專利名稱：作為促淀粉樣變蛋白成像劑的同位素標記的苯并噻唑化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明一般而言涉及同位素標記的苯并噻唑化合物領域，所述苯并噻唑化合物是促淀粉樣變蛋白(amyloidogenic protein)的底物，所述促淀粉樣變蛋白例如Aβ1-42(一種淀粉樣蛋白)，其在腦中的沉積物與阿爾茨海默病相關。
背景技術：
I.腦淀粉樣變性 阿爾茨海默病(“AD”)是一種以記憶力喪失和其它認知缺陷為特征的神經(jīng)變性疾病(McKhann等，Neurology 34939(1984))。它在美國是癡呆的最常見原因。AD可侵襲年輕至40-50歲年齡的人，然而，由于不通過危險的腦組織活檢就難以確定此疾病的存在，因此發(fā)作時間未知。AD的流行性隨年齡而增加，估計至85-90歲受影響的人群高達40-50％(Evans等，JAMA 2622551(1989)；Katzman，Neurology 4313(1993))。
研究表明腦中的淀粉樣蛋白沉積是阿爾茨海默病(AD)的發(fā)病機理中早期的致病事件。淀粉樣蛋白沉積的發(fā)展導致在腦中涉及學習和記憶的區(qū)域形成神經(jīng)炎斑和神經(jīng)原纖維纏結。典型的阿爾茨海默病神經(jīng)炎斑包括圍繞淀粉樣物質核心的營養(yǎng)不良神經(jīng)突。淀粉樣物質核心的主要成分是稱為β-淀粉樣蛋白(amyloid-beta，Aβ)的蛋白。
實際上，AD是通過檢查腦組織(通常是尸檢)才被確診的(Khachaturian，Arch.Neurol.421097(1985)；McKhann等，Neurology34939(1984))。在神經(jīng)病理學上，該疾病是以神經(jīng)炎斑(NP)、神經(jīng)原纖維纏結(NFT)和神經(jīng)元缺失并伴有多種其它發(fā)現(xiàn)的存在為特征的(Mann，Mech.Ageing Dev.31213(1985))。阿爾茨海默病死亡者的腦組織尸檢切片顯示出淀粉樣蛋白以神經(jīng)炎斑的蛋白樣細胞外核心的形式存在，這是AD所特有的。
這些神經(jīng)炎斑的淀粉樣蛋白核心包含稱為β-淀粉樣蛋白(Aβ)的蛋白，所述β-淀粉樣蛋白以主要為β-折疊片的構型排布(Mori等，J.Biol.Chem.26717082(1992)；Kirschner等，PNAS 83503(1986))。神經(jīng)炎斑是此疾病早期和不變的方面(Mann等，J.Neurol. Sci.89169；Mann，Mech Ageing Dev.31213(1985)；Terry等，J.Neuropathol Exp.Neurol 46262(1987))。
Aβ的最初沉積可能在臨床癥狀變得明顯之前很久就出現(xiàn)了。目前推薦的用于診斷AD的“最小顯微標準”基于在腦中發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)炎斑的數(shù)目(Khachaturian，Arch.Neurol，supra(1985))。然而，對于神經(jīng)炎斑計數(shù)的評價必須推遲到死后。
含有淀粉樣蛋白的神經(jīng)炎斑是AD和唐氏綜合征以及載脂蛋白E4等位基因純合的人(其極易得AD)在腦的選擇性區(qū)域的顯著特征(Corder等，Science 261921(1993)；Divry，P.，J Neurol.Psych.27643-657(1927)；Wisniewski等，in Zimmerman，H.M.(編)PROGRESS INNEUROPATHOLOGY(Grune和Stratton，N.Y.1973)第1-26頁)。
通過使用硫黃素S或剛果紅將腦切片染色很容易顯示腦淀粉樣蛋白(Puchtler等，J.Histochem.Cytochem.1035(1962))。剛果紅染色的淀粉樣蛋白的特征在于二向色性的外觀，表現(xiàn)為黃-綠偏光色。所述二向色性結合是淀粉樣蛋白β折疊片狀結構的結果(Glenner，G.N.Eng.J.Med.3021283(1980))。關于淀粉樣蛋白的生物化學和組織化學的詳細討論可見于Glenner，N. Eng.J.Med.，3021333(1980)。
迄今為止，對于AD的診斷大多通過臨床標準評價、腦組織活檢和死后尸檢研究而獲得。開發(fā)用于體內診斷阿爾茨海默病的方法的研究努力包括(1)基因檢測，(2)免疫測定方法，和(3)成像技術。
Aβ代謝異常對于AD的發(fā)展而言必需且足夠的證據(jù)是基于在幾個常染色體顯性形式AD的罕見家族中Aβ前體蛋白的點突變的發(fā)現(xiàn)(Hardy，Nature Genetics 1233(1992)；Hardy等，Science 256184(1992))。這些突變在N末端和C末端切割點附近發(fā)生，所述切割點對于Aβ由其前體蛋白生成來說是必需的(St.George-Hyslop等，Science 235885(1987)；Kang等，Nature 325733(1987)；Potter WO 92/17152)。然而，對大量AD家族的基因分析已經(jīng)證實了AD在遺傳上是異質的(St.George-Hyslop等，Nature 347194(1990))。與21號染色體標記的連鎖僅在具有早發(fā)型AD的一些家族中顯示出來，而在具有晚發(fā)型AD的家族中未顯示。更近些時候，在14號染色體上的基因(預計其產(chǎn)物包含多個跨膜域并組裝完整的膜蛋白)已由Sherrington等鑒別出來(Sherrington等，Nature 375754-760(1995))。該基因可導致最多70％的常染色體顯性的早發(fā)型AD。初步數(shù)據(jù)表明此14號染色體突變導致Aβ產(chǎn)生的增加(Scheuner等，Soc.Neurosci.Abstr.211500(1995))。在具有早發(fā)型AD的Volga German家族中，已經(jīng)在1號染色體上鑒定了非常相似的基因的突變(Levy-Lahad等，Science 269973-977(1995))。
對于載脂蛋白E基因型的篩選已表明其可在AD的診斷中作為輔助手段(Scott，Nature 366502(1993)；Roses，Ann.Neurol.386-14(1995))。然而，此項技術出現(xiàn)了困難，因為載脂蛋白E4等位基因僅僅是AD的一個風險因子，而不是疾病標記物。其在很多AD患者中缺失，并且在很多不癡呆的老年人中存在(Bird，Ann.Neurol.382-4(1995))。
已經(jīng)開發(fā)了用于檢測AD患者中神經(jīng)化學標記物存在的免疫測定方法，并用于檢測腦脊液中與AD相關的淀粉樣蛋白(Warner，Anal.Chem.591203A(1987)；Potter的國際專利申請公開92/17152；Glenner等的美國專利4,666,829)。這些診斷AD的方法還未被證明可檢測所有患者中的AD(尤其是在該疾病的早期階段)，并且是相對侵入性的，需要脊椎穿刺。而且，還進行了開發(fā)作為用于Aβ成像探針的單克隆抗體的嘗試(Majocha等，J.Nucl Med.，332184(1992)；Majocha等，WO89/06242；以及Majocha等，美國專利5,231,000)?？贵w探針的主要缺點是難于使這些大分子穿過血腦屏障。使用抗體進行AD的體內診斷，將需要血腦屏障方面的顯著異常以進入腦內。關于在AD中可靠地存在血腦屏障方面的異常這一點，還沒有令人信服的起作用的證據(jù)(Kalaria，Cerebrovascular&Brain Metabolism Reviews 4226(1992))。
放射性標記的Aβ肽已被用于標記AD腦切片中擴散型、緊密型和神經(jīng)炎型的斑塊(參見Maggio等，WO 93/04194)。然而，這些肽同樣具有抗體的所有缺點。具體地說，肽類通常不是以成像所必需的量穿過血腦屏障，因為這些探針與擴散性斑塊反應，它們對于AD而言可能并非是特異性的。
神經(jīng)炎斑和神經(jīng)纖維纏結是AD的兩個最有特征性的病理學標志(Klunk和Abraham，Psychiatric Development，6121-152(1988))。斑塊最早在新皮質中出現(xiàn)，在那里它們相對均勻地分布(Thai等，Neurology581791-1800(2002))。神經(jīng)纖維纏結最先出現(xiàn)在邊緣區(qū)域(比如跨內嗅區(qū)皮質(transentorhinal cortex))并以可預見的局部解剖模式向新皮質發(fā)展(Braak和Braak，Acta Neuropathologica 82239-259(1991))。Arnold等描繪了AD患者腦中的NFT和神經(jīng)炎斑的分布(Arnold等，Cereb.Cortex 1103-116(1991))。與NFT相比，神經(jīng)炎斑一般來說更均勻地分布于皮質各處，只是在邊緣的圓周異型皮質(periallocortex)和異型皮質(NFT密度最高的區(qū)域)內神經(jīng)炎斑顯著較少。通過硫黃素S染色，顳葉和枕葉具有最高的神經(jīng)炎斑密度，邊緣葉和額葉具有最低的神經(jīng)炎斑密度，頂葉具有中間的神經(jīng)炎斑密度(Arriagada等，Neurology421681-1688(1992))。Arriagada等研究了假定不癡呆的老年個體腦中AD型病理變化的局部分布。他們的研究表明，大多數(shù)年齡超過55歲的個體具有至少幾個NFT和斑塊。免疫組織化學限定的SP亞型具有與眾不同的Aβ-免疫反應性斑塊分布模式，所述Aβ-免疫活性斑塊在新皮質區(qū)的存在比邊緣區(qū)多得多，Alz-50免疫反應性斑塊很少發(fā)生并限制在包含Alz-50陽性神經(jīng)元和NFT的區(qū)域內。這些模式表明在老化和AD中導致NFT和SP的病理過程的共同性. 關于斑塊和纏結是否為發(fā)現(xiàn)于AD中的神經(jīng)變性過程的副產(chǎn)物或者它們是否為神經(jīng)元細胞死亡的原因還存在爭論(Ross，Current Opinionin Neurobiol.96644-650(1996)；Terry，J of Neuropath.& Exp.Neurol.551023-1025(1996)；Terry，J Neural Transmission-Suppl.53141-145(1998))。有證據(jù)清楚表明，新皮質和海馬突觸的缺失與發(fā)病前的認知狀況密切相關。一些研究者提出由微管相關蛋白τ的過度磷酸化引起的微管結構和功能的紊亂特別是在突觸缺失，一般是在AD中起關鍵的病因學作用(Terry，J.of Neuropath.& Exp.Neurol.551023-1025(1996)；Terry，J of Neural Transmission-Suppl.53141-145(1998))。已經(jīng)提出氧化損傷和膜破壞在AD中發(fā)揮重要作用(Perry，F(xiàn)ree Radical Biology&Medicine28831-834(2000)；Pettegrew等，Annals of the New York Academy ofSciences 826282-306(1997))。血管因素(包括敏感的、長期的腦灌注不足)也與AD的發(fā)病機制相關(De la Torre，Annals of the New YorkAcademy of Sciences 903424-436(2000)；Di Iorio等，Aging(Milano)11345-352(1999))。盡管全部這些因素均可能在AD的發(fā)病機制中起到一些作用，但越來越多的證據(jù)指向β-淀粉樣蛋白(Aβ)肽的過程，所述β-淀粉樣蛋白肽是一種聚集成原纖維狀的β折疊片狀結構的4 kD肽(Glenner和Wong，Biochemical&Biophysical Research Communications120885-890(1984))。已經(jīng)提出由于以下幾個原因Aβ在AD的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用1)Aβ沉積物是唐氏綜合征中AD的最早的神經(jīng)病理標記，可比NFT形成早幾十年(Mann等，Neurodegeneration 1201-215(1992)；Naslund等，JAMA 2831571-1577(2000))；2)β-淀粉樣變對于AD和密切相關的疾病而言是相對特異性的(Selkoe，Trends in Neurosciences16403-409(1993))；3)Aβ對培養(yǎng)的神經(jīng)元而言是有毒的(YanknerNeurobiol. Aging 13615-616(1992)；Mattson等，J.Neuroscience12376-389(1992)；Shearman等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 911470-1474(1994))，這種毒性似乎依賴于β-折疊二級結構和向至少是低聚體的聚集(Lambert等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 956448-6453(1989)；Pike等，J.Neuroscience 131676-1687(1993)；Simmons等，Molecular Pharmacology45373-379(1994))。雖然Aβ確定以單體、低聚體和纖維狀/斑塊部分平衡分布而存在，但Aβ的低聚體形式被強烈地表示為關鍵的神經(jīng)毒性成分(Selkoe，Alzheimer disease，R.D.Terry等編，293-310頁，LippincottWilliams and Wilkins，Philadelphia(1999)；Selkoe，Science 298，789-91(2002))。對低聚體Aβ的毒性作用的識別已形成了對AD“淀粉樣蛋白級聯(lián)假說”的幾種對立學說折衷的基礎(Terry，Ann.Neurol.49684(2001))。也許Aβ在AD發(fā)病機制中的作用的最強有力的證據(jù)來自淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)基因突變的發(fā)現(xiàn)，所述基因導致一些形式的早發(fā)型家族AD(Goate等，Nature 349704-706(1991))。另外，所有家族形式的常染色體顯性的AD均具有升高水平的更迅速聚集的Aβ的42個氨基酸形式(Younkin Rinsho Shinkeigaku-Clinical Neurology 371099(1997))。相比之下，未顯示τ蛋白的突變引起AD。相反，τ突變(染色體17)與伴有帕金森病的額顳葉癡呆癥相關聯(lián)(Goedert等，Neuron21955-958(1998))。最近的證據(jù)已經(jīng)表明，腦中Aβ水平與AD中認知下降之間有良好的相關性，并且淀粉樣蛋白的沉積似乎在AD的發(fā)病機制中是非常早期的、也許是最先的事件，其早于任何認知損傷(Naslund等，JAMA 2831571-1577(2000))。淀粉樣蛋白沉積物的存在可調節(jié)多種生物化學途徑，所述生物化學途徑導致其它蛋白的沉積、星形膠質細胞和小膠質細胞的活化、以及最終的神經(jīng)元細胞死亡和隨后的認知功能紊亂。
II.局限性和全身性的淀粉樣變 淀粉樣變是一種緩慢發(fā)展的病況，其可導致明顯的病態(tài)和死亡。多種疾病過程落入“淀粉樣變”類目的范圍內，其特征在于多種不溶性纖維狀蛋白(通常稱為“淀粉樣蛋白”)以足以損傷正常功能的量在一個或更多個器官中的細胞外組織沉積。
淀粉樣蛋白沉積物位于細胞外并且不被機體所代謝或清除。淀粉樣蛋白可通過與碘的淀粉樣染色反應而大體辨別；因此命名為淀粉樣蛋白。顯微鏡下，淀粉樣蛋白通過其細胞外分布、通過其在使用剛果紅染色時的著色光學性質、以及通過其蛋白原纖維結構而區(qū)分。因此，在光學顯微鏡下，淀粉樣蛋白是一種均質的、高度折光性的物質，其對剛果紅染料具有親和力，無論是在固定組織中還是在體內。在電子顯微鏡下，淀粉樣蛋白由100A°(10 nm)的線型非支化的原纖維組成；在x射線衍射下，其具有交叉的β圖譜。
與淀粉樣變相關的疾病均以積聚的淀粉樣蛋白沉積物為特征。淀粉樣蛋白沉積物的特征在于存在一種或更多種促淀粉樣變蛋白，所述促淀粉樣變蛋白源自具有異常結構或在血清中異常增加的前體蛋白。
淀粉樣蛋白形成的原因及其在組織中的沉積是未知的。在不同生物化學類型的淀粉樣變中，病因機理可能不同。例如，在繼發(fā)性淀粉樣變中，可能存在前體蛋白(急性期反應物血清淀粉樣蛋白A)的代謝缺陷，然而，在遺傳性淀粉樣變中似乎存在遺傳性變體蛋白。在原發(fā)性淀粉樣變中，骨髓細胞的單克隆群產(chǎn)生完整輕鏈的片段，所述輕鏈片段可以被異常處理而形成淀粉樣蛋白。
