專利名稱：降鈣素基因相關(guān)肽的衍生物的制作方法
降鈣素基因相關(guān)肽的衍生物本發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及新的CGRP衍生物和與其相關(guān)的方面。本
背景技術(shù)：
代謝綜合癥通過肥胖癥、抗胰島素性、血脂異常和高血壓癥來表現(xiàn)。當(dāng)今，利用選擇性治療模式(paradigmes)來治療這四種表現(xiàn)形式。 降鈣素基因相關(guān)的肽(在下文稱為CGRP)是在一些物種中以兩種形式(稱為CGRP- α和CGRP-β (或分別為CGRP-1和CGRP-II))存在的肽。CGRP肽在物種內(nèi)是高度保守的肽。例如，在P印tides 20(1999)，275-84的表I中提到的人和大鼠CGRP肽的氨基酸序列。CGRP是由例如感覺、運(yùn)動(dòng)原和腸道神經(jīng)釋放的。從文獻(xiàn)中可明顯得知，CGRP引發(fā)各種藥理作用，例如I)血管舒張，2)肌肉和肝AMP激酶(AMPK)活化和脂解和/或脂肪氧化，3)降低食物攝入，4)抑制胃排空和改變腸管功能，和5)提高糖酵解和抑制糖原合成。對(duì)所提及的作用的純生理意義還不完全了解，并且沒有出現(xiàn)長(zhǎng)期接觸CGRP的結(jié)果(例如，空腹胰島素、HbAlC和持續(xù)血管舒張)。然而，在新陳代謝病中，AMPK活化、脂肪氧化和降低食物攝入是有利的，已經(jīng)建議糖酵解和抑制糖原合成調(diào)解抗胰島素性。天然的CGRP具有小于30分鐘的半衰期，并且CGRP輸注之后的藥理作用持續(xù)期短是明顯的。由于給予CGRP的血管舒張作用，天然CGRP的體內(nèi)藥理學(xué)研究受到血管舒張和補(bǔ)償性血管收縮繼發(fā)性的效果的影響。由此，血管舒張作用是CGRP的劑量限制性作用，其妨礙了對(duì)與代謝性綜合癥有關(guān)的作用的完全理解。由此，CGRP的藥理學(xué)應(yīng)用需要產(chǎn)生具有長(zhǎng)期作用的CGRP類似物，并且甚至只可以用長(zhǎng)效類似物來獲得一些效果。US 2003/0204063中的權(quán)利要求I涉及肽，其被具有許多合適取代基的選自六個(gè)上位組的1-5個(gè)結(jié)構(gòu)剛性部分取代。在其中的權(quán)利要求2中，舉例說明了 55個(gè)肽，例如，CGRP。但工作實(shí)施例沒有涉及修飾的CGRP。按照其中的權(quán)利要求25，修飾的CGRP具有至少一個(gè)結(jié)構(gòu)剛性部分。本發(fā)明的目的
本發(fā)明的目的是克服或改善現(xiàn)有技術(shù)的至少一個(gè)缺點(diǎn)，或提供有用的替代性技術(shù)。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供具有與CGRP相似的藥理學(xué)性能的化合物，與CGRP所引起的作用相比較，其可以產(chǎn)生長(zhǎng)效作用。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP所產(chǎn)生的藥物動(dòng)力學(xué)性能相比較，其可以導(dǎo)致提高的藥物動(dòng)力學(xué)性能。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP所產(chǎn)生的藥效性能相比較，其可以導(dǎo)致提高的藥效性能。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP所產(chǎn)生的血漿GLP-I值相比較，其可以導(dǎo)致更高的血漿GLP-I值。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供化合物，其可以誘導(dǎo)體內(nèi)GLP-I釋放。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及提供化合物，其可以引起GLP-I從培養(yǎng)的L-細(xì)胞中釋放。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP導(dǎo)致的食物攝入相比較，其可以導(dǎo)致食物攝入降低。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP所引起的能量消耗(expenditure)相比較，其可以導(dǎo)致能量消耗増加。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP所引起的失重相比較，其可以導(dǎo)致失重增加。