Prlr特異性抗體及其用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了PRLR特異性抗體和包含這種抗體的藥物組合物、包含藥物組合物的試劑盒以及預(yù)防和治療癌癥的方法。
【專利說明】PRLR特異性抗體及其用途
[0001] 本申請是2007. 08. 17提交的CN 200780030284. 7,題為"PRLR特異性抗體及其用 途"的分案申請。
[0002] 相關(guān)申請的交叉參考
[0003] 本申請要求2007年6月26日提交的美國臨時專利申請?zhí)?0/946, 360和2006年 8月18日提交的美國臨時專利申請?zhí)?0/838, 648的優(yōu)先權(quán)。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0004] 本發(fā)明涉及通過給予PRLR特異性抗體來預(yù)防和治療癌癥的方法。
[0005] 發(fā)明背景
[0006] 在美國，癌癥是第二大致死原因。雖然"癌癥"用于描述多種不同類型的癌癥，例 如，乳腺癌、前列腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌，但是在表型水平和基因水平上每一種類型的 癌癥都是不同的。當由于突變而使一個或多個基因的表達變得無法調(diào)控時癌癥的生長就無 法被調(diào)節(jié)，細胞的生長就會失控。
[0007] 基因通常分為兩類，癌基因和腫瘤抑制基因。癌基因的正常功能是促進細胞生長， 但是只是在特殊條件下。當癌基因發(fā)生突變而無法被調(diào)控時，它在各種條件下都能促進細 胞生長。但是，研究發(fā)現(xiàn)，對于癌癥來說，必需使腫瘤抑制基因發(fā)生突變才能真正成功地治 療癌癥。腫瘤抑制基因的正常功能是抑制細胞生長。腫瘤抑制基因的例子包括p53、pl6、 p21和APC，所有這些基因在正常發(fā)揮作用時都可抑制細胞發(fā)生分裂和不可控的生長。當腫 瘤抑制基因發(fā)生突變或丟失時，其抑制細胞生長的功能也丟失，使細胞發(fā)生不可控的生長。
[0008] 促乳素受體（PRLR)是一種單鏈跨膜1類細胞因子受體，與細胞因子超家族成員的 受體同源，如IL2、IL3、IL4、IL6、IL7、促紅素和GM-CSF的受體。PRLR具有多種生物學(xué)功 能，其中包括細胞生長、分化、發(fā)育、泌乳和生殖。它沒有內(nèi)源性的酪氨酸激酶活性；配基結(jié) 合可導(dǎo)致受體二聚化、Jak2的交叉磷酸化和下游信號產(chǎn)生。人促乳素受體cDNA最初是從 肝癌和乳腺癌文庫中分離出來的（Boutin, J.-M.等，Molec.Endocr. 3:1455-1461,1989)。 根據(jù)核苷酸序列預(yù)測，其成熟蛋白包含598個氨基酸，其胞漿區(qū)比大鼠肝PRL受體長很多。 促乳素受體基因與生長激素受體基因位于同一染色體區(qū)，即5; 13-pl2(Arden，K. C.等， Cytogenet.Cell Gene53:161_165，1990;Arden，K.C·等，（摘要）AM.J.Hum.Genet.45(增 刊）：僅A129,1989)。生長激素也可以結(jié)合并活化促乳素受體。
[0009] 人PRLR基因的基因組結(jié)構(gòu)已經(jīng)清楚（Hu，Z. -Z.等，J. Clin. Endocr. Metab. 84:1153-1156,1999)。PRLR基因的5-引導(dǎo)-非翻譯區(qū)包含兩種第一外顯子：E13， 大鼠和小鼠 E13的人對應(yīng)物，和一種新的人型第一外顯子，被稱為E1N。5-引導(dǎo)-非翻譯區(qū) 還包含一個通用的非編碼外顯子2和外顯子3的一部分，后者包含翻譯起始密碼子。E13 和E1N外顯子在800個堿基對以內(nèi)。這兩個外顯子在人乳腺組織、乳腺癌細胞、生殖腺和肝 臟中有表達?？傊?，包含E13的轉(zhuǎn)錄子表達于大多數(shù)組織中。PRLR基因產(chǎn)物由外顯子3-10 編碼，其中外顯子10編碼胞內(nèi)區(qū)的大部分。E13和E1N外顯子分別從啟動子PIII和PN二 者之一開始轉(zhuǎn)錄。PIII啟動子包含Spl和C/EBP元件，這些元件與嚙齒類動物啟動子中的 元件一致，與大鼠和小鼠的該基因的-480/-106區(qū)有81%的同源性。PN啟動子包含推測的 ETS家族蛋白的結(jié)合位點和核受體的半位點。
[0010] PRLR有多種不同的亞型，這些亞型的胞漿區(qū)長度不同。試驗證明，人腹部皮下脂 肪組織和乳腺脂肪組織表達4種PRLR mRNA亞型（L、I、Sla和Sib) (Ling，C.等，1(：1111· Endocr. Metab. 88:1804-1808,2003)。另外，他們利用免疫印跡技術(shù)在人腹部皮下脂肪組 織和乳腺脂肪組織中檢測到了 L-PRLR和Ι-PRLR蛋白的表達。與對照相比，PRL可降低人 脂肪組織中脂蛋白脂肪酶的活性。Ling等人認為這些結(jié)果證明PRL通過功能性的PRLR 可直接降低人脂肪組織內(nèi)LPL的活性，這些結(jié)果說明在泌乳期間LPL可通過這種方式調(diào) 節(jié)。這些PRLR亞型在大鼠體內(nèi)的功能已被闡釋清楚（Perrot_Applanat，M.等，Molec. Endocr. 11:1020-1032,1997)。就像已知的長型受體（591個氨基酸）一樣，缺少胞漿區(qū) 198個氨基酸的Nb2型也能傳遞泌乳信號。但是缺少胞漿區(qū)291個氨基酸的短型受體是 無活性的。將長型和短型共轉(zhuǎn)染后檢測短型的功能，結(jié)果表明短型受體可通過形成無活 性異源二聚體的形式發(fā)揮顯性負調(diào)節(jié)抑制劑的作用，導(dǎo)致Janus激酶2的活化被抑制。 Perrot-Applanat等人認為，PRLR的異源二聚體可正性或負性活化PRL的轉(zhuǎn)錄。
[0011] 最近的文獻認為，PRLR在人乳腺癌和前列腺癌組織中是過量表達的（Li等， Cancer Res.，64:4774-4782,2004 ;Gill 等，J Clin Pathol.，54:956-960,2001 ;Touraine 等，J Clin Endocrinol Metab. ,83:667-674,1998)。Li 等人報道，在 54% 的前列腺癌標 本中Stat5的活化和PRLR的表達具有高組織學(xué)級別的相關(guān)性（Li等，同上）。其他文獻 報道顯示，在克隆形成分析中原發(fā)乳腺癌標本可對PRL產(chǎn)生反應(yīng)，胞漿PRL濃度與乳腺癌 風(fēng)險相關(guān)（Tworoger 等，Cancer Res. ,64:6814-6819, 2004 ;Tworoger 等，Cancer Res.， 66:2476-2482,2006)。另一個文獻報道顯示PRL轉(zhuǎn)基因小鼠會患惡性乳腺癌或前列腺異 常增生（Wennbo 等，J Clin Invest. ,100:2744-2751，1997 ;Wennbo 等，Endocrinology， 138:4410-4415,1997)〇
