專利名稱：雜芳環(huán)縮氨基硫脲類化合物及其衍生物和它們?cè)谥苽淇鼓[瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及縮氨基硫脲類化合物及其衍生物和用途，具體涉及一種雜芳環(huán)縮氨基硫脲類化合物及其衍生物和它們?cè)谥苽淇鼓[瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
縮氨基硫脲類化合物具有多種生物活性。已有的文獻(xiàn)報(bào)道中曾被用于抗菌劑(Foye，W.O.；Banijamali，A.R.；Patarapanich，C.J.Pharm.Sci.1986，75，1180；Easmon，J.)、抗瘧劑(Klayman，D.L.；Scovill，J.P.；Bartosevich，J.F.；Mason，C.J.，J.Med.Chem.1979，22，1367)，、抗病毒劑(Heinisch，G.；Holzer，W.；Rosenwirth，B.；Arzneim.-Forsch.1989，39，1196)、二氫葉酸還原酶的抑制劑(Foye，W.O.；Dabade，S.V.；Kelley，C.J.；Lebrun，E.；Rapenbusch，R.Med.Chem.Res.1998，8，542)，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑(Lukevics et al，Eur.J.Med.Chem.1995，30，983)，它和金屬離子的螯合劑可應(yīng)用于治療和細(xì)胞增殖相關(guān)的疾病(Richardson，D.R.；Love-Joy，D.B.WO 2004/069801)。這些具有不同生物活性的化合物其結(jié)構(gòu)也有所不同。
另外，在文獻(xiàn)中還有關(guān)于縮基硫脲類化合物晶體結(jié)構(gòu)的報(bào)道(Usman，A.；Razak，I.A.；Chantrapromma，S.；Fun，H.-K.；Philip，V.；Sreekanth，A.；Kurup，M.R.P.Acta Crystal.C，2002，C58，0652)。
有關(guān)雜環(huán)芳基縮氨基硫脲類化合物及其衍生物除上述報(bào)道的用途之外，至今未見具有抗腫瘤活性的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題在于進(jìn)一步研究設(shè)計(jì)雜環(huán)芳基縮氨基硫脲類化合物結(jié)構(gòu)改進(jìn)及其用途。
本發(fā)明提供了通式(I)的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物 其中，A為2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基、3-異噁唑基或5-異噻唑基；B為苯基、芐基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、3-異噁唑、3-異噻唑基、4-異噻唑基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-異噻唑基；R2為氫、甲基或羥甲基；R3為C1-3烷基、氯、氟、溴、三氟甲基、甲氧基或乙氧基；n為0或1；m為0、1、2、3、4或5；X為硫或腈基氨；Y為二甲胺基、二乙胺基、N-環(huán)戊基-N-甲基氨基、嗎啉基、哌啶基、4-甲基哌嗪基、4-(2-吡啶基)哌嗪基或4-(4-吡啶基)哌嗪基；其中當(dāng)A為2-吡啶基時(shí)，B不為2-吡啶基。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選例可以是通式(II)中的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物
其中B為苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基或1，3，4-噻二唑-2-基；更優(yōu)選苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基或1，2，4-噁二唑-5-基R2為氫、甲基或羥甲基；更優(yōu)選為氫R3為甲基、氯、溴、三氟甲基或甲氧基；更優(yōu)選為氯、溴或三氟甲基n為0或1；更優(yōu)選為0m為0、1或2；更優(yōu)選為0或1X為硫；Y為二甲胺基、二乙胺基、N-環(huán)戊基-N-甲基氨基、嗎啉基、4-(2-吡啶基)-哌嗪基或4-(4-吡啶基)哌嗪基；更優(yōu)選為二甲胺基、二乙胺基或N-環(huán)戊基-N-甲基氨基；本發(fā)明特別優(yōu)選的縮氨基硫脲類化合物為N，N-二甲基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(3-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(3-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2，2-二(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲。
本發(fā)明的另一目的是提供了一種藥物組合物，它由通式(I)和(II)中的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物與可藥用載體或賦形劑組成。
本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供了通式(I)和(II)中的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
