專利名稱：新化合物的制作方法
專利說明新化合物 本發(fā)明涉及新乙內(nèi)酰脲衍生物，它們的制備方法，含有它們的藥物組合物以及它們在治療中的用途。
金屬蛋白酶是蛋白酶類(酶)的超家族，其數(shù)量近年來顯著地增加?；诮Y(jié)構(gòu)和功能性的考慮，將這些酶已經(jīng)分為家族和亞家族，如N.M.Hooper(1994)FEBS Letters 3541-6中所述。金屬蛋白酶的例子包括基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)例如膠原酶(MMP1，MMP8，MMP13)，明膠酶(MMP2，MMP9)，溶基質(zhì)蛋白酶(stromelysins)(MMP3，MMP10，MMP11)，基質(zhì)溶解因子(matrilysin)(MMP7)，金屬彈性蛋白酶(MMP12)，成釉溶素(enamelysin)(MMP19)，MT-MMPs(MMP14，MMP15，MMP16，MMP17)；reprolysin或釉質(zhì)溶素(adamalysin)或MDC家族，其包括分泌酶和脫落酶(sheddases)例如TNF轉(zhuǎn)化酶(ADAM 10和TACE)；龍蝦肽酶家族(astacinfamily)，包括酶例如溶膠原加工蛋白酶(PCP)；及其它金屬蛋白酶例如可聚蛋白聚糖(aggrecanase)，內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶家族和血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶家族。
人們認為金屬蛋白酶在涉及組織再造(例如胚胎發(fā)育、骨形成和月經(jīng)期間的子宮再造)的生理病過程的多血癥中是重要的。這基于金屬蛋白酶斷裂大量基質(zhì)底物例如膠原、蛋白多糖和纖連蛋白的能力。也認為金屬蛋白酶在生物學重要細胞介質(zhì)(例如腫瘤壞死因子(TNF))的加工或分泌、以及生物學重要膜蛋白質(zhì)(例如低親合性IgE受體CD23)的后翻譯蛋白酶解加工或脫落中是重要的(對于更全面的列舉，見N.M.Hooper等人，(1997)Biochem J.321265-279)。
金屬蛋白酶與許多疾病或病癥有關。抑制一或多種金屬蛋白酶的活性可以在下列這些疾病或病癥中是非常有益的，例如各種炎癥性和變態(tài)反應性疾病例如，關節(jié)炎癥(特別是類風濕性關節(jié)炎，骨關節(jié)炎和痛風)，胃腸道炎癥(特別是炎癥性腸病，潰瘍性結(jié)腸炎和胃炎)，皮膚炎癥(特別是牛皮癬，濕疹，皮炎)；腫瘤轉(zhuǎn)移或侵入；與細胞外基質(zhì)的非受控降解有關的疾病，例如骨關節(jié)炎；骨再吸收性疾病(例如骨質(zhì)疏松癥和變形性骨炎)；與異常血管生成有關的疾??；與糖尿病、牙周病(例如齦炎)、角膜潰瘍形成、皮膚潰瘍、手術(shù)后病癥(例如結(jié)腸聯(lián)結(jié)現(xiàn)象)和皮膚創(chuàng)傷愈合有關的膠原再造增加；中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘疾病(例如多發(fā)性硬化)；阿爾茨海默氏病；在心血管疾病例如再狹窄和動脈粥樣硬化中觀察到的細胞外基質(zhì)再造；哮喘；鼻炎；和慢性阻塞性肺病(COPD)。
MMP12，又稱為巨噬細胞彈性蛋白酶或金屬彈性酶，最初由Shapiro等人在小鼠中克隆出[1992，Journal of Biological Chemistry 2674664]，并且在1995年由同一小組在人類中克隆出。MMP12優(yōu)先在活化巨噬細胞中表達，并且已經(jīng)證明，可以從吸煙者的肺泡巨噬細胞中分泌[Shapiro等人，1993，Journal of Biological Chemistry，26823824]，以及從動脈粥樣硬化病變的泡沫細胞中分泌[Matsumoto等人，1998，Am J Pathol 153109]。COPD的小鼠模型基于用香煙挑戰(zhàn)小鼠，小鼠吸煙六個月，一天兩只香煙，一周六天。這種處理之后，野生型小鼠出現(xiàn)肺氣腫。當在該模型中對MMP12基因敲除小鼠進行測試時，它們沒有出現(xiàn)顯著的肺氣腫，這強烈表明MMP12是COPD發(fā)病機理的關鍵酶。MMPs例如MMP12在COPD(肺氣腫和支氣管炎)中的作用已經(jīng)，在Anderson和Shinagawa，1999，Current Opinion inAnti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs 1(1)29-38中進行了討論。最近發(fā)現(xiàn)，吸煙增加了在人類的頸動脈斑點中的巨噬細胞滲透和巨噬細胞衍生的MMP-12的表達，Kangavari[Matetzky S，F(xiàn)ishbein MC等人，Circulation 102(18)，36-39Suppl.S，Oct 31，2000]。
MMP9(明膠酶B；92kDa TypeIV膠原酶；92kDa明膠酶)是一種分泌的蛋白質(zhì)，其在1989年首先被純化、然后克隆和排序[S.M.Wilhelm等人(1989)J.Biol Chem.264(29)17213-17221；published erratum in J.Biol Chem.(1990)265(36)22570]。MMP9的最近綜述對于這種蛋白酶的詳細信息和參考文獻提供了出色來源T.H.Vu&Z.Werb(1998)(InMatrix Metalloproteinases.1998.Edited by W.C.Parks&R.P.Mecham.pp 115-148.Academic Press.ISBN0-12-545090-7)。下列要點來自T.H.Vu&Z.Werb(1998)的綜述。
MMP9的表達通常被限制在幾種細胞類型中，包括滋養(yǎng)母細胞、破骨細胞、嗜中性白細胞和巨噬細胞。然而，它的表達能在這些相同細胞和在其它細胞類型中由一些介質(zhì)引起，包括細胞與生長因子或細胞因子的接觸。這些是常常在初始炎癥性反應中牽涉的相同介質(zhì)。如同其它分泌的MMPs一樣，MMP9被釋放為非活性的酶原，隨后酶原斷裂，形成酶促的活性酶。這種體內(nèi)活化所需的蛋白酶不是已知的。活性MMP9相對于非活性酶的平衡通過與一種天然存在的蛋白TIMP-1(金屬蛋白酶-1的組織抑制劑)相互作用在體內(nèi)進一步得到調(diào)節(jié)。TIMP-1與MMP9的C-末端區(qū)域結(jié)合，導致MMP9的催化區(qū)域的抑制作用。ProMMP9的誘發(fā)表達的平衡、前MMP9至活性MMP9的裂解和TIMP-1的存在結(jié)合在一起，以測定存在于局部位點的催化活性MMP9的量。蛋白水解活性MMP9攻擊包括明膠、彈性蛋白和天然IV型和V型膠原的底物；它對天然I型膠原、粘蛋白或?qū)诱尺B蛋白沒有活性。
存在大量的數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)牽涉MMP9在各種生理學和病理過程中的作用。生理學作用包括在胚胎移植的最初階段胚胎滋養(yǎng)母細胞經(jīng)過子宮上皮侵入；在骨生長發(fā)育中的一些作用；和炎性細胞從血管系統(tǒng)遞送到組織。
與源于其它人群的液體和AM上清液相比較，在源于未經(jīng)治療的哮喘患者的液體和AM上清液中MMP9的釋放顯著地增加，MMP9的釋放是使用酶免疫分析法測定的[Am.J.Resp.Cell&Mol.Biol.，Nov 1997，17(5)583-591]。在某些其它病理學病癥中也已經(jīng)觀察到MMP9表達增加，由此在例如COPD、關節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移病變、阿爾茨海默氏病、多發(fā)性硬化、和導致急性冠狀動脈病癥(例如心肌梗塞)的動脈粥樣硬化的斑點破裂等疾病過程中牽涉MMP9。
許多金屬蛋白酶抑制劑是已知的(例如，參見下列針對MMP抑制劑的綜述Beckett R.P.and Whittaker M.，1998，Exp.Opin.Ther.Patents，8(3)259-282，和Whittaker M.等人，1999，Chemical Reviews 99(9)2735-2776)。
WO 02/074767公開了下式的乙內(nèi)酰脲衍生物
其可以作為MMP抑制劑，特別是作為有效的MMP12抑制劑。
現(xiàn)在，我們公開了又一組乙內(nèi)酰脲衍生物，它們是金屬蛋白酶的抑制劑，并在抑制MMPs(例如MMP12和MMP9)中具有特別的益處。本發(fā)明的化合物具有有益的功效、選擇性和/或藥物動力學性質(zhì)。
根據(jù)本發(fā)明，提供式(I)的化合物
式中 R1表示環(huán)丁基或環(huán)丙基；所述環(huán)丙基任選被CH3，CN或者一或兩個氟原子進一步取代； R2表示C1-3烷基或環(huán)丙基；及 A，A1和B獨立地表示CH或N； 及其藥用鹽。
式(I)的化合物可以對映異構(gòu)體的形式存在。應當理解，所有對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、外消旋體及其混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
式(I)的化合物也可以各種互變異構(gòu)的形式存在。所有可能的互變異構(gòu)形式及其混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；所述環(huán)丙基任選被一或兩個氟原子進一步取代。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基。
在一個實施方案中，R2表示甲基或乙基。在一個實施方案中，R2表示甲基。
在一個實施方案中，A和A1各自表示N。在另一實施方案中，A表示N和A1表示CH。
在一個實施方案中，B表示N。在另一實施方案中，B表示CH。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；R2表示甲基或乙基；A和A1各自表示N；及B表示CH。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；R2表示甲基或乙基；A和A1各自表示N；及B表示N。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；R2表示甲基或乙基；A表示N和A1表示CH；及B表示N。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；R2表示甲基或乙基；A表示N和A1表示CH；及B表示CH。
在一個實施方案中，R1表示環(huán)丙基；所述環(huán)丙基任選被CH3，CN或者一或兩個氟原子進一步取代；R2表示C1-3烷基；及A，A1和B獨立地表示CH或N。
除非另外指出，本文中提及的術(shù)語″C1-3烷基″表示具有1～3個碳原子的直鏈或支鏈烷基。該基團的實例包括甲基，乙基，正丙基及異丙基。
任選被一或兩個氟原子進一步取代的環(huán)丙基環(huán)的實例包括1-氟-1-環(huán)丙基，2，2-二氟-1-環(huán)丙基和2，3-二氟-1-環(huán)丙基
