專利名稱：重氮雙環(huán)類smac模擬物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域。尤其是，本發(fā)明涉及Smac的N-末端序列的構(gòu)象約束的模擬物，其發(fā)揮編程性細(xì)胞死亡蛋白抑制劑的作用。本發(fā)明還涉及這些模擬物誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡或使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)敏感的用途。

背景技術(shù)：

侵害性癌細(xì)胞表型是導(dǎo)致胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑失調(diào)的多種遺傳和外遺傳改變的結(jié)果(Ponder，Nature 411336(2001))。然而，所有癌細(xì)胞的共同特征是它們不能執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序，丙因正常編程性細(xì)胞死亡機(jī)器的缺陷而導(dǎo)致的缺乏適當(dāng)?shù)木幊绦约?xì)胞死亡為癌癥的標(biāo)志(Lowe等人，Carcinogenesis 21485(2000))。目前大多數(shù)的癌癥療法，包括化療劑、輻射和免疫療法均通過(guò)間接誘導(dǎo)癌細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡起作用。因此，癌細(xì)胞因正常編程性細(xì)胞死亡機(jī)器中的缺陷而不能執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序通常與對(duì)化療、輻射或免疫療法誘導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡的抗性增加相關(guān)。不同起源的人體癌癥因編程性細(xì)胞死亡缺陷而對(duì)目前治療方案的原發(fā)性或獲得性抗性為目前癌癥療法中的主要問(wèn)題(Lowe等人，Carcinogenesis 21485(2000)；Nicholson，Nature 407810(2000))。因此，目前和未來(lái)對(duì)為改善癌癥患者的存活和生活質(zhì)量而設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)新分子靶特異性抗癌療法的努力必須包括特異性地靶向于對(duì)編程性細(xì)胞死亡耐受的癌細(xì)胞的策略。在這方面，在直接抑制癌細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡方面起重要作用的靶向關(guān)鍵負(fù)調(diào)節(jié)物代表了用于新抗癌藥物設(shè)計(jì)的非常富有前途的治療策略。

已經(jīng)鑒定了兩類編程性細(xì)胞死亡的中心負(fù)調(diào)節(jié)物。第一類調(diào)節(jié)物為Bcl-2家族蛋白，其以兩種有效的抗編程性細(xì)胞死亡分子Bcl-2和Bcl-XL蛋白為典型(Adams等人，Science 2811322(1998)；Reed，Adv.Pharmacol.41501(1997)；Reed等人，J.Cell.Biochem.6023(1996))。已經(jīng)廣泛綜述了在癌癥中靶向于Bcl-2和Bcl-XL以恢復(fù)癌細(xì)胞敏感性并且克服癌細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的抗性的治療策略(Adams等人，Science 2811322(1998)；Reed，Adv.Pharmacol.41501(1997)；Reed等人，J.Cell.Biochem.6023(1996))。幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室致力于設(shè)計(jì)Bcl-2和Bcl-XL的小分子抑制劑。

編程性細(xì)胞死亡的第二類中心負(fù)調(diào)節(jié)物為編程性細(xì)胞死亡蛋白的抑制劑(IAP)(Deveraux等人，Genes Dev.13239(1999)；Salvesen等人，Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.3401(2002))。這一類別包括蛋白質(zhì)例如XIAP、cIAP-1、cIAP-2、ML-IAP、HIAP、KIAP、TSIAP、NAIP、生存素、livin、ILP-2、apollon和BRUCE。IAP蛋白有效抑制相當(dāng)大量廣泛編程性細(xì)胞死亡刺激，包括化療劑、輻射和免疫療法在癌細(xì)胞中誘導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡。

X-連接的IAP(XIAP)為所有IAP成員中在抑制編程性細(xì)胞死亡方面最有效的抑制劑(Holcik等人，Apoptosis 6253(2001)；LaCasse等人，Oncogene 173247(1998)；Takahashi等人，J.Biol.Chem.2737787(1998)；Deveraux等人，Nature 388300(1997)；Sun等人，Nature 401818(1999)；Deveraux等人，EMBO J.185242(1999)；Asselin等人，Cancer Res611862(2001))。XIAP在死亡受體介導(dǎo)的和線粒體介導(dǎo)的兩種途徑中的編程性細(xì)胞死亡負(fù)調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用。XIAP作為有效的內(nèi)源性編程性細(xì)胞死亡抑制劑通過(guò)直接結(jié)合和有效抑制胱天蛋白酶家族酶中的三個(gè)成員胱天蛋白酶-3、-7和-9起作用(Takahashi等人，J.Biol.Chem.2737787(1998)；Deveraux等人，Nature 388300(1997)；Sun等人，Nature 401818(1999)；Deveraux等人，EMBO J.185242(1999)；Asselin等人，Cancer Res.611862(2001)；Riedl等Cell 104791(2001)；Chai等人，Cell 104769(2001)；Huang等人，Cell 104781(2001))。XIAP含有編程性細(xì)胞死亡重復(fù)(BIR)結(jié)構(gòu)域的三個(gè)桿狀病毒抑制劑以及C-末端RING指狀結(jié)構(gòu)。第三個(gè)BIR結(jié)構(gòu)域(BIR3)選擇性靶向胱天蛋白酶-9，即線粒體途徑中的起始物胱天蛋白酶，而B(niǎo)IR1與BIR2之間的連接體區(qū)抑制胱天蛋白酶-3和胱天蛋白酶-7二者(Salvesen等人，Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.3401(2002))。盡管與XIAP的結(jié)合可以防止所有三種胱天蛋白酶活化，但是顯然與胱天蛋白酶-9的相互作用對(duì)其抑制編程性細(xì)胞死亡而言最為關(guān)鍵(Ekert等人，J.Cell Biol.152；483(2001)；Srinivasula等人，Nature 410112(2001))。因?yàn)閄IAP在下游效應(yīng)器階段(即多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)途徑匯集的點(diǎn))阻斷編程性細(xì)胞死亡，所以靶向XIAP的策略可以證實(shí)對(duì)于克服癌細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的抗性是尤其有效的(Fulda等人，Nature Med.8808(2002)；Arnt等人，J.Biol.Chem.27744236(2002))。

盡管XIAP在每種類型癌癥中的確切作用遠(yuǎn)未得到完全了解，但是有證據(jù)確切地表明XIAP在許多類型的癌癥中廣泛過(guò)量表達(dá)，并且可能在癌細(xì)胞對(duì)多種目前的治療劑的抗性中起重要作用(Holcik等人，Apoptosis 6253(2001)；LaCasse等人，Oncogene 173247(1998))。

已發(fā)現(xiàn)XIAP蛋白在大部分NCI 60人癌細(xì)胞系中表達(dá)(Tamm等人，Clin.Cancer Res.61796(2000))。對(duì)在78位預(yù)先未治療的患者的腫瘤樣品的分析表明，那些具有較低水平XIAP的患者具有顯著更長(zhǎng)的存活(Tamm等人，Clin.Cancer Res.61796(2000))。已發(fā)現(xiàn)XIAP在人惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤中表達(dá)(Wagenknecht等人，Cell DeathDiffer.6370(1999)；Fulda等人，Nature Med.8808(2002))。發(fā)現(xiàn)XIAP在人前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)，并且阻斷與Apo2配體/腫瘤壞死因子相關(guān)的編程性細(xì)胞死亡，這種編程性細(xì)胞死亡在有線粒體活化存在下誘導(dǎo)配體介導(dǎo)的前列腺癌細(xì)胞的編程性細(xì)胞死亡(McEleny等人，Prostate 51133(2002)；Ng等人，Mol.Cancer Ther.11051(2002))。XIAP在患者的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中過(guò)量表達(dá)并且與NSCLC的發(fā)病機(jī)制有關(guān)(Hofmann等人，J.Cancer Res.Clin.Oncol.128554(2002))。XIAP的表達(dá)和使用順鉑治療時(shí)XIAP下調(diào)的缺乏與人卵巢癌的順鉑耐藥性有關(guān)(Li等人，Endocrinology 142370(2001)；Cheng等人，Drug Resist.Update 5131(2002))。這些數(shù)據(jù)共同提示，XIAP可能在幾種人癌癥對(duì)目前治療劑的抗性中起重要作用。

血管壁的完整性是血管體內(nèi)穩(wěn)態(tài)和器官功能所必需的。在血管發(fā)展和病理性血管發(fā)生期間，內(nèi)皮細(xì)胞存活和編程性細(xì)胞死亡之間的動(dòng)態(tài)平衡促進(jìn)這種完整性?，F(xiàn)已顯示，cIAP-1是血管發(fā)展期間維持內(nèi)皮細(xì)胞存活和血管體內(nèi)穩(wěn)態(tài)所必需的(Santoro等人，NatureGenetics 391397(2007)。因此，在胚胎發(fā)生、再生和腫瘤發(fā)生期間，cIAP-1可能在控制血管發(fā)生和血管體內(nèi)穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用。

編程性細(xì)胞死亡不是單一過(guò)程，而是涉及許多導(dǎo)致細(xì)胞降解的不同、有時(shí)相互連接的信號(hào)路徑。編程性細(xì)胞死亡的特定形式中涉及的路徑取決于許多因素，例如引發(fā)該過(guò)程的一個(gè)或多個(gè)損害。其它因素包括特定受體的活化或過(guò)度活化，例如由腫瘤壞死因子α(TNFα)、腫瘤壞死因子相關(guān)的編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)性配體(TRAIL或Apo2L)或FAS配體引起的“死亡”受體的活化。另一個(gè)決定性因素是所涉及的細(xì)胞的類型，因?yàn)樵贔as或TNFα受體活化之后所謂的類型I和類型II細(xì)胞顯示不同的信號(hào)路徑。

已經(jīng)顯示TRAIL(Apo2L)在與兩個(gè)促編程性細(xì)胞死亡TRAIL受體中的任意一個(gè)，即TRAIL-R1(或DR4)(Pan等人，Science276111(1997))或TRAIL-R2(KILLER，或DR5)(Wu等人，Nat.Genet.17141-143(1997)；Pan等人，Science 277815(1997)；Walczak等人，EMBO J.165386(1997))結(jié)合后為癌細(xì)胞(而不是正常細(xì)胞)中編程性細(xì)胞死亡的選擇性和有效誘導(dǎo)物。由TRAIL引起的促編程性細(xì)胞死亡性死亡受體的活化引起死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體(DISC)的形成，該復(fù)合體由作為接合體的受體FADD(Kischkel等人，Immunity 12611(2000)；Kuang等人，J.Biol.Chem.27525065(2000))和作為引發(fā)劑胱天蛋白酶的胱天蛋白酶-8構(gòu)成。一旦形成DISC，胱天蛋白酶-8由誘導(dǎo)的親近而自加工和活化(Medema等人，EMBO J.162794(1997)；Muzio等人，J.Biol.Chem.2732926(1998))。

TRAIL作為潛在癌癥治療劑已經(jīng)產(chǎn)生了很大的興趣(French等人，Nat.Med.5146(1999))，因?yàn)槠鋵?duì)癌細(xì)胞的選擇性靶向，而大多數(shù)正常細(xì)胞好象耐受TRAIL(Ashkenazi等人，Science2811305(1998)；Walczak等人，Nat.Med.5157(1999))。TRAIL的系統(tǒng)施用已經(jīng)證明安全和有效地殺死乳腺或結(jié)腸異種移植的腫瘤并延長(zhǎng)小鼠的存活(Walczak等人，Nat.Med.5157(1999))。雖然TRAIL可以特異殺死許多類型癌細(xì)胞，但是許多其它類型癌細(xì)胞顯示TRAIL抗性(Kim等人，Clin.Cancer Res.6335(2000)；Zhang等人，CancerRes.592747(1999))。此外，通過(guò)應(yīng)用特異識(shí)別TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗體(單克隆或多克隆抗體)殺死了癌細(xì)胞。

許多機(jī)理已被鑒定為對(duì)TRAIL抗性負(fù)責(zé)的潛在因素。這些機(jī)理在許多水平上存在，包括在受體水平、線粒體水平、后線粒體水平和DISC水平上。例如，胱天蛋白酶-8表達(dá)的喪失(Teitz等人，Nat.Med.6529(2000)；Griffith等人，J.Immunol.1612833(1998))或細(xì)胞FLICE抑制劑蛋白質(zhì)(cFLIP)的高表達(dá)(Kim等人，Clin.Cancer Res.6335(2000)；Zhang等人，Cancer Res.5927471999；Kataoka等人，J.Immunol.1613936(1998))使得癌細(xì)胞耐受TRAIL。Yeh等人已經(jīng)證實(shí)，cFLIP缺陷性胚胎小鼠成纖維細(xì)胞對(duì)受體介導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡尤其敏感(Yeh等人，Immunity 12533(2000))。cFLIP的若干剪接變體是已知的，包括短剪接變體cFLIP-S和長(zhǎng)剪接變體cFLIP-L。已經(jīng)表明，由于cFLIP-S的逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，cFLIP缺陷性胚胎小鼠成纖維細(xì)胞變得對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡耐受(Bin等人，F(xiàn)EBS Lett.51037(2002))。

雖然TRAIL代表腫瘤選擇性死亡受體活化的潛在有希望的候選物(即，它優(yōu)先在腫瘤細(xì)胞而不是正常組織中引起編程性細(xì)胞死亡)，但是許多癌細(xì)胞對(duì)上述編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)藥物耐受。結(jié)果，用這些藥物的治療通常要求用照射和/或細(xì)胞毒化學(xué)品的共同治療以達(dá)到治療效果。然而，輻射和化療都具有顯著的副作用，并且如有可能一般加以避免。

因此，仍需要可以選擇性地和有效地使腫瘤細(xì)胞對(duì)選擇性編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)藥物例如TRAIL或TRAIL受體抗體敏感，同時(shí)不使周圍正常細(xì)胞敏感的藥劑。此種藥劑還將可用于降低或防止通常與使用受體介導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡癌癥藥物有關(guān)的抗藥性，從而改進(jìn)它們的有效性和消除對(duì)組合治療的需要。

近來(lái)，將Smac/DIABLO(第二種線粒體衍生的胱天蛋白酶激活物)鑒定為響應(yīng)于編程性細(xì)胞死亡刺激物而從線粒體釋放入胞質(zhì)溶膠的蛋白質(zhì)(Budihardjo等人，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.15269(1999)；Du等人，Cell 10233(2000))。使用在成熟為成熟多肽過(guò)程中通過(guò)蛋白水解除去的N-末端線粒體引導(dǎo)肽合成Smac。已證實(shí)Smac與XIAP和其它IAP直接相互作用并且破壞其與胱天蛋白酶的結(jié)合，并促進(jìn)胱天蛋白酶活化。Smac為有效的XIAP內(nèi)源性抑制劑。

近來(lái)已經(jīng)確定了與Smac蛋白和肽相復(fù)合的XIAP的BIR3結(jié)構(gòu)域的高分辨實(shí)驗(yàn)性三維(3D)結(jié)構(gòu)(Sun等人，J.Biol.Chem.27536152(2000)；Wu等人，Nature 4081008(2000))(附

圖1)。Smac的N-末端四肽(Ala-Val-Pro-Ile或AVPI(SEQ ID NO1))通過(guò)幾種氫鍵相互作用和范德瓦耳斯相互作用識(shí)別XIAP的BIR3結(jié)構(gòu)域上的表面溝。還證實(shí)BIR3與胱天蛋白酶-9之間的相互作用涉及胱天蛋白酶-9小亞基的氨基末端上的四個(gè)殘基(Ala-Thr-Pro-Phe或ATPF(SEQ IDNO2))到BIR3結(jié)構(gòu)域上的同一表面溝。近來(lái)幾項(xiàng)研究已經(jīng)令人信服地證實(shí)，Smac通過(guò)與胱天蛋白酶-9競(jìng)爭(zhēng)BIR3結(jié)構(gòu)域表面上的相同結(jié)合溝而促進(jìn)胱天蛋白酶-9的催化活性(Ekert等人，J.Cell Biol.152483(2001)；Srinivasula等人，Nature 410112(2001))。

不同于大部分蛋白-蛋白相互作用，Smac-XIAP相互作用僅由Smac蛋白上的四個(gè)氨基酸殘基和XIAP的BIR3結(jié)構(gòu)域上的明確確定的表面溝介導(dǎo)。Smac肽AVPI(SEQ ID NO1)與XIAP BIR3結(jié)合的Kd值(Kd＝0.4μM)基本上與成熟Smac蛋白相同(Kd＝0.42μM)。這個(gè)明確確定的相互作用位點(diǎn)對(duì)模擬Smac與XIAP之間結(jié)合的非肽類藥物樣小分子的設(shè)計(jì)而言是理想的。

近來(lái)證實(shí)，由與載體肽結(jié)合以促進(jìn)胞內(nèi)遞送的Smac N-末端前四個(gè)氨基酸殘基組成的細(xì)胞可滲透性Smac肽(AVPI(SEQ IDNO1))可以在體外使不同腫瘤細(xì)胞和在體內(nèi)使惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)死亡受體連接或細(xì)胞毒性藥物誘導(dǎo)的編程性細(xì)胞死亡敏感(Fulda等人，Nature Med.8808(2002))。重要的是，這種Smac肽強(qiáng)烈促進(jìn)Apo2L/TRAIL在顱內(nèi)惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的體內(nèi)異種移植物模型中的抗腫瘤活性。完全根除已建立的腫瘤和小鼠的存活僅在使用Smac肽類和Apo2L/TRAIL的聯(lián)合療法時(shí)得以實(shí)現(xiàn)。具有重要意義的是，Smac肽對(duì)正常腦組織沒(méi)有可檢測(cè)到的毒性。

第二項(xiàng)近期的獨(dú)立研究還證實(shí)，由與不同載體肽結(jié)合的Smac N-末端前4-8個(gè)氨基酸殘基組成的肽促進(jìn)了編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)和不同化療藥，包括紫杉醇、依托泊苷、SN-38和多柔比星在MCF-7和其它人乳腺癌細(xì)胞系中的長(zhǎng)程抗增殖作用(Arnt等人，J.Biol.Chem.27744236(2002))。該研究結(jié)論性地證實(shí)，XIAP和cIAP-1為這些肽類在細(xì)胞中的主要分子靶。

第三項(xiàng)研究證實(shí)，與聚精氨酸結(jié)合的前7個(gè)N-末端殘基的Smac肽在非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞中可恢復(fù)凋亡體活性并且逆轉(zhuǎn)編程性細(xì)胞死亡抗性(Yang等人，Cancer Res.63831(2003))。已證實(shí)XIAP負(fù)責(zé)H460細(xì)胞中凋亡體活性的缺乏和胱天蛋白酶活性的抑制。當(dāng)與化療聯(lián)用時(shí)，細(xì)胞可滲透的Smac肽使鼠體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)退化，而對(duì)小鼠幾乎沒(méi)有毒性。這些近期獨(dú)立的研究共同強(qiáng)烈提示，有效的穩(wěn)定的細(xì)胞可滲透Smac肽模擬物可能對(duì)人乳腺癌和其它類型的癌癥具有顯著的治療潛能。

基于肽的抑制劑為闡明IAP的抗編程性細(xì)胞死亡功能和IAP在癌細(xì)胞對(duì)化療劑的響應(yīng)方面的作用的有用工具。但基于肽的抑制劑作為可能有用的治療劑一般存在內(nèi)在局限性。這些限制包括其細(xì)胞滲透性差和體內(nèi)穩(wěn)定性差。實(shí)際上，在這三項(xiàng)發(fā)表的使用基于Smac的肽抑制劑的研究中，所述的肽類必須與載體肽類融合以使其具有相對(duì)的細(xì)胞滲透性。

為了克服基于肽的抑制劑的內(nèi)在局限性，本發(fā)明涉及構(gòu)象約束的Smac模擬物的設(shè)計(jì)。
發(fā)明概述
普遍認(rèn)為，癌細(xì)胞或它們的支持細(xì)胞不能對(duì)基因損傷或暴露于編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑(例如抗癌藥和輻射)反應(yīng)而經(jīng)歷編程性細(xì)胞死亡是癌癥發(fā)生和進(jìn)展的主要因素。在癌細(xì)胞或它們的支持細(xì)胞(例如，腫瘤維管結(jié)構(gòu)中的新血管細(xì)胞)中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡被認(rèn)為是目前市場(chǎng)上或?qū)嵺`中實(shí)質(zhì)上所有有效癌癥治療藥物或放射治療的通用作用機(jī)制。細(xì)胞不能經(jīng)歷編程性細(xì)胞死亡的一種原因是IAP的表達(dá)和蓄積增加。

本發(fā)明考慮到，患有癌癥或其它與編程性細(xì)胞死亡失調(diào)有關(guān)的增殖性障礙或疾病的動(dòng)物暴露于治療有效量的抑制IAP的功能的藥物(例如，小分子)，將徹底殺滅所述患病的細(xì)胞或支持細(xì)胞(持續(xù)存活依賴于IAP的過(guò)度活性或過(guò)量表達(dá)的那些細(xì)胞)和/或使該細(xì)胞成為對(duì)癌癥治療藥物或放射療法的細(xì)胞死亡誘導(dǎo)活性更敏感的群體。本發(fā)明考慮到，IAP的抑制劑，當(dāng)作為單一療法給藥用于誘導(dǎo)依賴于IAP功能的癌細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡時(shí)，或當(dāng)與其它細(xì)胞死亡誘導(dǎo)性癌癥治療藥物或放射療法暫時(shí)結(jié)合以便使更大比例的癌細(xì)胞或支持細(xì)胞(與只單獨(dú)使用所述癌癥治療藥物或放射療法治療的動(dòng)物中的相應(yīng)群體的細(xì)胞相比)對(duì)執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序更敏感時(shí)，滿足了治療多種癌癥類型的未滿足的需求。

本發(fā)明還考慮到，用治療有效量的抑制IAP(例如，cIAP-1)的功能的藥物(例如，小分子)治療患有內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)的疾病(例如，腫瘤血管發(fā)生、視網(wǎng)膜病變和動(dòng)脈粥樣硬化)的動(dòng)物，可以防止或抑制血管發(fā)生并在病理狀況中的血管發(fā)展期間破壞血管體內(nèi)穩(wěn)態(tài)?？梢杂帽景l(fā)明化合物治療的具體障礙包括黃斑變性、內(nèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早熟的視網(wǎng)膜病變、角膜移植排斥、新血管性青光眼、晶狀體后纖維組織形成、發(fā)紅、Osler-Webber綜合征、心肌血管發(fā)生、噬斑新血管化、毛細(xì)管擴(kuò)張、血友病性關(guān)節(jié)、血管纖維瘤、傷口顆粒形成、腸粘連、動(dòng)脈粥樣硬化、硬皮病和肥大性疤痕。

申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，與碳環(huán)基類似物(例如，SM-122)相比，向雙環(huán)系統(tǒng)中插入NR5對(duì)與XIAP的結(jié)合具有某些意想不到的影響(圖表1)。例如，SM-245P3(R5＝Me)和SM-246P(R5＝Bn)與XIAP BIR3的結(jié)合親和性和在MDA-MB-231和SK-OV-3癌細(xì)胞系中的細(xì)胞活性小于SM-122。令人意想不到的是，SM-337(R5＝COCH2Ph)和SM-406(R5＝COCH2CH(CH3)2與XIAP BIR3的結(jié)合親和性和在MDA-MB-231和SK-OV-3癌細(xì)胞系中的細(xì)胞活性等于或好于SM-122。申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，除了某些生物學(xué)性質(zhì)以外，相對(duì)于SM-122，SM-406和其它有關(guān)的類似物還在口服生物利用度方面表現(xiàn)出令人意想不到的提高。
圖表1

