，趁熱過濾，濾液濃縮至32份，冷卻結(jié)晶12h，過濾得到根皮苷粗結(jié)晶7份；
(6)往根皮苷粗結(jié)晶中加入200份乙酸乙酯，加熱至40°C攪拌充分溶解，濃縮至16份，放置冷卻結(jié)晶12h，待析出白色針狀結(jié)晶，過濾得到結(jié)晶3.9份，經(jīng)真空干燥后即得到根皮
苷產(chǎn)品。
[0020]進一步，步驟(2)中所述的水必須是純化水。
[0021]進一步，步驟(2)中所述的過濾過程具體為一種陶瓷膜過濾。
[0022]進一步，步驟(4)中所述的石油醚溶劑沸點為30_60°C,使用體積為待萃取液體體積的35倍。
[0023]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯和弱酸性活性碳，兩者體積比重量之比為40-50:1。
[0024]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯必須是乙酸乙酯重結(jié)晶。
[0025]實施案例三:
一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，包括以下步驟:
(1)粉碎干燥鎖陽100份，待用；(2)加水，提取2次，第一次加入溶劑800份，加熱至沸騰，提取時間為3小時；第二次加入溶劑600份，加熱至沸騰，提取時間為2小時；合并兩次提取液，過濾得到濾液；
(3)將所得的濾液上200份的D101大孔吸附樹脂交換樹脂，上柱吸附30min后，用200份上柱液20%乙醇洗脫，流出液體收集重新上柱使用，再用400份上柱液70%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮得到35份；
(4)將濃縮洗脫液用石油醚反復(fù)萃取，待上清液無色為止；然后濃縮450份的上層石油醚萃取液，得到根皮苷粗品14份；
(5)用560份的乙酸乙酯溶解一份根皮苷粗品，加熱至40°C攪拌待充分溶解后，加入
4.4份弱酸性活性炭，間歇攪拌脫色3h，趁熱過濾，濾液濃縮至45份，冷卻結(jié)晶12h，過濾得到根皮苷粗結(jié)晶9份；
(6)往根皮苷粗結(jié)晶中加入270份乙酸乙酯，加熱至40度攪拌充分溶解，濃縮至23份，放置冷卻結(jié)晶12h，待析出白色針狀結(jié)晶，過濾得到結(jié)晶4.9份，經(jīng)真空干燥后即得到根皮苷產(chǎn)品。
[0026]進一步，步驟(2)中所述的水必須是純化水。
[0027]進一步，步驟(2)中所述的過濾過程具體為一種陶瓷膜過濾。
[0028]進一步，步驟(4)中所述的石油醚溶劑沸點為30_60°C,使用體積為待萃取液體體積的35倍。
[0029]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯和弱酸性活性碳，兩者體積比重量之比為40-50:1。
[0030]進一步，步驟(5)中所述的乙酸乙酯必須是乙酸乙酯重結(jié)晶。
[0031]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在 不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)，本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
【權(quán)利要求】
1.一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，其特征在于，包括以下步驟:(1)粉碎干燥鎖陽50份-100份，待用；(2)加水，提取2次，第一次溶劑用量按其體積配比為原料的8倍，加熱至沸騰，提取時間為3小時；第二次溶劑用量按其體積配比為原料的6倍，加熱至沸騰，提取時間為2小時；合并兩次提取液，過濾得到濾液；(3)將所得的濾液上D101大孔吸附樹脂交換樹脂，上柱吸附30min后，用上柱液20%乙醇洗脫，流出液體收集重新上柱使用，再用上柱液70%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至原體積的1/15 ；(4)將濃縮洗脫液用石油醚反復(fù)萃取，待上清液無色為止；然后濃縮上層石油醚萃取液，得到根皮苷粗品；(5)用乙酸乙酯溶解根皮苷粗品，加熱至40度攪拌待充分溶解后，加入弱酸性活性炭，間歇攪拌脫色3h，趁熱過濾，濾液濃縮至原體積的1/15，冷卻結(jié)晶12h，過濾得到根皮苷粗結(jié)晶;(6)往根皮苷粗結(jié)晶中加入乙酸乙酯，加熱至40度攪拌充分溶解，濃縮至原體積的1/15，放置冷卻結(jié)晶12h，待析出白色針狀結(jié)晶，過濾得到結(jié)晶，經(jīng)真空干燥后即得到根皮苷產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，其特征在于，步驟(2)中所述的水是純化水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，其特征在于，步驟(2)中所述的過濾過程具體為一種陶瓷膜過濾。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，其特征在于，步驟(4)中所述的石油醚溶劑沸點為30-60度，使用體積為待萃取液體體積的35倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鎖陽中提取分離高純度根皮苷的方法，其特征在于，步驟(5)中所述的乙酸乙酯是乙酸乙酯重結(jié)晶。
【文檔編號】C07H1/08GK103626811SQ201310503701
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月24日
【發(fā)明者】彭煒, 石永進, 吳紅麗 申請人:恩施市錦華生物工程有限責任公司