專利名稱：新型4-氨基-3-(吡咯基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2]吡啶-7-羧酸衍生物的制作方法
專利說明新型4-氨基-3-(吡咯基-苯氧基甲基)-噻吩并[3，2]吡啶-7-羧酸衍生物 本發(fā)明涉及作為Raf激酶的小分子抑制劑的取代的噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸衍生物。
更具體而言，本發(fā)明提供至少一種式I化合物
其中 R1選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，氰基，NR4R5，三氟甲基和NO2； R2可以是選自下列基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺?；?，磺酰胺，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，氨基甲酸酯和脲； R3選自氫，羥基，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5；環(huán)B選自芳基和雜芳基； 環(huán)A是任選還被取代的
A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且環(huán)A是芳族的， R4和R5選自氫，低級(jí)烷基或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基， X是O或NH， 及其藥用鹽。
如上所述，本發(fā)明化合物是Raf激酶抑制劑。此抑制可能與化合物作為有效和選擇性抗癌劑的活性相聯(lián)系。
許多疾病癥狀的特征在于細(xì)胞不受控制的增殖和分化。這些疾病癥狀包括各種細(xì)胞類型和疾病如癌癥，動(dòng)脈粥樣硬化癥，和再狹窄。在許多的這類疾病癥狀中，激酶，即通過調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和增殖而進(jìn)行基本功能的重要細(xì)胞酶，看來似乎起著決定性的作用。
調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和生存的分子機(jī)理和信號(hào)路徑作為抗癌策略的潛在標(biāo)靶而正受到相當(dāng)多的關(guān)注。近年來，針對(duì)靶向MAPK路徑的努力有了顯著的增加，所述的路徑將由受體酪氨酸激酶(RTKs)和G蛋白偶合受體引起的增殖信號(hào)的廣泛陣列集成在一起。
MAPK信號(hào)串包括由三種激酶組成的中心模塊的G蛋白R(shí)as工作上游Raf磷酸化并且由此活化MEK1/2，而MEK1/2又最終導(dǎo)致ERK1/2的活化。長(zhǎng)期認(rèn)為Raf激酶對(duì)于藥物發(fā)現(xiàn)是有吸引力的靶，原因在于其作為癌癥相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)用的潛在關(guān)卡的重要性(Strumberg和Seeber，Onkologie，2005，28101-107；Beeram等，J.Clin.Oncol.2005，236771-6790)。用于腫瘤細(xì)胞的增殖和生存的MAPK信號(hào)串的重要性最近隨著在人類腫瘤中活化B-Raf突變的發(fā)現(xiàn)而增加。已經(jīng)在黑素瘤、甲狀腺、結(jié)腸和其它癌癥中確定活化Raf突變(Strumberg和Seeber，Onkologie，2005，28101-107；Bollag等，Current Opinion in Investigational Drugs，2003，41436-1441)。
因此，除了用Ras突變和活化生長(zhǎng)因子受體控制腫瘤的任務(wù)外，Raf激酶抑制劑在攜帶B-Raf致癌基因的腫瘤中可具有治療潛力(Sharma等，Cancer Res.2005，652412-2421)。
哺乳動(dòng)物Raf絲氨酸/蘇氨酸激酶家族由稱作A-Raf，B-Raf和C-Raf(Raf-1)的三種68-至74-kd蛋白組成，它們高度共享保存氨基終端調(diào)節(jié)區(qū)域和在羧基終端的催化域。Raf蛋白通常是胞質(zhì)的，但是它們被小G-蛋白R(shí)as恢復(fù)成質(zhì)膜，并且這對(duì)于它們由生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和激素的活化是基本步驟。在膜上，通過包括一些殘基的構(gòu)象變化、結(jié)合到其它蛋白上、結(jié)合到脂質(zhì)上和磷酸化和脫磷酸化的高度復(fù)雜的過程，發(fā)生Raf活化。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)各種試劑干涉Raf激酶，包括反義寡核苷酸和小分子。這些抑制劑防止Raf蛋白的表達(dá)、阻斷Ras/Raf相互作用，或阻隔其激酶活性。B-Raf活性由siRNA或通過激酶抑制劑BAY-43-9006的向下調(diào)節(jié)導(dǎo)致黑素瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制和導(dǎo)致1205Lu細(xì)胞腫瘤發(fā)生潛力降低的B-Raf的siRNA-介導(dǎo)減少。目的正進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)的Raf抑制劑顯示出具有完全可容忍安全分布的抗癌功效的有望信號(hào)。臨床上最先進(jìn)的是Raf抑制劑BAY43-9006，它是最近由FDA認(rèn)可的，用于治療轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌，其中另外的第III期臨床試驗(yàn)用于治療其它癌癥。
盡管已經(jīng)取得了進(jìn)展，但是對(duì)于可以用于治療各種各樣的腫瘤和其它增殖性疾病的小分子化合物繼續(xù)研究，所述的其它增殖性疾病包括再狹窄，血管發(fā)生，糖尿病性視網(wǎng)膜病，銀屑病，手術(shù)粘連，黃斑變性和動(dòng)脈粥樣硬化癥。因此，對(duì)于提供具有抗增殖活性的組合物、藥品和/或藥物存在強(qiáng)烈需要。與其它的抗增殖藥劑相比，這些組合物、藥品和/或藥物可以不僅具有強(qiáng)活性，而且表現(xiàn)出減少的副作用。此外，響應(yīng)于用這些組合物、藥品和/或藥物治療的腫瘤范圍可以是廣泛的。這種類型的活性成分可以作為單個(gè)藥劑和/或組合治療而適宜于上述癥狀，所述的組合治療是它與其它的治療劑，與放射線，與手術(shù)/外科程序，熱處理或在所述的癥狀中已知的任何其它治療相結(jié)合。
在說明書中，在指出時(shí)，各種基團(tuán)可以被1-5個(gè)或優(yōu)選1-3個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自低級(jí)烷基，低級(jí)-鏈烯基，低級(jí)-炔基，二氧代-低級(jí)-亞烷基(形成例如苯并二氧基(benzodioxyl))，鹵素，羥基，CN，CF3，NH2，N(H，低級(jí)-烷基)，N(低級(jí)-烷基)2，氨基羰基，羧基，NO2，低級(jí)-烷氧基，硫代-低級(jí)-烷氧基，低級(jí)-烷基磺?；?，氨基磺酰基，低級(jí)-烷基羰基，低級(jí)-烷基羰氧基，低級(jí)-烷氧基羰基，低級(jí)-烷基-羰基-NH，氟-低級(jí)-烷基，氟-低級(jí)-烷氧基，低級(jí)-烷氧基-羰基-低級(jí)-烷氧基，羧基-低級(jí)-烷氧基，氨基甲?；?低級(jí)-烷氧基，羥基-低級(jí)-烷氧基，NH2-低級(jí)-烷氧基，N(H，低級(jí)-烷基)-低級(jí)-烷氧基，N(低級(jí)-烷基)2-低級(jí)-烷氧基，芐氧基-低級(jí)-烷氧基，單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基-磺?；涂梢匀芜x被以下基團(tuán)取代的低級(jí)-烷基鹵素，羥基，NH2，N(H，低級(jí)-烷基)或N(低級(jí)-烷基)2。用于烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)的優(yōu)選取代基是鹵素，低級(jí)烷氧基，低級(jí)烷基和氨基。
表述“R2可以是一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)”表示可以有一個(gè)或多個(gè)連接到A基團(tuán)上的R2基團(tuán)，優(yōu)選1至3個(gè)，并且更優(yōu)選1或2個(gè)，且再優(yōu)選只有1個(gè)。
術(shù)語(yǔ)“烷基”是指具有1至約20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，包括具有1至約7個(gè)碳原子的基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，烷基取代基可以是低級(jí)烷基取代基。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”是指具有1至6個(gè)碳原子的烷基，并且在一些實(shí)施方案中，具有1至4個(gè)碳原子的烷基。烷基的實(shí)例包括但不限于，甲基，乙基，正-丙基，異-丙基，正-丁基，仲-丁基，叔-丁基，正-戊基，和仲-戊基。
如本文所用的，“環(huán)烷基”意指只由碳原子組成的任何穩(wěn)定的單環(huán)或多環(huán)體系，其任何一個(gè)環(huán)是飽和的，并且術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”意指只由碳原子組成的任何穩(wěn)定的單環(huán)或多環(huán)體系，其至少一個(gè)環(huán)是部分未飽和的。優(yōu)選的環(huán)烷基是C3-C6-環(huán)烷基。環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，金剛烷基，環(huán)辛基，雙環(huán)烷基，包括雙環(huán)辛烷如[2.2.2]雙環(huán)辛烷或[3.3.0]雙環(huán)辛烷，雙環(huán)壬烷如[4.3.0]雙環(huán)壬烷，和雙環(huán)癸烷如[4.4.0]雙環(huán)癸烷(十氫化萘)，或螺環(huán)化合物。環(huán)烯基的實(shí)例包括但不限于，環(huán)戊烯基或環(huán)己烯基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”是指含有一個(gè)雙鍵并且具有2至6個(gè)，優(yōu)選2至4個(gè)碳原子的不飽和直鏈或支鏈脂族烴基。這樣的“鏈烯基”的實(shí)例是乙烯基，烯丙基，異丙烯基，1-丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-乙基-1-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，1-戊烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-己烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基和5-己烯基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“炔基”是指含有一個(gè)叁鍵并且具有2至6個(gè)，優(yōu)選2至4個(gè)碳原子的不飽和直鏈或支鏈脂族烴基。這樣的“炔基”的實(shí)例是乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-戊炔基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，1-己炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-己炔基和5-己炔基。
術(shù)語(yǔ)“酰胺”表示-(C＝O)-N-RaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地為氫或低級(jí)烷基。酰胺基的實(shí)例是氨基甲?；?(C＝O)-NH2。
術(shù)語(yǔ)“酯”表示-(C＝O)-O-C1-6-烷基。
如在定義中所用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”是指氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟和氯。
“芳基”是指一價(jià)單環(huán)或雙環(huán)的芳族碳環(huán)烴基，優(yōu)選6-10元芳族環(huán)體系。優(yōu)選的芳基包括但不限于，苯基，萘基，甲苯基和二甲苯基。
“雜芳基”是指含有最多兩個(gè)環(huán)的芳族雜環(huán)體系。優(yōu)選的雜芳基包括5或6元雜芳基，但不限于，噻吩基，呋喃基，吲哚基，吡咯基，吡啶基，吡嗪基，噁唑基，噻唑基(thiaxolyl)，喹啉基，嘧啶基，咪唑和四唑基。
在作為雙環(huán)的芳基或雜芳基的情況下，應(yīng)當(dāng)理解一個(gè)環(huán)可以是芳基，而另一個(gè)環(huán)是雜芳基，并且它們都是取代或未取代的。
“雜環(huán)”是指取代或未取代的5至8元單或雙環(huán)的非芳族烴，其中1至3個(gè)碳原子被選自氮、氧或硫原子中的雜原子代替。實(shí)例包括吡咯烷-2-基；吡咯烷-3-基；哌啶基；嗎啉-4-基等。
“雜原子”是指選自N，O和S中的原子。
“烷氧，烷氧基或低級(jí)烷氧基”是指連接到氧原子上的任何上述低級(jí)烷基。典型的低級(jí)烷氧基包括甲氧基，乙氧基，異丙氧基或丙氧基，丁氧基等。在烷氧基的含義內(nèi)進(jìn)一步包括的是多個(gè)烷氧基側(cè)鏈，例如乙氧基乙氧基，甲氧基乙氧基，甲氧基乙氧基乙氧基等；和取代的烷氧基側(cè)鏈，例如二甲基氨基乙氧基，二乙基氨基乙氧基，二甲氧基-磷酰基甲氧基等。
“藥用的”如藥用載體、賦形劑等是指對(duì)給予特定化合物的受試者而言是藥理上可接受的且基本上無毒性的。
