專利名稱：Hcv ns－3絲氨酸蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的黃病毒HCV NS3絲氨酸蛋白酶抑制劑以及它們用于治療或者預(yù)防HCV的方法。
背景技術(shù)：
HCV NS3絲氨酸蛋白酶是一種包含絲氨酸蛋白酶域和RNA解旋酶域的多功能蛋白質(zhì)。蛋白酶輔因子NS4A，一種相對小的蛋白質(zhì)，是增強(qiáng)絲氨酸蛋白酶活性所必需的蛋白質(zhì)。所述NS3絲氨酸蛋白酶在病毒生活周期中是必不可少的。根據(jù)X射線晶體結(jié)構(gòu)揭示的基質(zhì)結(jié)合部位分析表明，NS3蛋白酶的結(jié)合部位顯著淺薄并且溶劑被暴露，使得小分子抑制劑設(shè)計(jì)遇到困難。
確信兩種HCV蛋白酶抑制劑已經(jīng)進(jìn)入了臨床試驗(yàn)，即公開于WO0059929中的Boehringer Ingelheim′s BILN-2061和公開于WO0387092中的Vertex′VX-950。在學(xué)術(shù)和專利文獻(xiàn)中同樣提出了許多類似的擬肽HCV蛋白酶抑制劑。上述現(xiàn)有技術(shù)中的大多數(shù)擬肽通常以所述抑制劑P2位L-脯氨酸衍生物的形式存在，并且與HCV蛋白酶的S2亞位點(diǎn)相互作用。在BILN-2061的情形中，L-脯氨酸被喹啉醚4-取代，然而在VX-950中具有一個與L-脯氨酸環(huán)稠合的碳環(huán)。大多數(shù)擬肽還包括其它在P3位鍵接了的L-氨基酸衍生物肽，而許多上述提出的抑制劑還包括另外擴(kuò)展到P4、P5和P6的L-氨基酸衍生物。
已經(jīng)很明顯，BILN-2061或者VX-950的持續(xù)給藥選擇抗相應(yīng)藥物的HCV突變體，即所謂的藥物逃逸突變體。這些藥物逃逸突變體在HCV蛋白酶基因組中具有特征突變，特別是D168V、D168Y和/或A165S。由此，HCV的治療示例不得不類似于HIV治療，其中藥物逃逸突變也容易出現(xiàn)。據(jù)此，為了給無效患者提供治療方案，將不斷需要其它具有不同抵抗特性的藥物，并且即使對于首次治療，在將來使用多種藥物的聯(lián)合治療都可能成為正常形式。
使用HIV藥物，并且特別是HIV蛋白酶抑制劑的實(shí)踐進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)，亞最佳藥物動力學(xué)和復(fù)雜的劑量方式將很快導(dǎo)致順應(yīng)性被無意地破壞。這又意味著在HIV狀況下，相應(yīng)藥物的24小時谷濃度(最小的血漿濃度)往往在當(dāng)天的大部分時間內(nèi)降低在IC90或者ED90限度之下。普遍認(rèn)為，至少IC50的24小時谷濃度，并且更現(xiàn)實(shí)而言，IC90或者ED90的24小時谷濃度對于延遲藥物逃逸突變體的產(chǎn)生和獲得必需的藥物動力學(xué)和藥物代謝是非常必要的，這就使得上述谷濃度對藥物設(shè)計(jì)形成了一種有力挑戰(zhàn)。現(xiàn)有技術(shù)HCV蛋白酶抑制劑的強(qiáng)烈擬肽性質(zhì)以及自身結(jié)構(gòu)的多重肽鍵，對有效劑量形式形成了藥物動力學(xué)障礙。
發(fā)明簡述根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了式VI化合物，或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥。
其中A為C(＝O)OR1、C(＝O)NHSO2R2、C(＝O)NHR3或者CR4R4’，其中R1為氫、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；R2為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；R3為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、-OC1-C6烷基、-OC0-C3烷基碳環(huán)基、-OC0-C3烷基雜環(huán)基；R4為鹵素、氨基或者OH；或者R4和R4’都為＝O；R4’為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；其中R2、R3和R4’各自任選被獨(dú)立地選自以下的1～3個取代基所取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2C(＝O)-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；Y獨(dú)立地為一個鍵或者C1-C3亞烷基；Ra獨(dú)立地為H或者C1-C3烷基；Rb獨(dú)立地為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基或者C0-C3烷基雜環(huán)基；p獨(dú)立地為1或者2；M為CR7R7′或者NRu；Ru為H或者C1～C3烷基；R7為C1-C6烷基、C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基或者C2-C6鏈烯基，它們各自任選被1～3個鹵原子或者被氨基、-SH或者C0-C3烷基環(huán)烷基所取代；或者R7為J；R7′為H或者與R7一起形成任選被R7′a取代的C3-C6環(huán)烷基環(huán)，其中；R7′a為C1-C6烷基、C3-C5環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基，它們各自可以任選被鹵素取代；或者R7′a可以為J；q′為0或者1并且k為0～3；Rz為H，或者與星號標(biāo)記的碳一起形成烯鍵；Rq為H或者C1-C6烷基；W為-CH2-、-O-、-OC(＝O)H-、-OC(＝O)-、-S-、-NH-、-NRa、-NHSO2-、-NHC(＝O)NH-或者-NHC(＝O)-、-NHC(＝S)NH-或者一個鍵；R8是包含1個或者2個各自具有4～7個環(huán)原子并且各自具有0～4個選自S、O和N的雜原子的飽和、部分飽和或者不飽和環(huán)的環(huán)系，所述環(huán)系任選通過C1-C3烷基與W間隔；或者R8為C1-C6烷基；任何上述R8基團(tuán)都可以任選被R9單取代、二取代或者三取代，其中R9獨(dú)立地選自鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；其中所述碳環(huán)基或者雜環(huán)基部分任選被R10所取代；其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基、磺?；?C1-C3烷基)磺?；O2、OH、SH、鹵素、鹵代烷基、羧基、酰氨基；Rx為H或C1-C5烷基；或者Rx為J；T為-CHR11-或者-NRd-，其中Rd為H、C1-C3烷基；或者Rd為J；R11為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被以下的基團(tuán)所取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；或者R11為J；J，如果存在，為單個3～10元飽和或者部分不飽和的亞烷基鏈，它從R7/R7′環(huán)烷基或者從R7連接的碳原子延伸至Rd、Rj、Rx、Ry或者R11中一個從而形成一個大環(huán)，所述鏈任選被一至三個獨(dú)立選自-O-、-S-或者-NR12-的雜原子所中斷，并且其中鏈中的0～3個碳原子任選被R14取代；其中；R12為H、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或者-C(＝O)R13；R13為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；R14獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代和C1-C6硫代烷基；m為0或者1；n為0或者1；U為＝O或者不存在；R15為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被以下基團(tuán)取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHS(＝O)pRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb、Y-NRaC(＝O)ORb；G為-O-、-NRy-、-NRjNRj-；Ry為H、C1-C3烷基；或者Ry為J；一個Rj為H，并且另一個Rj為H或者J；R16為H或R16為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被以下基團(tuán)取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb、Y-NRaC(＝O)ORb。
并不希望以任何方式受限于理論或者具體變量的暫行約束模式，在此應(yīng)用的表意概念P1、P2、P3和P4僅僅是為了便利起見進(jìn)行提供，它們基本具有如Schechter & Berger，(1976)Biochem Biophys ResComm 27 157-162所述的常規(guī)含義，表示抑制劑的被確認(rèn)為分別充填所述酶S1、S2、S3和S4亞位點(diǎn)的那些部分，其中S1鄰近斷裂位點(diǎn)以及S4遠(yuǎn)離斷裂位點(diǎn)。不論連接方式如何，通過式VI等定義的組分都意圖包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。例如，預(yù)期，尤其是當(dāng)m和/或n為0時，封端基團(tuán)R16-G可以與S3和S4亞位點(diǎn)相互作用。
本發(fā)明的多種實(shí)施方案都可以象征性地表示為R16-G-P4-P3-P2-P1，其中P3和/或P4可以不存在。其中P1、P3和P4各自表示構(gòu)成天然或者非天然氨基酸衍生物的結(jié)構(gòu)單元，P2為取代的碳環(huán)殘基和G-R16為封端基團(tuán)。上述結(jié)構(gòu)單元一般通過酰胺鍵連接在一起。在本發(fā)明化合物中，所述酰胺鍵在P2結(jié)構(gòu)單元的各個側(cè)面上彼此反向。
本發(fā)明的另一方面包括藥物組合物，所述藥物組合物包括如上定義的本發(fā)明化合物以及其藥學(xué)上可接受的載體或者稀釋劑。
本發(fā)明的化合物和組合物可以用于醫(yī)學(xué)治療或者預(yù)防HCV在人類中傳染的方法中。據(jù)此，本發(fā)明的另一方面為如上所定義的本發(fā)明化合物在治療學(xué)上的用途，比如在制造用于預(yù)防或者治療黃病毒在人類或者動物中傳染的藥物中的用途。示例性的黃病毒包括BVDV、登革熱以及特別是HCV。
在本發(fā)明化合物中，將P2和P3連接在一起的酰胺鍵相對于連接P1和P2的酰胺鍵反向，即在P2腳手架每側(cè)上的氨基酸衍生物P1和P3都通過它們的氨基官能團(tuán)偶聯(lián)至P2腳手架的各個側(cè)面上的酸基團(tuán)。這意味著P3和P4側(cè)鏈(包括R16封端至它與S3或者S4相互作用的程度)指向與原肽基質(zhì)相反的方向。反向P3和P4氨基酸的另一結(jié)果是，這些氨基酸的側(cè)鏈相對于原肽基質(zhì)將一個原子向外轉(zhuǎn)移。
可以預(yù)期，P3和P4側(cè)鏈這種方式的方向變化將有助于形成P3和/或P4和/或R16袋填充基團(tuán)(pocket filing groups)(例如側(cè)鏈)的非天然D型立體化學(xué)。確實(shí)地，上述化合物一般是高活性化合物并且都在本發(fā)明范圍內(nèi)。然而，現(xiàn)已驚人地發(fā)現(xiàn)，即使在P3和/或P4位帶有L-氨基酸側(cè)鏈的本發(fā)明化合物都顯示出良好的活性，但是相應(yīng)的側(cè)鏈單元也必須相對于原來的肽基質(zhì)從不同的角度接近S3或者S4袋。據(jù)此，R11和/或R15上的L-立體化學(xué)和/或與擬L-立體化學(xué)相應(yīng)的R16構(gòu)型都代表本發(fā)明的優(yōu)選方面。
對S3和/或S4袋的不同接近角度還暗含著本發(fā)明化合物具有避免現(xiàn)有技術(shù)HCV蛋白酶抑制劑所表現(xiàn)的抗性的能力，迄今為止，所述現(xiàn)有技術(shù)HCV蛋白酶抑制劑都具有天然或者非天然L-氨基酸殘基的常規(guī)肽骨架。正如熟知的在抗病毒治療選擇壓力下迅速產(chǎn)生藥物逃逸突變體的HIV逆轉(zhuǎn)錄酶一樣，與RNA有關(guān)的HCV的RNA聚合酶NS5A具有非常差的解讀能力。這也意味著HCV聚合酶非常易于出錯，并且當(dāng)HCV抗病毒劑長期給藥時可能會產(chǎn)生特征抗性。即使是在投入之前，也很顯然，具有基本上肽骨架(即使進(jìn)行了大環(huán)化)的BILN 2061和在P3和P4上具有直鏈肽骨架的Vertex′NS3蛋白酶抑制劑VX-950在NS3蛋白酶的155、156或者168位上會迅速產(chǎn)生特征抗性突變(Lin等人，J Biol Chem 2004 279(17)17808-17)。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物組包括其中P1表示肼衍生物的那些化合物，即M為NRu，其中Ru一般為H或者C1-C3烷基。其中M為CR7R7′的化合物構(gòu)成本發(fā)明另外優(yōu)選的一方面。
在式VI中M為CR7R7′的優(yōu)選實(shí)施方案包括下式VIA
優(yōu)選在式VI中q′和k的值包括1∶1、1∶2、1∶3、2∶2、2∶3，更優(yōu)選為0∶2和0∶0；并且最優(yōu)選為0∶1，在此情形下優(yōu)選的化合物具有以下部分結(jié)構(gòu)之一 特別是其中Rz為H或者Rq為H或者甲基。
本發(fā)明化合物可以包含P3和P4兩個官能團(tuán)，即m和n各自都為1。包括P3和P4官能團(tuán)的式VI內(nèi)優(yōu)選的實(shí)施方案包括以下式VIda-VIdb
另外的實(shí)施方案包括與VIda和VIdb相應(yīng)的結(jié)構(gòu)，其中M為NRu。
本發(fā)明化合物的另一結(jié)構(gòu)包含P3官能團(tuán)，但不包括P4官能團(tuán)，即m為1和n為0。包括P3，但是不包括P4官能團(tuán)的式VI內(nèi)優(yōu)選的實(shí)施方案包括以下式VIea-VIeb
另外的實(shí)施方案包括與VIea和VIeb相應(yīng)的結(jié)構(gòu)，其中M為NRu。
本發(fā)明化合物的其它結(jié)構(gòu)包括其中m和n都為0并且由此基團(tuán)R16-G鄰接P2的構(gòu)造，但是如上所述，封端基團(tuán)R16-G可以有利地與S3和/或S4相互作用。
其中m和n都為0的式VI內(nèi)優(yōu)選的實(shí)施方案包括下式VIfa 另外的實(shí)施方案包括與VIfa相應(yīng)的結(jié)構(gòu)，其中M為NRu。
本發(fā)明化合物可以包括線型分子，如上所述。另外，在其中R7和R7′一起定義為螺環(huán)烷基(比如螺環(huán)丙基)的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以被構(gòu)造成大環(huán)，其中連接基團(tuán)J在式VI中Rj、Rx、Ry、Rd或者R11中一個基團(tuán)之間延伸。另外，大環(huán)J可以從與R7鄰接的碳延伸至Rj、Rx、Ry、Rd或者Ru中的一個。
其中m為0并且n為1的式VI化合物內(nèi)，優(yōu)選上述大環(huán)結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案包括下式VIga-VIgc
同樣優(yōu)選其中J鏈連接至與R7鄰接的碳原子的相應(yīng)結(jié)構(gòu)。
含有P3和P4兩個官能團(tuán)的式VI化合物內(nèi)，即其中m和n都為1的式VI化合物內(nèi)，優(yōu)選上述大環(huán)結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案包括下式VIha-VIhc
同樣優(yōu)選其中J鏈連接至與R7鄰接的碳原子的相應(yīng)結(jié)構(gòu)。
在P3和P4官能團(tuán)都不存在的式VI化合物內(nèi)，即其中m和n各自都為0的式VI化合物內(nèi)，優(yōu)選大環(huán)結(jié)構(gòu)包括下式VIhe-VIhf
同樣優(yōu)選其中J鏈連接至與R7鄰接的碳原子的相應(yīng)結(jié)構(gòu)。
一般而言，在任選的大環(huán)結(jié)構(gòu)中，例如上述圖解的大環(huán)結(jié)構(gòu)中，連系物J為具有3～10個鏈原子，優(yōu)選4～7個鏈原子，比如5或者6個鏈原子的飽和亞烷基或者部分不飽和的亞烷基鏈，即在相鄰碳原子之間帶有1～3個不飽和鍵的亞烷基鏈，一般為一個不飽和現(xiàn)象。該鏈的長度自然將取決于J是否從Rd、Rj、Rx、Ry、R11或者從與R7鄰接的碳延伸。適宜的鏈詳述在WO00/59929中。一般J為提供具有13～16個環(huán)原子的大環(huán)的大小(包括P1、P2以及如果存在的P3基團(tuán)中含在環(huán)內(nèi)的那些原子)。適宜的J為提供具有14或者15個環(huán)原子的大環(huán)的大小。
合意地，J鏈含有一個或兩個選自以下的雜原子O、S、NH、NC1-C6烷基或者N-C(＝O)C1-C6烷基。更優(yōu)選，J鏈任選包含一個下述的雜原子NH或者N-C(＝O)C1-C6烷基，最優(yōu)選為N(Ac)。最優(yōu)選包含氮原子的鏈?zhǔn)秋柡玩?。在另一?shí)施方案中，J包含一個選自O(shè)或者S的雜原子。該鏈可以被R14取代，比如H或者甲基。
一般J連系物是飽和的。另外，J包含1～3個雙鍵，優(yōu)選1個雙鍵，一般與環(huán)烷基R7官能團(tuán)間隔一個碳原子，如果存在的話。上述雙鍵可以是順式或者反式雙鍵。
從而，J的代表性實(shí)例包括戊烯、己烯、庚烯，它們各自被下述基團(tuán)所取代C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或者C1-C6硫代烷基；戊烯-3-基、己烯-4-基、庚烯-5-基，其中3、4或者5是指在3位和4位碳原子、4位和5位碳原子等等之間的雙鍵。
適宜的R7和R7′基團(tuán)包括其中R7′為H，并且R7為正乙基、正丙基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基、環(huán)丁基甲基、2，2-二氟乙基或者巰基甲基的那些。優(yōu)選的實(shí)施方案包括其中R7為正丙基或者2，2-二氟乙基的那些實(shí)施方案。
R7和R7′的另一優(yōu)選結(jié)構(gòu)包括其中R7′為H并且R7為C3-C7環(huán)烷基或者C1-C3烷基C3-C7環(huán)烷基的那些結(jié)構(gòu)。
對于R7和R7′，此外優(yōu)選的結(jié)構(gòu)包括其中R7′為H并且R7為J的那些結(jié)構(gòu)。
另外，R7和R7′一起定義為螺-環(huán)烷基官能團(tuán)，比如螺-環(huán)丁基環(huán)，并且更優(yōu)選為螺-環(huán)丙基環(huán)。在本發(fā)明上下文中，“螺”僅僅是指環(huán)烷基環(huán)與所述化合物的肽骨架共享一個碳原子。所述環(huán)是被取代或者未被取代的環(huán)。優(yōu)選的取代基包括用R7′a單取代或者二取代，其中R7′a為C1-C6烷基、C3-C5環(huán)烷基或者C2-C6鏈烯基，各自任選被鹵素所取代。
另外所述取代基可以是如上所述的J連系物。對于螺-環(huán)丙基環(huán)，一般優(yōu)選的立體化學(xué)定義如下。
特別優(yōu)選的取代基包括R7′a為乙基、乙烯基、環(huán)丙基(即對R7/R7′“螺”環(huán)烷基環(huán)的螺-環(huán)丙基取代基)、1-或者2-溴乙基、1-或者2-氟乙基、2-溴乙烯基或者2-fluorethyl。
在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，A為如PCT/EP03/10595中詳述的-CR4R4’，其內(nèi)容在此引入作為參考。
由此，適宜的R4’基團(tuán)包括C1-C6烷基，比如甲基、乙基、丙基、乙烯基和-CHCHCH3。另外優(yōu)選的R4’基團(tuán)包括芳基或者雜芳基，比如任選取代的苯基、吡啶基、噻唑基或者苯并咪唑基或者C1-C3烷基芳基或者C1-C3烷基雜芳基，其中烷基部分為甲基、乙基、丙基、乙烯基和-CHCHCH3。優(yōu)選的芳基部分包括任選取代的苯基、苯并噻唑和苯并咪唑。
優(yōu)選的R4基團(tuán)包括-NH2、氟或者氯。另外優(yōu)選的R4基團(tuán)包括-OH并且特別是＝O。
A的另一實(shí)施方案為C(＝O)NHR3，其中R3為任選取代的C0-C3烷基芳基、C0-C3烷基雜芳基、OC0-C3烷基芳基或者OC0-C3烷基雜芳基。適當(dāng)?shù)娜〈霈F(xiàn)于以下定義部分。
對于A，另一優(yōu)選的結(jié)構(gòu)為C(＝O)OR1，特別是其中R1為C1-C6烷基，比如甲基、乙基或者叔丁基，以及最優(yōu)選為氫。
對于A，特別優(yōu)選的結(jié)構(gòu)為C(＝O)NHSO2R2，特別是其中R2為任選取代的C1-C6烷基(優(yōu)選甲基)、或者任選取代的C3-C7環(huán)烷基(優(yōu)選環(huán)丙基)或者任選取代的C0-C6烷基芳基(優(yōu)選任選取代的苯基)。適當(dāng)?shù)娜〈霈F(xiàn)于以下定義部分。
在環(huán)狀P2基團(tuán)上的取代基-W-R8可以應(yīng)用任何脯氨酸取代基，所述脯氨酸取代基廣泛描述于下述文獻(xiàn)中WO00/59929、WO00/09543、WO00/09558、WO99/07734、WO99/07733、WO02/60926、WO03/35060、WO03/53349、WO03/064416、WO03/66103、WO03/064455、WO03/064456、WO03/62265、WO03/062228、WO03/87092、WO03/99274、WO03/99316、WO03/99274、WO04/03670、WO04/032827、WO04/037855、WO04/43339、WO04/92161、WO04/72243、WO04/93798、WO04/93915、WO04/94452、WO04/101505、WO04/101602、WO04/103996和WO04113365等等。
優(yōu)選的W官能團(tuán)包括，W為-OC(＝O)NH-、-OC(＝O)-、-NH-、-NR8′-、-NHS(O)2-或者-NHC(＝O)-，特別是-OC(＝O)NH-或者-NH-。對于上述W官能團(tuán)，優(yōu)選的R8基團(tuán)包括任選取代的C0-C3烷基碳環(huán)基或者C0-C3烷基-雜環(huán)基，包括在WO0009543、WO0009558和WO00/174768中描述的那些基團(tuán)。例如在環(huán)狀P2基團(tuán)上的酯類取代基，-W-R8，包括在WO01/74768中公開的那些取代基，比如C1-C6烷酰氧基、C0-C3烷基芳酰氧基，特別是(任選取代的)苯甲酰氧基或者C0-C3烷基雜環(huán)酰氧基，特別是以下基團(tuán) 此公開文獻(xiàn)還描述了另外可能的-W-R8，例如C1-C6烷基(比如乙基、異丙基)、C0-C3烷基碳環(huán)基(比如環(huán)己基)、2，2-二氟乙基、-C(＝O)NRc，其中Rc為C1-C6烷基、C0-C3烷基環(huán)丙基、C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜環(huán)基。
當(dāng)前優(yōu)選的W官能團(tuán)包括-S-，并且特別是-O-。在所述實(shí)施方案中，R8的適宜含義包括C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜芳基，它們各自任選被R9單取代、二取代或者三取代，其中R9為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、氨基或者酰氨基(例如任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基或者酰氨基)、C0-C3烷基芳基、C0-C3烷基雜芳基或者羧基，其中芳基或者雜芳基任選被R10取代，其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基(比如被C1-C6烷基單取代或者雙取代的氨基)、酰氨基(比如C1-C3烷基酰胺)、磺?；鵆1-C3烷基、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、羧基或者雜芳基。
一般，R8為C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜芳基時的C0-C3烷基部分為甲基，并且特別是不存在，即C0。所述芳基或者雜芳基部分如以下定義部分的寬泛說明。
優(yōu)選的R9包括C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基(比如二-(C1-C3烷基)氨基)、酰氨基(比如-NHC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C3烷基)、芳基或者雜芳基，其中芳基或者雜芳基部分任選被R10取代；其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基(比如單-或者二-C1-C6烷基氨基)、酰氨基(比如-NHC(O)C1-C3烷基或者C(＝O)NHC1-C6烷基)、鹵素、三氟甲基或者雜芳基。
優(yōu)選的R10包括C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、酰氨基(比如-NHC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C6烷基)、鹵素或者雜芳基。
特別優(yōu)選的R10包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基、甲氧基、氯、氨基、酰氨基(比如為-NHC(O)C1-C3烷基或者C(＝O)NHC1-C6烷基)或者C1-C3烷基噻唑。
R8優(yōu)選的實(shí)施方案包括1-萘基甲基、2-萘基甲基、芐基、1-萘基、2-萘基或者喹啉基，各自未被取代或者被如上定義的R9單取代或者二取代，特別是1-萘基甲基或者未被取代、被如上定義的R9單取代或者二取代的喹啉基。
當(dāng)前優(yōu)選R8為 其中R9a為C1-C6烷基；C1-C6烷氧基；硫代C1-C3烷基；任選被C1-C6烷基取代的氨基；C0-C3烷基芳基；或者C0-C3烷基雜芳基、C0-C3烷基雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基或者雜環(huán)基任選被R10所取代，其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基、酰氨基、雜芳基和雜環(huán)基；和R9b為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、酰氨基、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、羧基。
適宜的R9a包括芳基或者雜芳基，各自任選被如上定義的R10所取代，特別是其中R9a選自 其中R10為H、C1-C6烷基或者C0-C3烷基-C3-C6環(huán)烷基、氨基(比如被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基)、酰氨基(比如為-NHC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C6烷基)、雜芳基或者雜環(huán)基。
R9a合宜的為苯基，并且由此R8為 其中R10a為H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或者鹵素；和R9b為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基(比如C1-C3烷基氨基)、酰氨基(比如為-NHC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C3烷基)、NO2、OH、鹵素、三氟甲基或者羧基。
另外優(yōu)選的R8為
其中R10a為H、C1-C6烷基或者C0-C3烷基-C3-C6環(huán)烷基、氨基(比如任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基)、酰氨基(比如為-NHC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C3烷基或者C(＝O)N(C1-C3烷基)2)、雜芳基或者雜環(huán)基；和R9b為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基(比如為-NRC(O)C1-C6烷基或者C(＝O)NHC1-C3烷基或者C(＝O)N(C1-C3烷基)2)、NO2、OH、鹵素、三氟甲基或者羧基。
在上面剛剛描述的實(shí)施方案中，R9b合宜的為C1-C6-烷氧基，優(yōu)選為甲氧基。
其它R8基團(tuán)，例如當(dāng)W為醚時，為下式 其中W′為N或者CH，r為0或者1，Ra′為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、羥基或者胺，并且Rb′為H、鹵素、C1-C6烷基、C0-C3烷基環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫代烷基、環(huán)烷基C0-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜環(huán)基。特別優(yōu)選的醚取代基為7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基。
當(dāng)W為一個鍵時，則R8優(yōu)選為取代或者未被取代的雜環(huán)體系，如WO2004/072243或者WO2004/113665所述。
當(dāng)W為一個鍵時，R8代表性的實(shí)例包括以下任選可以被取代的芳族化合物1H-吡咯、1H-咪唑、1H-吡唑、呋喃、噻吩、唑、噻唑、異唑、異噻唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、吡嗪、酞嗪、喹喔啉、喹唑啉、喹啉、噌啉、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶、1H-吲哚、1H-苯并咪唑、1H-吲唑、7H-嘌呤、苯并噻唑、苯并唑、1H-咪唑并[4，5-c]吡啶、1H-咪唑并[4，5-b]吡啶、1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮、1，3-二氫-苯并咪唑-2-硫酮、2，3-二氫-1H-吲哚、1，3-二氫-吲哚-2-酮、1H-吲哚-2，3-二酮、1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮、1H-吡咯并[2，3-c]吡啶、苯并呋喃、苯并[b]噻吩、苯并[d]異唑、苯并[d]異噻唑、1H-喹啉-2-酮、1H-喹啉-4-酮、1H-喹唑啉-4-酮、9H-咔唑、1H-喹唑啉-2-酮。
當(dāng)W為一個鍵時，R8另外的代表性實(shí)例包括以下任選可以被取代的非芳族化合物氮丙啶、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷、4，5-二氫-1H-吡唑、吡唑烷、咪唑烷-2-酮、咪唑烷-2-硫酮、吡咯烷-2-酮、吡咯烷-2，5-二酮、哌啶-2，6-二酮、哌啶-2-酮、哌嗪-2，6-二酮、哌嗪-2-酮、哌嗪、嗎啉、硫代嗎啉-1，1-二氧化物、吡唑烷-3-酮、咪唑烷-2，4-二酮、哌啶、四氫呋喃、四氫吡喃、[1，4]二氧六環(huán)、1，2，3，6-四氫吡啶。
當(dāng)W為一個鍵時，優(yōu)選R8的含義包括四唑及其衍生物。所述四唑部分被連接到環(huán)狀P2腳手架上并且任選被取代，如下所示 其中Q*選自不存在、-CH2-、-O-、-NH-、-N(R1*)-、-S-、-S(＝O)2-和-(C＝O)-；Q*選自不存在、-CH2-和-NH-；Y*選自H、C1-C6烷基、C0-C3芳基、C0-C3雜環(huán)基；和R1*選自H、C1-C6烷基、碳環(huán)基、C0-C3芳基、C0-C3雜環(huán)基。
取代四唑的代表性實(shí)例如WO2004/072243中表1以及隨后的結(jié)構(gòu)或者WO2004/113665所述。
此外，當(dāng)W為一個鍵時，優(yōu)選R8的含義包括三唑及其衍生物。所述三唑部分被連接到環(huán)狀P2腳手架上并且任選被取代，如下所示 其中X*和Y*獨(dú)立地選自H、鹵素、C1-C6烷基、C0-C3碳環(huán)基、-CH2-氨基、-CH2-芳基氨基、-CH2-二芳基氨基、-(C＝O)-氨基、-(C＝O)-芳基氨基、-(C＝O)-二芳基氨基、C0-C3芳基、C0-C3雜環(huán)基，或者另外，X*和Y*連同它們連接的碳原子合起來形成選自芳基和雜芳基的環(huán)狀部分。
取代三唑的代表性實(shí)例如WO2004/072243中表2以及隨后的結(jié)構(gòu)或者WO2004/113665所述。
此外，當(dāng)W為一個鍵時，優(yōu)選R8的含義包括噠嗪酮及其衍生物。所述噠嗪酮部分被連接到環(huán)狀P2腳手架上并且任選被取代，如下所示 其中X*、Y*和Z*獨(dú)立地選自H、N3、鹵素、C1-C6烷基、碳環(huán)基、氨基、C0-C3芳基、-S-芳基、-O-芳基、-NH-芳基、二芳基氨基、二雜芳基氨基、C0-C3雜環(huán)基、-S-雜芳基、-O-雜芳基、-NH-雜芳基，或者另外，X和Y或者Y和Z以及它們連接的碳原子合起來形成芳基或者雜芳基環(huán)部分。
取代噠嗪酮的代表性實(shí)例如WO2004/072243中表3以及隨后的結(jié)構(gòu)或者WO2004/113665所述。
優(yōu)選P3基團(tuán)，即當(dāng)m為1時，類似于天然或者非天然氨基酸，特別是脂族氨基酸，比如L-纈氨酰、L-亮氨酰、L-異亮氨酰、或者L-叔亮氨酰。此外優(yōu)選的P3基團(tuán)，如WO02/01898中所示，包括C0-C3烷基環(huán)烷基丙氨酸，特別是環(huán)己基丙氨酸，任選被CO2Rg所取代，其中Rg為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基芳基、C0-C3烷基雜環(huán)基、C0-C3烷基環(huán)烷基或者胺；或者N-乙?；哙せ蛘咚臍溥秽Ｓ纱?，優(yōu)選R11基團(tuán)包括C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基(例如C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基)、C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜芳基，它們各自任選被羥基、鹵素、氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫代烷基、C(＝O)OR14、羧基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基、雜芳基或或雜環(huán)基所取代，其中所述取代基特別是羥基或者C(＝O)OR14。
特別優(yōu)選的R11包括叔丁基、異丁基、環(huán)己基、苯乙基、2，2-二甲基-丙基、環(huán)己基甲基、苯甲基、2-吡啶甲基、4-羥基-苯基甲基或者羧基丙基。最優(yōu)選的R11含義為叔丁基、異丁基或者環(huán)己基。
本發(fā)明實(shí)施方案包括其中P4不存在(即n為0)并且其中P3不帶有羰基(即U不存在)的化合物。代表性的亞結(jié)構(gòu)包括下式Ii的那些亞結(jié)構(gòu) 其中Rx和Ry如上所定義，優(yōu)選為H；R11′為C1-C6烷基，優(yōu)選為C3-C5支鏈烷基，比如L-纈氨酰、L-亮氨酰、L-異亮氨酰、L-叔亮氨酰的側(cè)鏈；或者C0-C2烷基C3-C7環(huán)烷基，比如環(huán)己基或者環(huán)己基甲基；R16a為-Rba、-S(＝O)pRba、-C(＝O)Rba；Rba為C1-C6烷基、C0-C3烷基雜環(huán)基、C0-C3烷基碳環(huán)基。
另外，帶有部分結(jié)構(gòu)Ii的化合物可以在適當(dāng)?shù)腞7含義和Rx、Ry或者R11′中的一個之間形成大環(huán)。
不帶有羧基官能團(tuán)(即變量U不存在)的P3基團(tuán)的代表性實(shí)例包括下式VIia-VIid
其中Ar為碳環(huán)基或者雜環(huán)基，特別是芳基或者雜芳基，它們各自任選被R9所取代。雖然式VIia-VIid部分結(jié)構(gòu)已經(jīng)在其中k為1并且q’為0的本發(fā)明上下文化合物內(nèi)進(jìn)行了闡明，但是，顯然上述VIi結(jié)構(gòu)還可以應(yīng)用于其它q’和k值時的化合物。類似地，雖然式VIic和VIid部分結(jié)構(gòu)表示與亮氨酸相應(yīng)的R11基團(tuán)，但是顯然這些結(jié)構(gòu)還可以用于其它R11基團(tuán)中，特別是那些與天然或者非天然L-氨基酸側(cè)鏈類似的基團(tuán)，例如叔丁基丙氨酸/叔亮氨酸。
在其中n為1的本發(fā)明化合物中，R15優(yōu)選為任選取代的C1-C6烷基或者C0-C3烷基碳環(huán)基(例如C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基)，它們可以各自任選被取代。優(yōu)選P4基團(tuán)為天然或者非天然氨基酸的一般類似物，特別是脂族氨基酸，比如L-纈氨酰、L-亮氨酰、L-異亮氨酰、L-叔亮氨酰或者L-環(huán)己基丙氨酸，并且由此優(yōu)選R15基團(tuán)包括環(huán)己基、環(huán)己基甲基、叔丁基、異丙基或者異丁基。
優(yōu)選G含義包括-NRy-(特別是其中Ry為甲基或者優(yōu)選為H)或者肼。
另外優(yōu)選G含義為O，從而與P4(如果存在)的羰基或者P3(如果存在)的羰基限定成酯，或者在其中基團(tuán)U不存在的變體中限定成醚。對于R16，常規(guī)藥學(xué)上可接受的醚或者酯封端基團(tuán)包括C1-C6烷基(特別是甲基或者叔丁基)、C0-C3烷基雜環(huán)基(特別是吡啶基、苯并咪唑基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基)或者C0-C3烷基碳環(huán)基(特別是苯基、芐基、2，3-二氫化茚基)，它們各自任選被羥基、鹵素、氨基或者C1-C6烷氧基所取代。