本發(fā)明的化合物的實例包括 (5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-({[6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-({[6-(2-環(huán)丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮； (5S)-5-甲基-5-({[6-[2-(1-甲基環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)咪唑烷-2，4-二酮；和 (5S)-5-環(huán)丙基-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮； 及其藥用鹽。
各示例的化合物代表了本發(fā)明的具體而又獨立的方面。
式(I)的化合物可以以對映體形式存在。因此，所有的對映體、非對映體、外消旋體和其混合物，包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。各種旋光異構(gòu)體可以使用傳統(tǒng)方法例如分步結(jié)晶或HPLC通過分離化合物的外消旋混合物而進行分離。可供選擇地，旋光異構(gòu)體可以通過不對稱合成或通過由光學活性原料合成而獲得。
如果本發(fā)明的化合物中存在旋光異構(gòu)體，作為本發(fā)明的獨立具體實施方案，我們公開所有的獨立光學活性形式和這些的組合，以及它們相應的外消旋體。
優(yōu)選式(I)的化合物具有如下所示的(5S)-立體化學結(jié)構(gòu)
如果本發(fā)明的化合物中存在互變異構(gòu)體，作為本發(fā)明的獨立具體實施方案，我們公開所有的獨立互變異構(gòu)形式和這些的組合。
本發(fā)明包括鹽形式的式(I)化合物。合適的鹽包括那些與有機或無機酸或有機或無機堿形成的鹽。這種鹽通常是藥用鹽，而非藥用鹽在具體化合物的制備和純化中具有應用性。這種鹽包括酸加成鹽例如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，檸檬酸鹽，甲苯磺酸鹽和馬來酸鹽，以及與磷酸或硫酸形成的鹽。在另一個方面，合適的鹽是堿鹽(base salt)，例如堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽，堿土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽，或有機胺鹽，例如三乙胺鹽。
式(I)化合物的鹽可以通過游離堿或其另一種鹽與一個或多個當量的合適酸或堿反應來形成。
式(I)的化合物是有用的，因為它們在動物中具有藥理學活性，并由此作為藥物是潛在可用的。尤其是，本發(fā)明的化合物是金屬蛋白酶抑制劑，并由此可以用于治療由MMP12和/或MMP9介導的疾病或病癥，例如哮喘，鼻炎，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，關節(jié)炎(例如類風濕性關節(jié)炎和骨關節(jié)炎)，動脈粥樣硬化和再狹窄，癌癥，侵入和轉(zhuǎn)移病變，涉及組織損壞的疾病，髖關節(jié)移位的松馳，牙周病，纖維化疾病，梗塞和心臟病，肝臟和腎纖維化，子宮內(nèi)膜異位，與細胞外基質(zhì)弱化有關的疾病，心力衰竭，主動脈瘤，CNS相關的疾病例如阿爾茨海默氏病和多發(fā)性硬化(MS)，和血液學病癥。
通常，本發(fā)明的化合物是MMP9和MMP12的有效抑制劑。本發(fā)明的化合物對較少抑制各種其它MMPs(MMP8、MMP14和MMP19)還顯示出良好的選擇性。
因此，本發(fā)明提供了用于治療的如上文所限定的式(I)化合物、或其藥用鹽。
另一方面，本發(fā)明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其藥用鹽在制備用于治療的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其藥用鹽在制備用于治療其中抑制MMP12和/或MMP9是有益的疾病或病癥的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其藥用鹽在制備用于治療炎性疾病的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供了如上文所限定的式(I)化合物、或其藥用鹽在制備用于治療阻塞性氣道疾病例如哮喘或COPD的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供如上文所限定的式(I)的化合物或其藥用鹽，在制備用于治療類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥或多發(fā)性硬化的藥物中的用途。
在本說明書的上下文中，除非有與此相反的具體說明，術(shù)語“治療”也包括“預防”。應該相應地解釋術(shù)語“治療學的”和“治療地”。
預防被認為與患有所述疾病或病癥的先前發(fā)作的人員的治療特別有關，或被認為與處于所述疾病或病癥的增加危險之中的人員的治療特別有關。處于形成具體疾病或病癥的危險之中的人員，通常包括具有該疾病或病癥的家族史的那些人員，或已經(jīng)通過遺傳學試驗或篩選確定為對形成該疾病或病癥特別敏感的那些人員。
本發(fā)明進一步提供了治療其中抑制MMP12和/或MMP9是有益的疾病或病癥的方法，該方法包括對患者給藥治療有效量的如上文所限定的式(I)化合物或其藥用鹽。
本發(fā)明也提供了治療阻塞性氣道疾病(例如哮喘或COPD)的方法，該方法包括對患者給藥治療有效量的如上文所限定的式(I)化合物或其藥用鹽。
當然，對于上述治療用途，給藥劑量隨所采用的化合物、給藥方式、所需要的治療和所治療的病癥而變化。式(I)化合物/鹽(活性組分)的每日劑量可以在0.001mg/kg至75mg/kg的范圍，尤其是從0.5mg/kg至30mg/kg。這種日劑量可以根據(jù)需要以分份劑量的形式給予。典型地，單位劑型含有約1mg至500mg的本發(fā)明的化合物。
可以單獨使用式(I)的化合物和其藥用鹽，但通常以藥物組合物的形式給藥，在藥物組合物中，式(I)化合物/鹽(活性組分)與可藥用助劑、稀釋劑或載體結(jié)合。根據(jù)給藥方式，藥物組合物優(yōu)選包含0.05至99％w(重量百分比)、更優(yōu)選0.10至70％w的活性組分，和1至99.95％w、更優(yōu)選30至99.90％w的可藥用助劑、稀釋劑或載體，所有的重量百分數(shù)基于全部組合物。例如，選擇和制備合適藥物制劑的常規(guī)方法描述在下面中“Pharmaceuticals-TheScience of Dosage Form Designs”，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988。
由此，本發(fā)明也提供了一種藥物組合物，其包括如上文所限定的式(I)化合物或其藥用鹽，以及結(jié)合有可藥用助劑、稀釋劑或載體。
本發(fā)明進一步提供了制備本發(fā)明藥物組合物的方法，其包括將如上文所限定的式(I)化合物或其藥用鹽與可藥用助劑、稀釋劑或載體混合。
對所希望治療的疾病或病癥，可以以標準方式給藥本發(fā)明的藥物組合物，例如通過口服、局部、腸胃外、口腔、經(jīng)鼻、陰道或直腸給藥或通過吸入給藥。為了達到上述目的，可以將本發(fā)明化合物通過本領域已知的方法配制成下列形式例如片劑，膠囊，水溶液或油性溶液，混懸劑，乳狀液，乳膏劑，油膏，凝膠劑，鼻腔噴霧劑(nasal spray)，栓劑，用于吸入的微細粉末或氣霧劑，和用于腸胃外使用(包括靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)或輸液)的無菌水溶液或油性溶液或混懸劑或無菌乳狀液。
除了本發(fā)明的化合物之外，本發(fā)明的藥物組合物也可以含有對于治療一或多種上文所指疾病或病癥中有價值的藥理學試劑例如“Symbicort”(商標)產(chǎn)品，或與其共同給藥(同時或順序)。
本發(fā)明進一步提供了制備如以上所定義的式(I)化合物或其藥用鹽的方法，其包括 a)使式(II)的化合物和式(III)化合物(或其鹽)反應
其中R2如式(I)所定義和L1表示離去基團
其中R1、A、A1和B如式(I)中所定義；或 b)使式(V)的化合物與式(XII)的硼酸衍生物(boronic acid derivative)反應，
其中R2和B如式(I)中所定義，LG為離去基團；
其中R1、A和A1如式(I)中所定義；或 c)使式(IX)的化合物與碳酸銨和氰化鉀反應
其中R1、R2、A、A1和B如式(I)中所定義； 以及之后任選地形成其藥用鹽。
在上述方法(a)中，合適的離去基團L1包括鹵素，特別是氯或三氟甲磺酸酯基。反應優(yōu)選在合適的溶劑中，任選在加入堿的情況下，在環(huán)境溫度至回流溫度下進行合適的時間，典型地是0.5至16小時。通常，使用溶劑例如N，N-二甲基甲酰胺、吡啶、四氫呋喃、乙腈、N-甲基吡咯烷或二氯甲烷。當使用時，加入的堿可以是有機堿例如三乙胺，N，N-二異丙基乙基胺，N-甲基嗎啉或吡啶，或無機堿例如堿金屬碳酸鹽。反應典型地在環(huán)境溫度進行0.5至16小時，或如通過色譜或光譜方法測定的，直至已經(jīng)達到反應結(jié)束?；酋；u化物與各種伯胺和仲胺的反應是文獻中已知的，并且反應條件的改變對本領域的技術(shù)人員是顯然的。
式(II)的磺酰氯(其中L1表示氯，R2表示Me)已經(jīng)公開于WO 02/074767中，在此將其引入作為參考?？墒褂妙愃频姆椒ㄖ苽淦渲蠷2表示C1-3烷基的相應化合物。
制備式(I)的化合物的合適方法以逆合成的方式描述于方案1中。
方案1
在方案1中，保護基團(PG)可以是氨基甲酸酯(例如叔丁氧基氨基甲酸酯)、酰胺(例如三氟乙?；?或烷基(例如叔丁基或苯基)。離去基團(LG)可以是氯、溴、碘或三氟甲磺酸酯基。在鈀催化的Suzuki偶合反應中，可以使用硼酸(boronic acid)或頻哪醇硼酸酯(pinacolboronates)?？梢岳脴藴蔛uzuki偶合反應(Chem.Rev.1995，95，2457)，在親電子試劑(VIIa-c)和硼試劑(XII)之間，或者相反地，在親電子試劑(XI)和硼試劑(VIIIa-c)之間制備中間體(IVa-c)。后者可使用標準Miyaura條件從(VIIa-c)獲得(J.Org.Chem.1995，60，7508-7510)。使用氯化氫的甲醇溶液(PG＝叔丁氧羰基)或回流氯甲酸1-氯乙基酯/回流甲醇(PG＝叔丁基或苯基)(Synlett.1993，195-196)進行(IVa-c)的脫保護，得到鹽酸鹽形式的氨(IIIa-c)。游離堿可如下獲得用堿處理(IIIa-c)，然后用有機溶劑(例如乙酸乙酯或甲苯)萃取。在叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二異丙基乙胺)的存在下，使鹽形式或堿形式的(IIIa-c)在合適溶劑(例如，乙腈、四氫呋喃、N-甲基吡咯烷或N，N-二甲基甲酰胺)中與磺酰氯(II)反應0.5至16小時，制備式(I)的化合物。
從中間體(IIIa-c)經(jīng)過甲磺酰胺(Xa-c)和酮(IXa-c)制備式(I)化合物的可供選擇的途徑先前已經(jīng)有描述(WO 02/074767)。簡而言之，用甲磺酰氯和叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二異丙基乙胺)在合適的溶劑(二氯甲烷或四氫呋喃)中處理(IIIa-c)，制備甲磺酰胺(Xa-c)，接著可使用標準操作將其轉(zhuǎn)化成酮(IXa-c)。在密封的小瓶中，于80-90℃加熱酮(IXa-c)與碳酸銨和氰化鉀的50％含水乙醇的溶液1至5小時，得到外消旋乙內(nèi)酰脲，其可用手性色譜(例如在OD-H上用100％乙醇)拆分。