已經(jīng)在生物化學方面定義了三種主要類型的淀粉樣蛋白和幾種較不常見的形式。第一種類型具有和免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)部分同源的N末端序列，被稱為AL，產(chǎn)生于原發(fā)性淀粉樣變和與多發(fā)性骨髓瘤相關的淀粉樣變中。第二種類型具有稱為AA蛋白的非免疫球蛋白的獨特的N末端序列，產(chǎn)生于繼發(fā)性淀粉樣變的患者中。第三種類型與家族性淀粉樣多神經(jīng)病相關，通常為具有單個氨基酸替換的轉甲狀腺素蛋白(transthyretin)(前白蛋白)分子。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其它的遺傳性淀粉樣蛋白是由某些家族的突變體凝溶膠蛋白、幾種其它家族的突變體載脂蛋白A-I、和其它遺傳性腦動脈淀粉樣蛋白的突變體蛋白構成的。在與長期血液透析相關的淀粉樣蛋白中，2-微球蛋白已構成了淀粉樣蛋白。與皮膚老化和內分泌器官相關的淀粉樣蛋白可能代表其它生物化學類型的淀粉樣變。發(fā)現(xiàn)于阿爾茨海默病的組織病理學損傷中的淀粉樣蛋白由蛋白質構成。與各種類型的淀粉樣變相關的化學分析已帶來了更細化的分類。一種獨特的蛋白——稱為AP(或血清AP)的五聚素(pentraxin)——普遍與所有類型的淀粉樣蛋白相關，并形成診斷檢測的基礎。
目前公認三種主要的全身性臨床類型。淀粉樣變被分類為原發(fā)性或自發(fā)性的(AL型)(當沒有相關疾病時)，和繼發(fā)性、獲得性或反應性的(AA型)(當與慢性疾病或傳染性疾病(結核病、支氣管擴張、骨髓炎、麻風)或炎性疾病(類風濕性關節(jié)炎、肉芽腫性回腸炎)相關時)。淀粉樣蛋白還與多發(fā)性骨髓瘤(AL)、霍奇金病(AA)、其它腫瘤、以及家族性地中海熱(AA)相關。淀粉樣變可伴有老化。第三種主要類型出現(xiàn)于不與其它疾病相關的家族性類型中，常常具有神經(jīng)病、腎病和心臟病的與眾不同的類型。
在原發(fā)性(AL)淀粉樣變中，可能涉及心、肺、皮膚、舌、甲狀腺和腸道。局限性的淀粉樣蛋白“腫瘤”可能見于呼吸道和其它部位。常常涉及實質器官(肝、脾、腎)和血管系統(tǒng)，特別是心臟。
繼發(fā)性(AA)淀粉樣變顯示出特別容易在脾、肝、腎、腎上腺和淋巴結發(fā)生。然而，沒有器官系統(tǒng)不受影響，可廣泛累及血管，雖然臨床上對心臟的顯著累及并不常見。肝和脾常常擴大、變硬和如橡膠狀。腎通常擴大。脾的部分具有大的、半透明的蠟狀區(qū)域，其中正常的馬爾皮基氏體被灰白的淀粉樣蛋白所取代，形成了西米脾。
遺傳性淀粉樣變的特征在于外周感覺和運動神經(jīng)病(常為自主性神經(jīng)病)、以及心血管和腎的淀粉樣蛋白。腕管綜合征和玻璃體異常可能發(fā)生。
與某些惡性腫瘤(例如多發(fā)性骨髓瘤)相關的淀粉樣蛋白具有與自發(fā)性(AL)淀粉樣蛋白相同的分布；與其它惡性腫瘤(例如甲狀腺髓樣癌)相關的淀粉樣蛋白則可能僅在與所述腫瘤或轉移相關的局部發(fā)生。淀粉樣蛋白常常見于患有成人發(fā)作型糖尿病的個體的胰腺中。
雖然可以基于特定的臨床癥狀和體征懷疑淀粉樣變的發(fā)生，但僅可通過活組織檢查對其確診。目前，腹部皮下脂肪墊穿刺抽吸和直腸粘膜的活組織檢查是最好的篩查辦法。其它可用的活組織檢查部位是齒齦、皮膚、神經(jīng)、腎和肝。組織切片應該使用剛果紅染料染色并通過偏光顯微鏡觀察淀粉樣蛋白所特有的綠色雙折射。同位素標記的血清AP已被用于閃爍掃描試驗以對淀粉樣變進行確診。需要開發(fā)更好的診斷方法以提供早期診斷，由此使有效治療成為可能。
在抑制淀粉樣蛋白沉積物和糖尿病治療之間的關聯(lián)方面存在一些思考，參見例如WO 02/16333。對于明確測量胰腺中淀粉樣蛋白的水平而言，用于診斷糖尿病的胰腺成像是一種合適的方法，其相關性似乎指示糖尿病的診斷。
III.替代指標(surrogate marker) AD被認為影響著約4百萬美國人和可能全世界2-3千萬的人。AD在發(fā)達國家被公認為一個主要的公共健康問題。隨著正在進行中的對AD分子基礎的闡明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了幾個治療靶點。例如，已經(jīng)批準了4種膽堿酯酶抑制劑用于AD患者的全身性治療-他克林(Cognex，Warner-Lambert，Morris Plains，New Jersey)；多奈哌齊(Aricept，Eisai，Inc.，Teaneck，New Jersey，和Pfizer，Inc.，New York，New York)；卡巴拉汀(rivagstigmine)(Exelon，Novartis，Basel，Switzerland)；和加蘭他敏(Reniinyl，Janssen，Titusville，New Jersey)。目前正在開發(fā)的潛在的新AD治療劑涉及免疫療法、分泌酶(secretase)抑制劑或抗炎藥。然而，迄今為止，還沒有可用的藥物已被證實改變認知下降的過程。
通過以下引自Hock等，2003，Neuron，38547-554的針對使用免疫療法作為抗淀粉樣蛋白療法的話來舉例說明開發(fā)抗淀粉樣蛋白治療的主要障礙“我們不知道在我們研究的患者中的腦Aβ-淀粉樣蛋白負荷是否降低；將需要體內成像技術來回答此問題”。在治療前和隨后跟蹤治療效果時量化淀粉樣蛋白負荷的能力是有效開發(fā)此類藥物的關鍵。
IV.診斷淀粉樣變的前驅形式 與阿爾茨海默病(AD)密切相關的病況的特征在于單獨的記憶障礙或者數(shù)個認知區(qū)域的損傷，但未足夠嚴重到符合阿爾茨海默病診斷標準的程度。此病況稱為輕度認知障礙(MCI)并可代表AD的前驅期。輕度認知障礙定義為從正常認知狀況到癡呆的中間狀態(tài)或過渡狀態(tài)。具有輕度認知障礙的患者通常具有超出預期年齡和教育的記憶障礙，但還不是癡呆。
存在一些被診斷為輕度認知障礙的患者將發(fā)展成AD的指征。還存在輕度認知障礙可能代表復雜的異常狀況(heterogeneous condition)以及一些患有輕度認知障礙的患者將不會發(fā)展成AD或其它癡呆性病癥的指征。
在區(qū)分癡呆與AD的界限方面引起了廣泛的注意。大多數(shù)的這種注意致力于正常老化和癡呆(或者更具體地說是阿爾茨海默病(AD))的界限或過渡狀態(tài)。幾項研究的綜述指出，這些個體發(fā)展成AD的風險提高，從每年1％增加到25％。這些比例的變化可能反映出診斷標準、測量儀器和小樣本量方面的不同。參見Dawe等，Int′t J.Geriatr.Psychiatry 7473(1992)。
診斷患有MCI的患者也逐漸受到了治療試驗的關注。阿爾茨海默病合作研究組織是一個對老化進行研究的阿爾茨海默病研究小組的合作團體，其正著手進行旨在改變MCI患者到AD發(fā)展進程的治療劑的多中心試驗。參見Grundman等，Neurology，1996，A403。
可能會出現(xiàn)關于MCI診斷標準的問題。一些研究者相信，實際上所有這些患有輕度疾病的患者都在神經(jīng)病理學上患有AD，因此這可能不是有用的區(qū)別。參見Morris等，Neurology 41469(1991)。其他人指出雖然這些患者中有很多發(fā)展成AD，但并非所有都是這樣的，因此，這種區(qū)分是一個重要的方面。參見Grundman，見上文；Petersen等，JAMA2731274(1995)；Petersen等，Ann N YAcad.Sci. 80258(1996)。
V.促淀粉樣變蛋白的底物 已推測了促淀粉樣變蛋白的可能底物，從染料物質(如剛果紅和金黃胺G衍生物(參見例如美國專利6,168,776)到出于使不溶性的Aβ成像目的已被標記的序列特異性肽。這些肽包括標記的Aβ肽本身、腐胺-釓-Aβ肽、放射性標記的Aβ、[111In]-Aβ、[125I]-Aβ、γ射線放射性標記的Aβ、Aβ-DTPA衍生物、放射性標記的腐胺、基于KVLFF的配體和其衍生物(參見國際公開WO93/04194和美國專利6,331,440)。
硫黃素T是1959年由Vassar和Culling(Arch.Pathol.68487(1959))首次作為選擇性淀粉樣蛋白染料描述的堿染料。Schwartz等(Zbl.Path.106320(1964))于1964年首次證實了硫黃素S(一種酸性染料)作為淀粉樣蛋白染料的用途。硫黃素T和硫黃素S的性質均被詳細研究過(Kelenyi J.Histochem.Cytochem.15172(1967)；Burns等J.Path.Bact.94337(1967)；Guntern等Experientia 488(1992)；LeVine Meth.Enzymol.309274(1999))。硫黃素S普遍用于AD腦中淀粉樣蛋白沉積的死后檢查研究，其已表明是用于證實老年斑塊的最靈敏的技術之一(Vallet等，Acta Neuropathol.83170(1992))。硫黃素T常被用作研究可溶性淀粉樣蛋白進入β片原纖維的聚集的試劑(LeVine Prot.Sci.2404(1993))。已提出與硫黃素T相關的季銨衍生物用作淀粉樣蛋白成像劑，但還沒提出這些試劑被腦攝取的證據(jù)(Caprathe等，美國專利6,001,331)。
因此，需要同位素標記的苯并噻唑類物質，其能夠穿透血腦屏障并與用于在診斷阿爾茨海默病中成像的不溶性淀粉樣蛋白沉積物相結合。
發(fā)明內容
本發(fā)明通過在一個實施方案中提供結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽而滿足此需要和其它需要
在式(I)中，Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X，其中X是F、Cl、Br或I。變量n是選自1～5的整數(shù)。
R’是H或低級烷基。
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph。如上所提及的，X是F、Cl、Br或I。Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，其中每個R11獨立地為H或C1-C5烷基。
此外，取代基Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H。
在另一個實施方案中，提供了一種藥物組合物，其包含有效量的如上所述的結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物和可藥用載體。
另一個實施方案是一種用于體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法。所述方法包括(i)給哺乳動物施用有效量的式(I)的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物會結合所述哺乳動物內的任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和(ii)檢測該化合物與在所述哺乳動物體內的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的藥物中的用途。
又一個實施方案是一種用于體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法。所述方法包括(i)使機體組織接觸有效量的式(I)的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物將會結合所述組織內的任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和(ii)檢測所述化合物與所述組織內的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的藥物中的用途。
另一個實施方案是一種用于區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法。所述方法包括(i)獲取來自正常哺乳動物和疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的(a)小腦和(b)同一腦的另一個區(qū)域的組織； (ii)使所述組織與結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物接觸； (iii)量化結合至該化合物的淀粉樣蛋白； (iv)計算(a)在腦中除小腦以外的其它區(qū)域內淀粉樣蛋白的量與(b)小腦中淀粉樣蛋白的量的比例；以及 (v)將正常哺乳動物的比例與疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的比例進行比較。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的藥物中的用途。
另一個實施方案是在人或動物活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的方法。所述方法包括步驟(a)使用式(I)的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽的溶液孵育福爾馬林固定的或新鮮冷凍的組織以形成被標記的沉積物，和(b)檢測所述被標記的沉積物。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于在人或動物活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于在人或動物活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的藥物中的用途。
在另一個實施方案中，提供了一種在活檢或尸檢組織中量化淀粉樣蛋白的方法。所述方法包括以下步驟 a)使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽的放射性標記衍生物與活檢組織或尸檢組織的勻漿一起孵育，其中所述化合物的至少一個取代基被選自125I、3H和含碳取代基(其中至少一個碳是14C)的放射性標記物所標記； b)將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記的衍生物與未與組織結合的式(I)化合物的放射性標記的衍生物分離， c)量化與組織結合的式(I)化合物的放射性標記的衍生物，以及 d)通過與標準物比較，將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記的衍生物的單位轉換為每100 mg組織中淀粉樣蛋白的微克數(shù)的單位。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物在活檢或尸檢組織中量化淀粉樣蛋白的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于在活檢或尸檢組織中量化淀粉樣蛋白的藥物中的用途。
在另一個實施方案中，提供了一種使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的方法。所述方法包括在體外結合或染色試驗中使淀粉樣蛋白斑塊與低于約10nM的濃度的式(I)化合物接觸。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于使所述化合物與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于使所述化合物與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的藥物中的用途。
在另一個實施方案中，提供了一種使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽在體內與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的方法。所述方法包括施用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，從而使在體內所施用化合物的血液濃度保持低于約10nM。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于使所述化合物在體內與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于使所述化合物在體內與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結(所述腦組織中包含此二者)結合的藥物中的用途。
另一個實施方案是用于檢測對象中至少一種淀粉樣蛋白沉積物的體內或體外方法，所述淀粉樣蛋白沉積物包含至少一種促淀粉樣變蛋白。所述方法包括以下步驟 (a)給患有與淀粉樣變相關的疾病的患者施用可檢測量的藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體，以及 (b)檢測所述化合物與包含至少一種促淀粉樣變蛋白的淀粉樣蛋白沉積物的結合。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于檢測對象中至少一種淀粉樣蛋白沉積物的用途，所述淀粉樣蛋白沉積物包含至少一種促淀粉樣變蛋白。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于檢測對象中至少一種淀粉樣蛋白沉積物的藥物中的用途，所述淀粉樣蛋白沉積物包含至少一種促淀粉樣變蛋白。
