專利名稱：山莓葉中具抗腫瘤作用的兩個(gè)新化合物、制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及山莓葉中提取分離出的兩個(gè)新化合物、制備方法以及其抗腫瘤藥物方面的用途。
背景技術(shù)：
山莓(Rubus corchorifolius L. f)屬薔薇科懸鉤子屬中一種落葉灌木。多生長(zhǎng)于向陽(yáng)山坡、溪邊、山谷、荒地和灌叢中，海拔300 1500m。除東北、內(nèi)蒙古、青海、新疆、西藏外，全國(guó)均有分布。福建全省各地均有山莓分布，野生資源蘊(yùn)藏量相當(dāng)大。我國(guó)利用山莓的歷史悠久，在《本草拾遺》、《本草綱目》、《名醫(yī)別錄》、《食療本草》中就有山莓藥用價(jià)值的詳細(xì)記載，其藥用已有上千年歷史。山莓果、根及葉均可入藥。地上部分(葉、幼果和莖)所含的香豆素化合物，如東茛菪內(nèi)酯具有一定的鎮(zhèn)痛、抗炎、祛痰和平喘的作用。在湘西、鄂西北山莓作為常用的苗族藥，用于醫(yī)治常見(jiàn)的多發(fā)病，如腹瀉、目赤、酒精中毒等，療效確切。目前有關(guān)山莓的研究主要是集中在資源的開(kāi)發(fā)利用方面，陳炳華利用其聚合果， 用于食品加工；利用其鞣質(zhì)作為化工原料，近年來(lái)又關(guān)山莓的化學(xué)成分研究不斷增多，陳炳華等首次從山莓莖葉中分離到了一種香豆素，經(jīng)理化試驗(yàn)和多種波譜分析鑒定為6-甲氧基-7-羥基香豆素，即東莨菪內(nèi)酯(kopletin)；同時(shí)報(bào)道山莓全株含鞣質(zhì)、黃酮類化合物，地上部分(葉、莖、幼果)含香豆素化合物，根中含酚性成分和皂甙。張敏測(cè)得山莓葉中總黃酮含量為1. 18mg/g。張琰等報(bào)道了莓果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)成分為保禮等人從山莓葉中提取出得到茶多酚，含量達(dá)5. 15%。畢金峰等報(bào)道山莓果實(shí)中含有大量的鞣化酸。陳雪香等報(bào)道山莓葉醇提物中的成分主要含有有機(jī)酸、糖類、黃酮及其甙類、鞣質(zhì)、酚類、強(qiáng)心甙、香豆素、留體、萜類。張敏等對(duì)山莓乙酸乙酯萃取部位的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到了 2個(gè)貝殼杉烷二萜新化合物3 α，16 α，17，19-對(duì)映-貝殼杉烷-四醇和2羰基-16 α-羥基-對(duì)映-貝殼杉烷-17-β-D-葡糖苷。陳雪香等從山莓乙酸乙酯萃取部位分離得到四個(gè)新化合物化合物分別為9 β，16 α，17三羥基-對(duì)映貝殼杉-2酮(9 β， 16 α，17-trihydroxy-ent-kaur-2_one)，16 α，17，19 三羥基-對(duì)映貝殼杉-2 酮(16 α，17， 19-trihydroxyl-ent-kaur-2-one)，2 β，3 α，16 α，17-四羥基-對(duì)映-貝殼杉醇 O β， 3 α，16 α，17_tetrahydroxyl_ent_kauranol)，且均具有抗月中瘤的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供從山莓中分離出的兩個(gè)新化合物，由山莓葉粗提取經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得，活性實(shí)驗(yàn)證明該組化合物具有抗腫瘤作用。本發(fā)明所提供的一組兩個(gè)新化合物是從山莓葉的粗提物中經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得，化學(xué)名稱分別為化合物1 (ZM-I) 3 β，16 α，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯，化合物2(99-106)3 β，16 α，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯-17-氧-β -D-葡萄糖苷。經(jīng)波譜解析和化學(xué)方法確定了化合物1、化合物2的結(jié)構(gòu)，分別為
權(quán)利要求
1. 一種山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物1，化學(xué)名稱為3β，16α，17，19_四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯，結(jié)構(gòu)式為
2. —種山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物2，化學(xué)名稱為3β，16α，17，19_四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯-17-氧-β -D-葡萄糖苷，結(jié)構(gòu)式為