在第三條途徑中，如上所述對中間體(VIIa-c)脫保護，得到鹽酸鹽形式的胺(VIa-c)。游離堿可通過用堿處理，然后用有機溶劑例如乙酸乙酯或甲苯萃取而分離。在叔胺(例如三乙胺、吡啶或N，N-二異丙基乙胺)的存在下，使鹽形式或堿形式的(VIa-c)在合適溶劑(例如乙腈、四氫呋喃、N-甲基吡咯烷或N，N-二甲基甲酰胺)中與磺酰氯(II)反應0.5至16小時，制備手性磺酰胺(Va-c)。可使用標準的Suzuki條件，使磺酰胺(Va-c)與硼試劑(XII)偶合得到式(I)的化合物。
使用如下方法便利地制備中間體(VIIa-b)。
1，2，3，4-四氫異喹啉中間體(VIIa) 1，2，3，4-四氫異喹啉的合成方法是文獻中公知的。典型的途徑是苯甲醛與二乙縮醛保護的氨基乙醛的Pomeranz-Fritz反應(Org.React.1951，6，191)，得到異喹啉核，將其經(jīng)過催化還原得到1，2，3，4-四氫-異喹啉。另一途徑是2-苯基乙胺的氨基甲酸酯與磷酰氯在回流的甲苯或二甲苯中的Bischler-Napieralski反應(Org.React.1951，6，74)。利用氫化鋰鋁的四氫呋喃溶液(J.Med.Chem.1987，30(12)，2208-2216)或二硼烷的四氫呋喃溶液(J.Med.Chem.1980，23(5)，506-511)還原所得的環(huán)狀苯甲酰胺，獲得1，2，3，4-四氫異喹啉。Bischler-Napieralski反應的變化形式是Pictet-Spengler合成(Org.React.1951，6，151)。在該反應中，將2-苯基乙胺的酰胺、氨基甲酸酯或磺酰胺與低聚甲醛(paraformaldehyde)和強質(zhì)子酸(例如三氟乙酸、硫酸)或路易斯酸(Lewis acid)在溶劑(例如，二氯甲烷、甲苯、甲酸)中加熱，從而以單個步驟得到1，2，3，4-四氫異喹啉(Tetrahedron 2002，58(8)，1471-1478)。
方案2
試劑 a)(CF3CO)2O，Et3N+4℃b)(HCHO)n，H2SO4，HOAc；RT.c)NaBH4，EtOH；RT或NH3(濃)，EtOH，加熱 d)(t-BuOCO)2O，Et3N，DCM，RT 方案2 優(yōu)選地，1，2，3，4-四氫異喹啉中間體(VIIa)用方案2中所示的途徑A合成。該途徑是N-[2-(3-溴苯)乙基]-2，2，2-三氟乙酰胺與甲醛和硫酸在乙酸中的Friedel-Craft型反應(Tetrahedron Lett.1996，37(31)，5453-5456)，該反應得到比例為3∶1的6-溴和8-溴異構(gòu)體的混合物。用BOC基團代替三氟乙酰胺基團得到(VIIa)。該區(qū)域異構(gòu)體(regioisomer)在此階段不能便利地分離。
1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘中間體(VIIb) 與1，2，3，4-四氫異喹啉相反，文獻中關于1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘合成方法的例子相當少。制備1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘的一個重要方法是，2，7-二氮雜萘的區(qū)域選擇性催化還原(Eur.J.Med.Chem.Ther.1996，31(11)，875-888)。2，7-二氮雜萘及其某些衍生物的合成已經(jīng)描述于該文獻中。一個典型的途徑包括幾個步驟，從丙二腈與1，3-丙酮二羧酸二乙酯的酸催化縮合反應開始(J.Chem.Soc.1960，3513-3515；也參見J.Heterocycl.Chem.1970，7，419-421)。2，7-二氮雜萘的稍微不同制備途徑包括氧化4-甲酰基-2，7-二氮雜萘，得到2，7-二氮雜萘-4-羧酸，接著進行脫羧反應(Synthesis 1973，46-47)。一種完全不同的方法是基于N-(乙氧羰基)-N-(丁-3-炔基)氨基-甲基吡嗪的內(nèi)Diels-Alder反應，并在氨基甲酸酯基團水解之后得到1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘和5，6，7，8-四氫-1，7-二氮雜萘的混合物(WO 02/064574)。
方案3
試劑 a)LiCH3NCH2CH2N(CH3)2，THF，-70℃，b)n-BuL1己烷溶液，-70℃，然后I2.c)TMS-乙炔，PdCl2(PPH3)2，CuI，Et3N，THF，60℃. d)7M NH3，EtOH，80℃ e)H2，PtO2，HOAc.f)48％HBr(aq)，120℃.g)(BOC)2O，Et3N，H2O，THF h)Tf2O，PhMe，30％K3PO4 優(yōu)選地，1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘中間體(VIIb)可以如方案3和4中所示來合成。在途徑B中，用N，N，N′-三甲基乙二胺的鋰鹽連續(xù)地處理市售的6-甲氧基煙堿甲醛(6-methoxynicotinaldehyde)，然后用正丁基鋰的己烷溶液處理，最后用碘處理，得到4-碘-6-甲氧基煙堿甲醛(參見Tetrahedron Lett.1993，34(39)，6173-6176)。在通常的Sonagashira-Hagihara條件下，使該碘化合物與三甲基甲硅烷基乙炔偶合(Synthesis 1980，627-630)，將所得的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]煙堿甲醛與氫氧化銨在乙醇中縮合，得到3-甲氧基-2，7-二氮雜萘(Synthesis 1999，2，306-311)。區(qū)域選擇性催化還原(參見Eur.J.Med.Chem.Ther 1996，31(11)，875-888)后，得到6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘。用BOC-酸酐脫甲基化和N-保護，最后用三氟甲磺酸酐在兩相體系中處理所得的6-羥基-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-羧酸叔丁酯，得到(VIIb)。
方案4
試劑 a)n-BuLi，THF，-70℃然后DMF，-70℃至RT.b)t-BuNH2；DCM3μmol濾網(wǎng)c)Li-TMP，-20℃然后DMF，-2℃至-10℃ d)NaBH3CN，MeOH，HOAc；RT.e)18％H Br(aq)回流，用K2CO3(aq-)再處理f)Ti2O，吡啶+4℃ 在途徑C中，用正丁基鋰將市售的5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶的無水四氫呋喃溶液金屬化(metallate)，然后用N，N-二甲基甲酰胺處理，得到6-甲氧基-4-甲基煙堿甲醛。用叔丁基胺的二氯甲烷溶液將其轉(zhuǎn)化成叔丁基亞胺。用2，2，6，6-四甲基哌啶鋰(Li-TMP)進行金屬化(參見J.Org.Chem.1993，58，2463-2467)，以及加入N，N-二甲基甲酰胺，得到亞氨基乙醛，將其用氰基硼氫化鈉的甲醇溶液還原，得到2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘。用48％的氫溴酸回流使甲基斷裂，并在堿的存在下用三氟甲磺酸酐處理，得到(VIIb)，其被保護為叔丁基胺。
本領域技術(shù)人員可以理解，在本發(fā)明的方法中，起始試劑或中間體化合物中的某些潛在地反應性官能團例如羥基或氨基，可以需要通過合適的保護基進行保護。由此，在各步驟中，本發(fā)明化合物制備可以包括一或多種保護基的添加和除去。
合適的保護基和添加與除去這種基團的詳細方法描述在‘ProtectiveGroups in Organic Chemistry’，edited by J.W.F.McOmie，Plenum Press(1973)and′Protective Groups in Organic Synthesis′，3rd Edition，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1999)中。
本發(fā)明的化合物和其中間體可以從它們的反應混合物中分離，并且如果需要的話，可以使用標準技術(shù)進一步純化。
現(xiàn)在將參考下列說明性的實施例進一步解釋本發(fā)明。
一般方法 在Varian Inova 400MHz或Varian Mercury-VX 300MHz儀器上記錄1HNMR和13C NMR譜圖。氯仿-d(δH 7.27ppm)、二甲基亞砜-d6(δH 2.50ppm)、乙腈-d3(δH 1.95ppm)或甲醇-d4(δH 3.31ppm)的中心峰用作內(nèi)標。使用硅膠(0.040-0.063mm，Merck)，施加輕微的超壓(0.2-0.4bar)到柱上，進行柱色譜分析。對于制備型HPLC，使用Kromasil KR-100-5-C18柱(250×20mm，AkzoNobel)和含有0.1％TFA的乙腈/水的混合物，流速為10mL/min。除非另外說明，原料是市售的。所有的溶劑和商用試劑是實驗室級的，并且原樣使用。如果沒有另外說明，經(jīng)無水硫酸鈉干燥提取物的有機相。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮有機相或溶液。產(chǎn)率是未優(yōu)化的。
下面的方法用于LC-MS分析 儀器Agilent 1100；Column Waters Symmetry 2.1×30mm；質(zhì)量APCI；流量0.7mL/min；波長254或220nm；溶劑A水+0.1％TFA；溶劑B乙腈+0.1％TFA；梯度15-95％/B 2.7分鐘，95％B 0.3分鐘。
下面的方法用于GC-MS分析 儀器Hewlett Packard 5890 Series II；柱Agilent HP-5(30m×0.32mmID)；質(zhì)量選擇檢測器Hewlett Packard 5971 Series；壓力55kPa He；爐程序100℃(3min)至300℃，25℃/min。
BOC-酸酐 二碳酸二叔丁基酯 n-BuLi 正丁基鋰 DCM 二氯甲烷 DIPEAN，N-二異丙基乙胺 DMF N，N-二甲基甲酰胺 DMSO 二甲基亞砜 EtOAc乙酸乙酯 EtOH 乙醇 GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜 LDA 二異丙基氨基鋰(lithium diisopropyl amide) MeOH 甲醇 LC-MS液相色譜-質(zhì)譜 PdCl2x dppf 1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵二氯化鈀(II) RT 室溫，通常為20至22℃ TEA 三乙胺 THF 四氫呋喃 TBME叔丁基甲基醚 TFA 三氟乙酸 Triflic anhydride 三氟甲磺酸酐(Tf2O) 實施例1(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮
在室溫，將[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.020g，0.087mmol)于無水THF(0.40mL)中的溶液滴加到攪拌著的6-[2-(環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氫異喹啉(0.023g，0.091mmol)，DIPEA(0.022mL，0.13mmol)和無水THF(0.50mL)的溶液中。加完后，將該溶液在室溫攪拌2小時，然后吸收于水-鹽水中并用EtOAc萃取兩次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過制備型HPLC進行純化，得到0.021g(50％)的標題化合物。其為白色固體。
LC-MS m/z 442(M+1)； 1H NMR(CD3CN)δ8.97(s，2H)，8.62(br s，1H)，7.52(s，1H)，7.51(dd，1H)，7.30(d，1H)，6.40(br s，1H)，4.48(s，2H)，3.54(t，2H)，3.51(d，1H)，3.42(d，1H)，3.01(t，2H)，2.38(m，1H)，1.48(s，3H)，及1.23(m，4H)ppm。
原料制備如下 6-[2-(環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氫異喹啉 在室溫，將6-[2-(環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-3，4-氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.034g，0.13mmol)在TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)中攪拌過夜，然后濃縮兩次，第二次加入有甲苯(5mL)，得到標題產(chǎn)物的三氟乙酸鹽。
1H NMR(CD3OD)δ8.87(s，2H)，7.60(d，1H)，7.59(s，1H)，7.37(d，1H)，4.43(s，2H)，3.55(t，2H)，3.21(t，2H)，2.27(m，1H)，及1.14(m，4H)ppm。
將粗產(chǎn)物吸收于1M碳酸鈉溶液(10mL)，并用EtOAc萃取兩次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥，過濾并濃縮，得到0.023g(94％)的標題產(chǎn)物，其為白色固體。
LC-MS m/z 252(M+1)。
5-溴-2-環(huán)丙基嘧啶 標題化合物根據(jù)Hickey等人(WO 00/066566)制備。
LC-MS m/z 199/201(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ8.61(s，2H)，2.30-2.18(m，1H)，及1.15-1.10(m，4H)ppm。
6-[2-(環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯 將6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯與8-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的4∶1混合物(0.097g，0.27mmol)，5-溴-2-環(huán)丙基嘧啶(0.054g，0.27mmol)，PdCl2x dppf(0.0045g)，2M碳酸鈉(1.0mL)，甲苯(4.0mL)和EtOH(1.0mL)用干氬氣吹洗10分鐘，然后在密封瓶中于81℃加熱6小時。將該黑色溶液通過玻璃棉過濾，吸收于水-鹽水中并用EtOAc洗滌兩次。將合并的有機相干燥，過濾并用硅膠(5g)濃縮。經(jīng)過EtOAc-庚烷(1∶5至1∶2)的柱色譜，得到0.034g(36％)的標題產(chǎn)物，其為白色固體。
LC-MS m/z 352(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ8.74(s，2H)，7.35(dd，1H)，7.29(s，1H)，7.22(d，1H)，4.62(s，2H)，3.68(t，2H)，2.90(t，2H)，2.30(m，1H)，1.50(s，9H)，1.18(m，2H)，及1.11(m，2H)ppm。
6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯 將6-溴-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯和8-溴-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的3∶1混合物(0.49g，1.6mmol)，二(頻哪醇合)二硼烷(bis(pinacolato)diborane)(0.45g，1.8mmol)，PdCl2x dppf(0.039g，0.048mmol)，乙酸鉀(0.48g，4.8mmol)和DMF(8.0mL)在81℃加熱過夜。蒸發(fā)溶劑，剩余物吸收于水-鹽水中并用EtOAc洗滌兩次。將有機相干燥，過濾并濃縮。經(jīng)過EtOAc-庚烷(1∶10至1∶4)的柱色譜，得到標題產(chǎn)物和8-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的4∶1混合物(0.24g)。
1H NMR(CDCl3)δ7.62(d，1H)，7.60(s，1H)，7.13(d，1H)，4.59(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(6-位異構(gòu)體)。
1H NMR(CDCl3)δ7.69(d，1H)，7.24-7.14(m′s，2H)，4.88(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(8-位異構(gòu)體)。
6-溴-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯 6-溴-2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫異喹啉按下面Stokker方法(TetrahedronLett.1996，37(31)，5453-5456)由[2-(3-溴苯基)乙基]胺(4.0g，20mmol)分兩步制得。經(jīng)EtOAc-庚烷(1∶10至1∶6)的柱色譜，得到6-溴-2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫異喹啉和8-溴-2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫異喹啉的3∶1混合物(2.3g，7.5mmol)。
1H NMR(CDCl3)δ7.62(d，1H)，7.60(s，1H)，7.13(d，1H)，4.59(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(6-位異構(gòu)體)。
1H NMR(CDCl3)δ7.69(d，1H)，7.24-7.14(m，2H)，4.88(s，2H)，3.64(t，2H)，2.85(t，2H)，1.50(s，9H)，及1.35(s，12H)ppm(8-位異構(gòu)體)。
將該混合物與無水EtOH(100mL)和25％氫氧化銨(10mL)在60℃攪拌4小時。再加入25％氫氧化銨(15mL)并在室溫繼續(xù)攪拌過夜。蒸發(fā)揮發(fā)物，留下粗胺，其為白色固體。LC-MS m/z 212/214(M+1)。
加入無水THF(50mL)和DIPEA(1.3mL，7.5mmol)，接著加入BOC-酸酐(1.8g，8.2mmol)。將該混合物在室溫攪拌過夜。蒸發(fā)揮發(fā)物，并將剩余物吸收于水中。用1M磷酸調(diào)節(jié)pH至2，并將產(chǎn)物用EtOAc萃取兩次。合并的有機相用鹽水洗滌，用飽和碳酸氫鈉使該鹽水呈弱堿性，干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物通過EtOAc-庚烷(1∶50至1∶20)的柱色譜進行純化，得到標題產(chǎn)物與8-溴-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸叔丁酯的3∶1混合物(2.24g，96％)。
LC-MS m/z 256/258(M-56)； 1H NMR(CDCl3)δ7.31(dd，1H)，7.30(br s，1H)，6.98(d，1H)，4.52(s，2H)，3.63(t，2H)，2.81(t，2H)，及1.50(s，9H)ppm(6-位異構(gòu)體)。
1H NMR(CDCl3)δ7.42(dd，1H)，7.12-7.01(m′s，2H)，4.55(s，2H)，3.64(t，2H)，2.84(t，2H)，及1.51(s，9H)ppm(8-位異構(gòu)體)。
作為選擇，6-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-異喹啉可制備如下 a)1，2，3，4-四氫-異喹啉-6-醇氫溴酸鹽 將6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-異喹啉鹽酸鹽(制備于WO 2004/26305中)(18.9g，94mmol)在48％氫溴酸水溶液中于100℃加熱12小時，然后冷卻至0℃。濾除固體，用叔丁基甲基醚洗滌并干燥。收率＝17.1g(79％)。
APCI-MS m/z150[M+H+]； 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.91(t，2H)，3.27-3.35(m，2H)，4.13(t，2H)，4.52(s，1H)，6.59(d，1H)，6.66(dd，1H)，7.00(d，1H)，9.07(s，2H)ppm。
b)6-三氟甲磺酰氧基-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯
上面的兩個步驟按Synthetic Communications，25(20)，3255-3261，(1995)中所述進行。
c)6-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯 將6-三氟甲磺酰氧基-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯(11.51g，30mmol)溶解于DMF(250mL)，并將該黃色溶液藉氬氣(g)鼓泡經(jīng)過該溶液進行吹洗。加入乙酸鉀(8.83g，90mmol)，二(頻哪醇合)二硼烷(8.38g，33mmol)，PdCl2dppf(1.22g，1.5mmol)和dppf(0.83g，1.5mmol)，并將該混合物再次用氬氣吹洗。然后將該混合物在90℃加熱2小時。加入一水合磷酸三鉀(18g，78mmol)，接著加入2-環(huán)丙基-5-溴-嘧啶(7.76g，39mmol)，并在90℃繼續(xù)攪拌5小時。將反應混合物倒在飽和碳酸氫鈉溶液中并用乙酸乙酯萃取若干次。將乙酸乙酯溶液通過硫酸鎂干燥，濾除干燥劑，并蒸發(fā)濾液。剩余物通過快速色譜進行純化，以乙酸乙酯∶庚烷(1∶3)洗脫，得到8.1g(76％)的標題化合物，其為無色的固體。