[0012] PRLR單克隆抗體可降低小鼠的乳腺癌發(fā)病率（Sissom等， Am. J.Pathol. 133:589-595,1988)。另外，PRL拮抗劑（S179D突變體PRL)可抑制人前列腺 癌細胞系DU-145在體外的增殖以及DU-145誘導(dǎo)腫瘤在體內(nèi)的生長（Xu等，Cancer Res.， 61:6098-6104,2001)〇
[0013] 因此，我們需要研究能在這些癌癥中調(diào)節(jié)PRLR及其功能的組合物和方法。本發(fā)明 涉及這些需求以及其他重要的需求。
[0014] 發(fā)明概述
[0015] PRLR的核苷酸序列展示在SEQ ID N0:1中，氨基酸序列展示在SEQ ID N0:2中。 胞外域（ECD)包含SEQ ID NO: 2的25到234位氨基酸，其中包含兩個主要的區(qū)，S1 (25-122 位氨基酸）和S2 (123-234位氨基酸）。已經(jīng)鑒定出了 PRLR的許多不同亞型：長型（L)、中 型（I)、無活性的可溶性亞型（PRLBP) △ S1和無活性的短型Sla和Sib。每個亞型所包含的 外顯子和核苷酸區(qū)顯示在圖1中。在典型的實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合S1區(qū)和/或 S2區(qū)的抗體。這種能結(jié)合S2區(qū)的抗體可以靶向到所有的活性亞型。本發(fā)明還提供了能特 異性結(jié)合一個亞型而不能結(jié)合另一個亞型（例如，能結(jié)合中型而不能結(jié)合Sla或Sib)的抗 體，或者能特異性結(jié)合活性亞型（長型、中型和ASl)而不能結(jié)合無活性亞型（Sla和Sib) 的抗體。
[0016] 本發(fā)明的材料和方法能滿足上述需求及本領(lǐng)域的其他需求。
[0017] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了能以1(Γ6Μ或更低的平衡解離常數(shù)（K D)與 PRLR胞外域結(jié)合并與下列任一抗體競爭結(jié)合75%以上PRLR的抗體：chXHA. 06. 642、 chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、 he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、 XPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17U XPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207, XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235, XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或XHA. 06. 907。術(shù)語"1(T6M或更低的平衡解離常數(shù)（KD) "是指平衡解離常數(shù)為，例如，10' 1(Γ7Μ、1(Γ8Μ、1(Γ9Μ、10^1、1(Γ ηΜ或1(Γ12Μ (低于1(Γ6Μ的數(shù)值）。在另一實施方式中，抗體 與下列任一抗體所結(jié)合的 PRLR 的表位一樣：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、 he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、 XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158, XPA. 06. 159、XPA. 06. 163、XPA. 06. 167、XPA. 06. 171、XPA. 06. 178、XPA. 06. 181、XPA. 06. 192、 XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217, XPA. 06. 219、XPA. 06. 229、XPA. 06. 233、XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、 XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907。
[0018] 在另一個實施方式中，上述抗體包含下列任一抗體的1、2、3、4、5或6個⑶R : chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、 he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、 XPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167, XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206, XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233, XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、 XHA. 06. 189或XHA. 06. 907。在另一個實施方式中，上述抗體是嵌合抗體、人源化抗體、人基 因工程抗體、人抗體、單鏈抗體或抗體片段。在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的上述抗體 的CDR內(nèi)至少有一個氨基酸被另一抗PRLR抗體的相應(yīng)CDR的相應(yīng)殘基取代。在一個典型 實施方式中，本發(fā)明提供的上述抗體中選自如下一組的抗體的CDR內(nèi)至少有一個氨基酸被 另一抗PRLR抗體的相應(yīng)CDR 的相應(yīng)殘基取代：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、 he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、 XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158, XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192, XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217, XPA. 06. 