所述腫瘤包括但不限于乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、結(jié)腸癌、肺癌、胰腺癌、表皮癌、肝癌，卵巢癌，S180肉瘤或淋巴細(xì)胞性白血病。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物可以從二硫化碳、胺類、氯代乙酸鈉、N，N-二甲基硫代氨基甲酰氯，水合肼、酮等通過本領(lǐng)域的普通合成技術(shù)制得(如方法一和二)。用于合成本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物的化學(xué)品包括溶劑、試劑、催化劑、保護(hù)基團(tuán)試劑、去保護(hù)基團(tuán)試劑。所述合成還可以包括加入或去除適宜的保護(hù)基團(tuán)以最終得到所需的縮氨基硫脲類化合物的步驟。用于制備本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物的合成化學(xué)轉(zhuǎn)化和基團(tuán)保護(hù)(去保護(hù))的方法對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說是公知的，具體可參見R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Green and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3rd Ed.，John Wiley and Sons(1999)，L.Fieser and M.Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis.John Wiley andSons(1994)；and L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，JohnWiley and Sons(1995)及其后續(xù)著作。
然而合成的方法并不是特定的，其他合成方法和路線也可用于合成本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物(例如Klayman，D.L.，Bartosevich，J.F.，Griffin，T.S.，Mason，C.J.，Scovill，J.P.J.Med.Chem.1979，22，855)。這些方法中包括但不限于基于液相和固相的合成、組合化學(xué)和平行合成反應(yīng)等。
用于合成本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物的化學(xué)原料絕大部分可以通過商業(yè)途徑獲得。合成中不能夠通過購(gòu)買得到的酮類化合物可以通過經(jīng)典文獻(xiàn)的方法制備獲得(R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers(1989)；)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員遂可依據(jù)所述說明和方法順利合成。
方法一雜環(huán)芳基縮氨基硫脲類化合物的合成
Ar＝苯基，2-噻吩基，3-吡啶基，4-吡啶基，等方法二雜環(huán)芳基縮氨基硫脲類化合物的合成 Ar＝苯基，2-噻吩基，3-吡啶基，4-吡啶基，等本發(fā)明所述的縮氨基硫脲類化合物的鹽是指其在藥學(xué)上可接受的鹽，包括各種無機(jī)或有機(jī)酸鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、扁桃酸鹽和草酸鹽；各種無機(jī)或有機(jī)堿鹽如鈉鹽，鈣鹽和N-甲基-葡萄糖胺鹽。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物也可以溶劑合物(包括水合物)的形式存在。例如在重結(jié)晶時(shí)這些化合物可與一個(gè)或者若干個(gè)單位的水或者其他溶劑分子形成結(jié)晶。所述化合物的溶劑合物(包括水合物)均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
術(shù)語“C1-3烷基”是指具有1～3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基等，優(yōu)選甲基。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物可通過腸道或者非腸道途徑給藥。腸道給藥制劑包括但不限于膠囊、片劑、乳劑、水懸浮劑、膠體液、溶液、微膠囊、丸劑、錠劑、顆粒劑、粉劑。常用于片劑的可藥用載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還會(huì)加入硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑。常用于膠囊劑的可藥用載體包括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)制成口服水懸浮劑和/或乳劑時(shí)，縮氨基硫脲類化合物可懸浮或溶解于油相里并與乳化劑或懸浮劑相結(jié)合。如果需要，也可以加入一些甜味劑和/或香味劑和/或增色劑。非腸道給藥途徑包括但不限于皮下、皮內(nèi)、動(dòng)脈、靜脈、肌肉、關(guān)節(jié)、滑液、胸骨、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)、顱內(nèi)注射或滴注。其它給藥途徑可包括局部、直腸、經(jīng)鼻、經(jīng)頰、陰道、舌下、粘膜、氣管或尿道。此外，本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物還可以通過氣霧吸入或植入蓄積或針刺等方式給藥。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物可被制成無菌注射劑，如無菌水相或油相懸浮液。