優(yōu)選本發(fā)明化合物可以包括肼官能團(tuán)，例如其中T為-NRd-和m為1；同時n為0或者1。另外，特別是其中m為0時，G可以為-NRjNRj-，比如-NHNH-。所述化合物通常不會在G和T上都包含肼。其中m和n都為0的式VI化合物內(nèi)，優(yōu)選的肼包括具有以下部分結(jié)構(gòu)VIja-VIjb的化合物 在式VIja和VIjb中，R16′可以被認(rèn)為是烷基(或者C1-C3烷基雜環(huán)基或者C1-C3烷基碳環(huán)基)，其中第一個烷基碳被氧基取代從而產(chǎn)生酮官能團(tuán)并且R16′為剩余的烷基、烷基雜環(huán)基或者烷基碳環(huán)基部分。式VIjb表明了一種變體，其中R16為其碳被氧代取代基和-ORb取代的亞甲基基團(tuán)，其中Rb定義如上，一般為C1-C6烷基(比如叔丁基)、C0-C3烷基雜環(huán)基(比如吡啶基)或者C0-C3烷基碳環(huán)基(比如芐基或者苯基)，它們各自任選被取代，如上所定義的。具有部分結(jié)構(gòu)VIja和VIjb的化合物可以是如上所述的線型分子(兩個Rj都為H)，或者優(yōu)選所示Rj基團(tuán)中的一個可以通過J與適當(dāng)?shù)腞7基團(tuán)大環(huán)化。
其中m為1的另一式VI的肼包括含有以下部分結(jié)構(gòu)VIjc和VIjd的那些肼
其中G、R15、R16、RX、Rd、Rq、Rz和Ru如上式VI所定義。具有部分結(jié)構(gòu)VIjc和VIjd的化合物可以是如上所述的線型分子(Rx和Rd兩者都為H)，或者優(yōu)選所示Rx或者Rd基團(tuán)中的一個可以通過J與適當(dāng)?shù)腞7基團(tuán)大環(huán)化。
雖然式VIja-VIjd用五元碳環(huán)作為P2腳手架進(jìn)行說明，但是顯然本發(fā)明的這方面同樣適用于其它q’和k的結(jié)構(gòu)。式VIja-VIjd內(nèi)優(yōu)選的實(shí)施方案包括其中Rq和Rz都為H的那些實(shí)施方案，或者其中Rz為烯鍵并且Rq為C1-C3烷基的那些實(shí)施方案。
當(dāng)G為氨基，和m與n都為0，并且R16為如下所定義的N-連接不飽和雜環(huán)(例如吡啶基或者嘧啶基)或者如下所定義的N-連接飽和雜環(huán)(比如哌嗪基、哌啶基并且特別是嗎啉基)時，得到另一肼類似結(jié)構(gòu)。上述實(shí)施方案的實(shí)例包括帶有式VIjc和VIjd的那些實(shí)施方案 帶有部分結(jié)構(gòu)VIjc和VIjd的化合物可以是如上所示的線型分子，或者優(yōu)選Rx可以經(jīng)J與適當(dāng)?shù)腞7基團(tuán)進(jìn)行大環(huán)化。雖然這些部分結(jié)構(gòu)使用五元環(huán)作為P2腳手架進(jìn)行說明，但是很顯然這種結(jié)構(gòu)可以延伸于其它的q’和k值。類似地，這些結(jié)構(gòu)可以應(yīng)用于其它作為R16的N-連接雜環(huán)。
現(xiàn)在返回式VI，一般而言，對于本發(fā)明化合物優(yōu)選的R16基團(tuán)包括2-茚滿醇、2，3-二氫化茚基、2-羥基-1-苯基-乙基、2-噻吩甲基、環(huán)己基甲基、2，3-亞甲二氧基芐基、環(huán)己基、苯基、芐基、2-吡啶基甲基、環(huán)丁基、異丁基、正丙基、甲基或者4-甲氧基苯基乙基。
當(dāng)前優(yōu)選的R16基團(tuán)包括2-茚滿醇、茚滿、2-羥基-1-苯基-乙基、2-噻吩甲基、2，3-亞甲二氧基芐基或者環(huán)己基甲基。
非天然氨基酸包括L-氨基酸，其中側(cè)鏈不是20種天然存在氨基酸中的一種。非天然氨基酸的實(shí)例包括L-β-甲磺?；谆彼?、L-環(huán)己基丙氨酸、L-叔亮氨酸(L-tertiary-leucine)、L-正亮氨酸、L-正纈氨酸、L-鳥氨酸、L-肌氨酸、L-瓜氨酸、L-高苯丙氨酸、L-高絲氨酸、L-β-(1-萘基)丙氨酸、L-β-(2-萘基)丙氨酸等等。非天然氨基酸還包括與20種天然氨基酸相應(yīng)的D-氨基酸和帶有其它側(cè)鏈(比如上述所列的那些側(cè)鏈)的D-氨基酸。
在此使用的“C1-C6烷基”(還縮寫為C1-C6alk，或者用于化合物表達(dá)式比如C1-C6烷氧基等等之中)意指包括直鏈或者支鏈脂族碳鏈，比如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、庚基以及其簡單異構(gòu)體。所述烷基可以具有不飽和鍵。另外，C1-C6烷基中任意C原子可以任選被一個、兩個或者價(jià)鍵允許時被三個鹵素原子取代和/或所述亞烷基鏈被雜原子S、O、NH中斷。如果所述雜原子位于鏈的末端，那么它可以適當(dāng)?shù)乇灰粋€或者兩個氫原子取代。C1-C4烷基和C1-C5烷基具有根據(jù)碳數(shù)需要調(diào)整的C1-C6烷基的相應(yīng)含義。
在此使用的“C1-C3烷基”包括甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基，它們可以各自任選被取代或者如上段所述被雜原子所中斷，或者在C2或者C3的情形中帶有不飽和鍵，比如CH2＝CH。
在此使用的“C1-C3亞烷基”描述了二價(jià)C1-C3烷二基部分，包括亞丙基、亞乙基并且特別時亞甲基。對于J，一般較長的亞烷基鏈可以包括1～3個不飽和現(xiàn)象和/或用如上所述的雜原子中斷。
“氨基”包括NH2、NHC1-C6烷基或者N(C1-C6-烷基)2，特別是C1-C3烷基變體。
“酰氨基”包括C(＝O)NH2和烷基酰胺基，比如C(＝O)NHC1-C6烷基、C(＝O)N(C1-C6烷基)2，特別是C(＝O)NHC1-C3烷基、C(＝O)N(C1-C3烷基)2或者-NH(C＝O)C1-C6烷基，例如-NHC(＝O)CHC(CH3)3，包括-NH(C＝O)C1-C3烷基。
在此使用的“鹵素”意指包括F、Cl、Br、I，特別是氯并且優(yōu)選氟。
在此使用的“C0-C3烷基芳基”意指包括芳基部分，比如苯基、萘基或者稠合至C3-C7環(huán)烷基的苯基(例如2，3-二氫化茚基)，其中所述芳基被直接鍵接(即C0)或者通過如上C1-C3亞烷基所定義的中間甲基、乙基或者丙基或異丙基連接。除非另有說明，芳基和/或它的稠合環(huán)烷基部分任選被1～3個選自以下的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、C1-C6烷?；?、氨基、疊氮基、氧代、巰基、硝基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基。“芳基”具有相應(yīng)的含義，即其中C0-C3烷基連系物不存在。
在此使用的“C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基”意指包括C3-C7環(huán)烷基基團(tuán)，比如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或者環(huán)庚基，其中所述環(huán)烷基被直接鍵接(即C0烷基)或者通過如上C1-C3亞烷基所定義的中間甲基、乙基、丙基(proyl)連接。所述環(huán)烷基可以包括不飽和鍵。除非另有說明，所述環(huán)烷基部分任選被1～3個選自以下的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、C1-C6烷?；被?、疊氮基、氧代、巰基、硝基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基。
在此使用的“C0-C3烷基碳環(huán)基”意指包括C0-C3烷基芳基和C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基。除非另有說明，所述芳基或者環(huán)烷基任選被1～3個選自以下的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、C1-C6烷酰基、氨基、疊氮基、氧代、巰基、硝基、C0-C3烷基碳環(huán)基和/或C0-C3烷基雜環(huán)基?！疤辑h(huán)基”具有與此相應(yīng)的含義，即其中C0-C3烷基連系物不存在。
在此使用的“C0-C3烷基雜環(huán)基”意指包括單環(huán)的、飽和或者不飽和的、含有雜原子的環(huán)，比如哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、吡唑基、咪唑基、唑基、異唑基、噻嗪基(thiaziholyl)、異噻嗪基、噻唑基、二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、四唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡唑基，或者任何稠合至苯基環(huán)的上述基團(tuán)，比如喹啉基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并噻嗪基、苯并異噻嗪基、苯并噻唑基、苯并二唑基、苯并-1，2，3-三唑基、苯并-1，2，4-三唑基、苯并四唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吡啶基、苯并嘧啶基、苯并噠嗪基、苯并吡唑基等等，所述環(huán)可以直接鍵接(即C0)，或者通過如上C1-C3亞烷基所定義的中間甲基、乙基、丙基或者異丙基連接。上述任何具有芳香特性的不飽和環(huán)在本文中都可以稱為雜芳基。除非另有說明，所述雜環(huán)和/或它的稠合苯基部分任選被1～3個選自以下的取代基所取代鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、C1-C6烷?；被?、疊氮基、氧代、巰基、硝基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基?！半s環(huán)基”和“雜芳基”具有相應(yīng)的含義，即其中C0-C3烷基連系物不存在。
由此，在上述定義范圍內(nèi)的一般雜環(huán)基和碳環(huán)基部分是具有5個或者特別是6個環(huán)原子的單環(huán)，或者包括稠合至4元、5元或者6元環(huán)的6元環(huán)的雙環(huán)結(jié)構(gòu)。
一般上述基團(tuán)包括C3-C8環(huán)烷基、苯基、芐基、四氫萘基、茚基、2，3-二氫化茚基、雜環(huán)基，比如氮雜環(huán)庚烷基、azocanyl、吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、二氫吲哚基、吡喃基、四氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、硫代吡喃基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、異唑基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、四唑基、吡唑基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、苯并異唑基、喹啉基、四氫喹啉基、異喹啉基、四氫異喹啉基、喹唑啉基、四氫喹唑啉基和喹喔啉基，它們可以各自任選被取代，如在此所定義的。
由此，所述飽和雜環(huán)部分包括比如以下的基團(tuán)吡咯啉基、吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、吡喃基、硫代吡喃基、哌嗪基、二氫吲哚基、azetidinyl、四氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、四氫呋喃基、六氫嘧啶基、六氫噠嗪基、1，4，5，6-四氫嘧啶胺、二氫-唑基、1，2-thiazinanyl-1，1-二氧化物、1，2，6-thiadiazinanyl-1，1-二氧化物、異噻唑烷基-1，1-二氧化物和咪唑烷基-2，4-二酮，然而，所述不飽和雜環(huán)包括具有芳香特性的基團(tuán)，比如呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、異氮茚基。在各種情形中，所述雜環(huán)可以與苯基環(huán)稠合，從而形成雙環(huán)體系。
合成本發(fā)明化合物可以通過不同的化學(xué)策略在溶液或者固相或者二者的結(jié)合中進(jìn)行合成。可以首先對適當(dāng)保護(hù)的單個結(jié)構(gòu)單元進(jìn)行制備，隨后將它們偶聯(lián)在一起，即，P2+P1→P2-P1。另外，可以將所述結(jié)構(gòu)單元的前體偶聯(lián)在一起，然后在抑制劑連續(xù)合成的后面步驟中對其進(jìn)行改變。然后，可以將期望結(jié)構(gòu)的另外結(jié)構(gòu)單元、結(jié)構(gòu)單元前體或者預(yù)合成的更大片斷偶聯(lián)在增長鏈上，例如，R16-G-P3+C(＝O)-P2-P1→R16-G-P3-C(＝O)-P2-P1或者R16-G-P4-P3+C(＝O)-P2-P1→R16-G-P4-P3-C(＝O)-P2-P1.
兩種氨基酸之間的偶聯(lián)、氨基酸與肽之間的偶聯(lián)或者兩種肽片斷之間的偶聯(lián)都可以利用標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)方法進(jìn)行，比如疊氮化物法、混合碳-羧酸酐(氯甲酸異丁酯)法、碳二亞胺(二環(huán)己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或者水溶性的碳二亞胺)法、活性酯(對硝基苯酯、N-羥基丁二酰亞胺基酯)法、Woodward試劑K-方法、羰二咪唑法、磷試劑或者氧化還原法。其中一些方法(特別是碳二亞胺法)可以通過加入1-羥基苯并三唑或者4-DMAP而得到改進(jìn)。這些偶聯(lián)反應(yīng)可以在溶液(液相)或者固相中進(jìn)行。
更明確而言，所述偶聯(lián)步驟包括一種反應(yīng)物的游離羧基與另一種反應(yīng)物的游離氨基在偶聯(lián)劑存在下發(fā)生脫水偶聯(lián)，從而形成酰胺連接鍵。上述偶聯(lián)劑的描述公開于一般的肽化學(xué)教科書中，例如M.Bodanszky，“Peptide Chemistry”，第二修訂版，Springer-Verlag，Berlin，Germany，(1993)，在下文簡稱為Bodanszky，其內(nèi)容在此引入作為參考。適宜偶聯(lián)劑的實(shí)例為N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺、在N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺或者N-乙基-N′-[(3二甲基氨基)丙基]碳二亞胺存在下的1-羥基苯并三唑。實(shí)用和有效的偶聯(lián)劑為市售(苯并三唑-1-基氧基)三-(二甲基氨基)六氟磷酸鹽，獨(dú)立使用或者在1-羥基苯并三唑或者4-DMAP存在下使用。另一實(shí)用和有效的偶聯(lián)劑為市售2-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸鹽。另一實(shí)用和有效的偶聯(lián)劑為市售O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽。
所述偶聯(lián)反應(yīng)在惰性溶劑中進(jìn)行，例如二氯甲烷、乙腈或者二甲基甲酰胺。將過量的叔胺(例如二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基吡咯烷或者4-DMAP)加入其中以保持反應(yīng)混合物的pH值為約8。反應(yīng)溫度通常為0℃～50℃，并且反應(yīng)時間通常為15min～24h。
在偶聯(lián)反應(yīng)期間，通常必須對氨基酸組分的官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)，以避免形成不期望的鍵?？梢詰?yīng)用的保護(hù)基列在Greene，“ProtectiveGroups in Organic Chemistry”，John Wiley & Sons，New York(1981)和“The PeptidesAnalysis，Synthesis，Biology”，Vol.3，AcademicPress，New York(1981)中，在下文中簡稱為Greene，其公開內(nèi)容在此引入作為參考。
通常將C-末端殘基的α-羧基保護(hù)成酯，該酯可以進(jìn)行裂解，從而形成羧酸?？梢詰?yīng)用的保護(hù)基包括1)烷基酯，比如甲基、三甲基甲硅烷基和叔丁酯，2)芳烷基酯，比如芐基和取代芐基酯，或者3)可以通過弱堿或者溫和還原方法分解的酯，比如三氯乙酯和苯乙酮(ethanone)酯。
一般對要進(jìn)行偶聯(lián)的各氨基酸的α-氨基進(jìn)行保護(hù)?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的任何保護(hù)基。上述基團(tuán)的實(shí)例包括1)?；热缂柞；?、三氟乙?；?、鄰苯二甲?；蛯?甲苯磺?；?；2)芳香氨基甲酸酯基團(tuán)，比如芐氧羰基(Cbz或者Z)和取代芐氧羰基和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；3)脂族氨基甲酸酯基團(tuán)，比如叔丁氧羰基(Boc)、乙氧羰基、二異丙基甲氧羰基和烯丙氧羰基；4)環(huán)狀烷基氨基甲酸酯基團(tuán)，比如環(huán)戊基氧基羰基和金剛烷氧基羰基；5)烷基，比如三苯甲基和芐基；6)三烷基甲硅烷基，比如三甲基甲硅烷基；和7)含硫醇的基團(tuán)，比如苯硫羰基和二硫代琥珀?；?。優(yōu)選α-氨基保護(hù)基為Boc或者Fmoc。許多適當(dāng)保護(hù)用于肽合成的氨基酸衍生物都可以市場購買到。
在下一偶聯(lián)步驟之前，所述α-氨基保護(hù)基被裂解。當(dāng)使用Boc基團(tuán)時，選擇的方法為單獨(dú)使用或者在二氯甲烷中的三氟乙酸，或者為在二氧六環(huán)或者乙酸乙酯中的HCl。然后在偶聯(lián)之前或者原位用堿性溶液(比如緩沖水溶液，或者在二氯甲烷或者乙腈或者二甲基甲酰胺中的叔胺)對所得銨鹽進(jìn)行中和。當(dāng)使用Fmoc基團(tuán)時，選擇的反應(yīng)物為在二甲基甲酰胺中的哌啶或者取代哌啶，但是任何仲胺都可以使用。所述去保護(hù)在0℃～室溫之間進(jìn)行，通常為20～22℃。
在使用任何上述基團(tuán)制備所述肽期間，一般要對任何具有側(cè)鏈官能團(tuán)的天然或者非天然氨基酸進(jìn)行保護(hù)。本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對于這些側(cè)鏈官能團(tuán)，適當(dāng)保護(hù)基的選擇和應(yīng)用取決于氨基酸以及肽上其它保護(hù)基的存在。在對上述保護(hù)基進(jìn)行選擇時，期望在去保護(hù)和偶聯(lián)α-氨基期間，所述基團(tuán)沒有被除去。
例如，當(dāng)Boc用作α-氨基保護(hù)基時，以下側(cè)鏈保護(hù)基是適宜的對-甲苯磺?；糠挚梢杂糜诒Ｗo(hù)比如賴氨酸和精氨酸的氨基酸氨基側(cè)鏈；乙酰氨基甲基、芐基(Bn)或者叔丁基磺?；糠挚梢杂糜诒Ｗo(hù)半胱氨酸的含有硫化物的側(cè)鏈；芐基(Bn)醚可以用于保護(hù)絲氨酸、蘇氨酸或者羥脯氨酸的含有羥基的側(cè)鏈；和芐基酯可以用于保護(hù)天冬氨酸和谷氨酸的含有羧基的側(cè)鏈。
當(dāng)選擇Fmoc用于α-胺保護(hù)時，通?；谑宥』谋Ｗo(hù)基是可以接受的。例如，Boc可以用于保護(hù)賴氨酸和精氨酸，叔丁基醚可以用于保護(hù)絲氨酸、蘇氨酸和羥脯氨酸以及叔丁酯可以用于保護(hù)天冬氨酸和谷氨酸。三苯甲基(Trityl)部分可以用于保護(hù)半胱氨酸的含有硫化物的側(cè)鏈。
一旦抑制劑順序合成得到完成，所述任何保護(hù)基就被以任何通過選擇保護(hù)基而確定的方式除去。這些方法為本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員所熟知的方法。
P2取代基的引入R8基團(tuán)可以在根據(jù)本發(fā)明化合物合成的任何適宜步驟中與P2腳手架進(jìn)行偶聯(lián)。一種方法是首先將R8基團(tuán)偶聯(lián)到P2腳手架上，隨后添加其它期望的結(jié)構(gòu)單元，即P1以及任選P3和P4。另一種方法是利用未被取代的P2腳手架偶聯(lián)P1、P2以及如果存在的P3和P4部分，然后添加R8基團(tuán)。
其中W為O以及R8為烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基的本發(fā)明化合物可以根據(jù)E.M.Smith等人(J.Med.Chem.(1988)，31，875-885)所述的方法進(jìn)行制備，如方案1所示，該方案圖解了其中q′為0并且k為1的帶有飽和P2腳手架的工藝。
方案1在比如二甲基甲酰胺的溶劑中，用比如氫化鈉或者叔丁氧鉀的堿對含有未被取代的P2結(jié)構(gòu)的化合物(1a)進(jìn)行處理(所述化合物可以按下文所述得到制備)，隨后使所得的醇鹽與烷基化試劑R8-X反應(yīng)，從而得到期望的取代衍生物(1b)，其中X為適宜的離去基團(tuán)，比如鹵素、甲磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或者甲苯磺酸鹽。
另外地，如果X為OH或者SH，那么P2取代基可以經(jīng)Mitsunobu反應(yīng)，在三苯基膦和活化劑(比如偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)或者偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)等等)存在下，通過使化合物1a的羥基與期望的醇或者硫醇反應(yīng)被引入。(Mitsunobu，1981，Synthesis，1月，1-28；Rano等人，Tetrahedron Lett.，1995，36，22，3779-3792；Krchnak等人，Tetrahedron Lett.，1995，36，5，6193-6196；Richter等人，Tetrahedron Lett.，1994，35，27，4705-4706)。
另外，可以通過用光氣處理醇(1a)，由此產(chǎn)生相應(yīng)的氯甲酸酯，在比如碳酸氫鈉或者三乙胺的堿存在下，所述氯甲酸酯與胺R8NH2反應(yīng)，形成氨基甲酸酯，即W為-OC(＝O)NH-，而醇(1a)與?；瘎㏑8-CO-X(比如酸酐或者?；u(例如酰氯))反應(yīng)，可以形成酯，即W為-OC(＝O)-。
多種醇R8-OH和烷基化劑R8-X都描述于WO00/09543和WO00/59929中。其中R8為取代喹啉衍生物的合成實(shí)例示于方案2中。
方案2在三氯化硼和三氯化鋁存在下，在比如二氯甲烷的溶劑中，使用?；瘎?比如乙酰氯等等)對市售或者文獻(xiàn)中可得到的適宜的取代苯胺(2a)進(jìn)行Friedel-Craft?；?，從而產(chǎn)生(2b)。在堿性條件下(比如在吡啶中)，在羧酸酯基團(tuán)活化劑(例如POCl3)存在下，將(2b)偶聯(lián)至雜環(huán)羧酸(2c)，隨后在堿性條件(比如叔丁醇鉀)下，在叔丁醇中進(jìn)行閉環(huán)和脫水，從而產(chǎn)生喹啉衍生物(2e)。在Mitsunobu反應(yīng)中，喹啉衍生物(2e)可以偶聯(lián)到如上所述的醇上，或者其中羥基可以通過用適當(dāng)?shù)柠u化劑(例如磷酰氯等等)處理喹啉(2e)而被適宜的離去基團(tuán)(比如鹵素，如氯、溴或者碘)置換。
多種具有通式結(jié)構(gòu)(2c)的羧酸都可以用于方案2中。這些酸可以商業(yè)購買到或者在文獻(xiàn)中可得到。按照Berdikhina等人Chem.Heterocycl.Compd.(Engl.Transl.)(1991)，427-433的方法的2-(取代)-氨基-羧基-氨基噻唑衍生物的制備實(shí)例，如下方案3所示。
方案3具有不同烷基取代基R′的硫脲(3c)可以通過以下方法得到形成在比如二異丙基乙胺的堿存在下，在比如二氯甲烷的溶劑中，使適當(dāng)?shù)陌?3a)與叔丁基異硫氰酸酯反應(yīng)，隨后在酸性條件下除去叔丁基。隨后使硫脲衍生物(3c)與3-溴丙酮酸縮合，從而形成酸(3d)。
其中R8取代基經(jīng)胺、酰胺、脲或者磺酰胺連接的P2結(jié)構(gòu)單元，可以由氨基取代碳環(huán)進(jìn)行制備，所述氨基取代碳環(huán)例如通過將相應(yīng)羥基衍生物的羥基轉(zhuǎn)化為疊氮基而得到，例如，通過將羥基轉(zhuǎn)化為適宜的離去基團(tuán)(比如甲磺酸鹽或者鹵素(如氯))，然后用疊氮化物取代離去基團(tuán)或者通過利用疊氮化物轉(zhuǎn)移劑(如二苯基磷酰基疊氮化物(DPPA)而得到。通過催化氫化或者任何其它適宜的還原方法還原上述疊氮化物，從而形成胺。所述氨基衍生物可以與通式R8-X的烷基化劑進(jìn)行取代反應(yīng)，其中R8和X如方案1所述，從而形成用于制備通式VI化合物的P2結(jié)構(gòu)單元，其中W為-NH-。使氨基取代碳環(huán)與通式R8-COOH的酸在標(biāo)準(zhǔn)酰胺偶聯(lián)條件下進(jìn)行反應(yīng)，從而形成其中R8取代基經(jīng)酰胺鍵連接的化合物，而使氨基取代碳環(huán)與適當(dāng)?shù)幕撬嵫苌颮8-S(O)2-X，其中X為離去基團(tuán)(例如氯)，在堿存在下進(jìn)行反應(yīng)，從而形成磺酰胺。其中環(huán)狀腳手架與R8取代基之間的連系物由脲基團(tuán)構(gòu)成的化合物可以通過例如以下方法得到用光氣處理氨基取代碳環(huán)，從而提供相應(yīng)的氯代氨基甲酸酯，隨后使其與期望的胺反應(yīng)。另外，所述氨基取代碳環(huán)可以與氨基甲酰氯或者具有期望R8取代基的異氰酸酯反應(yīng)以形成所述脲連接。顯然，相應(yīng)的反應(yīng)適用于具有其它環(huán)大小和特征的P2基團(tuán)。
其中雜環(huán)R8基團(tuán)直接連接至環(huán)狀P2腳手架即通式VI中W為一個鍵的本發(fā)明化合物，可以通過例如置換反應(yīng)得到制備，該反應(yīng)中在P2腳手架上的適宜離去基團(tuán)(比如鹵素或者甲磺酸鹽等等)被期望的R8基團(tuán)(比如雜環(huán)基團(tuán))所取代。另外，所述R8基團(tuán)可以通過Mitsunobu反應(yīng)的方式引入，其中P2前體中的羥基與雜環(huán)R8基團(tuán)中的氮原子進(jìn)行反應(yīng)。
Rq，Rz和*如上所述W是鍵其中四唑衍生物被連接至它的一個環(huán)碳原子上的化合物通過將四唑部分直接連接在P2前體上，可以合意地得到制備。這可以通過例如將P2前體的羥基轉(zhuǎn)化為氰基，隨后使其與疊氮化物試劑(比如疊氮化鈉)反應(yīng)而得到實(shí)現(xiàn)。三唑衍生物也可以直接構(gòu)建在P2前體上，例如通過將P2前體的羥基轉(zhuǎn)化為疊氮基，隨后進(jìn)行所提供的疊氮化物與適宜的炔衍生物的3+2環(huán)化加成反應(yīng)。
用于上述取代反應(yīng)和Mitsunobu反應(yīng)的結(jié)構(gòu)上不同的四唑可以通過使市售腈化合物與疊氮化鈉反應(yīng)而得到制備。三唑衍生物可以通過使炔化合物與三甲基甲硅烷疊氮化物進(jìn)行反應(yīng)而得到制備。所用炔化合物或者可以市場購買到，或者它們可以根據(jù)例如Sonogashira反應(yīng)而得到制備，即在PdCl2(PPh)3和CuI存在下，使伯炔、芳基鹵化物和三乙胺的反應(yīng)，如A.Elangovan，Y.-H.Wang，T.-I.Ho，Org.Lett.，2003，5，1841-1844中所述。在將P2結(jié)構(gòu)單元偶聯(lián)至其它結(jié)構(gòu)單元之前或之后，當(dāng)將雜環(huán)取代基連接至P2結(jié)構(gòu)單元時，還可以對所述雜環(huán)取代基進(jìn)行改變。
制備其中W為一個鍵并且R8為任選被取代的雜環(huán)的化合物的這些方法以及其它方法寬泛地描述于WO2004/072243中。
方案1中具有碳環(huán)衍生物的W-R8取代基的另外環(huán)大小和/或其位于其它位置的化合物也可以制備根據(jù)本發(fā)明的化合物。
P1結(jié)構(gòu)單元的合成和引入用于制備P1片斷的氨基酸或者可以市場購買到或者可以通過文獻(xiàn)得到，參見例如Boehringer-Ingelheim的WO00/09543和WO00/59929或者BMS的US2004/0048802。
方案4表示制備用作P1結(jié)構(gòu)單元并且隨后偶聯(lián)到P2結(jié)構(gòu)單元上的磺酰胺衍生物的實(shí)例。
方案4在比如THF的溶劑中，通過用偶聯(lián)試劑(例如N，N′-羰二咪唑(CDI)等等)處理所述氨基酸，隨后在強(qiáng)堿(比如1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU))存在下，使其與期望的磺酰胺(4b)反應(yīng)，可以將磺酰胺基團(tuán)引入到適當(dāng)保護(hù)的氨基酸(4a)上。另外，在比如二異丙基乙胺的堿存在下，用期望的磺酰胺(4b)對所述氨基酸進(jìn)行處理，隨后用比如PyBOP的偶聯(lián)試劑對其進(jìn)行處理，從而實(shí)現(xiàn)磺酰胺基團(tuán)的引入。通過標(biāo)準(zhǔn)方法除去氨基保護(hù)基，并且隨后采用，在比如二甲基甲酰胺的溶劑中，在比如二異丙胺的堿存在下，酰胺鍵形成的標(biāo)準(zhǔn)方法，比如通過偶聯(lián)試劑O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)，將其偶聯(lián)至如上所制備的P2結(jié)構(gòu)單元上，從而得到(4e)。另外，磺酰胺基團(tuán)可以在合成的后面步驟引入，例如作為最后一步。在這種情形中，具有反向保護(hù)形式的氨基酸，即具有未保護(hù)的氨基官能團(tuán)和保護(hù)的酸官能團(tuán)的氨基酸通過使用例如如上所述的標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件，被偶聯(lián)到P2結(jié)構(gòu)單元的酸官能團(tuán)上。通過利用適于現(xiàn)有保護(hù)基團(tuán)的適當(dāng)條件除去酸保護(hù)基團(tuán)，隨后偶聯(lián)如上所述的磺酰胺，得到化合物4e。
通過使氨基酸(4a)分別與適當(dāng)?shù)陌坊蛘叽荚邗０坊蛘啧バ纬傻臉?biāo)準(zhǔn)條件下反應(yīng)，用于制備根據(jù)其中A為酯或者酰胺的通式VI化合物的P1結(jié)構(gòu)單元可以得到制備。其中A為CR4R4’的根據(jù)通式VI的化合物可以通過將適當(dāng)?shù)腜1結(jié)構(gòu)單元偶聯(lián)至P2結(jié)構(gòu)單元而得到制備，如Oscarsson等人Bioorg Med Chem 2003 11(13)2955-2963和申請于2003年09月23日的PCT/EP03/10595所述，其內(nèi)容在此引入作為參考。
包括氮雜肽P1殘基，即通式VI中M為NRu的化合物可以通過在偶聯(lián)至P2片斷中使用適宜的P1氮雜-氨基?；糠侄玫街苽?。氮雜-氨基酰基部分的制備由M.D.Bailey等人描述于J.Med.Chem.，47，(2004)，3788-3799中，并且將實(shí)例示于方案5中。
方案5例如通過與如以下方案19所述的適當(dāng)?shù)娜┗蛘咄M(jìn)行還原氨基化反應(yīng)，可以將適當(dāng)?shù)腘-連接側(cè)鏈Ru引入到市售叔丁基肼上，由此產(chǎn)生N-烷基化肼基甲酸酯(5a)。在比如三乙胺或者二異丙基乙胺的堿存在下，在比如THF的溶劑中，使5a與期望的氯甲酸酯進(jìn)行縮合，從而產(chǎn)生5b。然后，利用取決于具體R1′的適當(dāng)條件，比如R1′為芐基時采用催化氫化條件，任選將其中R1′部分除去，由此給出相應(yīng)的酸。隨后，使上述所得的酸與如方案4所述的期望磺酰胺衍生物反應(yīng)，得到磺酰胺封端的結(jié)構(gòu)單元。另外，使肼基甲酸酯5a與異氰酸酯R3-N＝C＝O反應(yīng)，形成用于制備根據(jù)通式VI的化合物的結(jié)構(gòu)單元，其中M為NRu并且A為CONHR3。
封端P3和P3-P4結(jié)構(gòu)單元的合成結(jié)構(gòu)單元R16-G-P3和R16-G-P4-P3可以如方案6所示一般方法進(jìn)行制備。
方案6在比如DIEA或者DMAP的堿存在下，在比如二氯甲烷、氯仿或者二甲基甲酰胺或者其混合物的溶劑中，通過應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件(如使用比如HATU、DCC或者HOBt等等偶聯(lián)試劑)和酯形成條件等，適宜N-保護(hù)的氨基酸(6a)可以與氨基封端基團(tuán)(R16-NHRy)偶聯(lián)，形成酰胺，即G為NHRy(6b)。另外，在比如碳酸銫或者氧化銀(I)的堿存在下，使氨基酸(6a)與通式R16-X化合物反應(yīng)，其中R16如上所定義并且X為比如鹵素的離去基團(tuán)，形成酯，即G為O(6b)。另一方面，利用如上所述的標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件，氨基酸(6a)可以偶聯(lián)至適當(dāng)O-保護(hù)的仲氨基酸(6d)，形成(6e)。用適宜的封端基團(tuán)(6b)取代酯基形成可用于制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的片斷(6f)，其中m和n均為1。
當(dāng)G為N-Ry時，封端P3或者P2結(jié)構(gòu)單元還可以在固體載體上進(jìn)行制備，如方案7所例示。
方案7在比如二氯甲烷和二甲基甲酰胺的溶劑中，在比如N，N′-二異丙基碳二亞胺的偶聯(lián)試劑和比如DMAP的堿存在下，通過使氨基酸與期望的固體載體反應(yīng)，適當(dāng)N-保護(hù)(比如Boc保護(hù))的氨基酸(7a)可以被固定在固體載體上，在此后者由Agronaut樹脂PS-TFP進(jìn)行例示。然后，通過使用適宜的封端基團(tuán)(7c)，上述被固定的氨基酸(7b)可以從載體上分離，由此給出可用于制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的片斷(7d)，其中m或者n為1。任選可以將所述氨基保護(hù)基除去，隨后利用標(biāo)準(zhǔn)方法使其偶聯(lián)適當(dāng)?shù)陌被?，由此形成可用于制備根?jù)本發(fā)明的化合物的片斷，其中m和n為1。
P2結(jié)構(gòu)單元的制備和引入合成含有5元飽和P2腳手架的化合物的一般路線示于方案8中。
Rx′和T′具有分別與Rx和T相同的定義，但不是大環(huán)一部分。
A′是保護(hù)的羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案8環(huán)狀腳手架(8b)可以由例如3，4-二(甲氧基羰基)環(huán)戊酮(8a)進(jìn)行制備，如Rosenquist等人在Acta Chem.Scand.46(1992)1127-1129中所述，在比如甲醇的溶劑中用比如硼氫化鈉的還原劑還原酮基，隨后水解該酯，最后在吡啶存在下在乙酸酐中進(jìn)行環(huán)閉合。然后，利用常規(guī)的肽偶聯(lián)條件，在比如二甲基甲酰胺的溶劑中使用HATU和二異丙基胺，可以將上述得到的二環(huán)酸(8b)偶聯(lián)到期望的P3片段(8c)、P3-P4片段或者封端基團(tuán)R16-NHRy的胺官能團(tuán)上，給出(8d)。使用例如氫氧化鋰，使內(nèi)酯(8d)開環(huán)，形成酸，隨后利用常規(guī)肽偶聯(lián)條件，將該酸偶聯(lián)到P1結(jié)構(gòu)單元或者期望的P1片段的前體(8e)的氨基上。碳環(huán)R8-取代基可以例如通過與如上所述適當(dāng)?shù)拇歼M(jìn)行Mitsunobu反應(yīng)或者通過先前所述任何其它適宜的方法而得到引入。當(dāng)R7、R7′和A′包含官能團(tuán)時，這些官能團(tuán)任選通過本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員認(rèn)可的方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)，參閱，例如上面引用的Bodanzky或者Greene。
方案9表示合成含有飽和P2腳手架的式VI化合物的另一種方法，其中各結(jié)構(gòu)單元按照相反的次序引入，即P1片斷在封端基團(tuán)、P3或者P3-P4結(jié)構(gòu)單元被引入之前引入。
Rx′和T′具有分別與Rx和T相同的定義，但不是大環(huán)一部分。
A′是保護(hù)的羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案9在比如二氯甲烷的溶劑中，在比如二甲基氨基吡啶和三乙胺的堿存在下，(9a)的酸基團(tuán)通過用例如二碳酸二叔丁酯處理，被保護(hù)為叔丁酯，從而提供酯(9b)。使內(nèi)酯開環(huán)，并且如方案13所述或者直接通過P1片段的胺基使其與P1結(jié)構(gòu)單元(9c)偶聯(lián)，從而形成(9d)。如上所述引入R8-取代基，隨后通過在比如二氯甲烷的溶劑中，使上述酯經(jīng)受比如三氟乙酸和三乙基硅烷的酸性條件處理，將酸保護(hù)基團(tuán)除去，并且最后如上所述使其與P3結(jié)構(gòu)單元(9e)、P3-P4結(jié)構(gòu)單元或者封端基團(tuán)R16-NHRy偶聯(lián)，從而形成(9f)。當(dāng)R7、R7′和A′包含官能團(tuán)時，這些官能團(tuán)任選通過本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員認(rèn)可的方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)，參閱，例如上面引用的Bodanzky或者Greene。
將用于制備式VI化合物的不飽和P2腳手架可以如下所示進(jìn)行制備，用環(huán)戊烯進(jìn)行說明。
所述環(huán)戊烯腳手架一般如方案10所述進(jìn)行制備。

方案10如Dolby等人在J.Org.Chem.36(1971)1277-1285中所述對3，4-二(甲氧羰基)環(huán)戊酮(10a)進(jìn)行溴化-消去反應(yīng)，隨后用比如硼氫化鈉的還原劑對酮官能團(tuán)進(jìn)行還原，形成不飽和羥基化合物(10b)。在比如二氧六環(huán)和水的混合溶劑中，利用例如氫氧化鋰進(jìn)行選擇性酯水解，形成羥基取代的單酯衍生物(10c)。