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，與CGRP導(dǎo)致的血壓降低相比較，其可以導(dǎo)致血壓降低。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其藥理學(xué)性能在很大程度上與CGRP所具有的藥理學(xué)性能相當(dāng)或完全相同。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致血漿、肌肉和肝中的甘油三酯降低。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致HbAlc水平降低。 本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致空腹胰島素水平降低。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致血壓持續(xù)降低。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其在糖尿病前和糖尿病動(dòng)物模型中可以導(dǎo)致胰島素敏感性提高。本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的糖酵解提
聞。 本發(fā)明的另ー個(gè)方面涉及提供化合物，其可以導(dǎo)致哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的AMPK活化提聞。定義
本文中，術(shù)語CGRP化合物包括通式I的化合物 X1Cx2Tx3Tcx4Tx5Rlax6X7Lx8RsggX9X10X11X12X13FVPTX14VX15X16X17X18F(I)
其中 X1 是 Ala 或 Ser, X2 是 Asp 或 Asn, X3 是 Ala 或 Ser, X4 是 Val 或 Ala, X5 是 His 或Gin, X6 是 Gly 或 Asp, X7 是 Leu 或 Phe, X8 是 Ser> Asn 或 Arg, X9 是 Val、Ile、Met 或 Leu, X10: Val、Ala、Leu 或 Gly, X11 是 Lys、Ser、Asn 現(xiàn) His, X12 是 Ser、Asn、Asp、Pro, X13 是 Asp 或Asn, X14 是 Asp 或 Asn, X15 是 Gly 或 Ser, X16 是 Ala 或 Ser, X17 是 Glu、Gln、Lys 或 Asn, X18 是Ala或Ser，并且C端氨基酸殘基中的羧基任選被酰胺化，以及，在式I中，利用編碼氨基酸的常用的ー個(gè)字母來表示具體氨基酸殘基。式I包括，例如，得自于下列物種的CGRP :豬，羊，笑蛙，人，小鼠，馬，狗，大鼠，兩色葉蛙，日本稻魚，日本蛤蚧，日本河豚魚和鮭魚；如果合適的話，所有的都是α和β型。對(duì)于ー些物種，CGRP存在α和β型兩種形式，本文認(rèn)為兩種形式都是CGRP化合物。式I化合物的一個(gè)子組是通式II的化合物X1Cx2Tatcvthrlax6LLx，8rsggx，9x，10kx，12nfvptx14vgsx，17af(ii)
其中 X1 是 Ala 或 Ser, X2 是 Asp 或 Asn, X6 是 Asp 或 Gly, X’ 8 是 Arg 或 Ser, X’ 9 是 Val或 Met, X’ 10 是 Val 或 Leu, X’ 12 是 Asp、Asn 或 Ser, X14 是 Asp 或 Asn, X’ 17 是 Glu 或 Lys,并且C端氨基酸殘基中的羧基任選被酰胺化。式II包括，例如，得自于下列物種的CGRP 豬，小鼠，人，狗和大鼠；如果合適的話，所有的都是α和β型。具體地說，術(shù)語“ CGRP化合物，，包括人CGRP- α，人CGRP- β，大鼠CGRP- α和大鼠CGRP- β和人CGRP- α的類似物，人CGRP-β的類似物，大鼠CGRP-α的類似物和大鼠CGRP-β的類似物。術(shù)語“CGRP化合物”還包括通式I或II化合物的類似物。本文中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物,其中ー個(gè)、兩個(gè) 或三個(gè)氨基酸殘基與另ー個(gè)氨基酸殘基互換，氨基酸殘基缺失，或插入進(jìn)一步的氨基酸殘基。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