該懸浮液可按本領(lǐng)域的常規(guī)方法，使用適宜的分散劑或濕潤(rùn)劑(如Tween80)及懸浮劑等制得。它還可以是在可腸道外給藥的無毒稀釋劑或溶劑中的水溶液或懸浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。相關(guān)的可用載體或溶劑包括甘露醇、水、林格氏液、等滲氯化鈉等。另外，無菌的固定油(bland fixed oil)常被作為溶劑或懸浮劑的媒介，因而包括合成甘油單酯或甘油二酯在內(nèi)的多種柔和的固定油均適用。脂肪酸，如十八烯酸及其甘油酯衍生物(如橄欖油或蓖麻油，特別是其聚氧乙烯基衍生物)等可用于制備所述注射劑。所述油溶液或懸浮液還可包含一種長(zhǎng)鏈的乙醇稀釋劑或分散劑或羧甲基纖維素或類似的其他分散劑，此類物質(zhì)常用于制備可藥用乳劑和/或懸浮劑。其它一些制劑常用的表面活性劑如Tweens或Spans和/或其他類似的乳化劑或生物利用度促進(jìn)劑等也同樣可用于制備本制劑。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物可制成栓劑通過直腸給藥，方法是將其與適宜的非刺激性賦形劑混合，后者在室溫下為固體而在直腸溫度下為液體，因而該栓劑可溶解于直腸中并釋放出活性成份。此類賦形劑包括但不限于可可油、蜂蠟和聚乙烯。本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物、其可藥用鹽或溶劑合物的局部給藥制劑(如油膏)可直接用于患處。此類局部制劑含有活性成份及可藥用載體，后者包括但不限于礦物油、液體石油、白石油、丙二醇、聚氧乙烯或聚氧丙稀化合物、乳化臘或水。另外，本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物還可制成洗劑或油劑。適用的載體包括但不限于礦物油、三梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨臘酯、十六烷醇、2-十八烷醇、苯甲基乙醇或水。本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物還可制成灌腸劑等用于直腸局部給藥。局部透皮貼劑亦在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物亦可經(jīng)鼻噴霧或者吸入給藥，即按本領(lǐng)域的常規(guī)方法，使用苯甲基乙醇或其他防腐劑、吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或其他增溶劑或分散劑制得鹽溶液。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物還可通過植入給藥。采用植入給藥方式可達(dá)到在給藥對(duì)象體內(nèi)持續(xù)，定時(shí)釋放上述物質(zhì)的效果。另外，植入給藥還能在局部組織和器官定位給藥(Negrin et al.，Biomaterials 22(6)563，2001)定時(shí)釋放技術(shù)亦可用于本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物的給藥中，如基于聚合體技術(shù)的定時(shí)釋藥膠囊、緩釋技術(shù)和制劑包裹技術(shù)(如聚合體和脂質(zhì)體)等。
貼劑同樣包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。其包括基層(如聚合體、布、紗和繃帶)和本發(fā)明的藥物組合物?；鶎拥囊贿吙稍O(shè)有一保護(hù)層以防止活性成份的流出。所述貼劑還可含有一用于固定的粘合劑，后者可以是一種自然的或者合成的物質(zhì)，當(dāng)其與給藥對(duì)象的皮膚接觸時(shí)可暫時(shí)粘附于皮膚上。粘合劑可以是防水的。
“可藥用載體”不會(huì)破壞本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物、其可藥用鹽或溶劑合物的藥學(xué)活性，同時(shí)其有效用量，即能夠起到藥物載體作用時(shí)的用量對(duì)人體無毒?！翱伤幱幂d體”包括但不限于離子交換材料、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物傳遞系統(tǒng)(SEDDS)如d-α-維生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯、吐溫(Tweens)或其他類似聚合介質(zhì)等藥物制劑用的表面活化劑、血清蛋白如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、氨基乙酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸部分甘油酯混合物、水、鹽、電解質(zhì)如硫酸鹽精蛋白、磷酸氫二納、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、硅膠、硅酸鎂等。聚乙烯吡咯酮、纖維素物質(zhì)、聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙稀酸酯、乙烯-聚氧乙烯-嵌段聚合物和羊毛酯、環(huán)糊精如α-、β-及γ-環(huán)糊精或其經(jīng)化學(xué)修飾的衍生物如2-和3-羥丙基-β-環(huán)糊精等羥烷基環(huán)糊精或其他可溶性衍生物等均可用于促進(jìn)本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物的藥物傳遞。