“藥用鹽”是指保留本發(fā)明化合物的生物有效性和特性且由適宜的無毒性有機(jī)酸或無機(jī)酸或有機(jī)堿或無機(jī)堿形成的常規(guī)酸加成的鹽或堿加成的鹽。酸加成的鹽的實(shí)例包括那些來源于無機(jī)酸、諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的鹽以及那些來源于有機(jī)酸、諸如對(duì)甲苯磺酸、水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、三氟乙酸等的鹽。堿加成的鹽的實(shí)例包括那些來源于銨、鉀、鈉和季銨氫氧化物的鹽、諸如氫氧化四甲銨。將藥物化合物(即藥物)化學(xué)修飾成鹽是藥劑師眾所周知的獲得化合物改善的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、吸濕性、流動(dòng)性和溶解性的技術(shù)。例如，參見Ansel等《藥物劑型和藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)》(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)(第6版1995)196和1456-頁(yè)。
具有至少一個(gè)不對(duì)稱碳原子的式I化合物及它們的鹽可以作為外消旋混合物或不同的立體異構(gòu)體存在。可以由已知的分離方法如色譜分離各種異構(gòu)體。
本文公開且由式I所涵蓋的化合物可以顯示出互變異構(gòu)現(xiàn)象或結(jié)構(gòu)異構(gòu)現(xiàn)象。認(rèn)為本發(fā)明包括這些化合物的任何互變異構(gòu)或結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式，或這些形式的混合物，并且不限于上面的式I中描述的任一互變異構(gòu)或結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式。
“有效量＂是指對(duì)于防止、減輕或改善疾病癥狀或延長(zhǎng)被治療的患者生存有效的量。
“IC50”是指需要抑制50％特定測(cè)量活性的特定化合物的濃度。IC50可被測(cè)定，尤其如在下文在試驗(yàn)描述中所述測(cè)定。
“藥用酯”是指常規(guī)酯化的帶有羧基或羥基的通式I化合物，該酯類保留了通式I-IV化合物的生物有效性和特性且在體內(nèi)(在生物體內(nèi))分別被裂解成相應(yīng)的活性羧酸或醇。
本發(fā)明的化合物還包括的是那些式I化合物，其中 R1選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，氰基，NR4R5，三氟甲基和NO2； R2選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺酰基，磺酰胺，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，氨基甲?；?，氨基甲酸酯和脲； R3選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5； 環(huán)B選自芳基和雜芳基； 環(huán)A是任選還被取代的
A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且環(huán)A是芳族的， R4和R5選自氫，低級(jí)烷基或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基， X是O或NH， 及其藥用鹽。
在根據(jù)本發(fā)明的式I化合物全部實(shí)施方案中，R2可以是選自下列基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán) 氫， 低級(jí)烷基， 被羥基取代的低級(jí)烷基， 芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，其中芳基或雜芳基可以被鹵素或低 級(jí)烷基取代， 低級(jí)鏈烯基， 低級(jí)炔基， 低級(jí)烷氧基， 芳基， 芳基-低級(jí)亞烷基，其中芳基被低級(jí)烷氧基或鹵素取代， 雜芳基， 雜芳基-低級(jí)亞烷基，其中雜芳基被低級(jí)烷基或被羥基取代的低級(jí)烷 基取代， 氰基， 鹵素， 甲基磺酰基， 磺酰胺， 三氟甲基， 磺酰脲， 酰胺， 酯， 氨基甲酸酯， 和脲。
在根據(jù)本發(fā)明的式I化合物的全部實(shí)施方案中，R3可以選自氫，羥基，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5。
在根據(jù)本發(fā)明的式I化合物的全部實(shí)施方案中，環(huán)A可以是
其中A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且其中連接到R2上的A和連接到分子其余部分上的A是C或N，且環(huán)A是芳族的。
優(yōu)選的是所述式的化合物，其中 R1是氫或低級(jí)烷基，其在5-取代的1-羥基環(huán)B的C2處，其中環(huán)B是苯基，或 R1是氫或低級(jí)烷基，其在5-取代的3-羥基環(huán)B的C2處，其中環(huán)B是吡啶。
優(yōu)選的環(huán)A包括


和
其中所述的環(huán)可以還任選如上所述取代。
特別優(yōu)選的所述式的化合物是 4-氯-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯； 4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯； 4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽， 4-氨基-3-{5-[4-(2-羥基-乙基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽， 4-氯-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽， 4-氯-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸， 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽， 4-氯-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并-[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽， 4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺， 4-氯-3-[2-甲基-5-(甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯， 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，和 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺。
本發(fā)明的化合物用于治療或控制細(xì)胞增殖性疾病，特別是腫瘤疾病。這些化合物和含有這些化合物的制劑可以用于治療或控制實(shí)體瘤，諸如乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
根據(jù)本發(fā)明的化合物的治療有效量指的是有效預(yù)防、緩解或改善疾病癥狀或延長(zhǎng)所治療受試者存活的用量。治療有效量的測(cè)定屬于本領(lǐng)域技術(shù)的范圍。
本發(fā)明化合物的治療有效量或劑量可以在寬限內(nèi)改變并且可以按照本領(lǐng)域公知的方式測(cè)定?？梢栽诿糠N特定情況中根據(jù)個(gè)體需要調(diào)整這類劑量，包括所給予的具體化合物、給藥途徑、所治療的疾病和所治療的患者。一般來說，就對(duì)體重約為70Kg的成年人的口服或非腸道給藥而言，約10mg至約10,000mg，優(yōu)選約200mg至約1,000mg的每日劑量應(yīng)是合適的，不過，當(dāng)指示時(shí)，可以超過上限?？梢詫⒚咳談┝孔鳛閱蝿┝炕蚍謩┝拷o藥，或就非腸道給藥而言，可以作為連續(xù)輸注給藥。
本發(fā)明的制劑包括適宜于以下的那些口服、鼻、局部(包括口腔和舌下)、直腸、陰道和/或胃腸外給藥。該制劑可以方便地以單位劑量形式存在，并且可以由制藥學(xué)領(lǐng)域中周知的任何方法制備?？梢耘c載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的活性成分的量將根據(jù)將治療的主體以及給藥的特定模式而變化?？梢耘c載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的活性成分的量通常將是產(chǎn)生治療效果的式I化合物的量。通常，在100％中，該量的范圍為約1％至約99％活性成分，優(yōu)選約5％至約70％，最優(yōu)選約10％至約30％。
制備這些制劑或組合物的方法包括以下步驟將本發(fā)明的化合物與載體，以及任選的一種或多種輔助成分組合。通常，通過將本發(fā)明的化合物與液體載體或細(xì)碎的固體載體，或它們兩者，均勻并且密切地組合，然后，如果需要，成型為產(chǎn)品，制備制劑。
本發(fā)明適宜于口服給藥的制劑可以是以下形式膠囊劑、扁囊劑、小藥囊、丸劑、片劑、錠劑(使用矯味的基質(zhì)(flavored basis)，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉劑、顆粒劑或作為在水性或非水性液體中的溶液劑或懸浮劑，或作為水包油或油包水液體乳劑，或作為酏劑或糖漿劑，或作為軟錠劑(使用惰性基質(zhì)(inert base)，如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或漱口劑等，各自含有預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為活性成分。還可以將本發(fā)明的化合物作為大丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑給藥。
可以根據(jù)下面的通用方案合成本發(fā)明的化合物。
方案1
方案2
方案3
方案4
方案5
方案6
方案7
方案8
方案9
方案10
在方案1至10中，R1，R2，和R3如上面對(duì)于式I所定義，基團(tuán)R，R’的實(shí)例可以在下面的實(shí)施例中發(fā)現(xiàn)。PG和PG’是如在下面的實(shí)施例中舉例說明的標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基團(tuán)。
在下面的實(shí)施例中進(jìn)一步舉例并且詳細(xì)說明方案1至10的反應(yīng)條件。
在這些方案中，原料是可商購(gòu)的，或如在下面的實(shí)施例所述獲得的。
提供下列實(shí)施例和參考文獻(xiàn)以幫助理解本發(fā)明，本發(fā)明的真實(shí)范圍闡明在后附權(quán)利要求中。
實(shí)施例1 3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.334.62C11H9BrClNO2S 根據(jù)Luk，K.；McDermott，L.A.；Rossman，P.L.；Wovkulich，P.M.；Zhang，Z.US專利20050256154 A1的程序，由3-甲基噻吩制備3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯原料。
實(shí)施例2 3-羥基-4-甲基-苯甲酸乙酯
M.W.180.205C10H12O3 將3-羥基-4-甲基苯甲酸(25.42g，167mmol)(TCI US)和濃硫酸(3mL)在無水乙醇(180mL)中的混合物加熱回流20小時(shí)。冷卻后，加入固體碳酸氫鈉(10g)，以中和酸。將混合物在二乙醚(2 X 400mL)和水(2 X 300mL)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(300mL)洗滌，合并，干燥(MgSO4)，過濾，并且濃縮。將剩余物從己烷中重結(jié)晶，以兩批得到3-羥基-4-甲基-苯甲酸乙酯，為白色晶體。(產(chǎn)量29.14g，96.8％)。
實(shí)施例3 3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸乙酯
M.W.224.259 C12H16O4 在冰-水浴中冷卻下，將N，N-二異丙基乙胺(5.3mL，30.5mmol)(Aldrich)加入到3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯(5.0g，27.75mmol)(來自上面的實(shí)施例2)在二氯甲烷(20mL)中的懸浮液中。然后，滴加氯甲基甲基醚(4.2mL，55.5mmol)(Aldrich)，并且將混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后，將混合物用乙醚(100mL)稀釋，并且用水(100mL)，然后0.1N HCl(2 X 100mL)和鹽水(100mL)洗滌。將水層用乙醚(100mL)反洗。將有機(jī)溶液合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物通過用二氯甲烷洗脫的硅膠(Biotage 40L)過濾。將餾分合并并且濃縮，得到3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸乙酯，為無色油狀物。(產(chǎn)量4.88g，78.4％)。
實(shí)施例4 4-甲基-3-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲氧基)-苯甲酸乙酯
M.W.310.469 C16H26O4Si 將氫化鈉(60％，在油中，1.80g，45mmol)(Aldrich)用戊烷(2 X 50mL)洗滌，通過移液管除去戊烷。將得到的固體懸浮在無水N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中，并且在冰-水浴中冷卻。在30分鐘內(nèi)，滴加3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯(5.41g，30mmol)(來自上面的實(shí)施例2)在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。在攪拌另外30分鐘后，在10分鐘內(nèi)滴加2-(三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基氯(6.4mL，36mmol)(Aldrich)。于室溫?cái)嚢枇硗?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在水(3 X 100mL)和二乙醚(2 X 100mL)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(100mL)洗滌，然后合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮，得到粗制的4-甲基-3-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲氧基)-苯甲酸乙酯，為無色油狀物。將其在沒有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。(產(chǎn)量9.00g，96.6％)。