APCI-MS m/z352[M+H+]； 1H-NMR(CDCl3)δ8.77(2H，s)，7.36(1H，d)，7.31(1H，brs)，7.24(1H，d)，4.63(2H，s)，3.70(2H，brt)，2.92(2H，brt)，2.35(1H，m)，1.51(9H，s)，1.24-1.10(4H，m)ppm。
d)6-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-異喹啉 將6-(2-環(huán)丙基-嘧啶-5-基)-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯(9.49g，27mmol)在50℃溶解于乙酸乙酯(100mL)，并向該熱溶液中加入1.5M氯化氫的乙酸乙酯(200mL)溶液。1小時之后，將該混合物冷卻至室溫，濾出固體并干燥。
APCI-MS m/z252[M+H+]； 1H-NMR(CD3OD)δ9.35(2H，s)，7.76-7.70(2H，brs+brdd)，7.46(1H，d)，4.47(2H，s)，3.57(2H，t)，3.25(2H，t)，2.46(1H，m)，1.51-1.45(4H，m)ppm。
13C-NMR(CD3OD)δ168.39，155.82，134.34，132.65，132.52，131.32，129.22，128.74，126.69，45.56，42.69，26.17，16.51，14.11ppm。
將該二鹽酸鹽(8.82g，27mmol)懸浮于水(100mL)中并加入2M NaOH(300mL)。然后將該混合物用4∶1乙酸乙酯/二乙醚(4×300mL)萃取。將合并的有機相通過無水碳酸鉀進行干燥，過濾并蒸發(fā)，得到標題化合物，其為游離堿(6.65g)。
APCI-MS m/z252[M+H+]； 1H-NMR(CD3OD)δ8.81(2H，s)，7.43-7.38(2H，d+s)，7.18(1H，d)，3.99(2H，s)，3.10(2H，t)，2.90(2H，t)，2.25(1H，m)，1.18-1.06(4H，m)ppm。
13C-NMR(CD3OD)δ171.53，155.83，137.05，137.01，133.50，132.32，128.51，128.36，125.20，48.35，44.28，29.49，18.38，11.16ppm。
實施例2(5S)-5-({[6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮
標題化合物由6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘鹽酸鹽(0.63mmol)和[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.70mmol)，按照實施例1的一般方法制備。經(jīng)過凈EtOAc和EtOAc-MeOH(9∶1)作為洗脫液的柱色譜，得到0.060g幾乎純凈的產(chǎn)物。用99％EtOH重結(jié)晶，得到0.019g(7.0％)的標題化合物，其為白色固體。
LC-MS m/z442(M+1)； 1H NMR(DMSO-d6)δ10.8(s，1H)，9.06(d，1H)，8.49(s，1H)，8.26(dd，1H)，8.06(s，1H)，7.83(s，1H)，7.39(d，1H)，4.45(s，2H)，3.61(d，1H)，3.48(d，1H)，3.46(m，2H)，2.97(m，2H)，2.16(m，1H)，1.34(s，3H)和1.02-0.94(m，4H)ppm。
原料制備如下 6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘鹽酸鹽 將6-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.34g，0.90mmol)，2-環(huán)丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)吡啶(0.20g，0.82mmol)，PdCl2x dppf(0.050g)，飽和碳酸鈉(2mL)，EtOH(4mL)和甲苯(4mL)在80℃攪拌2小時。將該溶液冷卻至室溫，吸收于水(15mL)中，并用EtOAc-Et2O萃取三次。將合并的有機相干燥，過濾并濃縮。通過柱色譜進行純化，以EtOAc-庚烷(1∶1至3∶1)和EtOAc-MeOH(9∶1)為洗脫液，得到0.22g(70％)的6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-甲酸叔丁酯，其為白色固體。
LC-MS m/z 352(M+1)。
將該材料溶解于EtOAc(5mL)，并在1.5M氯化氫的EtOAc溶液(5mL)中于50℃攪拌4小時。蒸發(fā)溶劑，以定量的收率留下粗標題化合物(0.63mmol)。
2-環(huán)丙基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)吡啶 在氬氣氛下，將0.5M氯化鋅的THF溶液(5.5mL，2.8mmol)加到0.5M環(huán)丙基溴化鎂于THF(5.5mL，2.8mmol)中的溶液中。將該溶液在室溫攪拌2小時，此時形成漿狀物。向該漿狀物中一部分地加入2，5-二溴吡啶(0.65g，2.8mmol)和PdCl2x dppf(0.041g，0.050mmol)。幾分鐘之后，觀察到放熱且漿狀物變稠，放熱平息，并將該漿狀物在室溫攪拌過夜。將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液中并用乙醚萃取。將醚相干燥，過濾并濃縮，然后重新溶解于DCM，并施加到硅膠短塞上。將硅膠用DCM洗滌，并濃縮洗滌液。剩余物吸收于乙醚中，并用1.0M鹽酸洗滌。利用2.0M氫氧化鈉使酸性的水相呈堿性，并將產(chǎn)物反向萃取到醚中。將合并的醚相用鹽水洗滌，干燥，過濾并濃縮，得到0.28g(50％)的5-溴-2-環(huán)丙基吡啶，其為黃色油狀物。
LC-MS m/z 197.9/199.9(M+1)； 1H-NMR(CDCl3)δ8.48(d，1H)，7.63(dd，1H)，7.04(d，1H)，1.99(m，1H)，1.03-0.98(m，4H)ppm。
將5-溴-2-環(huán)丙基吡啶(0.21g，1.1mmol)，二(頻哪醇合)二硼烷(0.31g，1.2mmol)和乙酸鉀(0.32g，3.2mmo1)懸浮在二氧己環(huán)(10mL)中。將該漿狀物用氬氣脫氣10分鐘，然后加入PdCl2x dppf(0.026g)。將反應混合物在80℃加熱15小時，然后在冷卻至室溫之后，通過硅藻土塞進行過濾。濃縮濾液，得到黑色的油狀物，將其溶解于乙醚，并用1.0M氫氧化鈉萃取四次。將合并的黃色水相冷卻至10℃，用2.5M鹽酸酸化至pH6.5，然后用乙醚反復萃取。將合并的有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到0.27g(103％)的標題產(chǎn)物，其為緩慢固化的黃色油狀物。1H-NMR表明約60-65％純度的所需產(chǎn)物，主要雜質(zhì)為頻哪醇硼烷。該粗物質(zhì)無需進一步純化即可使用。
GC-MS m/z 245.2(M+)，244.2(M-1)； 1H-NMR(CDCl3)δ8.78(br s，1H)，7.93(dd，1H)，7.10(d，1H)，2.10(m，1H)，1.34(s，12H)，1.10-1.00(m，4H)ppm。
6-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-甲酸叔丁酯 在室溫，將粗3-甲氧基-2，7-二氮雜萘(由4.4mmol的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]煙堿甲醛制得)通過PtO2(約0.1g)于HOAc(25mL)中氫化(30psi壓力)2.5小時。將該溶液通過硅藻土墊過濾，并通過冷凍干燥法濃縮澄清的濾液，得到粗6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘，其為乙酸鹽。
LC-MS m/z 165(M+1)。
將該物質(zhì)在48％氫溴酸中回流10小時。蒸發(fā)揮發(fā)物，并將剩余物在45℃減壓干燥，得到粗5，6，7，8-四氫-2，7-二氮雜萘-3-醇氫溴酸鹽(約0.70g)。
LC-MS m/z 151(M+1)。
將該物質(zhì)(約4.8mmol)溶解于水(13mL)，并在室溫用THF(33mL)、Et3N(0.85mL，6.0mmol)和BOC-酸酐(1.6g，7.3mmol)處理。待在相同溫度下攪拌6小時之后，將該溶液濃縮至其原體積的三分之一，并將剩余物吸收于水中，用EtOAc萃取三次。將合并的有機相干燥，過濾并濃縮，得到0.80g(67％粗產(chǎn)物收率)的6-羥基-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-甲酸叔丁酯，其為白色固體。
LC-MS m/z 251(M+1)，195(M-55)。
將該物質(zhì)(約5.4mmol)溶解于甲苯(20mL)和30％正磷酸三鉀水溶液(20mL)的兩相體系，并在4℃用三氟甲磺酸酐(1.6mL，6.8mmol)處理[Org.Lett.2002，4(26)，4717-4718]。移去冰浴，繼續(xù)在室溫攪拌2小時，之后將兩相分離。水相用甲苯洗滌一次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥并濃縮。通過柱色譜進行純化，以EtOAc-庚烷(2∶1)作為洗脫液，得到0.45g(17％收率)的標題產(chǎn)物。
LC-MS m/z 383(M+1)，283(M-99)。
3-甲氧基-2，7-二氮雜萘 在氬氣氛下和-70℃，向攪拌著的N，N，N′-三甲基乙二胺(1.9mL，15mmol)于無水THF(65mL)中的溶液中緩慢地加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(9.0mL，14mmol)。待在-70℃攪拌15分鐘之后，滴加6-甲氧基-煙堿甲醛(1.3g，9.8mmol)。加完之后，繼續(xù)在-70℃再攪拌15分鐘。然后滴加1.6Mn-BuLi的己烷溶液(10mL，16mmol)，并在-45℃繼續(xù)攪拌4小時。將該溶液冷卻至-70℃，然后滴加碘(3.0g，12mmol)于無水THF(25mL)中的溶液。滴加完成時，繼續(xù)在-70℃攪拌30分鐘，然后在室溫攪拌3小時。將粗產(chǎn)物吸收于乙醚(40mL)中并相繼用飽和氯化銨(2×40mL)和5％硫代硫酸鈉(2×20mL)洗滌。將有機相干燥，過濾并濃縮。通過柱色譜進行純化，以EtOAc-庚烷(1∶1)為洗脫液，得到0.41g(15％收率)的4-碘-6-甲氧基煙堿甲醛。
LC-MS m/z 264(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ9.95(s，1H)，8.53(s，1H)，7.32(s，1H)及3.98(s，3H)ppm。
將4-碘-6-甲氧基煙堿甲醛(0.41g，1.6mmol)，三甲基甲硅烷基乙炔(0.35mL，2.8mmol)，PdCl2(PPh3)2(催化量)，CuI(催化量)，三乙胺(2mL)和THF(10mL)在60℃攪拌2小時。蒸發(fā)揮發(fā)物，并將剩余物吸收于水中，且用乙醚萃取。將有機相干燥，過濾并濃縮。通過柱色譜進行純化，以EtOAc-庚烷(1∶3)為洗脫液，得到0.25g(68％收率)的6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]煙堿-甲醛。