本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物的抗腫瘤活性已通過適宜的體外試驗(yàn)(in vitro assay)以及體內(nèi)試驗(yàn)(in vivo assay)得以驗(yàn)證，后者是對(duì)患有腫瘤的動(dòng)物用藥后評(píng)價(jià)其治療效果。在此基礎(chǔ)上，還可以確定出適宜的劑量范圍和給藥途徑。本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物在人體的用量可以根據(jù)其給藥途徑、患者的年齡和體重、腫瘤的類型及嚴(yán)重程度的不同而有所不同，對(duì)成人來講，其日劑量可以是0.1～100mg/kg，可一次或多次給藥。
本發(fā)明優(yōu)選的縮氨基硫脲類化合物包括但不限于N，N-二甲基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(3-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(3-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2，2-二(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-溴苯基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2，4-二氯苯基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(5-三氟甲基-2-吡啶基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-嘧啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-吡嗪基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(3-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(4-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲N，N-二乙基-N’-[2，2-二(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(2-吡啶基)-2-(2-嘧啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(2-吡啶基)-2-(2-吡嗪基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二乙基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；
N，N-二乙基-N’-[2-(5-三氟甲基-2-吡啶基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(3-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(4-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2，2-二(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(5-三氟甲基-2-吡啶基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(2-噁唑基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(2-噻唑基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；和N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2-(1，2，4-噁二唑-5-基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲。
表1列舉了本發(fā)明中具有代表性的雜環(huán)芳基縮氨基硫脲類化合物及其衍生物表1
上述化合物的結(jié)構(gòu)式如下
本發(fā)明人檢測(cè)了從S00111到S00341這一系列化合物，發(fā)現(xiàn)了它們對(duì)L1210癌細(xì)胞具有明顯的抑制作用。之后，本發(fā)明人又用其中的S00115化合物對(duì)十多種不同的癌細(xì)胞及S180實(shí)驗(yàn)小鼠的抑制作用進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)S00115對(duì)所有多種癌細(xì)胞具有明顯抑制作用。
迄今為止，本發(fā)明人所獲得的從S00111到S00341這一系列化合物對(duì)體外癌株以及對(duì)動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)均顯示了其良好的抗腫瘤活性。
這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明化合物的分子結(jié)構(gòu)與其抑癌活性之間具有非常緊密的聯(lián)系。根據(jù)這種緊密的構(gòu)效關(guān)系，本發(fā)明的縮氨基硫脲類化合物及其衍生物均具有良好的抗腫瘤活性。
以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。但并不僅限于此。
實(shí)施例1 2-吡啶基-苯甲酮的合成室溫下將2-腈基吡啶(104克，1摩爾)的四氫呋喃(200毫升)溶液滴入到新制備的苯基格氏試劑(1.5升乙醚-四氫呋喃溶液，1摩爾)中，混合物攪拌過夜。將20％的氯化銨水溶液(600毫升)加入后再攪拌2小時(shí)，然后用乙酸乙酯萃取(3×500毫升)。萃取液用無水硫酸鈉干燥后過濾濃縮至干即得產(chǎn)品可直接用于下一步(實(shí)施例4)。