其中Rq不是氫，比如為甲基化環(huán)戊烯腳手架的不飽和P2結(jié)構(gòu)腳手架可以如方案11所示進(jìn)行制備。
方案11通過使用比如氯鉻酸吡啶的氧化劑對市售3-甲基-3-丁-1-醇(11a)進(jìn)行氧化，隨后用乙酰氯、溴和甲醇處理，從而形成α-溴酯(11c)。然后，可以使所得的酯(11c)與烯醇化物(11e)反應(yīng)，通過例如用比如二異丙基酰胺鋰的堿在比如四氫呋喃的溶劑中處理相應(yīng)的叔丁酯而實(shí)現(xiàn)，從而給出烷基化化合物(11f)。所述叔丁酯(11e)可以通過在比如二甲基氨基吡啶的堿存在下，用二碳酸二叔丁酯處理相應(yīng)的市售酸(11d)而得到制備，其中k′為1～3。通過如上所述進(jìn)行烯烴易位反應(yīng)使(11f)環(huán)化，形成環(huán)戊烯衍生物(11g)。利用Jacobsen不對稱環(huán)氧化作用方法可以對(11g)進(jìn)行立體選擇性環(huán)氧化作用，從而得到環(huán)氧化物(11h)。最后，加入比如DBN(1，5-二氮雜雙環(huán)-[4.3.0]壬-5-烯)的堿，得到醇(11i)。任選可以對化合物(11i)的雙鍵進(jìn)行還原，例如使用比如鈀碳的催化劑進(jìn)行催化氫化，從而形成相應(yīng)的飽和化合物。
然后，如上所述，所得的環(huán)狀腳手架可以用于完成抑制劑合成。其實(shí)例示于方案12中。
Rx′和T′具有分別與Rx和T相同的定義，但不是大環(huán)一部分。
A′是保護(hù)的羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案12利用標(biāo)準(zhǔn)酰胺偶聯(lián)條件，比如在比如二異丙基苯胺等等的堿存在下，使用HATU可以將P1-結(jié)構(gòu)單元或者其適宜前體(12b)的氨基偶聯(lián)到環(huán)戊烯衍生物酸(12a)上，隨后通過例如如上所述的Mitsunobu條件引入R8-取代基，由此形成(12d)。對剩余的酯進(jìn)行水解，并且其次將酰胺偶聯(lián)至期望的P3或者P3-P4結(jié)構(gòu)單元(12e)上，任選隨后處理P1部分，從而得到根據(jù)式VI的含環(huán)戊烯化合物(12f)。當(dāng)R7、R7′和A′包含官能團(tuán)時，這些官能團(tuán)任選通過本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員認(rèn)可的方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)，參閱，例如上面引用的Bodanzky或者Greene。
具有包含直接連接在P2部分的封端基團(tuán)的肼的化合物，即P3和P4不存在并且G為NRjNRj，可以如方案13所示進(jìn)行制備。
A′是保護(hù)的羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案13在肽偶聯(lián)條件下，例如在比如DMF的溶劑中使用HATU和DIEA，使任選一個或者兩個氮原子上都有烷基取代的肼基甲酸叔丁酯(13a)與酸(13b)反應(yīng)，提供9Ac。任選通過標(biāo)準(zhǔn)方法除去boc基，如在比如二氯甲烷的適宜溶劑中使用例如TFA進(jìn)行酸處理，提供含肼衍生物(13d)。另外，任何不是肼基甲酸叔丁酯衍生物的適當(dāng)?shù)碾卵苌铮热鐔徇?1-基胺或者哌啶-1-基胺等等都可以連接到酸(13b)上。
然后，通過將P3或者P4-P3結(jié)構(gòu)單元偶聯(lián)至伯胺化合物13d上，所得化合物可以被進(jìn)一步擴(kuò)大，如方案14所示。
R11′具有與R11相同的定義，但不是大環(huán)一部分.
A′是保護(hù)羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案14用亞硝酸鈉、溴化鉀和硫酸處理α-氨基化合物(14a)(Yang等人，J.Org.Chem.(2001)，66，7303-7312)，形成相應(yīng)的α-溴化合物(14b)，該化合物通過與上述衍生物(13d)反應(yīng)提供含肼衍生物(14c)。
在P3單元中沒有羧基的化合物可以如方案15所示進(jìn)行制備，該方案用環(huán)戊烷衍生物作為P2腳手架進(jìn)行例證。
R11′具有與R11相同的定義，但不是大環(huán)一部分。
A′是保護(hù)羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案15酸(15a)可以利用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件被偶聯(lián)至通過文獻(xiàn)已知的方法制備的氨基疊氮化物衍生物(15b)上，從而給出酰胺衍生物(15c)。例如通過在比如甲醇的溶劑中，使用聚合物結(jié)合三苯基膦還原或者通過任何其它適宜的還原法還原疊氮官能團(tuán)，形成中間體(15d)，隨后可以在肽偶聯(lián)條件下使其與酸反應(yīng)或者在還原氨基化條件下使其與胺反應(yīng)，從而分別形成酰胺和仲胺。
方案16表示另一種合成P3結(jié)構(gòu)單元中不存在羧基的化合物的路線。
R11′具有與R11相同的定義，但不是大環(huán)一部分。
A′是保護(hù)羧酸、取代的酰胺或磺酰胺或CR4R4′。
方案16不使用方案15中的疊氮衍生物(15b)，而是使用相應(yīng)任選被保護(hù)的羥基衍生物(16b)與酸(16a)進(jìn)行偶聯(lián)，由此引入伯醇。隨后，醇(16c)在任選去保護(hù)之后，用適宜的氧化劑(比如Dess-Martin過碘烷(periodinane))進(jìn)行氧化，從而形成相應(yīng)的醛。在比如THF的溶劑中，通過利用如例如聚苯乙烯粘結(jié)氰基硼氫化物的試劑，使所述醛與期望的胺進(jìn)行還原氨基化反應(yīng)，從而形成胺衍生物(16e)。
另外，在適當(dāng)?shù)臈l件下，醇(16c)可以與適宜的?；噭┗蛘咄榛噭┓磻?yīng)，分別形成酯和醚化合物，即通式(I)中G為O的化合物。
隨后，通過利用適當(dāng)?shù)臈l件，使形成的醇與適宜的?；噭┗蛘咄榛噭┓磻?yīng)，分別形成酯和醚化合物，即通式VI中G為O的化合物。
雖然方案15和16已經(jīng)根據(jù)環(huán)戊烷衍生物進(jìn)行了描述，即式VI化合物中q′為0并且k為1，但是很顯然，相應(yīng)的方法可以用于其它式VI化合物的制備。
當(dāng)R7、R7′和A′包含官能團(tuán)時，這些官能團(tuán)可以通過本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員認(rèn)可的方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)，參閱，例如上面引用的Bodanzky或者Greene。
大環(huán)化合物的形成其中亞烷基鏈從R7/R7′環(huán)烷基延伸至Rx、Rd或者R11，由此形成大環(huán)的根據(jù)本發(fā)明的化合物可以如下所述進(jìn)行制備。適宜的P1、P2和P3結(jié)構(gòu)單元或者其前體利用如上所述的策略偶聯(lián)在一起，隨后進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)(大環(huán)化反應(yīng))。在大環(huán)形成之前或之后，所述P2結(jié)構(gòu)單元的取代基W-R8可以經(jīng)如上所述的Mitsunobu反應(yīng)并入其中，或者所述基團(tuán)可以用需要的取代脯氨酸類似物或者碳環(huán)處理。對于從R7/R7′環(huán)烷基延伸至R11的大環(huán)結(jié)構(gòu)，含適當(dāng)側(cè)鏈的P3氨基酸可以如WO00/59929中所述進(jìn)行制備。
合成大環(huán)化合物的一般路線示于方案17中，該方案圖解了應(yīng)用于具有螺-環(huán)丙基P1的化合物方法，其中大環(huán)含有P3側(cè)鏈。
方案17利用如上所述的標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件，使酸衍生物(17a)與適當(dāng)酸保護(hù)的氨基酸(17b)偶聯(lián)，從而形成(17c)。然后，利用比如下述文獻(xiàn)報(bào)道的一種基于Ru的催化劑，經(jīng)烯烴易位反應(yīng)進(jìn)行大環(huán)形成，Miller，S.J.，Blackwell，H.E.；Grubbs，R.H.J.Am.Chem.Soc.118，(1996)，9606-9614；Kingsbury，J.S.，Harrity，J.P.A.Bonitatebus，P.J.，Hoveyda，A.H.，J.Am.Chem.Soc.121，(1999)，791-799和Huang等人，J.Am.Chem.Soc.121，(1999)，2674-2678。還應(yīng)當(dāng)認(rèn)可含有其它過渡金屬(比如Mo)的催化劑也可以用于該反應(yīng)。任選分別通過本領(lǐng)域熟知的標(biāo)準(zhǔn)氫化方法和/或標(biāo)準(zhǔn)水解方法將雙鍵還原和/或?qū)⒁阴ニ狻Ａ硗?，可以對甲酯進(jìn)行選擇性水解，然后通過標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件使其與R16-G-P4結(jié)構(gòu)單元偶聯(lián)。描述于方案17中的大環(huán)化步驟還可以應(yīng)用于如上所述的相應(yīng)碳環(huán)類似物。當(dāng)所述連系物含有氮原子時，環(huán)閉合可以通過如WO00/59929所述的還原氨基化反應(yīng)進(jìn)行。
在P1部分不存在環(huán)丙基部分的大環(huán)化合物，即大環(huán)直接由肽骨架在與R7相鄰的碳原子延伸的化合物，可以利用在此所述的方法進(jìn)行制備。其中5元環(huán)烷基衍生物用作P2腳手架的實(shí)例示于方案18中。
A′是保護(hù)羧酸、取代的酰胺或磺酰胺。n是1，2，3，4或5方案18利用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件將適宜的烯丙基甘氨酸衍生物(18a)偶聯(lián)至P2腳手架(18b)的酸官能團(tuán)上，從而得到酰胺衍生物(18c)。對酯基進(jìn)行水解，隨后使其與烯烴取代的氨基酸(18Ad)進(jìn)行肽偶聯(lián)反應(yīng)，從而提供酰胺化合物(18e)。然后通過利用例如Hoveyda-Grubbs催化劑進(jìn)行環(huán)閉合易位反應(yīng)，從而給出大環(huán)化合物(18f)。
盡管方案18表示使用帶有未被取代的羥基的P2腳手架的合成順序，但是顯然，R8取代基可以在合成的任何適宜步驟引入，例如如方案9和10所述，或者它可以在易位反應(yīng)之后引入，即引入在化合物18f上，利用本文所述的任何方法。
用于制備其中大環(huán)從P3片斷上酰胺氮原子上伸出的化合物(即通式VI中Rx為J)或者用于制備其中P3和P4片斷不存在(即通式VI中m和n為0并且G為NRj)的化合物的結(jié)構(gòu)單元，一般可以如方案18B概述進(jìn)行制備。
方案18B氨基甲酸酯18Ba，該化合物可以市場購買到或者例如通過使期望的烷基胺與二碳酸二叔丁酯反應(yīng)而可以輕易制備得到，可以在Mitsunobu條件下與適當(dāng)?shù)摩?不飽和醇反應(yīng)，從而形成烷基化的氨基甲酸酯(18Bb)。使18Bb經(jīng)受酸性條件，例如在比如二氯甲烷的溶劑中用三氟乙酸對其進(jìn)行處理，從而給出游離胺(18Bc)，該胺可以利用任何先前所述的策略連接至P2片斷上。
含有肼基團(tuán)的大環(huán)結(jié)構(gòu)，即通式VI中T為NRd或者m和n為0并且G為NRjNRj，可以通過將適當(dāng)N-烷基化的肼基甲酸酯衍生物連接至P2片斷上而得到制備。烷基化的肼基甲酸酯衍生物可以通過例如如方案19所述進(jìn)行制備。

方案19通過適宜的氧化方法，例如在比如二氯甲烷的溶劑中，使用N-甲基嗎啉氧化物和過鐐酸四丙基銨，對適當(dāng)?shù)拇?19a)進(jìn)行氧化作用，從而形成醛(19b)。用所得醛對肼基甲酸叔丁酯進(jìn)行還原烷基化作用，從而得到期望的N-烷基化的結(jié)構(gòu)單元(19c)。另外，在與醛19b反應(yīng)中，可以使用非肼基甲酸叔丁酯的任何期望的肼衍生物，比如嗎啉-1-基胺或者哌啶-1-基胺等等。
方案20圖解了適用于制備其中肼基團(tuán)“外部”氮原子被適合于隨后大環(huán)形成的ω-不飽和烷基鏈或者任何其它適宜的烷基烷基化的化合物的結(jié)構(gòu)單元的合成順序。
方案20在Mitsunobu條件下，使適當(dāng)保護(hù)的肼衍生物(例如本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員可以很容易地制備的(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-氨基甲酸叔丁酯(20a))與期望的醇R-OH反應(yīng)，從而形成N-烷基化的肼化合物(20b)。通過用肼或者其衍生物(比如水合肼或者肼乙酸酯)處理，鄰苯二甲酰亞氨基的除去可以得到實(shí)現(xiàn)，從而形成肼基甲酸酯(20c)。然后，可以利用先前所述的任何方法將所得伯胺連接至期望的P2片斷上，從而得到20d，或者可以利用例如方案19中所述的還原氨基化方法將其進(jìn)一步烷基化，隨后使其與先前所述的P2片斷偶聯(lián)，從而得到20e。
方案21例證說明了將含P3結(jié)構(gòu)單元的肼偶聯(lián)到環(huán)戊烷腳手架上，隨后對其進(jìn)行大環(huán)化。
方案21使用標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件將肼基甲酸酯衍生物(21b)偶聯(lián)至P2-P1結(jié)構(gòu)單元(21a)上，從而形成中間體(21c)。通過如方案18所述的烯烴易位反應(yīng)對(21c)進(jìn)行環(huán)閉合，從而得到大環(huán)化合物(21d)。
在此使用的術(shù)語“N-保護(hù)基”或者“N-保護(hù)的”是指那些意在保護(hù)氨基酸或者肽的N-末端或者保護(hù)氨基，使其在合成工藝期間不發(fā)生不期望的反應(yīng)的基團(tuán)。通常應(yīng)用的N-保護(hù)基公開于Greene，“Protective Groups in Organic Synthesis”(John Wiley & Sons，NewYork，1981)中，其在此引入作為參考。N-保護(hù)基包括?；热缂柞；⒁阴；⒈；?、新戊酰、叔丁基乙?；?-氯乙?；?、2-溴乙?；⑷阴；?、三氯乙?；?、鄰苯二甲?；⑧?硝基苯氧基乙?；?、α-氯丁酰基、苯甲?；?-氯苯甲?；?、4-溴苯甲?；?-硝基苯甲?；鹊龋换酋；热绫交酋；蛯?甲苯磺?；鹊?；氨基甲酸酯形式基團(tuán)，比如芐氧羰基、對-氯芐氧羰基、對-甲氧基芐氧羰基、對-硝基芐氧羰基、2-硝基芐氧羰基、對-溴芐氧羰基、3，4-二甲氧基芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基、2-硝基-4，5-二甲氧基芐氧羰基、3，4，5-三甲氧基芐氧羰基、1-(對-聯(lián)苯基)-1-甲基乙氧羰基、α，α-二甲基-3，5-二甲氧基芐氧羰基、二苯甲氧羰基、叔丁氧羰基、二異丙基甲氧羰基、異丙氧羰基、乙氧羰基、甲氧羰基、烯丙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、苯氧羰基、4-硝基苯氧羰基、芴基-9-甲氧羰基、環(huán)戊基氧基羰基、金剛烷基氧基羰基、環(huán)己基氧基羰基和苯硫基羰基等等；烷基，比如芐基、三苯甲基和芐氧基甲基等等；和甲硅烷基，比如三甲基甲硅烷基等等。優(yōu)選的N-保護(hù)基包括Fmoc、甲酰基、乙?；?、苯甲?；?、新戊酰、叔丁基乙酰基、苯磺?；?、芐基、叔丁氧羰基(BOC)和芐氧羰基(Cbz)。
在此使用的“羥基保護(hù)基”是指保護(hù)羥基，使其在合成工藝期間不發(fā)生不期望的反應(yīng)的取代基，比如Greene，“Protective Groups InOrganic Synthesis”(John Wiley & Sons，New York(1981))中所公開的那些O-保護(hù)基。羥基保護(hù)基包括取代甲醚，例如，甲氧基甲基、芐氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、叔丁基以及其它低級烷基醚，低級烷基比如并丙基、乙基以及并且特別是甲基、芐基和三苯甲基；四氫吡喃基醚；取代乙醚，例如2，2，2-三氯乙醚；甲硅烷基醚，例如三甲基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚和叔丁基二苯基甲硅烷基醚；和通過羥基與羧酸反應(yīng)而制備的酯，例如乙酸酯、丙酸酯和苯甲酸酯等等。
在治療由黃病毒(比如HCV)引起的癥狀中，式I化合物典型地通過以獲得血漿濃度為約100～5000nM，比如300～2000nM的量給藥。取決于所述制劑的生物利用度，這相當(dāng)于給藥0.01～10mg/kg/天，優(yōu)選0.1～2mg/kg/天的劑量率。對于正常成年人，一般劑量率為每天約0.05～5g，優(yōu)選0.1～2g，比如500～750mg，分為每天一個至四個劑量單位。同所有藥劑一樣，劑量率將隨著患者的體重和新陳代謝條件以及感染的嚴(yán)重程度而變化，并且需要根據(jù)伴隨藥物進(jìn)行調(diào)節(jié)。
基于抗病毒治療的良好處方實(shí)踐，式I化合物一般與其它HCV治療劑共同給藥以避免藥物逃逸突變體的產(chǎn)生。上述另外的HCV抗病毒治療劑的實(shí)例包括病毒唑、干擾素(包括聚乙二醇化干擾素)。另外，許多核苷類似物和蛋白酶抑制劑處在臨床或者臨床前研究階段，它們適合于與本發(fā)明化合物共同給藥。
據(jù)此，本發(fā)明的另一方面提供一種在通用劑量單元中包括通式I化合物和至少一種其它HCV抗病毒劑的組合物，所述通用劑量單元比如為如下所述的任何劑型，但是特別是口服給藥的片劑或者膠囊或者液體懸浮劑或者用于口服或者注射應(yīng)用的溶液。本發(fā)明的另一方面提供治療或者預(yù)防黃病毒(比如HCV)傳染的方法，包括順序或者同時給藥式I化合物和至少一種其它HCV抗病毒劑。本發(fā)明的相關(guān)方面提供了一種患者包，包括式I化合物的第一藥物組合物，優(yōu)選為單位劑型，和第二HCV抗病毒劑的第二藥物組合物，一般也為單位劑型并且通常在患者包中的單獨(dú)容器內(nèi)?；颊甙€適宜地提供有印刷在包裝或者其中容器上或者包裝插頁上的說明，用于說明相應(yīng)藥物組合物的同時或者順序給藥。
許多HCV病人都是與其它傳染病的共感染或者傾向于與其它傳染病一起的超感染。據(jù)此，本發(fā)明的另一方面提供組合治療法，包括將本發(fā)明化合物與至少一種其它抗感染藥物共同配制在相同劑量單元中或者進(jìn)行共包裝。本發(fā)明化合物與至少一種其它抗感染劑同時或者順序給藥，一般說各劑量與單一療法所涉及試劑的劑量相當(dāng)。然而，某些抗感染劑可以誘發(fā)協(xié)同效應(yīng)，這就使得將要給藥的一種或者兩種活性成分的劑量低于相應(yīng)單一療法的劑量。例如，在傾向于通過Cyp3A4迅速代謝的藥物中，與HIV蛋白酶抑制劑利托那韋共同劑量給藥可以以較低的劑量方式給藥。
一般與HCV共感染或者超感染包括乙型肝炎病毒或者HIV。據(jù)此，本發(fā)明化合物有利地與至少一種HIV抗病毒劑和/或至少一種HBV抗病毒劑共同給藥(或者在同一劑量單元中、或者在共包裝的或者獨(dú)立處方的劑量單元中)。
代表性的HIV抗病毒劑包括NRTI，比如阿洛夫定(FLT)、齊多夫定(AZT，ZDV)、司他夫定(d4T，Zerit)、扎西他濱(ddC)、地丹諾辛(ddI，Videx)、阿巴卡韋(ABC，Ziagen)、拉米夫定(3TC，Epivir)、恩曲他濱(FTC，Emtriva)、racevir(外消旋FTC)、阿德福韋(ADV)、entacavir(BMS 200475)、阿洛夫定(FLT)、替諾福韋酯(TNF，Viread)、amdoxavir(DAPD)、D-d4FC(DPC-817)、-dOTC(Shire SPD754)、elvucitabine(Achillion ACH-126443)、BCH 10681(Shire)SPD-756、racivir、D-FDOC、GS7340、INK-20(硫醚磷脂AZT，Kucera)、2′，3′-雙脫氧-3′-氟鳥嘌呤核苷(FLG)及其前藥，比如MIV-210、reverset(RVT，D-D4FC，Pharmasset DPC-817)。
代表性的NNRTI包括地拉韋定(Rescriptor)、依發(fā)韋倫(DMP-266，Sustiva)、奈韋拉平(BIRG-587，Viramune)、(+)西卡拉腦立德A和B(Advanced Life Sciences)、卡泊韋林(AG1549f S-1153；Pfizer)、GW-695634(GW-8248；GSK)、MIV-150(Medivir)、MV026048(R-1495；Medivir AB/Roche)、NV-05 2 2(IdenixPharm.)、R-278474(Johnson & Johnson)、RS-1588(IdenixPharm.)、TMC-120/125(Johnson & Johnson)、TMC-125(R-165335；Johnson & Johnson)、UC-781(Biosyn Inc.)和YM215389(Yamanoushi)。
代表性的HIV蛋白酶抑制劑包括PA-457(Panacos)、KPC-2(Kucera Pharm.)，、5HGTV-43(Enzo Biochem)、安潑那韋(VX-478，Agenerase)、阿扎那韋(Reyataz)、印地那韋硫酸鹽(MK-639，Crixivan)、Lexiva(福沙那韋鈣，GW-433908或者908，VX-175)、利托那韋(Norvir)、羅品那韋+利托那韋(ABT-378，Kaletra)、替普拉那維、那非那韋甲磺酸酯(Viracept)、沙奎那韋(Invirase，F(xiàn)ortovase)、AG1776(JE-2147，KNI-764；Nippon MiningHoldings)、AG-1859(Pfizer)、DPC-681/684(BMS，GS224338；Gilead Sciences)、KNI-272(Nippon Mining Holdings)、Nar-DG-35(Narhex)、P(PL)-100(P-1946；Procyon Biopharma)、P-1946(Procyon Biopharma)、R-944(Hoffmann-LaRoche)、RO-0334649(Hoffmann-LaRoche)、TMC-114(Johnson & Johnson)、VX-385(GW640385；GSK/Vertex)、VX-478(Vertex/GSK)。
其它的HIV抗病毒劑包括入口抑制劑，所述入口抑制劑包括融合抑制劑、CD4受體抑制劑、CCR5共同受體抑制劑和CXCR4共同受體抑制劑，或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥。入口抑制劑的實(shí)例為AMD-070(AMD11070；AnorMed)、BlockAide/CR(ADVENTRXPharm.)、BMS 806(BMS-378806；BMS)、Enfurvirtide(T-20，R698，F(xiàn)uzeon)、KRH1636(Kureha Pharmaceuticals)、ONO-4128(GW-873140，AK-602，E-913；ONO Pharmaceuticals)、Pro-140(Progenics Pharm)、PRO542(Progenics Pharm.)、SCH-D(SCH-417690；Schering-Plough)、T-1249(R724；Roche/Trimeris)、TAK-220(Takeda Chem.Ind.)、TNX-355(Tanox)和UK-427，857(Pfizer)。整合酶抑制劑的實(shí)例為L-870810(Merck& Co.)、c-2507(Merck & Co.)和S(RSC)-1838(shionogi/GSK)。
HBV抗病毒劑的實(shí)例包括阿德福韋dipivoxil(Hepsera)，并且特別是拉米夫定和2′，3′-雙脫氧-3′-氟鳥嘌呤核苷(FLG)及其前藥，比如MIV-210，F(xiàn)LG的5′-O-纈氨?；?L-乳?；八?。這些后面的HBV抗病毒劑是特別適宜的，因?yàn)樗鼈冞€具有抗HIV的活性。
雖然所述活性劑可以單獨(dú)給藥，但是優(yōu)選它作為藥物制劑的組成部分存在。這種制劑將包含上述定義的活性劑以及一種或多種可接受的載體或者賦形劑以及任選包含其它治療成分。所述載體必須是可接受的，含義是它與制劑的其它成分相容并且不會對接受者造成損害。
所述制劑包括那些適合于直腸、經(jīng)鼻、局部(包括經(jīng)頰和舌下)、陰道或者胃腸外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))給藥，但是優(yōu)選該制劑為口服給藥制劑。該制劑可以適宜地以單位劑型形式存在，例如片劑和緩釋膠囊，并且其可以通過藥劑學(xué)領(lǐng)域熟知的任何方法進(jìn)行制備。
上述方法包括使上述定義的活性劑與載體結(jié)合的步驟。一般而言，該制劑通過以下方法進(jìn)行制備使該活性劑與液體載體或者細(xì)碎的固體載體或者兩者均化和緊密地結(jié)合，并且然后，如果需要將產(chǎn)品加工成形。本發(fā)明提供了制備藥物組合物的方法，包括使式VI化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽與藥學(xué)上可接受的載體或者賦形劑結(jié)合或者聯(lián)合。如果藥物制劑的生產(chǎn)涉及均勻混合藥物賦形劑和鹽形式的所述活性成分，那么通常優(yōu)選使用本質(zhì)上非堿性的賦形劑，即酸性或者中性的賦形劑。本發(fā)明中用于口服給藥的制劑可以作為獨(dú)立的單位存在，比如各自含有預(yù)定量活性劑的膠囊、藥包或者片劑；作為粉劑或者粒劑存在；作為活性劑在含水液體或者非水液體中的溶液或者懸浮液存在；或者作為水包油液體乳劑或者油包水液體乳劑存在，以及作為丸劑等等存在。
對于口服給藥的組合物(例如片劑和膠囊)，術(shù)語“適當(dāng)?shù)妮d體”包括賦形劑，比如一般的賦形劑，如粘合劑，例如糖漿劑、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、西黃蓍膠、聚乙烯吡咯烷酮(Povidone)、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、蔗糖和淀粉；填料和載體，例如玉米淀粉、明膠、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸二鈣、氯化鈉和藻酸；和潤滑劑，比如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉以及其它金屬硬脂酸鹽、硬脂酸、硬脂酸甘油酯、硅酮油、滑石蠟、油和氧化硅膠體。也可以使用比如胡椒薄荷、水楊酸甲酯、或者櫻桃香精等等的調(diào)味劑。可以合意地加入著色劑使劑型容易被識別。片劑還可以通過本領(lǐng)域熟知的方法進(jìn)行包衣。
片劑可以通過壓制或者模壓進(jìn)行制備，任選含有一種或者多種輔助成分。壓制片可以通過在適宜的設(shè)備中壓制自由流動形式(比如粉劑或者粒劑)的活性劑而得到制備，任選其中混有粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或者分散劑。模制片可以通過在適宜的設(shè)備中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉末化合物的混合物而得到制成。所述片劑任選可以進(jìn)行包衣或者刻痕并且可以進(jìn)行配制，以便提供活性劑的緩釋或者控釋。
其它適于口服給藥的制劑包括，將活性劑含入調(diào)味劑基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯膠或者西黃蓍膠)中的錠劑；將活性劑含入惰性基質(zhì)(比如明膠和甘油，或者蔗糖和阿拉伯膠)中的軟錠劑；和將活性劑含入適當(dāng)液體載體中的漱口劑。
式VI化合物可以形成鹽，這構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。式I化合物適宜的藥學(xué)上可接受的鹽包括有機(jī)酸的鹽，特別是羧酸鹽，包括但不限于乙酸鹽、三氟醋酸鹽、乳酸鹽、葡糖酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、泛酸鹽、羥乙基磺酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、丁酸鹽、雙葡萄酸鹽、環(huán)戊糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、乙二酸鹽、庚酸鹽己酸鹽、延胡索酸鹽、煙酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、酒石酸鹽、乳糖酸鹽、pivolate、樟腦酸鹽、十一酸鹽和琥珀酸鹽，有機(jī)磺酸鹽，比如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥乙磺酸鹽、樟腦磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、苯磺酸鹽、對-氯苯磺酸鹽和對-甲苯磺酸鹽；和無機(jī)酸鹽，比如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、半硫酸鹽、硫氰酸鹽、過硫酸鹽、磷酸和磺酸鹽。此外，本發(fā)明提供式I化合物的鹽，該鹽可能是或者可能不是藥學(xué)上可接受的鹽，但是其可以用作合成中間體，根據(jù)需要所述鹽部分被置換或者替換。
本發(fā)明包括式I化合物的前藥。式VI化合物的前藥為在給藥至患者后，通常在消化道、肝臟或者血漿中水解后在體內(nèi)釋放出式VI化合物的那些化合物。一般的前藥為羥基官能團(tuán)的藥學(xué)上可接受的醚并且特別是酯(包括磷酸酯)、胺官能團(tuán)藥學(xué)上可接受的酰胺或氨基甲酸酯或者羧基官能團(tuán)藥學(xué)上可接受的酯。優(yōu)選藥學(xué)上可接受的酯包括烷基酯(包括乙酸酯、丁酸酯、叔丁酸酯、十八烷基酯和新戊酸酯)、磷酸酯和磺酸酯(即那些衍生于RSO2OH的酯，其中R為低級烷基或者芳基)。藥學(xué)上可接受的酯包括低級烷基醚以及公開于WO00/47561中的醚，特別是甲氧基氨基?；鸵已趸被；?。
本發(fā)明化合物具有多種立體中心，并且本發(fā)明提供在這些立體中心的每一個上的外消旋物和對映異構(gòu)體。
一般地，對應(yīng)于P3和P4側(cè)鏈(即R15和/或R11)的基團(tuán)的立體化學(xué)將對應(yīng)于L-氨基酸構(gòu)型，不過本發(fā)明也提供在這些中心的一個或者兩個上的D-異構(gòu)體。應(yīng)當(dāng)注意，盡管E部分的本質(zhì)是P3和P4一般相對于常規(guī)多肽被轉(zhuǎn)移了一個原子和事實(shí)上翻轉(zhuǎn)肽殘基，但是L構(gòu)型仍是活性的，設(shè)想，同常規(guī)的肽基質(zhì)相比，使P3和P4隨后將胺酸側(cè)鏈傾斜至另一側(cè)。
環(huán)狀P2基團(tuán)(即跨接P1酰胺鍵的羰基和從P3伸出的羰基)骨架組分的立體化學(xué)一般將相應(yīng)于L-脯氨酸。鍵接W的P2環(huán)原子的立體化學(xué)一般如下所示 在其中R7和R7′被一起定義為螺烷基的本發(fā)明化合物中，上述螺-環(huán)烷基將一般在與A順向的螺-環(huán)丙基環(huán)上包含R7′a取代基
或者與A反向 合意地，上述螺-環(huán)丙基環(huán)的螺碳原子具有R構(gòu)型 合意地，在以下絕對構(gòu)型中，與A相鄰的螺-環(huán)丙基環(huán)上的R7′a取代基為順式方向 特別優(yōu)選變量R7′a包括乙基，由此在1位和2位上的不對稱碳原子具有R，R構(gòu)型。另外優(yōu)選R7′a包括乙烯基，由此在1位和2位上的不對稱碳原子具有R，S構(gòu)型。
在本發(fā)明化合物為包含J基團(tuán)的大環(huán)中，J優(yōu)選為(i)或者(ii)部分結(jié)構(gòu)表示的非對映異構(gòu)體
J與酰胺順向(i) J與A順向(ii)特別是其中J與A順向。
實(shí)施方案詳述現(xiàn)在，本發(fā)明的多種實(shí)施方案將僅僅參考以下非限制性實(shí)施例通過例證的方式進(jìn)行描述。
實(shí)施例1 7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-醇(1)。
向裝有甲苯(100mL)的攪拌的圓底燒瓶中加入苯甲?；宜嵋阴?18.7g，97mmol)和間-甲氧基苯胺(12g，97mmol)。然后將在二氧六環(huán)中的4M HCl(0.5mL)加入其中，并且使反應(yīng)混合物回流6小時(140℃)。將所得混合物與甲苯共蒸發(fā)。向所得粗混合物中加入二苯醚(50mL)，并且將所得混合物加熱至280℃，保持2h。當(dāng)理論量的乙醇(6mL)被收集在Dean Stark阱中時，停止加熱并且將混合物冷卻至室溫。將所得粗混合物溶于CH2Cl2(100mL)中并且攪拌30分鐘。將形成的沉淀濾出并且對其進(jìn)行干燥，由此給出1(4.12g，16.4mmol，17％)淺黃色粉末。
1H(300MHz，DMSO-D6)δ3.8(s，3H)，6.24(s，1H)，6.88-6.96(dd，1H，J＝9.07Hz，J＝2.47Hz)，7.19(d，1H，J＝2.19Hz)，7.56(t，3H，J＝2.19Hz)，7.8(dd，2H，J＝7.14Hz，J＝2.19Hz)，8.0(d，1H，J＝9.06Hz)；13C(75.5MHz，DMSO-D6)δ55.3，99.6，106.9，113.1，119.1，126.4，127.5，128.8，130.2，134.1，142.2，149.4，161.8，176.4。
實(shí)施例2
(消旋)-4-氧代環(huán)戊-2-烯-1，2-二羧酸二甲酯(2)將(1R，2S)-4-氧代-環(huán)戊烷-1，2-二羧酸二甲酯(4.8g，23.8mmol)和CuBr2(11.9g，53.2mmol)溶于無水THF(70mL)中，并且在90C下將該混合物回流2小時。將形成的CuBr濾出并且對所得有機(jī)相進(jìn)行濃縮。將CaCO3(2.7g，27.2mmol)和DMF(70mL)加入其中，并且使該混合物在100℃下保持1小時。將暗褐色混合物傾倒在冰(35g)上并且將形成的沉淀濾出。所得水層用乙酸乙酯(1×300mL+3×150mL)進(jìn)行提取。對所得有機(jī)相進(jìn)行干燥、過濾和濃縮。通過快速層析法(甲苯/EtOAc 9∶1)進(jìn)行純化，給出為黃色晶體的化合物2(2.1g，45％)。
實(shí)施例3 ((1S，4R)&(1R，4S))-4-羥基-環(huán)戊-2-烯-1，2-二羧酸二甲酯(3)向溶于甲醇(23mL)的化合物2(3.18g，16.1mmol)的冷溶液(-30℃)中加入NaBH4(0.66g，17.5mmol)。九分鐘之后，通過加入鹽水(80mL)將過量的NaBH4破壞。對所得混合物進(jìn)行濃縮并且用乙酸乙酯(4×80mL)對其進(jìn)行提取。對所得有機(jī)相進(jìn)行干燥、過濾和濃縮，從而給出為黃色油的化合物3(3.0g，92％)。
實(shí)施例4
((1S，4R)&(1R，4S))-4-羥基-環(huán)戊-2-烯-1，2-二羧酸2-甲酯(4)向溶于二氧六環(huán)和水(1∶1，110mL)中的化合物3(3.4g，22mmol)的冰冷溶液中加入LiOH(0.52g，22mmol)。兩個半小時之后，將混合物與甲苯和甲醇共蒸發(fā)。通過快速層析法(甲苯/乙酸乙酯3∶1+1％HOAc)進(jìn)行純化，給出為黃白色晶體的標(biāo)題化合物(1.0g，27％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.78-1.89(m，1H)，2.70-2.84(m，1H)，3.56-3.71(m，1H)，3.76(s，3H)，4.81-4.90(m，1H)，6.76-6.81(m，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ38.0，48.0，52.4，75.7，137.0，146.2，165.0 178.4。
實(shí)施例5 ((3S，5R)&(3R，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丁基氨基甲?；?-3-羥基-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(5)向化合物4(0.20g，1.1mmol)和2-氨基-戊酸叔丁酯(0.24g，1.4mmol)的DMF(7mL)冰冷溶液中加入DIPEA(0.18g，1.4mmol)和HATU(0.53g，1.4mmol)。兩小時之后將上述溶液濃縮，并且利用柱層析(甲苯/乙酸乙酯 3∶1)對其進(jìn)行純化。由此給出為黃色油的標(biāo)題化合物(0.22g，63％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.84-0.96(m，3H)，1.14-1.39(m，2H)，[(1.44 & 1.49)s，9H]，1.50-1.60(m，1H)，1.61-1.85(m，1H)，1.97-2.10(m，1H)，2.11-2.28(m，1H)，3.57-3.68(m，1H)，[(3.73 & 3.76)s，3H]，4.30-4.50(m，1H)，4.63-4.73(m，1H)，6.80-6.95(m，1H)，6.95-7.00(m，1H)。
實(shí)施例6 ((3S，5R)&(3R，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丙基氨基甲?；?-3-羥基-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(6)根據(jù)制備化合物5所述的方法，使化合物4(141mg，76mmol)反應(yīng)，使用L-2-氨基-正丁酸叔丁酯而非2-氨基-戊酸叔丁酯，由此給出為淡黃色油的標(biāo)題化合物(171mg，69％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.89-0.98(m，3H)，[(1.42 & 1.44)s，9H]，1.60-1.78(m，1H)，1.79-1.95(m，1H)，1.99-2.11(m，1H)，2.18-2.30(m，1H)，3.58-3.65(m，1H)，[3.75 & 3.78)s，3H]，4.22-4.39(m，1H)，4.61-4.66(m，1H)，6.77-6.90(m，1H)，6.91-6.92(m，1H).