申請(qǐng)人還發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物當(dāng)與其它抗癌藥(例如，

泰索帝、吉西他濱、米托蒽醌、依托泊苷)聯(lián)合時(shí)，在癌細(xì)胞系中表現(xiàn)出令人意想不到的體外活性的提高。另外，申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物當(dāng)與其它抗癌藥(例如，

泰索帝、吉西他濱)聯(lián)合時(shí)，在體內(nèi)癌癥異種移植模型中表現(xiàn)出令人意想不到的平均腫瘤體積的減小。因此，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，用治療有效量的本發(fā)明的化合物和一病程的抗癌藥或輻射聯(lián)合治療動(dòng)物，在該動(dòng)物中產(chǎn)生更大的腫瘤反應(yīng)和臨床益處(與單獨(dú)使用所述化合物或抗癌藥物/輻射治療的動(dòng)物相比)。另一方面，因?yàn)楸景l(fā)明的化合物降低了所有表達(dá)IAP的細(xì)胞的編程性細(xì)胞死亡閾值，增加了對(duì)抗癌藥物/輻射的編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)活性反應(yīng)而成功執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序的細(xì)胞的比例?？商娲?，本發(fā)明的化合物可用于允許給予更低(并因此毒性更小和更耐受)劑量的抗癌藥和/或輻射，以產(chǎn)生與單獨(dú)使用常規(guī)劑量的抗癌藥/輻射相同的腫瘤反應(yīng)/臨床益處。因?yàn)樗斜慌鷾?zhǔn)的抗癌藥物和輻射治療的劑量是已知的，所以本發(fā)明考慮到了它們與本發(fā)明的化合物的不同組合。另外，因?yàn)楸景l(fā)明的化合物至少部分地通過(guò)抑制IAP起作用，所以可以暫時(shí)將癌細(xì)胞和支持細(xì)胞暴露于治療有效量的所述化合物連接，以使細(xì)胞對(duì)所述抗癌藥或輻射治療反應(yīng)而執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序的意圖一致。因此，在一些實(shí)施方案中，聯(lián)合某些暫時(shí)關(guān)系給予本發(fā)明的組合物，提供特別有效的治療實(shí)踐。

本發(fā)明涉及Smac模擬物，其適用于抑制IAP蛋白的活性，尤其是增加細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑的敏感性。在一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，所述Smac模擬物是式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中 A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在； V選自N、CH和O； W選自CH和N； X選自氫和任選被取代的C1-3烷基； Y選自CONH、NHCO、C(O)O、OC(O)、(CH2)1-3(其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代)、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； Z是(CR1R2)r； D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m； J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q； T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、S＝O、SO2、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； U選自H、NR1R2、N(R1)COR7、OR1、SR1、任選被取代的烷基、任選被取代的芳基和雜芳基； n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5； r是0-3； 各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7； R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1；以及 R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，Smac模擬物是具有通式II的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中 A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在； V選自N、CH和O； W選自CH和N； X是任選被取代的C1-3烷基； Y選自CONH、C(O)O、(CH2)1-3(其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代)、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m； J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q； T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； U選自H、NR1R2、OR1、SR1、任選被取代的烷基和任選被取代的芳基； n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5； 各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7； R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1； R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述任選的取代基不包括羧酸、任選被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基或鹵代烷基取代的環(huán)烷基或任選被芳基取代的芳基，并且任選被取代的雜環(huán)基不包括氧代哌嗪基。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式III的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式V的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VI的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義，并且X是任選被取代的烷基。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VII的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VIII的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式IX的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式X的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

本發(fā)明涉及由式I-X表示的化合物，其是IAP蛋白的抑制劑。本發(fā)明涉及本發(fā)明的化合物誘導(dǎo)細(xì)胞中編程性細(xì)胞死亡和抑制血管發(fā)生的用途。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感的用途。所述化合物適用于治療、減輕或預(yù)防對(duì)誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡有反應(yīng)的障礙，例如，特征在于編程性細(xì)胞死亡失調(diào)的障礙，包括過(guò)度增殖性疾病例如癌癥。在一些實(shí)施方案中，所述化合物可用于治療、減輕或預(yù)防特征在于對(duì)癌癥療法耐受的癌癥(例如，那些化學(xué)耐受性、輻射耐受性、激素耐受性等的癌癥)。在其它實(shí)施方案中，所述化合物可用于治療特征在于過(guò)量表達(dá)IAP的過(guò)度增殖性疾病。在其它實(shí)施方案中，所述化合物可以用作在有此需要的動(dòng)物中防止或抑制血管發(fā)生的方法。

本發(fā)明提供藥物組合物，其包含誘導(dǎo)細(xì)胞中編程性細(xì)胞死亡或使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感治療上有效的量的式I-X的化合物。

本發(fā)明還提供藥劑盒(kit)，其包含式I的化合物和將所述化合物給予動(dòng)物的用法說(shuō)明。該藥劑盒可以任選地含有其它治療劑，例如，抗癌藥或編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑。

本發(fā)明還提供用于制備式XI化合物的方法
其中 A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在； V選自N、CH和O； W選自CH和N； X選自氫和任選被取代的C1-3烷基； Y選自CONH、NHCO、C(O)O、OC(O)、(CH2)1-3(其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代)、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； Z是(CR1R2)r； T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、S＝O、SO2、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； U選自H、NR1R2、N(R1)COR7、OR1、SR1、任選被取代的烷基、任選被取代的芳基和雜芳基； m是1或2； r是0-3； 各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；以及 R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； 該方法包括將式XII的化合物
其中A1、A2、V、W、X、Y、Z、T、U和m具有上文關(guān)于式XI所述的含義， 與R7CO-L縮合， 其中 R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；以及 L是離去基團(tuán)，形成式XI的化合物。

本發(fā)明還提供用于制備式XIX化合物的方法
其中m是1或2，并且P1是胺保護(hù)基團(tuán)，該方法包括 a)將式XX的化合物
與式XXI的化合物縮合，
其中P1和P2是胺保護(hù)基團(tuán)并且P1不等于P2，得到式XXII的化合物
b)將式XXII的烯烴轉(zhuǎn)化成醛，得到式XXIII的化合物；
c)除去式XXIII化合物的P2，得到式XXIV的化合物；

以及 d)還原式XXIV化合物的C＝N雙鍵，得到式XIX的化合物。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
圖1是說(shuō)明SM-406(AT-406)在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖2是說(shuō)明SM-406(AT-406)和泰索帝在前列腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖3是說(shuō)明SM-406(AT-406)和

在前列腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖4是說(shuō)明SM-406(AT-406)和泰索帝在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖5是說(shuō)明SM-406(AT-406)和

在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖6是說(shuō)明SM-406(AT-406)和吉西他濱在胰腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性的圖。

圖7是說(shuō)明SM-406(AT-406)在乳腺癌異種移植模型中的劑量方案最優(yōu)化研究的圖。

圖8是說(shuō)明SM-406在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系、SK-OV-3和OVCAR-4卵巢癌細(xì)胞系以及SK-Mel-2黑素瘤癌細(xì)胞系中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖9是說(shuō)明SM-406在HL-60和SR白血病細(xì)胞系中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖10是說(shuō)明SM-406在BT-549、MDA-MB-415、SUM-159、MDA-MB-468、MDA-MB-453和2LMP人乳腺癌細(xì)胞系中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖11是說(shuō)明TNFα聯(lián)合SM-406在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-436中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖12是說(shuō)明TNFα聯(lián)合SM-406在人乳腺癌細(xì)胞系SUM-159中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖13是說(shuō)明TRAIL聯(lián)合SM-406在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖14是說(shuō)明TRAIL聯(lián)合SM-406在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231(2LMP)中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖15是說(shuō)明吉西他濱聯(lián)合SM-406在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖16是說(shuō)明米托蒽醌聯(lián)合SM-406在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖17是說(shuō)明SM-406聯(lián)合roscovitine(Ros)在人前列腺細(xì)胞系PC3中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖18是說(shuō)明泰索帝(TXT)聯(lián)合SM-406在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-453中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖19是說(shuō)明VP-16聯(lián)合SM-406在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的圖。

圖20是說(shuō)明Smac模擬物對(duì)MDA-MB-231癌細(xì)胞中cIAP-1蛋白的影響的圖。

圖21是說(shuō)明Smac模擬物對(duì)SK-OV-3癌細(xì)胞中cIAP-1/2蛋白的影響的圖。

圖22是說(shuō)明SM-406在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的圖。

圖23是說(shuō)明SM-406在SK-OV-3卵巢癌細(xì)胞中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的圖。

圖24是說(shuō)明SM-406在Panc-1胰腺癌細(xì)胞中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的圖。

圖25是說(shuō)明SM-406在嚴(yán)重并發(fā)性免疫缺陷型(SCID)小鼠中的人乳腺癌的MDA-MB-231異種移植模型中抑制腫瘤生長(zhǎng)的圖。

圖26是說(shuō)明SM-406在裸鼠中人前列腺癌的PC-3異種移植模型中抑制腫瘤生長(zhǎng)的圖。

圖27是說(shuō)明SM-406在裸鼠中人乳腺癌的2LMP異種移植模型中抑制腫瘤生長(zhǎng)的的圖。

圖28是一系列說(shuō)明SM-406和SM-428與IAP蛋白的四個(gè)成員((A)XIAP；(B)cIAP1；(C)cIAP2；(D)ML-IAP)的BIR3結(jié)構(gòu)域競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合曲線的圖，其是使用基于熒光偏振的結(jié)合試驗(yàn)測(cè)定的。
本發(fā)明的詳細(xì)描述
本發(fā)明涉及由式I-X表示的構(gòu)象約束的化合物，其是Smac的模擬物并且發(fā)揮IAP抑制劑的作用。這些化合物使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感，在一些情況下，它們本身通過(guò)抑制IAP而誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡。因此，本發(fā)明涉及使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感的方法和在細(xì)胞中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的方法，其包括使細(xì)胞與式I-X的化合物(單獨(dú)或聯(lián)合編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑)接觸。本發(fā)明進(jìn)一步涉及在動(dòng)物中治療、緩解或預(yù)防對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)有反應(yīng)的障礙的方法，該方法包括將式I-X的化合物和編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑給予所述動(dòng)物。所述障礙包括那些特征在于編程性細(xì)胞死亡失調(diào)的障礙和那些特征在于IAP過(guò)量表達(dá)的障礙。本發(fā)明進(jìn)一步涉及在有其需要的動(dòng)物中防止或抑制血管發(fā)生的方法，該方法包括將式I-X的化合物給予所述動(dòng)物。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“IAP蛋白”指的是編程性細(xì)胞死亡蛋白家族抑制劑中的任意已知的成員，包括，但不限于XIAP、cIAP-1、cIAP-2、ML-IAP、HIAP、TSIAP、KIAP、NAIP、生存素、livin、ILP-2、apollon和BRUCE。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“IAP過(guò)量表達(dá)”指的是細(xì)胞中與表達(dá)編碼IAP蛋白的mRNA基礎(chǔ)水平或具有IAP蛋白基礎(chǔ)水平的類似相應(yīng)非病理學(xué)細(xì)胞相比，編碼IAP蛋白的mRNA水平升高(例如異常水平)和/或IAP蛋白的水平升高。用于檢測(cè)細(xì)胞中編碼IAP蛋白的mRNA水平或IAP蛋白水平的方法包括，但不限于使用IAP蛋白抗體的蛋白質(zhì)印跡、免疫組織化學(xué)法和核酸擴(kuò)增或直接RNA檢測(cè)法。與細(xì)胞中IAP蛋白的絕對(duì)水平同樣重要的是測(cè)定它們過(guò)量表達(dá)IAP蛋白，同樣重要的還有這類細(xì)胞中IAP蛋白與其他促編程性細(xì)胞死亡信號(hào)分子(例如促編程性細(xì)胞死亡Bcl-2族蛋白)相比的相對(duì)水平。當(dāng)這兩種水平的平衡使得若不是由于IAP蛋白水平，促編程性細(xì)胞死亡信號(hào)分子將足以使細(xì)胞進(jìn)行編程性細(xì)胞死亡程序并且死亡時(shí)，所述的細(xì)胞的存活將依賴于IAP蛋白。在這類細(xì)胞中，接觸抑制有效量的IAP蛋白抑制劑將足以使細(xì)胞進(jìn)行編程性細(xì)胞死亡程序并且死亡。因此，術(shù)語(yǔ)“IAP蛋白的過(guò)量表達(dá)”還指細(xì)胞，其因促編程性細(xì)胞死亡信號(hào)和抗編程性細(xì)胞死亡信號(hào)的相對(duì)水平，響應(yīng)抑制有效量的抑制IAP蛋白功能的化合物而發(fā)生編程性細(xì)胞死亡。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“抗癌劑”和“抗癌藥”指的是用于治療過(guò)度增殖性疾病，例如癌癥(例如哺乳動(dòng)物中)的任意治療劑(例如化療性化合物和/或分子治療性化合物)、放療或外科手術(shù)干預(yù)。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“前藥”指的是需要在靶生理系統(tǒng)中生物轉(zhuǎn)化(例如自發(fā)或酶促)以將前藥釋放或轉(zhuǎn)化(例如通過(guò)酶、生理、機(jī)械、電磁方式)成活性藥物的母體“藥物”分子的藥理學(xué)上無(wú)活性的衍生物。設(shè)計(jì)前藥是為了克服與穩(wěn)定性、毒性、缺乏特異性或有限的生物利用度相關(guān)的問(wèn)題。示例性前藥包括活性藥物分子自身和化學(xué)掩蔽基團(tuán)(例如可逆地抑制所述藥物活性的基團(tuán))。某些優(yōu)選的前藥為具有在代謝條件下可裂解的基團(tuán)的化合物的變型或衍生物。示例性前藥在它們?cè)谏項(xiàng)l件進(jìn)行進(jìn)行溶劑解或進(jìn)行酶降解或其它生物轉(zhuǎn)化(例如磷酸化、氫化、脫氫、糖基化)時(shí)，在體內(nèi)或體外變成具有藥學(xué)活性。前藥通常提供在哺乳動(dòng)物生物體中溶解度、組織相容性或延緩釋放的優(yōu)點(diǎn)(例如，參見(jiàn)Bundgard，Design of Prodrugs，pp.7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam(1985)；以及Silverman，The Organic Chemistry of DrugDesign and Drug Action，pp.352-401，Academic Press，San Diego，CA(1992))。常用的前藥包括酸衍生物，例如通過(guò)使母體酸與合適的醇(例如低級(jí)鏈烷醇)反應(yīng)制備的酯類，通過(guò)使母體酸化合物與胺反應(yīng)制備的酰胺類，或反應(yīng)生成酰化堿性衍生物的堿性基團(tuán)(例如低級(jí)烷基酰胺)。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥物上可接受的鹽”指的是在靶動(dòng)物(例如哺乳動(dòng)物)體內(nèi)為生理上耐受的本發(fā)明化合物的任意鹽(例如通過(guò)與酸或堿反應(yīng)獲得)。本發(fā)明化合物的鹽可以產(chǎn)生于無(wú)機(jī)酸和堿或者有機(jī)酸和堿。酸的實(shí)例包括，但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、馬來(lái)酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。其它盡管自身并非藥物上可接受的酸，例如草酸，可以用于制備可用作獲得本發(fā)明化合物及其藥物上可接受的酸加成鹽的中間體。

堿的實(shí)例包括，但不限于堿金屬(例如鈉)氫氧化物、堿土金屬(例如鎂)氫氧化物、氨和通式NW4+的化合物，其中W為C1-4烷基，等。

鹽的實(shí)例包括，但不限于乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽(digluconate)、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、氟庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、膠質(zhì)酸鹽、過(guò)硫酸鹽、苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一酸鹽等。鹽的其它實(shí)例包括與合適的陽(yáng)離子諸如Na+、NH4+和NW4+(其中W為C1-4烷基)化合的本發(fā)明化合物的陰離子等。為了治療應(yīng)用，將本發(fā)明化合物的鹽考慮為藥物上可接受的鹽。然而，例如，非藥物上可接受的酸和堿的鹽也可以應(yīng)用于制備或純化藥物上可接受的化合物。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指的是足以使得疾病的一種或多種癥狀改善或者預(yù)防疾病進(jìn)展或者導(dǎo)致疾病退化的治療劑的用量。例如，就治療癌癥而言，治療有效量?jī)?yōu)選指的是減小腫瘤生長(zhǎng)速率、減小腫瘤質(zhì)量、減少轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)量、增加腫瘤進(jìn)展的時(shí)間或增加存活時(shí)間至少5％，優(yōu)選至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％或至少100％的治療劑用量。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“致敏”和“敏化”指的是通過(guò)給予第一藥劑(例如通式I的化合物)使動(dòng)物或動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)胞對(duì)第二藥劑的生物作用(例如促進(jìn)或阻滯細(xì)胞功能的方面，包括，但不限于細(xì)胞分裂、細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、侵害、血管發(fā)生或編程性細(xì)胞死亡)更為敏感或更具響應(yīng)性?？梢詫⒌谝凰巹?duì)靶細(xì)胞的致敏效應(yīng)以在與和不與第一藥劑一起施用第二藥劑時(shí)觀察到的想要的生物作用(例如促進(jìn)或阻滯細(xì)胞功能的方面，包括，但不限于細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、侵害、血管發(fā)生或編程性細(xì)胞死亡)的差異來(lái)度量。致敏細(xì)胞的響應(yīng)可以比在沒(méi)有第一藥劑存在下的響應(yīng)增加至少10％，至少20％，至少30％，至少40％，至少50％，至少60％，至少70％，至少80％，至少90％，至少100％，至少150％，至少200％，至少350％，至少300％，至少350％，至少400％，至少450％或至少500％。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“編程性細(xì)胞死亡的失調(diào)”指的是細(xì)胞通過(guò)編程性細(xì)胞死亡發(fā)生細(xì)胞死亡(例如傾向性)的能力上的任何異常。編程性細(xì)胞死亡的失調(diào)與多種狀況相關(guān)或由它們誘導(dǎo)，包括例如，自身免疫性疾病(例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植物抗宿主病、重癥肌無(wú)力或斯耶格侖綜合征)、慢性炎癥狀況(例如銀屑病、哮喘或克羅恩病)、過(guò)度增殖性疾病(例如腫瘤、B細(xì)胞淋巴瘤或T細(xì)胞淋巴瘤)、病毒感染(例如皰疹、乳頭瘤或HIV)和其它狀況，例如骨關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈粥樣硬化。應(yīng)注意，當(dāng)這種失調(diào)由病毒感染誘導(dǎo)或與之相關(guān)時(shí)，在發(fā)生或觀察到失調(diào)時(shí)可能檢測(cè)到病毒感染，也可能未檢測(cè)到病毒感染。即，病毒-誘導(dǎo)的失調(diào)甚至可能在病毒感染癥狀消失后發(fā)生。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“血管發(fā)生”意指新血管向組織或器官中的發(fā)生。本文所用的術(shù)語(yǔ)“抗血管發(fā)生”是指預(yù)防或減少新血管的生長(zhǎng)?？梢杂帽景l(fā)明化合物治療的與血管發(fā)生有關(guān)的疾病或障礙的實(shí)例包括黃斑變性、內(nèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早熟的視網(wǎng)膜病變、角膜移植排斥、新血管性青光眼、晶狀體后纖維組織形成、發(fā)紅、Osler-Webber綜合征、心肌血管發(fā)生、噬斑新血管化、毛細(xì)管擴(kuò)張、血友病性關(guān)節(jié)、血管纖維瘤、傷口顆粒形成、腸粘連、動(dòng)脈粥樣硬化、硬皮病和肥大性疤痕。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“過(guò)度增殖性疾病”指的是動(dòng)物體內(nèi)局限化群體的增殖細(xì)胞不受通常的正常生長(zhǎng)限制的控制。過(guò)度增殖性疾病的實(shí)例包括但不局限于癌癥(例如腫瘤、贅生物、淋巴瘤等)或自身免疫性障礙。如果贅生物未發(fā)生侵害或轉(zhuǎn)移，那么認(rèn)為贅生物為良性的；如果這兩種情況中發(fā)生一種，那么認(rèn)為是惡性的?！稗D(zhuǎn)移”細(xì)胞指的是細(xì)胞可以侵入和破壞附近的機(jī)體結(jié)構(gòu)。增生是細(xì)胞增殖的一種形式，包括組織或器官中的細(xì)胞數(shù)量增加，而結(jié)構(gòu)或功能沒(méi)有顯著改變。組織變形是受控細(xì)胞生長(zhǎng)的一種形式，其中一種類型的完全分化細(xì)胞取代了另一種類型的分化細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，過(guò)度增殖性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、骨關(guān)節(jié)炎、平滑肌瘤、腺瘤、脂肪瘤、血管瘤、纖維瘤、血管閉塞、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、腫瘤前病變(例如腺瘤樣增生和前列腺上皮內(nèi)瘤形成)、原位癌、口毛發(fā)性白斑病或銀屑病。

活化淋巴樣細(xì)胞的病理性生長(zhǎng)通常導(dǎo)致自身免疫性疾病或慢性炎癥疾病。本文所用的術(shù)語(yǔ)“自身免疫性疾病”指的是生物產(chǎn)生識(shí)別生物自身分子、細(xì)胞或組織的抗體或免疫細(xì)胞的任何狀況。自身免疫性疾病的非限制性實(shí)例包括自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、貝格爾病或IgA腎病、口炎性腹瀉、慢性疲勞綜合征、克羅恩病、皮肌炎、纖維肌痛、移植物抗宿主病、格雷夫斯病、橋本甲狀腺炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、扁平苔癬、多發(fā)性硬化、重癥肌無(wú)力、銀屑病、風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、斯耶格倫綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、1型糖尿病、潰瘍性結(jié)腸炎、白癜風(fēng)等。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“腫瘤性疾病”指的是為良性(非癌性)或惡性(癌性)的任何異常細(xì)胞生長(zhǎng)。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“抗腫瘤劑”指的是阻止被靶向的(例如惡性)贅生物增殖、生長(zhǎng)或擴(kuò)散的任意化合物。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”指的是動(dòng)物體內(nèi)病理細(xì)胞(例如過(guò)度增殖性或贅生性細(xì)胞)的出現(xiàn)的減少。預(yù)防可以為完全性的，例如受試者體內(nèi)的病理細(xì)胞完全不存在。預(yù)防還可以為部分的，使得受試者體內(nèi)出現(xiàn)的病理細(xì)胞少于未使用本發(fā)明而出現(xiàn)的病理細(xì)胞。