實(shí)施例5 2-甲基-5-[4-甲基-3-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲氧基)-苯基]-[1，3，4]噁二唑
M.W.320.467 C16H24N2O3Si 將粗制4-甲基-3-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲氧基)-苯甲酸乙酯(9.0g，29mmol)(來自上面的實(shí)施例4)在無水肼(10mL，318mmol)(Aldrich)中的懸浮液加熱回流(150℃浴溫)1.5小時(shí)。在冷卻至室溫后，將混合物在乙酸乙酯(2 X 100mL)和水(3 X 100mL，加有幾mL的鹽水)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(100mL)洗滌，然后合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物用乙醇(300mL)稀釋并且濃縮，得到中間體酰肼，為白色固體。將其懸浮在原乙酸三乙酯(20mL，109mmol)(Aldrich)中，并且加熱回流(150℃浴溫)22小時(shí)。在冷卻后，將混合物用己烷稀釋，并且由快速色譜(Biotage 40L，5％，然后25％的乙酸乙酯的己烷溶液作為溶劑)純化。將餾分合并并且濃縮，得到2-甲基-5-[4-甲基-3-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲氧基)-苯基]-[1，3，4]噁二唑，為淡黃色油狀物，其通過放置而結(jié)晶為白色晶體。(產(chǎn)量8.22g，88.5％)。
實(shí)施例6 3-羥基-4-甲基-苯甲酸酰肼
M.W.166.181 C8H10N2O2 將3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯(14.42g，80mmol)(來自上面的實(shí)施例2)在無水肼(30mL，956mmol)(Aldrich)中的懸浮液加熱回流(150℃浴溫)2.0小時(shí)。在冷卻至室溫后，將混合物在減壓(高真空)下濃縮，得到粗制的3-羥基-4-甲基-苯甲酸酰肼，為灰白色固體。(產(chǎn)量13.26g，100％)。
實(shí)施例7 3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚
36721-179B M.W.176.176 C9H8N2O2 在密封壓力反應(yīng)器中，將3-羥基苯甲酸酰肼(0.91g，6mmol)(Aldrich)和原乙酸三乙酯(4.5mL，24mmol)(Aldrich)的混合物于150℃浴中加熱22小時(shí)。在冷卻至室溫后，將混合物濃縮，并且剩余物由快速色譜(Biotage40L，乙酸乙酯-己烷11作為溶劑)純化，得到2種產(chǎn)物。較高Rf物質(zhì)從二氯甲烷-己烷中結(jié)晶，得到2-(3-乙氧基-苯基)-5-甲基-[1，3，4]噁二唑，為白色晶體(產(chǎn)量0.29g，23.7％)。較低Rf原料從二氯甲烷-己烷中重結(jié)晶，得到3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚，為白色晶體。(產(chǎn)量0.77g，72.8％)。
實(shí)施例8 4-氯-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.429.885 C20H16ClN3O4S 在密封管中，在磁力攪拌下，將3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚(0.15g，0.85mmol)(來自上面的實(shí)施例7)，碳酸鉀(0.25g，1.8mmol)和18-冠-6(10mg，0.04mmol)(Aldrich)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的懸浮液于65℃加熱2小時(shí)。然后，加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.27g，0.8mmol)(來自上面的實(shí)施例1)和碘化鉀(0.13g，0.8mmol)，并且在密封管中，將混合物于65℃加熱另外20小時(shí)。冷卻后，將混合物在乙酸乙酯(2 X 100mL)和水(2 X 100mL)之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，然后合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物由快速色譜(Biotage 40S，20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液作為溶劑)純化，得到4-氯-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.22g，63.1％)。
實(shí)施例9 4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
37009-142A M.W.410.455 C20H18N4O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.12g，0.29mmol)(來自上面的實(shí)施例8)在2-丙醇(15mL)中的溶液中20分鐘。在微波反應(yīng)器中將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.07g，58％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C20H18N4O4S+H[(M+H)+]的計(jì)算值411.1122。實(shí)測(cè)值411.1121。
實(shí)施例10 4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
37009-143A M.W.425.470 C20H19N5O4S 將4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g，0.12mmol)(來自上面的實(shí)施例9)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中于160℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物由用乙腈-水洗脫的反相色譜(C18柱)純化，得到4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為白色粉末。(產(chǎn)量15.0mg，29％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C20H19N5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值426.1231。實(shí)測(cè)值426.1227。
實(shí)施例11 2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚
M.W.190.203 C10H10N2O2 將3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯(3.60g，20mmol)(來自上面的實(shí)施例6)在無水肼(10mL，318mmol)(Aldrich)中的懸浮液加熱回流(150℃浴溫)3小時(shí)。在冷卻至室溫后，將混合物在減壓下濃縮，得到干燥固體。將其懸浮于二甲苯(50mL)中，并且在減壓下濃縮。將得到的固體懸浮于原乙酸三乙酯(35mL，191mmol)(Aldrich)中，并且加熱回流(150℃浴溫)20小時(shí)，除去乙醇。冷卻后，加入二氯甲烷，并且通過過濾收集固體，得到2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚，為灰白色結(jié)晶物質(zhì)。(產(chǎn)量2.28g，60.0％)。
將來自上面的濾液由快速色譜(Biotage 40L，10％，然后是40％的乙酸乙酯的二氯甲烷溶液作為溶劑)純化，得到第二批的2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚，為白色結(jié)晶物質(zhì)。(產(chǎn)量0.99g，26.0％)。
實(shí)施例12 4-氯-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.443.912 C21H18ClN3O4S 在密封管中，在磁力攪拌下，將3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.29g，0.87mmol)(來自上面的實(shí)施例1)，碘化鉀(0.14g，0.87mmol)，2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚(0.17g，0.9mmol)(來自上面的實(shí)施例11)，碳酸鉀(0.27g，1.9mmol)和18-冠-6(10mg，0.04mmol)(Aldrich)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的懸浮液于65℃加熱20小時(shí)。冷卻后，將混合物在乙酸乙酯(2 X 100mL)和水(2 X 100mL)之間分配。將水層用二氯甲烷(2 X 100mL)萃取。[該物質(zhì)在二氯甲烷中比在乙酸乙酯中更可溶]。將有機(jī)層用鹽水洗滌，然后合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物由快速色譜(Biotage 40S，二氯甲烷，然后20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液作為溶劑)純化，得到4-氯-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.24g，62.4％)。
實(shí)施例13 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
37009-145A M.W.424.482 C21H20N4O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.12g，0.28mmol)(來自上面的實(shí)施例12)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分鐘。在微波反應(yīng)器中將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物由用30％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到回收的原料(25mg)和4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.053g，44％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H20N4O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值425.1278。實(shí)測(cè)值425.1274。
實(shí)施例14 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽
37009-148A M.W.439.497+114.024 C21H21N5O4S·C2HF3O2 將4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.043g，0.10mmol)(來自上面的實(shí)施例13)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物由用乙腈-含三氟乙酸的水洗脫的HPLC純化，得到兩種產(chǎn)物。第一種產(chǎn)物得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，為白色粉末。(產(chǎn)量20.0mg，47％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H21N5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值440.1387。實(shí)測(cè)值440.1384。
實(shí)施例15 4-氨基-3-{5-[4-(2-羥基-乙基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽
37009-148B M.W.482.565+114.024 C23H26N6O4S·C2HF3O2 第二種產(chǎn)物(來自上面的實(shí)施例14)得到4-氨基-3-{5-[4-(2-羥基-乙基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽。(產(chǎn)量10.0mg，21％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H26N6O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值483.1809。實(shí)測(cè)值483.1808。
實(shí)施例16 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽
37009-187A M.W.439.497+172.204 C21H21N5O4S·C7H8O3S 將4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺(0.045g，0.10mmol)(來自上面的實(shí)施例14)在甲醇(6mL)中的溶液，用一水合甲苯-4-磺酸(19.5mg，0.10mmol)(Aldrich)處理，并且于40℃加熱30分鐘。將溶液濃縮。將剩余物用二乙醚洗滌，溶解于水中，并且凍干，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽。(產(chǎn)量60.8mg，97％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H21N5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值440.1387。實(shí)測(cè)值440.1384。