實(shí)施例7 ((3S，5R)&(3R，5S))-5-((1R，2S)-1-叔丁氧羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基氨基甲酰基)-3-羥基-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(7)使化合物4(50mg，37mmol)根據(jù)制備化合物5所述的方法進(jìn)行反應(yīng)，使用(1R，2S)-1-氨基-2-乙烯基環(huán)丙羧酸叔丁酯而非2-氨基-戊酸叔丁酯，由此提供為淡黃色油的標(biāo)題化合物(50mg，38％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ[(1.38 & 1.42)s，9H]，1.75-1.83(m，1H)，2.00-2.21(m，3H)，3.55-3.63(m，1H)，[(3.77 & 3.82)s，3H]，4.20-4.38(m，1H)，4.65-4.80(m，1H)，5.13-5.20(m，1H)，5.22-5.38(m，1H)，5.60-5.82(m，1H)，6.95-6.96(m，2H)。
實(shí)施例8 ((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丁基氨基甲酰基)-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(8)向化合物5(0.23g，0.67mmol)的無水THF冰冷溶液中加入7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-醇(0.22g，0.88mmol)和三苯基膦(0.23g，0.88mmol)。然后將DIAD(0.19g，0.92mmol)溶于THF(2mL)中，并且將該溶液滴加加入至上述溶液中。一小時之后將上述混合物濃縮，并且利用快速層析法(甲苯/乙酸乙酯 3∶1)對其進(jìn)行純化。由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物(0.30g，77％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0，88-1.00(m，3H)，1.18-1.43(m，2H)，[(1.45 & 1.50)s，9H]，1.53-1.65(m，1H)，1.66-1.85(m，1H)，2.29-2.43(m，1H)，3.10-3.25(m，1H)，[(3.79 & 3.83)s，3H]，3.97(s，3H)，4.05-4.20(m，1H)，4.38-4.50(m，1H)，6.03-6.13(m，1H)，6.65-6.90(m，1H)，7.04-7.18(m，3H)，7.40-7.56(m，4H)，8.00-8.12(m，3H)。
實(shí)施例9
((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(9)根據(jù)制備化合物8所述的方法，使化合物6(132mg，40mmol)反應(yīng)，由此給出為黃色油的標(biāo)題化合物(137mg，61％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.83-0.98(m，3H)，[(1.42 & 1.44)s，9H]，1.65-1.78(m，1H)，1.80-1.97(m，1H)，2.30-2.40(m，1H)，3.05-3.20(m，1H)，[(3.78 & 3.80)s，3H]，3.94(s，3H)，3.95-4.01(m，1H)，4.38-4.44(s，1H)，6.05-6.15(m，1H)，6.80-6.94(m，1H)，7.02-7.15(m，3H)，7.38-7.55(m，4H)，7.97-8.18(m，3H)。
實(shí)施例10 ((3R，5R)&(3S，5S))-5-((1R，2S)-1-叔丁氧羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸甲酯(10)根據(jù)制備化合物8所述的方法，使化合物7(41mg，116mmol)反應(yīng)，形成為黃色油的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.52-1.57(m，1H)，1.58(m，9H)，1.80-1.83(m，1H)，2.00-2.17(m，1H)，2.20-2.38(m，1H)，3.20-3.37(m，1H)，3.80(s，3H)，3.81-3-3.98(m，1H)，3.99(s，3H)，5.12-5.20(m，1H)，5.22-5.40(m，1H)，5.63-5.80(m，1H)，6.05-6-20(m，1H)，7.00-7.21(m，4H)，7.40-7.58(m，4H)，8.02-8.18(m，3H)。
實(shí)施例11 ((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丁基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸(11)將甲酯8(0.35g，0.61mmol)溶于二氧六環(huán)/水(1∶1，7mL)中，并且將LiOH(0.031g，1.3mmol)加入其中。將該反應(yīng)攪拌過夜，然后對其進(jìn)行共濃縮。由此給出為褐色粉末的化合物11鋰鹽(0.32g，90％)。
實(shí)施例12 ((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸(12)根據(jù)制備化合物11所述的方法，使化合物9(225mg，40mmol)反應(yīng)，形成為黃色鹽的標(biāo)題化合物(157mg，72％)。
實(shí)施例13 ((3R，5R)&(3S，5S))-5-((1R，2S)-1-叔丁氧羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-1-烯羧酸(13)根據(jù)制備化合物11所述的方法，使化合物10(35mg，59mmol)反應(yīng)，形成為黃色鹽的標(biāo)題化合物(33mg，97％)。
實(shí)施例14 (S)-2-{[((1S，4S)&(1R，4R))-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲酰基}-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸叔丁酯(14)將酸12(38.4mg，0.070mmol)和(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基乙酸甲酯(26.6mg，0.098mmol)溶于DMF(1.5mL)中，并且在冰浴中對其進(jìn)行冷卻。將DIPEA(17.1μL，0.098mmol)和HATU(37.4mg，0.098mmol)加入其中。九十分鐘后使上述混合物與甲苯和甲醇共濃縮，然后通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯 6∶1)對其進(jìn)行純化。進(jìn)一步在HPLC(90％甲醇+0.2％TEA)上進(jìn)行純化。對非對映異構(gòu)體混合物14進(jìn)行濃縮，從而給出淡黃色油(20.6mg，37％)。對其進(jìn)行冷凍干燥之后，收集為白色粉末的化合物14。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.93-1.02(m，9H)，1.03-1.25(m，4H)，1.44(s，9H)，1.65-1.86(m，9H)，2.05-2.10(m，1H)，2.22-2.40(m，1H)，3.05-3.20(m，1H)，3.77(s，3H)，3.98(s，3H)，4.18-4.22(m，1H)，4.38-4.60(m，3H)，6.01-6.10(m，1H)，6.61-6.70(m，2H)，6.80-6.85(m，1H)，7.05-7.18(m，2H)，7.40-7.58(m，5H)，8.00-8.13(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ9.7，18.4，19.2，[25.9 & 26.1]，[28.2 & 28.5]，29.6，32.0，37.3，41.0，46.2，50.7，52.4，54.4，55.8，57.2，58.5，82.0，82.8，98.4，110.2，118.4，120.1，123.2，127.9，128.2，128.9，129.5，131.2，135.1，135.2，142.7，144.2，161.6，164.3，164.7，170.9，171.4，172.4.MALDI-TOF m/z 821.56[(M+Na)+C45H58N4NaO9+的計(jì)算值821.41]。
實(shí)施例15 (S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(R)-1-[((R)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸叔丁酯(15)根據(jù)制備化合物14所述的方法使化合物12(20mg，37mmol)反應(yīng)，使用(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-(R)-環(huán)己基乙酸甲酯而不使用(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-(S)-環(huán)己基乙酸甲酯，由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物(19mg，66％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.91-0.98(m，3H)，0.99-1.10(m，6H)，1.11-1.38(m，4H)，[(1.43 & 1.45)s，9H]，1-45-1.94(m，9H)，2.05-2.18(m，1H)，2.22-2.40(m，1H)，3.16-3.24(m，1H)，3.77(s，3H)，3.98(s，3H)，4.04-4.18(m，1H)，4.36-4.57(m，3H)，6.00-6.08(m，1H)，6.13-6.21(m，1H)，6.62-6.70(m，1H)，6.81-6.85(m，1H)，7.05-7.18(m，3H)，7.41-7.57(m，4H)，8.02-8.13(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ9.3，18.2，19.0，[25.5 & 25.9]，[28.0 & 28.3]，29.4，31.4，32.1，35.7，40.7，50.4，52.2，54.2，55.5，57.0，58.2，81.8，82.4，98.2，107.5，115.0，118.1，122.9，127.6，128.7，128.8，128.9，129.2，135.1，140.4，142.2，151.4，161.3，163.9，170.4，170.9，171.2，172.0.MALDI-TOF m/z 821.60[(M+Na)+C45H58N4NaO9+的計(jì)算值821.41]。
實(shí)施例16 (S)-2-{[((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-叔丁氧羰基-丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-3-甲基丁酸甲酯(16)根據(jù)制備化合物14所述的方法使化合物12(24mg，44mmol)反應(yīng)，使用D-纈氨酸甲酯而不使用(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)環(huán)己基乙酸甲酯，從而給出為白色粉末的標(biāo)題化合物(27mg，97％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.82-0.99(m，9H)，[(1.42 & 1.44)s，9H]1.65-1.95(m，2H)，2.18-2.25(m，1H)，2.26-2.40(m，1H)，3.20-3.25(m，1H)，3.75(s，3H)，3.97(s，3H)，4.15-4.19(m，1H)，4.36-4.43(m，1H)，4.64-4.75(m，1H)，6.03-6.15(m，1H)，6.80-6.85(m，2H)，7.10-7.20(m，3H)，7.42-7.58(m，4H)，8.0-8.10(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ9.7，[18.2 & 19.1]，25.7，[28.1 & 28.2]，32.0，35.6，50.4，52.4，54.5，55.7，57.6，81.7，82.7，98.4，107.7，115.2，118.4，123.2，127.8，129.0，129.2，129.5，134.8，135.0，140.4，142.5，151.6，159.6，[161.1& 161.5]，164.6，171.1，172.2.MALDI-TOF m/z 682.51[(M+Na)+C37H45N3NaO8+的計(jì)算值682.31]。
實(shí)施例17 (S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[(2，5-二甲氧基-苯基)-乙基-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸叔丁酯(17)化合物17(28.6mg，59％)由化合物12(33mg，60mmol)根據(jù)制備化合物14所述的方法進(jìn)行制備，使用2-氨基-N-(2，5-二甲氧基-苯基)-N-乙基-3-甲基丁酰胺而不使用(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基乙酸甲酯。由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.75-0.95(m，9H)1.05-1.18(m，3H)，[(1.42 & 1.44)s，9H]，1.60-1.95(m，3H)，2.20-2.40(m，1H)，3.20-3.34(m，1H)，3.60-3.80(m，2H)，[3.62-3.65(m，3H)]，[3.79-3.82(m，3H)]，3.98(s，3H)，4.02-4-18(m，1H)，4.30-4.44(m，2H)，6.05-6.18(m，1H)，6.60-6.63(m，1H)，6.77-6.80(m，2H)，6.85-6.93(m，2H)，7.12-7.20(m，2H)，7.35-7.60(m，5H)，8.02-8.20(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ[9.6 & 9.7]，[12.5 & 12.8]，[17.1 & 17.5]，[19.4 &19.5]，25.6，[28.0 & 28.1]，32.4，35.8，43.0，44.3，[50.2 & 50.3]，54.3，[54.8& 55.0 & 55.2 & 55.5]，[55.6 & 55.7 & 55.9 & 56.0]，81.7，82.8，98.4，106.9，[112.4 & 112.5]，113.7，115.0，115.2，115.9，116.3，118.4，[123.0 &123.1]，[127.7 & 127.8]，128.8，128.9，129.5，130.1，[134.1 & 134.2]，142.6，149.1，149.4，153.4，158.9，[161.4 & 161.6]，[163.2 & 163.5]，170.9，[171.3& 171.5]，172.3.MALDI-TOF m/z 831.62[(M+Na)+C46H56N4NaO9+的計(jì)算值831.39]。
實(shí)施例18 (S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸叔丁酯(18)化合物18(16.1mg，26％)由化合物12(43.2mg，0.077mmol)根據(jù)制備化合物14所述的方法進(jìn)行制備，使用(2-氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基-乙酸甲酯而不使用(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基乙酸甲酯。在甲苯/乙酸乙酯3∶1而非6∶1中對其進(jìn)行快速柱層析，由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.77-0.83(m，3H)，[(0.92 & 0.93)s，9H]0.94-1.20(m，4H)，[(1.36 & 1.38)s，9H]，1.42-1.76(m，8H)，2.20-2.38(m，1H)，2.81-2.96(m，1H)，3.20-3.22(m，1H)，2.78(s，3H)，[(3.83 & 3.85)s，3H]，3.97-4.02(m，1H)，4.17-4.21(m，1H)，4.22-4.37(m，2H)，5.85-5.97(m，1H)，[6.76-6.78(m，0.5H)]，[6.80-6.82(m，0.5H)]，6.98-7.05(m，3H)，7.23-7.41(m，6H)，7.82-7.99(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ[9.4 & 9.5]，[25.4 & 25.5]，25.8，[26.5 &26.6]，[27.9 & 28.0]，[28.4 & 28.5]，29.3，[35.4 & 35.7]，[36.0 & 36.4]，[40.5 & 40.7]，[50.2 & 50.5]，[52.1 & 52.2]，[54.1 & 54.3]，55.5，[57.0 &57.3]，[60.4 & 60.7]，[81.8 & 82.0]，[82.4 & 82.5]98.1，107.5，115.0，118.1，123.0，127.5，128.7，128.8，129.2，134.9，135.8，141.9，142.5，151.3，159.4，[160.9 & 161.3]，[163.7 & 163.9]，[169.9 & 170.0][170.0 & 171.3]，[172.5& 172.4].MALDI-TOF m/z 835.68[(M+Na)+C46H60N4NaO9+的計(jì)算值835.43]。
實(shí)施例19 (S)-2-{[(1R，4R)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(19a)和(S)-2-{[(1S，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(19b)將酸11(0.051g，0.087mmo1)和(2-氨基-3-甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基乙酸甲酯(0.054g，0.21mmo1)溶于DMF(1.5mL)中，并且在冰浴中對其進(jìn)行冷卻。將DIPEA(16mg，0.12mmo1)和HATU(47mg，0.13mmo1)加入其中。兩個半小時之后使上述混合物與甲苯和甲醇共濃縮，然后通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯 3∶1)對其進(jìn)行純化。進(jìn)一步在HPLC(90％甲醇+0.2％TEA)上進(jìn)行純化。由此，在共濃縮之后，給出為淡黃色稠漿液的兩種非對映異構(gòu)體19a(9.4mg，13％)和19b(5.3mg，7％)。冷凍干燥之后收集為白色粉末的19a和19b。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86-0.93(m，3H)，0.94-1.00(m，6H)，1.00-1.41(m，7H)，1.46(s，9H)，1.50-1.88(m，8H)，2.05-2.20(m，1H)，2.20-2.37(m，1H)，3.12-3.25(m，1H)，3.73(s，3H)，3.97(s，3H)，4.05-4.20(m，1H)，4.40-4.55(m，3H)，6.02-6.18(m，1H)，6.30(d，J＝8.52Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.76(d，J＝8.51Hz，1H)，7.06-7.16(m，2H)，7.42-7.56(m，5H)，8.00-8.12(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.0，18.4，19.3，26.1，28.3，28.5，29.7，31.9，34.9，36.0，41.0，50.7，52.4，53.3，55.7，57.2，58.6，82.0，82.7，98.4，105.7，107.7，115.2，118.4，123.2，125.3，127.9，129.0，129.1，135.1，138.0，142.4，151.6，159.4，161.6，164.3，170.7，171.2，172.3.19b1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.90-1.04(m，9H)，1.04-1.43(m，7H)，1.47(s，9H)，1.50-1.87(m，8H)，2.10-2.27(m，1H)，2.33-2.45(m，1H)，3.10-3.20(m，1H)，3.73(s，3H)，3.96(s，3H)，4.02-4.10(m，1H)，4.36-4.53(m，3H)，6.00-6.16(m，1H)，6.30(d，J＝8.52Hz，1H)，6.73(s，1H)，6.86(d，J＝7.96Hz，1H)，7.08-7.16(m，2H)，7.36-7.56(m，5H)，8.03-8.11(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.0，18.6，19.2，26.1，28.2，28.7，29.7，34.5，36.1，36.6，40.8，50.5，52.4，53.4，55.7，57.3，59.1，64.8，82.3，98.4，105.8，107.8，115.3，118.4，123.2，127.8，129.0，129.4，135.2，142.2，144.9，151.0，151.6，159.2，164.3，164.3，170.2，171.6，171.9。
實(shí)施例20 (S)-2-{[(1R，4R)-2-{(R)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(20a)和(S)-2-{[(1S，4S)-2-{(R)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(20b)方法A將羧酸11(57mg，0.10mmol)溶于熱(50℃)的無水THF(2mL)中。將(2-氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基-乙酸甲酯(50mg，0.12mmol)、DIPEA(30mg，0.23mmol)、DCC(25mg，0.12mmol)和HOBt(17mg，13mmol)加入其中。兩小時之后對上述混合物進(jìn)行濃縮并且將其加入到短柱(甲苯/乙酸乙酯 1∶3+3％乙酸)中。然后，在HPLC上對其進(jìn)行進(jìn)一步純化，使用90％甲醇+0.2％TEA。未對非對映異構(gòu)體產(chǎn)品進(jìn)行分離。經(jīng)過HPLC之后，使所得溶液與甲苯和甲醇進(jìn)行共濃縮，從而給出化合物20(28mg，34％)。
方法B向化合物11(60mg，0.10mmol)和(2-氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基-乙酸甲酯(42mg，0.15mmol)的冰冷溶液中加入DIPEA(19mg，0.15mmol)和HATU(62mg，0.16mmol)。兩個半小時之后，對上述混合物進(jìn)行濃縮并且利用柱層析(甲苯/乙酸乙酯 3∶1)對其進(jìn)行純化。所得非對映異構(gòu)體混合物利用HPLC(90％甲醇+0.2％TEA)進(jìn)行分離。由此給出20a(6mg，6％)和20b(9mg，10％)。
20a1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.82-0.90(m，3H)，1.01(s，9H)，1.05-1.40(m，7H)，1.46(s，9H)，1.50-1.80(m，8H)，2.20-2.35(m，1H)，3.07-3.25(m，1H)，3.73(s，3H)，3.97(s，3H)，4.11(d，J＝7.96Hz，1H)，4.38-4.52(m，3H)，6.03-6.12(m，1H)，6.24(d，J＝8.79Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.82(d，J＝9.06Hz，1H)，7.07-7.27(m，2H)，7.36(d，J＝7.96Hz，1H)，7.41-7.55(m，4H)，8.01-8.10(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.0，18.8，26.1，26.8，28.2，28.6，29.6，34.9，35.6，36.2，40.9，50.7，52.4，53.3，55.7，57.3，60.8，82.0，82.7，98.4，105.2，107.7，115.2，118.4，123.2，127.9，129.0，129.4，131.1，135.1，138.4，142.4，153.3，159.6，161.6，164.2，170.1，171.3，172.2.20b1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.90-0.98(m，3H)，1.04(s，9H)，1.08-1.40(m，7H)，1.44(s，9H)，1.55-1.90(m，8H)，2.20-2.38(m，1H)，3.10-3.22(m，1H)，3.73(s，3H)，3.97(s，3H)，4.02-4.15(m，1H)，4.35-4.48(m，3H)，6.00-6.08(m，1H)，6.72(s，1H)，6.90(d，J＝9.06Hz，1H)，7.09-7.20(m，3H)，7.44-7.55(m，5H)，8.03-8.11(m，3H)。
實(shí)施例21 (1R，2S)-1-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸叔丁酯(21)將酸13(35mg，0.060mmol)和(2-氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基乙酸甲酯(22mg，0.080mmol)溶于無水THF(1.5mL)中，并且將其升溫至50℃。將HOBt(11mg，0.080mmol)和DCC(31mg，0.15mmol)加入其中。一小時后使上述混合物與甲苯和甲醇共濃縮，然后通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯 1∶1)對其進(jìn)行純化。在HPLC(80％甲醇+0.2％TEA)上對其進(jìn)行進(jìn)一步純化。對非對映體混合物21進(jìn)行濃縮，從而給出淡黃色油(26.4mg，53％)。對其進(jìn)行冷凍干燥之后，收集為白色粉末的化合物21。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ[(0.98 & 1.00)，s，9H]，1.01-1.38(m，5H)，[(1.39 & 1.40)s，9H]，1.52-1.63(m，4H)，1.65-1.80(m，4H)，1.90-2.05(m，1H)，2.20-2.40(m，1H)，3.02-3.20(m，1H)，[(3.66 &3.67)s，3H)，3.98(s，3H)，3.99-4.02(m，1H)，4.30-4.45(m，2H)，5.05-5.11(m，1H)，5.20-5.30(m，1H)，5.60-5.81(m，1H)，6.03-6.17(m，1H)，6.77-6.82(m，1H)，6.95-7.22(m，5H)，7.40-7.50(m，4H)，8.01-8.10(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ22.3，[25.7 & 25.8]，[26.4 &26.5]，[28.0 & 28.4]29.2，32.7，33.3，[35.3 & 35.4]，36.0，[40.2 & 40.3]，40.7，52.0，55.4，[57.2 & 57.4][60.4 & 60.5]，[87.6 & 87.7]，[82.3 & 82.5]，98.4，107.0，114.9，[117.4 & 117.5]，118.1，122.9，127.6，128.6，128.9，129.2，[133.6 & 133.8]，135.9，136.9，140.1，[141.4 & 141.6]，151.1，159.6，[160.9& 161.3]，[164.2 & 164.6]，168.9，170.3，[172.1 & 172.6].MALDI-TOFm/z 859.77[(M+Na)+C48H60N4NaO9+的計(jì)算值859.43]。
實(shí)施例22 (S)-2-{[(1R，4R)-2-{(R)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸(22a)和(S)-2-{[(1S，4S)-2-{(R)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸(22b)在圓底燒瓶中對叔丁酯20(28mg，0.034mmol)、TES(8.7mg，0.075mmol)、DCM(1mL)和TFA(1mL)進(jìn)行混合。兩小時之后將上述混合物濃縮，并且在利用65％甲醇+0.2％TEA作為流動相的HPLC上對所得非對映異構(gòu)體進(jìn)行分離。由此給出為淡黃色稠漿液的22a(15mg，55％)和22b(12mg，45％)。對其進(jìn)行冷凍干燥之后，收集為白色粉末的標(biāo)題化合物。
22a[α]22D+155.8；1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.90-0.97(m，3H)，1.03(s，9H)，1.05-1.50(m，7H)，1.50-1.80(m，8H)，2.43-2.55(m，1H)，2.77-2.90(m，1H)，3.68(s，3H)，3.96(s，3H)，4.20-4.30(m，2H)，4.31-4.40(m，1H)，4.45-4.50(m，1H)，6.03-6.11(m，1H)，6.98(s，1H)，7.12-7.19(m，1H)，7.36(s，1H)，7.41(d，J＝2.2Hz，1H)，7.50-7.60(m，3H)，8.03-8.10(m，3H)13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ13.1，19.1，26.1，28.7，28.9，29.5，34.3，34.8，35.9，40.1，50.8，51.2，54.8，55.0，57.9，60.7，83.5，99.1，106.0，115.2，118.2，123.3，127.8，128.0，128.7，128.8，129.7，135.2，139.8，143.7，150.6，160.1，162.2，165.2，171.7，172.2，173.4.22b[α]22D-72,3；1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.90-0.97(m，3H)，1.02(s，9H)，1.07-1.35(m，7H)，1.53-1.90(m，8H)，2.46-2.61(m，1H)，2.76-2.88(m，1H)，3.69(s，3H)，3.96(s，3H)，4.15-4.35(m，2H)，4.37-4.41(m，1H)，4.42-4.47(m，1H)，6.02-6.12(m，1H)，7.02(s，1H)，7.16(dd，J＝2.47，9.34Hz，1H)，7.32(s，1H)，7.40(d，J＝2.47Hz，1H)，7.48-7.58(m，3H)，8.03-8.12(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ13.0，18.8，25.9，26.0，28.8，29.4，34.2，34.8，36.3，39.9，48.8，50.5，51.1，54.8，57.9，60.5，82.8，99.0，106.0，115.1，118.2，123.1，127.8，127.9，128.7，129.0，129.5，136.7，139.8，142.8，150.6，160.1，162.0，162.2，164.7，172.1，173.5。
實(shí)施例23 (S)-2-{[(1R，4R)-2-{(R)-1-[((R)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸(23a)和(S)-2-{[(1S，4S)-2-{(R)-1-[((R)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲酰基}-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸(23b)化合物23a(6.6mg，50％)和化合物23b(1.3mg，10％)由化合物15(14mg，0.018mmol)根據(jù)制備化合物22a和22b的方法進(jìn)行制備。由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
23a1H-NMR(300MHz，CD3OD)0.88-1.02(m，9H)，1.02-1.40(m，7H)，1.55-1.97(m，6H)，2.01-2.10(m，1H)，2.38-2.52(m，1H)，2.88-3.00(m，1H)，3.77(s，3H)，3.98(s，3H)，4.08-4.20(m，1H)，4.22-4.40(m，3H).6.03-6.18(m，1H)，6.86-6.99(m，1H)，7.08-7.20(m，1H)，7.23(s，1H)，7.40-7.43(m，1H)，7.45-7.70(m，3H)，8.02-8.20(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ9.0，17.6，18.2，24.5，25.3，28.1，28.8，30.9，35.4，39.4，49.6，51.1，54.7，57.2，58.0，82.4，98.5，105.5，114.5，117.7，122.7，127.2，127.3，128.2，129.0，135.6，136.4，141.7，149.9，159.5，161.2，161.4，164.0，171.0，171.7，172.4.23b1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.9-1.20(m，9H)，1.21-1.53(m，7H)，1.55-1.93(m，6H)，2.05-2.20(m，1H)，2.41-2.50(m，1H)，2.96-3-05(m，1H)，3.77(s，3H)，4.00(s，3H)，4.05-4.40(m，4H)，6.05-6.18(m，1H)，6.90-6.95(m，1H)，7.05-7.22(m，2H)，7.50-7.65(m，4H)，8.01-8.16(m，3H)。
實(shí)施例24 (S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[((S)-羧基-環(huán)己基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸(24)在圓底燒瓶中對叔丁酯14(13.4mg，0.017mmol)、TES(4.83mg，0.042mmol)、DCM(2mL)和TFA(2mL)進(jìn)行混合。一小時之后將上述混合物濃縮，并且通過利用65％甲醇+0.2％TEA作為流動相的HPLC對其進(jìn)行純化。由此給出為淡黃色稠漿液的24(4.3mg，34％)。對其進(jìn)行冷凍干燥之后，收集為白色粉末的化合物24。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.91-0.99(m，9H)，1.00-1.28(m，4H)，1.55-1.78(m，9H)，1.92-1.95(m，1H)，2.00-2.05(m，1H)，2.93-3.01(m，1H)，3.75(s，3H)，3.97(s，3H)，4.10-4.40(m，4H)，6.05-6.15(m，1H)，6.88-6.94(m，1H)，7.05-7.10(m，2H)，7.41-7.43(m，1H)，7.44-7.55(m，2H)，8.62-8.68(m，1H)，8.69-8.79(m，1H)，7.97-8.05(m，2H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ9.2，18.5，25.5，[29.0 & 29.2]，[30.0 &30.5]，35.3，37.7，39.7，46.2，50.0，[51.4 & 51.5]，53.6，55.1，57.1，58.4，83.1，98.9，104.9，114.6，118.3，123.0，123.4，127.5，128.4，128.5，129.7，135.0，142.1，145.7，146.2，159.2，161.9，164.3，171.5，171.9，172.2.MALDI-TOF m/z 791.27[(M+K)+C42H48KN4O9+的計(jì)算值791.31]。
實(shí)施例25 (S)-2-{[((3R，5R)&(3S，5S))-5-((S)-1-羧基-丙基氨基甲?；?-3-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-3-甲基丁酸甲酯(25)化合物25(8.0mg，60％)由化合物16(13.8mg，0.022mmol)根據(jù)制備化合物24的方法進(jìn)行制備，由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.83-1.02(m，9H)，1.68-1.80(m，1H)，1.82-2.02(m，1H)，2.10-2.22(m，1H)，2.40-2.60(m，1H)，2.81-2.95(m，1H)，3.75(s，3H)，4.00(s，3H)，4.18-4.22(m，1H)，4.27-4.40(m，2H)，6.05-6.12(m，1H)，6.99-7.02(m，1H)，7.16-7.21(m，1H)，7.38(s，1H)，7.40-7.43(m，1H)，7.48-7.61(m，3H)，7.98-8.12(m，3H)。
實(shí)施例26