3.—種如權(quán)利要求1所述的山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物1的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)稱取粉碎的山莓葉，加入10倍體積80%的乙醇，攪勻，于50°C下浸提48h，過(guò)濾，濾渣再重復(fù)提取一次，合并濾液，濃縮凍干備用；(2)將濃縮凍干所得浸膏液依次用石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇反復(fù)多次萃取，將萃取液分別濃縮，冷凍干燥，分別得石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物；(3)將氯仿萃取物進(jìn)行硅膠柱色譜分離，用三氯甲烷與甲醇進(jìn)行梯度洗脫，合并相同組份，濃縮凍干；(4)取濃縮凍干后呈現(xiàn)結(jié)晶的一個(gè)組分，用甲醇完全溶解，25°C下靜置M小時(shí)，得到結(jié)晶，過(guò)濾，將晶體再用甲醇溶解，重結(jié)晶一次，即得到化合物1。
4.一種如權(quán)利要求2所述的山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物2的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)稱取粉碎的山莓葉，加入10倍體積80%的乙醇，攪勻，于50°C下浸提48h，過(guò)濾，濾渣再重復(fù)提取一次，合并濾液，濃縮凍干備用；(2)將濃縮凍干所得浸膏液依次用石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇反復(fù)多次萃取，將萃取液分別濃縮，冷凍干燥，分別得石油醚，氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物；(3)將氯仿萃取物進(jìn)行硅膠柱色譜分離，用三氯甲烷與甲醇進(jìn)行梯度洗脫，合并相同組份，濃縮凍干；(5)將濃縮凍干后總重量最大，顯灰白色粉末狀的一個(gè)組份，用甲醇溶解并取適量硅膠拌勻，揮干溶劑，干法上樣，再進(jìn)行硅膠柱層析分離，用氯仿和甲醇進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)合并相同組份，濃縮凍干；(6)取檢測(cè)純度高的一個(gè)組分，用甲醇溶解，25°C下靜置M小時(shí)，得到結(jié)晶，過(guò)濾，將晶體再用甲醇溶解，重結(jié)晶一次，即得到化合物2。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物1的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，三氯甲烷與甲醇的體積比依次為500 0,500 1， 300 1,100 1,90 1,70 1,50 1,,30 1,10 1,5 1，甲醇與水的體積比為4 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的山莓葉中具抗腫瘤作用的新化合物2的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，三氯甲烷與甲醇的體積比依次為500 0,500 1， 300 1,100 1,90 1,70 1,50 1,,30 1,10 1,5 1，甲醇與水的體積比為 4 1，步驟(5)中，進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，氯仿和甲醇的體積比依次為100 0,80 1,40 1， 10 1,5 1，1 1,0 1。
7.如權(quán)利要求1所述的化合物1在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
8.如權(quán)利要求1所述的化合物1在制備保健品方面的用途。
9.如權(quán)利要求2所述的化合物2在制備抗腫瘤藥物方面的用途。
10.如權(quán)利要求2所述的化合物2在制備保健品方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及山莓葉中提取分離出的兩個(gè)新化合物及其制備方法，是從山莓葉的粗提物中經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析、薄層層析和結(jié)晶的方法所得，化學(xué)名稱分別為化合物1(ZM-1)3β，16α，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯，化合物2(99-106)3β，16α，17，19-四羥基-對(duì)映貝殼杉-19-乙酸酯-17-氧-β-D-葡萄糖苷?；钚詫?shí)驗(yàn)證明上述兩個(gè)新化合物均具有很好的抗腫瘤作用，可應(yīng)用于制備抗腫瘤藥物。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102344365SQ20111022298
公開(kāi)日2012年2月8日 申請(qǐng)日期2011年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月2日
發(fā)明者張敏, 曹庸, 歐陽(yáng)文, 陳雪香 申請(qǐng)人:曹庸