219、XPA. 06. 229、XPA. 06. 233、XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、 XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907。在另一個典型實施 方式中，本發(fā)明提供的上述抗體中選自如下一組的抗體：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、 he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、 XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、XPA. 06. 147、XPA. 06. 148、 ΧΡΑ. 06. 158,ΧΡΑ. 06. 159,ΧΡΑ. 06. 163,ΧΡΑ. 06. 167,ΧΡΑ. 06. 17UXPA. 06. 178,ΧΡΑ. 06. 18U ΧΡΑ. 06. 192,ΧΡΑ. 06. 202,ΧΡΑ. 06. 203,ΧΡΑ. 06. 206,ΧΡΑ. 06. 207,ΧΡΑ. 06. 210,ΧΡΑ. 06. 212, ΧΡΑ. 06. 217,ΧΡΑ. 06. 219,ΧΡΑ. 06. 229,ΧΡΑ. 06. 233,ΧΡΑ. 06. 235,ΧΡΑ. 06. 239,ΧΡΑ. 06. 145, ΧΗΑ· 06. 567、ΧΗΑ· 06. 642、ΧΗΑ· 06. 983、ΧΗΑ· 06. 275、ΧΗΑ· 06. 189 或 ΧΗΑ· 06. 907 的 CDR 內(nèi)至 少有一個氨基酸被選自如下一組的另一抗體的相應(yīng)⑶R的相應(yīng)殘基取代：chXHA. 06. 642、 chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、 he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、 XPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17U XPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207, XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235, XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或XHA. 06. 907。在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的上述抗體的CDR內(nèi)有一個或兩個氨基 酸被修飾。
[0019] 在本發(fā)明的另一個實施方式中，本發(fā)明所提供的上述抗體在輕鏈或重鏈可變 區(qū)上與抗體 chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、 he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、 XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163, XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203, XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229, XPA. 06. 233、XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、 XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907 有至少 60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、 96、97、98 或 99% 的一致性。
[0020] 在另一實施方式中，上述抗體包含人抗體序列的恒定區(qū)和人抗體序列的一個或多 個重鏈和輕鏈可變框架區(qū)。在本發(fā)明另一個實施方式中，本發(fā)明提供的上述抗體中人抗體 序列是個體人序列、人共有序列、個體人種系序列或人共有種系序列。
[0021] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供的上述抗體中重鏈恒定區(qū)是修飾的或未修飾的 IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、其片段或其組合。在另一實施方式中，本發(fā)明提供的上述抗體中重 鏈恒定區(qū)是修飾的或未修飾的IgGl、IgG2、IgG3或IgG4。在另一實施方式中，本發(fā)明提供 的上述抗體與PRLR的平衡解離常數(shù)為10'10'ΚΓ 8或1(Γ9Μ或更低。在另一實施方式中， 本發(fā)明所提供的上述抗體在CDR內(nèi)有保守取代。在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的上述 抗體包含低和中度風(fēng)險殘基上的保守或非保守改變。在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的 上述抗體中輕鏈恒定區(qū)是修飾的或未修飾的λ輕鏈恒定區(qū)、κ輕鏈恒定區(qū)、其片段或其組 合。
[0022] 在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的上述抗體能夠抑制PRLR的二聚化、抑制PRLR 的胞內(nèi)磷酸化、抑制ΜΑΡΚ磷酸化的誘導(dǎo)、抑制ΑΚΤ磷酸化的誘導(dǎo)和/或抑制PRL與PRLR的 結(jié)合。
[0023] 在其他實施方式中，上述抗體還能抑制VEGF的產(chǎn)生和/或血管發(fā)生。
[0024] 在另一實施方式中，本發(fā)明所提供的上述抗體能抑制癌細胞的增殖。在另一實施 方式中，抗體能抑制乳腺癌、前列腺癌或肺癌細胞的增殖。