在另一個實施方案中，提供了一種鑒別患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期的方法，包括 (a)給表現(xiàn)有臨床癡呆征兆或輕度認知障礙臨床征兆的患者施用結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽；然后 (b)對所述患者成像以獲取數(shù)據(jù)，以及 (c)參考標準化水平，分析所述數(shù)據(jù)以確定所述患者體內的淀粉樣蛋白水平，從而鑒別所述患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于鑒別患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于鑒別患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期的藥物中的用途。
在另一個實施方案中，提供了一種確定淀粉樣變治療療效的方法。所述方法包括 (a)給有此需要的患者施用有效量的結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽； (b)對所述患者成像；然后 (c)給所述有此需要的患者施用至少一種抗淀粉樣蛋白劑； (d)隨后給所述有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物； (e)對所述患者成像；以及 (f)將采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療前所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平與采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療后所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平進行比較。
另一個任選地與本文中所述的任意其它實施方案結合的實施方案是式(I)化合物用于確定在淀粉樣變治療中的療效的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)化合物在制備用于確定淀粉樣變治療療效的藥物中的用途。
具體實施例方式 本發(fā)明探索了同位素標記的苯并噻唑衍生物在體內穿透血腦屏障并結合促淀粉樣變蛋白的能力。
這種結合的一個實例是苯并噻唑化合物能夠與在神經(jīng)炎(但未擴散)斑塊中沉積的Aβ結合、與在腦血管淀粉樣蛋白中沉積的Aβ結合以及與由在NFT中沉積的蛋白所構成的淀粉樣蛋白結合。
特異性結合Aβ合成肽的表征親和力、動力學、最大結合 如前所述，使用在磷酸鹽緩沖鹽水(pH 7.4)中的2-(4’-[3H]甲氨基-苯基)-苯并噻唑([3H]BTA-1)和合成Aβ(l-40)分析苯并噻唑衍生物結合的特征(Klunk等，Life Sci.691471(2001)；Mathis等，Bioorg.Med.Chem.Lett.12295(2002))。
Aβ(l-40)的氨基酸序列如下 定義 “烷基”意指飽和的直鏈或支鏈烴基。實例包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、正戊基和正己基。
“烯基”意指包含至少一個碳碳雙鍵的不飽和的直鏈或支鏈烴基。實例包括但不限于乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、叔丁烯基、正戊烯基和正己烯基。
“炔基”意指包含至少一個碳碳叁鍵的不飽和的直鏈或支鏈烴基。實例包括但不限于乙炔基、丙炔基、異丙炔基、丁炔基、異丁炔基、叔丁炔基、戊炔基和己炔基。
“烷氧基”意指通過氧鍵連接的烷基。
“低級”在與烷基、烯基、炔基或烷氧基一起使用時意指C1-C8部分。
“鹵素”意指氟、氯、溴或碘基團。
“放射性鹵素”意指放射性的鹵素，即放射性氟、放射性氯、放射性溴或放射性碘。
“有效量”意指為產(chǎn)生所希望的效果而需要的量?！坝行Я俊钡膶嵗軌蛟隗w內或體外對一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物進行檢測和成像的量，其導致供藥用的可接受毒性和生物利用度水平和/或防止細胞降解和與原纖維形成相關的毒性。
“可藥用載體”意指藥學上可接受的材料、組合物或載體，比如液體或固體的填充劑、稀釋劑、賦形劑或溶劑包封材料，其參與將對象化合物從一個器官或機體的一部分攜帶或運送到另一個器官或機體的另一部分。每種載體在與制劑其它成分相容以及適用于患者的意義上來說是“可接受的”?？捎米骺伤幱幂d體的材料的實例包括但不限于(1)糖類，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，比如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；(3)纖維素及其衍生物，比如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(4)粉末化黃耆膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，比如可可脂和栓劑蠟；(9)油類，比如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；(10)二醇類，比如丙二醇；(11)多元醇類，比如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯類，比如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，比如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)pH緩沖溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；以及(22)在藥物制劑中使用的其它無毒的相容性物質，例如在REMINGTON’S PHARMACEUTICAL SCIENCES，15th ed.(MackPublishing Co.，1975)第1405-1412頁和1461-1487頁，以及THENATIONAL FORMULARY XIV，14th ed.(American PharmaceuticalAssociation，1975)中提到的。
“可藥用鹽”意指本發(fā)明化合物的酸或堿的鹽，所述鹽具有所期望的藥理活性，其既不是生物學上所不希望的也不是其它方面所不希望的。所述鹽可由酸形成，包括但不限于乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽(digluconate)、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽(glucoheptanoate)、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽(hemisulfate)、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。堿鹽的實例包括但不限于銨鹽、堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽、與有機堿成的鹽比如二環(huán)己基胺鹽、N-甲基-D-葡糖胺、以及與氨基酸(比如精氨酸和賴氨酸)成的鹽。在一些實施方案中，可使用包括以下的試劑將含堿性氮的基團季銨化低級烷基鹵化物比如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯比如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；長鏈鹵化物比如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；以及芳烷基鹵化物比如苯乙基溴化物。
“前藥”意指本發(fā)明化合物的衍生物，其在表現(xiàn)出其藥理作用之前經(jīng)歷生物轉化(比如代謝)。配制前藥的目的在于改善化學穩(wěn)定性、改善患者接受性和順應性、改善生物利用度、延長作用持續(xù)時間、提高器官選擇性、改善制劑(例如提高水溶性)、和/或減少副作用(例如毒性)。由本發(fā)明化合物使用常規(guī)方法(比如那些在BURGER′S MEDICINALCHEMISTRY AND DRUG CHEMISTRY，5th ed.，Vol.1(1995)，第172-178頁和第949-982頁中描述的方法)可容易地制備前藥。
本文中所用的術語“胃腸外”包括皮下、靜脈內、動脈內、肌內、腹膜內、鞘內、心室內、胸骨內、顱內和骨內注射以及輸注技術。
“動物”意指具有感覺和自主運動能力的活的有機體，為生存而需要氧和有機食物。實例包括但不限于人類、馬科、豬科、牛科、鼠科、狗科和貓科物種中的成員。在人的情況下，“動物”也可以稱為“患者”。
“哺乳動物”意指溫血的脊椎動物。
“對象”是哺乳動物，例如人。一個具體的實例是疑似患有癡呆的人。
“治療”意指 (i)預防動物的疾病、病癥或病況的發(fā)生，所述動物可能易患所述疾病、病癥和/或病況但還沒有被診斷為已患上這些疾病、病癥和/或病況； (ii)抑制疾病、病癥或病況，即阻止其發(fā)展；和/或 (iii)緩解疾病、病癥或病況，即引起疾病、病癥和/或病況的減退。
術語“療法”包括治療疾病和/或預防疾病。
術語“治療”不一定意味著完全治愈。對任何不想要的癥狀或疾病的任何病理作用的任何程度的緩解或者疾病進程的延緩都可以認為是治療。而且，治療可以包括使患者的健康狀況或外觀的整體感覺變差的行為。例如，在癌癥患者中施用化學療法可能使患者感覺“惡心”，但這仍被認為是治療。
術語“預防”意指降低有機體感染或發(fā)展與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病的可能性。例如，術語“預防”意指降低相對于對照組發(fā)展疾病的個體的百分比，所述對照組不施用抗淀粉樣蛋白劑。
術語“可檢測量”意指施用的可檢測化合物的量足以使檢測所述化合物與淀粉樣蛋白的結合成為可能。
“成像有效量”意指施用的可檢測的化合物的量足以使所述化合物與淀粉樣蛋白的結合的成像成為可能。
術語“體內成像”意指允許檢測如本文中所述的標記的苯并噻唑化合物的任何方法。
術語“用于檢測的體內或體外方法”意指允許檢測所標記的式(I)的苯并噻唑衍生物的任何方法。
術語“基線”意指在開始抗淀粉樣蛋白療法之前患者的淀粉樣蛋白沉積的量和分布。
除非上下文中另有明確說明，否則當其在本申請中出現(xiàn)時，單數(shù)術語的定義可外推應用于其復數(shù)形式；同樣，當其在本申請中出現(xiàn)時，復數(shù)術語的定義可外推應用于其單數(shù)形式。
淀粉樣蛋白成像劑 本發(fā)明的淀粉樣蛋白成像劑是任意的式(I)化合物或其可藥用鹽
其中R’、R3-R10和Y如上所定義。
式(I)化合物又稱為“苯并噻唑化合物”、“苯并噻唑衍生物”或“淀粉樣蛋白成像劑”，具有以下各特征(1)在體外與合成Aβ特異性結合，(2)在體內穿過未受損的血腦屏障的能力，(3)與包含至少一種促淀粉樣變蛋白的淀粉樣蛋白沉積物特異性結合，其中所述促淀粉樣變蛋白選自AL、AH、ATTR、Aβ2M、AA、AApoAI、AApoAII、AGel、ALys、AFib、ACys、ABri、ADan、APrP、ACal、AlAPP、AANF、APro、AIns、AMed、AKer、A(tbn)和ALac，(4)結合至在神經(jīng)炎(但未擴散)斑塊中沉積的Aβ上、結合至在腦血管淀粉樣蛋白中沉積的Aβ上、以及結合至由在NFT中沉積的蛋白所構成的淀粉樣蛋白上，和(5)在合適的劑量水平下還是無毒的并且具有令人滿意的作用持續(xù)時間。
在一個實施方案中，R3-R10可以獨立地選自H、F、Cl、Br、I、-N(R11)2和OR11。在與該實施方案或本文中所描述的任何其它實施方案相結合的實施方案中，R8和R9可獨立地為OR11。
在另一個任選地與本文中所描述的其它實施方案相結合的實施方案中，R7和R10可以各自為H。在另一個實施方案中，R3、R4、R5和R6可以各自為H。
在本發(fā)明的其它實施方案中，Y可以為F、Cl、Br、I或-NO2。Y的一個具體實例是F。
在另一個實施方案中，結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物中R3、R4、R5和R6、R7以及R10各自為H，R8和R9獨立地為OR11。
舉例說明的式(I)化合物包括但不限于以下表1中的那些 表1
在另一些任選地與本文中所描述的任何其它實施方案相結合的實施方案中，本發(fā)明涉及下表2中的另外的化合物。如同式(I)所描述的化合物一樣，以下化合物適合本文中所描述的方法、組合物和用途 表2
使用方法 本發(fā)明的化合物可用于確定在動物的器官或身體部位(包括腦)中的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的存在、位置和/或量。所述一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物包括但不限于一種或更多種Aβ沉積物?？紤]將遵循的淀粉樣蛋白沉積時間順序，本發(fā)明的化合物還可以用于將淀粉樣蛋白沉積與臨床癥狀(與疾病、病癥或病況相關)的發(fā)作相聯(lián)系。本發(fā)明的化合物可最終用于診斷以淀粉樣蛋白沉積為特征的疾病、病癥或病況，比如AD、家族性AD、唐氏綜合征、淀粉樣變、II型糖尿病、輕度認知障礙以及載脂蛋白E4等位基因的純合子。本發(fā)明的化合物還可用作評價抗淀粉樣蛋白療法的替代指標。
成像技術 本發(fā)明的一個方法確定患者的器官或身體部位(比如腦)內淀粉樣蛋白沉積物的存在和位置。所述方法包括給患者施用可檢測量的藥物組合物，所述藥物組合物包含結合淀粉樣蛋白的稱為“可檢測化合物”的本發(fā)明化合物或其水溶性可藥用鹽?！翱蓹z測量”意指所施用的可檢測化合物的量足以使檢測所述化合物與淀粉樣蛋白的結合稱為可能?！俺上裼行Я俊币庵杆┯玫目蓹z測化合物的量足以使所述化合物與淀粉樣蛋白的結合的成像稱為可能。
本發(fā)明采用淀粉樣蛋白成像劑與非侵入性神經(jīng)成像技術相結合，所述非侵入性神經(jīng)成像技術如磁共振波譜(MRS)或磁共振成像(MRI)、或γ成像比如正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或單光子發(fā)射計算機斷層掃描(SPECT)，用于在體內量化淀粉樣蛋白沉積。所述方法涉及給患者成像以建立淀粉樣蛋白沉積的基線。對于γ成像而言，測量由被檢驗器官或部位發(fā)出的輻射，并表達為總結合或比例，所述比例為在一個組織中的總結合被在同一體內成像期間在同一對象的另一個組織中的總結合歸一化(例如，除以)。體內總結合被定義為通過體內成像技術在組織內檢測的全部信號，而不需要通過第二次注射相同量的標記化合物與大量過量的未標記的但化學上相同的化合物進行校正。該方法還可包括在進行抗淀粉樣蛋白療法之后患者的至少一個成像期。該方法還可包括在治療之前和之后使用至少一種抗淀粉樣蛋白劑給患者成像。成像可在治療期間的任何時間進行。
為體內成像的目的，可用的檢測儀器的類型是選擇給定的標記物的一個主要因素。例如，放射性同位素和19F可用于本發(fā)明方法中的體內成像。所用的儀器類型將指導對放射性核素或穩(wěn)定同位素的選擇。例如，所選的放射性核素必須具有某種通過給定類型的儀器可檢測的衰變。另一個考慮因素涉及放射性核素的半衰期。半衰期應足夠長以便其在最大標靶吸收時間下仍可被檢測到，還應足夠短以便主體不遭受到有害輻射?？墒褂忙贸上駲z測本發(fā)明的放射性標記的化合物，其中檢測所發(fā)出的具有合適波長的γ輻射。γ成像的方法包括但不限于SPECT和PET。在一個實施方案中，比如對于SPECT檢測而言，所選的放射性標記物將不釋放粒子，但會產(chǎn)生大量的140-200keV的光子。對于PET檢測而言，所述放射性標記物將是發(fā)射正電子的放射性核素如19F，其將湮滅以形成兩束511keV的能被PET照相機檢測到的γ射線。
