專利名稱：具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明具體涉及一種具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前，國內(nèi)對熊果酸的研究報告多集中在熊果酸的提取分離工藝和藥理學(xué)研究， 特別是國內(nèi)外對熊果酸的抗癌作用研究已見報道。如王濤等的“熊果酸抗腫瘤作用及其機(jī)制研究進(jìn)展”(《藥物生物技術(shù)》，2008, 15 [2])；熊斌等的“熊果酸藥理學(xué)的研究進(jìn)展”(《國外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊》，2004, 31 [[3])；夏國豪等的“熊果酸抗腫瘤作用研究進(jìn)展”(《國外醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)分冊》，2002，29 [6]);等等。研究表明，熊果酸具有抗始發(fā)突變、抗促癌作用、抗氧化作用、細(xì)胞毒作用、誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化、抗血管生成作用、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。國內(nèi)的白育軍等報道了 6種熊果酸母核修飾物(《華西藥學(xué)雜志》，2003，18 [2]);楊定菊等報道了具有生物活性的聚乙二醇支載熊果酸(《中國藥科大學(xué)大學(xué)學(xué)報》，2008，39[1])，并發(fā)表了專利《親水性聚乙二醇支載熊果酸系列新藥及其制備方法》；孟艷秋等開發(fā)了熊果酸修飾氨基酸、氨基醇、胺、 雜環(huán)等系列衍生物等多項(xiàng)專利。然而，現(xiàn)有專利或文獻(xiàn)中采用氨基酸修飾熊果酸時，均采用將熊果酸的C18位羧基與天然α-氨基酸的α-氨基成酰胺鍵的方式，來制備氨基酸改性的熊果酸衍生物，尚未涉及將天然α -氨基酸與熊果酸以其他方式進(jìn)行連結(jié)等有關(guān)方面的研究。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述問題，本發(fā)明提供一種具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制備方法，該衍生物是經(jīng)經(jīng)氨基酸化學(xué)改性的熊果酸衍生物，以乙二胺為連接臂、將α-氨基酸與熊果酸進(jìn)行連結(jié)，研究表明該熊果酸衍生物具有良好抗癌活性。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)施的
一種具抗癌活性的熊果酸衍生物，是經(jīng)氨基酸化學(xué)改性制備的，其結(jié)構(gòu)式為
權(quán)利要求
1. 一種具抗癌活性的熊果酸衍生物，其特征在于所述熊果酸衍生物是經(jīng)氨基酸化學(xué)改性制備的，其結(jié)構(gòu)式為
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物，其特征在于所述的氨基酸為天然α-氨基酸，這些氨基酸以成α-酰胺鍵的方式通過乙二胺與熊果酸母核C-觀位羧基連結(jié)。
3.—種如權(quán)利要求1所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所述制備方法為(1)熊果酸與乙酸酐反應(yīng)生成化合物2；化合物2經(jīng)過草酰氯活化后，與乙二胺反應(yīng)生成化合物3 ；化合物3經(jīng)過堿解、酸化，得到化合物4 ；(2)化合物3與預(yù)先用Fmoc保護(hù)的天然α-氨基酸反應(yīng)，再脫除Fmoc保護(hù)基，制備了化合物5 ；(3)化合物4與預(yù)先用Fmoc保護(hù)的天然α-氨基酸反應(yīng)，再經(jīng)過脫Fmoc保護(hù)基后，制備了化合物6。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所述制備方法步驟(1)的具體過程為a: 5-15 g熊果酸用40-50 mL吡啶溶解，在冰浴條件下緩慢滴加20-30 mL乙酸酐，滴加完畢室溫下反應(yīng)6-9 h ；停止反應(yīng)，減壓蒸除吡啶，殘余物用二氯甲烷溶解，并依次用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸、蒸餾水、飽和氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相，有機(jī)相再用無水硫酸鈉除水1-3 h后過濾，濾液于40-50°C下減壓濃縮后烘干至恒重，于50-70°C下烘干，得化合物2 ；b:取4-6 g化合物2完全溶于30-50 mL 二氯甲烷中，冰浴條件下緩慢滴加5_7 mL草酰氯，滴加完畢后繼續(xù)維持冰浴攪拌0.5-2 h，后于室溫下繼續(xù)反應(yīng)12-36 h;反應(yīng)完畢，將上述溶液減壓蒸餾，得白色泡沫狀固體；在該固體中加入4(T60 