實(shí)施例17 5-碘-2-甲基-苯酚
M.W.234.038C7H7IO 根據(jù)Laugraud，S；Reinier，N，于1996年10月17公布的WO96/32399的程序，制備5-碘-2-甲基-苯酚。
將5-氨基-O-甲酚(10.0g，81mmol)(Aldrich)在四氫呋喃(100mL)，水(150mL)和濃硫酸(6mL，0.11mmol)的混合物中的溶液在冰-水浴中冷卻。在30分鐘內(nèi)滴加亞硝酸鈉(5.6g，81mmol)在水(30mL)中的溶液。在冷卻下，將混合物攪拌另外30分鐘。(形成懸浮液)。加入粉末銅金屬(200mg，3mmol)，接著加入碘化鉀(17.5g，0.11mmol)在水(70mL)中的溶液。將混合物溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?0分鐘，然后傾到入水(200mL)中。將混合物用乙酸乙酯(2 X 400mL)萃取。將有機(jī)層用水(400mL)和鹽水(400mL)洗滌，然后合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物由快速色譜(Biotage 75L，己烷-二氯甲烷23作為溶劑)純化。將純餾分合并，并且物質(zhì)從己烷中重結(jié)晶，以2批得到5-碘-2-甲基-苯酚，為白色針狀物。(產(chǎn)量10.08g，53.0％)。
實(shí)施例18 4-碘-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯
M.W.278.091 C9H11IO2 在冰-水浴中冷卻下，將N，N-二異丙基乙胺(8.3mL，47.4mmol)(Aldrich)加入到5-碘-2-甲基-苯酚(10.1g，43.1mmol)(來自上面的實(shí)施例17)在二氯甲烷(40mL)中的懸浮液中。滴加氯甲基-甲基醚(6.5mL，86.1mmol)(Aldrich)，并且混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將混合物用乙醚(200mL)稀釋，并且用水(200mL)，然后0.1N HCl(2 X 200mL)和鹽水(200mL)洗滌。將水層用乙醚(200mL)反洗。將有機(jī)溶液合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物通過用二氯甲烷-己烷(14V/V)洗脫的硅膠(Biotage 40L)過濾。將餾分合并并且濃縮，得到4-碘-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯，為無色油狀物。(產(chǎn)量9.05g，75.6％)。
實(shí)施例19 4-乙炔基-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯
M.W.176.217 C11H12O2 在壓力反應(yīng)器中，于室溫，將氬氣鼓泡進(jìn)入到4-碘-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯(7.63g，27.5mmol)(來自上面的實(shí)施例18)，三乙胺(55mL)(Aldrich)和乙腈(100mL)的混合物中20分鐘。加入乙炔基三甲基硅烷(9.2mL，64.5mmol)(Aldrich)，碘化亞銅(I)(245mg，1.28mmol)(Aldrich)和二氯二(三苯膦)鈀(II)(911mg，1.29mmol)(Aldrich)。將反應(yīng)器密封，并且在磁力攪拌下，將混合物于100℃加熱5小時(shí)。在冷卻至室溫后，將混合物懸浮在二乙醚(250mL)和水(250mL)中，并且通過

過濾。進(jìn)行層分離。將有機(jī)層用水(250mL)和鹽水(250mL)洗滌。將水層用乙醚(250mL)反洗。將有機(jī)層合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物溶解于甲醇(50mL)中，并且加入碳酸鉀(500mg)。將混合物于室溫?cái)嚢柽^夜。在濃縮后，將剩余物在二乙醚(2 X 250mL)和水(2 X 250mL)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(200mL)洗滌，合并，干燥(MgSO4)，過濾并且濃縮。將剩余物由快速色譜(Biotage 40L，己烷，然后己烷-二氯甲烷91和31，作為溶劑)純化，得到4-乙炔基-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯為褐色油狀物。(產(chǎn)量4.65g，96.2％)。
實(shí)施例20 4-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-1-甲基-1H-[1，2，3]三唑
M.W.233.27 C12H15N3O2 向4-乙炔基-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯(0.64g，3.63mmol)(來自上面的實(shí)施例19)，碘代甲烷(0.23mL，3.63mmol)(Aldrich)和疊氮化鈉(0.24g，3.63mmol)(Aldrich)在水(6mL)和叔丁醇(6mL)的混合物中的懸浮液中，加入銅粉(0.17g，2.68mmol)和硫酸銅水溶液(1N，0.7mL)。在微波反應(yīng)器中，將反應(yīng)混合物于125℃加熱20分鐘。冷卻后，將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用5-60％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到4-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-1-甲基-1H-[1，2，3]三唑。(產(chǎn)量0.57g，67％)。
實(shí)施例21 2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯酚
M.W.189.219 C10H11N3O 向4-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-1-甲基-1H-[1，2，3]三唑(0.57g，2.44mmol)(來自上面的實(shí)施例20)在四氫呋喃-2-丙醇(11，20mL)中的溶液中，加入HCl的二噁烷溶液(4M，8mL)(Aldrich)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?天。將溶液濃縮。將剩余物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物從乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶并且干燥，得到2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯酚。(產(chǎn)量0.24g，52％)。
實(shí)施例22 4-氯-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.442.928 C21H19ClN4O3S 將碳酸銫(0.56g，1.73mmol)(Aldrich)，2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯酚(0.24g，1.27mmol)(來自上面的實(shí)施例21)在四氫呋喃-N，N-二甲基甲酰胺(52，17.5mL)中的懸浮液于70℃加熱3小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.40g，1.15mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用30％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到4-氯-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.25g，48％)。
實(shí)施例23 4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
37009-158A M.W.423.497 C21H21N5O3S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.17g，0.38mmol)(來自上面的實(shí)施例22)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.10g，63％)。HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H21N5O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值424.1438。實(shí)測(cè)值424.1436。
實(shí)施例24 4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
37009-159A M.W.438.512 C21H22N6O3S 將4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.050g，0.11mmol)(來自上面的實(shí)施例23)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物由用乙腈-水洗脫的C18柱純化，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為白色粉末。(產(chǎn)量31.0mg，60％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H22N6O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值439.1547。實(shí)測(cè)值439.1545。
實(shí)施例25 3-(2H-四唑-5-基)-苯酚
M.W.162.15 C7H6N4O 將3-氰基苯酚(4.14g，34.75mmol)(Aldrich)，疊氮化鈉(2.49g，38.23mmol)(Aldrich)和氯化銨(2.05g，38.23mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物加熱至160℃ 18小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物由用乙腈-水洗脫的C18柱純化，得到3-(2H-四唑-5-基)-苯酚。(產(chǎn)量0.9g，16％)。
實(shí)施例26 3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯酚
M.W.282.304 C15H14N4O2 將4-甲氧基芐基氯(0.26mL，1.94mmol)(Aldrich)，碘化鉀(0.31g，1.85mmol)(Aldrich)，3-(2H-四唑-5-基)-苯酚(0.3g，1.85mmol)(來自上面的實(shí)施例25)，碳酸鉀(0.38g，2.78mmol)和18-冠-6(24.0mg，0.09mmol)(Aldrich)在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的懸浮液于65℃加熱1天。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用5-40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯酚。(產(chǎn)量0.38g，73％)。
實(shí)施例27 4-氯-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.536.013 C26H22ClN5O4S 將碳酸銫(0.60g，1.83mmol)，3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯酚(0.38g，1.35mmol)(來自上面的實(shí)施例26)在四氫呋喃-N，N-二甲基甲酰胺(52，17.5mL)中的懸浮液于70℃加熱3小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.41g，1.22mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到4-氯-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.17g，26％)。
實(shí)施例28 4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
37009-202A M.W.516.583 C26H24N6O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.17g，0.32mmol)(來自上面的實(shí)施例27)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.15g，94％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H24N6O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值517.1653。實(shí)測(cè)值517.1653。
實(shí)施例29 4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
37009-208A M.W.531.598 C26H25N7O4S 將4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.050g，0.10mmol)(來自上面的實(shí)施例28)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2小時(shí)。將沉淀物過濾并且干燥，得到4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺。(產(chǎn)量18.0mg，35％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H25N7O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值532.1762。實(shí)測(cè)值532.1762。