在本發(fā)明中，制備結合淀粉樣蛋白的化合物/成像劑，其可用于淀粉樣蛋白沉積的體內成像和量化。這些化合物將與非侵入性的神經(jīng)成像技術聯(lián)用，所述非侵入性的神經(jīng)成像技術比如磁共振波譜(MRS)或磁共振成像(MRI)、正電子發(fā)射斷層掃描(PET)和單光子發(fā)射計算機斷層掃描(SPECT)。根據(jù)本發(fā)明，可通過本領域中已知的一般有機化學技術，采用19F或13C將苯并噻唑化合物標記用于MRS/MRI。例如，參見ADVANCED ORGANIC CHEMISTRYREACTION，MECHANISMS，AND STRUCTURE，3rd ed.(1985)，其內容通過引用并入本文中。也可以通過本領域眾所周知的技術(如Fowler，J.和Wolf，A.在POSITRON EMISSION TOMOGRAPHY ANDAUTORADIOGRAPHY 391-450(Raven Press，1986)中所描述的，其內容通過引用并入本文中)采用18F、11C、75Br或76Br將苯并噻唑化合物標記用于PET。還可以通過本領域中已知的幾種技術(參見例如Kulkarni，Int.J.Rad.Appl.&Inst.(Part B)18647(1991)，其內容通過引用并入本文中)，采用123I將苯并噻唑化合物標記用于SPECT。此外，可使用任何合適的放射性碘同位素(例如但不限于131I、125I或123I)，通過經(jīng)由重氮化碘(diazodium iodide)直接使重氮化的氨基衍生物碘化(參見Greenbaum，F(xiàn).Am.J.Pharm.10817(1936))、或通過將不穩(wěn)定的重氮化的胺轉化為穩(wěn)定的三氮烯、或通過將非放射性的鹵代前體轉化為穩(wěn)定的三烷基錫衍生物然后可通過本領域中眾所周知的幾種方法將所述三烷基錫衍生物轉化為碘化合物(參見Satyamurthy和Barrio，J.Org.Chem.484394(1983)，Goodman等，J.Org.Chem.492322(1984)，以及Mathisetal，J.Labell Comp.and Radiopharm.1994905；Chumpradit等，J.Med.Chem.34877(1991)；Zhuang等，J.Med.Chem.371406(1994)；Chumpradit等，J.Med.Chem.374245(1994))而標記所述苯并噻唑化合物。例如，使苯并噻唑的穩(wěn)定的三氮烯衍生物或三烷基錫衍生物與含有131I、125I、123I、76Br、75Br、18F或19F的鹵化劑反應。因此，所述苯并噻唑的穩(wěn)定的三烷基錫衍生物是新型的前體，其可用于合成許多本發(fā)明的放射性標記的化合物。同樣，這些三烷基錫衍生物在本發(fā)明的一個實施方案加以考慮。
還可以使用已知的金屬放射性標記物例如锝-99m(99mTc)對苯并噻唑化合物進行放射性標記。可實現(xiàn)引入結合這些金屬離子的配體的取代基修飾，而不需要由放射性標記領域的普通技術人員進行過多的實驗。然后可以將所述金屬放射性標記的苯并噻唑用于檢測淀粉樣蛋白沉積物。制備Tc99m的放射性標記的衍生物是本領域中眾所周知的。參見例如Zhuang等“Neutral and stereospecific Tc-99m complexes[99mTc]N-benzyl-3，4-di-(N-2-mercaptoethyl)-amino-pyrrolidines (P-BAT)”Nuclear Medicine & Biology 26(2)217-24，(1999)；Oya等，“Small andneutral Tc(v)OBAT，bisaminoethanethiol(N2S2)complexes for developingnew brain imaging agents”Nuclear Medicine & Biology 25(2)135-40，(1998)；和Horn等，“Technetium-99m-labeled receptor-specificsmall-molecule radiopharmaceuticalsrecent developments andencouraging results”Nuclear Medicine & Biology 24(6)485-98，(1997)。
本發(fā)明的方法可使用通過核磁共振波譜可檢測到的同位素，用于體內成像和光譜的目的。在磁共振波譜中可用的元素包括但不限于19F和13C。
用于本發(fā)明目的的合適的放射性同位素可以是β發(fā)射體、γ發(fā)射體、正電子發(fā)射體和x射線發(fā)射體。這些放射性同位素包括131I、123I、18F、11C、75Br和76Br。根據(jù)本發(fā)明，用于磁共振成像(MRI)或磁共振波譜(MRS)的合適的穩(wěn)定的同位素包括19F和13C。用于體外量化在活檢組織或尸檢組織的勻漿中的淀粉樣蛋白的合適的放射性同位素包括125I、14C和3H。用于PET體內成像的示例性放射性標記物是11C或18F，用于SPECT成像的是123I，用于MRS/MRI的是19F，用于體外研究的是3H或14C。然而，根據(jù)本發(fā)明，可使用使成像劑可見的任何常規(guī)方法。
根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，涉及在活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的方法，所述方法包括使福爾馬林固定的組織與本發(fā)明的結合淀粉樣蛋白的苯并噻唑化合物一起孵育。在一個實施方案中，所述溶液為以本發(fā)明的結合淀粉樣蛋白的苯并噻唑化合物飽和的25-100％的乙醇(余量為水)。在孵育時，所述化合物在組織中將所述淀粉樣蛋白沉積物染色或標記，所述被染色或標記的沉積物可通過任何標準方法被檢測或觀察到。這些檢測方法包括顯微技術，比如亮視野顯微術、熒光顯微術、激光共聚焦顯微術和交叉極化顯微術。
量化在活檢或尸檢組織中的淀粉樣蛋白的方法包括將標記的本發(fā)明的苯并噻唑衍生物或其水溶性的無毒鹽與活檢組織或尸檢組織的勻漿一起孵育。通過本領域中眾所周知的方法獲得組織并將其均勻化。在一個實施方案中，所述標記物是放射性標記物，但是其它標記物比如酶、化學發(fā)光化合物和免疫熒光化合物對本領域技術人員來說也是眾所周知的。示例性的放射性標記物包括但不限于125I、14C和3H，包含在本文中所描述結構式的化合物之一上取代的取代基中。含有淀粉樣蛋白沉積物的組織將結合至本發(fā)明的結合淀粉樣蛋白的苯并噻唑化合物的標記衍生物上。然后通過本領域技術人員已知的任何機理(比如過濾)，將已結合組織與未結合組織分離開。然后可以通過本領域技術人員已知的任何方法將已結合組織量化。然后可通過與標準曲線比較(通過孵育已知量的淀粉樣蛋白與放射性標記的苯并噻唑衍生物而得到)，可將與組織結合的放射性標記的苯并噻唑衍生物的單位轉化為每100mg組織中淀粉樣蛋白的微克數(shù)的單位。
區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法包括從正常對象和從疑似患有阿爾茨海默病的對象的(a)小腦和(b)同一腦的除小腦外的其它區(qū)域中獲取組織。使用本領域技術人員眾所周知的方法將這些組織制成單獨的勻漿，然后將其與結合淀粉樣蛋白的放射性標記的式(I)的苯并噻唑化合物孵育。然后計算每種組織類型(例如小腦、非小腦、正常的、異常的)中結合至放射性標記的結合淀粉樣蛋白的苯并噻唑化合物的組織量，并計算非小腦組織中結合與小腦組織中結合的比例(對于正常組織而言以及對于疑似患有阿爾茨海默病的患者而言)。然后比較這些比例。如果來自疑似患有阿爾茨海默病的腦的所述比例在得自正常腦的所述比例的90％以上，則作出阿爾茨海默病的診斷。正常的比例可從前述所得的數(shù)據(jù)中得到，或者作為替代方案，可在研究疑似的腦組織的同時計算所述正常的比例。
相比于淀粉樣蛋白斑塊，本發(fā)明化合物與神經(jīng)原纖維纏結的特異性結合在小于10nM的濃度下尤其明顯，此濃度包含了PET放射性示蹤劑的體內濃度范圍。在這些僅包含纏結而不包含斑塊的低濃度下，當相比于既不含有斑塊也不含有纏結的對照腦組織時，沒有產(chǎn)生明顯的結合。然而，將含有主要為斑塊和一些纏結的腦組織的勻漿與本文中描述的結構式的化合物一起孵育，導致與沒有斑塊和纏結的對照組織相比在結合上的顯著增加。此數(shù)據(jù)表明這些化合物的一個優(yōu)點是其在低于10nM時對于Aβ沉積物的特異性。這些低濃度在PET研究中是可檢測的，使用放射性標記的本文中描述的式子的化合物(其對可能的Aβ沉積物是特異性的)進行PET檢測。這些化合物的用途使得PET可對Aβ沉積物進行檢測，所述Aβ沉積物例如發(fā)現(xiàn)于斑塊和腦血管淀粉樣蛋白中的那些。由于已經(jīng)報道了在額葉皮質中的Aβ水平在纏結形成前增加，因此這將提示本發(fā)明的用作PET示蹤劑的放射性標記化合物對AD皮質中的最早變化是特異性的(Naslund等，JAMA 2831571(2000))。體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法 如上所述，在一個實施方案中，本發(fā)明還提供了一種用于體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括 (i)給動物施用有效量的式(I)化合物，其中所述化合物在所述動物內會結合至任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物上；和 (ii)在所述動物體內檢測所述化合物與淀粉樣蛋白沉積物的結合。
在所述化合物與所述一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物結合已經(jīng)過了足夠長的時間后，例如在施用后30分鐘至48小時后，可采用本領域中已知的任何方法檢測所述結合。檢測方法的實例包括但不限于測定法(比如免疫測定法、量熱法、光密度測量法、光譜法和色譜法)、非侵入性神經(jīng)成像技術(比如磁共振波譜(MRS)、磁共振成像(MRI)和γ成像技術比如單光子發(fā)射計算機斷層掃描術(SPECT)和正電子發(fā)射光譜(PET))。對于γ成像而言，測量由被檢測的器官或部位發(fā)出的輻射并將其表示為總結合或比例，所述比例為在一個組織內的總結合被在同一體內成像過程中在所述對象的另一個組織內的總結合歸一化(例如除以)。體內總結合被定義為通過體內成像技術在組織中檢測到的全部信號，而不需要通過第二次注射同樣量的標記化合物與大量過量的未標記的但化學上相同的化合物來校正。
可用的檢測儀器的類型可以是選擇放射性鹵素或碳同位素的一個因素。例如，所選擇的放射性同位素應具有可被給定儀器檢測到的衰變類型。另一個考慮因素涉及所述放射性同位素的半衰期。半衰期應足夠長，以便放射性同位素在標靶的最大攝取時間時仍可檢測到，還應足夠短，以便宿主不必承受有害的輻射。對于SPECT檢測而言，所選的放射性同位素可能沒有粒子發(fā)射出，但可能產(chǎn)生大量的在140-200keV范圍內的光子。對于PET檢測而言，所選的放射性同位素可以是發(fā)射正電子的放射性同位素，其湮滅而產(chǎn)生兩束可被PET照相機檢測到511keV的γ射線。
可用的放射性同位素包括但不限于用于活檢組織或尸檢組織的勻漿中淀粉樣蛋白的體外量化的125I、14C和3H；用于PET體內成像的11C和18F；用于SPECT成像的123I；用于MRS/MRI的18F；用于體內研究的3H或14C；以及用于磁共振波譜的18F和13C。在一個實施方案中，所述檢測通過γ成像、磁共振成像或磁共振波譜實現(xiàn)。在另一個實施方案中，所述γ成像是PET或SPECT。
體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法 本發(fā)明還提供了一種用于體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括 (i)使機體組織與有效量的式(I)化合物接觸，其中所述化合物會在所述組織內結合任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和 (ii)檢測所述化合物在所述組織內與一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
可以通過本領域內已知的任何方法檢測所述結合。檢測方法的實例包括但不限于顯微技術，比如亮視野顯微術、熒光顯微術、激光共聚焦顯微術和交叉極化顯微術。
在一個實施方案中，所述組織是福爾馬林固定的或新鮮冷凍的活檢或尸檢組織。在另一個實施方案中，所述組織是勻漿化的。在又一個實施方案中，本發(fā)明化合物處于溶液中，所述溶液還含有25-99％的乙醇，所述溶液的余下部分為水。在另一個實施方案中，所述溶液含有0-50％的乙醇和0.0001～100μM的所述化合物。在又一個實施方案中，所述方法還包括(iii)從所述組織中分離出與所述化合物結合的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和(iv)量化所述與本發(fā)明化合物結合的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物。可通過本領域中已知的任何方法(比如過濾)將所述結合的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物從所述組織中分離。通過與標準曲線(通過孵育已知量的淀粉樣蛋白與本發(fā)明化合物或其可藥用鹽、水合物、溶劑化物或前藥而產(chǎn)生)比較，可將結合的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的量轉化為每100mg組織中一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的μg數(shù)的單位。
區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法 本發(fā)明還提供了區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法，包括 (i)獲取來自正常動物或疑似患有阿爾茨海默病的動物的(a)小腦和(b)同一腦的其它區(qū)域的組織； (ii)使所述組織與式(I)化合物接觸； (iii)量化與所述化合物結合的淀粉樣蛋白； (iv)計算腦中除小腦以外的區(qū)域中淀粉樣蛋白的量相對于小腦中淀粉樣蛋白的量的比例；以及 (v)將正常動物的該比例與疑似患有阿爾茨海默病的動物的該比例進行比較。
如果疑似患有阿爾茨海默病的動物的該比例為例如正常動物的該比例的90％以上，則可做出阿爾茨海默病的診斷。對于此方法而言。“正?！眲游锸俏椿加邪柎暮Ｄ〉膭游?。
施用和藥物組合物 根據(jù)本發(fā)明，可對預期有淀粉樣蛋白或淀粉樣蛋白原纖維形成的對象施用包含式(I)的淀粉樣蛋白成像劑的藥物組合物，所述對象例如臨床診斷有阿爾茨海默病或與淀粉樣蛋白沉積有關的其他疾病的患者。
給對象的施用可以是局部的或全身性的，并且可以與其它物質一起施用，例如，靜脈內、動脈內、鞘內(通過脊髓液)等。根據(jù)檢查的身體部位，施用還可以是皮內或腔內的。在所述化合物與淀粉樣蛋白結合已經(jīng)過足夠時間(例如30分鐘至48小時)后，通過常規(guī)成像技術比如MRS/MRI、SPECT、平面閃爍成像、PET以及任何新興的成像技術等檢測被檢查對象的所述部位。確切的方案必須根據(jù)如上所指出的患者的具體因素、被檢查的身體部位、施用方法和所用的標記物類型而變化；具體方法的確定對于本領域技術人員來說將是常規(guī)的。對于腦成像而言，作為一個實例，測量結合的放射性標記的本發(fā)明苯并噻唑化合物或類似物的量(總結合或特異結合)，并與和患者小腦結合的標記的苯并噻唑化合物的量以比例形式進行比較。然后將該比例與年齡匹配的正常腦中的相同比例進行比較。對于器官成像而言，作為另一個實例，測量結合的放射性標記的本發(fā)明硫黃素衍生物或類似物的量(總結合或特異結合)，并與和患者器官結合的標記的硫黃素衍生物的量以比例形式進行比較。然后將此比例與年齡匹配的正常器官中的相同比例進行比較。
本發(fā)明的淀粉樣蛋白成像劑可以以如上所述的可注射組合物的形式施用，也可以配制成眾所周知的藥物遞送系統(tǒng)(例如口服、直腸、胃腸外(靜脈內、肌肉內或皮下)、腦池內、陰道內、腹膜內、局部(粉末、軟膏或滴劑)，或作為口腔噴霧劑或鼻噴霧劑)。用于此目的的典型組合物包含可藥用載體。例如，所述組合物每毫升含有NaCl的磷酸鹽緩沖液中可以包含約10mg人血清白蛋白和約0.5到500微克標記的苯并噻唑化合物。其它的可藥用載體包括水溶液、無毒的賦形劑(包括鹽類)、防腐劑、緩沖劑等，例如在REMINGTON’S PHARMACEUTICALSCIENCES，15th Ed.EastonMack Publishing Co.pp.1405-1412和1461-1487(1975)以及THE NATIONAL FORMULARY XIV.，14th Ed.WashingtonAmerican Pharmaceutical Association(1975)中所描述的，其內容通過引用并入本文中。
非水溶劑的實例是丙二醇、聚乙二醇、植物油和可注射的有機酯比如油酸乙酯。含水載體包括水、醇/水溶液、鹽水溶液、胃腸外賦形劑比如氯化鈉、林格氏葡萄糖等。靜脈內賦形劑包括流體和營養(yǎng)補充劑。防腐劑包括抗微生物劑、抗氧化劑、螯合劑和惰性氣體。根據(jù)本領域中的常規(guī)技術調節(jié)pH和所述藥物組合物各種成分的確切濃度。參見Goodman和Gilman的THE PHARMACOLOGICAL BASIS FORTHERAPEUTICS(7th Ed.)。
PET掃描方案可包括在注射放射性藥物后15-60分鐘完成的標準的全身掃描(從頭覆蓋至骨盆)，或對特定的身體部位(例如心、肺、肝、腎)進行的掃描。該掃描方案與使用[F-18]2-氟-2-脫氧葡萄糖(FDG)進行的全身掃描或聚焦身體部位PET腫瘤掃描相似。也就是說，靜脈內注射淀粉樣蛋白特異性的放射性藥物，規(guī)定放射性示蹤劑分布于全身、感興趣器官中放射性示蹤劑的吸收、以及從血液和不存在淀粉樣蛋白的其它器官中清除的時間，對全身或特定身體部位進行20-40分鐘的掃描以對結合淀粉樣蛋白的放射性示蹤劑成像。此外，所述成像掃描可用于隨后的被掃描組織的直接活組織采樣。