(S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[(2，5-二甲氧基-苯基)-乙基-氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸(26)化合物26(5.7mg，36％)由化合物17(16.7mg，0.021mmol)根據(jù)制備化合物24的方法進(jìn)行制備，由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.75-0.81(m，6H)，0.82-0.98(m，3H)，1.00-1.10(m，3H)，1.60-2.00(m，3H)，2.40-2.56(m，1H)，2.80-2.88(m，1H)，3.18-3.24(m，1H)，3.40-3.46(m，1H)，[3.67-3.80(m，6H)]，3.97(s，3H)，4.10-4.20(m，1H)，4.21-4.40(m，2H)，6.02-6.17(m，1H)，6.75-6.82(m，1H)，6.84-7.01(m，3H)，7.10-7.20(m，1H)，7.30-7.37(m，1H)，7.40-7.43(m，1H)，7.50-7.60(m，3H)，8.00-8.17(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ9.6，[11.8 & 12.0]，[17.2 & 17.4]，18.9，25.0，32.3，35.7，43.3，44.2，[50.3 & 50.5]，[54.5 & 54.8 & 54.9 & 55.0]，[55.1 & 55.2 & 55.3 & 56.0]，58.7，83.6，99.3，105.5，[112.5 & 112.7]，114.3，[15.1 & 115.2]，115.7，116.1，118.4，[123.3 & 123.4]，125.2，[128.0& 128.1，128.8，129.1，129.8，[135.1 & 135.3]，139.2，[143.3 & 144.4]，149.2，[149.6 & 149.9]，153.8，159.9，162.4，[163.9 & 164.5]，172.1，172.8，[173.6 & 173.7].MALDI-TOF m/z 775.30[(M+Na)+C42H48N4NaO9+的計(jì)算值775.33]。
實(shí)施例27
(S)-2-{[((1R，4R)&(1S，4S))-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲酰基}-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-丁酸(27)化合物27(6.0mg，72％)由化合物18(8.6mg，0.011mmol)根據(jù)制備化合物24的方法進(jìn)行制備。通過HPLC(60％甲醇+0.2％TEA)進(jìn)行純化，從而給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.88-0.95(m，3H)，0.96(s，9H)，0.97-1.24(m，4H)，1.57-1.62(m，3H)，1.58-1.78(m，4H)，1.79-1.99(m，1H)，2.35-2.44(m，2H)，2.85-2.98(m，1H)，[(3.67 & 3.69)s，3H]，3.94(s，3H)，4.10-4.20(m，1H)，4.30-4.40(m，3H)，6.00-6.09(m，1H)，[6.80-6.82(m，0.5H)][6.85-6.87(m，0.5H)]，7.05-7.19(m，2H)，7.38-7.55(m，4H)，7.95-8.07(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ[9.1 & 9.2]，[24.7 & 24.9]，[25.4 & 25.5]，[25.9 & 26.0]，[28.3 & 28.4]，28.9，[34.8 & 34.9]，[35.6 & 35.9]，[39.6 & 39.7]，[49.9 & 50.1]，[51.4 &51.2]，[53.9 & 54.0]55.0，[57.2 & 57.4]，60.0，[82.1 & 82.5]，98.6，106.2，114.7，117.8，122.7，127.5，127.7，[128.4 & 128.5]，129.1，135.3，136.3，141.6，142.0，150.5，159.8，[161.0 & 161.3][164.0 & 164.1]，[171.6 &171.9]，[172.2 & 172.3]，[173,0 & 173.2].MALDI-TOF m/z 779.43[(M+Na)+C42H52N4NaO9+的計(jì)算值779.36]。
實(shí)施例28
(S)-2-{[(1R，4R)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(28)將叔丁酯19a(7.6mg，0.0094mmol)和TES(2.4mg，0.021mmol)溶于DCM(1mL)中，并且在冰浴中對該混合物進(jìn)行冷卻。將TFA(1mL)加入其中。兩小時之后將上述混合物濃縮，并且在利用60％甲醇+0.2％TEA作為流動相的HPLC上對其進(jìn)行純化。由此給出為淡黃色稠漿液的28(6.1mg，86％)。對其進(jìn)行冷凍干燥之后，收集為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CD3OD+CDCl3(1∶1))δ0.90-1.00(m，9H)，1.00-1.30(m，7H)，1.50-1.90(m，8H)，2.00-2.10(m，1H)，2.40-2.50(m，1H)，2.85-2.98(m，1H)，3.65-3.72(s，3H)，3.99(s，3H)，4.15-4.22(m，1H)，4.24-4.35(m，2H)，4.38-4.44(m，1H)，6.10-6.20(m，1H)，6.95-6.96(m，1H)，7.16-7.23(m，1H)，7.31(s，1H)，7.42(d，J＝2.47Hz，1H)，7.53-7.72(m，3H)，7.97-8.16(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD+CDCl31∶1)δ13.5，18.3，19.0，26.0，29.0，29.7，31.0，34.1，35.8，40.2，51.9，55.9，57.7，58.9，63.5，68.4，84.0，99.6，104.8，105.7，115.1，119.0，123.7，128.1，128.9，129.1，130.4，131.3，135.3，138.0，142.9，159.5，162.8，164.8，172.2，172.2，172.4實(shí)施例29
(S)-2-{[(1S，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(29)化合物29(1.3mg，26％)由化合物19b(5.3mg，0.065mmol)根據(jù)制備化合物28的方法進(jìn)行制備。由此給出為白色粉末的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.85-1.00(m，9H)，1.00-1.23(m，7H)，1.50-1.78(m，8H)，2.05-2.23(m，1H)，2.50-2.66(m，1H)，2.70-2.85(m，1H)，3.69(s，3H)，3.92(s，3H)，4.02-4.16(m，1H)，4.20-4.25(m，1H)，4.35-4.40(m，2H)，6.09(m，1H)，7.00(s，1H)，7.12-7.18(dd，J＝2.47，2.19Hz，1H)，7.30(s，1H)，7.40(d，J＝2.42Hz，1H)，7.48-7.74(m，3H)，8.03-8.10(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ11.7，16.5，17.0，24.4，27.2，27.9，29.0，29.137.5，41.8，49.7，50.5，53.3，56.3，63.5，66.5，81.0，100.3，101.0，105.7，113.6，121.6，126.3，127.1，127.9，130.1，131.4，135.6，138.7，141.1，150.4，160.2，160.5，165.3，173.0，173.6，173.7實(shí)施例30
(1R，2S)-1-{[(1R，4R)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸(30a)和(1R，2S)-1-{[(1S，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊-2-烯羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸(30b)化合物30a(6.3mg，49％)和化合物30b(5.6mg，43％)由化合物21(13.8mg，0.0016mmol)根據(jù)制備化合物22a和22b的方法進(jìn)行合成。30a和30b白色粉末。
30a1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.02(s，9H)，1.03-1.43(m，5H)，1.61-1.95(m，8H)，2.11-2.21(m，1H)，2.43-2.58(m，1H)，2.97-3.04(m，1H)，3，78(s，3H)，4.01(s，3H)，4.02-4.17(m，1H)，4.25-4.40(m，2H)，5.10-5-20(m，1H)，5.27-5.40(m，1H)，6.77-6.94(m，1H)，6.10-6.20(m，1H)，6.97(s，1H)，7.18(dd，J＝2.5，9.2Hz，1H)，7.22(s，1H)，7.46(d，J＝2.5Hz，1H)，7.52-7.65(m，3H)，8.00-8.18(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ13.5，25.3，25.7，28.3，28.7，29.0，32.8，34.6，35.3，39.3，49.7，51.1，54.6，57.2，59.8，82.1，98.4，105.8，114.5，116.3，117.6，122.6，127.2，128.1，128.2，128.8，130.2，133.7，136.0，139.5，141.5，150.3，159.7，161.0，161.2，163，4，171.6，172.5.MALDI-TOF m/z 803.56[(M+Na)+C44H52N4NaO9+的計(jì)算值803.36].30b1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.03(s，9H)，1.04-1.42(m，5H)，2.60-2.90(m，8H)，2.17-2.22(m，1H)，2.40-2.55(m，1H)，2.96-3.10(m，1H)，3.77(s，3H)，4.01(s，3H)，4.05-4.16(m，1H)，4.30-4.40(m，2H)，5.15-5.20(m，1H)，5.25-5.40(m，1H)，5.78-5.95(m，1H)，6.10-6.20(m，1H)，6.98(s，1H)，7.17(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H)，7.26(s，1H)，7.46(d，J＝2.5Hz，1H)，7.50-7.65(m，3H)，8.03-8.28(m，3H).13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ13.7，26.0，26.3，28.8，29.4，29.6，34.0，35.2，35.8，40.1，50.6，51.7，55.3，57.8，60.6，83.0，99.1，106.3，115.2，117.0，118.3，123.2，127.9，128.0，128.8，129.6，130.6，134.4，136.1，140.0，142.5，150.8，160.3，161.8，162.0，165.7，172.3，173.0
實(shí)施例31 反式-(3R，4R)-二(甲氧羰基)環(huán)戊醇(31)在0℃下，將硼氫化鈉(1.11g，0.029mol)加入到攪拌的(1R，2S)-4-氧代-環(huán)戊烷1，2-二羧酸二甲酯(4.88g，0.0244mol)的甲醇(300mL)溶液中。1小時之后用90mL鹽水將反應(yīng)猝滅，濃縮并且用乙酸乙酯對其進(jìn)行提取。將有機(jī)相收集、干燥、過濾和濃縮。所得粗產(chǎn)品通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯 1∶1)進(jìn)行純化，從而給出為黃色油的化合物31(3.73g，76％)。
實(shí)施例32 3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酸(32)在室溫下，將氫氧化鈉(1M，74mL，0.074mol)加入到攪拌的化合物31(3.73g，0.018mol)的甲醇(105mL)溶液中。4小時之后，反應(yīng)混合物用3M HCl進(jìn)行中和，蒸發(fā)，以及與甲苯共蒸發(fā)若干次。將吡啶(75mL)和Ac2O(53mL)加入其中，并且在室溫下將反應(yīng)混合物振搖過夜。然后將所得混合物與甲苯共蒸發(fā)并且通過快速柱層析(乙酸乙酯+1％乙酸)進(jìn)行純化，從而給出為黃色油的化合物32(2.51g，88％)。
實(shí)施例33 3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酸叔丁酯(33)在惰性氬氣氛中，在0℃下，將DMAP(14mg，0.115mmol)和Boc2O(252mg，1.44mmol)加入到攪拌的化合物32(180mg，1.15mmol)的2mL CH2Cl2溶液中。將反應(yīng)升溫至室溫并且攪拌過夜。對反應(yīng)混合物進(jìn)行濃縮，并且所得粗產(chǎn)品通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯梯度15∶1，9∶1，6∶1，4∶1，2∶1)進(jìn)行純化，從而給出為白色晶體的化合物33(124mg，51％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.45(s，9H)，1.90(d，J＝11.0Hz，1H)，2.10-2.19(m，3H)，2.76-2.83(m，1H)，3.10(s，1H)，4.99(s，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ27.1，33.0，37.7，40.8，46.1，81.1，81.6，172.0，177.7。
實(shí)施例34 (1R，2R，4S)-2-((1R，2S)-1-乙氧羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基氨基甲?；?-4-羥基-環(huán)戊烷羧酸叔丁酯(34)將化合物33(56mg，0.264mmol)溶于二氧六環(huán)/水1∶1(5mL)中，并且將該混合物冷卻至0℃。將1M氫氧化鋰(0.52mL，0.520mmol)加入其中并且在0℃下對該混合物攪拌45分鐘，在此之后上述混合物用1M鹽酸進(jìn)行中和、蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。將所得殘余物溶于DMF(5mL)中，并且將(1R，2S)-1-氨基-2-乙烯基環(huán)丙烷羧酸乙酯鹽酸鹽(60mg，0.313mmol)和二異丙基乙胺(DIEA)(138□L，0.792mmol)加入其中和將該溶液冷卻至0℃。將HATU(120mg，0.316mmol)加入其中，在0℃下對該混合物攪拌0.5小時并且在室溫下再另外攪拌2小時。然后對上述混合物進(jìn)行蒸發(fā)并且用EtOAc進(jìn)行提取、用鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。通過快速柱層析(甲苯/EtOAc 1∶1)進(jìn)行純化，從而提供為無色油的化合物34(86mg，89％)。
實(shí)施例35
(1R，2R，4R)-2-((1R，2S)-1-乙氧羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基氨基甲?；?-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羧酸叔丁酯(35)將化合物34(73mg，0.199mmol)溶于無水THF(4mL)中，并且將2-苯基-7-甲氧基-4-喹啉醇(86mg，0.342mmol)和三苯基膦(141mg，0.538mmol)加入其中。將上述混合物冷卻至0℃，并且將溶于1mL THF的DIAD(0.567mmol)滴加加入其中。在室溫下將上述混合物攪拌48h。將溶劑蒸發(fā)以及所得粗產(chǎn)品通過快速柱層析梯度洗脫(甲苯/EtOAc 9∶1，6∶1，4∶1)進(jìn)行純化，從而給出化合物35(81mg，68％)。
實(shí)施例36 Boc-L-叔亮氨酸-OH(36)將三乙胺(890μL，6.40mmol)滴加加入至攪拌的L-叔亮氨酸(300mg，2.29mmol)和二碳酸二叔丁酯(599mg，2.74mmol)的二氧六環(huán)/水1∶1(8mL)溶液中，并且將該溶液攪拌過夜。用石油醚(2×)對上述混合進(jìn)行提取，將水相冷卻至0℃并且通過緩慢加入4MNaHSO4·H2O小心地將其酸化至pH值為3。用EtOAc(3×)對酸化的水相進(jìn)行提取，合并的有機(jī)相用鹽水(2×)進(jìn)行洗滌，然后將其干燥、過濾和濃縮，從而給出為無色粉末的化合物36(522mg，99％)。不需要進(jìn)行進(jìn)一步純化。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.99(s，9H)，1.44(s，9H)，3.96(s，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ27.1，28.7，34.9，68.0，80.5，157.8，174.7。
實(shí)施例37 ((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲酸叔丁酯(37)利用與化合物34合成中相同的HATU偶聯(lián)條件，將Boc-Chg-OH(387mg，1.50mmol)偶聯(lián)至鹽酸甲胺(111mg，1.65mmol)上。所得粗產(chǎn)品用EtOAc提取、用鹽水洗滌并且進(jìn)行濃縮。通過快速柱層析(EtOAc)進(jìn)行純化，從而提供為無色固體的化合物37(307mg，76％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.91-1.13(m，2H)，1.14-1.31(m，3H)，1.44(s，9H)，1.61-1.80(m，6H)，2.80(d，J＝4.7Hz，3H)，3.91(dd，J＝7.1，9.1Hz，1H)，5.23(b，1H)，6.52(bs，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ25.9，26.0，26.1，28.3，28.5，29.6，40.5，59.5，79.7，155.9，172.4。
實(shí)施例38 {(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(38)向化合物37(98mg，0.362mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三乙基硅烷(115mL，0.742mmol)和TFA(3mL)。在室溫下將上述混合物攪拌2h，然后將其蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。將去保護(hù)的胺溶于DMF(5mL)中，并且利用與化合物34合成中相同的HATU偶聯(lián)條件將其偶聯(lián)至化合物36(84mg，0.363mmol)上。所得粗產(chǎn)品用EtOAc提取、用鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。通過快速柱層析(甲苯/EtOAc 1∶1)進(jìn)行純化，從而提供為無色固體的化合物38(128mg，92％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.99(s，9H)，1.02-1.30(m，5H)，1.44(s，9H)，1.58-1.77(m，4H)，1.78-1.89(m，2H)，2.79(d，J＝4.7Hz，3H)，4.11(d，J＝9.3Hz，1H)，4.33(app.t，J＝8.5Hz，1H)，5.65(b，1H)，7.25(b，1H)，7.39(b，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ25.9，25.9，26.0，26.2，26.8，28.4，29.0，29.7，34.5，39.7，58.4，62.4，79.4，156.0，171.4，171.8。
實(shí)施例39 (1R，2S)-1-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲酰基-甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲酰基}-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(39)向化合物35(30mg，0.050mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中加入三乙基硅烷(21□L，0.132mmol)和TFA(1.5mL)。在室溫下將上述混合物攪拌2h，然后將其蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。利用與化合物相同的方式對胺38(1.3當(dāng)量)進(jìn)行去保護(hù)，然后利用與化合物34合成中相同的HATU偶聯(lián)條件將其偶聯(lián)至去保護(hù)的化合物35上。所得粗產(chǎn)品用EtOAc提取、用鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。利用HPLC(MeOH/水 9∶1+0.2％三乙胺)進(jìn)行純化，從而得到為無色固體的化合物39(30mg，74％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.81-1.14(m，4H)，0.99(s，重疊峰，9H)，1.21(t，J＝7.1Hz，3H)，1.35-1.51(m，4H)，1.52-1.65(m，3H)，1.66-1.72(m，2H)，2.03-2.20(m，2H)，2.24-2.39(m，1H)，2.46-2.56(m，1H)，2.66(s，3H)，2.72-2.85(m，1H)，3.39-3.48(m，2H)，3.90(s，3H)，4.03-4.15(m，3H)，4.44(s，1H)，5.09(dd，J＝1.9，10.3Hz，1H)，5.19-5.27(m，1H)，5.25(dd，重疊峰，1H)，5.79(ddd，J＝8.8，10.3，17.2Hz，1H)，6.99(s，1H)，7.07(dd，J＝2.5，9.1，Hz，1H)，7.29(d，J＝2.5Hz，1H)，7.43-7.52(m，3H)，7.86-7.98(m，2H)，8.05(d，J＝9.3Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.7，23.4，26.0，26.9，27.1，27.3，30.1，30.7，35.0，35.4，38.3，38.8，40.9，41.0，47.9，55.9，59.6，62.0，62.4，79.8，99.9，107.3，116.4，118.0，119.1，124.4，128.9，129.8，130.5，135.3，141.3，152.1，161.1，162.4，163.0，171.6，172.5，173.7，175.2，176.8.Maldi-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值810.4，測定值810.5；(M+Na)+計(jì)算值832.4，測定值832.4；(M+K)+計(jì)算值848.5，測定值848.4。
實(shí)施例40 (1R，2S)-1-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸(40)向0℃的化合物39(20mg，0.025mmol)的THF/MeOH/水2∶1∶1(2mL)溶液中加入1M LiOH(175μL，0.175mmol)，使該溶液升溫至室溫并且將其攪拌48h。用1M HCl將上述溶液酸化至pH值為3，然后將其蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)品通過HPLC(MeOH/水6∶4+0.5％TFA，隨后MeOH/水4∶1+0.2％TFA)進(jìn)行純化，從而給出為無色固體的化合物40(13mg，67％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.82-0.98(m，1H)，1.01(s，9H)，1.05-1.26(m，3H)，1.34-1.43(m，1H)，1.49-1.77(m，8H)，2.10-2.21(m，1H)，2.28-2.42(m，2H)，2.50-2.61(m，1H)，2.64(s，3H)，2.68-2.81(m，1H)，3.36-3.45(m，2H)，4.04-4.11(m，1H)，4.06(s，重疊峰，3H)，4.27(d，J＝8.8Hz，1H)，5.10(dd，J＝1.8，10.3Hz，1H)，5.28(dd，J＝1.8，17.2Hz，1H)，5.59-5.68(m，1H)，5.82(ddd，J＝9.1，10.3，17.2Hz，1H)，7.44(dd，J＝2.5，11.8Hz，1H)，7.50(s，1H)，7.53(d，J＝2.5Hz，1H)，7.69-7.78(m，3H)，8.02-8.07(m，2H)，8.39(d，J＝9.3Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ23.5，26.0，26.9，27.2，27.3，30.0，30.7，34.7，35.3，37.0，38.7，41.0，41.3，47.4，56.9，59.4，62.7，83.9，100.4，102.2，116.2，117.7，121.7，126.7，129.8，130.8，133.4，133.9，135.6，143.5，158.0，166.6，168.6，172.5，173.4，173.6，175.4，176.4.Maldi-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值782.4，測定值782.2；(M+Na)+計(jì)算值804.4，測定值804.2；(M+K)+計(jì)算值820.5，測定值820.2。
實(shí)施例41 3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酸甲酯(41)將化合物32(1.014g，6.50mmol)溶于丙酮(35mL)中，然后將碘甲烷(13.68g，96.4mmol)和氧化銀(I)(1.61g，6.95mmol)加入其中。攪拌3小時之后，將所得混合物經(jīng)硅藻土過濾并且對濾液進(jìn)行蒸發(fā)，隨后通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯4∶1)對其進(jìn)行純化，從而得到為白色晶體的甲酯41(702mg，64％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.96(d，J＝10.7Hz，1H)，2.21-2.25(m，3H)，2.91-2.95(m，1H)，3.16(s，1H)，3.75(s，3H)，4.98(app.s，1H)。
實(shí)施例42
(1R，2R，4S)-2-((S)-1-叔丁氧羰基-丁基氨基甲?；?-4-羥基-環(huán)戊烷羧酸甲酯(42)將化合物41(263mg，1.55mmol)和H-Nva-OtBu(420mg，2.42mmol)溶于無水THF(20mL)中。將DIEA(530μL，3.04mmol)和2-羥基吡啶(260mg，2.73mmol)加入其中，將該混合物回流五天。將溶劑蒸發(fā)以及所得粗產(chǎn)品通過快速柱層析(甲苯/EtOAc 1∶2)進(jìn)行純化，從而給出42(510mg，96％)。
實(shí)施例43 (1R，2R，4R)-2-((S)-1-叔丁氧羰基-丁基氨基甲?；?-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羧酸甲酯(43)將化合物42(249mg，0.725mmol)、2-苯基-7-甲氧基-4-喹啉醇(310mg，1.23mmol)和PPh3(580mg，2.21mmol)溶于無水THF中，并且將其溫度降低至0℃。將溶于2mL無水THF中的DIAD(435μL，2.21mmol)在5分鐘時間內(nèi)加入到上述混合物中。兩小時之后將溫度升高至室溫并且將該溶液攪拌過夜。隨后對其進(jìn)行蒸發(fā)并且通過快速柱層析(甲苯/EtOAc梯度6∶1～4∶1)對其進(jìn)行純化，給出化合物43(324mg，78％)。
實(shí)施例44 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(44)將化合物43(38mg，0.066mmol)溶于二氧六環(huán)/水1∶1(4mL)中并且將該溶液冷卻至0℃，將1M LiOH(132μl，0.132mmol)加入其中。將溫度升高至室溫，將此溶液攪拌2小時，在此之后通過加入1M HCl對其進(jìn)行中和，隨后將其蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。將所得殘余物和去保護(hù)的胺38(1.1當(dāng)量)溶于DMF中，并且利用如化合物34合成中所用的標(biāo)準(zhǔn)HATU偶聯(lián)條件使它們偶聯(lián)。所得粗產(chǎn)品用EtOAc提取、用鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。用HPLC(MeOH/水9∶1+0.2％TEA)進(jìn)行純化，從而得到為無色固體的化合物44(44mg，81％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體(5∶1)δ0.79(t，J＝7.3Hz，3H)，0.85-1.19(m，3H)，0.93(s，重疊峰，9H)，1.20-1.35(m，2H)，1.39(s，1.5H)，1.43(s，7.5H)，1.54-1.79(m，6H)，2.06-2.28(m，3H)，2.39-2.51(m，2H)，2.66-2.78(m，1H)，2.74(d，重疊峰，J＝4.7Hz，3H)，3.42-3.68(m，2H)，3.84(s，2.5H)，3.88(s，0.5H)，4.19(t，J＝8.9Hz，1H)，4.39-4.59(m，1H)，4.68(d，J＝9.6Hz，1H)，5.04-5.14(m，1H)，6.77(s，1H)，6.88-7.06(m，2H)，7.26-7.47(m，6H)，7.53(b，1H)，7.85-7.97(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ13.7，18.7，25.6，25.7，26.0，26.7，28.0，28.9，29，7，34.5，34.7，37.7，38.0，39.2，46.6，47.7，52.7，55.3，58.5，60.3，77.9，81.7，98.0，107.4，115.0，117.9，122.8，127.4，128.6，129.0，140.2，151.2，158.9，160.6，161.1，170.9，171.6，171.8，172.7，173.3.Maldi-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值828.5，測定值828.6；(M+Na)+計(jì)算值850.5，測定值850.6；(M+K)+計(jì)算值866.6，測定值866.6。
實(shí)施例45 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基氨基甲酰基}-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-戊酸(45)將化合物44(21mg，0.025mmol)溶于CH2Cl2(1.5mL)中，并且將三乙基硅烷(10μL，0.063mmol)和TFA(1.5mL)加入其中。在室溫下將此溶液攪拌2小時，在此之后將溶劑蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)，從而產(chǎn)生為無色固體的化合物45(20mg，100％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.93(t，重疊峰，3H)，0.98(s，9H)，0.99-1.25(m，4H)，1.30-1.49(m，3H)，1.50-1.90(m，8H)，2.25-2.39(m，2H)，2.54-2.62(m，1H)，2.64(s，3H)，2.72-2.87(m，1H)，3.34-3.57(m，3H)，4.02-4.13(m，1H)，4.06(s，重疊峰，3H)，4.27-4.36(m，1H)，4.37-4.47(m，1H)，5.57-5.66(m，1H)，7.45(dd，J＝2.3，9.2Hz，1H)，7.48(s，1H)，7.54(d，J＝2.2Hz，1H)，7.69-7.79(m，3H)，8.01-8.07(m，2H)，8.42(d，J＝9.3Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.0，20.2，26.0，26.9，27.2，30.1，30.7，34.6，35.3，37.2，39.1，41.2，47.7，53.7，56.9，59.4，59.5，62.5，83.7，100.4，101.3，102.2，116.2，121.7，126.7，129.8，130.8，133.3，133.9，143.5，157.9，166.6，168.5，172.5，173.6，175.3，175.4，175.5。
Maldi-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值772.4，測定值772.6；(M+Na)+計(jì)算值794.4，測定值794.6；(M+K)+計(jì)算值810.5，測定值810.6。
實(shí)施例46 庚-6-烯醛(46)向庚-6-烯-1-醇(1mL，7.44mmol)和N-甲基嗎啉N-氧化物(1.308g，11.17mmol)DCM(17mL)溶液中加入研磨分子篩(3.5g，4)。在氮?dú)鈿夥罩?，在室溫下將此混合物攪?0分鐘，隨后將過鐐酸四丙基銨(TPAP)(131mg，0.37mmol)加入其中。再繼續(xù)攪拌2.5小時后將此溶液經(jīng)硅藻土過濾。然后將溶劑小心地蒸發(fā)并且使剩余液體通過快色柱層析(DCM)進(jìn)行純化，從而給出為油的揮發(fā)性醛46(620mg，74％)。
實(shí)施例47 N′-庚-6-烯-(E)-亞基-肼羧酸叔丁酯(47)向化合物46(68mg，0.610mmol)和肼基甲酸叔丁酯(81mg，0.613mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入研磨分子篩(115mg，3)。將此混合物攪拌3小時，在此之后將其經(jīng)硅藻土過濾并且進(jìn)行蒸發(fā)。將所得殘余物溶于無水THF(3mL)和AcOH(3mL)中。將NaBH3CN(95mg，1.51mmol)加入其中并且將該溶液攪拌過夜。用飽和NaHCO3溶液(6mL)和EtOAc(6mL)對反應(yīng)混合物進(jìn)行稀釋。所得有機(jī)相用鹽水、飽和NaHCO3、鹽水洗滌，用MgSO4干燥并進(jìn)行蒸發(fā)。通過用甲醇(3mL)和2M NaOH(1.9mL)處理使氰基硼烷加合物水解。將此混合物攪拌2小時以及將甲醇蒸發(fā)。將H2O(5mL)和DCM(5mL)加入其中，并且水相用DCM提取三次。對合并的有機(jī)相進(jìn)行干燥和蒸發(fā)。通過快速柱層析(含有1％三乙胺的甲苯/乙酸乙酯9∶1和含有1％三乙胺的甲苯/乙酸乙酯6∶1)進(jìn)行純化，從而產(chǎn)生為油的化合物47(85mg，61％)。
實(shí)施例48 (1R，2S)-1-{[(1R，2R，4R)-2-(N′-叔丁氧羰基-N-庚-6-烯基-肼基羰基)-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(48)將腳手架分子35(135mg，0.225mmol)和三乙基硅烷(71μL，0.447mmol)溶于DCM(2mL)中，在此之后將三氟乙酸(TFA)(2mL)加入其中。將上述混合物攪拌2h，然后將其與甲苯共蒸發(fā)以除去TFA。將所得殘余物溶于DMF(3mL)中，并且將化合物47(60mg，0.263mmol)和DIEA(118μL，0.677mmol)加入其中。將其溫度降低至0℃，并且將偶聯(lián)試劑O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)(94mg，0.247mmol)加入其中。將此冷溶液攪拌半小時，然后在室溫下再將其另外攪拌16小時。在減壓下，通過在水浴中加熱反應(yīng)燒瓶將溶劑除去。此后，將所得殘余物溶于乙酸乙酯中，并且有機(jī)層用鹽水洗滌三次、干燥、過濾并進(jìn)行蒸發(fā)。通過HPLC(含0.2％三乙胺的甲醇/H2O 90∶10)進(jìn)行純化，給出為油的化合物48(140mg，82％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3，40℃)δ1.22(t，J＝7.1Hz，3H)，1.28-1.42(m，6H)，1.46(s，9H)，1.52-1.62(m，2H)，1.82-1.91(m，1H)，1.96-2.16(m，3H)，2.18-2.34(m，2H)，2.42-2.56(m，1H)，2.58-2.72(m，1H)，3.42(app.bs，3H)，3.66-3.84(m，1H)，3.92(s，3H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，4.88-5.02(m，2H)，5.07-5.18(m，2H)，5.20-5.32(m，1H)，5.63-5.84(m，2H)，6.62(bs，1H)，6.94(s，1H)，7.09(dd，J＝2.6，9.2Hz，1H)，7.36-7.51(m，4H)，7.99-8.10(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ14.3，23.0，26.4，26.6，28.3，28.6，33.2，33.5，35.6，37.6，40.6，44.7，47.1，48.6，55.5，61.5，81.9，98.4，107.9，114.5，115.6，118.1，123.2，127.6，128.3，128.7，129.1，133.5，138.7，140.7，151.5，154.5，159.2，160.9，161.5，170.5，174.2，176.3.