實(shí)施例2 2-吡啶基-2-噻吩基甲酮的合成如實(shí)施例1，將新制成的2-噻吩基格氏試劑(從2-溴噻吩用常規(guī)方法制備)與2-腈基吡啶反應(yīng)即可得產(chǎn)物(直接用于實(shí)施例5)。
實(shí)施例3 N，N-二甲基-N’-氨基硫脲的合成在室溫下，將二硫化碳(3.8克，50毫摩爾)滴入氫氧化鈉(2.4克，60毫摩爾)和二甲基胺(5.45克，33％水溶液，40毫摩爾)的水溶液(50毫升)中。反應(yīng)物攪拌2小時(shí)后，滴加氯乙酸鈉(5.8克，50毫摩爾)水溶液(30毫升)并繼續(xù)攪拌20小時(shí)。反應(yīng)物用稀HCl溶液酸化至pH＝3，將沉淀物過濾得4.2克中間體。將該中間體與氫氧化鈉(0.9克，20毫摩爾)，水合肼(2毫升，85％)和水(12毫升)混合，加熱回流4小時(shí)，冷卻后有固體析出。過濾后將固體物溶于熱二氯甲烷，再過濾除去濾渣，濃縮濾液得到粗品，再將粗品在乙醇中重結(jié)晶得純品0.8克。
實(shí)施例4 N，N-二甲基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲的合成2-吡啶基-苯甲酮(0.9克，5毫摩爾)和N，N-二甲基-N’-氨基硫脲(0.6克，5毫摩爾)在二氯甲烷(10毫升)里混合并在室溫下攪拌過夜。薄層板層析(TLC)顯示反應(yīng)完全后將反應(yīng)混合物濃縮至干。所得固體經(jīng)乙醇重結(jié)晶二次后即得純品產(chǎn)物(1.0克，70％產(chǎn)率)，熔點(diǎn)124-126℃.經(jīng)高效液相色質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)表明純度高于99％，質(zhì)荷比為284.9[M+1].300兆核磁結(jié)果如下14.46ppm(S，1H)，8.75(m，1H)，7.79(m，1H)，7.56-7.59(m，2H)，7.26-7.41(m，5H)，3.44 & 3.46(S，6H)。
實(shí)施例5 N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲的合成如實(shí)施例4從2-吡啶基-2-噻吩基甲酮(0.95克，5毫摩爾)制得1.24克純品，86％產(chǎn)率，熔點(diǎn)130-131℃.經(jīng)高效液相色質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)表明純度高于99％，質(zhì)荷比為289.0[M-1].300兆核磁結(jié)果如下14.2ppm(S，0.56H)，13.15(S，0.44H)，8.76-8.83(m，1H)，7.68-7.90(m，3H)，7.25-7.45(m，2H)，7.0-7.20(m，1H)，3.44(S，6H)。
實(shí)施例6 N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(3-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲的合成如實(shí)施例5從2-吡啶基-3-噻吩基甲酮(0.95克，5毫摩爾)制得1.0克純品，69％產(chǎn)率，熔點(diǎn)119-121℃.經(jīng)高效液相色質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)表明純度高于95％，質(zhì)荷比為291.0[M+1].300兆核磁結(jié)果如下14.2ppm(S，0.56H)，13.15(S，0.44H)，8.76-8.83(m，1H)，7.68-7.90(m，3H)，7.25-7.45(m，2H)，7.0-7.20(m，1H)，3.44(S，6H)。
實(shí)施例7 S00111～S00340的體外抗腫瘤作用研究實(shí)驗(yàn)材料1.人腫瘤細(xì)胞株及其培養(yǎng)L1210(小鼠淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞，該細(xì)胞株由上海醫(yī)工院實(shí)驗(yàn)室凍存和傳代。
人肝癌(QGY)、人卵巢癌(Ho-8910)、人大細(xì)胞肺癌(NCI-H460)、人慢性髓原白血病(K562)、人乳腺癌(Bcap-37)等細(xì)胞均購(gòu)自中科院生化細(xì)胞研究所。細(xì)胞于含10％小牛血清(上海緯群生物技術(shù)有限公司)的RPMI-1640(Invitrogen)培養(yǎng)基中，在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)。
2.受試藥物S00111、S00112、S00114、S00115、S00178、S00340由桑迪亞公司提供。
3.其他試劑MTT及DMSO等均為Sigma公司產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)方法受試藥物對(duì)上述腫瘤細(xì)胞株的細(xì)胞毒性通過MTT法測(cè)得。具體步驟如下1.樣品制備將受試藥物溶解于二甲亞砜中，得到濃度為10mg/ml的溶液。再用PBS作梯度稀釋，得到濃度分別為1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml、0.1μg/ml、0.01μg/ml的稀釋樣品。
2.將稀釋好的樣品加入平底96孔板中，每孔10μL，每點(diǎn)作兩個(gè)平行測(cè)試。將DMSO相應(yīng)作梯度稀釋后加入板中，作為對(duì)照。
3.細(xì)胞經(jīng)胰酶消化并洗滌后懸浮于含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，經(jīng)胎盤藍(lán)染色排除法計(jì)活細(xì)胞數(shù)，并調(diào)節(jié)細(xì)胞懸浮液密度至2×105細(xì)胞/ml。