[0025] 除了癌癥之外，本發(fā)明的另一實施方式提供了用于預(yù)防和/或治療自身免疫疾病 和炎性疾病或失調(diào)的上述抗體?？贵w特別適用于預(yù)防、緩解或治療包含自身免疫性和/或 炎性組分的疾病。這些疾病包括而不限于自身免疫性疾病和炎性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼 瘡（SLE)、盤狀狼瘡、狼瘡性腎炎、肉狀瘤病、炎性關(guān)節(jié)炎，其中包括而不限于幼年性關(guān)節(jié)炎、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、萊特爾綜合征、強直性脊柱炎和痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，器官或組 織移植排斥、超急性、急性或慢性排斥和/或移植物抗宿主病、多發(fā)性硬化癥、高IgE綜合 征、結(jié)節(jié)性多發(fā)性動脈炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、腸炎、克羅恩病、乳糜瀉（谷蛋白敏感性腸 病）、自身免疫性肝炎、惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、牛皮癬、硬皮病、重癥肌無力、自 身免疫性血小板減少性紫癜、自身免疫性甲狀腺炎、格雷夫斯病、橋本甲狀腺炎、免疫復(fù)合 物病、慢性疲勞免疫異常綜合征（CFIDS)、多肌炎和皮肌炎、冷球蛋白血癥、血栓溶解、心肌 病、尋常天庖瘡、肺間質(zhì)纖維化、I型和II型糖尿病、1、2、3和4型遲發(fā)型超敏反應(yīng)、變態(tài)反 應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)性紊亂、對治療蛋白的不需要的/意外的免疫反應(yīng)、哮喘、丘-施二氏綜合征 (變應(yīng)性肉芽腫）、特應(yīng)性皮炎、變應(yīng)性和刺激性接觸性皮炎、風(fēng)疹、IgE-介導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)、 動脈粥樣硬化、血管炎、原發(fā)性炎性肌病、溶血性肌病、阿爾茨海默病、慢性炎性脫髓鞘性多 神經(jīng)病等。
[0026] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供的上述抗體與另一診斷或治療劑連接。
[0027] 在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了篩選抗PRLR蛋白胞外域的抗體的方法，其中 的抗體可用于治療癌癥，該方法包括步驟：使包含PRLR的ECD的多肽與包含下列抗體的至 少 1、2、3、4、5 或 6 個 CDR 的候選抗體接觸：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、 he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、ΧΡΑ. 06. 128、 XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158, XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192, XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217, XPA. 06. 219、XPA. 06. 229、XPA. 06. 233、XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、 XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 和 XHA. 06. 907 ;檢測候選抗體與多肽的 結(jié)合親和力，如果測得平衡解離常數(shù)為1〇_6Μ或更低則所述的候選抗體可被鑒定為可用于 治療癌癥的抗體。
[0028] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供了系統(tǒng)改變抗體和篩選抗PRLR蛋白胞外域的抗 體的方法，其中的抗體可用于治療癌癥，該方法包括制備候選抗體的步驟，其中的候選抗 體在如下抗體的⑶R內(nèi)的一個或兩個氨基酸上包含修飾：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、 he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、 XPA. 06. 128,XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148, XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18U XPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212, XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235,XPA. 06. 239,XPA. 06. 145, XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 和 XHA. 06. 907 ;使包含 PRLR的ECD的多肽與所述的候選抗體接觸；檢測候選抗體與多肽的結(jié)合親和力；如果測得 平衡解離常數(shù)為1(Γ6Μ或更低則所述的候選抗體可被鑒定為可用于治療癌癥的抗體。
[0029] 在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了篩選抗PRLR蛋白胞外域的抗體的方法，其中 的抗體可用于治療癌癥，該方法包括使乳腺、肺或前列腺細胞與候選抗體接觸的步驟，其中 的候選抗體包含如下抗體的至少1、2、3、4、5或6個CDR :chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、 he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、 XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、XPA. 06. 147、XPA. 06. 148、 XPA. 06. 158、XPA. 06. 159、XPA. 06. 163、XPA. 06. 167、XPA. 06. 171、XPA. 06. 178、XPA. 06. 181、 XPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212, XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235,XPA. 06. 239,XPA. 06. 145, XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 和 XHA. 06. 907,或在一個 或多個CDR內(nèi)有一個或兩個氨基酸修飾的抗體；檢測所述細胞的增殖或存活能力；如果檢 測到細胞增殖和存活能力下降則所述的候選抗體可被鑒定為可用于治療癌癥的抗體。