ー個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)氨基酸殘基與另ー個(gè)氨基酸殘基互換。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
一個(gè)氨基酸殘基與另ー個(gè)氨基酸殘基互換。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
兩個(gè)氨基酸殘基與另ー個(gè)氨基酸殘基互換。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
三個(gè)氨基酸殘基與另ー個(gè)氨基酸殘基互換。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
氨基酸殘基缺失。在一個(gè)實(shí)施方案中，“通式I或II化合物的類似物”是通式I或II的化合物，其中
摘入進(jìn)一步的氣基酸殘基。通式I或II化合物的類似物的氨基酸編號(hào)與通式I或II化合物的氨基酸編號(hào)ー致。優(yōu)選，插入的氨基酸殘基是可以被核酸(遺傳三聯(lián)體)編碼的氨基酸。此外，術(shù)語“CGRP化合物”還包括具有保守性替換的上述CGRP化合物。本文中，當(dāng)描述蛋白吋，“保守性替換”是指蛋白的氨基酸組成的變化，其中殘基被不會(huì)顯著地改變?cè)摰鞍谆钚缘慕Y(jié)構(gòu)上類似的置換物替代。由此，具體氨基酸序列的“保守置換的變體”是指不決定蛋白活性的氨基酸的氨基酸替代，或用具有類似性能(例如，酸性，堿性，帶正電荷或帶負(fù)電荷，極性或非極性，等等)的另ー個(gè)氨基酸替代氨基酸，這樣就可以使甚至關(guān)鍵氨基酸的替代不會(huì)顯著地改變活性。提供功能上類似的氨基酸的保守性替換表在本領(lǐng)域是眾所周知的。下列六個(gè)組各自包含彼此保守性替換的氨基酸I)丙氨酸、絲氨酸和蘇氨酸，2)門冬氨酸和谷氨酸，3)天冬酰胺和谷氨酰胺，4)精氨酸和賴氨酸，5)異亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸和纈氨酸，和6)苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，上面鑒定的置換不是唯一可能的保守性替換。例如，人們可以認(rèn)為所有帶電的氨基酸作為彼此的保守性替換，無論它們是帶正電或帶負(fù)電。另外，在編碼的序列中，改變、添加或缺失單個(gè)氨基酸或小百分比的氨基酸的單獨(dú)置換、缺失或添加也可以是“保守置換的變體”。所述CGRP化合物在兩個(gè)Cys殘基(通常在2和7位)之間具有常規(guī)分子內(nèi)部的ニ硫橋。本文中，術(shù)語“h-CGRP-α ”、“h_CGRP_ β ”、“r_CGRP_ α ” 和 “r-CGRP- β ” 分別是人CGRP- α、人CGRP- β、大鼠CGRP- α和大鼠CGRP- β的縮寫。本文中，術(shù)語“h-CGRP-I”、“h-CGRP-II”、“r-CGRP-I”和 “r-CGRP-II” 分別是人CGRP- α、人CGRP- β、大鼠CGRP- α和大鼠CGRP- β的同義語。本文中，術(shù)語例如“h-CGRP- α (2_37) ”包括由h_CGRP_ α中的2至37位的氨基酸殘基組成的肽，并且類似地用于其它位置的表示法。
本文中，術(shù)語“氨基酸殘基”包括形式上已經(jīng)從羧基上除去羥基和/或形式上已經(jīng)從氨基上除去氫原子的氨基酸。本文中，術(shù)語例如“Seri”是指氨基酸殘基Ser在CGRP化合物的I位(從N端開始數(shù)起)。同樣，術(shù)語例如“Cys2”是指氨基酸Cys在CGRP化合物的2位(從N端開始數(shù)起)，并且類似地用于其它位置。可以通過核酸編碼的氨基酸的例子是(在括號(hào)中具有常用的三個(gè)字母代碼和ー個(gè)字母代碼):丙氨酸(Ala & A)，精氨酸(Arg & R)，天冬酰胺(Asn & N)，門冬氨酸(Asp& D)，半胱氨酸(Cys & C)，谷氨酸(Glu & E)，谷氨酰胺(Gin & Q)，甘氨酸(Gly & G)，組氨酸(His & H),異亮氨酸(lie & I),亮氨酸(Leu & L)，賴氨酸(Lys & K)，甲硫氨酸(Met& M)，苯丙氨酸(Phe & F)，脯氨酸(Pro & P)，絲氨酸(Ser & S)，蘇氨酸(Thr & T)，色氨酸(Trp & W)，酪氨酸(Tyr & Y)和纈氨酸(Val & V)。如果由于分類錯(cuò)誤而與通常使用的編碼不符合，使用通常使用的編碼為準(zhǔn)。本文中，按照本發(fā)明的?