mL 二氯甲烷至完全溶解并減壓蒸干溶劑，所得產(chǎn)物用40-70 mL 二氯甲烷溶解，成為備用溶液；取10-30 mL無水乙二胺充分分散于40-60 mL 二氯甲烷中，冰浴下緩慢滴加上述備用溶液；滴畢，繼續(xù)冰浴20-40 min，后撤除冰浴，室溫反應(yīng)8-16 h ；用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%鹽酸、蒸餾水、飽和氯化鈉依次洗滌有機(jī)層，直至有機(jī)層呈中性，有機(jī)層再加入無水硫酸鈉除水1-3 h后過濾，濾液減壓蒸餾，得到白色固體，白色固體用甲醇重結(jié)晶，得到化合物3 ；c:取4-6 g化合物3溶于四氫呋喃與甲醇的混合溶液160-170 mL中，兩者體積比例為1-2:1-2 ；加入10-30 mL的3-5 mol/L氫氧化鈉水溶液，室溫下攪拌8_16 h，減壓蒸除溶劑，加入200-300 mL二次蒸餾水，室溫下充分?jǐn)嚢?. 5-2 h，減壓抽濾，濾餅用二次蒸餾水洗滌至中性，減壓蒸除溶劑，得到白色粉末狀固體，白色固體用甲醇重結(jié)晶，得到化合物4。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所述制備方法步驟(2)的具體過程為取2-4 mmol用Fmoc保護(hù)的天然α -氨基酸溶于含有 60-70 mL 二氯甲烷和1，4-二氧六環(huán)的混合溶劑中，兩者的體積比為1-2:1-2，冰浴條件下加入1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽0. 5-0. 7 g并保持此溫度反應(yīng)20-40 min，后加入l-2g化合物3，然后室溫反應(yīng)12-36 h ；反應(yīng)畢，蒸發(fā)出溶劑，殘余物加入體積比為4-6:1的二氯甲烷、三乙胺混合溶液50-70 mL，室溫反應(yīng)48-72 h，反應(yīng)結(jié)束，蒸出溶劑， 殘余物采用硅膠柱層析分離，柱層析條件為先以1 L體積比為9-11:1的乙酸乙酯/石油醚混合溶劑沖洗硅膠柱，然后再用體積比為9-11:1的乙酸乙酯/乙醇進(jìn)行洗脫，收集所需組分，得到化合物5。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所述制備方法步驟(3)的具體過程為取1-2 g用Fmoc保護(hù)的天然α -氨基酸溶于含有60-70 mL 二氯甲烷和1，4-二氧六環(huán)的混合溶劑中，兩者的體積比為1-2:1-2，冰浴條件下加入 0.7-0.8 g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽并保持此溫度反應(yīng)20-40 min, 后加入1-2 g化合物4，然后室溫反應(yīng)12-36 h;反應(yīng)畢，蒸發(fā)出溶劑，殘余物加入體積比為 4-6:1的二氯甲烷、三乙胺混合溶液100-140 mL，室溫反應(yīng)48-72 h，反應(yīng)結(jié)束，蒸出溶劑， 殘余物采用硅膠柱層析分離，柱層析條件為先以1 L體積比為9-11:1的乙酸乙酯/石油醚混合溶劑沖洗硅膠柱，然后再用體積比為4-6:1的乙酸乙酯/乙醇進(jìn)行洗脫，收集所需組分，得到白色固體即為化合物6。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所制備的化合物5的結(jié)構(gòu)為當(dāng)R1為乙酰氧基時，如式(I)所示結(jié)構(gòu)。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物的制備方法，其特征在于所制備的化合物6的結(jié)構(gòu)為當(dāng)R1為羥基時，如式(I)所示結(jié)構(gòu)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具抗癌活性的熊果酸衍生物，其特征在于所合成的如式(I) 所示化合物具有抗腫瘤作用，可用于治療腫瘤疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具抗癌活性的熊果酸衍生物及其制備方法。該方法將熊果酸C-28位羧基通過乙二胺、以形成酰胺鍵的方式，與天然α-氨基酸連結(jié)，合成一系列具抗腫瘤活性的熊果酸衍生物。體外藥理試驗(yàn)表明，本發(fā)明中經(jīng)氨基酸化學(xué)改性的熊果酸衍生物對人肝癌HepG2細(xì)胞、人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞、人胃癌AGS細(xì)胞及BGC-823、人前列腺癌細(xì)胞PC-3具有明顯的體外抑制能力。
文檔編號C07J63/00GK102260315SQ20111014615
公開日2011年11月30日 申請日期2011年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月1日
發(fā)明者白鍇凱, 石賢愛, 鄭允權(quán), 郭養(yǎng)浩 申請人:福州大學(xué)