實(shí)施例30 3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯酚
M.W.176.179 C8H8N4O 將碳酸銫(0.60g，1.83mmol)，3-(2H-四唑-5-基)-苯酚(0.30g，1.85mmol)(來自上面的實(shí)施例25)在四氫呋喃-N，N-二甲基甲酰胺(52，17.5mL)中的懸浮液于70℃加熱3小時(shí)。加入碘代甲烷(0.29g，2.04mmol)(Aldrich)。繼續(xù)加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯酚。(產(chǎn)量0.23g，70％)。
實(shí)施例31 4-氯-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.429.888 C19H16ClN5O3S 將3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(042g，1.24mmol)(來自上面的實(shí)施例1)，3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯酚(0.23g，1.31mmol)(來自上面的實(shí)施例30)，碘化鉀(0.21g，1.24mmol)，碳酸鉀(0.38g，2.78mmol)和18-冠-6(16.0mg，0.06mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物于65℃加熱1天。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到4-氯-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.15g，28％)。
實(shí)施例32 4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
37009-206A M.W.410.458 C19H18N6O3S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.15g，0.35mmol)(來自上面的實(shí)施例31)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.11g，79％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C19H18N6O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值411.1234。實(shí)測(cè)值411.1235。
實(shí)施例33 4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
37009-209A M.W.425.472 C19H19N7O3S 將4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.050g，0.12mmol)(來自上面的實(shí)施例32)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2小時(shí)。將沉淀物過濾，用甲醇洗滌并且干燥，得到4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為白色粉末。(產(chǎn)量39.0mg，75％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C19H19N7O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值426.1343。實(shí)測(cè)值426.1344。
實(shí)施例34 5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯酚
M.W.299.762C16H14ClN3O 向4-乙炔基-2-甲氧基甲氧基-1-甲基-苯(1.50g，8.50mmol)(來自上面的實(shí)施例19)，4-氯芐基溴(1.76g，8.50mmol)和疊氮化鈉(0.56g，8.50mmol)在水(12mL)和叔丁醇(12mL)的混合物中的懸浮液中，加入銅粉(0.40g，6.30mmol)和硫酸銅溶液的水溶液(1N，1.64mL)。在微波反應(yīng)器中，將反應(yīng)混合物于130℃加熱30分鐘。冷卻后，將反應(yīng)混合物在二氯甲烷和水之間分配。將水相用二氯甲烷(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮。將剩余物由用40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯酚；(產(chǎn)量0.75g，59％)；和1-(4-氯-芐基)-4-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-1H[1，2，3]三唑。(產(chǎn)量0.61g，21％)。
實(shí)施例35 4-氯-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.553.471 C27H22Cl2N4O3S 將碳酸銫(1.11g，3.41mmol)，5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯酚(0.75g，2.50mmol)(來自上面的實(shí)施例34)在四氫呋喃-N，N-二甲基甲酰胺(52，23mL)中的懸浮液于70℃加熱2小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.76g，2.27mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將沉淀物過濾，用乙酸乙酯洗滌并且干燥，得到4-氯-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.33g，26％)。
實(shí)施例36 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.534.041 C27H24ClN5O3S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.33g，0.60mmol)(來自上面的實(shí)施例35)在2-丙醇(30mL)中的溶液中20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.23g，72％)。
實(shí)施例37 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
M.W.549.056 C27H25ClN6O3S 將4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.050g，0.09mmol)(來自上面的實(shí)施例36)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2小時(shí)。將沉淀物過濾，用甲醇洗滌并且干燥，得到4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為白色粉末。(產(chǎn)量34.5mg，68％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H25ClN6O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值549.1470。實(shí)測(cè)值549.1459。
實(shí)施例38 4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽
M.W.549.056+172.204 C27H25ClN6O3S·C7H8O3S 將4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺(0.159g，0.29mmol)(來自上面的實(shí)施例37)在甲醇(10mL)中的溶液，用一水合甲苯-4-磺酸(61.0mg，0.319mmol)處理，并且于室溫加熱40分鐘。將溶液濃縮。將剩余物用二乙醚洗滌，溶解于水中，且凍干為4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺1.5甲苯-4-磺酸鹽。(產(chǎn)量0.21g，100％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H25ClN6O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值549.1470。實(shí)測(cè)值549.1467。
實(shí)施例39 3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-酰肼
M.W.318.76 C16H15ClN2O3 將4-氯苯基乙酰氯(1.36g，7.22mmol)(Aldrich)，3-羥基-4-甲基-苯甲酸酰肼(1.0g，6.02mmol)(來自上面的實(shí)施例6)和三乙胺(1.36mL)在四氫呋喃(20mL)中的混合物于85℃加熱1天。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(1X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物用乙酸乙酯和二氯甲烷洗滌并且干燥，得到3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-酰肼。(產(chǎn)量0.91g，95％)。
實(shí)施例40 5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚
M.W.300.75 C16H16ClN2O2 向3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-酰肼(0.91g，2.85mmol)(來自上面的實(shí)施例39)在乙腈(20mL)中的溶液中，加入二異丙基乙胺(3.0mL，17.1mmol)和三苯膦(1.50g，5.70mmol)。在攪拌5分鐘后，加入六氯乙烷(1.01g，4.28mmol)(Aldrich)，并且將混合物于室溫?cái)嚢?天。蒸發(fā)溶劑。將剩余物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(1X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物由用20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化為5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚。(產(chǎn)量0.68g，79％)。
實(shí)施例41 4-氯-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.554.46 C27H21Cl2N3O4S 將碳酸銫(0.54g，1.66mmol)，5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚(0.36g，1.20mmol)(來自上面的實(shí)施例40)在四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(52，21mL)中的懸浮液于68℃加熱2小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.36g，1.08mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物用乙酸乙酯洗滌并且干燥，得到4-氯-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.17g，26％)。
實(shí)施例42 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.535.03 C27H23ClN4O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.11g，0.20mmol)(來自上面的實(shí)施例41)在2-丙醇(15mL)中的溶液中20min。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱5.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.07g，64％)。
實(shí)施例43 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
M.W.550.037 C27H24ClN5O4S 將4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.07g，0.13mmol)(來自上面的實(shí)施例42)在二甲亞砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)處理，并且在微波反應(yīng)器中，于160℃加熱2.8小時(shí)。將反應(yīng)混合物由C18柱色譜和SFC柱色譜純化，得到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為白色粉末。(產(chǎn)量8mg，11％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H24ClN5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值550.1311。實(shí)測(cè)值550.1311。
實(shí)施例44 3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-(4-氯-苯甲酰基)-酰肼