[0030] 在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了治療癌癥患者的方法，其中包括0、Ι、ΙΙ、ΙΙΙ、 IV或V期癌癥患者，該方法包括給予治療有效量的上述抗體的步驟。在一個相關(guān)的實施方 式中，所述癌癥是乳腺癌、肺癌或前列腺癌。在另一實施方式中，需要給予第二治療劑。在 一個典型實施方式中，第二治療劑是阿霉素、柔紅霉素或其他蒽環(huán)類抗生素或拓撲異構(gòu)酶 抑制劑。在其他實施方式中，上述任一拓撲異構(gòu)酶抑制劑與chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、 he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4 -起 給予。在另一實施方式中，還對對象進行放療或手術(shù)治療。在本發(fā)明的另一實施方式中，所 述對象是PRLR和HER2-neu表達陽性的，以及其中所述的第二治療劑是抗Her2-neu抗體。 在一個相關(guān)實施方式中，所述對象是PRLR和ER表達陽性的，以及其中所述的第二治療劑是 抗ER抗體。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了可用作藥物的本發(fā)明的抗體，其中包括用于 治療癌癥的藥物。在其他實施方式中，本發(fā)明提供了本發(fā)明的抗體在制備癌癥治療藥物中 的用途。藥物可與第二治療劑和/或放療一起施與對象。
[0031] 在本發(fā)明的另一實施方式中，本發(fā)明提供了靶向表達PRLR的腫瘤細胞的方法，該 方法包括給予連接到放射性核素或其他毒素上的上述抗體的步驟。在另一實施方式中，所 述對象是哺乳動物。在另一個實施方式中，所述對象是人。
[0032] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供了包含編碼上述抗體的重鏈或輕鏈的核苷酸序列 的游離核酸分子。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了包含與調(diào)節(jié)控制序列可操控連接的上 述核酸分子的表達載體。在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了包含上述載體或上述核酸分 子的宿主細胞。
[0033] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供了利用上述宿主細胞制備抗體的方法，該方法包 括在合適的條件下培養(yǎng)宿主細胞并回收所述的抗體。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了通 過上述方法制備的抗體。
[0034] 在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了純化至按重量計至少達到95%同質(zhì)性的上述 抗體。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了包含上述抗體和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合 物。
[0035] 在另一實施方式中，本發(fā)明提供了包含包裝在容器內(nèi)的上述抗體的試劑盒，其中 的上述抗體包含治療有效量的本發(fā)明的抗體，試劑盒任選可包含第二治療劑，還可以包含 粘帖在容器上或者包裝在容器內(nèi)的標簽，標簽上注明容器的內(nèi)含物并指導(dǎo)和/或說明如何 使用容器的內(nèi)容物來治療癌癥。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了試劑盒，其中容器是藥瓶 或小瓶或預(yù)裝注射器。
[0036] 在本發(fā)明的另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體 包含選自如下一組的輕鏈可變區(qū)氨基酸序列：SEQ ID N0:21、23、25、27、29、31、33、35、37、 39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、82、84、86、88、91、95 和 96。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含選自如下 一組的重鏈可變區(qū)氨基酸序列：SEQ ID N0:20、2、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、 46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、83、85、87、89、90、93、94、97 和 98。在 另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基 酸序列SEQ ID N0:88和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:89。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了 能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:88和重鏈可 變區(qū)序列SEQ ID N0:90。
[0037] 在本發(fā)明的另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體 包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:91和重鏈可變區(qū)序列SEQ IDN0:93。在另一實施方 式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:91和重鏈可變區(qū)序列SEQ IDN0:94。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR 胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:92和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:93。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕 鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:92和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:94。