實(shí)施例49 (Z)-(1R，4R，6S，16R，18R)-14-叔丁氧羰基氨基-18-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，15-二氧代-3，14-二氮雜-三環(huán)[14.3.0.04，6]十九碳-7-烯-4-羧酸乙酯(49)向化合物48(158mg，0.209mmol)的無水DCM(25mL)溶液鼓泡氬氣5分鐘。然后，在氬氣氣氛中，向此攪拌溶液中加入Hoveyda-Grubbs催化劑第二代(11mg，0.018mmol)的無水DCM(5mL)溶液。在氬氣氛下將此混合物在回流下攪拌16小時。將溶劑蒸發(fā)并且通過HPLC(含有0.2％三乙胺的甲醇/H2O 90∶10)對其進(jìn)行純化，得到為無色固體的化合物49(107mg，70％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.03-1.22(m，1H)，1.28(t，J＝7.1Hz，3H)，1.32-1.44(m，4H)，1.49(s，9H)，1.55-1.73(m，2H)，1.81-1.91(m，1H)，2.04-2.28(m，3H)，2.30-2.52(m，3H)，2.53-2.70(m，1H)，2.86-3.00(m，1H)，3.34-3.44(m，1H)，3.46-3.62(m，1H)，3.95(s，3H)，4.19(q，J＝7.1Hz，2H)，4.32-4.48(m，1H)，5.20-5.33(m，1H)，5.34(bs，1H)，5.58-5.70(m，1H)，7.10(s，1H)，7.14(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H)，7.39(d，J＝2.5Hz，1H)，7.45-7.55(m，3H)，8.00(d，J＝8.0Hz，2H)，8.17(d，J＝9.3Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ14.6，23.4，27.5，27.7，28.0，28.5，30.7，36.1，38.1，42.5，45.6，56.0，62.7，79.9，82.8，100.2，107.4，116.6，119.1，124.5，126.5，128.9，129.8，130.5，135.8，141.5，152.2，156.4，161.3，162.5，163.1，171.9，175.8，179.0.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值727.4，測定值727.5.
實(shí)施例50 (Z)-(1R，4R，6S，16R，18R)-14-叔丁氧羰基氨基-18-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，15-二氧代-3，14-二氮雜-三環(huán)[14.3.0.04，6]十九碳-7-烯-4-羧酸(50)向化合物49(27mg，0.037mmol)的THF/MeOH/H2O 2∶1∶1(5mL)溶液中加入1M LiOH(300μL，0.300mmol)。將此溶液在室溫下攪拌24小時，最后在回流下攪拌1小時。用1M HCl將其酸化至pH 3～4并且進(jìn)行蒸發(fā)后，所得殘余物通過HPLC(MeOH/H2O 80∶20和MeOH/H2O 90∶10)進(jìn)行純化，產(chǎn)生為無色固體的化合物50(12mg，46％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.06-1.24(m，1H)，1.26-1.42(m，3H)，1.48(s，9H)，1.52-1.73(m，3H)，1.80-1.90(m，1H)，2.02-2.15(m，1H)，2.15-2.40(m，4H)，2.43-2.54(m，1H)，2.54-2.68(m，1H)，2.88-3.00(m，1H)，3.35-3.48(m，1H)，3.49-3.66(m，1H)，3.96(s，3H)，4.32-4.48(m，1H)，5.25-5.42(m，2H)，5.56-5.68(m，1H)，7.14(s，1H)，7.17(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H)，7.40(d，J＝2.2Hz，1H)，7.46-7.58(m，3H)，8.00(d，J＝8.0Hz，2H)，8.19(d，J＝9.1Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ23.6，26.8，27.8，28.3，28.5，30.5，35.8，38.1，43.0，45.5，56.0，80.2，82.7，100.4，106.9，116.6，119.2，124.7，127.4，129.0，129.8，130.7，134.8，140.9，151.6，156.5，161.1，163.0，163.4，173.8，175.7，179.3.
實(shí)施例51 ((S)-1-環(huán)戊基氨基甲?；?2，2-二甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(51)向化合物36(133mg，0.575mmol)、環(huán)戊基胺(64μL，0.648mmol)和DIEA(301μL，1.73mmol)的DMF(3mL)冷溶液中加入偶聯(lián)試劑HATU(240mg，0.631mmol)。將此混合物攪拌半小時，然后在室溫下再繼續(xù)攪拌兩小時。在減壓下，通過在水浴中加熱反應(yīng)燒瓶將溶劑除去，將殘余物溶于乙酸乙酯中，在此之后有機(jī)相用鹽水洗滌三次、干燥、過濾和蒸發(fā)。通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯4∶1)進(jìn)行純化，從而產(chǎn)生為無色晶體的51(140mg，82％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.95(s，9H)，1.28-1.48(m，重疊峰，2H)，1.40(s，9H)，1.49-1.71(m，4H)，1.86-2.01(m，2H)，3.76(b，1H)，4.09-4.23(m，1H)，5.32(b，1H)，5.91(b，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ23.6，23.7，26.5，28.3，32.6，33.1，34.5，51.0，62.2，79.4，155.9，170.3.
實(shí)施例52
(1R，2S)-1-{[(1R，2R，4S)-2-((S)-1-環(huán)戊基氨基甲酰基-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；?-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(52)根據(jù)制備化合物39的方法對化合物51(298mg，0.048mmol)和35(16mg，0.054mmol)進(jìn)行去保護(hù)和偶聯(lián)。通過HPLC(含0.2％三乙胺的甲醇/H2O 90∶10)進(jìn)行純化，給出為無色固體的化合物52(22mg，63％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ0.97(s，9H)，1.21(t，J＝7.1Hz，3H)，1.26-1.37(m，1H)，1.38-1.46(m，2H)，1.48-1.58(m，4H)，1.78-1.85(m，1H)，1.86-2.02(m，3H)，2.03-2.19(m，1H)，2.28-2.40(m，2H)，2.41-2.54(m，1H)，2.64-2.78(m，1H)，3.10-3.24(m，1H)，3.30-3.44(m，1H)，3.95(s，3H)，4.04-4.21(m，3H)，5.12(dd，J＝1.7，10.3Hz，1H)，5.14-5.22(m，1H)，5.28(dd，J＝1.7，17.0Hz，1H)，5.59(b，1H)，5.75(ddd，J＝8.8，10.3，17.0Hz，1H)，6.66-6.82(m，2H)，6.99(s，1H)，7.09(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H)，7.41-7.55(m，4H)，7.99-8.09(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ14.3，22.9，23.6，23.6，26.7，32.7，33.2，33.7，34.8，35.9，36.6，40.2，46.4，47.5，51.3，55.5，61.1，61.4，78.0，98.4，107.1，115.2，117.9，118.2，123.1，127.6，128.8，129.3，133.5，159.1，161.4，169.4，169.9，173.1，174.0.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值725.4，測定值725.6；(M+Na)+計(jì)算值747.4，測定值747.6；(M+K)+計(jì)算值763.3，測定值763.5。
實(shí)施例53
(1R，2S)-1-{[(1R，2R，4S)-2-((S)-1-環(huán)戊基氨基甲?；?2，2-二甲基-丙基氨基甲?；?-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸(53)向化合物52(14mg，0.019mmol)的二氧六環(huán)/H2O 1∶1(4mL)溶液中加入1M LiOH(115μL，0.115mmol)。在室溫下將上述溶液攪拌24h。此后，將另外-份LiOH(75μL，0.075mmol)加入其中并且將該溶液再攪拌24h。用1M HCl將其酸化至pH值大約為3并且與甲苯進(jìn)行共蒸發(fā)后，所得殘余物通過HPLC(MeOH/H2O70∶30，含有0.2％TFA)進(jìn)行純化，得到為無色固體的化合物53(8mg，60％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.98(s，9H)，1.28-1.48(m，3H)，1.49-1.76(m，5H)，1.78-1.94(m，2H)，2.10-2.24(m，1H)，2.26-2.45(m，2H)，2.50-2.62(m，1H)，2.66-2.79(m，1H)，3.35-3.48(m，2H)，3.94-4.03(m，1H)，4.06(s，3H)，4.16-4.24(m，1H)，5.10(dd，J＝1.8，10.3Hz，1H)，5.29(dd，J＝1.8，17.2Hz，1H)，5.62(b，1H)，5.82(ddd，J＝9.1，10.3，17.2Hz，1H)，7.43(dd，J＝2.5，9.3Hz，1H)，7.50(s，1H)，7.50-7.69(dd，重疊峰，1H)，7.67-7.80(m，3H)，8.01-8.11(m，2H)，8.39(d，J＝9.3Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ24.7，24.7，27.3，33.1，33.6，34.7，35.4，36.9，38.7，41.0，47.4，52.3，56.9，62.3，83.9，100.4，102.3，116.2，117.7，121.6，126.7，129.8，130.8，133.4，133.8，135.6，143.5，158.0，166.5，168.6，171.9，173.4，175.2，176.4.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值697.4，測定值697.3；(M+Na)+計(jì)算值718.7，測定值719.3；(M+K)+計(jì)算值735.3，測定值735.3。
實(shí)施例54
(S)-叔丁氧羰基氨基-環(huán)己基-乙酸甲酯(54)向Boc-Chg-OH(53mg，0.206mmol)的丙酮(3mL)溶液中加入碘甲烷(195μL，3.1mmol)和氧化銀(I)(53mg，0.229mmol)。在覆蓋有鋁箔的反應(yīng)燒瓶中將此混合物攪拌過夜。此后將該溶液經(jīng)硅藻土過濾并進(jìn)行蒸發(fā)。通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯15∶1)進(jìn)行純化，從而產(chǎn)生為無色油的甲酯54(56mg，100％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.00-1.34(m，5H)，1.44(s，9H)，1.54-1.82(m，6H)，3.73(s，3H)，4.20(dd，J＝2.8，5.0Hz，1H)，5.05(bs，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ26.0，28.2，28.3，29.5，41.1，52.0，58.3，79.7，155.6，172.9.
實(shí)施例55 (S)-((S)-2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基-乙酸甲酯(55)對化合物54(93mg，0.343mmol)進(jìn)行去保護(hù)并根據(jù)制備化合物39的方法將其偶聯(lián)至Z-Val-OH(95mg，0.378mmol)上。通過快速柱層析(甲苯/乙酸乙酯4∶1)，給出為無色固體的化合物55(131mg，94％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.92-1.30(m，11H)，1.54-1.88(m，6H)，2.02-2.18(m，1H)，3.72(s，3H)，4.05-4.18(m，1H)，4.52(dd，J＝3.0，5.5Hz，1H)，5.12(s，2H)，5.49(bs，1H)，6.52(bs，1H)，7.34(s，5H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ17.8，19.0，25.8，28.2，29.3，31.2，40.5，51.9，56.8，60.0，66.8，127.7，127.9，128.1，128.3，136.2，156.3，171.3，172.2.
實(shí)施例56 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-戊酸叔丁酯(56)向化合物55(40mg，0.099mmol)的乙醇(95％)(7.5mL)溶液中加入在活性炭上的鈀(10％，40mg)，并且在室溫下在壓力下對該混合物氫化2h。將該混合物經(jīng)硅藻土過濾并進(jìn)行蒸發(fā)。將化合物43(38mg，0.083mmol)溶于二氧六環(huán)/H2O 1∶1(3mL)中，并且將該混合物冷卻至0℃，此后將1M LiOH(140μL，0.140mmol)加入到攪拌的上述溶液中。1小時之后混合物用1M鹽酸進(jìn)行中和，將溶劑蒸發(fā)以及與甲苯共蒸發(fā)。所得殘余物利用與合成化合物48中相同的HATU偶聯(lián)條件偶聯(lián)到去保護(hù)的55上。通過HPLC(含0.2％三乙胺的甲醇/H2O 90∶10)進(jìn)行純化，給出為無色固體的化合物56(56mg，88％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.82-0.96(m，9H)，0.82-1.22(m，重疊峰，6H)，1.23-1.40(m，2H)，1.44(s，9H)，1.50-1.69(m，4H)，1.71-1.87(m，2H)，1.95-2.06(m，1H)，2.07-2.22(m，1H)，2.28-2.54(m，3H)，2.60-2.75(m，1H)，3.08-3.28(m，1H)，3.30-3.49(m，1H)，3.70(s，3H)，3.94(s，3H)，4.28-4.38(m，1H)，4.41-4.57(m，2H)，5.17(b，1H)，6.54-6.70(m，2H)，6.74(b，1H)，6.95(s，1H)，7.09(dd，J＝2.5，9.1Hz，1H)，7.39-7.55(m，5H)，7.98-8.10(m，3H)；13C-NMR(75.5MHz，CDCl3)δ13.7，18.1，18.6，19.2，25.9，28.0，28.2，29.6，30.7，34.6，36.5，37.6，40.8，47.4，47.5，52.1，52.8，55.5，56.8，58.9，77.8，82.0，98.3，107.5，115.3，118.1，123.1，127.5，128.7，129.1，140.5，151.4，159.2，160.7，161.3，171.0，171.5，172.3，172.8，173.0.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值815.5，測定值815.7；(M+Na)+計(jì)算值837.4，測定值837.6；(M+K)+計(jì)算值853.4，測定值853.6。
實(shí)施例57 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-戊酸(57)將叔丁酯56(28mg，0.034mmol)和三乙基硅烷(14μL，0.088mmol)溶于DCM(2mL)中，在此之后將三氟乙酸(2mL)加入其中并且將該混合物攪拌2h。與甲苯共蒸發(fā)，從而給出為無色固體的57(26mg，100％)。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.86-1.00(m，9H)，1.01-1.24(m，4H)，1.36-1.46(m，2H)，1.48-1.75(m，8H)，1.70-1.89(m，重疊峰，1H)，1.96-2.12(m，1H)，2.22-2.40(m，重疊峰，2H)，2.49-2.64(m，1H)，2.72-2.91(m，1H)，3.26-3.40(m，重疊峰，1H)，3.50-3.68(m，重疊峰，1H)，3.62(s，3H)，4.05(s，3H)，4.09-4.17(m，1H)，4.17-4.25(m，1H)，4.35-4.45(m，1H)，5.62(b，1H)，7.44(dd，J＝2.2，9.3Hz，1H)，7.49(s，1H)，7.53(d，J＝2.2Hz，1H)，7.65-7.78(m，3H)，7.98-8.06(m，2H)，8.41(dd，J＝2.8，9.3Hz，1H)；13C-NMR(CD3OD，75.5MHz)δ13.9，18.8，19.7，20.2，27.0，29.7，30.5，31.8，34.6，37.7，38.9，41.1，47.8，52.3，53.6，56.9，58.8，58.9，60.3，83.8，100.4，102.2，116.2，121.6，126.7，129.8，130.8，133.3，133.8，143.5，157.9，166.5，168.5，173.3，173.9，175.5，175.5，175.6.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值759.4，測定值759.7；(M+Na)+計(jì)算值781.4，測定值781.7；(M+K)+計(jì)算值797.4，測定值797.7。
實(shí)施例58 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(S)-1-[((S)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-丁酸(58)按照實(shí)施例42中所述的方法進(jìn)行制備，但是使用L-2-氨基-N-丁酸叔丁酯而不是H-Nva-OtBu。然后如實(shí)施例43中所述，使所得化合物反應(yīng)，從而給出(1R，2R，4R)-2-((S)-1-叔丁氧羰基-丙基氨基甲酰基)-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羧酸甲酯。如實(shí)施例56中所述使該化合物與55進(jìn)行偶聯(lián)，隨后如實(shí)施例57所述進(jìn)行酯解，從而給出為無色固體的化合物58。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.82-0.99(m，9H)，0.82-1.40(m，重疊峰，6H)，1.48-1.78(m，6H)，1.80-1.95(m，1H)，1.97-2.12(m，1H)，2.22-2.40(m，重疊峰，2H)，2.51-2.64(m，1H)，2.71-2.90(m，1H)，3.16-3.39(m，重疊峰，1H)，3.49-3.59(m，1H)，3.63(s，3H)，3.95(s，3H)，4.12-4.23(m，2H)，4.28-4.38(m，1H)，5.31(b，1H)，7.43(dd，J＝2.2，9.3Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.51(s，1H)，7.66-7.89(m，3H)，7.99-8.07(m，2H)，8.42(d，J＝9.1Hz，1H)；13C-NMR(75.5MHz，CD3OD)δ10.7，18.8，19.7，25.8，27.0，27.0，29.7，30.5，31.8，37.7，38.9，41.2，47.9，52.3，55.3，56.9，58.8，60.6，83.6，100.7，102.2，116.3，121.5，126.7，129.8，130.8，133.7，133.8，143.9，158.2，166.4，168.3，173.3，173.8，175.2，175.5，175.6.MALDl-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值745.4，測定值744.9；(M+Na)+計(jì)算值767.4，測定值766.9；(M+K)+計(jì)算值783.5，測定值782.9。
實(shí)施例59 (S)-2-{[(1R，2R，4S)-2-{(R)-1-[((R)-環(huán)己基-甲氧羰基-甲基)-氨基甲酰基]-2-甲基-丙基氨基甲?；鶀-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-丁酸(59)按照實(shí)施例54中所述的方法進(jìn)行制備，但是使用Boc-D-環(huán)己基甘氨酸而不是Boc-L-環(huán)己基甘氨酸。然后如實(shí)施例55中所述使所得化合物反應(yīng)，隨后如實(shí)施例56所述使其與(1R，2R，4R)-2-((S)-1-叔丁氧羰基-戊基氨基甲?；?-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羧酸甲酯進(jìn)行偶聯(lián)。如實(shí)施例57所述除去酯基，從而給出為無色固體的化合物59。
1H-NMR(CD3OD，300MHz)δ0.82-1.02(m，9H)，1.04-1.42(m，6H)，1.52-1.80(m，6H)，1.80-1.96(m，重疊峰，1H)，2.00-2.14(m，1H)，2.29-2.46(m，2H)，2.51-2.65(m，1H)，2.68-2.84(m，1H)，3.24-3.39(m，重疊峰，1H)，3.47-3.60(m，1H)，3.67(s，3H)，4.07(s，3H)，4.18-4.27(m，2H)，4.28-4.38(m，1H)，5.64(app.bs，1H)，7.44(d，J＝2.3，6.9Hz，1H)，7.42(s，2H)，7.67-7.81(m，3H)，8.04(d，J＝7.8Hz，2H)，8.41(d，J＝9.1Hz，1H)；13C-NMR(CD3OD，75.5MHz)δ10.8，18.5，19.6，25.7，27.1，27.1，30.1，30.6，31.9，37.3，38.2，41.1，47.8，52.3，55.4，56.9，59.0，59.1，60.2，83.8，100.5，102.2，116.3，121.6，126.8，129.8，130.8，133.6，133.8，143.7，158.1，166.5，168.5，173.4，173.8，175.4，175.7，175.7.MALDI-TOF-譜(M+H)+計(jì)算值745.4，測定值745.4；(M+Na)+計(jì)算值767.4，測定值767.4；(M+K)+計(jì)算值783.5，測定值783.3。
實(shí)施例60 樹脂結(jié)合的2-叔丁氧羰基氨基-3，3-二甲基丁酸(60)向Argonaut樹脂PS-TFP(1.38mmol/g，10g)和2-叔丁氧羰基氨基-3，3-二甲基-丁酸(4.5g，20.7mmol)中加入二氯甲烷(40mL)和DMF(10mL)。向此混合物中加入DMAP(1g，8.28mmol)，并且隨后加入DIC(9.5mL，60.7mmol)。在室溫下攪拌3小時后，對樹脂進(jìn)行過濾并且用DMF、THF、DCM、THF、DCM和乙醚順序?qū)ζ溥M(jìn)行洗滌，隨后在真空中對其進(jìn)行干燥。
實(shí)施例61 [1-(2-羥基-茚滿-1-基氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(61)。
向在DCM中的部分60(200mg)中加入氨基茚滿醇(0.14mmol)。將該混合物攪拌2小時。將液體過濾并且所述樹脂用2×DCM進(jìn)行洗滌。將合并的液體混合并且進(jìn)行濃縮至干燥，從而得到標(biāo)題化合物(20.5mg，0.055mmol)。經(jīng)HPLC測定純度＞95％。M+H+363.15.
13C NMRδC(100MHz；CDCl3；Me4Si)27.0，28.5，34.2，39.8，50.8，57.9，68.2，73.7，124.8，125.6，127.4，128.5，140.4，171.6.1H NMRδH(400MHz；CDCl3；Me4Si)1.07(9H，s，CCH3)，1.44(9H，s，OCCH3)，2.93(1H，dd，Jgem16.4Hz，J3,22.3Hz，CH2)，3.15(1H，dd，Jgem16.4Hz，J3,25.2Hz，CH2)，實(shí)施例62 2-氨基-N-(2-羥基-茚滿-1-基)-3，3-二甲基丁酰胺(62)在室溫下，將化合物61保持在DCM-TFA 2∶1(2mL)中60分鐘。將該溶液與甲苯共蒸發(fā)至干燥。
實(shí)施例63 (2-叔丁氧羰基氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-環(huán)己基-乙酸甲酯(63)向2-叔丁氧羰基氨基-3，3-二甲基丁酸(500mg，2.16mmol)、氨基-環(huán)己基-乙酸甲酯(444mg，2.59mmol)和HATU(2g，5.40mmol)的DMF(20mL)溶液中加入二異丙基乙胺(1.88mL，10.8mmol)。在室溫下，將該溶液攪拌1小時。并用二氯甲烷(40mL)稀釋。上述溶液用NaHCO3水溶液(飽和)和水(×2)洗滌、干燥并進(jìn)行濃縮。所得產(chǎn)品純度＞95％。M+H+385.4。
實(shí)施例64
{1-[(環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(64)向在EtOH-THF 1∶2中的化合物63加入大量過量的甲胺(在水中為30％)，并且將其在室溫下放置2周。將上述溶液濃縮至干燥，并且使所得殘余物通過短硅膠柱，用2％甲醇的二氯甲烷進(jìn)行洗脫，從而給出純產(chǎn)品(＞95％)。M+H+384.5實(shí)施例65 2-氨基-N-(環(huán)己基-甲基氨基甲?；?甲基)-3，3-二甲基-丁酰胺(65)在室溫下，將化合物64保持在二氯甲烷-三氟乙酸2∶1中1小時，并且將其濃縮至干燥。所得殘余物在真空中干燥16小時。反相C18HPLC表明其純度＞95％。M+H+283.1。
實(shí)施例66 1-(2-氨基-4-甲氧基苯基)乙酮(66)將間-甲氧基苯胺(10.0g，82mmol)溶于CH2Cl2(50mL)中，并且將該溶液冷卻至-50℃。在20分鐘時間內(nèi)，將BCl3(在CH2Cl2中，1M，82mL，82mmol)緩緩加入其中，在此之后，在-50℃下將該混合物攪拌30分鐘，隨后向其中順序加入AcCl(6.0mL，84mmol)和AlCl3(11g，82mmol)。在-50℃下將該混合物攪拌1小時，隨后使其升溫至室溫。在室溫下將其攪拌過夜后，將上述溶液在40℃下加熱4h，在此之后將所得混合物倒在冰上。所得含水混合物用10％NaOH(w/v)進(jìn)行堿化并且用EtOAc(4×200mL)對其進(jìn)行提取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌、干燥(MgSO4)并進(jìn)行蒸發(fā)，從而給出黑色固體，該固體經(jīng)快速柱層析(乙醚/CH2Cl220∶80)得到純化。所得固體在乙醚/己烷中進(jìn)行重結(jié)晶，從而給出為光亮棕褐色葉狀物的化合物93(5.6g，42％)。
實(shí)施例67N-(叔丁基)-N′-異丙硫脲(67)向異硫氰酸叔丁酯(5.0mL，39mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液中加入異丙胺(4.0mL，47mmol)和二異丙基乙胺(DIEA)(6.8mL，39mmol)，并且在室溫下將所得混合物攪拌2h。所得反應(yīng)混合物用EtOAc進(jìn)行稀釋，用10％檸檬酸(2×)、飽和NaHCO3(2×)、H2O(2×)和鹽水(1×)進(jìn)行洗滌。對所得有機(jī)層進(jìn)行干燥(MgSO4)和蒸發(fā)，從而得到為白色固體的標(biāo)題化合物(3.3g，52％)，不需要進(jìn)一步純化即可使用。
實(shí)施例68N-異丙硫脲(68)將化合物67(3.3g，20mmol)溶于濃HCl(45mL)中，并且將該溶液回流40分鐘。使上述混合物冷卻至室溫，然后在冰浴中進(jìn)行冷卻，并且用固體NaHCO3和飽和NaHCO3將其堿化至pH值9.5，在此之后將產(chǎn)品提取入EtOAc(3×)中。合并的有機(jī)相用H2O(2x)和鹽水(1x)進(jìn)行洗滌、干燥(MgSO4)并進(jìn)行蒸發(fā)，從而得到粗標(biāo)題化合物(2.1g，90％)，不需進(jìn)一步純化即可使用。
實(shí)施例69
2-(異丙氨基)-1，3-噻唑-4-羧酸氫溴酸鹽(69)將化合物68(2.1g，18mmol)和3-溴丙酮酸(3.0g，18mmol)的二氧六環(huán)(180mL)懸浮液加熱至80℃。達(dá)到80℃時混合物成為澄清，不久以后產(chǎn)品開始沉淀，為白色固體。加熱2h之后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并且將沉淀濾出和收集。由此得到純標(biāo)題產(chǎn)品(4.4g，94％)。
實(shí)施例70 N-(2-乙?；?5-甲氧基苯基)-2-(異丙氨基)-1，3-噻唑-4-羧酰胺(70)將化合物69(4.4g，16.5mmol)和苯胺衍生物66(2.75g，16.5mmol)的在吡啶(140mL)中的混合物冷卻至-30℃(通過冷卻，透明溶液部分地變成懸浮液)。在5分鐘時間內(nèi)，將POCl3(3.3mL，35mmol)緩緩加入其中。在-30℃下將上述混合物攪拌1小時，隨后使其達(dá)到室溫。在室溫下攪拌1.5h之后，將所得反應(yīng)混合物傾倒在冰上，并且用固體NaHCO3和飽和NaHCO3將其pH值調(diào)節(jié)至約9～10。將所得粗產(chǎn)品提取入CH2Cl2(3×)中，并且將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)和蒸發(fā)。所得粗深米黃色固體經(jīng)快速柱層析(己烷/EtOAc 55∶45)進(jìn)行純化，從而給出為淺黃色固體的化合物70(5.6g，76％)。
實(shí)施例71
2-[2-(異丙氨基)-1，3-噻唑-4-基]-7-甲氧基喹啉-4-醇(71)將t.BuOK(2.42g，21mmol)的無水t.BuOH(40mL)溶液加熱至回流。在5分鐘時間內(nèi)，將化合物70(1.8g，5.4mmol)分份加入其中，并且將形成的暗紅色溶液在回流下攪拌另外20分鐘。將上述混合物冷卻至室溫，并且將HCl(在二氧六環(huán)中為4M，8.0mL，32mmol)加入其中，在此之后，所得反應(yīng)混合物在真空下進(jìn)行濃縮。為了確保所有的HCl和二氧六環(huán)都被除去，將粗產(chǎn)品再溶于CH2Cl2中兩次并且將其徹底蒸發(fā)，從而得到為褐色固體的輕微不純的化合物71鹽酸鹽(1.62g)。將上述產(chǎn)品溶于CH2Cl2中并且用飽和NaHCO3進(jìn)行洗滌，在此之后，水相用CH2Cl2提取幾次。對合并的有機(jī)相進(jìn)行干燥(MgSO4)和蒸發(fā)，從而給出為淺褐色固體的化合物71(1.38g，81％)(根據(jù)HPLC測試，純度＞95％)。1H-NMR(MeOH-d4，400MHz)δ1.30(d，J＝6.0Hz，6H)，3.93(s，3H)，3.95-4.07(m，1H)，6.73(s，1H)，6.99(dd，J＝2.4，9.2Hz，1H)，7.26(d，J＝2.4Hz，1H)，7.37(s，1H)，8.10(d，J＝9.2Hz，1H).