LC-MS m/z 234(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ10.4(s，1H)，8.73(s，1H)，6.84(s，1H)，4.03(s，3H)及0.30(s，9H)ppm。
將6-甲氧基-4-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-煙堿甲醛(0.25g，1.1mmol)和7M氨的MeOH溶液(5mL)在密封瓶中于80℃攪拌過夜。將該溶液濃縮，吸收于飽和碳酸鈉溶液中并用乙醚萃取。將有機相干燥，過濾并濃縮，得到0.20g的標題產(chǎn)物。
GC-MS m/z 160(M+)； 1H NMR(CDCl3)δ9.41(s，1H)，9.27(s，1H)，8.47(d，1H)，7.64(d，1H)，7.03(s，1H)，及4.12(s，3H)ppm。
實施例3(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮
向攪拌著的6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘鹽酸鹽(0.12g，0.42mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(0.12mL，0.84mmol)，接著在-10℃滴加[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯(0.090g，0.40mmol)于THF(10mL)中的溶液。將該混合物在室溫攪拌過夜，濃縮，吸收于水(10mL)中，并用EtOAc萃取四次。將合并的有機相干燥，過濾并濃縮。通過制備性HPLC進行純化，得到0.12g(64％)的標題化合物，其為白色固體。
LC-MS m/z 442.9(M+1)； 1H NMR(CD3OD)δ9.05(s，2H)，8.43(s，1H)，7.81(s，1H)，4.63(s，2H)，3.40(t，2H)，3.38(q，2H)，3.00(t，2H)，2.20(m，1H)，1.40(s，3H)，及1.05(m，4H)ppm。
實施例4(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮
通過實施例3的一般方法制備標題化合物，但是采用[(4S)-4-乙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯。
LC-MS m/z 457(M+1)。
原料制備如下 6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘鹽酸鹽 在防潮(氯化鈣管)條件下，將2-叔丁基-6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘(0.12g，0.39mmol)，氯甲酸1-氯乙酯(1.0mL，5.8mmol)和甲苯(10mL)的混合物回流4小時。濃縮至干之后，將暗色的剩余物吸收于MeOH(10mL)中并再回流3小時。加入木炭(1g)并繼續(xù)回流20分鐘。然后將該混合物通過硅藻土過濾，并濃縮澄清的濾液，得到固體的標題化合物(0.12g)。
LC-MS m/z 253(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ9.22(s，2H)，8.57(s，1H)，7.98(s，1H)，4.41(s，2H)，3.45(t，2H)，2.44(m，2H)，2.32(m，1H)，及1.21(m，4H)ppm。
2-叔丁基-6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘 向攪拌著的2-叔丁基-6-羥基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘(0.15g，0.73mmol)于吡啶(5.0mL)中的冷(4℃)溶液中，緩慢加入三氟甲磺酸酐(0.14mL，0.80mmol)。加完后，將該混合物在4℃攪拌30分鐘，用5％碳酸鉀溶液(10mL)淬滅，并用DCM萃取四次。將合并的有機相干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過EtOH-TBME(1∶9)為洗脫液的柱色譜，得到0.30g粗三氟甲磺酸鹽，其為油狀物。
LC-MS m/z 339.2(M+1)。
將該三氟甲磺酸鹽溶解于二氧己環(huán)(10mL)，并加入無水乙酸鉀(0.43g，4.5mmol)，2-環(huán)丙基嘧啶-4-硼酸(0.14g，0.89mmol)和PdCl2x dppf(0.0050g)。將該混合物用氬氣脫氣，密封并于90℃攪拌過夜。冷卻之后，將該溶液吸收于水(20mL)中并用EtOAc萃取三次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥，過濾并濃縮。經(jīng)過以EtOH-TBME(1∶9)和TBME-EtOH-TEA(20∶2∶1)為洗脫液的柱色譜，得到0.12g(兩步驟為53％)的標題化合物，其為淡棕色的固體。
LC-MS m/z 309(M+1)； 1H NMR(CDCl3)9.05(s，2H)，8.45(s，1H)，7.38(s，1H)，3.97(m，2H)，2.95(m，4H)，2.00(m，1H)，1.21(s，9H)，1.11(dt，2H)，及1.09(dt，2H)ppm。
2-叔丁基-6-羥基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘 將2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘(5.1g，23mmol)和45％氫溴酸的乙酸溶液(70mL)的溶液在密封瓶中于100℃加熱1小時，冷卻至室溫并濃縮。將剩余物小心溶解于20％碳酸鉀溶液(100mL)并用EtOAc萃取四次。將合并的有機相干燥，過濾并濃縮。用TBME-己烷重結(jié)晶，得到3.7g(77％)的標題化合物，其為白色固體。
LC-MS m/z 207(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ7.21(s，1H)，6.35(s，1H)，4.77(m，2H)，4.11(m′s，4H)，及1.31(s，9H)ppm。
2-環(huán)丙基嘧啶-4-硼酸 按照Li等人(J.Org.Chem.2002，67，5394-5397)的方法，由4-溴-2-環(huán)丙基嘧啶(WO 00/066566)，制備標題化合物，收率為90％(25mmol比例)。LC-MS表明，產(chǎn)物由硼酸和三酸酐(sym-環(huán)硼氧烷)構(gòu)成。
LC-MS m/z 165(M+1)和439(M+1)。
2-叔丁基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2，7-二氮雜萘 在氬氣氛下和-20℃，向攪拌著的2，2，6，6-四甲基哌啶(9.0mL，60mmol)于無水THF(300mL)中的溶液中緩慢加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(40mL，60mmol)，同時保持溫度為-20℃。加完之后，繼續(xù)在-20℃攪拌40分鐘。然后在-20℃滴加叔丁基-[(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)亞甲基]胺(6.3g，30mmol)于無水THF(100mL)中的溶液。將該混合物在-15至-10℃攪拌1.5小時，然后冷卻至-20℃。歷時5分鐘滴加無水DMF(6.5ml，70mmol)，并在-10℃繼續(xù)攪拌1.5小時。然后加入于MeOH(250ml)中的冰乙酸(60mL)，接著歷時5分鐘逐份地加入氰基硼氫化鈉(2.3g，40mmol)。攪拌過夜之后，蒸發(fā)溶劑，并緩慢地加入20％碳酸鉀溶液，以將pH提升至9。將該混合物用TBME萃取四次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥并濃縮，得到粗油狀物。真空蒸餾，得到5.2g(77％)的標題化合物，其為無色的油狀物，沸點105-106℃/0.5mmHg。
GC-MS m/z 220.1(M+)； 1H NMR(CDCl3)δ7.90(s，1H)，6.55(s，1H)，3.95(s，3H)，3.81(m，3H)，2.95-2.90(m，3H)，及1.11(s，9H)ppm。
叔丁基-[(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)亞甲基]胺 將2-甲氧基-4-甲基煙堿甲醛(1.8g，12mmol)，叔丁胺(15mL)，3分子篩(8g)和無水DCM(10mL)混合，并在防潮(氯化鈣管)條件下使之在室溫靜置。兩天之后，將該混合物過濾，并用干燥DCM洗滌分子篩若干次。將合并的洗滌液濃縮，得到2.2g(89％)的標題化合物，其為粗油狀物，并立即用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3)δ8.55(br s，1H)，8.50(s，1H)，6.50(s，1H)，3.96(s，3H)，2.50(s，3H)，及1.30(s，9H)ppm。
2-甲氧基-4-甲基煙堿甲醛 在-70℃和氬氣氛下，歷時10分鐘向攪拌著的5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶(2.6g，13mmol)于無水THF(40mL)中的溶液中加入1.6M n-BuLi的己烷溶液(8.1mL，14mmol)。將該混合物在-70℃攪拌30分鐘，然后以保持溫度為-70℃的速率滴加無水DMF(1.2mL，15mmol)。加完時，將該混合物在-70℃攪拌30分鐘，然后在室溫攪拌過夜。將反應用1M鹽酸(40mL)淬滅，然后用TBME萃取三次。將合并的有機相用鹽水洗滌，干燥，過濾并濃縮。經(jīng)過以TBME-輕質(zhì)石油醚(1∶1)為洗脫液的柱色譜，得到1.8g(91％)的標題化合物，其為淺黃色固體。
LC-MS m/z 152(M+1)； 1H NMR(CDCl3)δ10.1(s，1H)，8.55(s，1H)，6.61(s，1H)，4.05(s，3H)，2.60(s，3H)ppm。
[(4S)-4-乙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯 按WO 02/074767中所述的制備[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基]甲磺酰氯的方法制備。
實施例5(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮
利用WO 02/074767中所述方法，通過手性色譜拆分(±)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮，制備標題化合物。
制備型色譜數(shù)據(jù) Chiracel OD-H柱(L 25cm，2cm)Daicel Chemical Industries Ltd. 洗脫液100％EtOH 流速15mL/分鐘 檢測UV 254nm。