通常，標記的式(I)苯并噻唑化合物的可檢測的量將由本領域普通醫(yī)師根據(jù)考慮的因素比如患者的年齡、病況、性別和疾病的程度、禁忌證、伴隨療法(如果有的話)以及其它變量進行調整而變化。本發(fā)明化合物的約0.001μg/kg/天至約10,000mg/kg/天的數(shù)量級的劑量水平可用于本發(fā)明的方法。在一個實施方案中，所述劑量水平是約0.001μg/kg/天至約10μg/kg/天。在另一個實施方案中，所述劑量水平是約0.01μg/kg/天至約1.0μg/kg/天。在另一個實施方案中，所述劑量水平是約0.1mg/kg/天至約100mg/kg/天。
對任何特定患者來說的具體劑量水平將根據(jù)多種因素而變化，所述因素包括所采用的具體化合物的可能毒性；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；施用時間；排泄率；藥物聯(lián)用；以及施用形式。通常，體外的劑量效應結果提供患者施用的合適劑量的有用指導。動物模型的研究也是有用的。確定合適劑量水平的考慮因素在本領域中是眾所周知的，并且在普通醫(yī)師的技能范圍內。
可使用用于調節(jié)藥物遞送的時間和次序的任何已知的施用方案，并且在必要時可重復以實現(xiàn)本發(fā)明方法中的治療。所述方案可包括預治療和/或與其它一種或更多種治療劑的共同施用。
在一個實施方案中，將式(I)化合物施用給疑似患有以淀粉樣蛋白沉積為特征的疾病、病癥或病況的動物或處在患有上述疾病、病癥或病況的風險中的動物。例如，所述動物可為老年人。
在另一個實施方案中，當通過與合成的Aβ肽或AD腦組織的結合進行測量時，本發(fā)明化合物以約0.0001μM至約10.0μM的解離常數(shù)(KD)結合Aβ。
本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包含 (i)有效量的至少一種本發(fā)明化合物；和 (ii)可藥用載體。
所述組合物可包含一種或更多種其它的藥學上可接受的成分，包括但不限于一種或更多種潤濕劑、緩沖劑、助懸劑、潤滑劑、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、色素、調味劑、甜味劑和治療劑。
可將所述組合物配制成固體、液體、凝膠或混懸劑形式以用于(1)口服施用，例如灌劑(drench)(水溶液或混懸液或者非水溶液或混懸液)、片劑(例如靶向口頰、舌下或全身吸收的)、大藥丸、粉末、顆粒、用于舌的糊劑、硬明膠膠囊劑、軟明膠膠囊劑、口腔噴霧劑、乳劑和微乳劑；(2)通過皮下、肌肉內、靜脈內或硬膜外注射的胃腸外施用，例如無菌溶液、混懸液或持續(xù)釋放制劑；(3)局部施用，例如乳膏、軟膏、控釋貼劑或用于皮膚的噴霧劑；(4)陰道內或直腸內施用，例如陰道栓、乳膏或泡沫；(5)舌下施用；(6)眼部施用；(7)透皮施用；或(8)鼻腔施用。
在一個實施方案中，可將所述組合物配制用于靜脈內施用，并且所述載體包括流體和/或營養(yǎng)補充劑。在另一個實施方案中，所述組合物能夠在體內與淀粉樣蛋白特異性結合，能夠穿過血腦屏障，在合適的劑量水平下無毒和/或具有令人滿意的持續(xù)作用時間。在另一個實施方案中，所述組合物在每毫升含有NaCl的磷酸鹽緩沖液中包含約10mg的人血清白蛋白和約0.5至500mg的本發(fā)明化合物。
此外，本發(fā)明的苯并噻唑化合物可用于確定淀粉樣變治療療效的方法中。所述方法包括使用淀粉樣蛋白成像作為替代指標的方法。替代指標是一種特殊類型的生物標記，其可用于替代作為藥物批準用途的臨床終點的臨床測量。例如，膽固醇水平的測量現(xiàn)在是動脈粥樣硬化的可接受替代指標。本發(fā)明涉及使用淀粉樣蛋白成像作為抗淀粉樣蛋白療法療效的替代指標。
本發(fā)明提供了一種評價抗淀粉樣蛋白療法成功的方法。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了一種用于評價抗淀粉樣蛋白療法臨床成功的方法。在一些實施方案中，所述方法可用于評價隨后具有很少或沒有臨床癥狀的輕度損傷對象中的臨床成功。確定淀粉樣變治療療效的基本方法包括 (a)給有此需要的患者施用有效量的如上所述的式(I)化合物或可藥用鹽； (b)對所述患者成像；然后 (c)給有此需要的患者施用至少一種抗淀粉樣蛋白劑； (d)隨后給有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物； (e)對所述患者成像；以及 (f)將采用至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療劑之前所述患者中淀粉樣蛋白沉積物的水平與采用至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療之后所述患者中淀粉樣蛋白沉積物的水平進行比較。
可檢測的標記物包括可使用本領域技術人員已知的成像技術檢測到的任何原子或基團。通常，所述可檢測標記物選自3H，131I，125I，123I，76Br，75Br，18F，CH2-CH2-X＊，O-CH2-CH2-X＊，CH2-CH2-CH2-X＊，O-CH2-CH2-CH2-X＊(其中X＊＝131I、123I、76Br、75Br或18F)，19F，125I，含碳取代基(選自低級烷基、(CH2)nOR’、CF3、CH2-CH2X、O-CH2-CH2X、CH2-CH2-CH2X、O-CH2-CH2-CH2X(其中X＝F、Cl、Br或I)、CN、(C＝O)-R’、(C＝O)N(R’)2、O(CO)R’、COOR’、CR’＝CR’-Rph和CR2’-CR2’-Rph，其中至少一個碳是11C、13C或14C)，和W-L＊或V-W-L＊形式的螯合基(具有螯合的金屬基團)(其中V選自-COO-、-CO-、-CH2O-和-CH2NH-；W是-(CH2)n，其中n＝0、1、2、3、4或5；且L＊是
其中M＊是99mTc)。
在一個實施方案中，所述可檢測標記物是放射性標記物。
抗淀粉樣蛋白療法 本發(fā)明的另一個實施方案是確定需要進行淀粉樣變治療的患者的治療淀粉樣變的療效的方法。所述方法包括給患者施用式(I)化合物，然后對患者成像。成像后，給患者施用至少一種抗淀粉樣蛋白劑/抗淀粉樣蛋白療法。施用量、給藥途徑、以及療法的持續(xù)時間由本領域技術人員基于患者的年齡、重量和病況進行確定。這樣的確定在本領域技術人員的范圍內。合適的量包括但不限于0.01～100mg/kg。合適的給藥途徑包括但不限于口服、皮下和靜脈內。合適的治療持續(xù)時間包括但不限于每天不確定地給予一次單劑量至四劑量。合適的成像時間包括但不限于在第一次給藥后即刻到最近一次給藥后十年。示例性的成像時間包括但不限于在最近一次給藥后的7天至6個月。
“抗淀粉樣蛋白劑”或“抗淀粉樣蛋白療法”是治療或預防淀粉樣變的任何藥劑或藥劑組合。與淀粉樣蛋白沉積、淀粉樣變相關的疾病的實例包括阿爾茨海默病、唐氏綜合征、2型糖尿病、遺傳性腦出血淀粉樣變(荷蘭人)、淀粉樣蛋白A(活性的)、繼發(fā)性淀粉樣變、MCI、家族性地中海熱、伴有蕁麻疹和耳聾的家族性淀粉樣蛋白腎病(穆-韋綜合征)、淀粉樣蛋白λL-鏈或淀粉樣蛋白κL-鏈(自發(fā)性的，與骨髓瘤或巨球蛋白血癥相關)、Aβ2M(長期血液透析)、ATTR(家族性淀粉樣蛋白多神經(jīng)病(葡萄牙人、日本人、瑞典人))、家族性淀粉樣蛋白心肌病(丹麥人)、分離的心臟淀粉樣蛋白(isolated atrial amyloid)、系統(tǒng)性老年淀粉樣變、AIAPP或淀粉不溶素(amylin)胰島素瘤、心房鈉利尿因子(分離的心房淀粉樣蛋白)、降鈣素原(甲狀腺髓樣瘤)、凝溶膠蛋白(家族性淀粉樣變(芬蘭人))、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(伴有淀粉樣變的遺傳性腦出血(冰島人))、AApo-A-I(家族性淀粉樣蛋白多神經(jīng)病-Iowa)、AApo-A-II(小鼠加速衰老)、與纖維蛋白原相關的淀粉樣蛋白；以及去唾液酸糖蛋白(Asor)或Pr P-27(瘙癢病、克雅病、格-施-沙綜合征(Gertsmann-
syndrome)、牛海綿狀腦病)或在載脂蛋白E4等位基因純合的人的情況下、以及與載脂蛋白E4等位基因純合性相關的病況或亨廷頓病。本發(fā)明涉及與淀粉樣蛋白斑塊沉積相關的疾病。在一個實施方案中，所述與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病是AD。
根據(jù)式(I)的本發(fā)明的苯并噻唑可作為抗淀粉樣蛋白療法療效的替代指標而用于淀粉樣蛋白成像。施用淀粉樣蛋白成像劑以建立淀粉樣蛋白沉積的基線并隨后在使用抗淀粉樣蛋白劑給患者治療之前和之后對患者成像均可確定抗淀粉樣蛋白療法的功效。由于可以施用淀粉樣蛋白成像劑并且可以在任何抗淀粉樣蛋白療法之前和之后對患者成像，因此所述方法可用于確定抗淀粉樣蛋白治療的功效，。所述方法涉及確定對治療與淀粉樣蛋白沉積有關的疾病無效的抗淀粉樣蛋白療法，以及確定對治療與淀粉樣蛋白沉積有關的疾病有效的抗淀粉樣蛋白療法。本領域內的普通技術人員可以根據(jù)合適的方案確定所述抗淀粉樣蛋白療法的條件和劑量。因此，本發(fā)明涉及確定目前已知的抗淀粉樣蛋白療法的功效，以及還有待發(fā)現(xiàn)的抗淀粉樣蛋白療法的功效。示例性的非限制性的抗淀粉樣蛋白療法描述如下。
在一些實施方案中，可以通過本發(fā)明的方法確定乙酰膽堿酯酶抑制劑在治療淀粉樣變中的功效。乙酰膽堿酯酶療法是基于AD退化模式的研究，其中鑒別在基底前腦中神經(jīng)元組的顯著減少。這些細胞均使用遞質乙酰膽堿，其損失意味著較少的乙酰膽堿在皮層中在其前體終端處被釋放。基于這些發(fā)現(xiàn)已經(jīng)開發(fā)出了幾種藥物，比如他克林、多奈哌齊、卡巴拉汀和加蘭他敏，并推測它們通過抑制酶乙酰膽堿酯酶而起作用(Ingram，V.，American Scientist，2003，91(4)312-321)。
在另一些實施方案中，通過本發(fā)明的化合物，根據(jù)已描述的方法，確定在治療淀粉樣變中靶向負責形成淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)的有毒片段的酶的抗淀粉樣蛋白療法。在一些實施方案中，所述淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)的有毒片段是錯誤折疊的Aβ肽。例如，一些科學家認為Aβ1-42片段的過度產(chǎn)生是AD的根本原因。Aβ1-42片段是通過由β-分泌酶(BACE1)(其產(chǎn)生氨基酸末端)和-γ分泌酶(其切割APP的羧基末端)切割APP而形成的。這些分泌酶的抑制劑可用作抗淀粉樣蛋白療法(Ingram，V.，American Scientist，2003，91(4)312-321)。
在一些實施方案中，可通過本發(fā)明的方法確定免疫療法策略在淀粉樣變治療中的功效。免疫療法通過利用患者的免疫系統(tǒng)定位并破壞淀粉樣蛋白斑塊而起作用，科學家們正積極探索多種免疫療法策略。免疫療法策略可以是被動的或主動的。例如，在主動免疫療法中，患者可接受Aβ肽的注射劑或噴鼻劑，導致抗淀粉樣蛋白免疫應答。另一方面，被動免疫療法可能涉及旁路β淀粉樣蛋白，使用已在對β淀粉樣蛋白應答中產(chǎn)生的抗血清代替。已經(jīng)研究了涉及抗Aβ肽的抗體的免疫療法來治療AD。例如，AN-1792是一種預先聚集的合成的淀粉樣蛋白β(Aβ；1-42長度)連同QS-21佐劑的制劑(Hock，C.等，2003，Neuron，38547-554)。大約有300名AD患者在由于副作用而停止臨床試驗之前已采用此制劑進行了治療(Birmingham，K.和Frantz，S.，2002，Nature Medicine，8199-200)。
在另一些實施方案中，通過本發(fā)明的方法確定神經(jīng)保護策略在淀粉樣變治療中的功效。例如，很多臨床醫(yī)師推薦患者服用高劑量(1000-2000IU/天)的維生素E。已提出用于淀粉樣變治療的其它類型的神經(jīng)保護策略是高劑量的維生素C、鈣通道調節(jié)劑、自由基清除劑和金屬離子螯合劑(Selkoe，等，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.，2003，43545-84)。
在一些實施方案中，通過本發(fā)明的方法確定抗炎藥(NSAID)策略在淀粉樣變治療中的功效。涉及NSAID的治療基于如下證據(jù)皮質中的細胞炎癥反應是由Aβ肽的漸進性累積而引起的。示例性的抗炎藥是潑尼松、非特異性的環(huán)氧合酶抑制劑以及環(huán)氧合酶2抑制劑(Clark，M.等，Annals ofInternal Medicine，2003，138(5)400-410；以及Hardy，John，Annu.Rev.Med.，2004，5515-25)。
在一些實施方案中，本發(fā)明的方法可確定降膽固醇療法的功效，所述降膽固醇療法包括但不限于3-羥基-3-甲基戊二?；o酶A還原酶抑制劑(他汀類)。涉及降膽固醇藥物(比如他汀類)的治療是基于流行病學的證據(jù)，即用他汀類治療的患者具有降低的AD發(fā)病率，并且他汀類可改變Aβ的代謝以降低Aβ水平(Wolozin，B(2002)Cholesterol and Alzheimer′sdisease.Biochemical Society Transactions.30525-529)。示例性的降低膽固醇的他汀類藥物包括洛伐他汀、普伐他汀、瑞舒伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀和辛伐他汀。其它的降膽固醇藥包括煙酸、消膽胺、非諾貝特、考來維侖(Colesevelam)和依替米貝(ezetimibe)。
在另一些實施方案中，通過本發(fā)明的方法確定消除聚集的Aβ1-42的神經(jīng)毒性的小分子在淀粉樣變治療中的功效。這樣的藥物在施用時(例如在疾病進程的早期)，將會在對神經(jīng)元形成任何永久性損傷之前給逐漸累積的Aβ肽“解毒”(Clark，M.等，Annals of Internal Medicine，2003，138(5)400-410)。
在一些實施方案中，通過本發(fā)明的方法確定“誘餌肽(decoy peptide)”在淀粉樣變治療中的功效。誘餌肽是與累積的Aβ1-42肽結合并迫使其采取無毒結構的小分子。示例性的誘餌肽是小分子肽(5、6或9個氨基酸長)，選自能夠與標記的Aβ1-42形成緊密結合的大的蛋白片段庫(Clark，M.等，Annals of Internal Medicine，2003，138(5)400-410)。
在另一些實施方案中，通過本發(fā)明的方法確定膽固醇動態(tài)平衡調節(jié)在淀粉樣變治療中的功效。近來發(fā)現(xiàn)降膽固醇藥的長期使用與低的AD發(fā)病率相關聯(lián)。同時，已表明高膽固醇飲食增加動物的Aβ病變，并且已表明降膽固醇藥減少APP轉基因小鼠的病變。正在進行臨床試驗，以研究膽固醇動態(tài)平衡調節(jié)在AD治療中的作用(Hardy，John，Annu.Rev.Med.，2004，5515-25)。
認為某些抗體比如命名為m266的抗體(DeMattos，RB，Bales，KR，Cummins，DJ，Dodart，JC Paul，SM，Holtzman，DM(2001)“Peripheralanti-A beta antibody alters CNS and plasma A beta clearance anddecreases brain A beta burden in a mouse model of Alzheimer’s disease”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 988850-8855)或除抗體以外的分子(Matsuoka，Y，Saito，M，LaFrancois，J，Saito，M，Gaynor，K，Olm，V，Wang，L，Casey，E，Lu，Y，Shiratori，C，Lemere，C，Duff，K(2001)“Novel therapeutic approachfor the treatment of Alzheimer’s disease by peripheral administration ofagents with an affinity to beta-amyloid”Journal of Neuroscience，2329-33)通過與血液中的Aβ肽結合而降低腦淀粉樣蛋白，從而產(chǎn)生“外周降低(peripheral sink)”并將Aβ的平衡由腦向血液轉移，在血液中可將Aβ從機體中清除。這樣的藥劑在本文中被稱為“外周降低劑(peripheral sinkagent)”。
評價抗淀粉樣蛋白療法的功效 使用根據(jù)式(I)的苯并噻唑來測定治療淀粉樣變的療效的方法包括給有此需要的患者施用式(I)的化合物并對患者成像。在成像后，將至少一種抗淀粉樣蛋白劑施用給患者。然后，給患者施用有效量的式(I)化合物并再次對患者成像。最后，將使用抗淀粉樣蛋白劑治療以前患者的淀粉樣蛋白沉積的基線水平與使用抗淀粉樣蛋白劑治療以后患者的淀粉樣蛋白沉積的水平進行比較。這樣的比較在熟練的執(zhí)業(yè)醫(yī)師的范圍內。