；苌锞哂小伴L(zhǎng)效作用”的表述是指其T1A比相應(yīng)的非衍生化CGRP的T1A長(zhǎng)至少為50%，優(yōu)選至少100%，且更優(yōu)選至少500%。T1A是利用下面章節(jié)(標(biāo)題“CGRP和其類似物的藥物動(dòng)力學(xué)和GLP-I-釋放性能”)中所描述的方法測(cè)定的半衰期。“白蛋白結(jié)合親合性”可以利用本領(lǐng)域已知的ー些方法測(cè)定。在ー個(gè)方法中，所測(cè)定的化合物是用例如125I或3H放射性標(biāo)記的，并且用固定白蛋白培養(yǎng){Biochem. J.，^2(1995), 725-31)。相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)來計(jì)算該化合物的結(jié)合。在另ー個(gè)方法中，相關(guān)化合物是放射性標(biāo)記的，并且它與固定在例如SPA微粒上的白蛋白的結(jié)合與所測(cè)定的衍生物的稀釋系列競(jìng)爭(zhēng)。競(jìng)爭(zhēng)的EC5tl值是衍生物親合性的量度。在第三個(gè)方法中，在不同的白蛋白濃度下測(cè)定化合物的受體親合性或效能，并且與白蛋白濃度有關(guān)的化合物的相對(duì)親合性或效能的變化反映了它對(duì)白蛋白的親合性。
本文中，術(shù)語“藥物動(dòng)力學(xué)性能”包括Cmax和TL本文中，術(shù)語“藥效性能”包括血壓降低，血漿GLP-I水平提高，食物攝入降低，失重，脂質(zhì)氧化増加，糖酵解提高，血漿和組織TG水平降低，能量消耗提高，空腹胰島素水平降低，HbAlc水平降低和胰島素敏感性提高。本文中，“ GLP-1”是由37個(gè)氨基酸殘基組成的所謂的胰高血糖素樣肽I。本文中，“全部GLP-1”是GLP-I和它的主要DDP-IV代謝物GLP-1 (7-37)。本文中，“治療有效量”是指引起研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師所尋求研究的組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物或醫(yī)學(xué)響應(yīng)所計(jì)算得到的藥劑的預(yù)定數(shù)量，例如，足以刺激、預(yù)防、阻止、延遲或逆轉(zhuǎn)疾病或任何其它不合需要癥狀的進(jìn)程、獲得目標(biāo)治療效果的數(shù)量。本文中，“可藥用載體”或“可藥用賦形劑”是指給藥時(shí)不會(huì)引起不利的身體反應(yīng)的載體，并且是治療劑可充分地溶解于其中以便遞送治療有效量的載體。賦形劑的例子包括緩沖的水，生理鹽水，磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，葡萄糖溶液，Hank’s溶液和惰性稀釋劑，例如碳酸鈣，碳酸鈉，乳糖，磷酸鈣或磷酸鈉。本文中，“哺乳動(dòng)物”具有其常規(guī)含義，并且包括靈長(zhǎng)類(例如，人和非人靈長(zhǎng)類)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(例如，嚙齒類，例如小鼠和大鼠)，農(nóng)畜(例如牛，豬，羊和馬)和家畜(例如狗和貓)。本文中，術(shù)語哺乳動(dòng)物的病癥和/或疾病的“治療”是指(i)預(yù)防病癥或疾病，也就是說，防止疾病的任何臨床癥狀；(ii)抑制病癥或疾病，也就是說，阻止臨床癥狀的形成或進(jìn)程；和/或Qii)減輕病癥或疾病，也就是說，引起臨床癥狀的衰退。本文中，“EC5tl值”具有其在本領(lǐng)域中的正常含義，并且是指可導(dǎo)致具體生物效應(yīng)的最大提高的50%的化合物濃度，例如，生物效應(yīng)是其最大值的一半時(shí)的濃度。本發(fā)明概述
本發(fā)明涉及?；腃GRP化合物。附圖的簡(jiǎn)要說明 在圖和與其相關(guān)的文字中，“類似物α I”和“類似物β I”是分別在下面實(shí)施例I和2中具體陳述的本發(fā)明的化合物。此外，在圖中，“ a -CGRP”和“ β -CGRP”分別是人CGRP- α和人 CGRP-β。圖I. a -CGRP、類似物α I和類似物β I的藥物動(dòng)力學(xué)特性和對(duì)血漿GLP-I的同時(shí)效應(yīng)。皮下(在下文稱為s.c.)給予SD大鼠CGRP或本發(fā)明的化合物。通過ELISA方案分析血漿樣品的CGRP和總的GLP-1。以平均值土SEM(η=6)的形式得到數(shù)據(jù)。空心符號(hào)代表接觸數(shù)據(jù)(左側(cè)Y軸)，實(shí)心符號(hào)代表血漿GLP-I水平(右側(cè)Y軸)。圖2.劑量反應(yīng)曲線(cAMP在CGRP-受體表達(dá)細(xì)胞中的積聚)。CGRP和本發(fā)明化合物誘導(dǎo)的循環(huán)AMP在CGRP-受體表達(dá)細(xì)胞中是積聚。通過利用GraphPad Prism軟件，將劑量反應(yīng)曲線擬合，并計(jì)算PEC5tl值。以平均值土SEM(n=2)的形式得到數(shù)據(jù)。圖3. CGRP誘導(dǎo)的GLP-I在腸管L-細(xì)胞系中的釋放。在不含血清的培養(yǎng)基(含有