實(shí)施例72 (1R，4R，5R)-N-[(1S)-1-[[[(1S)-1-環(huán)己基-2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，2-二甲基丙基]-3-氧代-2-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酰胺(72)向化合物32(53mg，0.34mmol)的DMF(9mL)溶液中加入化合物65(80mg，0.28mmol)和DIEA(290L，1.66mmol)。將此溶液冷卻至0℃，并且將HATU(127mg，0.33mmol)加入其中。在0℃下攪拌1h并且在室溫下攪拌1h后，將溶劑蒸發(fā)，所得粗產(chǎn)品通過快速柱層析(EtOAc/甲苯2∶1)進(jìn)行純化，從而給出為白色固體的化合物72(110mg，92％)。
實(shí)施例73 (1R)-1-[[[(1R，2R，4R)-2-[[[(1S)-1-[[[(1S)-1-環(huán)己基-2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，2-二甲基丙基]氨基]羰基]-4-羥基環(huán)戊基]羰基]氨基]-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(73)將化合物72(60mg，0.14mmol)溶于二氧六環(huán)(3.5mL)和H2O(2.5mL)中，并且將該溶液冷卻至0℃。在5分鐘時間內(nèi)，將LiOH(1M，280L，0.28mmol)滴加加入其中，在此之后在0℃下將該反應(yīng)混合物攪拌40分鐘。用1M HCl將其pH值調(diào)節(jié)至7，并且將溶劑蒸發(fā)。將所得殘余物懸浮在DMF(5mL)中，并且將1-氨基-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(32mg，0.17mmol)和DIEA(146L，0.84mmol)加入其中。冷卻至0℃后，將HATU(64mg，0.17mmol)加入其中，并且在0℃下對該混合物攪拌1小時和在室溫下攪拌1小時。將溶劑蒸發(fā)以及所得產(chǎn)品利用快速柱層析(EtOAc/甲醇9∶1)進(jìn)行純化，從而給出為白色固體的化合物73(67mg，82％)。
實(shí)施例74
叔丁基(1R，2R，4R)-2-[[[(1R)-1-(乙氧羰基)-2-乙烯基環(huán)丙基]氨基]羰基]-4-[[2-[2-(異丙氨基)-1，3-噻唑-4-基]-7-甲氧基喹啉-4-基]氧基]環(huán)戊烷羧酸酯(74)標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例76方法A中所述的方法進(jìn)行制備，但是使用化合物34而非化合物73。(注釋使用4當(dāng)量的Ph3P和DIAD。層析洗脫液甲苯/EtOAc 1∶1)實(shí)施例75 (1R，2R，4R)-2-[[[(1R)-1-(乙氧羰基)-2-乙烯基環(huán)丙基]氨基]羰基]-4-[[2-[2-(異丙氨基)-1，3-噻唑-4-基]-7-甲氧基喹啉-4-基]氧基]環(huán)戊烷羧酸(75)向化合物74(20mg，30μmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中加入TFA(2mL)和Et3SiH(10μL，63μmol)。2小時之后將揮發(fā)物蒸發(fā)，粗制品不需經(jīng)任何純化步驟即可使用?；衔?518mg，定量，為白色固體。
實(shí)施例76 (1R)-1-[[[(1R，2R，4S)-2-[[[(1S)-1-[[[(1S)-1-環(huán)己基-2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，2-二甲基丙基]氨基]羰基]-4-[[7-甲氧基-2-[2-[(1-甲基乙基)氨基]-4-噻唑基]-4-喹啉基]氧基]環(huán)戊基]羰基]氨基]-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(76)方法A向化合物73(59mg，0.10mmol)的無水THF(4mL)溶液中加入喹啉71(49mg，0.16mmol)和Ph3P(65mg，0.25mmol)。冷卻至0℃后，在5分鐘時間內(nèi)將DIAD(50μL，0.25mmol)滴加加入其中。所得溶液在0℃下攪拌1h和在室溫下攪拌48h。將溶劑蒸發(fā)以及所得剩余物利用快速柱層析(CHCl3/2M NH3在甲醇中，95∶5)進(jìn)行純化，從而給出為白色固體的化合物76(9mg，10％)。
方法B根據(jù)實(shí)施例72中所述方法將化合物75偶聯(lián)至化合物65上，從而給出標(biāo)題化合物(82％)。
實(shí)施例77 (1R)-1-[[[(1R，2R，4S)-2-[[[(1S)-1-[[[(1S)-1-環(huán)己基-2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基]羰基]-2，2-二甲基丙基]氨基]羰基]-4-[[7-甲氧基-2-[2-[(1-甲基乙基)氨基]-4-噻唑基]-4-喹啉基]氧基]環(huán)戊基]羰基]氨基]-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸(77)將化合物76(8mg，9μmol)溶于甲醇(150μL)和THF(100μL)的混合物中。將LiOH(1mg，42μmol)的H2O(25L)溶液加入其中，并且在50℃下將該混合物攪拌過夜。該溶液用HOAc進(jìn)行中和并且進(jìn)行蒸發(fā)。將所得殘余物懸浮在CH2Cl2中并且用H2O對其進(jìn)行洗滌。對有機(jī)相進(jìn)行蒸發(fā)，從而給出為白色固體的標(biāo)題化合物(8mg，定量)。
1H-NMR(MeOH-d4，400MHz)(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物)δ0.60-1.33(m，21H)，1.35-1.73(m，12H)，1.90-2.42(m，2H)，2.51-2.75(m，6H)，3.20-3.38(m，1H)，3.85(s，3H)，3.95-4.28(m，1H)，4.91-5.02(m，1H)，5.12-5.23(m，1H)，5.64-5.83(m，1H)，7.01-7.11(m，1H)，7.25-7.40(m，1H)，7.42-7.57(m，1H)，7.85-8.08(m，1H).
實(shí)施例78 2-氨基-3，3-二甲基-N-噻吩-2-基-甲基-丁酰胺(78)如實(shí)施例61所述進(jìn)行制備，但是使用噻吩-2-甲胺而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去，由此標(biāo)題化合物得到制備。
實(shí)施例79
2-氨基-N-(6-羥基-4，5，6，7-四氫-苯并[b]噻吩-5-基)-3，3-二甲基丁酰胺(79)標(biāo)題化合物按照如下所述進(jìn)行制備如實(shí)施例61所述，但是使用2-氨基-4，5，6，7-四氫-苯并[b]噻吩-5醇而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。
實(shí)施例80 2-氨基-N-(2-二乙基氨基-乙基)-3，3-二甲基-丁酰胺(80)標(biāo)題化合物按照如下所述進(jìn)行制備如實(shí)施例61所述，但是使用N，N-二乙基亞乙基二胺而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。
實(shí)施例81 2-氨基-N-[2-(2-甲氧基-苯氧基)-乙基]-3，3-二甲基-丁酰胺(81)標(biāo)題化合物按照如下所述進(jìn)行制備如實(shí)施例61所述，但是使用2-甲氧基苯氧基乙胺而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。
實(shí)施例82
2-氨基-1-(3-羥基-吡咯烷-1-基)-3，3-二甲基-丁-1-酮(82)標(biāo)題化合物按照如下所述進(jìn)行制備如實(shí)施例61所述，但是使用(R)-3-吡咯烷酮而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。
實(shí)施例83 2-氨基-N-(1，1-二氧代-四氫-1-噻吩-3-基)-3，3-二甲基-丁酰胺(83)標(biāo)題化合物按照如下所述進(jìn)行制備如實(shí)施例61所述，但是使用2-甲氧基苯氧基乙胺而非氨基茚滿醇，隨后如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。
實(shí)施例84 氨基甲酸，[(1S)-1-[[(苯磺?；?氨基]羰基]丁基]-，苯甲基酯(84)向攪拌的Z-Nva-OH(150mg，0.59mmol)的THF(6mL)溶液中加入CDI(400mg，2.4mmol)。將此漿液在室溫下攪拌30分鐘，隨后將DBU(200μL，1.3mmol)和苯磺酰胺(250mg，1.59mmol)的THF(2mL)溶液加入其中。將上述混合物在60℃下攪拌48小時，隨后將其濃縮至干燥。將所得殘余物溶于甲醇中并且使其經(jīng)過HPLC進(jìn)行純化，從而給出標(biāo)題化合物(118.5mg，0.304mmol)。經(jīng)HPLC測定其純度＞95％。M-H+389.0，+Na 412.96.
實(shí)施例85 (2S)-2-氨基-N-(苯磺酰基)戊酰胺(85)將化合物84溶于甲醇(5mL)中，隨后加入Pd/C并且對其進(jìn)行氫化2小時。將漿液經(jīng)硅藻土過濾、用甲醇洗滌并將其濃縮至干燥，從而給出標(biāo)題化合物。產(chǎn)率100％。M+H+257.3。
實(shí)施例86 4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷-1，2-二羧酸1-{[1-(環(huán)己基甲基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-酰胺}2-[(1-苯甲磺酰氨基羰基-2-乙烯基-環(huán)丙基)-酰胺](86)如實(shí)施例60所述將N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨酸連接到Argonaut樹脂PS-TFP上，隨后如實(shí)施例61所述使其與環(huán)己烷甲胺反應(yīng)，并且如實(shí)施例62所述將Boc基團(tuán)除去。如實(shí)施例39所述使所得的胺與化合物35進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，隨后如實(shí)施例40所述進(jìn)行乙酯的水解，給出1-{[2-[1-(環(huán)己基甲基-氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸。然后如實(shí)施例94所述對所得的酸進(jìn)行處理，但是使用甲苯磺酰胺而不是環(huán)丙基磺酰胺，由此給出標(biāo)題化合物。產(chǎn)率6％。經(jīng)HPLC測定其純度＞95％。M+H+864.32。
實(shí)施例87 乙酸(1S，2R)-1-((2S)-2-氨基-3，3-二甲基-丁酰氨基)-茚滿-2-基酯(87)將化合物61(4g)的溶液保持在吡啶-乙酸酐2∶1中30分鐘。將DCM加入其中，并且所得溶液用檸檬酸(水溶液)和NaHCO3(水溶液)進(jìn)行洗滌。將所得有機(jī)層濃縮至干燥，給出經(jīng)HPLC測定純度＞90％的乙酰化產(chǎn)品。然后，將所得化合物置于30％TFA的DCM溶液中1.5小時，隨后將其濃縮至干燥。在甲苯中共蒸發(fā)兩次，給出經(jīng)HPLC純度＞90％的標(biāo)題產(chǎn)品。
實(shí)施例88 (2S)-甲磺酸2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基-戊基酯(88)向通過冰水浴冷卻的((1S)-1-羥甲基-3-甲基-丁基)-氨基甲酸叔丁酯(25g，115mmol)的二氯甲烷(500ml)溶液中順序加入二異丙基乙胺(35.7g，276mmol)和甲磺酰氯(15.81g，138mmol)。將所得溶液攪拌過夜，在此期間，使上述混合物逐漸升溫至環(huán)境溫度。所得混合物順序用水、10％檸檬酸(水溶液)、水和飽和NaHCO3(水溶液)洗滌，然后用Na2SO4干燥并進(jìn)行濃縮，從而得到褐色固體(32.6g，96％)，不需進(jìn)一步純化即可用于下一反應(yīng)。
實(shí)施例89 ii)((1S)-1-疊氮甲基-3-甲基-丁基)氨基甲酸叔丁酯(89)
在DMF中，在80℃下，得自實(shí)施例88的甲磺酸酯(32.6g，110mmol)用疊氮化鈉(21.45g，330mmol)處理24小時。將溶劑蒸發(fā)，將所得殘余物吸收在DCM中、過濾并且用飽和NaHCO3(水溶液)洗滌。所得溶液用Na2SO4進(jìn)行干燥并且進(jìn)行濃縮，從而得到褐色油，經(jīng)使用梯度乙酸乙酯和己烷的快速層析法進(jìn)行純化，從而得到為白色固體的標(biāo)題化合物(19.55g，73％)。
實(shí)施例90 (1S)-1-疊氮甲基-3-甲基-丁胺(90)在DCM(150ml)中，用TFA(30ml)處理((1S)-1-疊氮甲基-3-甲基-丁基)-氨基甲酸叔丁酯(9.64g，39.78mmol)3小時，在減壓下將上述混合物蒸發(fā)，將所得殘余物溶于乙酸乙酯中并且用1MK2CO3水溶液洗滌、用Na2SO4干燥和濃縮，從而得到黃色液體(4.55g，80％)。
實(shí)施例91 1-{[2-己-5-烯基氨基甲酰基-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基環(huán)丙烷羧酸乙酯(91)如實(shí)施例39所述，通過用三乙基硅烷處理將化合物35的叔丁酯除去。將所得的酸(724mg，1.33mmol)、己-5-烯基胺鹽酸鹽(271mg，2mmol)和二異丙基乙胺(1.85ml，10.65mmol)溶于DMF(20ml)中，并且將其冷卻至0℃。30分鐘之后，將HATU(608mg，1.6mmol)加入其中，并且將燒瓶從冰浴中移出。反應(yīng)之后接有LC-MS。3小時之后，將反應(yīng)混合物提取到EtOAc(100ml)和碳酸氫鈉水溶液(15ml)中。EtOAc相用硫酸鎂進(jìn)行干燥、蒸發(fā)并且在硅膠上通過層析法(在己烷中25％EtOAc→在己烷中50％EtOAc)進(jìn)行純化，從而給出純標(biāo)題產(chǎn)品(726mg，87％)。MS(M+H+)525.8實(shí)施例92 17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸乙酯(92)將化合物91(363mg，0.58mmol)溶于脫氣二氯甲烷(100ml)中。然后將Hoveyda-Grubbs催化劑第二代(26mg，0.041mmol)加入其中，并且使該混合物在氬氣氣氛下回流過夜。反應(yīng)混合物在二氧化硅上進(jìn)行蒸發(fā)并且通過硅膠層析(在己烷中50％EtOAc→在己烷中70％EtOAc)進(jìn)行純化，從而給出純標(biāo)題產(chǎn)品(111mg，32％)。MS(M+H+)597.7實(shí)施例93
17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸(93)將化合物92(95mg，0.159mmol)溶于四氫呋喃(10ml)、甲醇(5ml)和水(4ml)中。將氫氧化鋰(40mg，1.67mmol)溶于水(1ml)中并且將其加入上述溶液中。將反應(yīng)混合物加熱至65℃。3小時之后對反應(yīng)混合物進(jìn)行冷卻、用HCl水溶液(pH＝5)進(jìn)行酸化、在二氧化硅上進(jìn)行蒸發(fā)并且通過硅膠層析(在二氯甲烷中10％甲醇→在二氯甲烷中15％甲醇)進(jìn)行純化，從而給出純標(biāo)題產(chǎn)品(65mg，72％)。MS(M+H+)569.8實(shí)施例94 環(huán)丙烷磺酸[17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基]-酰胺(94)將化合物93(65mg，0.12mmol)、DMAP(21mg，0.17mmol)和EDAC(44mg，0.23mmol)溶于DMF(0.2ml)中。在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌5h。隨后將環(huán)丙基磺酰胺(69mg，0.57mmol)和DBU(80μl，0.57mmol)加入其中。在室溫下對其攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物提取在EtOAc(80ml)和檸檬酸水溶液(10％，2×15ml)中。有機(jī)相用MgSO4進(jìn)行干燥、在二氧化硅上進(jìn)行蒸發(fā)并且在硅膠上通過層析法(在二氯甲烷中5％甲醇→在二氯甲烷中15％甲醇)純化兩次，給出一種稠漿液。將上述稠漿液溶于少量乙腈中并且用乙醚使其沉淀，從而給出純標(biāo)題產(chǎn)品(19mg，23％)。MS(M+H+)673.2
實(shí)施例95 1-{[2-己-5-烯基-甲基-氨基甲酰基)-4-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)]-環(huán)戊烷羰基]-氨基-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(95)根據(jù)實(shí)施例39中所述方法將化合物35的叔丁酯除去。將所得的酸(850mg，1.56mmol)、N-甲基己-5-烯基胺鹽酸鹽(380mg，2.5mmol)和二異丙基乙胺(2.3ml，13.4mmol)溶于DMF(60mL)中，并且將其冷卻至0℃。30分鐘之后，將HATU(0.76mg，2.0mmol)加入其中，并且將燒瓶從冰浴中移出。反應(yīng)之后接有TLC。2小時之后，將反應(yīng)混合物加入5％檸檬酸中，并且用乙酸乙酯對其提取三次。所得的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并且在減壓下對其進(jìn)行蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)品通過硅膠層析法進(jìn)行純化，從而給出標(biāo)題產(chǎn)品(820mg，82％)。
實(shí)施例96 17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸乙酯(96)將化合物95(648mg，1.01mmol)溶于脫氣二氯乙烷(500ml)中。然后將Hoveyda-Grubbs催化劑第二代(35mg，0.055mmol)加入其中，并且使該混合物在氬氣氣氛下回流過夜。反應(yīng)混合物在二氧化硅上進(jìn)行蒸發(fā)并且在硅膠上通過層析法(在甲苯中30％EtOAc→在甲苯中50％EtOAc)進(jìn)行純化，從而給出純標(biāo)題產(chǎn)品(230mg，37％)。MS(M+H+)612.8實(shí)施例97 17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸乙酯(97)將化合物96(260mg，0.42mmol)溶于1，4-二烷(20mL)中，將1.0M氫氧化鋰(6.0ml)加入其中，并且在室溫下將該混合物攪拌過夜，然后在60℃下攪拌六小時。將反應(yīng)混合物加入5％檸檬酸中，并且用乙酸乙酯對其提取3次。所得的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并且在減壓下對其進(jìn)行蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)品通過用DCM和5％MeOH的硅膠層析法進(jìn)行純化，從而給出標(biāo)題產(chǎn)品(130mg，53％)。MS(M+H)584，7實(shí)施例98
環(huán)丙烷磺酸[17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基]-酰胺(98)將化合物97(58.3mg，0.1mmol)、DMAP(18.3mg，0.15mmol)和EDAC(38.7mg，0.2mmol)溶于DMF(1.0ml)中。在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌過夜。隨后將環(huán)丙基磺酰胺(60.5mg，0.5mmol)和DBU(76μg，0.5mmol)加入其中。在室溫下攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物加入到5％檸檬酸中，并且用乙酸乙酯對其提取三次。所得有機(jī)相用硫酸鈉進(jìn)行干燥和進(jìn)行蒸發(fā)。所得殘余物通過硅膠層析法純化兩次，給出標(biāo)題產(chǎn)品(20mg)。MS(M+H)687,8。
實(shí)施例99 [[4-環(huán)丙烷磺酰氨基羰基-17-(7-甲氧基-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-13-基]-氨基甲酸叔丁酯(99)N′-己-5-烯-(E)-亞基-肼羧酸叔丁酯根據(jù)實(shí)施例46和47所述方法進(jìn)行制備，但是從己-5-烯-醇而非庚-6-烯-醇開始。如實(shí)施例48所述對化合物35進(jìn)行處理，但是使用上述N′-己-5-烯-(E)-亞基-肼羧酸叔丁酯而非相應(yīng)的庚-6-烯衍生物，隨后如實(shí)施例49所述進(jìn)行大環(huán)化并且如實(shí)施例50所述進(jìn)行乙酯的水解，給出酸。將所得的酸(58mg，0.0846mmol)溶于無水DMF(7mL)中并且將DIEA在1分鐘時間內(nèi)滴加加入其中。將所得溶液在室溫下攪拌1小時，隨后將含有環(huán)丙基磺酰胺(41mg，0.338mmol)、DMAP(41.3mg，0.338mmol)和DBU(50μL，0.338mmol)的無水DMF(1.5mL)溶液加入其中。將上述溶液在室溫下攪拌5天。所得溶液用EtOAc(50mL)進(jìn)行稀釋并且用飽和NaHCO3進(jìn)行洗滌。所得水相用DCM進(jìn)行提取。對所得合并的有機(jī)層進(jìn)行干燥、濃縮和使其通過HPLC進(jìn)行純化，從而產(chǎn)生為白色固體的標(biāo)題化合物(14.3mg，0.018mmol)，經(jīng)HPLC測定其純度＞95％。M+H+788.3。
實(shí)施例100 環(huán)丙烷磺酸[13-氨基-17-(7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-基氧基)-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基]-酰胺三氟乙酸鹽(100)在室溫下，將化合物99(2.4mg，0.00304mmol)保持在TFA-DCM 1∶2(3mL)中60分鐘。將甲苯(3mL)加入其中。將上述樣品共蒸發(fā)至干燥，從而形成標(biāo)題化合物(2.1mg，0.0026mmol)。經(jīng)HPLC測定，純度＞95％。M+H+688.3.
實(shí)施例101
3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酸己-5-烯基-甲基酰胺(101)在氬氣下，向冰浴中的在5mL DMF中的HATU(2.17g，5.7mmol)和N-甲基己-5-烯基胺鹽酸鹽(6.47mmol)中加入在11mlDMF中的1R，4R，5R-3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-羧酸(835.6mg，5.35mmol)，隨后加入DIEA(2.80mL，16mmol)。攪拌40分鐘后，將上述混合物在室溫下攪拌5h。將溶劑蒸發(fā)，將殘余物溶于EtOAc(70mL)中并且用飽和NaHCO3(10mL)對其進(jìn)行洗滌。水相用EtOAc(2×25mL)進(jìn)行提取。將有機(jī)相合并、用飽和NaCl(20mL)洗滌、用Na2SO4干燥并進(jìn)行蒸發(fā)。經(jīng)快速柱層析(150g硅膠，2/1 EtOAc-石油醚(PE)，通過KMnO4水溶液進(jìn)行TLC檢測，在4/1 EtOAc-PE中Rf為0.55)給出為黃色油的化合物(1.01g，75％)。
實(shí)施例102 4-羥基環(huán)戊烷-1，2-二羧酸1-[(1-環(huán)丙烷磺酰氨基羰基-2-乙烯基環(huán)丙基)-酰胺]2-(己-5-烯基-甲基酰胺(102)將LiOH溶液(0.15M，53mL，8mmol)加入到冰浴中的內(nèi)酯酰胺101(996mg，3.96mmol)中并且攪拌1h。用1N HCl將上述混合物酸化至pH值為2～3并且對其進(jìn)行蒸發(fā)、與甲苯共蒸發(fā)若干次，以及在真空下干燥過夜。將(1R，2S)-環(huán)丙烷磺酸(1-氨基-2-乙烯基環(huán)丙烷羰基)酰胺鹽酸鹽(4.21mmol)和HATU(1.78g，4.68mmol)加入其中。在氬氣下，在冰浴中對上述混合物進(jìn)行冷卻，將DMF(25mL)加入其中，然后將DIEA(2.0mL，11.5mmol)加入其中。攪拌30分鐘后，將上述混合物在室溫下攪拌3h。將溶劑蒸發(fā)后，將殘余物溶于EtOAc(120mL)中，順序用0.5N HCl(20mL)和飽和NaCl(2×20mL)對其進(jìn)行洗滌，并且用Na2SO4對其進(jìn)行干燥。經(jīng)快速柱層析(200gYMC硅膠，在CH2Cl2中2～4％甲醇)給出白色固體(1.25g，66％)。
實(shí)施例103 環(huán)丙烷磺酸(17-羥基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基)-酰胺(103)將環(huán)戊醇102(52.0mg，0.108mmol)溶于19mL 1，2-二氯乙烷(使用之前鼓泡氬氣)中。將Hoveyda-Grubbs第二代催化劑(6.62mg，10mole％)溶于DCE(2×0.5mL)中并且將其加入上述溶液中。用氬氣對該新鮮溶液鼓泡1分鐘。將其等分(每份4mL)轉(zhuǎn)移到五個2～5mL微波管中。向最后的管中加入0.8mL沖洗用溶劑(rinsing withsolvent)。通過微波對各管進(jìn)行加熱(5分鐘內(nèi)由室溫升至160℃)。將所有的等分合并并且將溶劑蒸發(fā)。經(jīng)快速層析法(硅膠，3～7％甲醇，在CH2Cl2中)給出24.39mg固體(在10％MeOH-CH2Cl2中Rf為0.28，有兩個斑點(diǎn))。將所得固體與9.66mg樣品合并，并且使其通過第二層析(2～8％甲醇，在EtOAc中)，從而給出含80％期望化合物的膏狀固體(23mg)(26％產(chǎn)率)。
實(shí)施例104
環(huán)丙烷磺酸{17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-基氧基]-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基)-酰胺(104)在冰浴中，將DIAD(22μL，0.11mmol)加入到由易位產(chǎn)品103(23mg)、2-(4-異丙基-1，3-噻唑-2-基)-7-甲氧基喹啉-4-醇(24mg，0.08mmol)和PPh3(30mg，0.11mmol)的在1mL無水THF中的混合物中。將所得混合物在室溫下攪拌過夜，然后將其蒸發(fā)。所得殘余物(1.5mL MeCN溶液的1.2mL)通過制備HPLC(Hypercarb 7uL100×21.2mm，在10分鐘內(nèi)MeCN水溶液由40％至99％)進(jìn)行純化，從而給出3.18mg為膏狀固體的MV062308(13％產(chǎn)率)。
1H NMR(DMSO-d6)δppm主旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體0.99(m，2H)，1.11(m，2H)，1.20-1.30(m，2H)，1.37和1.38(2d，J＝7.0Hz，6H)，1.46-1.58(m，2H)，1.70(m，1H)，1.85(m，1H)，1.90(dd，J＝8.5，6.0Hz，1H)，2.06(br，1H)，2.26(m，1H)，2.38(m，1H)，2.52-2.62(m，3H)，2.90-2.97(m，2H)，3.06(s，3H)，3.21(m，1H)，3.40-3.56(m，2H)3.97(s，3H)，4.60(m，1H)，5.04(m，1H)，5.41(br，1H)，5.66(m，1H)，7.16(m)，7.58(br)，8.02(m)，10.92(s，1H)實(shí)施例105
N-{4-[4-(4-環(huán)丙烷磺酰氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-17-基氧基)-7-甲氧基-喹啉-2-基]-噻唑-2-基}-3，3-二甲基丁酰胺(105)如實(shí)施例104所述用4-羥基-7-甲氧基-2-[2-(2，2-二甲基丁?；?氨基噻唑-4-基]喹啉處理化合物103，從而給出標(biāo)題化合物。
LCMS保留時間2.30min，梯度3分鐘內(nèi)30％-80％B(流速0.8mL/min，UV 220nm，ACE C8 3×50mm；流動相A在90％H2O中10mM NH4Ac，B在90％ACN中10mM NH4Ac)，(M+1)+＝807。
實(shí)施例106 1-{[2-(己-5-烯基-甲基-氨基甲?；?-4-羥基-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(106)如實(shí)施例102所述使化合物101反應(yīng)，但是使用1-氨基-2-乙烯基環(huán)丙烷羧酸乙酯而非(1R，2S)-環(huán)丙烷磺酸(1-氨基-2-乙烯基-環(huán)丙烷羰基)酰胺鹽酸鹽，由此給出標(biāo)題化合物。
實(shí)施例107
1-{[4-(4-溴-苯磺酰氧基-2-(己-5-烯基-甲基-氨基甲酰基)-環(huán)戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-環(huán)丙烷羧酸乙酯(107)將化合物106(115mg，0.286mmol)溶于甲苯5ml和二氯甲烷1ml中。將DABCO(2.2.2-二偶氮二環(huán)辛烷)(96mg，0.857mmol，3當(dāng)量)加入到上述溶液中，隨后加入BsCl(109mg，0.428mmol，1.5當(dāng)量)。使該反應(yīng)在室溫下攪拌過夜，用甲苯(+10％乙酸乙酯)稀釋，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并進(jìn)行蒸發(fā)。通過柱層析(洗脫液EtOAc，Rf 0.25)得到期望的產(chǎn)品。轉(zhuǎn)化率80％。產(chǎn)量106mg。
實(shí)施例108 17-(4-溴-苯磺酰氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸乙酯(108)將化合物107(106mg，0.169mmol)溶于二氯甲烷(40ml)中，并且通過將氮?dú)夤娜肴芤褐?0分鐘對其進(jìn)行脫氣。然后將Hoveyda-Grubbs催化劑第一代(10mg，0.017mmol，10mol％)加入其中，并且使該混合物在氮?dú)鈿夥障禄亓鬟^夜。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，將MP-TMT鈀清除劑(大約100mg)加入其中并且攪拌2.5小時。將清除劑通過過濾除去并且用50mL二氯甲烷對其進(jìn)行洗滌。所得溶液通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮。所得粗產(chǎn)品通過柱層析(EtOAc)進(jìn)行純化，從而給出61mg產(chǎn)品。產(chǎn)率60％。
實(shí)施例109 17-[2-(2-異丙氨基-噻唑-4-基)-7-甲氧基-喹啉-4-基氧基]-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸乙酯(109)將2-(異丙氨基-噻唑-4-基)-7-甲氧基-喹啉-4-醇(220mg，0.7mmol)(如WO 00/59929所述進(jìn)行制備)溶于7ml NMP(N-甲基吡咯烷酮)中，將一匙Cs2CO3加入其中，在60℃下將其攪拌1.5小時。然后將化合物108(150mg，0.24mmol)加入其中。將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌過夜。上述混合物用氯仿稀釋并且用碳酸氫鈉、鹽水進(jìn)行洗滌。所得水相用氯仿進(jìn)行反提取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并進(jìn)行蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)品通過制備HPLC(Gilson)(MeOH-H2O，65％)進(jìn)行純化，從而給出21mg產(chǎn)品(產(chǎn)率13％)以及12mg異構(gòu)體。
實(shí)施例110
17-[2-(2-異丙氨基-噻唑-4-基)-7-甲氧基-喹啉-4-基氧基]-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羧酸(110)向在THF(0.2ml)和甲醇(0.3ml)混合物中的酯109(21mg，0.031mmol)溶液中加入在0.15ml水中LiOH(4mg，0.17mmol)的溶液。所得混合物在60℃下攪拌3.5小時。冷卻至室溫后，將乙酸加入其中(30當(dāng)量)。將該混合物與甲苯共蒸發(fā)。所得殘余物在氯仿和水之間進(jìn)行分配，水相用氯仿提取三次，將有機(jī)相合并、用硫酸鈉干燥和蒸發(fā)，從而給出20mg純產(chǎn)品(產(chǎn)率99％)。
實(shí)施例111 環(huán)丙烷磺酸{17-[2-(2-異丙氨基-噻唑-4-基)-7-甲氧基-喹啉-4-基氧基]-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-三環(huán)[13.3.0.0*4，6*]十八碳-7-烯-4-羰基}酰胺(111)將酸110(20mg，0.15mmol)、DMAP(28mg，0.225mmol)和EDAC(58mg，0.3mmol)溶于DMF(1.5ml)中。在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌過夜。隨后將環(huán)丙基磺酰胺(91mg，1.125mmol)和DBU(114μl，0.75mmol)加入其中。在室溫下攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物加入到5％檸檬酸中，并且用氯仿對其提取三次。所得的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并進(jìn)行蒸發(fā)。所得殘余物通過制備HPLC進(jìn)行純化，從而給出標(biāo)題產(chǎn)品(5.6mg)(產(chǎn)率24％)。
測定利用常規(guī)的體外(酶)測定法或者細(xì)胞培養(yǎng)測定法，對本發(fā)明化合物對黃病毒(比如HCV)NS3蛋白酶的活性進(jìn)行了方便的測定。
一種有效的測定法是公開于EP 1043399中的Bartenshlager復(fù)制子測定法。另一種復(fù)制子測定法描述于WO 03064416中。
涉及抑制全長肝炎C NS3的適宜酶測定法基本上如Poliakov，2002Prot Expression & Purification 25 363 371中所述。簡要而言，酯肽基質(zhì)Ac-DED(Edans)EEAbuΨ[COO]ASK(Dabcyl)-NH2(AnaSpec，SanJosé，USA)的水解在肽輔因子KKGSVVIVGRIVLSGK存在下以分光熒光進(jìn)行測定，如Landro，1997 Biochem 36 9340-9348所述。在約30℃下，將所述酶(1nM)與25μM輔因子和所述抑制劑培養(yǎng)在緩沖液(比如50mM HEPES，pH值7.5，10mM DTT，40％甘油，0.1％正辛基-β-D-葡糖苷)10分鐘，其中反應(yīng)通過加入基質(zhì)被啟動，一般為0.5μM基質(zhì)。一般將抑制劑溶于DMSO中，聲處理30s并且使其進(jìn)行旋轉(zhuǎn)。在測定之間通常將上述溶液貯存在-20℃下。
另一種酶活性測定法描述于WO 0399316中，其利用HCV NS3/4A蛋白酶配合物FRET肽測定法。這種體外測定法的目的是測定本發(fā)明化合物對源于BMS、H77C或者J416S株的HCV NS3蛋白酶配合物的抑制作用，如下所述。這種測定法提供了本發(fā)明化合物在抑制HCV蛋白水解活性中效果如何的指征。
血清取自被HCV感染的患者。HCV基因組(BMS株)的設(shè)計(jì)全長cDNA模板由通過血清RNA的逆轉(zhuǎn)錄-PCR(RT-PCR)獲得的DNA片段，并且利用根據(jù)其它基因型la株之間的同源性而選擇的引物進(jìn)行構(gòu)建。根據(jù)對整個基因組順序的確定，根據(jù)Simmonds等人的分類(參見P Simmonds，KA Rose，S Graham，SW Chan，F(xiàn) McOmish，BC Dow，EA Follett，PL Yap和H Marsden，J.Clin.Microbiol.，31(6)，1493-1503(1993))將基因型Ia確定給HCV分離物。非結(jié)構(gòu)區(qū)域NS2-5B的氨基酸序列被證明其中＞97％等同于HCV基因型Ia(H77C)以及87％等同于基因型Ib(J4L6S)。傳染性克隆H77C(Ia基因型)和J4L6S(Ib基因型)可以得自于R.Purcell(NIH)并且其順序公開于Genbank(AAB67036，參見Yanagi，M.，Purcell，R.H.，Emerson，S.U.和Bukh.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94(16)8738-8743(1997)；AF054247，參見Yanagi，M.，St Claire，M.，Shapiro，M.，Emerson，S.U.，Purcell，R.H.和Bukhj，Virology 244(1)，161(1998))中。