M.W.304.74 C15H13ClN2O3 將4-氯苯甲酰氯(0.92mL，7.22mmol)(Aldrich)，3-羥基-4-甲基-苯甲酸酰肼(1.0g，6.02mmol)(來自上面的實(shí)施例6)和三乙胺(1.36mL)在四氫呋喃(20mL)中的混合物于85℃加熱1天。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將沉淀物用乙酸乙酯和二氯甲烷洗滌并且干燥，得到3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-(4-氯-苯甲?；?-酰肼。(產(chǎn)量1.28g，70％)。
實(shí)施例45 5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚
M.W.286.72 C15H11ClN2O2 向3-羥基-4-甲基-苯甲酸N’-(4-氯-苯甲?；?-酰肼(1.28g，4.20mmol)(來自上面的實(shí)施例44)在乙腈(20mL)中的溶液中，加入二異丙基乙胺(4.4mL，25.2mmol)和三苯膦(2.21g，8.40mmol)。在攪拌5分鐘后，加入六氯乙烷(1.49g，6.30mmol)(Aldrich)，并且將混合物于室溫?cái)嚢?天。蒸發(fā)溶劑。將剩余物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(1X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物由用0-60％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚。(產(chǎn)量0.34g，28％)。
實(shí)施例46 4-氯-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.540.43 C26H19Cl2N3O4S 將碳酸銫(0.54g，1.66mmol)，5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]-噁二唑-2-基]-2-甲基-苯酚(0.34g，1.19mmol)(來自上面的實(shí)施例45)在四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(52，21mL)中的懸浮液于68℃加熱2小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.36g，1.08mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配。將水相用乙酸乙酯(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物用乙酸乙酯洗滌并且干燥，得到4-氯-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.30g，47％)。
實(shí)施例47 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.521.00 C26H21ClN4O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.30g，0.56mmol)(來自上面的實(shí)施例46)在2-丙醇(30mL)中的溶液中20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱5.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.22g，76％)。
實(shí)施例48 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸
M.W.492.94 C24H17ClN4O4S 將氫氧化鈉水溶液(2N，2.0mL，1.0mmol)加入到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.22g，0.42mmol)(來自上面的實(shí)施例47)在四氫呋喃/甲醇(31，8mL)中的溶液中，并且將混合物于50℃加熱1天。將反應(yīng)混合物濃縮且與甲苯共沸蒸餾。將固體剩余物與乙酸乙酯一起研磨。然后將固體懸浮于水中，并且用鹽酸(1N)處理。在攪拌30分鐘后，收集固體，用水洗滌并且干燥，得到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸。(產(chǎn)量0.20g，95％)。
實(shí)施例49 4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽
M.W.650.032 C26H22ClN5O4S·C2HF3O2 在攪拌下，將4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(0.10g，0.20mmol)(來自上面的實(shí)施例48)，一水合1-羥基苯并三唑(43mg，0.32mmol)(Aldrich)和1，3-二異丙基碳二亞胺(0.044mL，0.17mmol)(Aldrich)的混合物在四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(3.6mL，5:1)中合并。在1小時(shí)后，加入乙醇胺(0.036mL，0.60mmol)(Aldrich)。將混合物于室溫?cái)嚢?8小時(shí)，然后濃縮。將剩余物由用乙腈/水洗脫的HPLC純化，得到4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，為白色粉末。(產(chǎn)量52mg，40％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22ClN5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值536.1154。實(shí)測(cè)值536.1149。
實(shí)施例50 3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸
C10H12O4M.W.196.205 將3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸乙酯(4.5g，20mmol)(來自上面的實(shí)施例3)在乙醇(50mL)，水(20mL)和1N氫氧化鈉水溶液(30mL)的混合物中的溶液于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將混合物濃縮以除去大部分乙醇。將得到的水溶液用乙酸(2.5g，41.6mmol)酸化。在放置另外30分鐘后，將形成的沉淀物通過過濾收集，用水洗滌并且干燥，得到3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸，為白色粉末。(產(chǎn)量3.82g，97％)。
實(shí)施例51 5-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-3-甲基-[1，2，4]噁二唑
M.W.234.257 C12H14N2O3 將3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯甲酸(1.96g，10mmol)(來自上面的實(shí)施例50)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(1.92g，10mmol)(Aldrich)和一水合1-羥基苯并三唑(1.35g，10mmol)(Aldrich)在N，N-二甲基甲酰胺(25mL)中的混合物于室溫?cái)嚢?0分鐘。加入乙酰胺肟(0.74g，10mmol)(GFS Chemicals)，并且混合物于140℃加熱2小時(shí)。冷卻后，將混合物在乙酸乙酯(2X)和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。將乙酸乙酯溶液合并并且濃縮，剩余物由快速色譜純化，得到5-(3-甲氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-3-甲基-[1，2，4]噁二唑。(產(chǎn)量1.23g，52.5％)。
實(shí)施例52 2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯酚
M.W.190.20 C10H10N2O 向5-(3-甲基氧基甲氧基-4-甲基-苯基)-3-甲基-[1，2，4]噁二唑(1.23g，5.25mmol)(來自上面的實(shí)施例51)在四氫呋喃/2-丙醇(11，30mL)中的溶液中，加入13.1mL的4M HCl的二噁烷溶液(Aldrich)。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將溶液濃縮。將剩余物用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物在乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，并且干燥，得到2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯酚。(產(chǎn)量0.88g，88％)。
實(shí)施例53 4-氯-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.443.91 C21H18ClN3O4S 將碳酸銫(1.02g，3.13mmol)，2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯酚(0.42g，2.20mmol)(來自上面的實(shí)施例52)在四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(52，21mL)中的懸浮液于70℃加熱2小時(shí)。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.68g，2.04mmol)(來自上面的實(shí)施例1)。繼續(xù)加熱1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在二氯甲烷和水之間分配。將水相用二氯甲烷(2X)萃取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并且濃縮。將剩余物由用5-10％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脫的快速色譜純化，得到4-氯-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.51g，57％)。
實(shí)施例54 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.424.48 C21H20N4O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.42g，0.95mmol)(來自上面的實(shí)施例53)在2-丙醇(30mL)中的溶液中20分鐘。在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮。將剩余物用熱甲醇洗滌，過濾并且干燥，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色粉末。(產(chǎn)量0.33g，83％)。
實(shí)施例55 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸
M.W.396.43 C19H16N4O4S 將氫氧化鈉水溶液(2N，3.0mL，1.5mmol)加入到4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.33g，0.78mmol)(來自上面的實(shí)施例54)在四氫呋喃/甲醇(31，8mL)中的溶液中，并且將混合物于50℃加熱1天。將反應(yīng)混合物濃縮，并且與甲苯共沸蒸餾。將固體剩余物與乙酸乙酯一起研磨。然后將固體懸浮于水中，并且用鹽酸(1N)處理。在攪拌30分鐘后，收集固體，用水洗滌且干燥為4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸。(產(chǎn)量0.29g，94％)。
實(shí)施例56 4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并-[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽
M.W.553.516 C21H21N5O4S·C2HF3O2 在攪拌下，將4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(0.10g，0.25mmol)(來自上面的實(shí)施例55)，一水合1-羥基苯并三唑(54mg，0.40mmol)(Aldrich)和1，3-二異丙基碳二亞胺(0.055mL，0.36mmol)(Aldrich)的混合物在四氫呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(3.6mL，51)中合并。在1小時(shí)后，加入乙醇胺(0.046mL，0.76mmol)(Aldrich)。將混合物于室溫?cái)嚢?8小時(shí)，然后濃縮。將剩余物由用乙腈/水洗脫的HPLC純化，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，為白色粉末。(產(chǎn)量70mg，50％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H21N5O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值440.1387。實(shí)測(cè)值440.1384。
實(shí)施例57 5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯酚
M.W.309.37 C18H19N3O2 在密封反應(yīng)管中，將2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯酚(0.65g；3.42mmol)(來自上面的實(shí)施例11)和4-甲氧基芐基胺(3.10g；22.6mmol)(Aldrich)的混合物在油浴中于150-155℃加熱42小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，且用二氯甲烷和己烷稀釋，從而迫使產(chǎn)物從溶液中沉淀出。將粗制固體通過過濾收集，然后再?gòu)亩燃淄?甲醇溶液中在蒸發(fā)掉溶劑時(shí)沉淀出。收集固體并且干燥，得到5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯酚。(產(chǎn)量0.849g，76.3％)。