O.1%牛血清白蛋白(在下文稱為BSA)和O. 005% tween20)中，用CGRP刺激L-細(xì)胞(50, 000個(gè)細(xì)胞/孔)3小時(shí)，通過利用ELISA分析培養(yǎng)基得到GLP-I含量。以平均值土SEM(n=2)的形式得到數(shù)據(jù)。圖4.本發(fā)明的化合物(類似物β I)誘導(dǎo)的累積食物攝入的減少。以平均值土SEM(n=5-8)的形式得到數(shù)據(jù)。對(duì)于s. c.給予本發(fā)明化合物或賦形劑的SD大鼠，在Feedffin裝置中檢測(cè)48小時(shí)的食物攝入。圖5.本發(fā)明的化合物(類似物α I)誘導(dǎo)的累積食物攝入的減少。以平均值土SEM(n=5-8)的形式得到數(shù)據(jù)。對(duì)于腹膜內(nèi)(本文稱為i. P.)給予本發(fā)明化合物或賦形劑的SD大鼠，在FeedWin裝置中檢測(cè)48小時(shí)的食物攝入。圖6.在SD大鼠中，s. c.注射類似物β I之后，類似物β I對(duì)平均動(dòng)脈血壓(MAB)的影響。以平均值土SEM(n=2-4)的形式得到數(shù)據(jù)。通過遙測(cè)技術(shù)連續(xù)地測(cè)定MAB。圖7.在飲食誘導(dǎo)的肥胖(DIO)大鼠中，用類似物α 1(100 nmol/kg, s. c.)或賦形劑急性治療之后，經(jīng)過24小時(shí)的氧消耗(VO2),用AUC(曲線下的面積)表示(n=4-8)。數(shù)據(jù)是平均值土 SEM。(***p〈0.001，t檢驗(yàn))。圖8.在DIO大鼠中，用類似物α 1(100 nmol/kg)或賦形劑急性治療之后，經(jīng)過24小時(shí)的平均呼吸交換率(RER) (n=4-8)。數(shù)據(jù)是平均值+SEM0 (**ρ〈0· 01，t檢驗(yàn))。圖9.在DIO大鼠中，用類似物α 1(100 nmol/kg)或賦形劑s. c.治療14天之后，從基線開始的體重變化(%)。數(shù)據(jù)是平均值土SEM。

圖10.在ob/ob小鼠中，用類似物α I (100 nmol/kg)或賦形劑治療(s.c) 14天之后的HbAlc的變化。數(shù)據(jù)是平均值土SEM(p=0. 09，t檢驗(yàn))。圖11.在ob/ob小鼠中，用類似物α i(100 nmol/kg)或賦形劑治療(s.c) 14天之后的空腹血漿胰島素的變化。數(shù)據(jù)是平均值土SEM(*p〈0. 05，t檢驗(yàn))。序列表 SEQ ID NO. I是存在于下面提到的實(shí)施例I和3所制備化合物中的人CGRP-α (8-36)序列，SEQ ID NO. 2是存在于下面提到的實(shí)施例2所制備化合物中的人CGRP-β (8-36)序列。SEQ ID NO. 3是下面提到的通式I，SEQ ID NO. 4是通式II。本發(fā)明的詳細(xì)說明
在一方面，本發(fā)明涉及通式X-Y-Z的化合物，其中X表示CGRP化合物，形式上已經(jīng)從存在于它的氨基酸殘基中的一個(gè)氨基上除去氫；Υ是本文所定義的連接基<1是?；?；其中-Y-Z部分與存在于CGRP化合物中的氨基酸殘基中所存在的氨基連接。在本發(fā)明的化合物中，?；?以Z表示)和/或與連接基(以Y表示)連接的?；哂凶銐虻陌椎鞍捉Y(jié)合親合性。連接基Y選自下式的六個(gè)基團(tuán)
權(quán)利要求
1.通式X-Y-Z的化合物，其中X表示CGRP化合物，從其中已經(jīng)形式上從存在于氨基酸殘基中的一個(gè)氨基上除去氫，是選自下式六個(gè)基團(tuán)的連接基
2.按照前述權(quán)利要求的化合物，其中存在于Z中的?；从诰哂?2-22個(gè)碳原子的脂肪酸或脂肪二酸。
3.按照前述權(quán)利要求的化合物，其中存在于Z中的?；从诰哂?2-22個(gè)碳原子的脂肪二酸。