分析色譜數(shù)據(jù) Chiralcel OD-H柱(L 15cm，0.46cm)Daicel Chemical Industries Ltd. 洗脫液100％EtOH 流速0.30mL/分鐘 檢測UV 254/220nm。
保留時間(tR)-見下面 (S)-對映異構(gòu)體(tR 13.0分鐘) 1H NMR(DMSO-d6)δ10.79(br s，1H)，8.94(s，2H)，7.97(br s，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.33-7.28(m，1H)，4.41(s，2H)，3.59-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.28-2.21(m，1H)，1.65(q，J＝7.6Hz，2H)，1.11-1.00(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。
(R)-對映異構(gòu)體(tR 18.3分鐘) 1H NMR(DMSO-d6)δ10.79(br s，1H)，8.94(s，2H)，7.97(br s，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.32-7.28(m，1H)，4.41(s，2H)，3.58-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.28-2.21(m，1H)，1.65(q，J＝7.6Hz，2H)，1.11-1.00(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。
(±)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮) 根據(jù)WO 02/074767中所述方法，由6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫異喹啉制備標題化合物。
LC-MS m/z 456(M+1)； 1H NMR(DMSO-d6)δ10.78(br s，1H)，8.94(s，2H)，8.03(br s，1H)，7.61-7.56(m，2H)，7.30(d，J＝8.5Hz，1H)，4.42(s，2H)，3.60-3.40(m，4H)，2.96(t，J＝6.2Hz，2H)，2.26-2.20(m，1H)，1.65(q，J＝7.2Hz，2H)，1.10-1.01(m，4H)，及0.78(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。
實施例6(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮
利用實施例1中所述的方法制備標題化合物。
LC-MS m/z456(M+1)； 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.31(s，3H)，1.83-2.12(m，2H)，2.26-2.45(m，4H)，2.96(s，2H)，3.19-3.55(m，4H)，3.78(q，1H)，4.43(s，2H)，6.92(s，1H)，7.32(d，1H)，7.60(s，2H)，9.04(s，2H)，10.81(s，1H)ppm。
所需原料同樣利用實施例1中所述的一般方法制備。
6-(2-環(huán)丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸1，1-二甲基乙酯 LC-MS m/z366(M+1)； 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.81(s，2H)，7.13-7.37(m，3H)，4.55(d，2H)，3.64(t，2H)，2.82-2.90(m，2H)，2.30-2.50(m，6H)，1.84-2.14(m，1H)，1.45(s，9H)ppm。
6-(2-環(huán)丁基嘧啶-5-基)-1，2，3，4-四氫異喹啉鎓氯化物 LC-MS m/z 266(M+1)； 環(huán)丁基(亞氨基)甲基氯化銨(Cyclobutyl(imino)methanaminium chloride)
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.69-1.84(m，1H)，1.86-2.05(m，2H)，2.08-2.32(m，3H)，3.29-3.42(m，1H)，8.85(s，4H)ppm。
5-溴-2-環(huán)丁基嘧啶 GC-MS m/z211/213(M)； 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.88-2.17(m，2H)，2.36-2.46(m，4H)，3.78(td，1H)，8.72(s，2H)ppm。
實施例7(5S)-5-甲基-5-({[-[2-(1-甲基環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)咪唑烷-2，4-二酮
利用實施例1中所述的方法制備標題化合物。
LC-MS m/z456(M+1)； 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.94(q，2H)，1.30(d，2H)，1.34(s，3H)，1.54(s，3H)，2.96(t，2H)，3.40-3.62(m，4H)，4.42(s，2H)，7.31(d，1H)，7.58(d，2H)，8.06(s，1H)，8.97(s，2H)，10.77(s，1H)ppm。
所需原料同樣按實施例中所述的一般方法制備 6-[2-(1-甲基環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氫異喹啉鎓氯化物 LC-MS m/z266(M+1)； 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.94(q，2H)，1.30(q，2H)，1.53(s，3H)，2.96-3.14(m，2H)，3.29-3.42(m，2H)，4.18-4.32(m，2H)，5.81(s，1H)，7.15-7.27(m，1H)，7.36(t，1H)，7.63(d，1H)，8.98(s，2H)，9.85(s，1H)ppm。
亞氨基(1-甲基環(huán)丙基)甲基氯化銨 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.46(dd，2H)，0.91(q，2H)，1.21(s，3H)，7.35(s，4H)ppm。
5-溴-2-(1-甲基環(huán)丙基)嘧啶 LC-MS m/z 213/215(M+1)； 1H NMR(399.988MHz，CDCl3)δ0.93(dd，2H)，1.35(dd，2H)，1.54(s，3H)，8.59(s，2H)ppm。
實施例8(5S)-5-環(huán)丙基-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)咪唑烷-2，4-二酮
利用實施例1中所述的一般方法，由6-[2-(環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-1，2，3，4-四氫異喹啉和(4S)-(4-環(huán)丙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基)甲磺酰氯制備標題化合物。
LC-MS m/z 468(M+1)； 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.18(q，1H)，0.33-0.56(m，3H)，1.02-1.17(m，5H)，2.24(dd，1H)，2.96(t，2H)，3.40-3.82(m，4H)，4.43(s，2H)，7.31(t，1H)，7.58(d，2H)，7.95(s，1H)，8.94(s，2H)，10.74(s，1H)ppm。
所需原料制備如下 2-芐基硫基-1-環(huán)丙基-乙酮 將芐硫醇(15.6ml，0.133mol)在DCM(100ml)中攪拌，加入三乙胺(20.5ml，0.146mol)，將該混合物冷卻于冰/丙酮浴中，并滴加溶解于DCM(100ml)中的按WO 03/074495制備的2-溴-1-環(huán)丙基-乙酮(21.77g，0.133mol)。將該混合物攪拌48小時，用水及然后的鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。
GC-MS m/z 206(M)； 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.86-0.91(m，2H)，0.99-1.03(m，2H)，2.05-2.16(m，1H)，3.22(s，2H)，3.64(s，2H)，7.18-7.31(m，5H)ppm。
該材料無需進一步純化即可使用。
芐基硫基甲基-5-環(huán)丙基-咪唑烷-2，4-二酮 將2-芐基硫基-1-環(huán)丙基-乙酮(27.55g，0.133mol)溶解于乙醇(250ml)并分配到20×40ml小瓶中。將氰化鈉(6.52g，0.133mol)和碳酸銨(64g，0.667mol)溶解于水(250ml)并分裝到小瓶中，然后將小瓶密封并在安全網(wǎng)下于90℃加熱5小時。冷卻至室溫后，合并小瓶的內(nèi)容物，加入TBME，并將該混合物用水(×2)和鹽水(×1)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。接著蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物(16.5g，45％)。將該物質(zhì)吸附在硅膠上，并進行色譜(5×9.5cm硅膠柱)，用異己烷至50％乙酸乙酯的異己烷溶液洗脫，得到標題化合物(11.81g，32.1％)。
LC-MS m/z277(M+1)； 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.23-0.59(m，4H)，1.12-1.19(m，1H)，2.87(dd，2H)，3.67-3.74(m，2H)，6.06(s，1H)，7.15-7.33(m，5H)，8.66(s，1H)ppm。
在Chiralpak AD半制備型柱上分離異構(gòu)體。
洗脫液65％醇/35％異己烷 濃度50mg/ml 注入體積2ml 餾出時間21分鐘 在Chiralpak AD 25×0.46cm柱上以0.7ml/分鐘的流速進行的手性分析給出8.9和11.5分鐘的保留時間。將餾出較快的異構(gòu)體用于進一步的反應。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.19-0.58(m，4H)，1.10-1.24(m，1H)，2.86(dd，2H)，3.62-3.78(m，2H)，5.87(s，1H)，7.16-7.34(m，5H)，8.51(s，1H)ppm。
(4S)-(4-環(huán)丙基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基)甲磺酰氯
將(5S)-芐基硫基甲基-5-環(huán)丙基-咪唑烷-2，4-二酮(770mg，2.78mmol)溶解于90％乙酸(100ml)并在冰水浴中冷卻，同時使氯氣鼓泡經(jīng)過10分鐘。將反應混合物凍干，得到標題化合物，其為白色固體(640mg，91％)。