本文所使用的術(shù)語(yǔ)“編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑”是指與調(diào)節(jié)編程性細(xì)胞死亡(例如，抑制、減少、增加、促進(jìn))有關(guān)的藥劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，編程性細(xì)胞死亡的調(diào)節(jié)劑是編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑”是指誘導(dǎo)細(xì)胞(例如癌細(xì)胞)中編程性細(xì)胞死亡、使那些細(xì)胞更易執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序。在一個(gè)實(shí)施方案中，誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的藥劑是抗癌藥。編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括蛋白(其包含死亡結(jié)構(gòu)域)，例如但不限于Fas/CD95、TRAMP、TNF RI、DR1、DR2、DR3、DR4、DR5、DR6、FADD和RIP。編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑的其它實(shí)例包括但不限于，TNFα、Fas配體、Fas/CD95及其它TNF家族受體的抗體、TRAIL(亦稱為Apo2配體或Apo2L/TRAIL)、TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑(例如，單克隆或多克隆激動(dòng)性抗體)、Bcl-2、p53、BAX、BAD、Akt、CAD、PI3激酶、PP1和胱天蛋白酶蛋白。調(diào)節(jié)劑廣泛地包括TNF家族受體和TNF家族配體的激動(dòng)劑和拮抗劑。編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑可以是可溶性的或膜結(jié)合的(例如配體或受體)。優(yōu)選的編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑是編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)物，例如TNF或TNF相關(guān)的配體，尤其是TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體或TRAIL。

本發(fā)明的IAP抑制劑是Smac模擬物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，其具有通式I
其中 A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在； V選自N、CH和O； W選自CH和N； X選自氫和任選被取代的C1-3烷基； Y選自CONH、NHCO、C(O)O、OC(O)、(CH2)1-3(其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代)、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； Z是(CR1R2)r； D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m； J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q； T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、S＝O、SO2、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； U選自H、NR1R2、N(R1)COR7、OR1、SR1、任選被取代的烷基、任選被取代的芳基和雜芳基； n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5； r是0-3； 各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7； R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1；以及 R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。

在一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式II的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中 A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在； V選自N、CH和O； W選自CH和N； X是任選被取代的C1-3烷基； Y選自CONH、C(O)O、(CH2)1-3(其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代)、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m； J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q； T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； U選自H、NR1R2、OR1、SR1、任選被取代的烷基和任選被取代的芳基； n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5； 各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基； R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7； R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1；以及 R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述任選的取代基不包括羧酸；任選被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基或鹵代烷基取代的環(huán)烷基；或任選被芳基取代的芳基；并且任選被取代的雜環(huán)基不包括氧代哌嗪基。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m為3或4。在另一個(gè)實(shí)施方案中，p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q為1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m為3或4并且p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q為1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m是3或4，p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q是1并且T是C＝O。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m是3或4，p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q是1并且U是NR1R2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m是3或4，p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q是1并且R6是CH2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m是3或4，p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q是1，Y是CONH，W是CH并且V是N。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基和雜任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式III的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式II所述的含義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式II所述的含義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式V的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有上文關(guān)于式II所述的含義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VI的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、R5、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義，以及X是任選被取代的烷基。

在一個(gè)實(shí)施方案中，A1、A2、X、R5、T和U具有上文關(guān)于式II所述的含義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VII的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是CONH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式VIII的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是CONH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式IX的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是CONH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

在另一個(gè)特殊的實(shí)施方案中，Smac模擬物是式X的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中A1、A2、V、W、X、Y、R5、T和U具有與上文關(guān)于式I所述相同的含義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，W是CH，V是N，T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是CONH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A1是任選被取代的烷基并且A2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基選自任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代的芳基，以及R2是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-CHPh2。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是任選被取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-CH2CH(CH3)2。

有用的烷基包括直鏈或支化C1-18烷基，尤其是甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基、仲丁基、3-戊基和3-己基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述烷基是C1-6烷基。

術(shù)語(yǔ)“亞烷基(alkylenyl)”是指含1、2、3或4個(gè)連接的亞甲基的二價(jià)烷基，由-(CH2)4-示例。

有用的烯基包括直鏈或支化C2-18烷基，特別是乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基和己烯基。

有用的炔基是C2-18炔基，特別是乙炔基、丙炔基、丁炔基和2-丁炔基。

有用的環(huán)烷基是C3-10環(huán)烷基。典型的環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、金剛烷基和降冰片基。

有用的芳基包括C6-14芳基，特別是苯基(縮寫為“Ph”)、萘基、菲基、蒽基、茚基、甘菊環(huán)基、聯(lián)苯基、亞聯(lián)苯基和芴基。

有用的雜芳基包括C5-14雜芳基，尤其是噻吩基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、異苯并呋喃基、色烯基、呫噸基、吩呫噸基(phenoxanthenyl)、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、三唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲嗪基、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、酞嗪基(phthalzinyl)、萘啶基、喹喔啉基(quinozalinyl)、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌間二氮雜苯基、菲咯啉基、吩嗪基、異噻唑基、吩噻嗪基、異噁唑基、呋咱基、吩噁嗪基、1，4-二氫喹喔啉-2，3-二酮、7-氨基香豆素、吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮、1，2-苯并異噁唑-3-基、苯并咪唑基、2-羥吲哚基和2-氧代苯并咪唑基。當(dāng)雜芳基在環(huán)上含有氮原子時(shí)，那么該氮原子可以為N-氧化物形式，例如吡啶基N-氧化物、吡嗪基N-氧化物、嘧啶基N-氧化物等。

任選的取代基包括一個(gè)或多個(gè)烷基；鹵素；羥基；羧酸(即，-CO2H及其鹽)；鹵代烷基；任選被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基或鹵代烷基取代的環(huán)烷基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基、芳基或雜芳基取代的芳基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基或雜芳基取代的芳氧基；芳烷基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜芳氧基；烷氧基；烷硫基；芳硫基；酰氨基；氨基；酰氧基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的芳酰氧基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素或鹵代烷基取代的二苯基氧膦基氧基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜環(huán)基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的雜環(huán)烷氧基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的部分不飽和雜環(huán)烷基；任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵代烷基和芳基取代的部分不飽和雜環(huán)烷氧基。

有用的飽和或部分飽和碳環(huán)基是如上文所定義的環(huán)烷基，以及環(huán)烯基，例如環(huán)戊烯基、環(huán)庚烯基和環(huán)辛烯基。碳環(huán)基還包括具有稠合的任選取代的芳基的基團(tuán)例如萘滿。

有用的鹵素包括氟、氯、溴和碘。

有用的芳烷基和雜芳烷基包括被一個(gè)或多個(gè)上述任選被取代的C6-14芳基或雜芳基取代的任何上述C1-18烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述芳烷基被兩個(gè)任選被取代的C6-14芳基取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述芳烷基被一個(gè)任選被取代的C6-14芳基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述任選被取代的C6-14芳基是任選被取代的苯基。有用的芳烷基包括芐基(縮寫為Bn)、苯乙基和萘甲基。

有用的鹵代烷基包括被一個(gè)或多個(gè)氟、氯、溴或碘原子取代的C1-10烷基，例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、五氟乙基、1，1-二氟乙基、氯甲基、氯氟甲基和三氯甲基。

有用的烷氧基包括被上述C1-18烷基之一取代的氧。

有用的烷硫基包括被上述C1-18烷基之一取代的硫。還包括此類烷硫基的亞砜和砜。

有用的酰氨基包括羰基酰氨基以及與氨基氮連接的任何C1-6?；?烷?；?，例如乙酸氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、戊酰氨基、己酰氨基以及芳基-取代的C2-6取代的?；?br>
有用的酰氧基是與氧基(-O-)連接的任何C1-6?；?烷?；?，例如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基、己酰氧基等。

有用的芳基酰氧基包括在上述任何酰氧基上取代的任何上述芳基，例如2，6-二氯苯甲酰氧基、2，6-二氟苯甲酰氧基和2，6-二-(三氟甲基)苯甲酰氧基。

有用的氨基包括-NH2、-NHR11和-NR11R12，其中R11和R12是如上文所定義的C1-18烷基或環(huán)烷基。

有用的飽和或部分飽和的雜環(huán)基包括四氫呋喃基、吡喃基、哌啶基、哌嗪基、氧代哌嗪基、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、奎寧環(huán)基、嗎啉基、異苯并二氫吡喃基、苯并二氫吡喃基、吡唑烷基、吡唑啉基、特窗?；?tetronoyl)和tetramoyl。

有用的亞芳基包括C6-14亞芳基，特別是亞苯基、亞萘基、亞菲基、亞蒽基、亞茚基、亞薁基、亞聯(lián)苯基、亞聯(lián)苯烯基(biphenylenylene)和亞芴基。

有用的亞雜芳基包括二取代的雜芳基例如2，5-亞噻吩基、2，4-亞咪唑基和1，3-亞三唑基。

本文中使用的術(shù)語(yǔ)“離去基團(tuán)”是指原子或基團(tuán)，該原子或基團(tuán)在說(shuō)明的反應(yīng)中脫離被認(rèn)為是所述底物的殘基或主要部分的原子或基團(tuán)。在酰胺偶聯(lián)反應(yīng)中，典型的離去基團(tuán)包括-F，-Cl，-Br，-OH，-OC6F5，-O(CO)烷基等等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述離去基團(tuán)是-Cl。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述離去基團(tuán)是-OH的活化形式(例如，OBt，O-?；愲??？梢允褂没罨瘎?例如，二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺(EDC)，苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽(PyBop))以活化羧酸(即，所述離去基團(tuán)是-OH)，形成酰胺。這些活化劑是有機(jī)合成領(lǐng)域中的技術(shù)人員熟知的。也可以添加其它添加劑，例如N-羥基苯并三唑(HOBt)或N-羥基琥珀酰亞胺(HOSu)以最佳化反應(yīng)參數(shù)(例如，速率，收率，純度，外消旋化)。

本文在提及化學(xué)反應(yīng)的產(chǎn)物時(shí)使用的術(shù)語(yǔ)“分離的”意指在后續(xù)化學(xué)轉(zhuǎn)化之前，所期望的一種或多種產(chǎn)物與反應(yīng)混合物的不期望的組分(例如，溶劑，原料，化學(xué)試劑)分離?？梢酝ㄟ^(guò)多種多樣的方法，將所期望的一種或多種產(chǎn)物與不期望的組分分離，例如，通過(guò)硅藻土或硅膠過(guò)濾，接著除去揮發(fā)性(例如，溶劑)組分。

本文中使用的術(shù)語(yǔ)“氨基保護(hù)基”是指在分子的其它官能團(tuán)或部分上進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，隱蔽(即，保護(hù))胺官能度的基團(tuán)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟悉胺保護(hù)基團(tuán)的選擇、連接和裂解，并且理解許多不同的保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域中已知的，一個(gè)或另一個(gè)保護(hù)基團(tuán)的適合性取決于所計(jì)劃的特定合成方案?？色@得關(guān)于該主題的論述用于參考，例如Greene和Wuts，″Protective Groups in Organic Synthesis，″3rd Ed.，pp.17-245(J.Wiley & Sons，1999)，通過(guò)參考將其公開(kāi)的內(nèi)容并入本文。適合的胺保護(hù)基團(tuán)包括芐氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(BOC)、9-芴基甲氧羰基(FMOC)和芐基(Bn)。

本文中使用的術(shù)語(yǔ)“大約或約”包所述值±10％。因此，“大約10”意指9至11。

在整個(gè)說(shuō)明書中，選擇基團(tuán)及其任選的取代基，以提供穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)部分和化合物。

本發(fā)明的某些化合物可以作為立體異構(gòu)體(包括旋光異構(gòu)體)存在。本發(fā)明包括所有立體異構(gòu)體(既作為純的單獨(dú)立體異構(gòu)體制備物和每種的富集制備物)，以及這類立體異構(gòu)體的外消旋混合物以及可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法分離的單獨(dú)對(duì)映體。

在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，式I的化合物選自下組化合物










或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥。

在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，式II的化合物選自下組化合物




或其游離堿，或其另一種藥學(xué)上可接受的鹽，或其前藥。

在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，式I的化合物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥。

本發(fā)明還涉及制備式XI化合物的方法，
它包括縮合式XII的化合物
與R7CO-L，其中A1、A2、V、W、X、Y、Z、T、U和R7具有上文關(guān)于式I所述的含義，m是1或2，以及L是離去基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，L是Cl或OBt。在一個(gè)實(shí)施方案中，Z是(CR1R2)r并且r是0。在另一個(gè)實(shí)施方案中，m是1。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，L是-OH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺或苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑和添加劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)，使反應(yīng)參數(shù)例如純度和收率最優(yōu)化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑是N-羥基苯并三唑。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的分析方法例如TLC，LC，LC/MS，HPLC，NMR等，監(jiān)測(cè)式XII的化合物和R7CO-L之間的所述縮合反應(yīng)的過(guò)程?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法例如正相柱色譜法和反相柱色譜法(例如，硅膠柱色譜法或反相HPLC)，結(jié)晶，萃取等，分離和純化式XI的化合物?？梢詫⒁虼朔蛛x的產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化(例如，重結(jié)晶)，直到達(dá)到期望水平的純度。在一個(gè)實(shí)施方案中，式XI的化合物具有90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的純度。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式XIII化合物的方法，
包括縮合式XIV的化合物
與R7CO-L，其中A1、A2、V、W、X、Y、Z、T和U具有上文關(guān)于式I所述的含義，m是1或2，以及L是離去基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，L是Cl或OBt。在一個(gè)實(shí)施方案中，Z是(CR1R2)r并且r是0。在另一個(gè)實(shí)施方案中，m是1。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2--二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，L是-OH或-OBt。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺或苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在存在活化劑和添加劑的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)，使反應(yīng)參數(shù)例如純度和收率最優(yōu)化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑是N-羥基苯并三唑。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的分析方法例如TLC，LC，LC/MS，HPLC，NMR等，監(jiān)測(cè)式XIV的化合物和R7CO-L之間的所述縮合反應(yīng)的過(guò)程?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法例如正相和反相柱色譜法(例如，硅膠柱色譜法或反相HPLC)、結(jié)晶、萃取等，分離和純化式XIII的化合物?？梢詫⒁虼朔蛛x的產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化(例如，重結(jié)晶)，直到達(dá)到期望水平的純度。在一個(gè)實(shí)施方案中，式XIII的化合物具有90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的純度。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式XV化合物的方法，
包括縮合式XVI的化合物
與R7CO-L，其中A1、A2、V、W、X、T、U和R7具有上文關(guān)于式I所述的含義，m是1或2，以及L是離去基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，L是Cl、OH或OBt。在一個(gè)實(shí)施方案中，m是1。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，L是-OH或-OBt。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺或苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在存在活化劑和添加劑的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)，使反應(yīng)參數(shù)例如純度和收率最優(yōu)化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑是N-羥基苯并三唑。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的分析方法例如TLC，LC，LC/MS，HPLC，NMR等，監(jiān)測(cè)式XIV的化合物和R7CO-L之間的所述縮合反應(yīng)的過(guò)程?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法例如正相和反相柱色譜法(例如，硅膠柱色譜法或反相HPLC)、結(jié)晶、萃取等，分離和純化式XV的化合物。可以將因此分離的產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化(例如，重結(jié)晶)，直到達(dá)到期望水平的純度。在一個(gè)實(shí)施方案中，式XV的化合物具有90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的純度。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式XVII化合物的方法，
包括縮合式XVIII的化合物
與R7CO-L，其中A1、A2、V、X、T、U和R7具有上文關(guān)于式I所述的含義，m是1或2，以及L是離去基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，L是Cl、OH或OBt。在一個(gè)實(shí)施方案中，m是1。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，L是-OH或-OBt。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺或苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在存在活化劑和添加劑的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)，使反應(yīng)參數(shù)例如純度和收率最優(yōu)化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑是N-羥基苯并三唑。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的分析方法例如TLC，LC，LC/MS，HPLC，NMR等，監(jiān)測(cè)式XVIII的化合物和R7CO-L之間的所述縮合反應(yīng)的過(guò)程?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法例如正相和反相柱色譜法(例如，硅膠柱色譜法或反相HPLC)、結(jié)晶、萃取等，分離和純化式XVII的化合物?？梢詫⒁虼朔蛛x的產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化(例如，重結(jié)晶)，直到達(dá)到期望水平的純度。在一個(gè)實(shí)施方案中，式XVII的化合物具有90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的純度。

本發(fā)明還涉及式XIX化合物的制備，
其中m是1或2，以及P1是胺保護(hù)基團(tuán)，該方法包括 a)縮合式XX的化合物
與式XXI的化合物，
其中P1和P2是胺保護(hù)基團(tuán)，并且P1不等于P2，得到式XXII的化合物，
b)將式XXII的烯烴轉(zhuǎn)化為醛，得到式XXIII的化合物；
c)除去式XXIII化合物的P2胺保護(hù)基團(tuán)，得到式XXIV的化合物；
d)還原式XXIV化合物的C＝N雙鍵，得到式XIX的化合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，式XXI的化合物是N-α-(叔丁氧羰基)-N-β-(芐氧羰基)-L-二氨基-丙酸(Boc-Dap(Z)-OH)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在有活化劑存在的情況下進(jìn)行式XX化合物與式XXI化合物的縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺或苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在存在活化劑和添加劑的情況下進(jìn)行所述縮合反應(yīng)，使反應(yīng)參數(shù)例如純度和收率最優(yōu)化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述添加劑是N-羥基苯并三唑。

適用于本發(fā)明方法中的胺保護(hù)基團(tuán)P1和P2是眾所周知的，例如但不限于三氟乙?；?、叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(CBz)、烯丙氧羰基(Alloc)、三苯甲基(三苯基甲基)、9-芴基甲基烯氧(enoxy)羰基(Fmoc)等等。使用不干擾目的化合物的其它部分的溫和反應(yīng)條件，一般能夠選擇性地引入和除去這些基團(tuán)?？梢允褂帽绢I(lǐng)域中已知的方法，在方便的階段引入和除去這些保護(hù)基團(tuán)。這些保護(hù)基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)、它們的引入和它們的除去方法在本領(lǐng)域中是已知的并且能夠例如在Greene和Wuts，″Protective Groups in Organic Synthesis，″3rd Ed.，pp.17-245(J.Wiley & Sons，1999)中找到，通過(guò)引用將其全部?jī)?nèi)容并入本文。

在一個(gè)實(shí)施方案中，P1和P2選自三氟乙酰基、叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(CBz)、烯丙氧羰基(Alloc)、三苯甲基(三苯基甲基)和9-芴基甲基烯氧羰基(Fmoc)，使得P1不等于P2。在一個(gè)實(shí)施方案中，P1和P2是正交保護(hù)基團(tuán)，即，在P2保護(hù)基團(tuán)存在下能夠選擇性地除去P1保護(hù)基團(tuán)，或者在P1保護(hù)基團(tuán)存在下能夠選擇性地除去P2保護(hù)基團(tuán)。正交保護(hù)基團(tuán)策略是本領(lǐng)域中已知的。在一個(gè)實(shí)施方案中，P1是叔丁氧羰基(Boc)。在一個(gè)實(shí)施方案中，P2是芐氧羰基(CBz)。在一個(gè)實(shí)施方案中，P1是叔丁氧羰基(Boc)并且P2是芐氧羰基(CBz)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行式XX的化合物與式XXI的化合物的縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行式XX的化合物與式XXI的化合物的縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行式XX的化合物與式XXI的化合物的縮合。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約30℃進(jìn)行式XX的化合物與式XXI的化合物縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20至大約30℃進(jìn)行所述縮合反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述縮合反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，用臭氧處理式XXII的烯烴，得到式XXIII的醛，以及m是1。在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如氯仿、1，2-二氯乙烷、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷或四氫呋喃中進(jìn)行所述與臭氧的反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在二氯甲烷中進(jìn)行所述與臭氧的反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-100℃至大約0℃進(jìn)行所述與臭氧的反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-78℃進(jìn)行所述與臭氧的反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)反應(yīng)混合物的顏色變藍(lán)(表示溶液中存在過(guò)量的臭氧)時(shí)，所述與臭氧的反應(yīng)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，首先將式XXII的烯烴轉(zhuǎn)化為伯醇，然后將該醇氧化，得到式XXIII的醛，以及m是2。在一個(gè)實(shí)施方案中，經(jīng)由硼氫化反應(yīng)將式XXII的烯烴轉(zhuǎn)化為伯醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、1，2，-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷或四氫呋喃中進(jìn)行所述硼氫化反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述硼氫化反應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使用9-硼雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷(9-BBN)進(jìn)行所述硼氫化反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，用Dess-Martin periodinane將所述伯醇氧化為醛，得到式XXIII的醛，以及m是2。在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如二氯甲烷中進(jìn)行所述氧化。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃進(jìn)行所述氧化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃進(jìn)行所述氧化。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述氧化在大約1小時(shí)至大約48小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氧化在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，P2是Cbz基團(tuán)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，P2是CBz并且通過(guò)用碳披鈀的氫化被裂解。在一個(gè)實(shí)施方案中，在甲醇、乙醇、1-丁醇、2-丁醇、3-丁醇、叔-丁醇、1-丙醇或2-丙醇中進(jìn)行所述氫化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在2-丙醇中進(jìn)行所述氫化。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約0℃至大約40℃進(jìn)行所述氫化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃至大約30℃進(jìn)行所述氫化。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述氫化在大約1小時(shí)至大約24小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氫化在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在還原C＝N雙鍵之前分離式XXIV的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)硅藻土過(guò)濾分離式XXIV的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)硅藻土過(guò)濾，接著蒸發(fā)溶劑，分離式XXIV的化合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，用H2和碳披鈀、Na(CN)BH3或NaBH(OAc)3，將式XXIV化合物的C＝N雙鍵還原。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述還原劑是NaBH(OAc)3。在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如甲醇、乙醇、1-丁醇、2-丁醇、3-丁醇、叔-丁醇、1-丙醇、2-丙醇、乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述還原。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在四氫呋喃中進(jìn)行所述還原。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約0℃至大約25℃進(jìn)行所述還原。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在大約20℃至大約30℃進(jìn)行所述還原。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述還原在大約1小時(shí)至大約24小時(shí)內(nèi)完成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述與臭氧的反應(yīng)在大約12小時(shí)內(nèi)完成。

可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的分析方法例如TLC，LC，LC/MS，HPLC，NMR等，監(jiān)測(cè)上述制備式XIX化合物的任一反應(yīng)的過(guò)程。可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法例如正相和反相柱色譜法(例如，硅膠柱色譜法或反相HPLC)、結(jié)晶、萃取等，分離和純化式XIX的化合物?？梢詫⒁虼朔蛛x的產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化(例如，重結(jié)晶)，直到達(dá)到期望水平的純度。在一個(gè)實(shí)施方案中，式XIX的化合物具有90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的純度。

可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，制備本發(fā)明的化合物。具體地說(shuō)，可以按照實(shí)施例中典型反應(yīng)舉例說(shuō)明的方法，制備式I-XXIII的化合物。