在一些實施方案中，在使用抗淀粉樣蛋白劑治療以前患者的淀粉樣蛋白沉積的水平將高于使用抗淀粉樣蛋白劑治療以后患者的淀粉樣蛋白沉積的水平。這樣的結果表明抗淀粉樣蛋白劑/抗淀粉樣蛋白療法可有效治療與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病。
例如，AN-1792是一種預先聚集的合成淀粉樣蛋白β(Aβ；1-42個氨基酸長)連同QS-21佐劑的制劑。約300個AD患者在由于副作用而停止臨床試驗前已采用此制劑進行了治療(Birmingham，K.和Frantz，S.，2002，Nature Medicine，8199-200)。雖然有此挫折，但對此方法保持樂觀的人已經(jīng)提出了兩個發(fā)現(xiàn)。第一，在唯一已公開的關于AN-1792治療的AD患者的尸檢報告中，有幾個不尋常的發(fā)現(xiàn)，包括(i)新皮層的廣泛區(qū)域具有很少的Aβ斑塊；(ii)缺少Aβ斑塊的皮層區(qū)域含有與未免疫的AD相似的纏結密度、神經(jīng)纖絲和腦淀粉樣蛋白血管病(CAA)，但缺少與斑塊相關的營養(yǎng)不良的神經(jīng)突和星形角質細胞簇；(iii)在某些缺乏斑塊的區(qū)域，Aβ-免疫反應性與小膠質細胞相關(Nicoll，J.等，2003，Nature Medicine，9448-452)。第二，在30名AN-1792治療患者的小的亞組中，產(chǎn)生抗Aβ抗體的那些患者(如通過組織淀粉樣蛋白斑塊免疫活性法(TAPIR)所測定的)與沒有這些抗體的患者相比，顯示出認知功能和日常生活活動性的明顯較低的下降率，如通過簡易精神狀況檢查(Mini Mental StateExamination)、癡呆殘疾性評價以及由韋氏記憶量表(Wechsler MemoryScale)延期回憶的視覺配對輔助測試(the Visual Paired Associates Test)所示出的那樣(Hock等，Neuron 38547-54(2003))。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及在給不符合AD臨床診斷標準的患者腦中的淀粉樣蛋白沉積物成像的方法中給患者施用式(I)的化合物。這些患者包括但不限于表現(xiàn)出臨床癡呆病征的患者或具有輕度認知障礙的患者，例如表現(xiàn)出可疑病因的癡呆病癥的患者，其中來自患者淀粉樣蛋白成像的數(shù)據(jù)揭示了某些淀粉樣蛋白沉積物是AD或另一種淀粉樣蛋白沉積病癥的前驅癥狀。
本發(fā)明的另一個實施方案是鑒別患者處于淀粉樣蛋白沉積疾病的標準臨床診斷的前驅期的方法。所述方法包括使用淀粉樣蛋白成像劑以獲取患者的定量和定性數(shù)據(jù)。根據(jù)本發(fā)明，定量和定性的淀粉樣蛋白成像將允許對淀粉樣蛋白沉積疾病做出較早的且更準確的診斷，并將有助于抗淀粉樣蛋白療法的開發(fā)。本方法的目標患者可以是表現(xiàn)出臨床癡呆病征的患者或表現(xiàn)出輕度認知障礙臨床病征的患者。
本領域技術人員了解醫(yī)師可采用確認癡呆臨床病征的不同標準。這些標準包括但不限于Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，第3版(DSM-III)Alzheimer’s Disease Diagnostic and Treatment Center(ADDTC)，International Statistical Classification of Diseases，修訂第10版(ICD-10)，National Institute of Neurological Disorders and StrokeAssociation Internationale pour Ia Recherche et l′Enseignment enNeurosciences (NINDS-AIREN)以及Diagnostic and Statistical Manual ofMental Disorders，第4版(DSM-IV)。參見Pohjasvaara等，Stroke，2000 31；2952-2957。
具有輕度認知障礙的患者的臨床表征完全在醫(yī)師的技能范圍內。對患者闡明這一病況的測試涉及進行一系列的心理測驗。所述臨床診斷方法在例如Petersen等，Arch.Neurol.Vol.56，p 303-308，1999年3月中進行了全面綜述和討論。
僅基于臨床測試，鑒定為MCI的對象可能被診斷為AD(以每年約10-15％的比例)，仍診斷為MCI，或者轉而被診斷為“正常”(每年10-15％)(Larrieu，S，Letenneur，L，Orgogozo，JM，F(xiàn)abrigoule，C，Amieva，H，Le，C，Barberger-Gateau，P，Dartigues，JF(1926)Incidence and outcome ofmild cognitive impairment in a population-based prospective cohort.Neurology.591594-1599)。
因此，存在值得考慮的與此臨床診斷相關的預測不確定性。鑒定臨床診斷為MCI的患者中腦淀粉樣蛋白沉積的存在或不存在的能力有可能大大增加預測轉化為AD的準確性。
與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病種類包括但不限于阿爾茨海默病、唐氏綜合征、2型糖尿病、遺傳性腦出血淀粉樣變(荷蘭人)、淀粉樣蛋白A(活性的)、繼發(fā)性淀粉樣變、家族性地中海熱、伴有蕁麻疹和耳聾的家族性淀粉樣蛋白腎病(穆-韋綜合征)、淀粉樣蛋白λL-鏈或淀粉樣蛋白κL-鏈(自發(fā)性的，與骨髓瘤或巨球蛋白血癥相關)、Aβ2M(長期血液透析)、ATTR(家族性淀粉樣蛋白多神經(jīng)病(葡萄牙人、日本人、瑞典人))、家族性淀粉樣蛋白心肌病(丹麥人)、分離的心臟淀粉樣蛋白、系統(tǒng)性老年淀粉樣變、AIAPP或淀粉不溶素胰島素瘤、心房鈉利尿因子(分離的心房淀粉樣蛋白)、降鈣素原(甲狀腺髓樣瘤)、凝溶膠蛋白(家族性淀粉樣變(芬蘭人))、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(伴有淀粉樣變的遺傳性腦出血(冰島人))、AApo-A-I(家族性淀粉樣蛋白多神經(jīng)病-Iowa)、AApo-A-II(小鼠加速衰老)、與纖維蛋白原相關的淀粉樣蛋白；以及去唾液酸糖蛋白或Pr P-27(瘙癢病、克雅病、格-施-沙綜合征、牛海綿狀腦病)或在載脂蛋白E4等位基因純合的人的情況下、以及與載脂蛋白E4等位基因純合性相關的病況或亨廷頓病。在一個實施方案中，所述與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病是淀粉樣蛋白斑塊沉積疾病。與淀粉樣蛋白沉積相關的一種具體疾病是AD。
因此，根據(jù)本發(fā)明，鑒別患者處于淀粉樣蛋白沉積疾病前驅癥狀的基本方法必須具有 (a)給有此需要的表現(xiàn)出臨床癡呆病征的患者或表現(xiàn)出輕度認知障礙病征的患者施用有效量的上述式(I)化合物或其可藥用鹽； (b)對所述患者成像以獲取數(shù)據(jù)；以及 (c)分析所述數(shù)據(jù)以確定所述患者中的淀粉樣蛋白的水平(參照標準患者)。
一個實施方案涉及診斷表現(xiàn)出可疑病因的癡呆患者的方法。該方法包括基于發(fā)現(xiàn)的淀粉樣蛋白沉積來確定可疑病因的癡呆是否可能是AD或另一種淀粉樣蛋白沉積病癥。該方法包括給患者施用式(I)化合物、對所述患者成像以獲取數(shù)據(jù)以及基于發(fā)現(xiàn)的淀粉樣蛋白沉積來確定該可疑病因的癡呆是否是AD。
術語“可疑病因的癡呆性疾病”指這樣的病況人表現(xiàn)出臨床評價(所述臨床評價由癡呆性病癥診斷領域的技術人員所共同做出的神經(jīng)學、精神病學、醫(yī)學和神經(jīng)心理學方面的評價組成)，并且在臨床評價后，所述評價者發(fā)現(xiàn)可能存在某些癡呆性病癥的證據(jù)(基于主觀記憶陳訴、通過與所述偏離正常機能者熟悉的病史陳訴者對記憶陳訴的描述、或者在本領域技術人員普遍使用的神經(jīng)心理和臨床測試方面的較差表現(xiàn))，但不能發(fā)現(xiàn)任何單一臨床上定義的癡呆型病癥(比如AD、額顳葉癡呆、路易體癡呆、血管性癡呆、由于重性抑郁導致的假性癡呆、克雅病以及本領域技術人員已知的其它病癥)的足夠證據(jù)，或者發(fā)現(xiàn)該人表現(xiàn)多于一種單一癡呆性病癥的證據(jù)，達到對于該人中這兩種(或更多種)癡呆性病癥的區(qū)分成問題的程度。
本發(fā)明的此實施方案使用淀粉樣蛋白成像劑與非侵入性神經(jīng)成像技術相結合，所述非侵入性神經(jīng)成像技術比如磁共振波譜(MRS)或磁共振成像(MRI)、或γ成像比如正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或單光子發(fā)射計算機斷層掃描(SPECT)，用于在體內量化淀粉樣蛋白沉積。這些成像技術獲得關于多個腦區(qū)域的數(shù)據(jù)。通過描繪“感興趣區(qū)域或ROI”而得到對具體區(qū)域的量化。
根據(jù)本實施方案，可將使用上述成像技術之一獲得的患者數(shù)據(jù)與來自標準患者的數(shù)據(jù)比較，并基于區(qū)分前驅癥狀患者與淀粉樣蛋白沉積疾病的標準臨床診斷的標準得出結論。
采用同樣方案，可比較得自用于患者的成像技術的數(shù)據(jù)以便 確定可疑病因的癡呆病癥系由淀粉樣蛋白沉積疾病所引起； 區(qū)分阿爾茨海默病與額顳葉癡呆； 監(jiān)測患者以確定阿爾茨海默病的發(fā)作； 診斷臨床已診斷為輕度認知障礙的患者的阿爾茨海默病； 鑒別患者處于阿爾茨海默病前驅期； 鑒別患者患有與淀粉樣蛋白沉積相關的病癥，其中所述患者表現(xiàn)有可疑病因的癡呆性病癥；或者 鑒別患者患有阿爾茨海默病，其中所述患者表現(xiàn)有可疑病因的癡呆性病癥。
淀粉樣蛋白成像的數(shù)據(jù)分析 所得數(shù)據(jù)可用標準吸收值(SUV)或用藥代動力學模型參數(shù)比如相對于參比組織如小腦的洛根分布體積比(Logan distribution volume ratio)(DVR)來定量表示。超過SUV或DVR典型對照值一倍標準差以上的對象被認為是“陽性”測試，并被認為處于淀粉樣蛋白沉積疾病如AD的臨床診斷的前驅期。具體地，如果對象在額葉皮質、頂葉皮質或后扣帶回皮質中在40-60分鐘的平均SUV大于1.0，則可認為其為“陽性”。此值將AD患者與初始人研究中的對照清楚地區(qū)分開(Klunk等，2004，Ann.Neurol.，55(3)306-19)(參見圖2)。同樣，如果對象在額葉皮質、頂葉皮質或后扣帶回皮質中的洛根DVR值超過1.5，則可認為其為“陽性”(參見圖3)。這些腦區(qū)域和確切的截止值僅作為實例給出，進一步的研究可發(fā)現(xiàn)其它可用的腦區(qū)域，所述截止值可被改進，并且可應用其它的模型技術(比如房室模型、圖解分析、參比組織模型或光譜分析)確定這些截止值。此外，可由圖像定性解釋掃描數(shù)據(jù)，比如
圖1中的圖反映了SUV、洛根DVR或其它參數(shù)的區(qū)域性腦分布，其中解釋PET掃描的領域的普通技術人員能確定淀粉樣蛋白的定性量和分布與臨床診斷的淀粉樣蛋白沉積疾病的前驅期一致。
在本發(fā)明的另一個實施方案中，對含有至少一種淀粉樣蛋白沉積物的對象或處于含有至少一種淀粉樣蛋白沉積物的風險的對象進行體內或體外檢測，所述淀粉樣蛋白沉積物即包含至少一種促淀粉樣變蛋白的沉積物，所述檢測通過必須包含以下步驟的方法進行 (a)給患有與淀粉樣變相關疾病的對象施用可檢測量的包含至少一種上述式(I)化合物及其可藥用鹽的藥物組合物；和 (b)檢測所述化合物與包含至少一種促淀粉樣變蛋白的淀粉樣蛋白沉積物的結合，其中所述促淀粉樣變蛋白選自AL、AH、ATTR、Aβ2M、AA、AApoAI、AApoAII、AGel、ALys、AFib、ACys、ABri、ADan、APrP、ACal、AlAPP、AANF、APro、AIns、AMed、AKer、A(tbn)和ALac。
在原發(fā)性全身淀粉樣變(AL)中，所述促淀粉樣變蛋白可以是由無性系的漿細胞產(chǎn)生的異常一致的單克隆免疫球蛋白輕鏈(κ或λ)。原纖維在腎、心、肝和其它器官/組織中沉積。
在少數(shù)情況下，免疫球蛋白鏈淀粉樣變原纖維僅包含重鏈序列而不含輕鏈序列。在這些情況下，所述疾病稱為“重鏈淀粉樣變”(AH)。
在轉甲狀腺素蛋白淀粉樣變中，所述前體蛋白是正常或突變序列的TTR(一種在肝臟和脈絡叢中合成的轉運蛋白)。TTR是4個同樣的每個127個氨基酸亞基組成的四聚體。正常序列的TTR在老年(＞70歲)個體的心室中形成淀粉樣蛋白沉積物；此疾病又稱為“老年性心臟淀粉樣變”。TTR心臟淀粉樣變的流行性隨年齡而逐漸增加，影響著25％或更多的超過90歲的老年人群。正常序列的ATTR可以是偶然尸檢所見，或者其可引起臨床癥狀(例如心力衰竭和心律失常)。
TTR的點突變增加了TTR形成淀粉樣蛋白的趨勢。形成淀粉樣變的TTR突變是作為具有可變外顯率的常染色體顯性疾病遺傳的。已知超過60種的形成淀粉樣變的TTR突變。最普遍的TTR突變是TTR Val30Met(在葡萄牙、日本和瑞典常見)和TTR Val122Ile(3.9％的非洲裔美國人攜帶)。形成淀粉樣變的TTR突變主要引起在外周神經(jīng)、心臟、胃腸道和玻璃體中的沉淀物。
在β2微球蛋白淀粉樣變中，所述前體蛋白是正常的β微球蛋白(β2M)，其為主要組織相容性復合體的輕鏈組分。在臨床環(huán)境下，β2M與進行透析的患者相關，在罕見情況下與不進行透析的腎衰竭患者相關。
β2M通常在腎臟中發(fā)生分解代謝。在腎衰竭患者中，蛋白質在血清中累積。常規(guī)的透析膜不會除去β2M；因此，透析患者的血清水平可高達參比范圍值的30-60倍。所涉及的典型器官包括腕關節(jié)韌帶、可能的滑膜(引起關節(jié)病和骨囊腫)和心臟、胃腸道、肝、肺、前列腺、腎上腺和舌。
淀粉樣蛋白A(AA)淀粉樣變是全世界內系統(tǒng)性淀粉樣變的最普遍形式。其發(fā)生于感染性或非感染性病因的慢性炎性疾病的過程中。在AA中，腎、肝和脾是主要的涉及部位。
載脂蛋白AI淀粉樣變(AApoAI)是一種由apoAI基因的點突變引起的常染色體顯性的淀粉樣變。通常，此淀粉樣變是一種顯著的腎淀粉樣蛋白。一些家族具有外周神經(jīng)病或心臟病。ApoAI(可能來自正常序列)還是老年人主動脈中局限性淀粉樣蛋白斑塊中的原纖維前體。
載脂蛋白AII淀粉樣變(AApoAII)是一種由apoAII基因的點突變引起的常染色體顯性的淀粉樣變。所述的具有此癥狀的兩個家族各自在終止密碼子上攜帶點突變，導致形成異常長的蛋白質。
凝溶膠蛋白淀粉樣變(AGel)中的前體蛋白是調節(jié)肌動蛋白的蛋白凝溶膠蛋白。淀粉樣蛋白原纖維包括含有點突變的凝溶膠蛋白片段。
纖維蛋白原淀粉樣變(AFib)是一種由纖維蛋白原α鏈基因的點突變引起的常染色體顯性的淀粉樣變。
溶菌酶淀粉樣變(ALys)是一種由溶菌酶基因的點突變引起的常染色體顯性的淀粉樣變。
半胱氨酸蛋白酶抑制劑C淀粉樣變(ACys)中的前體蛋白是半胱氨酸蛋白酶抑制劑C，其為一種含有點突變的半胱氨酸蛋白酶抑制劑。此病況臨床上命名為HCHWA(冰島型)。ACys是常染色體顯性的。臨床癥狀包括在生命中開始的第二個十年或第三個十年中發(fā)生多次中風和精神狀態(tài)改變。發(fā)病機制在于突變的半胱氨酸蛋白酶抑制劑之一廣泛分布于組織中，但原纖維僅在腦血管中形成；因此，認為局部病況在原纖維形成中起到作用。
朊病毒蛋白淀粉樣變(APrP)中的前體蛋白是一種朊病毒蛋白，其為一種質膜糖蛋白。病因是感染性的(即庫魯病)或遺傳性的(即克雅病(CJD)、格-施-沙(GSS)綜合征、致死性家族性失眠(FFI))。感染單位是朊病毒蛋白，其引起由宿主染色體基因編碼的同源蛋白質的構象改變。CJD、GSS和FFI的患者在朊病毒蛋白基因上攜帶常染色體顯性的形成淀粉樣蛋白的突變；因此，甚至在缺少感染性觸發(fā)劑的情況下也形成淀粉樣變。
在降鈣素淀粉樣變中(ACal)，所述前體蛋白是降鈣素(一種由甲狀腺合成的調節(jié)鈣的激素)。具有甲狀腺髓樣癌的患者可能在腫瘤中發(fā)生局限性的淀粉樣蛋白沉積，其由正常序列的降鈣素原(ACal)組成。推測的發(fā)病機制是局部鈣形成增加，導致足夠高的引起聚合和原纖維形成的局部肽濃度。
在胰島淀粉樣蛋白多肽淀粉樣變(AIAPP)中，所述前體蛋白是胰島淀粉樣蛋白多肽(IAPP)，又稱為淀粉不溶素。IAPP是一種由胰島β細胞分泌的蛋白，與胰島素共同儲存在分泌顆粒中并與胰島素一起釋放。通常，IAPP調節(jié)骨骼肌中的胰島素活性。IAPP淀粉樣蛋白發(fā)現(xiàn)于胰島素瘤中以及很多患有2型糖尿病的患者的胰腺中。