4.在平底96孔板中，每孔加入90微升細(xì)胞，于37℃、5％CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
5.將加入細(xì)胞的平底96孔板在37℃、5％CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中保溫48小時(shí)。
6.每孔中加入10μl5mg/mlMTT溶液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫3～4小時(shí)。
7.每孔加入100μl DMSO，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫過夜，使生成的甲簪晶體充分溶解。測(cè)定492nm光吸收值。
8.根據(jù)光吸收值計(jì)算受試藥物處理后細(xì)胞相對(duì)存活率。計(jì)算公式如下
9.通過Xlift軟件計(jì)算受試藥物對(duì)各腫瘤細(xì)胞的IC50。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果見下表。
表2.樣品S00111～S00340對(duì)L1210的體外增殖抑制作用
注本次試驗(yàn)中由于CDDP溶解的不好，因此CDDP的IC50值略有偏高。
表3.樣品S00178對(duì)QGY、Ho8910和Bcap-37抑制作用
表4化合物S00115對(duì)上述腫瘤細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下
表5化合物S00340對(duì)上述腫瘤細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下
實(shí)施例8.S00115小鼠抑瘤試驗(yàn)一、試驗(yàn)?zāi)康囊孕∈骃180肉瘤為模型，對(duì)S00115的抗腫瘤作用進(jìn)行初步研究。
二、試驗(yàn)內(nèi)容S00115對(duì)小鼠S180肉瘤的生長(zhǎng)抑制作用1、試驗(yàn)樣品樣品S00115，使用時(shí)用酒精和枸櫞酸助溶，再生理鹽水配制為所需濃度。
對(duì)照品注射用環(huán)磷酰胺(CTX)，上海華聯(lián)制藥有限公司，批號(hào)020806。配制時(shí)用生理鹽水溶解。
2、動(dòng)物和瘤株動(dòng)物昆明種小鼠50只，雄性，體重20±1g，由上海醫(yī)藥工業(yè)研究動(dòng)物房提供。合格證號(hào)滬動(dòng)合格證字107號(hào)。
瘤株S180腹水瘤小鼠1只，由上海醫(yī)藥工業(yè)研究藥理室傳代維持。
3、試驗(yàn)方法S180腹水瘤小鼠，無菌條件下抽取腹水，記數(shù)細(xì)胞，用生理鹽水稀釋為1-2×107個(gè)/ml，按0.2ml/只給小鼠腋下皮下接種。次日將小鼠隨機(jī)均分為7組，每組6只。
根據(jù)初測(cè)毒結(jié)果，設(shè)置S00115靜脈給藥劑量為2、1、0.5mg/kg進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
對(duì)照品環(huán)磷酰胺采用腹腔注射途徑給藥，劑量為30mg/kg×7d。
另設(shè)空白對(duì)照組。
動(dòng)物接種次日開始按體重給藥，靜脈注射0.5ml/20g，連續(xù)10天，接種后第11天處死，取瘤塊稱重，計(jì)算抑瘤率。結(jié)果判定根據(jù)以下公式
1.4結(jié)果2mg/kg抑瘤率為81.11％；1mg/kg抑瘤率為61.48％；0.5mg/kg抑瘤率為50.68％；S00115抑制S180荷瘤小鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。
表6、樣品對(duì)小鼠S180實(shí)體瘤的抑制作用
實(shí)施例9含有本發(fā)明的化合物S00115的片劑按照本領(lǐng)域的已知方法制備片劑，每片含有下述成分
S00115 1mg乳糖70mg硬脂酸鎂3mg聚乙烯吡咯烷酮 7mg合計(jì)81mg如果需要，片劑可用羥丙基甲基纖維素、滑石和著色劑進(jìn)行膜包覆。
實(shí)施例10-14含有本發(fā)明化合物S00111、S00112、S00178或S00340的片劑方法同實(shí)例9，但將實(shí)例9的化合物S00115分別以化合物S00111、S00112、S00114、S00178或S00340替找。
實(shí)施例15含有本發(fā)明的化合物S00115的膠囊按照本領(lǐng)域已知的方法制備膠囊劑，每粒膠囊中含有下述成分S00115 1mg乳糖70mg玉米淀粉25mg硬脂酸鎂1mg聚乙烯吡咯烷酮 4mg合計(jì)101mg實(shí)例16-21含有本發(fā)明化合物S00111、S00112、S00114、S00178、S00340或S00341的膠囊方法同實(shí)例15，但將實(shí)例15的化合物S0115分別以化合物S00111、S00112、S00114、S00178、S00340或S00341替代。
實(shí)施例22含有本發(fā)明的化合物S00115的粉針劑可按如下方法制備將S00115 1.0mg加異丙醇和蒸餾水溶解，用0.22um的微孔濾膜過濾，無菌條件下，分別裝于10ml西林瓶中，轉(zhuǎn)盤，預(yù)冷凍(低于熔點(diǎn)10～20℃)，放入低于-45℃的冷凍箱中，出結(jié)晶后升華干燥，出箱，軋蓋，即可。
實(shí)例23-28含有本發(fā)明化合物S00111、S00112、S00114、S00178、S00340或S00341的粉針劑方法同實(shí)例21，但將實(shí)例21的化合物S00115分別以化合物S00111、S00112、S00114、S00178、S00340或S00341替代。
權(quán)利要求