本發(fā)明的重要方面是式I-X的化合物誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡，并且還強(qiáng)化應(yīng)反應(yīng)編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)信號(hào)而發(fā)生的編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)。因此考慮到，這些化合物使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感，包括對(duì)這類誘導(dǎo)劑耐受的細(xì)胞。本發(fā)明的IAP抑制劑可以用于在可以通過(guò)誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡進(jìn)行治療、減輕或預(yù)防的任意障礙中誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡。因此，本發(fā)明提供用于靶向特征在于過(guò)量表達(dá)IAP蛋白的動(dòng)物的組合物和方法。在一些實(shí)施方案中，與非病理性樣品(例如，非癌細(xì)胞)相比，所述細(xì)胞(例如，癌細(xì)胞)顯示升高的IAP蛋白表達(dá)水平。在其它實(shí)施方案中，所述細(xì)胞通過(guò)執(zhí)行編程性細(xì)胞死亡程序和對(duì)抑制有效量的式I-X化合物反應(yīng)而死亡，有效表現(xiàn)出升高的IAP蛋白表達(dá)水平，所述反應(yīng)至少部分是由于在所述細(xì)胞中依賴于用于它們存活的IAP蛋白功能而發(fā)生。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)編程性細(xì)胞死亡有關(guān)的狀態(tài)，其與一種或多種編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑有關(guān)。編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括，但不限于，F(xiàn)as/CD95，TRAMP，TNF RI，DR1，DR2，DR3，DR4，DR5，DR6，F(xiàn)ADD，RIP，TNFα，F(xiàn)as配體，TRAIL，TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗體，Bcl-2，p53，BAX，BAD，Akt，CAD，PI3激酶，PP1，以及胱天蛋白酶蛋白。也包括其它參與編程性細(xì)胞死亡的開(kāi)始、決定和降解階段的藥劑。編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括藥劑、活性、存在或變化，其濃度可以調(diào)節(jié)受治療者中的編程性細(xì)胞死亡。優(yōu)選的編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑是編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑，例如TNF或TNF相關(guān)配體，尤其是TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體或TRAIL。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物和方法用于治療動(dòng)物(例如，哺乳動(dòng)物受治療者包括，但不限于，人和獸醫(yī)學(xué)動(dòng)物)中患病的細(xì)胞、組織、器官或病理狀況和/或疾病狀態(tài)。在這一方面，不同的疾病和病理狀況易于使用本發(fā)明的方法和組合物進(jìn)行治療或預(yù)防。這些疾病和病況的非限制性舉例性清單包括，但不限于，乳腺癌、前列腺癌、淋巴瘤、皮膚癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、黑素瘤、惡性黑素瘤、卵巢癌、腦癌、原發(fā)性腦癌、頭-頸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、肝癌、膀胱癌、非-小細(xì)胞肺癌、頭或頸癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、維爾姆斯腫瘤、宮頸癌、睪丸癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、泌尿生殖器癌、甲狀腺癌、食道癌、骨髓瘤、多發(fā)性骨髓瘤、腎上腺癌、腎細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜癌、腎上腺皮質(zhì)癌、惡性胰腺胰島素瘤、惡性類癌瘤癌、絨毛膜癌、蕈樣真菌病、惡性血鈣過(guò)多、宮頸增生、白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性粒細(xì)胞性白血病、急性粒細(xì)胞性白血病、毛細(xì)胞性白血病、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、卡波西肉瘤、真性紅細(xì)胞增多、原發(fā)性血小板增多、何杰金病、非何杰金淋巴瘤、軟組織肉瘤、骨肉瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤等；T和B細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫??；炎性疾??；感染(作為抗?jié)兯帲?，在幽門螺旋桿菌的情況下)；過(guò)度增殖性疾?。籄IDS；變性病況、血管疾病(例如原發(fā)性靜脈曲張病)等。本發(fā)明的化合物還可以用于治療在編程性細(xì)胞死亡或編程性細(xì)胞死亡機(jī)器中存在缺陷的疾病，例如，多發(fā)性硬化、哮喘、動(dòng)脈粥樣硬化等。在某些實(shí)施方案中，被治療的癌細(xì)胞為轉(zhuǎn)移性的。在其它實(shí)施方案中，被治療的癌細(xì)胞對(duì)抗癌劑有抗性。

在某些實(shí)施方案中，適合于用本發(fā)明組合物和方法治療的感染包括，但不限于由病毒、細(xì)菌、真菌、支原體、阮病毒等導(dǎo)致的感染。

本發(fā)明的某些實(shí)施方案提供了給予有效量的通式I-X化合物和至少一種額外的治療劑(包括，但不限于化療抗腫瘤藥、編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑、抗微生物藥、抗病毒藥、抗真菌藥和抗炎劑)和/或治療技術(shù)(例如外科手術(shù)干預(yù)和/或放療)的方法。

預(yù)計(jì)許多合適的抗癌藥用于本發(fā)明的方法。實(shí)際上，本發(fā)明關(guān)注，但不限于大量抗癌劑的施用，諸如誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的藥劑；多核苷酸類(例如反義，核酶，siRNA)；多肽類(例如酶和抗體)；生物模擬物(例如棉酚或BH3模擬物)；與Bcl-2家族蛋白，例如Bax結(jié)合(例如寡聚化或絡(luò)合)的藥劑；生物堿類；烷化劑；抗腫瘤抗生素；抗代謝物；激素；鉑化合物；單克隆或多克隆抗體(例如與抗癌藥、毒素、防御素綴合的抗體)、毒素；放射性核素；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物(例如干擾素(例如IFN-α)和白細(xì)胞介素(例如IL-2))；過(guò)繼免疫治療劑；造血生長(zhǎng)因子；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的藥劑(例如全反式視黃酸)；基因療法試劑(例如反義療法試劑和核苷酸)；腫瘤疫苗；血管生成抑制劑；蛋白體抑制劑；NF-KB調(diào)節(jié)劑；抗-CDK化合物；HDAC抑制劑等。適合于與所公開(kāi)的化合物共同施用的化療化合物和抗癌療法的大量其它實(shí)例為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。

在某些實(shí)施方案中，抗癌劑包括誘導(dǎo)或刺激編程性細(xì)胞死亡的藥劑。誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的藥劑包括，但不限于輻射(例如X-射線、γ射線、UV)；腫瘤壞死因子(TNF)相關(guān)的因子(例如，TNF家族受體蛋白、TNF家族配體、TRAIL、TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗體)；激酶抑制劑(例如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)激酶抑制劑、血管生長(zhǎng)因子受體(VGFR)激酶抑制劑、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)激酶抑制劑、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)激酶抑制劑和Bcr-Abl激酶抑制劑(諸如GLEEVEC))；反義分子；抗體(例如HERCEPTIN、RITUXAN、ZEVALIN和AVASTIN)；抗雌激素藥(例如雷洛昔芬和他莫昔芬)；抗雄激素藥(例如氟他胺、比卡魯胺、非那雄胺、氨魯米特、酮康唑和皮質(zhì)類固醇)；環(huán)加氧酶2(COX-2)抑制劑(例如塞來(lái)考昔、美洛昔康、NS-398和非類固醇抗炎藥(NSAID))；抗炎藥(例如保泰松、DECADRON、DELTASONE、地塞米松、地塞米松intensol、DEXONE、HEXADROL、羥氯喹、METICORTEN、ORADEXON、ORASONE、羥布宗、PEDIAPRED、保泰松、PLAQUENIL、潑尼松龍、潑尼松、PRELONE和TANDEARIL)；以及癌癥化療藥(例如伊立替康(CAMPTOSAR)、CPT-11、氟達(dá)拉濱(FLUDARA)、達(dá)卡巴嗪(DTIC)、地塞米松、米托蒽醌、MYLOTARG、VP-16、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、5-FU、多柔比星、吉西他濱、硼替佐米、吉非替尼、貝伐珠單抗、TAXOTERE或TAXOL)；細(xì)胞信號(hào)分子；神經(jīng)酰胺類和細(xì)胞因子；星孢素等。

在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物和方法提供了通式I-X的化合物和至少一種選自烷化劑、抗代謝物和天然產(chǎn)物(例如草本和其它植物和/或動(dòng)物衍生的化合物)的抗過(guò)度增殖藥或抗腫瘤劑。

適用于本發(fā)明組合物和方法的烷化劑包括，但不限于1)氮芥類(例如氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖(L-沙可來(lái)新)；以及苯丁酸氮芥)；2)亞乙基亞胺類和甲基蜜胺類(例如六甲蜜胺和塞替派)；3)磺酸烷基酯類(例如白消安)；4)亞硝基脲類(例如卡莫司汀(BCNU)；洛莫司汀(CCNU)；司莫司汀(賽氮芥)；以及鏈佐星(鏈唑霉素))；以及5)三氮烯類(例如達(dá)卡巴嗪(DTIC；二甲基三氮烯基咪唑甲酰胺)。

在某些實(shí)施方案中，適用于本發(fā)明組合物和方法的抗代謝物包括，但不限于1)葉酸類似物(例如甲氨蝶呤(氨甲蝶呤))；2)嘧啶類似物(例如氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)、氟尿苷(氟脫氧尿苷；FudR)和阿糖胞苷(阿糖胞苷))；以及3)嘌呤類似物(例如巰嘌呤(6-巰嘌呤；6-MP)、硫鳥(niǎo)嘌呤(6-硫鳥(niǎo)嘌呤；TG)和噴司他丁(2′-脫氧柯福霉素))。

在其它實(shí)施方案中，適用于本發(fā)明組合物和方法的化療劑包括，但不限于1)長(zhǎng)春花生物堿(例如長(zhǎng)春堿(VLB)、長(zhǎng)春新堿)；2)表鬼臼毒素(例如依托泊苷和替尼泊苷)；3)抗生素(例如更生霉素(放線菌素D)、柔紅霉素(道諾霉素；柔毛霉素)、多柔比星、博來(lái)霉素、普卡霉素(光輝霉素)和絲裂霉素(絲裂霉素C))；4)酶(例如L-天冬酰胺酶)；5)生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑(例如干擾素-α)；6)鉑配位復(fù)合物(例如順鉑(順式-DDP)和卡鉑)；7)蒽二酮類(例如米托蒽醌)；8)取代的脲類(例如羥基脲)；9)甲基肼衍生物(例如丙卡巴肼(N-甲基肼；MIH))；10)腎上腺皮質(zhì)抑制劑(例如米托坦(o，p′-DDD)和氨魯米特)；11)腎上腺皮質(zhì)類固醇類(例如潑尼松)；12)孕激素類(例如己酸羥孕酮、醋酸甲羥孕酮和醋酸甲地孕酮)；13)雌激素類(例如己烯雌酚和炔雌醇)；14)抗雌激素藥(例如他莫昔芬)；15)雄激素類(例如丙酸睪酮和氟甲睪酮)；16)抗雄激素藥(例如氟他胺)；以及17)促性腺激素釋放激素類似物(例如亮丙瑞林)。

常規(guī)用于癌癥療法環(huán)境中的任何溶瘤細(xì)胞的藥劑可應(yīng)用于本發(fā)明的組合物和方法中。例如，美國(guó)食品與藥品監(jiān)督管理局維持了批準(zhǔn)在美國(guó)使用的溶瘤細(xì)胞的藥劑的配方集。與U.S.F.D.A.對(duì)應(yīng)的國(guó)際合作機(jī)構(gòu)維持了相似的配方集。表1中提供了批準(zhǔn)用于美國(guó)的典型抗腫瘤藥的清單。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，所有美國(guó)批準(zhǔn)的化療藥所需的“產(chǎn)品標(biāo)簽”描述了所列舉的藥劑被批準(zhǔn)的適應(yīng)癥、給藥信息、毒性數(shù)據(jù)等。
表1
抗癌劑還包括已經(jīng)確定具有抗癌劑活性但是目前還沒(méi)有經(jīng)美國(guó)食品和藥物管理局或其它對(duì)應(yīng)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的或正在進(jìn)行新用途評(píng)價(jià)的化合物。實(shí)例包括但不限于，3-AP、12-O-十四酰佛波醇(tetradecanoylphorbol)-13-乙酸鹽、17AAG、852A、ABI-007、ABR-217620、ABT-751、ADI-PEG 20、AE-941、AG-013736、AGRO100、丙氨菌素、AMG 706、抗體G250、坑瘤酮、AP23573、阿帕齊醌、APC8015、阿替莫德、ATN-161、阿曲生坦、阿扎胞苷、BB-10901、BCX-1777、貝伐珠單抗、BG00001、比卡魯胺、BMS 247550、硼替佐米、苔蘚抑素-1、布舍瑞林、鈣三醇、CCI-779、CDB-2914、頭孢克肟、西妥昔單抗、CG0070、西侖吉肽、氯法拉濱、康普瑞汀A4磷酸鹽、CP-675，206、CP-724，714、CpG 7909、姜黃素、地西他濱、DENSPM、度骨化醇、E7070、E7389、海鞘素743、乙法昔羅、依氟鳥(niǎo)氨酸、EKB-569、恩扎啕林、厄洛替尼、依昔舒林、芬維A胺、黃酮吡多、氟達(dá)拉濱、氟他胺、福莫司汀、FR901228、G17DT、加利昔單抗、吉非替尼、高金雀花堿、葡磷酰胺、GTI-2040、組氨瑞林、HKI-272、高粗榧?jí)A、HSPPC-96、hu14.18-干擾白細(xì)胞素-2融合蛋白、HuMax-CD4、伊洛前列素、咪喹莫德、英利昔單抗、白介素-12、IPI-504、依羅夫文、依沙匹隆、拉帕替尼、來(lái)妥替尼、亮丙立德、LMB-9免疫毒素、氯那法尼、luniliximab、馬磷酰胺、MB07133、MDX-010、MLN2704、單克隆抗體3F8、單克隆抗體J591、莫特沙芬、MS-275、MVA-MUC1-IL2、尼魯米特、硝基喜樹(shù)堿、諾拉曲塞二鹽酸鹽、諾瓦得士、NS-9、O6-芐基鳥(niǎo)嘌呤、奧利美生鈉、ONYX-015、奧戈伏單抗、OSI-774、帕尼單抗、伯爾定、PD-0325901、培美曲塞、PHY906、吡格列酮、吡非尼酮、匹蒽醌、PS-341，PSC 833，PXD101，吡唑啉吖啶、R115777、RAD001、豹蛙酶、若貝霉素類似物、rhuAngiostatin蛋白、rhuMab 2C4、羅格列酮、盧比替康、S-1、S-8184、沙鉑、SB-、15992、SGN-0010、SGN-40、索拉非尼、SR31747A、ST1571、SU011248、N-(辛二酰基)苯胺羥肟酸、蘇拉明、他波司他、他侖帕奈、他立喹達(dá)、坦羅莫司、TGFa-PE38免疫毒素、瑟利德米、胸腺法新、替匹法尼、替拉扎明、TLK286、曲貝替定、三甲曲沙葡糖醛酸脂、TroVax、UCN-1、丙戊酸、長(zhǎng)春氟寧、VNP40101M、伏洛昔單抗、伏林司他、VX-680、ZD1839、ZD6474、齊留通和佐舒喹達(dá)三鹽酸鹽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗癌藥選自泰索帝、吉西他濱、拉帕替尼(

)和依托泊苷。

關(guān)于抗癌劑和其它治療劑的更詳細(xì)描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以參考許多說(shuō)明性手冊(cè)，包括，但不限于Physician′s DeskReference以及Goodman和Gilman的″Pharmaceutical Basis ofTherapeutics″第10版Eds.Hardman等人，2002。

本發(fā)明提供了與放療一起施用通式I-X的化合物的方法。本發(fā)明并不限于用于將治療劑量的輻射傳遞給動(dòng)物的類型、用量或遞送和給藥系統(tǒng)。例如，動(dòng)物可以接受光子放療、粒子束放療、其它類型的放療及其組合。在某些實(shí)施方案中，使用線性加速器將輻射遞送給動(dòng)物。在還有的其它實(shí)施方案中，使用γ刀遞送放射。

輻射源可以在動(dòng)物的內(nèi)部或外部。外部放射治療最為常用并且包括使用例如線性加速器使高能輻射束通過(guò)皮膚定向于腫瘤部位。盡管射束局限于腫瘤部位，但是幾乎不可能避免接觸正常健康組織。然而，外放射通常為動(dòng)物充分耐受。內(nèi)放射療法包括在體內(nèi)腫瘤部位處或接近腫瘤部位處植入輻射發(fā)射源，諸如珠、金屬線、丸粒、膠囊、顆粒等，包括使用特異性靶向癌細(xì)胞的遞送系統(tǒng)(例如使用與癌細(xì)胞結(jié)合配體結(jié)合的顆粒)。這類植入物可以在治療后除去或在體內(nèi)保持失活狀態(tài)。內(nèi)放射療法的類型包括，但不限于近距放射療法、間質(zhì)照射、腔內(nèi)照射、放射免疫療法等。

動(dòng)物可以可選地接受放射致敏劑(例如甲硝唑、米索硝唑、動(dòng)脈內(nèi)溴甙(Budr)、靜脈內(nèi)碘苷(IudR)、硝基咪唑、5-取代的-4-硝基咪唑類、2H-異吲哚二酮類、[[(2-溴乙基)-氨基]甲基]-硝基-1H-咪唑-1-乙醇、硝基苯胺衍生物、DNA-親和性低氧選擇性細(xì)胞毒素、鹵化DNA配體、1，2，4苯并三嗪氧化物、2-硝基咪唑衍生物、含氟的硝基吡咯衍生物、苯甲酰胺、煙酰胺、吖啶-嵌入劑、5-硫代四唑衍生物、3-硝基-1，2，4-三唑、4，5-二硝基咪唑衍生物、羥基化texaphrins、順鉑、絲裂霉素、tiripazamine、亞硝基脲、巰基嘌呤、氨甲蝶呤、氟尿嘧啶、博來(lái)霉素、長(zhǎng)春新堿、卡鉑、表柔比星、多柔比星、環(huán)磷酰胺、長(zhǎng)春地辛、依托泊苷、紫杉醇、熱(過(guò)熱)等)、輻射防護(hù)劑(例如半胱胺、氨基烷基二氫硫代磷酸酯、氨磷汀(WR 2721)、IL-1、IL-6等)。放射致敏劑促進(jìn)殺死腫瘤細(xì)胞。輻射防護(hù)劑防止健康組織受到放射的有害作用。

可以對(duì)動(dòng)物施用任意類型的輻射，只要患者耐受放射劑量而沒(méi)有不可接受的負(fù)面副作用即可。合適類型的放療包括，例如，電離(電磁)放療(例如X-射線或γ射線)或粒子束放療(例如高線性能量放射)。將電離放射定義為包括具有產(chǎn)生電離，即得到或失去電子的足夠能量的粒子或光子的放射(例如，如US 5,770,581中所述，將該文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容引入本文作為參考)。放射的作用至少部分可以受到臨床醫(yī)師控制。為最大限度地接觸靶細(xì)胞并且降低毒性，優(yōu)選將放射劑量分次給予。

對(duì)動(dòng)物施用的總輻射劑量?jī)?yōu)選為約.01戈瑞(Gy)-約100Gy。更優(yōu)選，在治療期過(guò)程中施用約10Gy-約65Gy(例如約15Gy，20Gy，25Gy，30Gy，35Gy，40Gy，45Gy，50Gy，55Gy或60Gy)。盡管在某些實(shí)施方案中，可以在1天過(guò)程中施用完整劑量的放射，但是理想的是，將總劑量分次并且在幾天內(nèi)給予。理想的是在至少約3天過(guò)程中給予放療，例如至少5、7、10、14、17、21、25、28、32、35、38、42、46、52或56天(約1-8周)。因此，每日放射劑量包括約1-5Gy(例如約1Gy，1.5Gy，1.8Gy，2Gy，2.5Gy，2.8Gy，3Gy，3.2Gy，3.5Gy，3.8Gy，4Gy，4.2Gy或4.5Gy)，優(yōu)選1-2Gy(例如1.5-2Gy)。每日輻射劑量應(yīng)足以誘導(dǎo)破壞被靶向的細(xì)胞。如果延長(zhǎng)超過(guò)一定期限，那么并不優(yōu)選每天給予放射，從而使動(dòng)物休息并且實(shí)現(xiàn)該療法的作用。例如，對(duì)每周治療而言，理想的是連續(xù)5天給予放射，并且有2天不給予，由此每周有2天休息。然而，可以1天/周，2天/周，3天/周，4天/周，5天/周，6天/周或所有7天/周給予輻射，這取決于動(dòng)物的反應(yīng)性和任何可能的副作用。可以在治療期中的任意時(shí)間時(shí)啟動(dòng)放療。優(yōu)選在第1周或第2周啟動(dòng)輻射并且在該治療期的剩余期限內(nèi)給予。例如，在包括6周治療例如實(shí)體瘤的治療期間，在第1-6周或第2-6周內(nèi)給予放射。或者，在包括5周治療期的第1-5周或第2-5周內(nèi)給予放射。然而，本發(fā)明并不限于這些示例性的放療施用方案。

抗微生物治療劑也可以用作本發(fā)明中的治療劑。可以使用可以殺傷、抑制或者減弱微生物功能的任意活性劑以及預(yù)計(jì)具有這類活性的任意藥劑?？刮⑸飫┌ǎ幌抻谔烊缓秃铣傻目股?、抗體、抑制蛋白(例如防御素)、反義核酸、膜破裂劑等，可以單獨(dú)使用或以組合方式使用。實(shí)際上，可以使用任何類型的抗生素，包括，但不限于抗細(xì)菌劑、抗病毒劑、抗真菌劑等。

在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在下列條件中的一種或多種下，對(duì)動(dòng)物施用通式I-X的化合物和一種或多種治療劑或抗癌劑以不同的周期性，以不同的持續(xù)時(shí)間，以不同的濃度，通過(guò)不同的給藥途徑，在一種組合物中，在單獨(dú)的組合物中等。在某些實(shí)施方案中，在施用治療劑或抗癌劑之前施用所述的化合物，例如在施用治療劑或抗癌藥之前0.5、1、2、3、4、5、10、12或18小時(shí)，1、2、3、4、5或6天，1、2、3或4周施用該化合物。在某些實(shí)施方案中，在施用治療劑或抗癌劑之后施用所述的化合物，例如在施用抗癌藥之后0.5、1、2、3、4、5、10、12或18小時(shí)，1、2、3、4、5或6天，1、2、3或4周施用該化合物。在某些實(shí)施方案中，同時(shí)施用所述的化合物和治療劑或抗癌劑，但使用不同的方案，例如每日施用所述的化合物，而每周1次、每2周1次、每3周1次或每4周1次施用所述的治療劑或抗癌劑。在其它實(shí)施方案中，每周1次施用所述的化合物，而每日、每周1次、每2周1次、每3周1次或每4周1次施用所述的治療劑或抗癌劑。

本發(fā)明范圍內(nèi)的組合物包括以有效實(shí)現(xiàn)其預(yù)想目的的量包含本發(fā)明化合物的所有組合物。盡管個(gè)體需要不同，但是確定每種成分的有效量的最佳范圍屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的范圍。一般來(lái)說(shuō)，對(duì)哺乳動(dòng)物，例如人而言，每天口服給藥0.0025-50mg/kg因?qū)φT導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡有反應(yīng)的疾病而被治療的哺乳動(dòng)物體重的劑量的化合物或等量的其藥物上可接受的鹽。例如，口服給藥約0.01-約25mg/kg以治療、改善或預(yù)防這類疾病。就肌內(nèi)注射而言，劑量一般為口服劑量的約一半。例如，合適的肌內(nèi)劑量為約0.0025-約25mg/kg，最優(yōu)選約0.01-約5mg/kg。

單位口服劑量可以包括約0.01-約1000mg，例如約0.1-約100mg的化合物?？梢詫挝粍┝孔鳛橐黄蚨嗥瑒┗蛘咭涣；蚨嗔Ｄz囊每天給予一次或多次，所述的片劑或膠囊各自含有約0.1-約10，適宜地是約0.25-50mg化合物或其溶劑合物。