實(shí)施例58 4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.563.08 C29H27ClN4O4S 將碳酸鉀(0.246g；1.67mmol)加入到5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯酚(0.17g；0.55mmol)(來自上面的實(shí)施例57)在DMF(3.4mL)中的溶液中，并且將混合物于室溫?cái)嚢?分鐘。然后凈加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.246g；0.74mmol)(來自上面的實(shí)施例1)，并且于室溫繼續(xù)攪拌4.25小時(shí)。將深紅色混合物用乙酸乙酯稀釋，并且將混合物用水洗滌兩次，然后用鹽水洗滌一次。將有機(jī)相用硫酸鈉干燥并且濃縮。粗制物質(zhì)由快速色譜(80g柱，用4％甲醇的二氯甲烷溶液，然后到40％甲醇的梯度洗脫)純化。將含產(chǎn)物的餾分合并并且濃縮。然后通過濃縮物質(zhì)的二氯甲烷-己烷溶液至小體積，從經(jīng)過色譜的物質(zhì)中除去少量的污染物，從而導(dǎo)致為白色固體的產(chǎn)物沉淀，然后將其通過過濾收集并且干燥，得到4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量0.188g；60.8％)。
實(shí)施例59 4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.543.65 C29H29N5O4S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.330g；0.59mmol)(來自上面的實(shí)施例58)在2-丙醇(20mL)中的懸浮液中15-20分鐘。然后在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱90分鐘。將反應(yīng)混合物濃縮，且將剩余物由快速色譜(120g柱；4％甲醇的二氯甲烷溶液，然后到40％甲醇的梯度)純化，得到4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.263g；96％純；78.72％)。
實(shí)施例60 4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
M.W.558.66 C29H30N6O4S 將乙醇胺(1.8mL；29.9mmol)(Aldrich)加入到4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(50mg；0.08277mmole)(來自上面的實(shí)施例59)在二甲亞砜(0.6mL)中的溶液中。在微波反應(yīng)器中，將混合物于135℃加熱2.25小時(shí)。在冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物用水稀釋，導(dǎo)致產(chǎn)物沉淀為乳狀固體，將其通過離心收集和干燥。將粗制固體與熱甲醇一起研磨，稍微冷卻，過濾和干燥，以兩批得到4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺。(產(chǎn)量31.2mg，51.3％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C29H30N6O4S+H[(M+H)+]計(jì)算值559.2122。實(shí)測(cè)值559.2120。
實(shí)施例61 4-氯-3-[2-甲基-5-(甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.442.93 C21H19ClN4O3S 將4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(85mg；0.151mmol)(來自上面的實(shí)施例58)與三氟乙酸(1.0mL；13mmol)，茴香醚(100μL；0.92mmol)(Aldrich)和硫酸(50μL；0.94mmol)的混合物于室溫?cái)嚢?2小時(shí)。將混合物濃縮。將剩余物用二氯甲烷稀釋，且再次濃縮。然后，將剩余物用二氯甲烷和甲醇稀釋，并且用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將水相用二氯甲烷和甲醇的混合物反洗。將兩種有機(jī)相合并，用硫酸鈉干燥并且濃縮。粗制物質(zhì)由快速色譜(12g柱；EtOAc，接著到6040 EtOAc甲醇梯度)純化，得到4-氯-3-[2-甲基-5-(甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(產(chǎn)量56.3mg，84.20％)。
實(shí)施例62 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯
M.W.423.50 C21H21N5O3S 將氨氣鼓泡進(jìn)入到4-氯-3-[2-甲基-5-(甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.106g；0.24mmol)(來自上面的實(shí)施例61)在2-丙醇(20mL)中的懸浮液中15-20分鐘。然后在微波反應(yīng)器中，將混合物于140℃加熱75分鐘。在冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷(～75mL)稀釋，并且用水，然后用鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)并且濃縮。將剩余物與熱二氯甲烷一起研磨兩次，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，為白色固體。(產(chǎn)量80.4mg)。通過將來自兩次研磨的母液進(jìn)行色譜純化，得到另外的產(chǎn)物。(產(chǎn)量7.7mg，合計(jì)82.49％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H21N5O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值424.1438。實(shí)測(cè)值424.1433。
實(shí)施例63 4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺
M.W.438.51 C21H22N6O3S 將乙醇胺(1.5mL；24.9mmol)(Aldrich)加入到4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(68.4mg；0.162mmol)(來自上面的實(shí)施例62)在二甲亞砜(0.5mL)中的懸浮液中。在微波反應(yīng)器中，將混合物于135℃加熱90分鐘，然后于140℃加熱1小時(shí)。在加熱下，將粗制反應(yīng)混合物在高真空下濃縮，以除去大部分乙醇胺和DMSO。將剩余物用水稀釋，從而引起乳狀沉淀物從溶液中析出。通過過濾收集固體，用水洗滌且干燥。然后將物質(zhì)與熱甲醇一起研磨，得到4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，為灰白色固體。(產(chǎn)量48mg，67.8％)。
HRMS(ES+)m/z對(duì)于C21H22N6O3S+H[(M+H)+]計(jì)算值439.1547。實(shí)測(cè)值439.1544。
實(shí)施例64 激酶抑制分析(IC50) 用6H-MEK作為底物的c-RafHTRF分析(劑量響應(yīng)) 分析原則 分析利用6H-MEK作為底物。通過c-Raf磷酸化，磷酸化的6H-MEK用兔抗-磷酸基-MEK1/2，Eu-標(biāo)記的抗兔和APC-標(biāo)記的抗-6H抗體檢測(cè)。
試劑和儀器 酶具有EE-標(biāo)記的克隆人c-Raf；磷酸化的(與桿狀病毒Hi5細(xì)胞中的v-src-FLAG共表達(dá)的)，0.2mg/mL(2.74μM，假定73kD分子量)，貯存于-15℃。
底物WT全長(zhǎng)6H-MEK，4.94mg/mL(154.4μM，假定32kD的MW)，貯存于-15℃。
抗體兔(α-P-(Ser217/221)-MEK-1/2Ab(獲自Cell Signaling，Cat.#9121B，Lot 14)Eu-(α-兔IgG(獲自Wallac，Cat.# AD0083，Lot 318663，710ug/mL，4.4μM)；(α-6H-SureLight-APC(獲自Martek，Cat.#AD0059H，LotE012AB01，3.03μM)。
讀數(shù)器PerkinElmer的Envision，用412反射鏡的HTRF讀數(shù)模式。
分析板基片全黑聚丙烯板(Cat.#4344)。
其它復(fù)合板用Weidman384聚丙烯板(REMP)。
分析程序 (1)制備激酶分析緩沖液(KAB)50mM HEPES(HyClone)pH7，10mM MgCl2，1mM DTT，0.1mM Na3V2O4，和0.3mg/ml BSA。
(2)制備在KAB中的6H-MEK(150nM)。加入12μl/孔到分析板中。
(3)制備在KAB中的ATP(66μM)。
(4)在DMSO中，將化合物稀釋到2.4mM并且將任何陽(yáng)性對(duì)照稀釋到480μM。在DMSO中進(jìn)行10點(diǎn)3x稀釋。撤回2.5μl/孔的DMSO溶液，并且加入到(3)中的27.5μl/孔ATP溶液中。
(5)混合，然后將(4)中的6μl/孔的溶液加入到分析板中，對(duì)于在MEK磷酸化過程中的DMSO濃度為2.1％。
(6)制備在KAB中的c-Raf(12nM)。
(7)在柱1-2中，加入6μl/孔的KAB，并且在柱3-24中，加入6μl/孔的c-Raf。
(8)于37℃溫育30min。
(9)制備在AB1中的兔(α-P-(Ser 217/221)-MEK-1/2 Ab(來自貯液的1240)50mM HEPES pH7，0.2mg/ml BSA，和43mM EDTA。
(10)為了停止反應(yīng)，將來自(9)的6μl/孔的溶液加入到分析板中，并且于37℃溫育30min。
(11)制備在AB2中的Eu-(α-兔IgG(9nM)和(α-6H-SureLight-APC(120nM)50mM HEPES pH7和0.2mg/ml BSA。
(12)將來自(11)的6μl/孔的溶液加入到分析板中。
(13)為了測(cè)定光譜干擾因子，按照步驟(1)至(10)制備兩個(gè)樣品。對(duì)于空白樣品，加入6μl/孔的AB2。對(duì)于干擾因子樣品，加入6μl/孔的Eu-抗兔IgG(9nM)。
(14)于室溫溫育1.5小時(shí)。
(15)在Envision上讀出于615nm和665nm的HTRF信號(hào)。在光譜干擾校正后，標(biāo)準(zhǔn)化HTRF信號(hào)。
c-Raf的表達(dá)和純化 在High-5細(xì)胞中表達(dá)N末端EE-標(biāo)記的c-Raf。將5升培養(yǎng)物用EE-c-Raf和FLAG-vSrc為12比率的病毒共轉(zhuǎn)染，并且在48小時(shí)后收獲。將細(xì)胞塊在含有5mM EDTA，50mM KF，20mM焦磷酸鈉，20mM β-甘油磷酸酯，0.5mM Na VO3，1％NP-40(w/v)和Complete Protease Tablets的TBS中裂解。將裂解產(chǎn)物于20,000xg離心1小時(shí)。將上清液與8ml的抗-EE標(biāo)記-G蛋白瓊脂糖于4℃溫育2小時(shí)。然后，將樹脂用30體積的上述緩沖液洗滌。將c-Raf蛋白通過與含有100mg/ml的EE肽的上述緩沖液于4℃溫育1小時(shí)而洗脫。使用具有YM10膜的Amicon Stir Cell濃縮蛋白。將濃縮的蛋白相對(duì)于含有1mM DTT和30％甘油的TBS透析。由BioRad DC方法測(cè)定蛋白濃度。
6H-MEK1(62-393)的純化 將含有用于表達(dá)6H-MEK1(62-393)的質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞在RichMedia中生長(zhǎng)，并且用1mM IPTG于22℃誘導(dǎo)24小時(shí)。將細(xì)胞塊重新懸浮于50mM磷酸鉀緩沖液，pH8.0，300mM NaCl，5mM MgCl2，10mMCHAPS，2mM TCEP和Complete Protease Inhibitor Tablets中。由超聲波破壞細(xì)胞。將裂解產(chǎn)物通過于13,000xg離心45分鐘而清除。將上清液用50mM磷酸鉀緩沖液，pH8.0，10mM咪唑，4mM TCEP，300mM NaCl，10mM CHAPS，2mM吡咯-2-羧酸酯，和100mM ZnCl2以11稀釋，然后與TALON金屬親和性樹脂于4℃溫育1小時(shí)。
將樹脂用10體積的50mM磷酸鉀緩沖液，pH8.0，5mM咪唑，2mMTCEP，300mM NaCl，10mM CHAPS，1mM吡咯-2-羧酸酯，和50mMZnCl2洗滌。蛋白通過與5體積的20mM HEPES，pH8.0，100mM EDTA，2mM TCEP，10％v/v甘油于4℃溫育1小時(shí)而洗脫。使用具有10Kd MW截止膜(cutoff membrane)的Amicon Ultra 15裝置濃縮洗脫的材料。然后將樣品在Superdex 200 26/60柱上進(jìn)行尺寸排阻色譜。將6H-MEK1 Peak匯集并且如上所述濃縮。由BioRad方法測(cè)定蛋白。
用6H-MEK作為底物的b-Raf野生型HTRF分析(劑量響應(yīng)) 分析原則 分析利用6H-MEK作為底物。通過b-Raf WT磷酸化，磷酸化的6H-MEK用兔抗-磷酸基-MEK1/2，Eu-標(biāo)記的抗兔和APC-標(biāo)記的抗-6H抗體檢測(cè)。
試劑和儀器 酶獲自Upstate的具有N-末端GST-標(biāo)記的重組人b-Raf殘基416-端；(由在Sf21昆蟲細(xì)胞中的桿狀病毒表達(dá))，0.26mg/mL(3.87μM，假定67.2kD的分子量)Cat.#14-530M，Lot#25502AU，貯存于-80℃。
底物獲自C.Belunis(5/26/04)的WT全長(zhǎng)6H-MEK，4.94mg/mL(154.4μM，假定32kD的MW)，貯存于-15℃。
抗體兔(α-P-(Ser217/221)-MEK-1/2Ab(獲自Cell Signaling，Cat.#9121B，Lot 14)Eu-(α-兔IgG(獲自Wallac，Cat.#AD0083，Lot 318663，710ug/mL，4.4μM)；(α-6H-SureLight-APC(獲自Martek，Cat.#AD0059H，LotE012AB01，3.03μM)。
