專(zhuān)利名稱(chēng)：一種黃果茄甾醇的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種黃果茄留醇的制備方法，尤其是一種應(yīng)用膜分離和高速逆流色譜技術(shù)從黃果茄中制備黃果茄留醇的方法。
背景技術(shù)：
黃果爺(5b7a/w xanthocarpum Schrad, et Wendl)異名大苦果、野爺果,常見(jiàn)于云南省河口、蒙自、元江、元謀、祿勸、巧家海拔125— 880米地區(qū)，個(gè)別也上達(dá)到海拔1100米，喜生于干熱河谷沙灘上。我國(guó)湖北、四川、廣東及臺(tái)灣也有。廣泛分布于熱帶亞洲(阿拉伯地區(qū)，印度，斯里蘭卡，馬六甲，越南，泰國(guó))、澳洲及波里尼西亞和日本南部。黃果茄味苦辛，溫，具有清熱利濕，消瘀止痛的功效。印度民間常用本植物治療咳嗽、發(fā)熱及心臟病。其全草的醇提取部分有強(qiáng)心作用。對(duì)離體蛙心、貓心房戌心室肌、乳頭肌在一定濃度時(shí)，能增強(qiáng)其收縮及張力，但如濃度過(guò)高，反降低其收縮力。長(zhǎng)期用藥可顯著降低豚鼠肺及支氣管中組織胺含量(80% )，而對(duì)皮膚、胃的組織胺有輕度上升。黃果茄中含有生物堿、脂肪油和在留醇類(lèi)物質(zhì)，留醇之一為黃果茄留醇。已經(jīng)黃果茄甾醇具有保肝作用，在濃度10毫克/千克，對(duì)CCI4S導(dǎo)的小鼠肝損傷有保護(hù)作用，此外黃果茄留醇還可作為抗炎劑使用。黃果茄甾醇黃色片狀物(丙酮)，mp251°C。分子式C37H54O4,分子量562. 84，
現(xiàn)有技術(shù)中，黃果茄留醇提取分離方法較少，均為實(shí)驗(yàn)室成分鑒別應(yīng)用方法，如正丁醇
萃取、硅膠柱層析等，這些方法制備的黃果茄留醇純度低，制備量小。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種操作簡(jiǎn)單，成本低，純度高的黃果茄甾醇的制備方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案
1)醇提取黃果茄的果實(shí)破碎，加入5-10倍量(V/W)的70-80%的乙醇溶液加熱回流提取2-3次，每次l-3h，過(guò)濾，合并提取液；
2)活性炭脫色上述提取液加入提取液量5%藥用活性炭，50°C保溫脫色60min，得到脫色液；
3)膜分離上述脫色液通過(guò)超濾膜系統(tǒng)，收集透過(guò)液；
4 )高速逆流色譜分離將透過(guò)液濃縮，干燥得到黃果茄留醇粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得黃果茄甾醇。步驟3)中所述超濾膜系統(tǒng)為中空纖維超濾膜系統(tǒng)，截留分子量為1000-3000。步驟4)中所述高速逆流色譜中兩相溶劑系統(tǒng)為正己烷(4-7):乙酸乙酯(2-5):甲醇(4-6):水(5)。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)本工藝采用提取法制備黃果茄留醇，超濾除具有明顯的濾除膠體雜質(zhì)的性能外，還具有良好的脫色效果；采用高速逆流色譜分離制備量大，周期短，產(chǎn)品純度高，而且分離過(guò)程樣品無(wú)損失，無(wú)污染。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I
取黃果茄的果實(shí)1kg，破碎，加入5倍量(V/W)的80%的乙醇溶液加熱回流提取3次，每次lh，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，50°C保溫脫色60min，得到脫色液，再將脫色液通過(guò)截留分子量為3000的中空纖維超濾膜系統(tǒng)超濾，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到黃果茄甾醇粗品。將正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按4 5 6 :5體積比量取，置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以3ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，收集黃果茄留醇流分，濃縮，低溫干燥即得黃果茄留醇5. 5mg，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為97. 6%。實(shí)施例2
取黃果茄的果實(shí)10kg，破碎，加入8倍量(V/W)的70%的乙醇溶液加熱回流提取2次，每次3h，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，50°C保溫脫色60min，得到脫色液，再將脫色液通過(guò)截留分子量為1000的中空纖維超濾膜系統(tǒng)超濾，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到黃果茄甾醇粗品。將正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按7 :2 4 :5體積比量取，置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以2. 5ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，收集黃果茄留醇流分，濃縮，低溫干燥即得黃果茄留醇62. Img,經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為 95. 8%ο實(shí)施例3
取黃果茄的果實(shí)10kg，破碎，加入8倍量(V/W)的75%的乙醇溶液加熱回流提取2次，每次2h，過(guò)濾，合并提取液，加入5%藥用活性炭，50°C保溫脫色60min，得到脫色液，再將脫色液通過(guò)截留分子量為2000的中空纖維超濾膜系統(tǒng)超濾，收集透過(guò)液，濃縮，干燥得到黃果茄甾醇粗品。將正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按5 :4 5 :5體積比量取，置于分液漏斗中混合均勻，靜止分層，分離上下相，以上相為固定相，以下相為流動(dòng)相，取上述粗品適量溶于下相中待用，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，以2. 8ml/min流速泵入流動(dòng)相，當(dāng)流動(dòng)相流出，開(kāi)始連續(xù)進(jìn)樣，收集黃果茄留醇流分，濃縮，低溫干燥即得黃果茄留醇52. 3mg,經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為 98. 4%ο
權(quán)利要求
1.一種黃果茄留醇的制備方法，其特征在于包含以下步驟 1)醇提取黃果茄的果實(shí)破碎，加入5-10倍量(V/W)的70-80%的乙醇溶液加熱回流提取2-3次，每次l-3h，過(guò)濾，合并提取液； 2)活性炭脫色上述提取液加入提取液量5%藥用活性炭，50°C保溫脫色60min，得到脫色液； 3)膜分離上述脫色液通過(guò)超濾膜系統(tǒng)，收集透過(guò)液； 4)高速逆流色譜分離將透過(guò)液濃縮，干燥得到黃果茄留醇粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得黃果茄甾醇。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟3)中所述超濾膜系統(tǒng)為中空纖維超濾膜系統(tǒng)，截留分子量為1000-3000。
3.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟4)中所述高速逆流色譜中兩相溶劑系統(tǒng)為正己烷(4-7):乙酸乙酯(2-5):甲醇(4-6):水(5)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種黃果茄甾醇的制備方法。該方法以黃果茄的果實(shí)為原料，加入5-10倍量(V/W)的70-100%的乙醇溶液加熱回流提取2-3次，每次1-3h，過(guò)濾，合并提取液，加入適量活性炭保溫脫色，脫色液通過(guò)膜分離系統(tǒng)，透過(guò)液濃縮，干燥得到黃果茄甾醇粗品，采用高速逆流色譜進(jìn)行分離，制得黃果茄甾醇。該工藝操作簡(jiǎn)單，純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號(hào)C07J9/00GK102643320SQ20121012489
公開(kāi)日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月26日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司