在局部用制劑中，所述化合物的存在濃度約為0.01-100mg/克載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物的存在濃度約為0.07-1.0mg/ml，例如約0.1-0.5mg/ml，例如約0.4mg/ml。

除將化合物作為原料化學(xué)品給藥外，還可以將本發(fā)明的化合物作為藥物制劑的組成部分施用，所述的藥物制劑含有合適的藥物上可接受的載體，包括有利于將所述化合物加工成可以在藥學(xué)上使用的制劑的賦形劑和助劑。優(yōu)選地，所述的制劑，特別是那些可以口服或局部給藥并且可以用于優(yōu)選給藥類型的制劑，例如片劑、錠劑、緩釋糖錠劑和膠囊、口腔清洗劑和口腔洗劑、凝膠、液體混懸液、洗發(fā)劑、發(fā)膠、洗發(fā)香波，以及還有可以通過(guò)直腸給藥的制劑，諸如栓劑，以及通過(guò)靜脈內(nèi)輸注、注射、局部或口服給藥的合適的溶液含有約0.01-99％，例如約0.25-75％的活性化合物與賦形劑。

可以將本發(fā)明的藥物組合物對(duì)可以經(jīng)歷本發(fā)明化合物有益作用的任意動(dòng)物給藥。在這類動(dòng)物中最重要的是哺乳動(dòng)物，例如人，不過(guò)，本發(fā)明并不限于此。其它動(dòng)物包括獸醫(yī)動(dòng)物(牛、綿羊、豬、馬、狗、貓等)。

可以通過(guò)實(shí)現(xiàn)預(yù)想目的的任意方式施用所述的化合物及其藥物組合物。例如，可以通過(guò)腸胃外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、透皮、頰粘膜、鞘內(nèi)、顱內(nèi)、鼻內(nèi)或局部途徑給藥。交替地，或同時(shí)，可以通過(guò)口服途徑進(jìn)行給藥。給藥劑量取決于接受者的年齡、健康情況和體重、同時(shí)治療的種類(如果有的話)、治療頻率和所需效果的性質(zhì)。

按照自身公知的方式，例如通過(guò)常規(guī)的混合、制粒、制錠、溶解或凍干方法，制備本發(fā)明的藥物制劑。因此，可以通過(guò)下列步驟獲得口服使用的藥物制劑將活性化合物與固體賦形劑合并，可選地研磨所得混合物并且如果需要或必要，在添加合適的助劑后加工顆?；旌衔?，從而得到片芯或錠芯。

具體來(lái)說(shuō)，合適的賦形劑為填充劑，例如糖類，例如乳糖或蔗糖、甘露糖醇或山梨醇；纖維素制品和/或磷酸鈣，例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣；以及粘合劑，例如淀粉糊，例如使用玉米淀粉、小麥淀粉、稻淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，可以加入崩解劑，例如上述淀粉和羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或藻酸或其鹽，例如藻膠鈉。助劑尤其是流動(dòng)調(diào)節(jié)劑和潤(rùn)滑劑，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇。如果需要，可以給錠芯包上耐胃液的合適的包衣材料。為了這一目的，可以使用濃糖溶液，它可以可選地含有阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。為了生產(chǎn)耐胃液的包衣材料，使用合適的纖維素制品，例如鄰苯二酸乙酰纖維素或鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素的溶液。例如，為了鑒別或?yàn)榱吮碚骰钚曰衔飫┝康慕M合，可以向片劑或錠劑包衣層中加入染料或色素。

可以口服使用的其它藥物制劑包括由明膠制成的推拉式膠囊以及由明膠和增塑劑諸如甘油或山梨醇制成的密封軟膠囊。推拉式膠囊可以含有顆粒形式的活性化合物，所述的顆粒中可以混合有諸如乳糖這類填充劑、例如淀粉這類粘合劑和/或諸如滑石粉或硬脂酸鎂這類潤(rùn)滑劑以及任選地，穩(wěn)定劑。在軟膠囊中，優(yōu)選將活性化合物溶于或懸浮于合適的液體中，例如脂肪油或液體石蠟。此外，可以加入穩(wěn)定劑。

可以通過(guò)直腸使用的可能的藥物制劑包括例如由一種或多種活性化合物與栓劑基質(zhì)的組合組成的栓劑。合適的栓劑基質(zhì)例如為天然或合成的甘油三酯類或鏈烷烴類。此外，還能夠使用由活性化合物與基質(zhì)組合組成的直腸用膠囊。可能的基質(zhì)材料包括例如液體甘油三酯類、聚乙二醇類或鏈烷烴類。

用于腸胃外給藥的合適的制劑包括水溶性形式的活性化合物，例如水溶性鹽和堿性溶液的水溶液。此外，可以將活性化合物的混懸液以合適的油性注射混懸液形式給藥。合適的親脂性溶劑或介質(zhì)包括脂肪油，例如芝麻油；或合成的脂肪酸酯類，例如油酸乙酯或甘油三酯類或聚乙二醇-400。含水的注射混懸液可以含有增加該混懸液粘度的物質(zhì)，包括例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇和/或葡聚糖。任選地，該混懸液中還可以含有穩(wěn)定劑。

優(yōu)選通過(guò)選擇合適的載體將本發(fā)明的局部用組合物配制成油劑、霜?jiǎng)?、洗劑、軟膏劑等。合適的載體包括植物油或礦物油、白凡士林(白軟石蠟)、支鏈脂肪或油、動(dòng)物脂肪和高分子量醇(大于C12)。優(yōu)選的載體為那些活性組分在其中可溶的載體。還可以包括乳化劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑和抗氧化劑，并且如果需要，還可以包括賦予顏色或香味的藥劑。另外，透皮促進(jìn)劑可以用于這些局部用制劑中。這類促進(jìn)劑的實(shí)例可以在美國(guó)專利US 3,989,816和US 4,444,762中找到。

優(yōu)選由礦物油、自乳化蜂蠟和水的混合物配制霜?jiǎng)谠摶旌衔镏谢旌狭嘶旌先苡谏倭坑椭T如杏仁油的活性組分。這類霜?jiǎng)┑牡湫蛯?shí)例為一種包括約40份水、約20份蜂蠟、約40份礦物油和約1份杏仁油的霜?jiǎng)?br>
可以通過(guò)將活性組分在植物油諸如杏仁油中的溶液與溫?zé)岬能浭灮旌喜⑶沂乖摶旌衔锢鋮s而配制軟膏劑。這類軟膏劑的典型實(shí)例為一種包括按重量計(jì)約30％杏仁油和約70％白軟石蠟的軟膏劑。

可以通過(guò)將活性組分溶于合適的高分子量醇例如丙二醇或聚乙二醇而便利地制備洗劑。

下列實(shí)施例用于解釋本發(fā)明的方法和組合物，而非限制它們。在臨床療法中通常遇到并且對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的對(duì)條件和參數(shù)的其它合適的修改和改變屬于本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 共價(jià)約束的Smac模擬物的合成
一般性方法在300MHz的質(zhì)子頻率下獲得NMR光譜。用Me4Si(0.00ppm)、CHCl3(7.26ppm)、CD2HOD(3.31ppm)或DHO(4.79ppm)作為內(nèi)標(biāo)報(bào)告1H化學(xué)位移。用CDCl3(77.00ppm)、CD3OD(49.00ppm)或1，4-二氧雜環(huán)己烷(67.16ppm)作為內(nèi)標(biāo)報(bào)告13C化學(xué)位移。在室溫測(cè)定旋光度。可以通過(guò)反相HPLC(0.1％TFA的水溶液和0.1％TFA乙腈溶液作為洗脫劑)，純化本發(fā)明的化合物并將其分離為TFA鹽。
一般性程序A(羧酸和胺之間的縮合)
在0℃攪拌下，向兩種底物的CH2Cl2(20mg/mL，對(duì)于次要的底物)溶液中添加EDC(每氨基1.1eq)、HOBt(每氨基1.1eq)和N，N-二異丙基乙胺(每氨基4eq)。在室溫將混合物攪拌8小時(shí)然后濃縮。通過(guò)所述色譜法純化殘余物，得到產(chǎn)物。
一般性程序B(Boc脫保護(hù))
向所述底物的甲醇溶液(20mg/mL)中添加HCl的1，4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4M，10-20eq/Boc)。在室溫將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮，得到產(chǎn)物。
實(shí)施例2 Smac模擬物中間體的合成
可以使用方案1-7中所述的方法學(xué)，合成構(gòu)象約束的Smac模擬物的合成途徑中的中間體。
方案1
試劑和條件(a)i.4N HCl在1，4-二氧雜環(huán)己烷，甲醇中；ii.Boc-Dap(Z)-OH，EDC，HOBt，N，N-二異丙基乙胺，CH2Cl2，52％，兩步；；(b)O3，然后PPh3，CH2Cl2，90％；(c)H2，10％Pd-C，i-PrOH，41％；(d)H2，10％Pd-C，i-PrOH；(e)NaBH(OAc)3，THF；(f)9-BBN(2eq)，THF，回流，12h，然后3N NaOH(2eq)，35％H2O2(2.5eq)，0℃-rt，85％；(f)i.Dess-Martin periodinane，CH2Cl2；ii.H2，10％Pd-C，i-PrOH，50％，兩步；(h)H2，10％Pd-C，i-PrOH；(i)NaBH(OAc)3，THF.
方案1中顯示了中間體5和7的合成。可以根據(jù)報(bào)道的方法，用五步由焦谷氨酸1制備化合物2(參見(jiàn)(1)Zhang，J.；Xiong，C.；Wang，W.；Ying，J.；Hruby，V.，J.Org.Lett.，2002，4(23)，4029-4032，(2)Polyak，F(xiàn).和Lubell，W.D.J.Org，Chem.1998，63，5937-5949，以及(3)Tetrahedron Letters 2005，46，945-947.)，為兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，R型異構(gòu)體為主要產(chǎn)物(比例約為4∶1)。除去2中的Boc基團(tuán)，接著與N-α-(叔丁氧羰基)-N-β-(芐氧羰基)-L-二氨基-丙酸(Boc-Dap(Z)-OH)縮合，得到酰胺3。臭氧氧化3中的C-C雙鍵，得到醛4。裂解4中的Cbz基團(tuán)，所得到的胺與所述醛基團(tuán)分子內(nèi)縮合，隨后在延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間下，在一鍋中實(shí)現(xiàn)烯胺的還原，得到化合物5。可替代地，將4的CBz基團(tuán)脫保護(hù)，分子內(nèi)環(huán)化，分離烯胺中間體并還原，提供5。在該轉(zhuǎn)化中，只獲得化合物5，沒(méi)有可檢測(cè)的其異構(gòu)體形成，這提示在這些條件下來(lái)自次要異構(gòu)體的氨基醛沒(méi)有環(huán)化。

向化合物2(540mg，2mmol)在20mL甲醇中的溶液中添加4mL的4N HCl在1，4-二氧雜環(huán)己烷中的溶液。在室溫將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮，得到銨鹽。向該鹽在15mL二氯甲烷中的混合物中添加1.17g(2.4eq)Boc-Dap(Z)-OH·DCHA、460mg(2.4mmol)EDC、320mg(2.4mmol)HOBt和3mL N，N-二異丙基乙胺。在室溫將混合物攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)色譜法純化殘余物，得到化合物3(YP-348)(580mg，59％)。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)(主要異構(gòu)體)δ7.34-7.28(m，5H)，5.80-5.77(m，1H)，5.59(m，1H)，5.36-5.33(d，J＝10.0Hz，2H)，5.19-5.01(m，4H)，4.67-4.62(m，1H)，4.47-4.44(m，1H)，3.76-3.74(s，1H)，3.74-3.71(s，2H)，2.32-2.30(m，1H)，2.16-2.12(m，1H)，1.99-1.95(m，2H)，1.42(s，9H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ172.4，170.5，156.5，155.2，136.4，134.6，133.8，128.3，127.9，118.5，117.1，80.0，66.6，59.7，58.2，52.6，43.4，29.2，28.1，26.6。

在-78℃，使O3通過(guò)化合物3(490mg，1mmol)在20mLCH2Cl2中的溶液中鼓泡，直到顏色變成淡藍(lán)色。再通入O3鼓泡15分鐘，然后通入空氣鼓泡以除去過(guò)量的O3。添加3mL Et3N后，將混合物溫至室溫并攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑并通過(guò)色譜法純化殘余物，得到醛4(YP-367)(340mg，69％)。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)(主要的異構(gòu)體)δ9.78-9.67(m，1H)，7.53-7.32(m，5H)，5.44(s，1/2H)，5.32(s，1/2H)，5.15-5.06(m，2H)，4.64(m，1H)，4.40-4.39(m，1H)，3.78-3.76(s，3/2H)，3.76-3.74(s，3/2H)，3.48-3.42(m，3H)，2.78-2.52(m，1H)，2.40-2.20(m，1H)，2.16(m，2H)，2.06-1.89(m，1H)，1.44-1.43(m，9H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ200.3，199.5，172.6，172.2，170.3，156.5，136.4，128.4，128.0，66.7，59.7，59.1，54.3，52.4，52.3，48.4，43.3，29.6，28.2，21.0。

向化合物4(290mg，0.6mmol)在20mL異丙醇中的溶液中添加0.2g 10％Pd/C。在H2下，在室溫將混合物攪拌過(guò)夜，通過(guò)硅藻土過(guò)濾并濃縮。將殘余物溶于無(wú)水THF中。向該溶液中，添加NaBH(OAc)3(380mg，1.8mmol)。在室溫將混合物攪拌過(guò)夜，以CH2Cl2稀釋，以鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并濃縮。通過(guò)色譜法純化殘余物，得到化合物5(72mg，35％)。[α]20D-30.2(c＝1.7，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ5.45(brd，J＝8.0Hz，1H)，4.67(m，1H)，4.52(t，J＝9.0Hz，1H)，4.23(m，1H)，3.74(s，3H)，3.20(m，2H)，2.94(m，1H)，2.74(dd，J＝13.6，10.9Hz，1)，2.35(m，1H)，2.14(m，1H)，1.99(m，1H)，1.86-1.74(m，3H)，1.66(m，1H)，1.43(brs，9H)；13C NMR(75MHz，CDCl3，TMS)δ173.42，170.60，155.16，79.68，59.46，58.39，54.92，52.44，46.72，37.45，32.15，29.64，28.29，26.98。

用9-BBN氫硼化3中的C-C雙鍵，接著堿性氧化所得到的硼烷，得到醇6。用Dess-Martin periodinane氧化6，得到兩種醛的混合物，以與用于化合物5的相同的程序?qū)⑵洵h(huán)化，得到化合物7。類似于5，在該轉(zhuǎn)化過(guò)程中只獲得一種異構(gòu)體。

化合物7的分析數(shù)據(jù)[α]20D-23.2(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ5.23(brd，J＝8.0Hz，1H)，4.79(m，1H)，4.65(dd，J＝9.7，8.2Hz)，4.22(m，1H)，3.74(s，3H)，3.02-2.80(m，4H)，2.38-1.70(m，9H)，1.43(brs，9H)；13CNMR(75MHz，CDCl3，TMS)δ173.38，171.59，155.09，79.68，62.03，59.82，53.72，53.15，52.48，50.09，34.66，34.55，29.47，28.31，27.33。
方案2

YP-248P的分析數(shù)據(jù)1H NMR顯示，該化合物具有兩種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其比例為2∶1。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.47-7.44(m，1H)，7.38-7.32(m，4H)，5.65-5.62(d，J＝8Hz，1H)，5.31-5.16(m，2H)，4.64-4.60(m，1H)，4.51-4.46(t，J＝8Hz，1H)，4.24-4.23(m，1H)，4.23-4.21(m，1H)，3.75(s，1H)，3.73(s，2H)，3.66-3.63(m，1H)，3.63-3.61(m，1H)，3.61-3.31(m，1H)，2.36-2.34(m，1H)，2.11-1.76(m，6H)，1.44-1.45(s，9H)。

酰胺中間體的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ5.79(brd，J＝7.0Hz，1H)，4.50-4.35(m，2H)，4.05(m，1H)，3.98-3.85(m，2H)，3.70(s，3H)，3.32-3.04(m，2H)，2.54(m，1H)，2.40-2.26(m，2H)，2.25-1.60(m，6H)，1.39(s，9H)，0.98-0.89(m，6H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ173.12，172.52，168.85，154.69，79.80，59.51，56.11，54.38，53.51，52.23，46.18，42.02，32.51，31.12，28.12，26.54，25.81，22.69，22.40。
方案3

YP-237P的分析數(shù)據(jù)[α]20D-21.5°(c＝1.0，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ3.71(t，J＝6.5Hz，3H)，3.60(dd，J＝9.0，5.4Hz，1H)，3.11(m，1H)，2.05(m，1H)，1.95-1.63(m，3H)，1.46(s，9H)，1.25(m，1H)，0.89(s，9H)，0.05(s，6H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ174.5，80.8，61.5，60.6，57.5，38.8，31.8，30.4，28.0，25.9，18.2，-5.4；HRMS[M+H]+m/z的計(jì)算值330.2464；實(shí)測(cè)值330.2466。

YP-238P的分析數(shù)據(jù)[α]20D-90.0°(c＝1.67，CHCl3)；1HNMR顯示，該化合物具有兩種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其比例為1∶1。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.28(m，5H)，5.59(m，1H)，5.35(m，1H)，5.20-5.05(m，2H)，4.85(m，1/2H)，4.65(m，1/2H)，4.46(m，1H)，4.35(m，1H)，3.80(m，1/2H)，3.70-3.50(m，2H)，3.40(m，1H)，3.25(m，1/2H)，2.32(m，1H)，2.20-1.50(m，4H)，1.46(s，4.5H)，1.44(s，4.5H)，1.43(s，4.5H)，1.41(s，4.5H)；HRMS[M+Na]+m/z的計(jì)算值558.2791；實(shí)測(cè)值558.2794。

YP-239的分析數(shù)據(jù)[α]20D-51.6°(c＝1.67，CHCl3)；1HNMR顯示，該化合物具有兩種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其比例為2∶1。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ9.76(s，2/3H)，9.71(s，1/3H)，7.40-7.28(m，5H)，5.72-5.30(m，2H)，5.20-4.95(m，2H)，4.90-4.25(m，3H)，3.52-3.05(m，3H)，2.90-1.60(m，4H)，1.50-1.35(m，18H)；HRMS[M+Na]+m/z的計(jì)算值556.2635；實(shí)測(cè)值556.2629。

YP-239P的分析數(shù)據(jù)[α]20D-8.4°(c＝0.65，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ5.49(brd，J＝8.1Hz，1H)，4.70(m，1H)，4.41(t，J＝9.3Hz，1H)，4.30(m，1H)，3.25-3.18(m，2H)，2.89(m，1H)，2.75(dd，J＝13.5，11.1Hz，1H)，2.34(m，1H)，2.18-1.60(m，6H)，1.49(s，9H)，1.44(s，9H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ171.8，170.4，155.2，81.7，79.5，60.6，58.5，54.9，52.3，46.9，37.5，32.1，28.3，28.0，27.0；HRMS[M+Na]+m/z的計(jì)算值406.2318；實(shí)測(cè)值406.2317。
方案4


YP-244的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.92-7.75(m，1H)，7.48-7.46(m，1H)，7.37-7.24(m，15H)，6.24-6.18(t，J＝8.3Hz，1H)，5.76-5.70(t，J＝7.3Hz，1H)，5.15(s，2H)，4.70-4.65(m，1H)，4.57-4.54(m，1H)，4.15-4.10(m，2H)，3.60-3.40(m，1H)，2.67-2.61(m，2H)，2.12-2.01(m，2H)，1.82-1.76(m，2H)，1.48-1.47(s，9H)。

YP-244P2的分析數(shù)據(jù)1H NMR顯示，該化合物具有兩種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其比例為1∶1。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.83-7.69(m，1H)，7.47-7.45(m，1H)，7.36-7.26(m，15H)，6.24-6.18(t，J＝8.2Hz，1H)，5.15(s，2H)，4.89-4.79(m，1H)，4.70-4.62(q，J＝6.9Hz，1H)，4.23-4.07(m，2H)，3.60-3.47(1H)，2.82(s，3/2H)，2.79(s，3/2H)，2.62-2.59(m，2H)，2.48-2.30(m，1H)，2.13-2.03(m，2H)，1.86-1.79(m，2H)，1.51(s，9/2H)，1.49(s，9/2H)，1.38-1.35(d，J＝7.0Hz，3H)。

YP-245的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ9.09-9.07(d，J＝7.2Hz，1H)，7.32-7.18(m，10H)，6.99-6.80(br，1H)，6.23-6.20(d，J＝7.3Hz，1H)，5.08-5.04(m，1H)，4.72-4.67(t，J＝8.5Hz，1H)，4.33-4.18(m，1H)，307-2.94(m，1H)，2.80(s，3H)，2.73-2.54(m，1H)，2.53-2.38(m，1H)，2.31-2.24(t，J＝11Hz，1H)，2.18-2.00(m，2H)，1.75-1.74(m，2H)，1.53(s，9H)，1.35-1.26(d，J＝7.1Hz，3H)。

YP-370的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.60-7.05(m，9H)，5.78-5.50(m，1H)，5.20-5.11(m，2H)，4.65-4.30(m，2H)，4.28-4.22(m，1H)，3.60-3.48(m，1H)，3.42-3.38(m，1H)，2.93-2.68(m，2H)，2.58-2.40(m，1H)，2.28-1.98(m，4H)，1.98-1.70(m，6H)，1.44(s，9H)。

YP-372的分析數(shù)據(jù)1H NMR顯示，該化合物具有兩種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，其比例為1∶1。1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ7.45(m，1H)，7.36-7.10(m，9H)，6.72-6.58(m，1H)，5.21-5.14(t，J＝9.9Hz，2H)，4.82(m，1H)，4.48-4.41(m，1H)，4.14-4.09(m，2H)，3.82-3.60(m，1H)，3.20-2.90(m，2H)，2.79(s，3/2H)，2.77(s，3/2H)，2.50-2.36(m，1H)，2.18-2.01(m，4H)，1.89-1.82(m，6H)，1.49(s，9/2H)，1.46(s，9/2H)，1.37-1.33(m，3H)；HRMS[M+Na]+m/z的計(jì)算值698.3530；實(shí)測(cè)值698.3541。

YP-373的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CDCl3，TMS)δ8.77-8.75(d，J＝7.1Hz，1H)，7.21-7.05(m，4H)，6.90-6.73(br，1H)，5.06-4.98(m，2H)，4.65-4.59(t，J＝8.1Hz，1H)，4.23-4.17(m，1H)，3.02-3.01(m，1H)，2.76(s，3H)，2.70-2.68(m，2H)，2.60-2.48(m，2H)，2.38(m，1H)，2.12-2.03(m，4H)，1.82-1.72(m，6H)，1.47(s，9H)，1.32-1.29(d，J＝7.1Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ170.6，168.4，137.6，136.4，129.3，128.9，127.2，125.8，60.3，58.2 54.4，49.3，47.4，46.8，34.9，31.8，29.0，28.2，27.6，18.7，14.1；HRMS[M+Na]+m/z的計(jì)算值564.3162；實(shí)測(cè)值564.3163。
方案5