讀數(shù)器PerkinElmer的Envision，用412反射鏡的HTRF讀數(shù)模式。
分析板基片全黑聚丙烯板(Cat.#4344)。
其它復(fù)合板用Weidman384聚丙烯板(REMP)。
分析程序 (1)制備激酶分析緩沖液(KAB)50mM HEPES(HyClone)pH7，10mM MgCl2，1mM DTT，0.1mM Na3V2O4，和0.3mg/ml BSA。
(2)制備在KAB中的6H-MEK(150nM)。加入12μl/孔到分析板中。
(3)制備在KAB中的ATP(66μM)。
(4)在DMSO中，將化合物稀釋到2.4mM并且將任何陽(yáng)性對(duì)照稀釋到480μM。在DMSO中進(jìn)行10點(diǎn)3x稀釋。撤回2.5μl/孔的DMSO溶液，并且加入到(3)中的27.5μl/孔ATP溶液中。
(5)混合，然后將(4)中的6μl/孔的溶液加入到分析板中，對(duì)于在MEK磷酸化過程中的DMSO濃度為2.1％。
(6)制備在KAB中的b-Raf WT(100pM)。
(7)在柱1-2中，加入6μl/孔的KAB，并且在柱3-24中，加入6μl/孔的b-RafWT。
(8)于37℃溫育30min。
(9)制備在AB1中的兔(α-P-(Ser 217/221)-MEK-1/2 Ab(來自貯液的1200)50mM HEPES pH7，0.2mg/ml BSA，和43mM EDTA。
(10)為了停止反應(yīng)，將來自(9)的6μl/孔的溶液加入到分析板中，并且于37℃溫育30min。
(11)制備在AB2中的Eu-(α-兔IgG(9nM)和(α-6H-SureLight-APC(180nM)50mM HEPES pH7和0.2mg/ml BSA。
(12)將來自(11)的6μl/孔的溶液加入到分析板中。
(13)為了測(cè)定光譜干擾因子，按照步驟(1)至(10)制備兩個(gè)樣品。對(duì)于空白樣品，加入6μl/孔的AB2。對(duì)于干擾因子樣品，加入6μl/孔的Eu-抗兔IgG(9nM)。
(14)于室溫溫育1.5小時(shí)。
(15)在Envision上讀出于615nm和665nm的HTRF信號(hào)。在光譜干擾校正后，標(biāo)準(zhǔn)化HTRF信號(hào)。
用6H-MEK作為底物的b-RafV600E突變型HTRF分析(劑量響應(yīng)) 分析原則 分析利用6H-MEK作為底物。通過b-Raf V600E磷酸化，磷酸化的6H-MEK用兔抗-磷酸基-MEK1/2，Eu-標(biāo)記的抗兔和APC-標(biāo)記的抗-6H抗體檢測(cè)。
試劑和儀器 酶獲自Upstate的具有N-末端GST-標(biāo)記的含V600E突變的重組人b-Raf殘基416-端；(由在Sf21昆蟲細(xì)胞中的桿狀病毒表達(dá))，0.26mg/mL(7.49μM，假定67.3kD的分子量)Cat.#14-5M，Lot#25633AU，貯存于-80℃。
底物獲自C.Belunis(5/26/04)的WT全長(zhǎng)6H-MEK，4.94mg/mL(154.4μM，假定32kD的MW)，貯存于-15℃。
抗體兔(α-P-(Ser217/221)-MEK-1/2Ab(獲自Cell Signaling，Cat.#9121B，Lot14)Eu-(α-兔IgG(獲自Wallac，Cat.#AD0083，Lot 318663，710ug/mL，4.4μM)；(α-6H-SureLight-APC(獲自Martek，Cat.#AD0059H，LotE012AB01，3.03μM)。
讀數(shù)器PerkinElmer的Envision，用412反射鏡的HTRF讀數(shù)模式。
分析板基片全黑聚丙烯板(Cat.#4344)。
其它復(fù)合板用Weidman 384聚丙烯板(REMP)。
分析程序 (1)制備激酶分析緩沖液(KAB)50mM HEPES(HyClone)pH7，10mM MgCl2，1mM DTT，0.1mM Na3V2O4，和0.3mg/ml BSA。
(2)制備在KAB中的6H-MEK(150nM)。加入12μl/孔到分析板中。
(3)制備在KAB中的ATP(66μM)。
(4)在DMSO中，將化合物稀釋到2.4mM并且將陽(yáng)性對(duì)照稀釋到480μM。在DMSO中進(jìn)行10點(diǎn)3x稀釋。撤回2.5μl/孔的DMSO溶液，并且加入到(3)中的27.5μl/孔ATP溶液中。
(5)混合，然后將(4)中的6μl/孔的溶液加入到分析板中，對(duì)于在MEK磷酸化過程中的DMSO濃度為2.1％。
(6)制備在KAB中的b-Raf V600E(100pM)。
(7)在柱1-2中，加入6μl/孔的KAB，并且在柱3-24中，加入6μl/孔的b-Raf V600E。
(8)于37℃溫育30min。
(9)制備在AB1中的兔α-P-(Ser 217/221)-MEK-1/2Ab(來自貯液的1200)50mM HEPES pH7，0.2mg/ml BSA，和43mM EDTA。
(10)為了停止反應(yīng)，將來自(9)的6μl/孔的溶液加入到分析板中，并且于37℃溫育30min。
(11)制備在AB2中的Eu-α-兔IgG(9nM)和α-6H-SureLight-APC(180nM)50mM HEPES pH7和0.2mg/ml BSA。
(12)將來自(11)的6μl/孔的溶液加入到分析板中。
(13)為了測(cè)定光譜干擾因子，按照步驟(1)至(10)制備兩個(gè)樣品。對(duì)于空白樣品，加入6μl/孔的AB2。對(duì)于干擾因子樣品，加入6μl/孔的Eu-抗兔IgG(9nM)。
(14)于室溫溫育1.5小時(shí)。
(15)在Envision上讀出于615nm和665nm的HTRF信號(hào)。在光譜干擾校正后，標(biāo)準(zhǔn)化HTRF信號(hào)。
分析數(shù)據(jù) 表1激酶酶抑制分析(IC50)
權(quán)利要求
1.式I化合物
其中
R1選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，氰基，NR4R5，三氟甲基和NO2；
R2可以是選自下列基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺?；酋０?，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，氨基甲酸酯和脲；
R3選自氫，羥基，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5；
環(huán)B選自芳基和雜芳基；
環(huán)A是任選還被取代的
A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且環(huán)A是芳族的，
R4和R5選自氫，低級(jí)烷基或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，
X是O或NH，
及其藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式I化合物，
其中
R1選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，氰基，NR4R5，三氟甲基和NO2；
R2選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺?；酋０?，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，氨基甲?；被姿狨ズ碗?；
R3選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5；
環(huán)B選自芳基和雜芳基；
環(huán)A是
A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且環(huán)A是芳族的，
R4和R5選自氫，低級(jí)烷基或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，
X是O或NH，
及其藥用鹽。
3.權(quán)利要求1或2任何一項(xiàng)所述的化合物，其中R1是氫或低級(jí)烷基，其在5-取代的1-羥基環(huán)B的C2處，其中環(huán)B是苯基。
4.權(quán)利要求1或2任何一項(xiàng)所述的化合物，其中R1是氫或低級(jí)烷基，其在5-取代的3-羥基環(huán)B的C2處，其中環(huán)B是吡啶。
5.權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)所述的化合物，其中環(huán)A選自
和
其中
R2選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺酰基，磺酰胺，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，氨基甲酰基，氨基甲酸酯和脲，并且
環(huán)B選自芳基和雜芳基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其選自
4-氯-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；
4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；
4-氨基-3-[3-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，
4-氨基-3-{5-[4-(2-羥基-乙基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽，
4-氯-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，和
4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。
6.權(quán)利要求1的化合物，其選自
4-氨基-3-[2-甲基-5-(1-甲基-1H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{3-[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[3-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，和
4-氨基-3-{5-[1-(4-氯-芐基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸鹽。
7.權(quán)利要求1的化合物，其選自
4-氯-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-芐基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸，
4-氨基-3-{5-[5-(4-氯-苯基)-[1，3，4]噁二唑-2-基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，和
4-氯-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。
8.權(quán)利要求1的化合物，其選自
4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-苯氧基甲基]-噻吩并-[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺三氟乙酸鹽，
4-氯-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-{5-[4-(4-甲氧基-芐基)-5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺，
4-氯-3-[2-甲基-5-(甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2c]吡啶-7-羧酸乙酯，
4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，和
4-氨基-3-[2-甲基-5-(5-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3，2-c]吡啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺。
9.藥物組合物，其包含式I化合物，
其中
R1選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，氰基，NR4R5，三氟甲基和NO2；
R2選自氫，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，芳基或雜芳基取代的低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，低級(jí)烷氧基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，氰基，鹵素，甲基磺?；?，磺酰胺，三氟甲基，磺酰脲，酰胺，酯，
氨基甲?；被姿狨ズ碗?；
R3選自氫，羥基，低級(jí)烷基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和NR4R5；
環(huán)B選自芳基和雜芳基；
環(huán)A是
A獨(dú)立地選自C，N，O和S，并且環(huán)A是芳族的，
R4和R5選自氫，低級(jí)烷基或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，
X是O或NH，
或其藥用鹽，
以及藥用載體。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的式I化合物在制備對(duì)于治療癌癥，動(dòng)脈粥樣硬化癥，和/或再狹窄有用的藥物中的應(yīng)用。
11.如上所述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物，其中R1，R2，R3，X，環(huán)A和環(huán)B如本文中所述。該化合物顯示抗癌性。
文檔編號(hào)C07D495/04GK101479278SQ200780023914
公開日2009年7月8日 申請(qǐng)日期2007年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月29日
發(fā)明者奕 陳, 建春·托馬斯·陸, 帕梅拉·勞倫·羅斯曼, 蘇松塞 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司