1H NMR(400MHz，THF)δ0.37-0.65(m，4H)，1.25-1.33(m，1H)，4.62(dd，2H)，7.39(s，1H)，9.86(s，1H)ppm。
藥理學實施例 分離的酶測定 MMP12 重組人類MMP12催化區(qū)域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20152的描述來表達和純化。純化的酶能夠用于監(jiān)測抑制劑的活性，如下所述在存在抑制劑(10倍濃度)或不存在抑制劑的條件下，在室溫，將MMP12(50ng/ml最終濃度)在測定緩沖液(0.1M“Tris-HCl”(商標)緩沖液，pH值7.3，含有0.1M NaCl、20mM CaCl2、0.020mMZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商標)清凈劑)中用合成底物Mac-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2(10μM)培養(yǎng)60分鐘。通過在λex320nm和λem 405nm處測定熒光來測定活性。百分數(shù)抑制(抑制百分數(shù))計算如下 ％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光無抑制劑-熒光背景]。
MMP8 純化的前MMP8購自Calbiochem。通過1mM的對氨基-苯基-乙酸汞(APMA)在35℃將酶(10μg/ml)活化2.5h?；罨拿缚梢杂糜谌缦卤O(jiān)測抑制劑的活性在35℃(80％H2O)，在存在抑制劑(10倍濃度)或不存在抑制劑的條件下，將MMP8(200ng/ml的最終濃度)在測定緩沖液(0.1M“Tris-HCl”(商標)緩沖液，pH7.5，含有0.1M NaCl、30mM CaCl2、0.040mM ZnCl和0.05％(w/v)、“Brij 35”(商標)清凈劑)中，用合成底物Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2(12.5μM)培養(yǎng)90分鐘。通過在λex320nm和λem 405nm處測定熒光來測定活性。百分數(shù)抑制計算如下 ％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光無抑制劑-熒光背景]。
MMP9 表達重組人類MMP9催化區(qū)域，然后通過螯合Zn柱色譜并接著通過氧肟酸酯親合柱色譜來純化。該酶能夠用于如下監(jiān)測抑制劑的活性在室溫，在存在抑制劑(10倍濃度)或不存在抑制劑的條件下，將MMP9(5ng/ml的最終濃度)在測定緩沖液(0.1M“Tris-HCl”(商標)緩沖液，pH7.3，含有0.1MNaCl、20mM CaCl2、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)、“Brij 35”(商標)清凈劑)中，用合成底物Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2(5μM)培養(yǎng)30分鐘。通過在λex 320nm和λem 405nm處測定熒光來測定活性。百分數(shù)抑制計算如下 ％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光無抑制劑-熒光背景]。
MMP14 重組人類MMP14催化區(qū)域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20，152來表達和純化。純化的酶能夠用于監(jiān)測抑制劑的活性，如下所述在存在抑制劑(5倍濃度)或不存在抑制劑的條件下，在室溫，將MMP14(10ng/ml最終濃度)在測定緩沖液(0.1M“Tris-HCl”(商標)緩沖液，pH值7.5，含有0.1M NaCl、20mM CaCl2、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商標)清凈劑)中用合成底物Mac-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2(10μM)培養(yǎng)60分鐘。通過在λex320nm和λem 405nm處測定熒光來測定活性。百分數(shù)抑制計算如下 ％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光無抑制劑-熒光背景]。
使用表達和純化的前MMP來試驗其它基質(zhì)金屬蛋白酶(包括MMP9)的方案，例如如C.Graham Knight等人(1992)FEBS Lett.296(3)263-266所述。
MMP19 重組人類MMP19催化區(qū)域可以按照Parkar A.A.等人(2000)，ProteinExpression and Purification，20，152來表達和純化。純化的酶能夠用于監(jiān)測抑制劑的活性，如下所述在存在抑制劑(5倍濃度)或不存在抑制劑的條件下，在35℃，將MMP19(40ng/ml最終濃度)在測定緩沖液(0.1M“Tris-HCl”(商標)緩沖液，pH值7.3，含有0.1M NaCl、20mM CaCl2、0.020mM ZnCl和0.05％(w/v)“Brij 35”(商標)清凈劑)中用合成底物Mca-Pro-Leu-Ala-Nva-Dpa-Ala-Arg-NH2(5μM)培養(yǎng)120分鐘。通過在λex320nm和λem 405nm處測定熒光來測定活性。百分數(shù)抑制計算如下 ％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光無抑制劑-熒光背景]。
下表顯示了本發(fā)明化合物代表性選擇。
表
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物或其藥用鹽
式中
R1表示環(huán)丁基或環(huán)丙基；所述環(huán)丙基任選被CH3，CN或者一或兩個氟原子進一步取代；
R2表示C1-3烷基或環(huán)丙基；及
A，A1和B獨立地表示CH或N；
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽，其中R1表示環(huán)丙基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物或其藥用鹽，其中R2表示甲基或乙基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3中任一項的化合物或其藥用鹽，其中B1表示CH。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4中任一項的化合物或其藥用鹽，其中A和A1各自表示N。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥用鹽，該化合物選自
(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-({[6-(6-環(huán)丙基吡啶-3-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫-2，7-二氮雜萘-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)-5-乙基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-({[6-(2-環(huán)丁基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺酰基}甲基)-5-甲基咪唑烷-2，4-二酮；
(5S)-5-甲基-5-({[6-[2-(1-甲基環(huán)丙基)嘧啶-5-基]-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)咪唑烷-2，4-二酮；和
(5S)-5-環(huán)丙基-5-({[6-(2-環(huán)丙基嘧啶-5-基)-3，4-二氫異喹啉-2(1H)-基]磺?；鶀甲基)咪唑烷-2，4-二酮。
7.制備權(quán)利要求1所定義的式(I)的化合物或其藥用鹽的方法，其包括
a)使式(II)的化合物和式(III)化合物(或其鹽)反應
其中R2如式(I)所定義和L1表示離去基團
其中R1、A、A1和B如式(I)中所定義；或
b)使式(V)的化合物與式(XII)的硼酸衍生物反應，
其中R2和B如式(I)中所定義，LG為離去基團；
其中R1、A和A1如式(I)中所定義；或
c)使式(IX)的化合物與碳酸銨和氰化鉀反應
其中R1、R2、A、A1和B如式(I)中所定義；
以及之后任選地形成其藥用鹽。
8.一種藥物組合物，其包括如權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)的化合物或其藥用鹽，以及結(jié)合有可藥用助劑、稀釋劑或載體。
9.一種制備權(quán)利要求8所要求的藥物組合物的方法，其包括將權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)的化合物或其藥用鹽與可藥用助劑、稀釋劑或載體混合。
10.權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)的化合物或其藥用鹽，其用于治療。
11.權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)的化合物或其藥用鹽在制備用于治療阻塞性氣道疾病的藥物中的用途。
12.權(quán)利要求11的用途，其中阻塞性氣道疾病是哮喘或慢性阻塞性肺病。
13.權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)化合物或其藥用鹽在制備用于治療類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、動脈粥樣硬化、癌癥或多發(fā)性硬化的藥物中的用途。
14.治療由MMP12和/或MMP9介導的疾病或病癥的方法，該方法包括對患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)化合物或其藥用鹽。
15.治療阻塞性氣道疾病的方法，該方法包括對患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1-6中任一項所要求的式(I)化合物或其藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)的化合物，式中R1，R2，A，A1和B如說明書中所定義；它們的制備方法；包含它們的藥物組合物；該藥物組合物的制備方法；它們的在治療中的用途。該化合物可用作MMP抑制劑。
文檔編號C07D471/00GK101119987SQ200580048177
公開日2008年2月6日 申請日期2005年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月17日
發(fā)明者巴林特·加博斯, 邁克爾·倫德克維斯特, 馬格努斯·芒克阿夫羅森肖爾德, 艾戈爾·沙莫夫斯基, 帕沃爾·茲拉托伊德斯基 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司