可以通過(guò)方案5中所示的方法，制備式A表示的化合物，其中m是1-2，并且R1和R2獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。簡(jiǎn)言之，用Cbz保護(hù)基團(tuán)保護(hù)中間體a中的氨基，得到中間體b。水解b的酯基團(tuán)，產(chǎn)生酸c。將c與胺NR1R2縮合，得到式A的化合物。
方案6

可以如方案6中所示，制備式B表示的化合物，其中A1、A2、Z、X、T、U、m和R5具有上文關(guān)于式I所述的含義。簡(jiǎn)言之，除去a中的Boc保護(hù)基團(tuán)，提供胺b。將b與相應(yīng)的Boc-保護(hù)的氨基酸縮合，得到酰胺c。除去c中的Cbz保護(hù)基團(tuán)，得到胺d。向d中的氨基引入R5，得到e?？梢杂孟鄳?yīng)的烷基鹵(例如，MeI)取代d或用適合的親電體通過(guò)其它親核置換反應(yīng)，引入R5。當(dāng)R5是COR7時(shí)，可以通過(guò)將d與R7CO-L(其中L是離去基團(tuán))縮合，引入COR7。例如，R7CO-L可以是相應(yīng)的羧酸(即，R7CO2H)或酰氯(即，R7COCl)。除去e中的Boc保護(hù)基團(tuán)，得到f。通過(guò)用烷基鹵取代f或用相應(yīng)的醛還原性胺化f，引入A1基團(tuán)，提供式B表示的Smac模擬物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)將d與相應(yīng)的羧酸(即，R7CO2H)縮合，引入COR7。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在活化劑(例如，二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺、苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷翁六氟磷酸鹽)的存在下，進(jìn)行R7CO2H與d的縮合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活化劑是1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在活化劑和一種或多種另外的添加劑(例如，N-羥基苯并三唑)的存在下，進(jìn)行R7CO2H與d縮合，以使反應(yīng)參數(shù)例如收率最佳化。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述反應(yīng)在大約1小時(shí)至大約24小時(shí)內(nèi)完成。在一個(gè)實(shí)施方案中，在大約-20℃至大約25℃的溫度下進(jìn)行所述反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在惰性有機(jī)溶劑例如乙腈、苯、氯仿、1，2-二氯乙烷、1，2，-二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、N-甲基-2-吡咯烷酮或四氫呋喃中進(jìn)行所述反應(yīng)。
方案7

可以用方案7中所示的方法，合成式C表示的化合物(其中m是1或2，并且R1、R2和R7具有上文關(guān)于式I所述的含義)。還原a中的酯基團(tuán)，得到醇b。甲磺酸化b中的羥基，接著用疊氮化鈉取代所得到的甲磺酸酯，得到疊氮化物c。在THF-H2O中用PPh3還原疊氮化物，提供胺d。用醛R1CHO還原性胺化d，得到胺e。向e中的氨基引入R″，得到式C的化合物。當(dāng)R″是R2時(shí)，可以通過(guò)用烷基鹵或其它適合的親電體取代，或還原性胺化醛，將其與氨基相連。當(dāng)R″是COR7時(shí)，可以通過(guò)將e與R7CO-L(其中L是離去基團(tuán))縮合，將其引入。在一個(gè)實(shí)施方案中，R7CO-L是酸(即，R7CO2H)或酰氯(即，R7COCl)。
實(shí)施例3

YP-245P3的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O，TMS)δ7.28-7.20(m，10H)，5.97(s，1H)，5.25(br，1H)，4.51(br，1H)，3.91-3.84(q，J＝7.1Hz，1H)，3.82-3.70(m，1H)，3.58-3.55(m，1H)，3.48-3.43(m，1H)，3.23-3.19(t，J＝12Hz，1H)，2.90(s，3H)，2.56(s，3H)，2.40-2.36(m，1H)，2.13-1.73(m，5H)，1.41-1.38(d，J＝7.1Hz，3H)；HRMS[M+H]+m/z的計(jì)算值492.2975；實(shí)測(cè)值492.2971。
實(shí)施例4

YP-246P的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O，TMS)δ7.33-7.13(m，15H)，6.03-6.01(m，1H)，5.32-5.30(m，1H)，4.64-4.61(m，1H)，4.31(s，2H)，3.85-3.83(q，J＝7.1Hz，1H)，3.69(m，1H)，3.59-3.51(m，1H)，3.12-3.08(t，J＝11.6Hz，1H)，2.55(s，3H)，2.40-2.28(m，1H)，2.09-2.04(m，1H)，1.81-1.66(m，4H)，1.37-1.35(d，J＝7.1Hz，3H)；HRMS[M+H]+m/z計(jì)算值568.3288；實(shí)測(cè)值568.3284。
實(shí)施例5

SM-330的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O，TMS)δ8.88-8.76(m，1H)，7.30-7.18(m，10H)，5.95-5.93(d，J＝4.7Hz，1H)，4.93-4.91(m，1H)，4.38-4.26(m，1H)，4.24(m，1H)，3.90-3.86(m，1H)，3.69-3.65(m，1H)，3.50-3.38(m，2H)，2.58(s，3H)，2.23-2.18(m，1H)，2.04(s，3H)，1.93(s，2H)，1.81-1.74(m，4H)，1.43-1.41(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ175.3，173.3，172.9，170.2，141.2，129.2，128.1，127.7，62.3，62.1 58.5，57.8，57.3，52.6，51.8，32.2，31.3，27.5，21.5，20.7，15.5；HRMS[M+H]+m/z計(jì)算值520.2924；實(shí)測(cè)值520.2924。
實(shí)施例6

SM-337的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CD3OD，TMS)δ7.34-7.27(m，15H)，6.18-6.15(d，J＝8.0Hz，1H)，4.60-4.57(m，1H)，4.28(m，1H)，4.12-4.07(m，1H)，3.99-3.82(m，4H)，3.50-3.40(m，1H)，2.67(s，3/2H)，2.66(s，3/2H)，2.34(m，1H)，2.07-2.00(m，3H)，1.88-1.81(m，2H)，1.56-1.52(d，J＝6.8Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CD3OD)δ174.6，174.0，169.6，169.4，143.1，136.4，130.3，129.5，128.6，128.2，127.8，62.7，58.3，54.2，41.6，33.3，31.9，28.2，16.3。
實(shí)施例7

SM-350的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CD3OD，TMS)δ8.94-8.92(d，J＝7.9Hz，1H)，7.34-7.26(m，12H)，7.04-6.98(m，2H)，6.18-6.15(d，J＝7.9Hz，1H)，4.60-4.57(m，1H)，4.31(br，1H)，4.02-3.76(m，4H)，3.50(m，1H)，2.68(s，3H)，2.34(m，1H)，2.11-1.82(m，5H)，1.55-1.53(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CD3OD)δ173.2，170.2，169.7，164.8，161.5，143.1，132.5，131.9，129.6，128.6，128.1，116.2，62.7，58.4，53.9，40.5，33.3，32.3，31.8，28.3，16.3；HRMS[M+Na]+m/z計(jì)算值636.2962；實(shí)測(cè)值636.2974。
實(shí)施例8

SM-356的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CD3OD，TMS)δ8.93-8.91(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38-7.26(m，11H)，6.90-6.86(m，2H)，6.18-6.16(d，J＝7.9Hz，1H)，5.10-5.00(m，1H)，4.61-4.58(m，1H)，4.40-4.28(m，1H)，4.15-3.91(m，4H)，3.36(m，2H)，2.69(s，2H)，2.67(s，1H)，2.42-2.28(m，1H)，2.02-1.95(m，5H)，1.55-1.53(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CD3OD)δ173.2，172.4，170.2，169.7，169.4，143.2，134.1，129.6，128.4，128.1，120.1，112.0，104.1，62.7，58.4，53.9，34.2，33.3，32.3，31.7，28.3，16.2；HRMS[M+Na]+m/z計(jì)算值654.2868；實(shí)測(cè)值654.2866。
實(shí)施例9

SM-376的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CD3OD，TMS)δ8.50-8.43(m，1H)，7.46-7.44(m，1H)，7.32-7.31(m，4H)，7.26-7.24(m，1H)，7.15-7.11(m，3H)，5.09(m，2H)，4.43(m，1H)，4.20(m，1H)，4.01-3.92(m，4H)，3.58-3.42(m，1H)，2.83-2.81(m，2H)，2.70(s，1H)，2.68(s，2H)，2.38-2.25(m，1H)，2.09-1.82(m，8H)，1.27-1.53(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CD3OD)δ174.1，173.6，169.6，169.3，138.5，137.9，136.5，130.2，129.8，128.0，127.0，62.9，58.3，54.4，41.6，32.1，31.9，31.4，30.2，28.4，21.7，16.4；HRMS[M+Na]+m/z計(jì)算值582.3056；實(shí)測(cè)值582.3080。
實(shí)施例10

SM-377的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，CD3OD，TMS)δ8.50-8.40(m，1H)，7.47-7.44(m，1H)，7.36-7.31(m，2H)，7.15-7.01(m，5H)，5.09(m，2H)，4.43(m，1H)，4.38-4.28(m，1H)，4.12(m，1H)，4.02-3.93(m，4H)，2.83-2.81(m，2H)，2.70(s，3H)，2.38-2.28(m，1H)，2.12-1.82(m，8H)，1.56-1.53(d，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(75MHz，CD3OD)δ173.8，173.5，169.7，169.3，138.5，132.5，131.8，129.9，126.9，116.3，62.9，58.3，57.8，54.1，40.6，33.4，32.2，31.7，30.2，28.4，21.7，16.3；HRMS[M+H]+m/z計(jì)算值578.3143；實(shí)測(cè)值578.3147。
實(shí)施例11

SM-401的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.37(m，2H)，7.30(m，5H)，7.05(m，2H)，4.46(m，2H)，4.33(m，2H)，3.92-3.81(m，6H)，3.54(m，1H)，3.32(m，1H)，2.74(s，3H)，2.34(m，1H)，2.16-1.78(m，5H)，1.54(d，J＝6.3Hz，3H)。13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ173.2，168.8，168.5，164.0，160.8，135.3，129.4，129.2，128.8，126.9，115.3，115.0，62.0，61.2，57.3，57.1，53.2，53.0，42.9，42.3，40.7，32.5，31.3，27.5，15.5。
實(shí)施例12

SM-402的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.60(m，1H)，7.40(m，4H)，7.02(m，4H)，4.52-4.43(m，2H)，4.35-4.29(m，2H)，4.08-3.80(m，6H)，3.54(m，1H)，3.38(m，1H)，2.70(s，3H)，2.33(m，1H)，2.13-1.82(m，5H)，1.54(d，J＝6.9Hz，3H)。13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ173.1，172.8，168.8，168.5，164.1，135.1，131.5，131.0，129.2，115.3，115.0，61.9，57.3，52.9，42.3，39.6，32.4，31.3，30.9，27.3，15.3 實(shí)施例13

SM-403的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.39-7.22(m，9H)，7.08-7.02(m，4H)，6.15(d，J＝6.0，1H)，4.97(m，1H)，4.54(m，1H)，4.30(m，1H)，4.02-3.66(m，6H)，3.59-3.54(m，1H)，2.66(s，3H)，2.33(m，1H)，2.11-1.80(m，5H)，1.53(d，J＝6.6Hz，3H)。13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ173.4，172.4，168.8，168.4，164.2，160.9，138.1，135.3，129.8，129.7，129.6，129.5，129.4，129.0，128.7，128.6，126.9，115.6，115.3，115.0，72.6，61.9，57.3，56.2，53.1，47.0，40.6，32.3，31.5，31.1，27.4，15.5。
實(shí)施例14

SM-404的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.37-7.25(m，6H)，7.11-6.91(m，6H)，6.15(d，J＝7.5，1H)，4.83(m，1H)，4.54(m，1H)，4.30(m，1H)，4.02-3.60(m，6H)，3.51(m，1H)，2.94(m，2H)，2.72(s，3H)，2.23(m，1H)，2.11-1.80(m，5H)，1.53(d，J＝6.6Hz，3H)。13C NMR(MeOH-d4，300MHz)δ174.0，172.4，168.7，168.4，163.7，160.8，137.9，137.4，130.7，130.6，129.9，129.8，129.6，129.5，115.6，115.3，115.1，115.0，114.0，71.5，67.2，57.4，56.0，55.9，52.8，51.7，35.0，32.3，31.5，31.1，30.7，27.4，15.4。
實(shí)施例15

SM-405的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.40-7.25(m，10H)，6.15(s，1H)，4.61-4.55(m，1H)，4.28-4.22(m，1H)，4.00-3.95(m，2H)，3.86-3.81(m，1H)，3.68-3.66(m，1H)，3.45-3.40(m，1H)，2.94-2.92(m，1H)，2.72(s，3H)，2.68-2.57(m，2H)，2.34-2.23(m 2H)，2.16-1.79(m，7H)，1.66-1.53(m，4H)，1.52(d，J＝7.2Hz，3H)。13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ176.1，172.2，168.8，168.3，142.2，142.1，132.2，132.0，129.1，128.7，128.4，127.9，127.8，127.7，127.5，127.2，61.8，57.5，57.3，53.1，38.9，38.7，37.2，32.5，32.2，31.4，31.0，27.4，24.9，15.3。
實(shí)施例16

SM-406的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.38-7.25(m，10H)，6.14(d，J＝7.5Hz，1H)，4.62-4.56(m，1H)，4.30-4.25(m，1H)，4.05-3.96(m，2H)，3.87-3.49(m，4H)，2.72(s，3H)，2.46(m，2H)，2.37-2.32(m，1H)，2.15-2.00(m，5H)，1.84-1.80(m，1H)，1.56(d，J＝5.4Hz，3H)，1.00(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ175.7，172.3，168.8，168.3，142.2，142.1，132.2，132.0，129.1，129.0，128.7，128.4，127.8，127.7，127.5，127.2，61.8，57.4，57.3，53.2，41.7，38.6，37.2，32.2，31.4，31.0，27.4，26.3，22.0，15.3。
實(shí)施例17

SM-407的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.31-7.27(m，12H)，6.94(m，2H)，6.15(m，1H)，4.82-4.70(m，1H)，4.53(m，1H)，4.09-3.58(m，5H)，3.36(m，1H)，3.05-2.72(m，4H)，2.71(s，3H)，2.30(m，1H)，2.05-1.81(m，5H)，1.56(m，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ173.9，172.3，169.4，168.5，163.5，160.2，142.3，142.1，137.5，132.9，132.2，130.8，130.6，129.0，128.6，127.7，127.5，127.3，115.2，114.9，61.9，57.6，57.2，53.1，52.9，46.8，38.2，35.3，34.9，32.4，31.6，30.8，27.5，15.8。
實(shí)施例18

SM-408的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.35-7.16(m，15H)，6.18(m，1H)，4.82-4.70(m，1H)，4.53(m，1H)，4.09-3.58(m，5H)，3.30(m，1H)，3.10(m，1H)，2.98(t，J＝6.0Hz，2H)，2.75(m，1H)，2.72(s，3H)，2.30(m，1H)，2.05-1.81(m，5H)，1.56(m，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.3，172.4，169.0，168.5，142.3，141.8，132.9，132.1，129.1，128.9，128.7，128.5，127.7，127.6，127.3，126.2，61.8，57.4，57.2，52.8，46.6，34.9，32.3，31.7，30.9，27.5，15.4。
實(shí)施例19

SM-409的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.37-7.26(m，10H)，6.16(s，1H)，4.60(m，1H)，4.26(m，1H)，4.06-3.92(m，2H)，3.80(m，1H)，3.68-3.35(m，2H)，2.72(s，3H)，2.56(m，2H)，2.30(m，1H)，2.05-1.81(m，5H)，1.64(q，J＝7.5Hz，2H)，1.56(d，J＝6.6Hz，3H)，0.96(t，J＝7.5Hz，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ175.6，172.3，168.7，168.5，142.2，142.1，132.9，132.8，132.2，132.0，129.1，129.0，128.7，128.4，127.7，127.3，61.8，57.4，57.3，53.0，46.9，35.3，34.9，32.4，31.4，30.9，27.3，18.9，15.4，13.3。
實(shí)施例20
試劑和條件i.苯乙酸，EDC，HOBt，N，N-二異丙基乙胺，CH2Cl2；ii.3N LiOH，1，4-二氧雜環(huán)己烷，然后1N HCl； iii.氨基二苯基甲烷，EDC，HOBt，N，N-二異丙基乙胺，CH2Cl2；iv.4N HCl，1，4-二氧雜環(huán)己烷中，v.N-Boc-N-甲基丙氨酸，EDC，HOBt，N，N-二異丙基乙胺，CH2Cl2；vi.4N HCl，1，4-二氧雜環(huán)己烷中，62％，六步。

將7與苯乙酸縮合，接著水解甲基酯，得到酸，將該酸與氨基二苯胺縮合，得到酰胺。除去該酰胺中的Boc保護(hù)基團(tuán)，提供銨鹽。將該鹽與N-Boc-N-甲基-丙氨酸縮合，接著除去Boc保護(hù)基團(tuán)，得到SH-207。


SM-207的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.22-6.80(m，15H)，5.95(s，1H)，4.75(m，1H)，4.38(m，1H)，4.18-3.45(m，5H)，3.42-2.85(m，3H)，2.67(s，3H)，2.12-0.80(m，11H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ174.27，172.09，170.94，169.24，142.01，141.83，141.68，134.86，129.32，128.16，128.99，127.76，127.34，71.92，61.13，58.57，57.31，49.77，49.21，49.05，41.46，31.44，18.06，15.73，15.62。
實(shí)施例21

SM-412的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.81(m，1H)，7.41-7.26(m，10H)，6.06(m，1H)，4.56-4.43(m，3H)，4.11(m，2H)，3.99-3.76(m，4H)，3.58-3.47(m，4H)，3.32(m，1H)，2.72(m，3H)，2.34-1.80(m，6H)，1.60(m，3H)，13CNMR(MeOH-d4，300M Hz)δ172.1，169.2，168.7，164.1，163.6，160.2，142.3，142.0，128.7，128.2，127.9，127.7，127.5，127.3，116.3，62.2，58.0，57.8，53.5，50.3，46.4，37.3，32.0，30.8，27.9，15.2。
實(shí)施例22

SM-413的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ9.00(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41-7.26(m，10H)，6.17(m，1H)，4.62(m，2H)，4.32(m，1H)，4.00(m，2H)，3.75(m，3H)，3.47(m，1H)，3.20(m，1H)，2.92(m，1H)，2.72(2s，3H)，2.30(m，1H)，2.07-1.80(m，5H)，1.54(d，J＝7.2Hz，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.8，172.4，171.7，168.8，168.5，142.2，142.0，128.7，128.4，127.8，127.7，127.5，127.3，68.2，61.8，57.3，51.7，46.9，37.7，32.2，30.8，27.4，15.2。
實(shí)施例23

SM-414的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.80(m，1H)，7.41-7.26(m，12H)，6.09(m，1H)，5.12(m，1H)，4.56(m，2H)，4.32(m，1H)，4.18(m，1H)，4.03(m，2H)，3.75(m，2H)，3.46(m，1H)，3.16(m，1H)，2.72(s，3H)，2.30-1.80(m，6H)，1.54(m，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ172.2，171.4，170.4，169.1，168.7，142.3，142.2，136.0，128.7，128.4，128.1，127.9，127.6，127.5，127.1，122.4，119.6，62.1，57.6，57.3，46.4，45.4，33.4，32.3，30.8，27.7，15.2。
實(shí)施例24

SM-415的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.97(d，J＝8.4Hz，1H)，7.38-7.25(m，10H)，6.16(m，1H)，4.80(m，1H)，4.58(m，1H)，4.25(m，1H)，3.96(m，3H)，3.47(m，1H)，3.20(m，1H)，2.72(s，3H)，2.62(m，1H)，2.49(m，1H)，2.34(m，1H)，2.15-1.87(m，5H)，1.56(m，3H)，1.08(s，9H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.2，172.5，169.0，168.4，142.1，142.0，128.7，128.5，127.8，127.7，127.5，127.3，61.7，57.4，57.3，53.1，51.9，46.7，44.6，32.5，31.5，31.2，30.8，29.4，27.2，15.3。
實(shí)施例25

SM-416的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.95(d，J＝8.1Hz，1H)，7.38-7.25(m，10H)，6.16(m，1H)，4.80(m，1H)，4.56(m，1H)，4.25(m，2H)，3.92(m，3H)，3.47(m，1H)，2.72(s，3H)，2.60(m，3H)，2.34(m，1H)，2.12-1.81(m，8H)，1.56(m，4H)，1.47(m，1H)，1.30(m，1H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.6，172.4，169.5，168.4，142.2，142.0，128.7，128.4，127.8，127.7，127.5，127.3，73.0，61.7，57.3，57.2，53.1，51.9，46.6，42.0，39.4，34.4，32.5，31.2，30.8，27.2，15.2。
實(shí)施例26

SM-418的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.37-7.25(m，10H)，6.16(m，1H)，4.89(m，1H)，4.58(m，1H)，4.40(m，1H)，4.26(m，1H)，4.03-3.83(m，3H)，3.66-3.48(m，3H)，H)，2.70(m，3H)，2.33(m，1H)，2.08-1.75(m，10H)，1.54(m，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ177.6，172.4，169.2，168.6，142.2，142.0，128.7，128.5，128.4，127.8，127.7，127.6，127.5，127.3，73.4，61.7，57.3，57.1，53.0，51.9，46.9，39.4，38.9，34.7，32.7，31.3，30.8，28.0，27.3，15.2。
實(shí)施例27

SM-419的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.37-7.25(m，10H)，6.16(m，1H)，4.89(m，1H)，4.58(m，2H)，4.26(m，1H)，4.03-3.71(m，5H)，3.55-3.37(m，2H)，2.70(m，3H)，2.67(m，2H)，2.33(m，1H)，2.08-1.75(m，6H)，1.54(m，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ173.5，172.2，169.2，168.6，142.2，141.9，128.8，128.7，128.5，128.4，128.2，127.8，127.7，127.6，127.5，127.3，127.2，73.1，67.5，61.8，57.3，46.6，37.1，35.9，32.5，32.1，31.4，30.8，27.4，15.2。
實(shí)施例28

SM-420的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.38-7.25(m，10H)，6.16(s，1H)，4.87(m，1H)，4.58(m，1H)，4.24(m，1H)，3.98(m，2H)，3.75(m，1H)，3.42(m，1H)，3.24(m，1H)，2.68(s，3H)，2.49(m，2H)，2.37-2.32(m，1H)，2.15-2.00(m，5H)，1.84-1.80(m，1H)，1.56(m，6H)，1.00(2d，J＝6.0Hz，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ175.4，172.4，168.9，168.6，142.2，142.0，128.7，128.5，127.8，127.7，127.5，127.3，61.8，57.3，53.0，52.0，46.6，34.4，32.5，31.5，30.9，28.0，27.3，22.0，21.9，15.3。
實(shí)施例29