心房鈉利尿因子淀粉樣變與前體蛋白心房鈉利尿因子(ANF)相關，所述心房鈉利尿因子是一種控制鹽和水動態(tài)平衡的激素，其由心房合成。淀粉樣蛋白沉積物局限于心房。此病況在老年人中高度流行。心房鈉利尿因子淀粉樣變(AANF)在患有長期存在的充血性心力衰竭的患者中最為常見，大概是由于持續(xù)產(chǎn)生ANF所致。
在促乳素淀粉樣蛋白(APro)中，促乳素或促乳素片段發(fā)現(xiàn)于垂體淀粉樣蛋白中。此病況常見于老年人中，并且還已報道于具有產(chǎn)生促乳素的垂體瘤患者的淀粉樣瘤(amyloidoma)中。
皮膚的淀粉樣蛋白與一些抗角蛋白抗體反應而產(chǎn)生局限性形式的淀粉樣變。然而，對原纖維的確切身份沒有在角蛋白淀粉樣物質中得到化學確認，但是它們被稱作角蛋白淀粉樣蛋白(AKer)。
主動脈內淀粉樣蛋白發(fā)生于大多數(shù)超過60歲的人中。內淀粉樣蛋白(AMed)源自乳凝集素(lactadherin)的蛋白水解片段，所述乳凝集素為一種由哺乳動物上皮表達的糖蛋白。
家族性英國型癡呆(FBD)的神經(jīng)病理學特征在于獨特的形成淀粉樣蛋白的蛋白ABri的沉積。它是前體蛋白BRI的異常形式的片段。
在家族性丹麥型癡呆(FDD)中，在BRI基因3’區(qū)域的密碼子265和266之間的十聚體副本源自名為ADan的淀粉樣肽(比由正常BRI基因產(chǎn)生的野生型肽長11個殘基)。已發(fā)現(xiàn)ADan沉積物廣泛分布于FDD病例的CNS中。ADan的沉積物主要是非原纖維聚合體。
ABri和ADan肽是源自較大的稱為BRI前體蛋白并由13號染色體上的BRI基因編碼的膜錨定前體蛋白的片段。
牙源性鈣化上皮瘤(Pindborg tumor)的特征在于產(chǎn)生大量的淀粉樣蛋白并存在鈣化的板層小體。與此綜合征相關的淀粉樣蛋白尚未命名，但通常稱為A(tbn)。
淀粉樣蛋白原纖維可以在缺乏血清淀粉樣蛋白P(SAP)成分和硫酸肝素蛋白聚糖的情況下由幾種天然多肽(比如胰島素)形成。這產(chǎn)生了淀粉樣蛋白AIns，其前體為胰島素。
另一種蛋白乳鐵傳遞蛋白作為家族性上皮下角膜淀粉樣變中的主要原纖維蛋白而報道。推測結構異?；虍惓Ｔ黾拥难鍧舛犬a(chǎn)生淀粉樣蛋白ALac。
通過本發(fā)明的硫黃素化合物檢測促淀粉樣變蛋白。所述硫黃素化合物靶向至少一種促淀粉樣變蛋白，所述促淀粉樣變蛋白源自至少一種選自以下的蛋白前體免疫球蛋白輕鏈、免疫球蛋白重鏈、轉甲狀腺素蛋白、β2微球蛋白、(載脂蛋白)血清AA((Apo)serum AA)、載脂蛋白AI、載脂蛋白AII、凝溶膠蛋白、溶菌酶、纖維蛋白原α鏈、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C、ABriPP、ADanPP、朊病毒蛋白、降鈣素(原)、胰島淀粉樣多肽、心房利鈉因子、促乳素、胰島素、乳凝集素、角膜上皮素(kerato-epithelin)、與牙源性鈣化上皮瘤相關的前體蛋白(tbn)以及乳鐵傳遞蛋白。使得受影響組織發(fā)生不同綜合征或疾病的正是這些蛋白標靶。參見Buxbaum，Curr.Opin Rheumatol 1667-75(2003)。還參見Merlini和Westermark，J InternMed 255159-178(2004)。
＊＊＊＊ 給出以下實施例以舉例說明本發(fā)明。然而，應當理解，本發(fā)明并不限于在這些實施例中所描述的具體條件或細節(jié)。通過整個說明書，任何以及全部的可公開獲得的文件的參考，包括美國專利，均通過引用具體并入本文中，如同在本文中將其全部列出一樣。
實施例 合成實施例 實施例15-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的合成
方案試劑和條件a.Na2S.9H2O，回流，20h，b.4-氟代苯甲醛，DMSO，110℃，5h a.2-氨基-4-甲氧基苯硫酚在氮氣下并在攪拌下將在水(45mL)中的4-氯-3-硝基苯甲醚(5.0g，26.7mmol)和Na2S.9H2O(17.3g，72.1mmol)的混合物回流20小時。將反應混合物冷卻至室溫并以5％HCl中和至pH7。以乙酸乙酯(20mL×3)萃取水溶液。合并萃取物，以MgSO4干燥并蒸發(fā)至干，得到所期望的化合物(4.1g，98.9％)。
b.5-甲氧基-2-(4’-氟代苯基)苯并噻唑將2-氨基-4-甲氧基苯酚(50mg，0.33mmol)和4-氟苯甲醛(45mg，0.36mmol)在DMSO(1mL)中的混合物在110℃下加熱5小時。將反應混合物冷卻至室溫，倒入水(5mL)中，并以乙酸乙酯(3×2mL)萃取。合并萃取物并以水清洗，以MgSO4干燥，蒸發(fā)至干，將殘留物通過制備性TLC(己烷∶乙酸乙酯4∶1)純化，得到所期望化合物的類白色固體(35mg，40.9％)。
1H-NMR(300MHz，丙酮-d6)δ8.13-8.20(m，2H)，7.94(d，J＝8.8Hz，1H)，7.56(d，J＝2.4Hz，1H)，7.32(t，J1＝J2＝8.7Hz，2H)，7.10(dd，J1＝2.4Hz，J2＝8.8Hz，1H)，3.93(s，3H). 實施例26-甲氧基-2-(2’-羥基-4’-氟苯基)苯并噻唑的合成
方案PPA，140℃，2.5h 向2-羥基-4-氟苯甲酸(61mg，0.39mmol)和2-氨基-5-甲氧基苯硫酚(93mg，0.6mmol)的混合物中加入多聚磷酸(“PPA”)(2.4g)。在攪拌下于140℃將混合物加熱2.5小時。冷卻至室溫以后，向混合物中緩慢加入飽和的NaHCO3以中和PPA，并用EtOAc萃取混合物。合并有機層并蒸發(fā)至干。使用制備性硅膠TLC(己烷/乙酸乙酯3/1)分離殘留物，得到標題產(chǎn)物(25mg，0.091mmol，產(chǎn)率23％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3，ppm)δ12.68(寬峰，1H)，7.82(d，1H)，7.57(dd，1H)，7.31(d，1H)，7.07(dd，1H)，6.76(dd，1H)，6.41(m，1H)，3.88(s，3H). 實施例36-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的合成
方案DMSO，120℃，2h 將2-氨基-5-甲氧基苯酚(155mg，1mmol)和4-氟苯甲醛(123mg，1mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在120℃下加熱2小時。將反應混合物冷卻至室溫，倒入水(10mL)中，并以乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并萃取物并以水清洗，以MgSO4干燥，蒸發(fā)至干，將殘留物通過快速柱(己烷/乙酸乙酯95/5)純化，得到所期望化合物的類白色固體(103mg，39.8％)。
1H-NMR(300MHz，丙酮-d6ppm)δ8.14(dd，J1＝5.3Hz，J2＝9.0Hz，2H)，7.92(d，J＝8.9Hz，1H)，7.63(d，J＝2.5Hz，1H)，7.33(t，J1＝J2＝8.7Hz，2H) 7.15(dd，J1＝2.6Hz，J2＝8.9Hz，1H)，3.91(s，3H). 實施例42-(2’-氨基-4’-氟苯基)苯并噻唑的合成
方案PPA，130℃，18h 在攪拌下將2-氨基-4-氟苯甲酸(310mg，2mmol)、2-氨基苯硫酚(250mg，2mmol)和PPA(～2g)的混合物于130℃下加熱18小時。在冷卻至室溫后，向混合物中緩慢加入飽和的NaHCO3以中和PPA，并以EtOAc萃取溶液。合并萃取物并蒸發(fā)至干，通過快速柱(己烷/乙酸乙酯4/1)純化殘留物，得到所期望的產(chǎn)物(140.7mg，產(chǎn)率28.8％)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6，ppm)δ8.30-8.09(m，2H)，7.79(dd，J1＝6.4Hz，J2＝8.8Hz，1H)，7.71(s，2H，NH2)，7.49-7.64(m，2H)，6.75(dd，J1＝2.6Hz，J2＝11.8Hz，1H)，6.58(dt，J1＝J2＝8.3Hz，J3＝2.6Hz，1H). 通過類似方法，利用本領域技術人員已知的常規(guī)有機轉化和取代制備上述表1和表2中所公開的其它苯并噻唑化合物。
生物學實施例 進入小鼠腦的研究 將在乙醇中的[F-18]-6-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑用生理鹽水稀釋以制備每mL含有約500微居里的溶液。將野生型瑞士Webster小鼠稱重，通過側尾靜脈注射約30微居里，并在注射后的不同時間處死。在死亡時通過心臟穿刺取出全血樣品，迅速取下腦并解剖為小腦和全腦(無腦干)。還除去每只小鼠的股骨以測定[18F]氟的代謝程度。在帶有校準注射液部分的γ射線井式計數(shù)器中測定這些部分，將樣品按注射時間進行衰變校正。稱重樣品，確定每克組織注射劑量的百分數(shù)(％ID/g)并按小鼠體重歸一化((％ID＊kg)/g)。
進入狒狒腦的研究 將40kg的狒狒麻醉、固定并置于通風設備上。將狒狒置于PET掃描儀中以對腦成像，進行透射掃描以校正衰減。給狒狒靜脈內注射含有8mCi的[F-18]-6-甲氧基-2-(4’-氟苯基)苯并噻唑的溶液，并在注射后2小時中在一系列逐漸增加的數(shù)據(jù)采集時間的箱中對腦成像。采集數(shù)據(jù)后，將圖像重構并畫出感興趣的區(qū)域。對于每個區(qū)域中產(chǎn)生校正衰變和注意力的時間-活性曲線(TAC)，以測定每個腦區(qū)域中放射性的定量時間過程。這些TAC表明了放射性示蹤劑的極好的腦穿透性以及放射性從正常狒狒腦中的快速清除。這些體內性質連同所述配體在體外與聚集的淀粉樣蛋白的相對高的親和力表明所述化合物是潛在有用的淀粉樣蛋白成像劑。
與Aβ合成肽的結合親和力的表征 如前所述，使用合成的Aβ(1-40)和2-(4’-[3H]甲氨基-苯基)-苯并噻唑([3H]BTA-1)在磷酸鹽緩沖鹽水(pH 7.4)中對苯并噻唑衍生物結合的特征進行分析(Klunk等，Life Sci.691471(2001)；Mathis等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，12295(2002))。下表列出了示例性的苯并噻唑化合物的抑制常數(shù)(Ki)，用于表示與合成的Aβ(1-40)競爭對[3H]BTA-1的結合。Ki值低于20nM的化合物示例性地用作體內PET放射性示蹤劑。
權利要求
1.一種結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H。
2.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、-N(R11)2和OR11。
3.根據(jù)權利要求2的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中R8和R9獨立地為OR11。
4.根據(jù)權利要求3的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中R7和R10各自為H。
5.根據(jù)權利要求4的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中R3、R4、R5和R6各自為H。
6.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中Y選自F、Cl、Br、I和-NO2。
7.根據(jù)權利要求6的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中Y為F。
8.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中R3、R4、R5和R6、R7以及R10各自為H，R8和R9獨立地為OR11。
9.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中Y包含可檢測的標記物。
10.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物選自
11.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其具有下式
12.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其具有下式
13.根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其具有下式
14.一種藥物組合物，其包含
(i)有效量的根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物；和
(ii)可藥用載體。
15.一種體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括
(i)給哺乳動物施用有效量的根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物會結合所述哺乳動物內的任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和
(ii)檢測該化合物與哺乳動物體內一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
16.根據(jù)權利要求15的方法，其中所述一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物位于所述哺乳動物的腦內。
17.根據(jù)權利要求15的方法，其中所述哺乳動物是疑似患有阿爾茨海默病、家族性阿爾茨海默病、唐氏綜合征或載脂蛋白E4等位基因純合的人。
18.根據(jù)權利要求15的方法，其中所述檢測是通過γ成像、磁共振成像或磁共振波譜實現(xiàn)的。
19.根據(jù)權利要求18的方法，其中所述檢測是通過γ成像實現(xiàn)的。
20.根據(jù)權利要求19的方法，其中所述γ成像是PET或SPECT。
21.根據(jù)權利要求15的方法，其中靜脈內施用所述化合物。
22.一種體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括
(i)使機體組織接觸有效量的根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物會結合所述組織內的任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和
(ii)檢測所述化合物與所述組織內一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
23.根據(jù)權利要求22的方法，其中所述化合物處于溶液中，所述溶液還含有25-99％的乙醇，所述溶液的余下部分為水。
24.根據(jù)權利要求22的方法，其中所述溶液包含0-50％的乙醇和0.0001～100μM的所述化合物。
25.根據(jù)權利要求22的方法，其中所述檢測通過亮視野顯微術、熒光顯微術、激光共聚焦顯微術和交叉極化顯微術實現(xiàn)。
26.根據(jù)權利要求22的方法，其中所述方法還包括
(iii)從所述組織中分離出與所述化合物結合的一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和
(iv)量化與所述化合物結合的所述一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物。
27.一種區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法，包括
(i)獲取來自正常哺乳動物和疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的(a)小腦和(b)同一腦的其它區(qū)域的組織；
(ii)使所述組織與根據(jù)權利要求1的結合淀粉樣蛋白的化合物接觸；
(iii)量化與所述化合物結合的淀粉樣蛋白；
(iv)計算(a)腦中除小腦以外的區(qū)域中淀粉樣蛋白的量相對于(b)小腦中淀粉樣蛋白的量的比例；以及
(v)將正常哺乳動物的該比例與疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的該比例進行比較。
28.根據(jù)權利要求27的方法，其中將對象中(i)所述化合物與除小腦之外的腦區(qū)域的結合與(ii)所述化合物與小腦的結合的比例和正常對象中的該比例進行比較。
29.一種在人或動物活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的方法，所述方法包括以下步驟
(a)使用結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽的溶液孵育福爾馬林固定的或新鮮冷凍的組織以形成被標記的沉積物
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H；
(b)檢測所述被標記的沉積物。