1.一種通式(I)的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物 其中，A為2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基、3-異噁唑基或5-異噻唑基；B為苯基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、3-異噁唑、3-異噻唑基、4-異噻唑基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-2-基或5-異噻唑基；R2為氫、甲基或羥甲基；R3為C1-3烷基、氯、氟、溴、三氟甲基、甲氧基或乙氧基；n為0或1；m為0、1、2、3、4或5；X為氧、硫或腈基氨；且Y為二甲胺基、二乙胺基、N-環(huán)戊基-N-甲基氨基、嗎啉基、哌啶基、4-甲基哌嗪基、4-(2-吡啶基)哌嗪基或4-(4-吡啶基)哌嗪基；其中當(dāng)A為2-吡啶基時(shí)，B不為2-吡啶基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的縮氨基硫脲類化合物，其特征在于其中所述A為2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-5-基或1，3，4-噻二唑-2-基；B為苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基或1，3，4-噻二唑-2-基；R2為氫；R3為甲基、氯、溴、三氟甲基或甲氧基；n為0或1；m為0、1或2；X為硫；Y為二甲胺基、二乙胺基、N-環(huán)戊基-N-甲基氨基、嗎啉基、4-(2-吡啶基)哌嗪基或4-(4-吡啶基)哌嗪基；其中A為2-吡啶基時(shí)，B不為2-吡啶基。
3.一種通式(II)的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物 其中B為苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基、3-噠嗪基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噻二唑-3-基或1，3，4-噻二唑-2-基；更優(yōu)選苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基或1，2，4-噁二唑-5-基；R2為氫、甲基或羥甲基；R3為甲基、氯、溴、三氟甲基或甲氧基；n為0或1；m為0、1或2；X為硫；Y為二甲胺基、二乙胺基、N-環(huán)戊基-N-甲基氨基、嗎啉基、4-(2-吡啶基)-哌嗪基或4-(4-吡啶基)哌嗪基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的縮氨基硫脲類化合物，其特征在于其中所述B為苯基、2-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-噁唑基、2-噻唑基、2-嘧啶基、2-吡嗪基或1，2，4-噁二唑-5-基；n為0；m為0或1；且Y為二甲胺基、二乙胺基或N-環(huán)戊基-N-甲基氨基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的縮氨基硫脲類化合物，其特征在于該化合物為N，N-二甲基-N’-[2-苯基-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(3-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-吡啶基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(3-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲；N，N-二甲基-N’-[2-(4-三氟甲基苯基)-2-(2-噻吩基)-1-氮雜烯基]-硫脲；或N-甲基-N-環(huán)戊基-N’-[2，2-二(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的縮氨基硫脲類化合物，其特征在于該化合物為N，N-二甲基-N’-[2-(2-噻吩基)-2-(2-吡啶基)-1-氮雜烯基]-硫脲。
7.一種如權(quán)利要求1和3所述的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于其中所述腫瘤為乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、結(jié)腸癌、肺癌、胰腺癌、表皮癌、肝癌，卵巢癌，S180肉瘤或淋巴細(xì)胞性白血病。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，其中所述的藥物為注射劑型或口服劑型。
10.一種藥物組合物，其特征在于該藥物組合物由權(quán)利要求1-6所述的任意一項(xiàng)的縮氨基硫脲類化合物及其鹽或溶劑合物與藥用載體或賦形劑組成。
全文摘要
本發(fā)明公開了縮氨基硫脲類化合物及其衍生物和它們?cè)谥苽淇鼓[瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的化合物經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)，顯示了其對(duì)腫瘤有較好的抑制效果，例如對(duì)小鼠S180實(shí)體瘤的抑制作用可達(dá)81.1％。本發(fā)明的化合物可以制成片劑、膠囊劑或注射劑等多種劑型。
文檔編號(hào)C07D409/06GK1891701SQ200510027600
公開日2007年1月10日 申請(qǐng)日期2005年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月7日
發(fā)明者王曉川, 齊銘 申請(qǐng)人:桑迪亞醫(yī)藥技術(shù)(上海)有限責(zé)任公司