SM-421的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.95(m，1H)，7.38-7.14(m，15H)，6.17(m，1H)，4.85(m，1H)，4.56(m，1H)，4.23(m，1H)，4.04-3.85(m，2H)，3.73(m，1H)，3.46(m，1H)，3.20(m，1H)，2.70(2s，3H)，2.62(t，J＝7.8Hz，2H)，2.45(m，2H)，2.30(m，1H)，2.05-1.81(m，7H)，1.54(d，J＝7.2Hz，3H)，13C NMR (MeOH-d4，300M Hz)δ174.8，172.3，169.0，168.6，142.2，142.1，141.9，128.7，128.5，128.4，127.8，127.5，127.3，126.0，61.8，57.3，52.8，52.0，46.6，35.2，32.9，32.5，31.8，31.4，30.8，27.2，15.3。
實(shí)施例30

SM-422的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.38-7.25(m，10H)，6.18(s，1H)，4.87(m，1H)，4.57(m，1H)，4.22(m，1H)，3.98(m，2H)，3.76(m，1H)，3.42(m，1H)，3.24(m，1H)，2.70(2s，3H)，2.49(m，2H)，2.37-2.32(m，1H)，2.15-2.00(m，4H)，1.78(m，1H)，1.68-1.58(m，3H)，1.55(2d，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.19(m，2H)，0.95(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ175.3，172.4，169.0，168.6，142.2，142.1，128.7，128.5，127.8，127.7，127.5，127.3，61.8，57.4，57.3，52.9，51.9，46.6，38.7，32.9，32.5，31.3，30.8，28.2，27.3，23.5，22.0，21.9，15.3。
實(shí)施例31

SM-423的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ4.84(m，1H)，4.42(m，1H)，4.30(m，1H)，3.95(m，3H)，3.42(m，1H)，3.24(m，1H)，2.71(s，3H)，2.50(d，J＝7.2Hz，2H)，2.34(m，1H)，2.15-2.00(m，10H)，1.65(m，1H)，1.55(2d，J＝7.2Hz，3H)，1.16(m，6H)，1.00(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，172.2，169.1，168.6，61.7，57.3，57.2，56.6，53.2，50.3，46.7，41.8，32.7，32.6，31.3，30.8，27.4，27.2，26.0，25.7，25.1，22.0，21.8，15.2。
實(shí)施例32

SM-425的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.25-7.18(m，4H)，5.36(t，J＝7.5Hz，1H)，4.89(m，1H)，4.47(m，1H)，4.30(m，1H)，3.90(m，3H)，3.40(m，1H)，3.00(m，2H)，2.71(s，3H)，2.55-2.41(m，3H)，2.38(m，2H)，2.15-2.00(m，6H)，1.81(m，1H)，1.54(m，3H)，1.00(m，6H)，13C NMR (MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.1，169.1，168.7，143.6，143.4，128.0，126.7，124.7，124.0，61.8，57.3，56.9，54.9，53.1，51.8，46.8，42.1，41.5，33.3，32.7，31.2，30.8，30.0，27.6，26.1，25.9，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例33

SM-426的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.64-7.55(m，4H)，4.65(d，J＝16.2Hz，1H)，4.55(m，1H)，4.39(d，J＝16.2Hz，1H)，4.22(m，1H)，3.98(m，2H)，3.76(m，1H)，3.42(m，1H)，2.70(s，3H)，2.47(m，2H)，2.37-2.32(m，1H)，2.15-2.00(m，6H)，1.83(m，1H)，1.54(m，3H)，0.95(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.5，169.5，168.7，143.6，143.4，127.8，127.5，125.4，125.3，123.0，61.8，57.4，57.2，56.6，52.9，51.8，46.7，42.4，42.1，41.5，32.5，31.3，30.8，27.4，26.2，23.5，22.0，21.9，15.3。
實(shí)施例34

SM-427的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.45(m，1H)，7.20-7.10(m，3H)，5.07(m，1H)，4.88(m，1H)，4.43(m，1H)，4.22(m，1H)，3.98(m，3H)，3.48(m，1H)，2.89(m，2H)，2.75(s，3H)，2.55(d，J＝6.6Hz，2H)，2.44(m，1H)，2.30-1.78(m，11H)，1.55(m，3H)，1.00(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，172.7，169.5，168.5，137.6，136.9，128.8，127.1，126.0，61.9，57.3，56.7，53.2，51.9，46.7，42.1，41.5，32.6，31.2，30.8，29.3，27.4，26.1，22.2，21.9，20.8，15.2。
實(shí)施例35

SM-429的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.64(m，3H)，7.53-7.32(m，6H)，4.87(m，1H)，4.55-4.40(m，3H)，4.23(m，1H)，3.98(m，2H)，3.82(m，1H)，3.38(m，1H)，2.71(s，3H)，2.46(d，J＝7.2Hz，2H)，2.33(m，1H)，2.15-1.78(m，7H)，1.53(2d，J＝6.9Hz，3H)，0.98(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.8，173.2，169.6，168.7，141.7，141.2，139.6，129.2，128.9，127.5，127.1，126.1，125.9，61.8，57.2，56.5，53.0，51.8，46.7，43.2，42.1，41.5，35.0，32.6，31.2，30.8，27.3，26.0，22.2，21.9，15.3。
實(shí)施例36

SM-430的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ8.05(d，J＝7.8Hz，1H)，7.88(m，1H)，7.81(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57-7.43(m，4H)，4.87-4.80(m，3H)，4.49(m，1H)，4.23(m，1H)，3.98(m，2H)，3.85(m，1H)，3.43(m，1H)，2.71(s，3H)，2.50(d，J＝6.9Hz，2H)，2.33(m，1H)，2.15-1.78(m，7H)，1.53(2d，J＝7.2Hz，3H)，0.99(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.0，169.3，168.7，134.3，133.9，131.7，128.8，128.2，126.4，125.8，125.5，123.4，61.8，57.3，56.7，53.1，51.8，46.7，42.1，41.4，41.3，35.0，32.6，31.1，30.8，27.3，26.2，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例37

SM-431的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.45(m，1H)，7.25-7.17(m，3H)，5.40(t，J＝7.8Hz，1H)，4.88(m，1H)，4.46(m，1H)，4.25(m，1H)，3.98(m，3H)，3.40(m，1H)，3.00(m，2H)，2.71(s，3H)，2.55(m，2H)，2.44(m，1H)，2.34(m，2H)，2.15-2.00(m，6H)，1.81(m，1H)，1.53(m，3H)，1.00(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.1，169.5，168.6，143.6，143.3，127.8，126.5，124.5，61.9，57.3，56.6，54.8，53.2，51.8，46.7，42.1，41.5，35.1，33.4，32.6，31.2，30.8，30.0，27.4，26.1，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例38

SM-432的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.38-7.25(m，10H)，4.80(m，1H)，4.32(m，2H)，4.18(m，1H)，3.98(m，2H)，3.87(m，1H)，3.63(m，1H)，3.49(m，1H)，2.70(s，3H)，2.50(d，J＝7.2Hz，2H)，2.32(m，1H)，2.15-1.74(m，7H)，1.56(m，3H)，1.00(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300MHz)δ174.7，173.0，169.1，168.6，142.8，128.6，128.4，128.1，126.7，61.8，57.2，56.7，53.1，50.9，46.7，44.0，42.0，41.5，32.6，30.8，27.1，26.1，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例39

SM-433的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.54-7.22(m，9H)，4.86(m，1H)，4.48(m，1H)，4.4-4.19(m，3H)，4.09-3.84(m，3H)，3.40(m，1H)，2.71(s，3H)，2.49(d，J＝6.6Hz，2H)，2.33-1.74(m，8H)，1.53(2d，J＝6.9Hz，3H)，0.98(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.1，169.3，168.7，141.9，141.2，135.6，130.0，129.2，128.3，128.1，127.8，127.3，61.8，57.3，56.9，53.2，51.8，46.7，42.0，41.5，41.3，35.0，32.6，31.2，30.8，27.3，26.0，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例40

SM-434的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.60(m，4H)，7.38(m，4H)，7.30(m，1H)，4.86(m，1H)，4.57-4.36(m，3H)，4.22(m，1H)，4.04-3.89(m，3H)，3.42(m，1H)，2.71(s，3H)，2.49(d，J＝6.6Hz，2H)，2.35-1.79(m，8H)，1.53(2d，J＝6.9Hz，3H)，0.98(m，6H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.7，173.2，169.2，168.7，141.1，140.3，138.0，128.9，128.0，127.3，127.1，126.9，61.8，57.3，56.9，53.1，51.8，46.7，42.8，42.1，41.5，35.2，32.6，31.2，30.8，27.4，26.0，22.2，21.9，15.2。
實(shí)施例41

SM-227的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.34-7.12(m，10H)，5.92(brs，1H)，5.23(dd，J＝12.06，5.34Hz，1H)，4.65(m，1H)，4.50(m，1H)，3.88(m，1H)，3.52(m，1H)，3.45(m，1H)，3.31(m，1H)，3.13(m，1H)，2.58(s，3H)，2.36(m，1H)，2.20-1.72(m，5H)，1.41(d，J＝7.05Hz，3H)；13CNMR(75MHz，D2O)δ173.93，170.10，168.28，140.81，140.63，129.37，128.33，128.24，127.53，61.31，59.11，58.52，57.15，48.68，47.50，46.10，31.82，31.26，30.94，27.13，15.46。
實(shí)施例42

SM-211的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.23-7.02(m，10H)，5.85(s，1H)，4.70(m，1H)，4.32(m，1H)，4.01(m，1H)，3.85(m，1H)，3.65-3.20(m，4H)，2.90-2.70(m，2H)，2.27-2.03(m，3H)，2.01-1.43(m，8H)，1.36(d，J＝6.90Hz，3H)，0.78(t，J＝7.3Hz，3H)，0.76-0.70(m，6H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ176.89，173.57，170.10，170.06，142.14，142.08，129.86，129.77，128.72，128.62，128.35，128.21，62.77，58.54，56.95，49.58，49.29，48.82，48.72，48.43，48.14，43.00，31.92，26.74，22.83，22.64，20.33，16.55，11.20。
實(shí)施例43

SM-212的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.37-7.16(m，10H)，6.12(m，1H)，4.82(m，1H)，4.56(m，1H)，4.20(m，1H)，4.08(m，1H)，3.96(m，1H)，3.87(m，1H)，3.42-3.25(m，2H)，2.52-1.70(m，14H)，1.52(t，J＝7.2Hz，3H)，0.98(t，J＝7.5Hz，6H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ176.45，173.01，169.39，168.33，141.38，141.23，129.27，129.16，128.10，127.73，127.55，127.52，62.77，62.11，57.92，57.01，52.49，51.96，47.58，46.71，41.39，31.82，27.26，26.29，23.69，22.14，8.50。
實(shí)施例44

SM-213的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.38-7.20(m，10H)，6.05(s，1H)，4.89(m，1H)，4.62(m，1H)，4.53(m，1H)，4.36-4.10(m，2H)，3.95-3.40(m，4H)，3.28-3.10(m，1H)，2.50-1.75(m，9H)，1.59(d，J＝7.2Hz，3H)，1.01-1.85(m，6H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ177.09，173.01，169.46，167.43，141.52，141.39，129.24，129.16，128.11，127.96，127.78，127.64，61.80，58.06，57.17，56.51，51.72，49.30，48.73，48.25，47.87，41.42，27.32，26.29，22.25，22.15，21.88，15.92。
實(shí)施例45

SM-209的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.22-7.05(m，4H)，6.95-6.77(m，4H)，5.90(s，1H)，4.90(m，1H)，4.45(m，1H)，4.13(m，1H)，3.97(m，1H)，3.85-3.60(m，1H)，3.50-3.10(m，3H)，2.80(m，1H)，2.65(s，3H)，2.30-1.60(m，6H)，1.46(d，J＝7.2Hz，3H)，1.12-0.85(m，6H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ180.27，172.52，169.36，160.48，137.37，137.19，129.55，129.45，115.81，115.53，61.98，57.32，56.43，51.92，49.98，46.81，35.07，32.70，31.30，30.82，27.44，19.18，18.76，15.53。
實(shí)施例46

SM-210的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.22-7.03(m，4H)，6.95-6.80(m，4H)，5.90(s，1H)，4.82(m，1H)，4.35(m，1H)，4.12(m，1H)，3.89(m，1H)，3.82-3.15(m，4H)，2.60(s，3H)，2.30-1.50(m，9H)，1.42(d，J＝7.2Hz，3H)，0.82-0.65(m，6H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ176.09，172.70，169.50，160.53，137.27，137.14，129.49，129.35，115.92，115.84，115.80，115.62，62.10，61.80，58.07，56.54，52.26，46.59，42.28，41.38，32.40，31.35，27.43，25.98，22.16，15.59。
實(shí)施例47

SM-230的分析數(shù)據(jù)1H NMR(300MHz，D2O)δ7.32-7.16(m，3H)，7.12-7.05(m，2H)，5.02(m，1H)，4.32-4.12(m，3H)，4.02-3.20(m，5H)，3.10(m，1H)，2.52(s，3H)，2.28-1.52(m，12H)，1.42-1.39(m，3H)，0.82-0.60(m，6H)。
實(shí)施例48
實(shí)施例49
實(shí)施例50
實(shí)施例51

SM-437的分析數(shù)據(jù)1H NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ7.45(m，1H)，7.30(m，4H)，7.14(m，1H)，7.02-6.84(m，2H)，5.43(t，J＝8.1Hz，1H)，4.79(m，1H)，4.39(m，1H)，4.00-3.77(m，4H)，3.56(m，1H)，3.40(m，1H)，3.00(m，6H)，2.70(s，3H)，2.49(m，1H)，2.28(m，1H)，2.00-1.75(m，6H)，1.54(d，J＝6.6Hz，3H)，13C NMR(MeOH-d4，300M Hz)δ174.1，173.0，169.1，168.5，143.6，143.2，137.4，130.6，127.7，126.5，124.5，124.4，62.1，57.3，54.8，52.6，51.6，46.6，35.1，33.4，32.4，31.4，30.8，30.0，27.5，15.2。
實(shí)施例52 抑制劑與XIAP的結(jié)合
為了試驗(yàn)構(gòu)象約束的Smac模擬物與IAP蛋白的結(jié)合能力，開(kāi)發(fā)了使用基于熒光偏振(FP)的方法的敏感和定量的體外結(jié)合試驗(yàn)并將其用于測(cè)定Smac模擬物與XIAP蛋白的結(jié)合親和性(Nikolovska-Coleska等人，Anal.Biochem.332261-73(2004))。對(duì)于這一試驗(yàn)，將5-羧基熒光素(5-Fam)與突變的Smac肽AbuRPF-K-(5-Fam)-NH2(稱作SM5F)的賴氨酸側(cè)鏈耦合。SM5F肽與XIAP BIR3蛋白的結(jié)合的Kd值測(cè)定為17.92nM，其表明該肽與XIAP蛋白的表面袋結(jié)合，具有高親和性。與His-標(biāo)記物稠合的人XIAP(殘基241-356)的重組XIAP BIR3蛋白是穩(wěn)定的和可溶的，并且用于基于FP的結(jié)合試驗(yàn)。

采用試驗(yàn)化合物在DMSO中的連續(xù)稀釋液進(jìn)行劑量依賴性FP結(jié)合實(shí)驗(yàn)。在Dynex 96孔黑色圓底板(Fisher Scientific)中添加在試驗(yàn)緩沖液(100mM磷酸鉀，pH值7.5；100μg/ml牛γ球蛋白；0.02％疊氮化鈉，從InvitrogenTM Life Technology購(gòu)買)中的試驗(yàn)樣品和預(yù)培養(yǎng)的XIAP BIR3蛋白質(zhì)(30nM)和SM5F肽(5nM)的5μl樣品以產(chǎn)生125μl的最終體積。對(duì)于每一試驗(yàn)，包括含重組XIAP BIR3蛋白和SM5F的結(jié)合肽對(duì)照物(相當(dāng)于0％抑制)和僅含游離SM5F的游離肽對(duì)照物(相當(dāng)于100％抑制)。當(dāng)結(jié)合達(dá)到平衡時(shí)，在3小時(shí)培養(yǎng)之后，使用ULTRA READER(Tecan U.S.Inc.，Research Triangle Park，NC)測(cè)量偏振值。使用非線性最小二乘分析，由曲線圖測(cè)定IC50值，即置換50％結(jié)合肽時(shí)的抑制劑濃度。使用GRAPHPAD PRISM軟件(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)進(jìn)行曲線擬合。

可替代地，在最優(yōu)化的程序中，使用Ultra平板讀數(shù)器(Tecan，Research Triangle Park，NC)，在

ThermoLabsystems，黑色圓底平板(Fisher Scientific)中進(jìn)行FP實(shí)驗(yàn)。用活性化合物的連續(xù)稀釋液實(shí)施劑量依賴性結(jié)合實(shí)驗(yàn)。在96-孔中，添加試驗(yàn)緩沖液(100mM磷酸鉀，pH 7.5；100ug/ml牛γ球蛋白；0.02％疊氮化鈉)中的被測(cè)試化合物以及預(yù)孵育的XIAP BIR3(30nM)和SM5F Smac-Flu肽(5nM)的5μl樣品，以產(chǎn)生125μl的最終體積。對(duì)于每次試驗(yàn)，將含有XIAP-BIR3和SM5F Smac-Flu的陰性對(duì)照(相當(dāng)于0％抑制)以及只含有游離Smac-Flu肽的陽(yáng)性對(duì)照(相當(dāng)于100％抑制)包含在每個(gè)實(shí)驗(yàn)板上。在振蕩器上將所述板混合15分鐘并在室溫孵育1-3小時(shí)。在485nm激發(fā)波長(zhǎng)和530nm發(fā)射波長(zhǎng)，測(cè)量偏振值。由方程式％抑制＝100[1-(mP-mPf)/(mPb-mPf)]產(chǎn)生抑制百分比，式中mPf是游離肽對(duì)照(最小mP)并且mPb是結(jié)合肽對(duì)照(最大mP)。使用非線性最小二剩分析，由所述圖確定IC50，即50％的結(jié)合肽被置換時(shí)的抑制劑濃度，并且使用GraphPad

軟件進(jìn)行曲線擬合。使用專門為基于FP的試驗(yàn)而開(kāi)發(fā)的數(shù)學(xué)方法和軟件，由測(cè)定的SM5F的IC50值和Kd值產(chǎn)生Smac模擬物的Ki值。

在所述結(jié)合試驗(yàn)中測(cè)試時(shí)，如表2中所示，本發(fā)明的構(gòu)象約束的Smac模擬物表現(xiàn)出強(qiáng)的與XIAP BIR3蛋白的結(jié)合親和性。這些結(jié)合親和性比天然Smac肽AVPI(SEQ ID NO1)的結(jié)合親和性(1,183±441nM)好多于10倍。這些數(shù)據(jù)提示，所述構(gòu)象約束的Smac模擬物將充當(dāng)IAP活性的強(qiáng)效抑制劑。
表2 實(shí)施例53 抑制劑與其它IAP蛋白的結(jié)合
為了測(cè)試構(gòu)象約束的Smac模擬物與其它IAP蛋白(ML-IAP，cIAP1，以及cIAP2)的結(jié)合能力，開(kāi)發(fā)并最優(yōu)化了結(jié)合試驗(yàn)條件。在結(jié)合試驗(yàn)中，使用了與His-標(biāo)記物稠合的重組cIAP1 BIR3結(jié)構(gòu)域(殘基253-363)、cIAP2 BIR3結(jié)構(gòu)域(殘基238-349)和ML-IAPBIR3結(jié)構(gòu)域(殘基63-179)。與關(guān)于XIAP BIR3所述的相似，進(jìn)行了對(duì)于其它IAP蛋白的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)。簡(jiǎn)言之，使用了相同高親和性示蹤物SM5F Smac-Flu肽，其結(jié)合cIAP1、cIAP2和ML-IAP，具有高親和性分別為4.1nM、6.6nM和160nM。在競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)中使用了下列蛋白濃度和示蹤物10nM cIAP1和2nM SM5F，25nM cIAP2和2nM SM5F，300nM ML-IAP和5nM SM5F。
實(shí)施例54 構(gòu)象約束的Smac模擬物抑制細(xì)胞生長(zhǎng)
測(cè)試了本發(fā)明化合物對(duì)不同癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)的影響。將細(xì)胞以3000細(xì)胞/孔的密度與試驗(yàn)化合物一起接種在96-孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板上并將細(xì)胞在37℃下在95％空氣和5％CO2的氣氛中培養(yǎng)4天。使用WST-8試劑盒和(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4二磺苯基)-2H-四唑鎓一鈉鹽；Dojindo Molecular Technologies，Inc.，Gaithersburg，Maryland)，測(cè)定在用不同濃度化合物處理之后的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。以10％的最終濃度將WST-8添加到每一孔中，然后在37℃下培養(yǎng)所述板2-3小時(shí)。使用ULTRA Tecan讀數(shù)器(MolecularDevice)在450nm下測(cè)量樣品的吸光度。通過(guò)比較未處理的細(xì)胞和用試驗(yàn)化合物處理過(guò)的細(xì)胞中的吸光度，計(jì)算試驗(yàn)化合物抑制細(xì)胞生長(zhǎng)50％的濃度(IC50)。

當(dāng)針對(duì)MDA-MB-2131人乳腺癌細(xì)胞系測(cè)試時(shí)，如表3中所示，本發(fā)明的化合物顯示出強(qiáng)抑制活性，這表明所述化合物是癌細(xì)胞生長(zhǎng)的強(qiáng)效抑制劑。當(dāng)針對(duì)SK-OV-3卵巢癌細(xì)胞系測(cè)試時(shí)，所述化合物甚至更強(qiáng)效(表3)。
表3 實(shí)施例55 YP-337誘導(dǎo)細(xì)胞死亡
測(cè)試了YP-337誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-231和卵巢癌SK-OV-3細(xì)胞系中細(xì)胞死亡的能力(表4)。用YP-337處理細(xì)胞48小時(shí)并用錐蟲(chóng)藍(lán)排出試驗(yàn)測(cè)定了細(xì)胞存活力。
表4
實(shí)施例56 SM-406(AT-406)在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在MDA-MB-231乳腺癌異種移植(裸鼠)模型中測(cè)試了SM-406(AT-406)充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)，持續(xù)兩周。如圖1中所說(shuō)明的，SM-406(AT-406)在30、100和200mg/kg劑量的SM-406(AT-406)下表現(xiàn)出抗腫瘤活性。在100和200mg/kg下觀察到至多11％的劑量依賴性體重減輕。
實(shí)施例57 SM-406(AT-406)和泰索帝在前列腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在PC-3前列腺癌異種移植(裸鼠)模型中測(cè)試了SM-406(AT-406)單獨(dú)和聯(lián)合泰索帝充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)，每周一次給予泰索帝，持續(xù)兩周。如圖2中所說(shuō)明的，100和200mg/kg劑量的SM-406(AT-406)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。另外，SM-406(AT-406)(100mg/kg)聯(lián)合泰索帝(8mg/kg)表現(xiàn)出增強(qiáng)的抗腫瘤活性。
實(shí)施例58 SM-406(AT-406)和

在前列腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在PC-3前列腺癌異種移植(裸鼠)模型中中測(cè)試了SM-406(AT-406)單獨(dú)和聯(lián)合

充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)，每周bid X 5給予

持續(xù)兩周。如圖3中所說(shuō)明的，100和200mg/kg劑量的SM-406(AT-406)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。另外，SM-406(AT-406)(100mg/kg)聯(lián)合