BMS、H77C和J4L6S株是產(chǎn)生重組體NS3/4A蛋白酶配合物的常規(guī)株。為這些株編碼重組體HCV NS3/4A蛋白酶配合物(氨基酸1027～1711)的DNA如P.Gallinari等人所述進(jìn)行操縱(參閱Gallinari P，Paolini C，Brennan D，Nardi C，Steinkuhler C，De Francesco R.Biochemistry.38(17)562032，(1999))。簡要而言，將溶解尾部的三-賴氨酸添加到30NS4A編碼區(qū)的3′-末端。NS4A-NS4B切割位點(diǎn)的P1位置上的半胱氨酸(氨基酸1711)被轉(zhuǎn)換為甘氨酸以避免賴氨酸標(biāo)記物的蛋白酶剪切。此外，在氨基酸1454位，半胱氨酸向絲氨酸的突變可以通過PCR被引入，從而預(yù)防NS3解旋酶域的自溶裂解。按照P.Gallinari等人所述記錄(參閱Gallinari P，Brennan D，Nardi C，BrunettiM，Tomei L，Steinkuhler C，De Francesco R.，J Virol.72(8)6758-69(1998))及其改良法，變體DNA片段可以被克隆在pET21b細(xì)菌表達(dá)載體(Novagen)中和NS3/4A配合物可以表達(dá)于大腸埃希氏桿菌株BL21(DE3)(Invitrogen)中。簡要而言，通過在20℃下用0.5mM異丙基-β-D-硫代吡喃型半乳糖苷(IPTG)處理22小時，NS3/4A表達(dá)可以得到誘發(fā)。一般發(fā)酵(101)產(chǎn)生大約80g濕式細(xì)胞漿料。將上述細(xì)胞再懸浮于由25mM N-2-(羥乙基)哌嗪-N′-2-(乙烷磺酸)(HEPES)，pH7.5，20％甘油，500mM氯化鈉(NaCl)，0.5％Triton-X100，1μg/mL溶菌酶，5mM氯化鎂(MgCl2)，1μg/mL DnaseI，5mM β-巰基乙醇(BME)，蛋白酶抑制劑-乙二胺四乙酸(EDTA)游離(Roche)組成的裂解緩沖液(10mL/g)中，使其均勻并且在VC中培養(yǎng)20分鐘。對上述勻漿進(jìn)行聲處理，并且通過在4℃下在235000g下對其超離心1小時而使其澄清。
將咪唑加入上清液中至其最終濃度為15mM，并且將其pH值調(diào)節(jié)至8。將粗蛋白質(zhì)提取物加載到用緩沖液B(25n-tM 20 HEPES，pH820％甘油，500mM NaCl，0.5％Triton-XIOO，15mM咪唑，5mMBME)預(yù)平衡過的次氮基三乙酸鎳(Ni-NTA)柱上。以1mL/min的流速對樣品進(jìn)行加載。上述柱用15柱體積的緩沖液C(與緩沖液B一樣，只是其中含有0.2％Triton-X100)進(jìn)行洗滌。所述蛋白質(zhì)用5柱體積的緩沖液D(與緩沖液C一樣，只是其中含有200mM咪唑)進(jìn)行洗脫。
對含NS3/4A蛋白酶配合物的級份進(jìn)行收集并且將其加載到用緩沖液D(25MM HEPES，pH7.5，20％甘油，300mM NaCl，0.2％Triton-X100，10mM BME)預(yù)平衡過的脫鹽柱Superdex-S200上。以1mL/min的流速對樣品進(jìn)行加載。對含有NS3/4A蛋白酶配合物30的級份進(jìn)行收集并且將其濃縮至大約0.5mg/mL。由BMS、H77C和J4L6S株獲得的NS3/4A蛋白酶配合物的純度，通過SDS-PAGE和質(zhì)譜分析，一般斷定大于90％。
所述酶通常貯存在-80℃下，在用于測定緩沖液中之前將其融化在冰上并且進(jìn)行稀釋。用于NS3/4A蛋白酶測定法中的基質(zhì)適宜的為RET S1(共振能量傳遞酯肽基質(zhì)；AhaSpec，Inc.cat#_22991)(FRET肽)，Taliani等人描述在Anal.Biochem.240(2)6067(1996)中。這種肽的序列大概地以NS4A/NS4B天然切割位點(diǎn)為基礎(chǔ)，只是在該切割位點(diǎn)上存在的是酯鍵而不是酰胺鍵。在本發(fā)明化合物不存在或者存在下，將肽基質(zhì)與三種重組體NS3/4A配合物中的一種一起進(jìn)行培養(yǎng)，并且利用Cytofluor Series 4000對熒光反應(yīng)產(chǎn)物的形成進(jìn)行實(shí)時跟蹤。所用試劑如下所列HEPES和甘油(超純)可以得自于GIBCO-BRL。二甲亞砜(DMSO)得自于Sigma。β-巰基乙醇得自于Bio Rad。
測定緩沖液50mM HEPES，pH7.5；0.15M NaCl；0.1％Triton；15％甘油；10mM BME?；|(zhì)2μM最終濃度(自在DMSO中的2mM備用溶液20，貯存在-20℃)。HCV NS3/4A型1a(1b)2～3nM最終濃度(自在25mM HEPES中的5μM備用溶液，pH7.5，20％甘油，300m.M NaCl，0.2％Triton-X100，10mM BME溶液)。對于效力接近測定極限的化合物，所述測定法可以通過將50μg/mL BSA加入到測定緩沖液中和/或?qū)⒛┒说鞍酌笣舛冉档椭?00pM而變得更為靈敏。
所述測定合意地在得自Falcon的96孔聚苯乙烯黑板(plate)中進(jìn)行。每個孔中都含有25μl在測定緩沖液中的NS3/4A蛋白酶配合物、50μl在10％DMSO/測定緩沖液中的本發(fā)明化合物和25μl在測定緩沖液中的基質(zhì)。還在相同的測定板上對對照物(沒有化合物)進(jìn)行制備。將酶配合物與化合物或者對照物溶液混合，一般在通過加入基質(zhì)啟動酶促反應(yīng)前混合1分鐘。所述測定板通常利用分光光度計(jì)(比如Cytofluor Series 4000(Perspective Biosysterns))即時讀數(shù)。對該儀器進(jìn)行合意地設(shè)置，以在25℃下讀出340nm的發(fā)射和490nm的激發(fā)。反應(yīng)通常持續(xù)大約15分鐘。
抑制百分比可以利用以下方程進(jìn)行計(jì)算。
100-[(dFinh/dFcon)×100]其中dF是熒光在曲線線性范圍上的變化。對抑制-濃度數(shù)據(jù)應(yīng)用非線性曲線擬合，并且通過利用比如Excel XI-擬合軟件的軟件利用以下方程對50％有效濃度(IC50)進(jìn)行計(jì)算y＝A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))。
酶測定合意地應(yīng)用熒光共振能量傳遞(FRET)原理，從而對HCVNS3絲氨酸蛋白酶催化的NS4A/4B裂解結(jié)果產(chǎn)生光譜響應(yīng)。所述活性一般在使用355nm激發(fā)波長和500nm發(fā)射波長的連續(xù)熒光測定中進(jìn)行測定。其起始速度可以根據(jù)10分鐘連續(xù)的由于NS3蛋白酶催化裂解事件而產(chǎn)生的增強(qiáng)熒光強(qiáng)度讀數(shù)進(jìn)行確定。
另一種酶測定法可以進(jìn)行如下材料重組體HCV NS3全長酶可以如Poliakov等人Protein Expression &purification 25(2002)363-371中所示進(jìn)行制備。
NS4A輔因子合意地具有氨基酸序列KKGSVVIVGRIVLSGK(可以市場購買到)，通常被制備成為10mM原料的DMSO溶液。
FRET-基質(zhì)(Ac-Asp-Glu-Asp(EDANS)-Glu-Glu-Abu-ψ-[COO)Ala-Ser-Lys(DABCYL)-NH2，MW1548.60，可以購自AnaSpec RET S1，CA.USA)，并且一般被制備成1.61mM原料的DMSO溶液。等分樣(50μl/管)應(yīng)當(dāng)覆蓋有鋁箔以防止直射光并且貯存在-20℃下。
參比化合物-1，序列為AcAsp-D-Gla-Leu-Ile-Cha-Cys的N-1725，MW 830.95，可以購自于BACHEM，Switzerland，并且通常被制備成2mM原料DMSO溶液以及在-20℃下貯存為等分試樣。
1M HEPES緩沖液可以購自Invitrogen Corporation，貯存在20℃。
甘油可以購自Sigma，99％純度。
CHAPS，3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲銨]-1-丙磺酸鹽可以購自Research Organics，Cleveland，OH44125，USA。MW614.90DTT，DL-二硫蘇糖醇(Cleland ReagentDL-DTT)99％純度，MW.154.2。貯存+4℃。
DMSO可以購自SDS，13124 Peypin，F(xiàn)rance。99.5％純度。
TRIS，超純(三羥甲基氨基甲烷)，可以購自于ICN BiomedicalsInc。
氯化鈉，可以得自KEBOlab AB。
N-十二烷基-β-D-麥芽糖苷，最低98％，可以購自于Sigma，貯存20℃。
設(shè)備微量滴定板(白色臨檢用酶標(biāo)板(cliniplate)，ThermoLab Systemscat no.9502890)Eppendorf移液管Biohit移液管，多次劑量Ascent熒光計(jì)，濾色片對ex 355nm，em 500nm方法試驗(yàn)方法在DMSO中制造本發(fā)明化合物的10mM備用液。在試驗(yàn)時將上述備用液貯存在室溫下，然而長期貯存時放置在-20℃。
測定緩沖液A
50mM HEPES緩沖液，pH＝7.5，40％甘油，0.1％CHAPS貯存室溫10mM DTT(在-20℃下等分貯存和在每次試驗(yàn)中加入新鮮的)測定緩沖液B25mM TRIS pH7.5，0.15M NaCl，10％甘油，0.05％正十二烷基-β-D-麥芽糖苷5mM DTT(在-20℃下等分貯存和在每次試驗(yàn)中加入新鮮的)試驗(yàn)順序反應(yīng)緩沖液(用于一個板，100個反應(yīng))的制備(緩沖液A)1、在去離子水中制備9500μl測定緩沖液(HEPES，pH＝7.5，40％甘油和0.1％CHAPS)。加入DTT給出10mM的最終濃度(每次試驗(yàn)均新近制備)。
2、迅速融化NS3蛋白酶3、加入13.6μl NS3蛋白酶和13.6μl NS4A肽并且進(jìn)行適當(dāng)混合。在室溫下將混合物放置15分鐘。
4、盡快將酶備用液放回液氮或者-80℃。
反應(yīng)緩沖液(用于一個板，100個反應(yīng))的制備(緩沖液B)5、在去離子水中制備9500μl測定緩沖液(TRIS，pH＝7.5，0.15M NaCl，0.5mM EDTA，10％甘油和0.05％正十二烷基β-D-麥芽糖苷)。加入DTT給出5mM的最終濃度(每次試驗(yàn)均新近制備)。
6、迅速融化NS3蛋白酶7、加入27.2μl NS3蛋白酶和13.6μl NS4A肽并且進(jìn)行適當(dāng)混合。在室溫下將混合物放置15分鐘。
8、盡快將酶備用液放回液氮或者-80℃中。
抑制劑/參比化合物的制備制備系列抑制劑稀釋物，在DMSO中的抑制劑被稀釋為100×最終濃度10、1、0.1、0.01和0.001μM。在100μl全部反應(yīng)體積中最終的DMSO濃度為1％。
制備系列參比化合物稀釋物，在DMSO中的N-1725被稀釋為100×最終濃度120、60、30、15、7.5和3.75nM。
每次試驗(yàn)需要八個酶對照孔。
空白孔含有95μL緩沖液(不存在NS3PR)、1μL DMSO和5μL基質(zhì)。
FRET基質(zhì)的制備用測定緩沖液將基質(zhì)備用液(1.61mM)稀釋成40μM工作液。防止暴露于光線。
測定順序使用96孔臨檢用酶標(biāo)板，每孔的總測定體積為100μl。
1、向每個孔中加入95μL測定緩沖液2、加入1μl抑制劑/參比化合物3、在室溫下預(yù)培養(yǎng)30分鐘4、通過加入5μL 40μM基質(zhì)溶液(最終濃度為2μM)起動反應(yīng)5、在ex＝355nm和em＝500nm下連續(xù)讀數(shù)20分鐘，監(jiān)控每分鐘增強(qiáng)的熒光。
6、繪制連續(xù)曲線(在線性范圍內(nèi)，8～10個時間點(diǎn))并且確定斜率，為起始速度，相對于每個單個抑制劑濃度。
7、根據(jù)酶對照數(shù)據(jù)計(jì)算％抑制作用。
結(jié)果處理將結(jié)果表示為某濃度(濾光器)下的％抑制作用或者表示為nM或者μM的Ki值。
％抑制作用的計(jì)算起始速度根據(jù)10分鐘連續(xù)的由于NS3蛋白酶催化裂解事件而增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度讀數(shù)進(jìn)行確定。與酶對照數(shù)據(jù)相比抑制劑斜率的變化給出了在某濃度下的％抑制作用。
Ki的計(jì)算對所有的抑制劑進(jìn)行處理，假設(shè)它們都服從競爭性抑制規(guī)則。
根據(jù)一系列抑制劑濃度下的抑制值對IC50值進(jìn)行計(jì)算。所述計(jì)算值用于以下方程中Ki＝IC50/(1+S/Km)在以下兩個計(jì)算程序的輔助下繪圖Grafit和Graphpad按上述測定法本發(fā)明上述例證的多種化合物都顯示了1nM至6.9微摩爾的IC50值和次微摩爾至微摩爾的ED50值。
藥物逃逸抗性形式和速率培養(yǎng)在微量滴定板上的復(fù)制子可以用于確定抗性發(fā)展速率和可以用于選出藥物逃逸突變體。進(jìn)行試驗(yàn)的化合物以約它們ED50濃度加入，每個濃度8個備份。在適當(dāng)?shù)膹?fù)制子培養(yǎng)期之后，對上清液或者溶解細(xì)胞中的蛋白酶活性進(jìn)行測定。
在隨后傳代培養(yǎng)中進(jìn)行以下操作。使在試驗(yàn)化合物對未處理受感染細(xì)胞(SIC，Starting Inhibitory Conentration)顯示＞50％蛋白酶活性的濃度下產(chǎn)生的病毒傳代至新鮮復(fù)制子培養(yǎng)物。將取自八個備份中每種內(nèi)的等分，比方說，15μl上清液轉(zhuǎn)入到?jīng)]有試驗(yàn)化合物的復(fù)制子細(xì)胞中(對照)和轉(zhuǎn)入到具有相同濃度試驗(yàn)化合物的細(xì)胞中，并且另外，兩種濃度分別高五倍。(參見下表)當(dāng)允許復(fù)制子的病毒成分在最高無毒濃度(5～40μM)下繁殖(例如，如通過HCV蛋白酶活性而測定的)時，對2～4個平行孔進(jìn)行收集并展開，以得到用于序列分析和交叉抗性的物料。
關(guān)鍵允許病毒生長抑制病毒產(chǎn)生125xSIC125xSIC25xSIC →25xSIC 5xSIC25xSIC 5xSIC → 無化合物25xSIC 5xSIC → 無化合物5xSICSICSIC→無化合物SIC 無化合物→Pass 1Pass 2 Pass 3 Pass 4 Pass 5評價(jià)對藥物逃逸突變體活性的另一種方法包括制備產(chǎn)生特異突變的突變體酶，所述特異突變用于如上所示標(biāo)準(zhǔn)Ki確定中。例如WO04/039970描述了能夠通向產(chǎn)生155、156和/或168藥物逃逸突變體的HCV蛋白酶的結(jié)構(gòu)，所述藥物逃逸突變體由BILN-2061和VX-950的選擇壓力引起。因此，可以將上述結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)成代替自然型蛋白酶的復(fù)制子載體，從而使得在細(xì)胞測定法中便于評價(jià)給定的化合物是否對給定的藥物逃逸突變體具有活性。
P450代謝作用本發(fā)明化合物經(jīng)人類細(xì)胞色素系統(tǒng)P450主要同工型的代謝作用合意地在由人類細(xì)胞色素P450cDNA(supersomes)Gentest Corp.WoburnUSA轉(zhuǎn)染的桿狀病毒感染的昆蟲細(xì)胞中進(jìn)行確定。
濃度為0.5、5和50μM的試驗(yàn)化合物在過量表達(dá)多種細(xì)胞色素P450同工型的supersomes存在下雙份培養(yǎng)，所述細(xì)胞色素P450同工型包括CYP1A2+P450還原酶、CYP2A6+P450還原酶、CYP2C9-Arg144+P450還原酶、CYP2C19+P450還原酶、CYP2D6-Val 374+P450還原酶和CYP3A4+P450還原酶。所述培養(yǎng)包括固定濃度的細(xì)胞色素P450(例如，50pmol)并且實(shí)施1小時以上。在試驗(yàn)化合物代謝作用中給定同工型的參與通過UV HPLC層析分析測定母體化合物的消失而進(jìn)行確定。
權(quán)利要求
1.式VI化合物，或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者前藥。 其中A為C(＝O)OR1、C(＝O)NHSO2R2、C(＝O)NHR3或者CR4R4’，其中R1為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基，C0-C3烷基雜環(huán)基；R2為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；R3為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、-OC1-C6烷基、-OC0-C3烷基碳環(huán)基、-OC0-C3烷基雜環(huán)基；R4為鹵素、氨基或者OH；或者R4和R4’一起為＝O；R4’為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；其中R2、R3和R4’各自任選被獨(dú)立地選自以下的1～3個取代基所取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2C(＝O)-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；Y獨(dú)立地為一個鍵或者C1-C3亞烷基；Ra獨(dú)立地為H或者C1-C3烷基；Rb獨(dú)立地為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基或者C0-C3烷基雜環(huán)基；p獨(dú)立地為1或者2；M為CR7R7′或者NRu；Ru為H或者C1-C3烷基；R7為C1-C6烷基、C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基、或者C2-C6鏈烯基，它們各自任選被1～3個鹵原子或者被氨基、-SH或者C0-C3烷基環(huán)烷基所取代；或者R7為J；R7′為H或者與R7一起形成任選被R7′a取代的C3-C6環(huán)烷基環(huán)，其中；R7′a為C1-C6烷基、C3-C5環(huán)烷基、C2-C6鏈烯基，它們各自可以任選被鹵素取代；或者R7′a為J；q′為0或者1并且k為0～3；Rz為H，或者與星號標(biāo)記的碳一起形成烯鍵；Rq為H或者C1-C6烷基；W為-CH2-、-O-、-OC(＝O)H-、-OC(＝O)-、-S-、-NH-、-NRa、-NHSO2-、-NHC(＝O)NH-或者-NHC(＝O)-、-NHC(＝S)NH-或者一個鍵；R8是包含1個或者2個各自具有4～7個環(huán)原子并且各自具有0～4個選自S、O和N的雜原子的飽和、部分飽和或者不飽和環(huán)的環(huán)系，所述環(huán)系任選通過C1-C3烷基與W間隔；或者R8為C1-C6烷基；任何上述R8基團(tuán)都可以任選被R9單取代、二取代或者三取代，其中R9獨(dú)立地選自鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2C(＝O)-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；其中所述碳環(huán)基或者雜環(huán)基部分任選被R10所取代；其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基、磺?；?C1-C3烷基)磺?；?、NO2、OH、SH、鹵素、鹵代烷基、羧基、酰氨基；Rx為H或者C1-C5烷基；或者Rx為J；T為-CHR11-或者-NRd-，其中Rd為H、C1-C3烷基或者Rd為J；R11為H，或者R11為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被獨(dú)立地選自以下的1～3個取代基所取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb、Y-NRaC(＝O)ORb；或者R11為J；J，如果存在，為單個3～10元飽和或者部分不飽和的亞烷基鏈，它從R7/R7′環(huán)烷基或者從R7連接的碳原子延伸至Rd、Rj、Rx、Ry或者R11中的一個從而形成一個大環(huán)，所述鏈任選被一至三個獨(dú)立地選自-O-、-S-或者-NR12-的雜原子所中斷，并且其中鏈中的0～3個碳原子任選被R14取代；其中R12為H、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基或者COR13；R13為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基；R14獨(dú)立地選自H、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或者C1-C6硫代烷基；m為0或者1；n為0或者1；U為O或者不存在；R15為H、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被獨(dú)立地選自以下的1～3個取代基所取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基雜環(huán)基、C0-C3烷基碳環(huán)基、NH2C(＝O)-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb和Y-NRaC(＝O)ORb；G為-O-、-NRy-、-NRjNRj-；Ry為H、C1-C3烷基；或者Ry為J；一個Rj為H并且另一個Rj為H或者J；R16為H，或者R16為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基，它們各自可以被以下基團(tuán)取代鹵素、氧代、腈、疊氮基、硝基、C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基雜環(huán)基、NH2CO-、Y-NRaRb、Y-O-Rb、Y-C(＝O)Rb、Y-(C＝O)NRaRb、Y-NRaC(＝O)Rb、Y-NHSOpRb、Y-S(＝O)pRb、Y-S(＝O)pNRaRb、Y-C(＝O)ORb、Y-NRaC(＝O)ORb。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中M為CR7R7′。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其具有部分結(jié)構(gòu)
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其具有部分結(jié)構(gòu)
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中Rq為C1-C3烷基，優(yōu)選甲基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中m為0和n為0。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中G為-NRy-或者-NRjNRj-。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中Ry或者一個Rj基團(tuán)為J，由此限定一個大環(huán)化合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中R16為H、C1-C6烷基或者C3-C6環(huán)烷基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中m為1。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中U為O。
12.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中T為CR11。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R11為C1-C6烷基、C0-C3烷基碳環(huán)基、C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜芳基，它們各自任選被鹵素、氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫代烷基、COOR14、羧基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基、雜芳基或者雜環(huán)基所取代；或者特別被羥基或者COOR14所取代。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中R11為叔丁基、異丁基、環(huán)己基、苯乙基、2，2-二甲基-丙基、環(huán)己基甲基、苯甲基、2-吡啶基甲基、4-羥基-苯甲基或者羧基丙基，特別是叔丁基、異丁基或者環(huán)己基。
15.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中Rd、Rx或者R11中的一個為J，從而限定一個大環(huán)化合物。
16.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中n為1。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的化合物，其中R15為C1-C6烷基或者C0-C3烷基碳環(huán)基，它們各自被任選取代。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的化合物，其中R15為環(huán)己基、環(huán)己基甲基、叔丁基、異丙基或者異丁基。
19.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中G為NRy或者NRjNRj，其中Ry或者一個Rj為H或者甲基，并且另一個Rj為H。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的化合物，其中R16為H、C1-C6烷基或者為5或6元雜環(huán)，特別是嗎啉、哌啶或者哌嗪。
21.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中R16為C1-C6烷基、C0-C3烷基雜環(huán)基、C0-C3烷基碳環(huán)基，它們各自任選被羥基、鹵素、氨基或者C1-C6烷氧基所取代。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的化合物，其中R16為2-茚滿醇、2，3-二氫化茚基、2-羥基-1-苯基-乙基、2-噻吩甲基、環(huán)己基甲基、2，3-亞甲二氧基芐基、環(huán)己基、芐基、2-吡啶基甲基、環(huán)丁基、異丁基、正丙基或者4-甲氧基苯基乙基。
23.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中W為-OC(＝O)-、-NRa-、-NHS(O)2-或者-NHC(＝O)-；或者特別是-OC(＝O)NH-或者-NH。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中W為-S-、一個鍵或者特別是-O-。
25.根據(jù)權(quán)利要求23或者24的化合物，其中R8是任選被取代的C0-C3烷基碳環(huán)基或者任選被取代的C0-C3烷基雜環(huán)基。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的化合物，其中C0-C3烷基部分為亞甲基或者優(yōu)選為一個鍵。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的化合物，其中R8為C0-C3烷基芳基或者C0-C3烷基雜芳基，它們各自任選被R9單取代、二取代或者三取代，其中R9為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基或者酰氨基、C0-C3烷基芳基、C0-C3烷基雜芳基、羧基、任選被R10取代的芳基或者雜芳基；其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、任選被C1-C6烷基單取代或二取代的氨基、C1-C3烷基酰胺、磺?；鵆1-C3烷基、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、羧基或者雜芳基。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的化合物，其中R9為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、二-(C1-C3烷基)氨基、C1-C3烷基酰胺、芳基或者雜芳基，所述芳基或者雜芳基任選被R10所取代；其中R10為C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、氨基、單-或者二-C1-C3烷基氨基、酰氨基、C1-C3烷基酰胺、鹵素、三氟甲基或者雜芳基。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的化合物，其中R10為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、任選被C1-C3烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基、C1-C3-烷基酰胺、鹵素或者雜芳基。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的化合物，其中R10為甲基、乙基、異丙基、叔丁基、甲氧基、氯、任選被C1-C3烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基、C1-C3烷基酰胺或者C1-C3烷基噻唑基。
31.根據(jù)權(quán)利要求26的化合物，其中R8為1-萘基甲基、2-萘基甲基、芐基、1-萘基、2-萘基或者喹啉基，各自未被取代或者被如上所定義的R9單取代或者二取代。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的化合物，其中R8為1-萘基甲基或者喹啉基，各自未被取代或者被如上所定義的R9單取代或者二取代。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的化合物，其中R8為 其中R9a為C1-C6烷基；C1-C6烷氧基；硫代C1-C3烷基；任選被C1-C6烷基取代的氨基；C0-C3烷基芳基；或者C0-C3烷基雜芳基、C0-C3烷基雜環(huán)基，所述芳基、雜芳基或者雜環(huán)任選被R10取代；其中R10為C1-C6烷基、C0-C3烷基C3-C7環(huán)烷基、C1-C6烷氧基、任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基、C1-C3烷基酰胺；和R9b為C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、二(C1-C3烷基)氨基、(C1-C3烷基)酰胺、NO2、OH、鹵素、三氟甲基、羧基。
34.根據(jù)權(quán)利要求33化合物，其中R9a為芳基或者雜芳基，它們各自任選被如上所定義的R10所取代。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的化合物，其中R9a選自 其中R10為H、C1-C6烷基或者C0-C3烷基環(huán)烷基、任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基、(C1-C3烷基)酰胺。
36.根據(jù)權(quán)利要求34的化合物，其中R9a為任選取代的苯基，優(yōu)選為被C1-C6烷基取代的苯基；C1-C6烷氧基；或者鹵素。
37.根據(jù)權(quán)利要求33的化合物，其中R8為 其中R10a為H、C1-C6烷基或者C0-C3烷基碳環(huán)基、任選被C1-C6烷基單取代或者二取代的氨基、酰氨基、(C1-C3烷基)酰胺、雜芳基或者雜環(huán)基；和R9b為C1-C6烷基、C1-C6-烷氧基、氨基、二(C1-C3烷基)氨基、(C1-C3烷基)酰胺、NO2、OH、鹵素、三氟甲基或者羧基。
38.根據(jù)權(quán)利要求33的化合物，其中R9b為C1-C6-烷氧基，優(yōu)選為甲氧基。
39.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A為C(＝O)NHSO2R2。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的化合物，其中R2為任選取代的C1-C6烷基，優(yōu)選為甲基。
41.根據(jù)權(quán)利要求39的化合物，其中R2為任選取代的C3-C7環(huán)烷基，優(yōu)選為環(huán)丙基。
42.根據(jù)權(quán)利要求39的化合物，其中R2為任選取代的C0-C6烷基芳基，優(yōu)選為任選取代的苯基。
43.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A為C(＝O)OR1。
44.根據(jù)權(quán)利要求43的化合物，其中R1為H或者C1-C6烷基，優(yōu)選為氫、甲基、乙基或者叔丁基。
45.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R7′為H，并且R7為乙基、環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基甲基或者巰基甲基，優(yōu)選為正丙基或者2，2-二氟乙基。
46.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R7和R7′一起形成螺-環(huán)丙基或者螺-環(huán)丁基環(huán)，它們?nèi)芜x被R7′a單取代或者二取代；其中R7′a為C1-C6烷基、C3-C5環(huán)烷基或者C2-C6鏈烯基，各自任選被鹵素所取代；或者R7a為J。
47.根據(jù)權(quán)利要求47的化合物，其中所述環(huán)為被R7′a取代的螺-環(huán)丙基環(huán)，其中R7′a為乙基、乙烯基、環(huán)丙基、1-或者2-溴乙基、1-或者2-氟乙基、2-溴乙烯基或者2-fluorethyl。
48.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R7為J并且R7′為H。
49.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中J為任選含有1～2個獨(dú)立地選自-O-、-S-或者-NR12-的雜原子的3～8元飽和或者不飽和亞烷基鏈，其中R12為H，C1-C6烷基，比如甲基，或者-C(＝O)C1-C6烷基，比如乙?；?br> 50.根據(jù)權(quán)利要求49的化合物，其中J為4～7-元飽和或者不飽和全碳亞烷基鏈。
51.根據(jù)權(quán)利要求49的化合物，其中J是飽和或者單不飽和的。
52.根據(jù)權(quán)利要求49的化合物，其中J具有提供含14或15個環(huán)原子的大環(huán)的大小。
53.一種藥物組合物，包含如權(quán)利要求1所定義的化合物及其藥學(xué)上可接受的載體。
54.根據(jù)權(quán)利要求53的藥物組合物，還另外包含其它選自核苷類似物聚合酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、病毒唑和干擾素的HCV抗病毒劑。
55.如權(quán)利要求1所定義的化合物在治療學(xué)中的用途。
56.如權(quán)利要求1所定義的化合物在制造用于預(yù)防或者治療黃病毒感染的藥物中的用途，所述黃病毒包括HCV。
57.一種治療或者預(yù)防比如HCV的黃病毒感染的方法，包括給藥有效量的如權(quán)利要求1所定義的化合物至患有上述感染或者處于上述感染危險(xiǎn)中的個體。
全文摘要
對抑制丙型肝炎病毒(HCV)的NS3蛋白酶的擬肽化合物進(jìn)行了描述。所述化合物具有下式其中各變量定義如說明書中所提供。所述化合物包括帶有連接至抑制劑更為遠(yuǎn)離原基質(zhì)名義切割位點(diǎn)的那些部分的新連接的碳環(huán)P2單元，相對于那些接近于切割位點(diǎn)的肽鍵該連接翻轉(zhuǎn)了末端面上的肽鍵方向。
文檔編號C07D487/04GK1914225SQ200580003423
公開日2007年2月14日 申請日期2005年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月30日
發(fā)明者A·羅森奎斯特, F·托爾斯滕松, P·-O·約翰松, I·克瓦恩斯特倫, B·薩米爾松, H·瓦爾貝里 申請人:美迪維爾公司