[0038] 在本發(fā)明的另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體 包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:95和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:97。在另一實施方 式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:95和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:98。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR 胞外域的抗體，其中抗體包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:96和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID NO: 97。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合PRLR胞外域的抗體，其中抗體包含輕 鏈可變區(qū)氨基酸序列SEQ ID N0:96和重鏈可變區(qū)序列SEQ ID N0:98。
[0039] 在本發(fā)明的另一實施方式中，本發(fā)明提供了能結(jié)合人PRLR胞外域的抗體，其中抗 體與胞外域結(jié)合的KD比與小鼠 PRLR胞外域結(jié)合的KD低至少10到25, 000倍、100到20, 000 倍、1，000 到 18, 000 倍、5, 000 到 17, 000 倍、8, 000 到 16, 000 倍、10, 000 到 15, 000 倍、12, 000 到15, 000倍、或13, 000到14, 000倍。在一個相關(guān)實施方式中，上述抗體與he. 06. 275-4 結(jié)合的表位相同。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了與人PRLR胞外域、小鼠 PRLR胞外域和 大鼠 PRLR胞外域結(jié)合的抗體。在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了以1(Γ6Μ或更低的平衡 解離常數(shù)（K D)與人、小鼠和大鼠 PRLR胞外域結(jié)合的抗體。在一個相關(guān)實施方式中，上述抗 體與he. 06. 642-2結(jié)合的表位相同。
[0040] 在另一實施方式中，上述方法可用于鑒定需要用抗PRLR抗體治療的對象，例如， 通過（a)從對象獲得樣品；以及（b)分析樣品的PRLR、Jak2、Mapk、Stat5、Erkl/2和/或 Akt的磷酸化水平；其中PRLR、Jak2、Mapk、Stat5、Erkl/2和/或Akt的磷酸化水平是需要 用抗PRLR抗體治療的指示劑。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了監(jiān)測癌癥對象的癌癥療法 的方法，該方法包括步驟：(a)在開始癌癥療法前分析對象的第一樣品的PRLR磷酸化水平； 以及（b)在開始癌癥療法后分析第二樣品，其中在開始癌癥療法后磷酸化PRLR的水平降低 說明患者接受了治療有效量的癌癥療法。在一個相關(guān)實施方式中，所述癌癥療法是上述任 一實施方式所述的抗體。
[0041] 附圖簡述
[0042] 圖1顯示的是各種PRLR亞型的基因排列和外顯子。
[0043] 圖2、3和4顯示的是選擇出的PRLR特異性抗體對pERKl/2磷酸化的效應(yīng)。 [mAbl 167是對照鼠抗PRLR單克隆抗體；R&D系統(tǒng)（R&D Systems)，貨號ΜΑΒΙ 167]
[0044] 圖5顯示的是PRLR特異性抗體對PRL反應(yīng)性腫瘤細胞系增殖的效應(yīng)。
[0045] 圖6顯示的是PRLR特異性抗體對PRLR胞內(nèi)磷酸化的效應(yīng)。
[0046] 圖 7A-7C 顯示的是抗體 XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、 XPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167, XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206, XPA. 06. 207、XPA. 06. 210、XPA. 06. 212、XPA. 06. 217、XPA. 06. 219、XPA. 06. 229、XPA. 06. 233、 XPA. 06. 235、XPA. 06. 239的VH和VL氨基酸序列以及CDR (下劃線）的位置，在pERK試驗 中該抗體有80%以上的抑制活性。
[0047] 圖8顯示的是抗體XPA. 06. 145的VH和VL氨基酸序列。
[0048] 圖9顯示的是抗體XHA. 06. 983、XHA. 06. 275和XHA. 06. 642的前導(dǎo)序列以及VH和 VL核苷酸序列。
[0049] 圖 10 顯示的是抗體 XHA. 06. 983、XHA. 06. 275 和 XHA. 06. 642 的 VH 和 VL 氨基酸序 列（下劃線部分為CDR)。
[0050] 圖11顯示的是能高效抑制BaF/prlr細胞增殖和存活的嵌合的抗PRLR單克隆抗 體chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275和chXHA. 06. 983。KLH-G1是與對照抗體匹配的非特異性 同種型抗體。右側(cè)顯示的是相應(yīng)的小鼠單克隆抗體的IC50值。
[0051] 圖12顯示的是嵌合的抗PRLR mAb可抑制T47D細胞內(nèi)的STAT5信號。在用50ng/ ml PRL刺激前30min用lug/ml mAb預(yù)處理細胞。利用PRLR的磷酸酪氨酸殘基546和611 特異性抗體分析細胞裂解物內(nèi)是否存在磷酸-PRLR。
[0052] 圖13顯不了人基因工程抗體（Human Engineered? antibody)對pERKl/2憐酸化 的效應(yīng)。
[0053] 圖14顯示的是抗PRLR mAb介導(dǎo)的ADCC。在使用mAb (lug/ml)前用鈣黃綠素 -AM 標記T47D-T2細胞，純化的人NK細胞與細胞以10:1的效靶比混合。孵育4小時后，測定 釋放到上清內(nèi)的鈣黃綠素-AM。抗KLH抗體和赫賽?。℉ere印tin)分別作為陰性和陽性對 照。％特異性計算為（實驗組釋放一自發(fā)釋放V(最大釋放一自發(fā)釋放）Χ1〇〇。