(90mg/kg)表現(xiàn)出增強(qiáng)的抗腫瘤活性。
實(shí)施例59 SM-406(AT-406)和泰索帝在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在2LMP乳腺癌異種移植模型中測(cè)試了單獨(dú)和聯(lián)合泰索帝SM-406(AT-406)充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)，每周一次給予泰索帝，持續(xù)兩周。如圖4中所說(shuō)明的，100mg/kg劑量的SM-406(AT-406)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。另外，SM-406(AT-406)(100mg/kg)聯(lián)合泰索帝(12mg/kg)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。
實(shí)施例60 SM-406(AT-406)和

在乳腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在2LMP乳腺癌異種移植模型中中測(cè)試了SM-406(AT-406)單獨(dú)和聯(lián)合

充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)，qd給予

持續(xù)兩周。如圖5中所說(shuō)明的，30、100和200mg/kg劑量的SM-406(AT-406)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。另外，SM-406(AT-406)(30、100和200mg/kg)聯(lián)合

(90mg/kg)表現(xiàn)出增強(qiáng)的抗腫瘤活性。
實(shí)施例61 SM-406(AT-406)在胰腺癌異種移植模型中的抗腫瘤活性
在Panc-1胰腺癌異種移植模型中中測(cè)試了SM-406(AT-406)充當(dāng)抗腫瘤劑的能力。每周qd X 5給予SM-406(AT-406)。如圖6中所說(shuō)明的，30和100mg/kg劑量的SM-406(AT-406)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。
實(shí)施例62 SM-406(AT-406)乳腺癌異種移植模型的給藥方案最優(yōu)化
如圖7中所說(shuō)明的，使用200mg/kg的SM-406(AT-406)，實(shí)施了旨在最優(yōu)化SM-406(AT-406)在MDA-MB-231乳腺癌異種移植(裸鼠)模型中的給藥方案的研究。以qd X 5，每周第1-5天，qd X 3，每周第1-3天或每周一次的給藥產(chǎn)生抗腫瘤活性。與其它給藥方案相比，在每周給藥中體重減輕較小(＜5％)。
實(shí)施例63 SM-406在癌細(xì)胞系中的體外活性
在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系、SK-OV-3和OVCAR-4卵巢癌細(xì)胞系以及SK-Mel-2黑素瘤癌細(xì)胞系中測(cè)試了SM-406作為單一藥劑抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定了細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖8中所說(shuō)明的，SM-406抑制全部四種癌細(xì)胞系，對(duì)MDA-MB-231、SK-OV-3、SK-Mel-2和OVCAR-4的IC50值分別為82nM、238nM、6638nM和926nM。
實(shí)施例64 SM-406在癌細(xì)胞系中的體外活性
在HL-60和SR白血病細(xì)胞系中測(cè)試了SM-406作為單一藥劑抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖9中所說(shuō)明的，SM-406抑制兩種細(xì)胞系，IC50值分別為58nM和7290nM。
實(shí)施例65 SM-406在癌細(xì)胞系中的體外活性
在BT-549、MDA-MB-415、SUM-159、MDA-MB-468、MDA-MB-453和2LMP人乳腺癌細(xì)胞系中測(cè)試了SM-406作為單一藥劑抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖10中所說(shuō)明的，在全部六種細(xì)胞系中SM-406抑制了細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例66 SM-406聯(lián)合TNFα在MDA-MB-436細(xì)胞系中的體外活性
在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-436中測(cè)試了SM-406聯(lián)合TNFα，以及SM-428作為單一藥劑抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用TNFα或聯(lián)合不同濃度的SM-406，或用SM-428處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖11中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用TNFα處理相比，SM-406聯(lián)合TNFα表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例67 SM-406聯(lián)合TNFα在SUM-159細(xì)胞系中的體外活性
在人乳腺癌細(xì)胞系SUM-159中測(cè)試了SM-406聯(lián)合TNFα，以及SM-428作為單一藥劑抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用TNFα或聯(lián)合不同濃度的SM-406，或用SM-428處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖12中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用TNFα處理相比，SM-406聯(lián)合TNFα表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例68 SM-406聯(lián)合TRAIL在Panc-1細(xì)胞系中的體外活性
在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中測(cè)試了SM-406聯(lián)合TRAIL抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用TRAIL或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖13中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用TRAIL處理相比，SM-406聯(lián)合TRAIL表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例69 SM-406聯(lián)合TRAIL在MDA-231(2LMP)細(xì)胞系中的體外活性
在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231(2LMP)中測(cè)試了SM-406聯(lián)合TRAIL抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用TRAIL或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖14中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用TRAIL處理相比，SM-406聯(lián)合TRAIL表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例70 SM-406聯(lián)合吉西他濱在Panc-1細(xì)胞系中的體外活性
在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中測(cè)試了SM-406聯(lián)合吉西他濱抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用吉西他濱或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖15中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用吉西他濱處理相比，SM-406聯(lián)合吉西他濱顯示出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例71 SM-406聯(lián)合米托蒽醌在Panc-1細(xì)胞系中的體外活性
在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中測(cè)試了SM-406聯(lián)合米托蒽醌抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用米托蒽醌或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖16中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用米托蒽醌處理相比，SM-406聯(lián)合米托蒽醌表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例72 SM-406聯(lián)合Roscovitine在PC3細(xì)胞系中的體外活性
在人前列腺細(xì)胞系PC3中測(cè)試了SM-406聯(lián)合roscovitine(Ros)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用SM-406或聯(lián)合不同濃度的roscovitine處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖17中所說(shuō)明的，SM-406聯(lián)合roscovitine抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例73 SM-406聯(lián)合泰索帝在MDA-MB-453細(xì)胞系中的體外活性
在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-453中測(cè)試了SM-406聯(lián)合泰索帝(TXT)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用TXT或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如中圖18所說(shuō)明的，與單獨(dú)用泰索帝處理相比，SM-406聯(lián)合泰索帝顯示出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例74 SM-406聯(lián)合VP-16在Panc-1細(xì)胞系中的體外活性
在人胰腺細(xì)胞系Panc-1中測(cè)試了SM-406聯(lián)合VP-16抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。單獨(dú)用VP-16或聯(lián)合不同濃度的SM-406處理細(xì)胞4天。使用基于WST的試驗(yàn)，測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)。如圖19中所說(shuō)明的，與單獨(dú)用VP-16處理相比，單獨(dú)SM-406聯(lián)合VP-16表現(xiàn)出增強(qiáng)的抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
實(shí)施例75 SM-406對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞中cIAP-1蛋白的作用
在MDA-MB-231癌細(xì)胞中測(cè)定了SM-406和SM-428對(duì)cIAP-1蛋白的作用。以不同的濃度和在不同的時(shí)間點(diǎn)，用SM-406或SM-428處理細(xì)胞。通過(guò)蛋白質(zhì)印跡，分析了蛋白水平。如圖20中所說(shuō)明的，SM-406降低了cIAP-1蛋白水平。
實(shí)施例76 SM-406對(duì)SK-OV-3細(xì)胞中的cIAP-1和cIAP-2蛋白的作用
在SK-OV-3癌細(xì)胞中測(cè)定了SM-406和SM-428對(duì)cIAP-1和cIAP-2蛋白的作用。以不同的濃度和在不同的時(shí)間點(diǎn)，用SM-406或SM-428處理細(xì)胞。通過(guò)蛋白質(zhì)印跡，分析了蛋白水平。如圖21中所說(shuō)明的，SM-406降低了cIAP-1和cIAP-2蛋白水平。
實(shí)施例77 SM-406誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡
在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中測(cè)定了SM-406或SM-428對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)。用SM-406或SM-428處理細(xì)胞不同時(shí)間期間，并使用流式細(xì)胞儀，通過(guò)FITC膜聯(lián)蛋白V/碘化丙錠染色，分析了編程性細(xì)胞死亡。如圖22中所說(shuō)明的，在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中，3μM的SM-406誘導(dǎo)了編程性細(xì)胞死亡。
實(shí)施例78 SM-406誘導(dǎo)SK-OV-3細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡
在SK-OV-3卵巢癌細(xì)胞中測(cè)定了SM-406或SM-428對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)。用不同濃度的SM-406或SM-428處理細(xì)胞。使用流式細(xì)胞儀，通過(guò)FITC膜聯(lián)蛋白V/碘化丙錠染色，分析了編程性細(xì)胞死亡。如圖23中所說(shuō)明的，在SK-OV-3卵巢癌細(xì)胞中，0.1、0.3、1和3μM的SM-406誘導(dǎo)了編程性細(xì)胞死亡。
實(shí)施例79 SM-406誘導(dǎo)Panc-1細(xì)胞中的編程性細(xì)胞死亡
在Panc-1胰腺癌細(xì)胞中測(cè)定了SM-406或SM-428對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)。用不同濃度的SM-406或SM-428處理細(xì)胞。使用流式細(xì)胞儀，通過(guò)FITC膜聯(lián)蛋白V/碘化丙錠染色，分析了編程性細(xì)胞死亡。如圖24中所說(shuō)明的，在panc-1胰腺癌細(xì)胞中，0.3、1和3μM的SM-406誘導(dǎo)了編程性細(xì)胞死亡。
實(shí)施例80 SM-406在MDA-MB-231異種移植模型中的抗腫瘤活性
在嚴(yán)重并發(fā)性免疫缺陷型(SCID)小鼠中的人乳腺癌的MDA-MB-231異種移植模型中，測(cè)試了SM-406充當(dāng)抗腫瘤藥的能力。當(dāng)腫瘤生長(zhǎng)至150mm3的平均尺寸時(shí)，開(kāi)始處理。通過(guò)經(jīng)口管飼法，每天給予SM-406，每周5天，持續(xù)2周。靜脈內(nèi)(i.v.)給予泰索帝，每周一次，持續(xù)2周。如圖25中所說(shuō)明的，30和100mg/kg PO的SM-406表現(xiàn)出抗腫瘤活性。
實(shí)施例81 SM-406在PC-3異種移植模型中的抗腫瘤活性
在裸鼠中的人前列腺癌的PC-3異種移植模型中測(cè)試了SM-406充當(dāng)抗腫瘤藥的能力。當(dāng)腫瘤生長(zhǎng)至100mm3的平均尺寸時(shí)，開(kāi)始處理。經(jīng)口管飼法，在第15-25天之間，每天給予SM-406，每周5天，持續(xù)2周，并且在第43-53天之間持續(xù)另外2周。在第16、23和44天，靜脈內(nèi)(i.v.)給予泰索帝，每周一次，持續(xù)3周。如圖26中所說(shuō)明的，SM-406單獨(dú)或聯(lián)合泰索帝顯示出抗腫瘤活性。
實(shí)施例82 SM-406在2LMP異種移植模型中的抗腫瘤活性
在裸鼠中的人乳腺癌的2LMP異種移植模型中測(cè)試了SM-406充當(dāng)抗腫瘤藥的能力。在第16-26天之間，每天腹膜內(nèi)(i.p.)或經(jīng)口(p.o.)給予SM-406，持續(xù)10天。靜脈內(nèi)(i.v.)給予泰索帝，每周一次，持續(xù)2周。在第16-26天之間，每天一次腹膜內(nèi)給予腫瘤壞死因子(TNF)-相關(guān)的編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)性配體(TRAIL)，持續(xù)10天。如圖27中所說(shuō)明的，SM-406單獨(dú)或聯(lián)合TRAIL表現(xiàn)出抗腫瘤活性。
實(shí)施例83 SM-406與IAP蛋白的BIR3結(jié)構(gòu)域的結(jié)合
使用基于熒光-偏振的結(jié)合試驗(yàn)，測(cè)定了SM-406和SM-428與IAP蛋白四個(gè)成員的BIR3結(jié)構(gòu)域的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合曲線。測(cè)試的IAP蛋白包括(A)XIAP；(B)cIAP1；(C)cIAP2；(D)ML-IAP。如圖28中所說(shuō)明的，SM-406與全部四種IAP蛋白結(jié)合。
現(xiàn)在充分描述了本發(fā)明，本領(lǐng)域的技術(shù)人員理解，可以在不影響本發(fā)明的保護(hù)范圍的廣泛和等效范圍的條件、配方和其它參數(shù)內(nèi)實(shí)施本發(fā)明，或其任意實(shí)施方案。通過(guò)參考將本申請(qǐng)中引用的所有專利、專利申請(qǐng)和出版物一起全部?jī)?nèi)容完全并入本文。
權(quán)利要求
1.具有式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中
A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在；
V選自N、CH和O；
W選自CH和N；
X選自氫和任選被取代的C1-3烷基；
Y選自CONH、NHCO、C(O)O、OC(O)、其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代的(CH2)1-3、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
Z是(CR1R2)r；
D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m；
J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q；
T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、S＝O、SO2、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
U選自H、NR1R2、N(R1)COR7、OR1、SR1、任選被取代的烷基、任選被取代的芳基和雜芳基；
n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5；
r是0-3；
各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7；
R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1；以及
R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基。
2.具有式II的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥
其中
A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在；
V選自N、CH和O；
W選自CH和N；
X是任選被取代的C1-3烷基；
Y選自CONH、C(O)O、其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代的CH2)1-3、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
D是(CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m；
J選自任選被取代的亞烷基和(CR1R2)p-R6-(CR3R4)q；
T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
U選自H、NR1R2、OR1、SR1、任選被取代的烷基和任選被取代的芳基；
n、m、p和q獨(dú)立地選自0-5；
各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
R5選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的雜烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜芳基和COR7；
R6選自O(shè)、S、NR1、CR1R2、C＝O、C＝S和C＝NR1；
R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
條件是任選的取代基不包括羧酸，任選被一個(gè)或多個(gè)烷基、鹵素、羥基或鹵代烷基取代的環(huán)烷基，或任選被芳基取代的芳基，并且任選被取代的雜環(huán)基不包括氧代哌嗪基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m為3或4。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q為1。
5.權(quán)利要求2的化合物，其中n和m獨(dú)立地選自0-4，使得n+m為3或4并且p和q獨(dú)立地選自0和1，使得p+q為1。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中T是C＝O。
7.權(quán)利要求5的化合物，其中U是NR1R2。
8.權(quán)利要求5的化合物，其中R6是CH2。
9.權(quán)利要求5的化合物，其中Y是CONH，W是CH并且V是N。
10.權(quán)利要求2的化合物，其中T是C＝O，U是NR1R2，R6是CH2，Y是CONH，W是CH并且V是N。
11.權(quán)利要求2的化合物，其具有式III
12.權(quán)利要求1的化合物，其具有式IV
13.權(quán)利要求12的化合物，其具有式V
14.權(quán)利要求13的化合物，其具有式VI
15.權(quán)利要求14的化合物，其中T是C＝O，U是NR1R2并且R5是COR7。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中A1是任選被取代的烷基并且A2-是氫。
17.權(quán)利要求15的化合物，其中R1選自任選被取代的碳環(huán)基和任選被取代的烷基。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R1是任選被取代的烷基，其中所述任選的取代基是芳基，其任選被一個(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基、鹵素、鹵代烷基或雜芳基取代，并且R2是氫。
19.權(quán)利要求15的化合物，其中R7是任選被取代的烷基。
20.權(quán)利要求1的化合物，其選自下組化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥。
21.權(quán)利要求2的化合物，其選自下組化合物
或其游離堿或其另一種藥學(xué)上可接受的鹽。
22.下式的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥。
23.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-21任一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
24.藥物組合物，其包含權(quán)利要求22的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
25.誘導(dǎo)細(xì)胞中編程性細(xì)胞死亡的方法，其包括使所述細(xì)胞與權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物接觸。
26.使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑敏感的方法，其包括使所述細(xì)胞與權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物接觸。
27.權(quán)利要求26的方法，其還包括使所述細(xì)胞與編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑接觸。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是化學(xué)治療劑。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是輻射。
30.權(quán)利要求27的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是腫瘤壞死因子(TNF)、TNF相關(guān)配體或者TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述TNF相關(guān)配體選自TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體和TRAIL。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述TNF相關(guān)配體是TRAIL。
33.權(quán)利要求32的方法，其中所述TRIAL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑是抗體。
34.治療、緩解或預(yù)防動(dòng)物中對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)有反應(yīng)的障礙的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物給予所述動(dòng)物。
35.權(quán)利要求34的方法，其還包括給予編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是化學(xué)治療劑。
37.權(quán)利要求35的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是輻射。
38.權(quán)利要求35的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是TNF、TNF相關(guān)配體或者TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述TNF相關(guān)配體選自TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體和TRAIL。
40.權(quán)利要求39的方法，其中所述TNF相關(guān)配體是TRAIL。
41.權(quán)利要求38的方法，其中所述TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑是抗體。
42.權(quán)利要求34的方法，其中所述對(duì)編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)有反應(yīng)的障礙是過(guò)度增殖性疾病。
43.權(quán)利要求的42方法，其中所述過(guò)度增殖性疾病是癌癥。
44.權(quán)利要求35的方法，其中在所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑之前，給予權(quán)利要求1-20的所述化合物。
45-權(quán)利要求35的方法，其中在所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑之后，給予權(quán)利要求1-22的所述化合物。
46.權(quán)利要求35的方法，其中與所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑同時(shí)給予權(quán)利要求1-22的所述化合物。
47.治療、緩解或預(yù)防動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物給予所述動(dòng)物。
48.權(quán)利要求47的方法，其還包括給予抗癌藥。
49.權(quán)利要求48的方法，其中所述抗癌藥是編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑。
50.權(quán)利要求49的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是化學(xué)治療劑。
51.權(quán)利要求49的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是輻射。
52.權(quán)利要求49的方法，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是TNF、TNF相關(guān)配體或者TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑。
53.權(quán)利要求52的方法，其中所述TNF相關(guān)配體選自TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體和TRAIL。
54.權(quán)利要求52的方法，其中所述TNF相關(guān)配體是TRAIL。
55.權(quán)利要求52的方法，其中所述TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑是抗體。
56.權(quán)利要求47的方法，其中所述過(guò)度增殖性疾病是癌癥。
57.權(quán)利要求48的方法，其中在所述抗癌藥之前給予權(quán)利要求1-22的所述化合物。
58.權(quán)利要求48的方法，其中在所述抗癌藥之后給予權(quán)利要求1-22的所述化合物。
59.權(quán)利要求48的方法，其中與所述抗癌藥同時(shí)給予權(quán)利要求1-22的所述化合物。
60.權(quán)利要求48的方法，其中所述抗癌藥選自泰索帝、拉帕替尼和吉西他濱。
61.防止或抑制有此需要的動(dòng)物中血管發(fā)生的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物給予所述動(dòng)物。
62.權(quán)利要求61的方法，其中所述動(dòng)物患有疾病或障礙，該疾病或障礙選自黃斑變性、內(nèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、早熟的視網(wǎng)膜病變、角膜移植排斥、新血管性青光眼、晶狀體后纖維組織形成、發(fā)紅、Osler-Webber綜合征、心肌血管發(fā)生、噬斑新血管化、毛細(xì)管擴(kuò)張、血友病性關(guān)節(jié)、血管纖維瘤、傷口顆粒形成、腸粘連、動(dòng)脈粥樣硬化、硬皮病和肥大性疤痕。
63.藥劑盒，其包含權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物和將所述化合物給予動(dòng)物的用法說(shuō)明。
64.權(quán)利要求63的藥劑盒，其進(jìn)一步包含抗癌藥。
65.權(quán)利要求64的藥劑盒，其中所述抗癌藥是編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑。
66.權(quán)利要求65的藥劑盒，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是化學(xué)治療劑。
67.權(quán)利要求65的藥劑盒，其中所述編程性細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)劑是TNF、TNF相關(guān)配體或者TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑。
68.權(quán)利要求67的藥劑盒，其中所述TNF相關(guān)配體選自TRAMP配體、Fas/CD95配體、TNFR-1配體和TRAIL。
69.權(quán)利要求68的藥劑盒，其中所述TNF相關(guān)配體是TRAIL。
70.權(quán)利要求67的藥劑盒，其中所述TRAIL-R1或TRAIL-R2的激動(dòng)劑是抗體。
71.權(quán)利要求64的藥劑盒，其中所述用法說(shuō)明用于將所述化合物給予患有過(guò)度增殖性疾病的動(dòng)物。
72.權(quán)利要求71的藥劑盒，其中所述過(guò)度增殖性疾病是癌癥。
73.制備式XI化合物的方法
其中
A1和A2獨(dú)立地選自氫和任選被取代的烷基，其中當(dāng)V是O時(shí)，A2不存在；
V選自N、CH和O；
W選自CH和N；
X選自氫和任選被取代的C1-3烷基；
Y選自CONH、NHCO、C(O)O、OC(O)、其中一個(gè)或多個(gè)CH2基團(tuán)可以被O、S或NR1替代的(CH2)1-3、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
Z是(CR1R2)r；
T選自C＝O、C＝S、C＝NR1、S、S＝O、SO2、O、NR1、CR1R2、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
U選自H、NR1R2、N(R1)COR7、OR1、SR1、任選被取代的烷基和任選被取代的芳基；
m是1或2；
r是0-3；
各R1、R2、R3和R4獨(dú)立地選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；以及
R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；
該方法包括將式XII的化合物
其中A1、A2、V、W、X、Y、Z、T、U和m具有上文關(guān)于式XI所述的含義；
與R7CO-L縮合，形成式XI的化合物，
其中
R7選自氫、任選被取代的烷基、任選被取代的碳環(huán)基、任選被取代的雜環(huán)基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜芳基；以及
L是離去基團(tuán)。
74.權(quán)利要求73的方法，其中，V是N，r是0，W是CH，Y是CONH，T是C＝O并且U是NR1R2。
75.權(quán)利要求73的方法，其中L選自Cl和OH。
76.權(quán)利要求75的方法，其中L是OH并且在有活化劑存在的情況下進(jìn)行所述縮合。
77.制備式XIX化合物的方法
其中m是1或2，以及P1是胺保護(hù)基團(tuán)，該方法包括
a)縮合式XX的化合物
與式XXI的化合物，
其中P1和P2是胺保護(hù)基團(tuán)并且P1不等于P2，得到式XXII的化合物
b)將式XXII的烯烴轉(zhuǎn)化為醛，得到式XXIII的化合物；
c)除去式XXIII化合物的P2，得到式XXIV的化合物；
以及
d)還原式XXIV化合物的C＝N雙鍵，得到式XIX的化合物。
78.權(quán)利要求77的方法，其中P1是叔丁氧羰基。
79.權(quán)利要求78的方法，其中P2是芐氧羰基。
80.權(quán)利要求77的方法，其中在所述還原C＝N雙鍵之前，分離所述式XXIV的化合物。
81.權(quán)利要求80的方法，其中所述還原使用NaBH(OAc)3。
全文摘要
本發(fā)明涉及Smac的重氮雙環(huán)類模擬物，其發(fā)揮編程性細(xì)胞死亡蛋白抑制劑的作用。本發(fā)明還涉及這些模擬物用于誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡性細(xì)胞死亡和使細(xì)胞對(duì)編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑敏感的用途。
文檔編號(hào)C07D487/00GK101686981SQ200880018648
公開(kāi)日2010年3月31日 申請(qǐng)日期2008年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月13日
發(fā)明者王少萌, 鵬越峰, 孫海鷹, 倩 蔡, Z·尼科洛夫斯卡-科萊斯卡, 呂建鋒, 肅 邱 申請(qǐng)人:密執(zhí)安州立大學(xué)董事會(huì)