30.根據(jù)權利要求29的方法，其中所述溶液含有25-100％的乙醇，所述溶液的余下部分為水，其中所述溶液被式(I)化合物飽和。
31.根據(jù)權利要求30的方法，其中所述溶液包含含有0-50％乙醇的水緩沖液，其中所述溶液含有0.0001～100μM的式(I)化合物。
32.根據(jù)權利要求29的方法，其中所述檢測通過選自以下的顯微技術而實現(xiàn)亮視野顯微術、熒光顯微術、激光共聚焦顯微術和交叉極化顯微術。
33.一種量化活檢或尸檢組織中的淀粉樣蛋白的方法，所述方法包括以下步驟
a)使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽的放射性標記衍生物與活檢組織或尸檢組織的勻漿一起孵育，其中所述化合物中至少一個取代基被選自125I、3H和含碳取代基的放射性標記物所標記，其中至少一個碳是14C；
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H；
b)將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物和未與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物分離，
c)量化與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物，以及
d)通過與標準物比較，將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物的單位轉換為每100mg組織中淀粉樣蛋白的微克數(shù)的單位。
34.一種使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結結合的方法，所述腦組織中包含淀粉樣蛋白斑塊和神經(jīng)原纖維纏結二者，所述方法包括在體外結合或染色試驗中使所述淀粉樣蛋白斑塊與濃度低于約10nM的式(I)化合物接觸
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H。
35.一種在體內使結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結結合的方法，所述腦組織中包含淀粉樣蛋白斑塊和神經(jīng)原纖維纏結二者，所述方法包括施用有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽，以在體內使所施用化合物的血液濃度保持低于約10nM
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H。
36.一種用于檢測對象中包含至少一種促淀粉樣變蛋白的至少一種淀粉樣蛋白沉積物的體內或體外方法，所述方法包括以下步驟
(a)給患有與淀粉樣變相關的疾病的患者施用可檢測量的藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體，
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H；和
(b)檢測所述化合物與包含至少一種促淀粉樣變蛋白的淀粉樣蛋白沉積物的結合。
37.根據(jù)權利要求36的方法，其中所述對象患有與系統(tǒng)性淀粉樣變相關的疾病。
38.根據(jù)權利要求37的方法，其中所述至少一種淀粉樣蛋白沉積物位于所述對象的中胚層組織內。
39.根據(jù)權利要求38的方法，其中所述組織選自外周神經(jīng)、皮膚、舌、關節(jié)、心或肝。
40.根據(jù)權利要求37的方法，其中所述至少一種淀粉樣蛋白沉積物位于實質器官內。
41.根據(jù)權利要求40的方法，其中所述器官選自脾、腎、肝和腎上腺。
42.根據(jù)權利要求37的方法，其中所述與系統(tǒng)性淀粉樣變相關的疾病選自多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、慢性炎性疾病、類風濕性關節(jié)炎、感染性疾病、皮肌炎、硬皮病、局限性腸炎、潰瘍性結腸炎、結核病、慢性骨髓炎、支氣管擴張、皮膚膿腫、肺膿腫、癌癥、霍奇金病、家族遺傳性淀粉樣變、家族性地中海熱、家族性癡呆和家族性淀粉樣多神經(jīng)病。
43.根據(jù)權利要求42的方法，其中所述皮膚膿腫或肺膿腫由皮下使用海洛因而引起。
44.根據(jù)權利要求36的方法，其中所述檢測選自γ成像、磁共振成像和磁共振波譜。
45.根據(jù)權利要求44的方法，其中所述檢測通過γ成像進行，并且所述γ成像是PET或SPECT。
46.根據(jù)權利要求36的方法，其中所述藥物組合物通過靜脈內注射施用。
47.根據(jù)權利要求36的方法，其中所述對象因慢性腎衰竭而正在接受透析。
48.根據(jù)權利要求36的方法，其中所述對象正患有與局限性淀粉樣變相關的疾病。
49.根據(jù)權利要求48的方法，其中所述至少一種淀粉樣蛋白沉積物位于選自以下的組織內腱鞘、關節(jié)、主動脈、甲狀腺、胰島、老化垂體、醫(yī)源性組織、心房和角膜。
50.根據(jù)權利要求48的方法，其中所述至少一種淀粉樣蛋白沉積物位于胰腺內。
51.根據(jù)權利要求48的方法，其中所述與局限性淀粉樣變相關的疾病選自原發(fā)性骨髓瘤、家族性癡呆、海綿狀腦病、c細胞甲狀腺腫瘤、胰島素瘤、催乳素瘤和牙源性鈣化上皮瘤。
52.一種鑒別患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期的方法，包括
(a)給表現(xiàn)有臨床癡呆征兆或輕度認知障礙臨床征兆的患者施用結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H；然后
(b)對所述患者成像以獲取數(shù)據(jù)；以及
(c)參考標準化水平，分析所述數(shù)據(jù)以確定所述患者體內的淀粉樣蛋白水平，從而鑒別所述患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期。
53.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述患者被診斷為輕度認知障礙。
54.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述淀粉樣疾病是阿爾茨海默病。
55.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述成像選自γ成像、磁共振成像和磁共振波譜。
56.根據(jù)權利要求55的方法，其中所述成像通過γ成像進行，并且所述γ成像是PET或SPECT。
57.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述數(shù)據(jù)將可疑病因的癡呆性疾病確定為由淀粉樣蛋白沉積疾病引起。
58.根據(jù)權利要求57的方法，包括區(qū)分阿爾茨海默病與額顳葉癡呆。
59.根據(jù)權利要求53的方法，還包括監(jiān)測所述患者以確定阿爾茨海默病的發(fā)作。
60.根據(jù)權利要求52的方法，其還包括在臨床診斷為輕度認知障礙的患者中診斷阿爾茨海默病。
61.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述與淀粉樣蛋白沉積相關的疾病是阿爾茨海默病。
62.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述患者表現(xiàn)出可疑病因的癡呆性病癥。
63.根據(jù)權利要求62的方法，其中所述患者患有未診斷的AD。
64.根據(jù)權利要求52的方法，其中所述患者患有未診斷的AD。
65.一種確定淀粉樣變治療療效的方法，包括
(a)給有此需要的患者施用有效量的結合淀粉樣蛋白的式(I)化合物或其可藥用鹽
其中
Y是H、NO2、-NR’3+、F、Cl、Br、I或-(CR’2)n-X；
其中
X是F、Cl、Br或I；和
n為1～5；
R’是H或低級烷基；
R3-R10獨立地選自H、F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-N(R’)3+、-NO2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11、COOR11、Rph、-CR11＝CR11-Rph和-C(R11)2-C(R11)2-Rph，其中
X是F、Cl、Br或I；和
Rph是任選被選自以下的一個或更多個取代基取代的苯基F、Cl、Br、I、C1-C5烷基、(CH2)1-3-OR11、CF3、-(CH2)1-3-X、-O-(CH2)1-3-X、CN、-CO-R11、-N(R11)2、-CO-N(R11)2、-O-(CO)-R11、OR11、SR11和COOR11，
每個R11獨立地為H或C1-C5烷基；和
Y或R3-R10包含至少一種選自以下的可檢測標記物131I、123I、124I、125I、76Br、75Br、18F、19F、11C、13C、14C和3H；
(b)對所述患者成像；然后
(c)給所述有此需要的患者施用至少一種抗淀粉樣蛋白劑；
(d)隨后給所述有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物；
(e)對所述患者成像；以及
(f)將采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療前所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平與采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療后所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平進行比較。
66.根據(jù)權利要求65的方法，其中所述藥劑包含一種或更多種針對Aβ肽的抗體。
67.根據(jù)權利要求65的方法，其中所述藥劑包含β分泌酶和/或γ分泌酶的一種或更多種抑制劑。
68.根據(jù)權利要求65的方法，其中所述藥劑包含與Aβ1-42結合的小分子。
69.根據(jù)權利要求68的方法，其中所述藥劑是誘餌肽。
70.根據(jù)權利要求65的方法，其中所述淀粉樣變是阿爾茨海默病。
71.根據(jù)權利要求65的方法，其中所述成像選自γ成像、磁共振成像和磁共振波譜。
72.根據(jù)權利要求71的方法，其中所述成像通過γ成像進行，并且所述γ成像是PET或SPECT。
73.根據(jù)權利要求68的方法，其中所述藥劑是外周降低劑。
74.選自以下的化合物
75.根據(jù)權利要求74的化合物，其中所述化合物選自
76.一種藥物組合物，其包含
(i)有效量的根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物；和
(ii)可藥用載體。
77.一種體內檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括
(i)給哺乳動物施用有效量的根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物，其中所述化合物會在所述哺乳動物體內結合任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和
(ii)檢測所述化合物在所述哺乳動物體內與一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
78.一種體外檢測一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的方法，包括
(i)使機體組織與有效量的根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物接觸，其中所述化合物會在所述組織內結合任何一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物；和
(ii)檢測所述化合物在所述組織內與一種或更多種淀粉樣蛋白沉積物的結合。
79.一種區(qū)分患有阿爾茨海默病的腦與正常腦的方法，包括
(i)獲取來自正常哺乳動物和疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的(a)小腦和(b)同一腦的另一個區(qū)域的組織；
(ii)使所述組織與根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物接觸；
(iii)量化與所述化合物結合的淀粉樣蛋白；
(iv)計算(a)在腦中除小腦以外的區(qū)域內淀粉樣蛋白的量與(b)小腦中淀粉樣蛋白的量的比例；以及
(v)將正常哺乳動物的比例與疑似患有阿爾茨海默病的哺乳動物的比例進行比較。
80.一種在人或動物的活檢或尸檢組織中檢測淀粉樣蛋白沉積物的方法，所述方法包括以下步驟
(a)使用根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽的溶液孵育福爾馬林固定的或新鮮冷凍的組織以形成被標記的沉積物，和
(b)檢測所述被標記的沉積物。
81.一種在活檢或尸檢組織中量化淀粉樣蛋白的方法，所述方法包括以下步驟
a)使根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽的放射性標記衍生物與活檢組織或尸檢組織的勻漿一起孵育，其中所述化合物中至少一個取代基被選自125I、3H和含碳取代基的放射性標記物所標記，其中所述含碳取代基中至少一個碳是14C；
b)將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物與未與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物分離，
c)量化所述與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物，以及
d)通過與標準物比較，將與組織結合的式(I)化合物的放射性標記衍生物的單位轉換為每100mg組織的淀粉樣蛋白的微克數(shù)單位。
82.一種使權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結結合的方法，所述腦組織中含有淀粉樣蛋白斑塊和神經(jīng)原纖維纏結二者，所述方法包括在體外結合或染色試驗中使所述淀粉樣蛋白斑塊與濃度低于約10nM的所述化合物接觸。
83.一種使權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽在體內與腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊選擇性結合但不與腦組織中的神經(jīng)原纖維纏結結合的方法，所述腦組織中含有淀粉樣蛋白斑塊和神經(jīng)原纖維纏結二者，所述方法包括施用有效量的所述化合物或其可藥用鹽，以使所施用化合物的血液濃度在體內保持低于約10nM。
84.一種用于檢測對象中含有至少一種促淀粉樣變蛋白的至少一種淀粉樣蛋白沉積物的體內或體外方法，所述方法包括以下步驟
(a)給患有與淀粉樣變相關疾病的對象施用可檢測量的藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體，和
(b)檢測所述化合物與包含至少一種促淀粉樣變蛋白的淀粉樣蛋白沉積物的結合。
85.一種鑒別患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期的方法，包括
(a)給表現(xiàn)有臨床癡呆征兆或輕度認知障礙臨床征兆的患者施用根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽；
(b)對所述患者成像以獲取數(shù)據(jù)，以及
(c)參考標準化水平，分析所述數(shù)據(jù)以確定所述患者體內的淀粉樣蛋白水平，從而鑒別所述患者處于與淀粉樣蛋白沉積相關疾病的前驅期。
86.一種確定淀粉樣變治療療效的方法，包括
(a)給有此需要的患者施用有效量的根據(jù)權利要求74的結合淀粉樣蛋白的化合物或其可藥用鹽；
(b)對所述患者成像；然后
(c)給所述有此需要的患者施用至少一種抗淀粉樣蛋白劑；
(d)隨后給所述有此需要的患者施用有效量的根據(jù)權利要求74的化合物；
(e)對所述患者成像；以及
(f)將采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療前所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平與采用所述至少一種抗淀粉樣蛋白劑治療后所述患者中淀粉樣蛋白沉積的水平進行比較。
全文摘要
本發(fā)明提供了分離的利奈唑胺(linezolid)雜質去氟利奈唑胺、其制備方法及其作為參比標準物的用途。
文檔編號C07D277/66GK101351458SQ200680050215
公開日2009年1月21日 申請日期2006年11月30日 優(yōu)先權日2005年12月1日
發(fā)明者威廉·E·克倫克, 小切斯特·A·馬西斯 申請人:匹茲堡大學