[0054] 圖15顯示的是組合試驗中抗PRLR mAb與細胞毒藥物的協(xié)同效應(yīng)。阿霉素 (上圖）和順鉬（下圖）與抗KLH對照抗體、抗PRLR mAb chXHA. 06. 642或抗PRLR mAb chXHA. 06. 275(濃度均為lug/ml)共同給藥。通過CellTiter Glo分析測定細胞的存活率， 報告為RLU(y-軸）。
[0055] 圖16顯示的是STAT5磷酸化試驗證明人基因工程單克隆抗體（Human Engineered? mAb)保留有抗PRLR功能性特征。T47D細胞與1或10ug/ml mAb共孵育，然 后再用或不用PRL(50ng/ml)處理30分鐘。
[0056] 圖17A和B顯示的是人源化的抗PRLR候選抗體可高效地抑制PRL依賴性的BaF3/ PRLR細胞的生長。BaF3/PRLR細胞在PRL(50ng/ml)存在的條件下培養(yǎng)48小時，分別添加 抗KLH對照抗體（上圖）、嵌合抗體或Human Engineered?抗體（人基因工程抗體）。利用 曲線擬合的非線性回歸分析計算EC50值。
[0057] 圖18A和B顯示的是P-STAT5對chXHA. 06. 642處理動物內(nèi)Nb2-Cll腫瘤的抑制作 用。帶有Nb2-cll皮下腫瘤的無胸腺小鼠腹膜內(nèi)注射chXHA. 06. 642或KLH對照IgGl mAb。 兩天后腹膜內(nèi)注射20ug oPRL。對照動物注射鹽水。兩天后腹膜內(nèi)注射20ug 〇PRL，40分鐘 后收獲腫瘤，利用免疫印跡或IHC分析p-STAT5。圖18A，80ug Tyr694p-STAT5的蛋白質(zhì)印 跡結(jié)果；圖 18B，Tyr694 P-STAT5 的 IHC 結(jié)果。
[0058] 圖19A和B顯示的是兩個不同的試驗都證明chXHA. 06. 642對SCID小鼠的Nb2-cll 大鼠淋巴瘤模型是有效的。
[0059] 圖20A和B顯示的是chXHA. 06. 642可抑制SCID小鼠體內(nèi)種植的Nb2-cll大鼠淋 巴瘤。圖20A顯示了腫瘤體積；圖20B顯示了條件存活率。
[0060] 圖21A和B顯示的是腹膜內(nèi)單次注射oPRL誘導(dǎo)P-STAT5,用chA64. 1處理可抑制 T47D人乳腺異種移植物內(nèi)的P-STAT5的誘導(dǎo)。chXHA. 06. 642或KLH對照IgGl腹膜內(nèi)注射 荷T47D腫瘤的免疫妥協(xié)小鼠，小鼠已被植入0. 18mg/天雌二醇（E2)丸以支持腫瘤生長。兩 天后腹膜內(nèi)注射20ug 〇PRL，40分鐘后收獲T47D腫瘤，利用免疫印跡或IHC分析P-STAT5。 圖 21A，80ug Tyr694 p-STAT5 的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果；圖 21B，Tyr694 p-STAT5 的 IHC 結(jié)果。
[0061] 詳細描述
[0062] 本發(fā)明提供了 PRLR特異性抗體、包含這種抗體的藥學(xué)上可接受的制劑、制備抗體 和藥學(xué)上可接受的制劑的方法以及利用藥學(xué)上可接受的制劑和化合物治療患者的方法。本 發(fā)明的抗體具有結(jié)合PRLR和/或抑制PRLR二聚化和/或抑制PRLR胞內(nèi)磷酸化、和/或抑 制PRLR下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，例如，通過Jak2、Mapk、Stat5、Erkl/2和/或Akt的磷酸化、以及抑 制癌癥或腫瘤相關(guān)的細胞增殖的理想生物學(xué)活性。本發(fā)明以這種方式提供了通過檢測PRLR 的磷酸化或通過分析其他下游信號伙伴如Jak2、Stat5、Erkl/2和/或Akt的磷酸化狀態(tài) 來直接分析PRLR活化的方法。因此，分析下游信號通路可用于確定哪些患者需要使用抗體 PRLR抗體，或者用于監(jiān)測用抗PRLR抗體治療的患者。
[0063] 本發(fā)明的抗體還可具有結(jié)合癌細胞表達的PRLR的理想生物學(xué)活性，因此可用于 癌細胞的靶向性細胞毒治療。
[0064] 本發(fā)明還涉及鑒定PRLR基因或基因產(chǎn)物及其突變體的拮抗劑或激動劑的篩選試 驗。因此，本發(fā)明涉及鑒定PRLR基因或基因產(chǎn)物及其突變體的拮抗劑或激動劑的方法以及 所述的激動劑或拮抗劑在治療或預(yù)防本文所述的癌癥中的用途。另外，本發(fā)明涉及核酸分 子、多肽和/或PRLR基因編碼產(chǎn)物在篩選、診斷、預(yù)防和/或治療以PRLR異常表達或異常 活性為特征的疾病中的用途，其中包括癌癥，例如而不限于肺癌、乳腺癌和前列腺癌。
[0065] 根據(jù)體外試驗分析發(fā)現(xiàn)，幾種優(yōu)選的小鼠抗體或嵌合抗體具有較高的親和力和效 應(yīng)，這些抗體通過Studnicka等的Human Engineering?方法改造后其免疫原性降低。簡 言之，將重鏈和輕鏈可變區(qū)的表面暴露氨基酸殘基修飾成人源殘基，這些位置的氨基酸被 確定不可能對抗原結(jié)合或蛋白折疊產(chǎn)生不良影響，同時可以降低其在人體環(huán)境內(nèi)的免疫原 性。構(gòu)建包含修飾重鏈和/或輕鏈可變區(qū)的合成基因并且連接到人Y重鏈和/或κ輕鏈 恒定區(qū)上。所有的人重鏈和輕鏈恒定區(qū)都可用于連接Human Engineered?抗體（人基因工 程抗體）可變區(qū)。人重鏈和輕鏈基因?qū)氲讲溉閯游锛毎麅?nèi)，收獲產(chǎn)生的重組免疫球蛋白 產(chǎn)物并分析其特征。
[0066] 本發(fā)明的典型抗體包括 chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、 he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、ΧΡΑ. 06. 128、 XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158, XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192, XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06.217, XPA. 06. 219、XPA. 06. 229、XPA. 06. 233、XPA. 06. 235、XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、 XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 和 XHA. 06. 907。根據(jù)《布達佩斯條約》 的規(guī)定，于2006年8月17日將下列分泌抗體的雜交瘤保存到位于美國弗吉尼亞州馬納薩 斯的美國典型培養(yǎng)物保藏所（ATCC，10801 University Blvd.，Manassas，VA 20110-2209 (USA))：