4.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中CGRP化合物具有通式I: X1CX2TX3TCX4TX5RLAX6X7LX8RSGGX9X1(lXnX12X13FVPTX14VX15X16X17X18F，其中 X1 是 Ala 或 Ser，X2 是 Asp 或 Asn,X3 是 Ala 或 Ser，X4 是 Val 或 Ala，X5 是 His 或 Gin, X6 是 Gly 或 Asp，X7 是 Leu 或 Phe, X8 是Serλ Asn 或 Arg, X9 是 Val、lie、Met 或 Leu，X10 是 Val、Ala、Leu 或 Gly，X11 是 Lys、Ser、Asn或 His，X12 是 Serλ Asn、Asp、Pro, X13 是 Asp 或 Asn，X14 是 Asp 或 Asn，X15 是 Gly 或 Ser, X16是Ala或Sen X17是Glu、Gin、Lys或Asn，X18是Ala或Sen并且C端氨基酸殘基中的羧基任選被酰胺化，以及，在式I中，利用編碼氨基酸的常用的一個(gè)字母來表示具體氨基酸殘基；和所述CGRP化合物在兩個(gè)Cys殘基(通常在2和7位)之間具有常規(guī)分子內(nèi)部的二硫橋。
5.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的化合物，其中CGRP化合物具有通式II X1CX2TATCVTHRLAX6LLXJ 8RSGGX’ 9X’ 1(IKX’ 12NFVPTX14VGSX’ 17AF，其中 X1 是 Ala 或 Ser，X2 是 Asp 或 Asn，X6是 Asp 或 Gly, X’ 8 是 Arg 或 Ser, X’ 9 是 Val 或 Met, X’ 10 是 Val 或 Leu, X’ 12 是 Asp、Asn 或Ser，X14是Asp或Asn，X’ 17是Glu或Lys，并且C端氨基酸殘基中的羧基任選被酰胺化。
6.按照前述條款的任一項(xiàng)的化合物，其中式-Y-Z的部分在N端氨基酸殘基處[即，I位]與CGRP化合物連接，例如，與Ser連接。
7.按照前述條款的任一項(xiàng)的化合物，在可能的范圍內(nèi)，其中式-Y-Z的部分在賴氨酸殘基處與CGRP化合物連接，例如，在24位或35位。
8.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)本文所描述的新產(chǎn)物，例如，在上述條款的任一項(xiàng)中所描述的新產(chǎn)物。
9.本文所描述的新的用途，例如，在上述條款的任一項(xiàng)中所描述的新的用途。
10.本文所描述的新的治療法，例如，在上述條款的任一項(xiàng)中所描述的新的治療法。
11.在上述實(shí)施例的任一項(xiàng)中所描述的產(chǎn)物，例如，在實(shí)施例1-3中所描述的產(chǎn)物。
12.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的產(chǎn)物，其導(dǎo)致GLP-I的體內(nèi)釋放；導(dǎo)致體重減輕；長(zhǎng)期接觸之后導(dǎo)致HbAlc水平降低；導(dǎo)致空腹胰島素水平降低；導(dǎo)致持續(xù)的血管舒張；和/或?qū)е履芰肯奶岣摺?br> 13.按照前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)的產(chǎn)物，其對(duì)CGRP受體具有效果，導(dǎo)致GLP-I的體內(nèi)釋放；對(duì)CGRP受體具有效果，導(dǎo)致體重減輕；對(duì)CGRP受體具有效果，在長(zhǎng)期接觸之后導(dǎo)致HbAlc水平降低JtCGRP受體具有效果，導(dǎo)致空腹胰島素水平降低JtCGRP受體具有效果，導(dǎo)致持續(xù)血管舒張；和/或?qū)GRP受體具有效果，導(dǎo)致能量消耗提高。
14.本文描述的任何新的特征或特征的組合。
全文摘要
帶有連接基的?；疌GRP化合物作為藥物具有長(zhǎng)期作用并且是有價(jià)值的。
文檔編號(hào)C07K14/585GK102666579SQ201080048722
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2010年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月30日
發(fā)明者A.S.尼爾森, C.尼爾遜, J.F.劉, J.T.科德拉, J.科費(fèi)德, K.勞恩, T.克魯塞 申請(qǐng)人:諾沃—諾迪斯克有限公司