[0067]

【權(quán)利要求】
1. 以1(Γ6Μ或更低平衡解離常數(shù)（KD)與PRLR胞外域結(jié)合并與下列任一抗體競爭 結(jié)合 75% 以上 PRLR 的抗體：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、 he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、ΧΡΑ. 06. 128、ΧΡΑ. 06. 129、 ΧΡΑ. 06. 130,ΧΡΑ. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,ΧΡΑ. 06. 148,ΧΡΑ. 06. 158,ΧΡΑ. 06. 159, ΧΡΑ. 06. 163,ΧΡΑ. 06. 167,ΧΡΑ. 06. 17UXPA. 06. 178,ΧΡΑ. 06. 18UXPA. 06. 192,ΧΡΑ. 06. 202, ΧΡΑ. 06. 203,ΧΡΑ. 06. 206,ΧΡΑ. 06. 207,ΧΡΑ. 06. 210,ΧΡΑ. 06. 212,ΧΡΑ. 06. 217,ΧΡΑ. 06. 219, ΧΡΑ. 06. 229、ΧΡΑ. 06. 233、ΧΡΑ. 06. 235、ΧΡΑ. 06. 239、ΧΡΑ. 06. 145、ΧΗΑ. 06. 567、ΧΗΑ. 06. 642、 ΧΗΑ· 06. 983、ΧΗΑ· 06. 275、ΧΗΑ· 06. 189 或 ΧΗΑ· 06. 907。
2. 如權(quán)利要求1所述的與下列任一抗體結(jié)合PRLR的相同表位的抗體：chXHA. 06. 642、 chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、 he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、 XPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17U XPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207, XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235, XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907。
3. 包含下列任一抗體的 1、2、3、4、5 或 6 個 CDR 的抗體：chXHA. 06. 642、chXHA. 06. 275、 he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、he. 06. 275-4、 XPA. 06. 128,XPA. 06. 129,XPA. 06. 130,XPA. 06. 13UXPA. 06. 14UXPA. 06. 147,XPA. 06. 148, XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17UXPA. 06. 178,XPA. 06. 18U XPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207,XPA. 06. 210,XPA. 06. 212, XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235,XPA. 06. 239,XPA. 06. 145, XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907。
4. 如權(quán)利要求1-3中任一項所述的抗體，其特征在于，所述抗體是嵌合抗體、人源化抗 體、人基因工程抗體、人抗體、單鏈抗體或抗體片段。
5. 如上述權(quán)利要求中任一項所述的抗體，其特征在于，所述CDR內(nèi)的至少一個氨基酸 被另一抗PRLR抗體的相應(yīng)CDR的相應(yīng)殘基取代。
6. 如上述權(quán)利要求中任一項所述的抗體，其特征在于，所述CDR內(nèi)的一個或兩個氨基 酸是經(jīng)過修飾的。
7. 如上述權(quán)利要求中任一項所述的與下列抗體的輕鏈或重鏈可變區(qū)有至少60、 65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98 或 99% - 致性的抗體：chXHA. 06. 642、 chXHA. 06. 275、he. 06. 642-1、he. 06. 642-2、he. 06. 275-1、he. 06. 275-2、he. 06. 275-3、 he. 06. 275-4、XPA. 06. 128、XPA. 06. 129、XPA. 06. 130、XPA. 06. 131、XPA. 06. 141、 XPA. 06. 147,XPA. 06. 148,XPA. 06. 158,XPA. 06. 159,XPA. 06. 163,XPA. 06. 167,XPA. 06. 17U XPA. 06. 178,XPA. 06. 18UXPA. 06. 192,XPA. 06. 202,XPA. 06. 203,XPA. 06. 206,XPA. 06. 207, XPA. 06. 210,XPA. 06. 212,XPA. 06. 217,XPA. 06. 219,XPA. 06. 229,XPA. 06. 233,XPA. 06. 235, XPA. 06. 239、XPA. 06. 145、XHA. 06. 567、XHA. 06. 642、XHA. 06. 983、XHA. 06. 275、XHA. 06. 189 或 XHA. 06. 907。
8. 如上述權(quán)利要求中任一項所述的包含人抗體序列的恒定區(qū)和人抗體序列的一個或 多個重鏈和輕鏈可變框架區(qū)的抗體。
9. 如權(quán)利要求8所述的抗體，其特征在于，所述人抗體序列是個體人序列、人共有序 列、個體人種系序列或人共有種系序列。
10. 如上述權(quán)利要求中任一項所述的抗體，其特征在于，所述重鏈恒定區(qū)是修飾的或未 修飾的IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、其片段或其組合。
【文檔編號】C07K16/18GK104098699SQ201310220338
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2007年8月17日 優(yōu)先權(quán)日:2006年8月18日
【發(fā)明者】D·貝丁格爾, J·達米昂諾, M·盧克曼, L·馬斯塔, A·莫扎, G·諾特 申請人:諾華有限公司, 愛克索馬技術(shù)有限公司