專利名稱：紫杉醇衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新一代紫杉醇衍生物、其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
癌癥作為現(xiàn)代社會(huì)威脅人類生命最為嚴(yán)重的疾病之一，盡管在過去三十年來對(duì)它的防治取得了許多重大的突破，但遠(yuǎn)未達(dá)到將其攻克的程度。紫杉醇(Taxol)作為上個(gè)世紀(jì)70年代從美洲紅豆杉樹皮中分離獲得的一種復(fù)雜二萜化合物，被認(rèn)為是當(dāng)前癌癥治療中最重要和最有效的藥物，它是通過與微管蛋白結(jié)合促進(jìn)微管的裝配并抑制微管的解聚，從而中止細(xì)胞的有絲分裂，達(dá)到抑制腫瘤生長的目的。紫杉醇自1992年被首次批準(zhǔn)用于晚期卵巢癌和乳腺癌治療以來，目前在臨床上已經(jīng)被廣泛用于卡波斯肉瘤、非小細(xì)胞肺癌、胃腸道癌以及睪丸癌等多種癌癥的治療。
盡管紫杉醇在癌癥治療中已經(jīng)顯示出十分顯著的作用，但是從它的衍生物中找到療效更好、毒性更低的化合物也是十分可能的。一個(gè)顯著成功的例子就是多烯紫杉醇(Docetaxel)的發(fā)現(xiàn)，它是將紫杉醇C13位側(cè)鏈上N上的苯甲酰基換成叔丁氧羰基，C10位乙酰氧基變成羥基的人工修飾產(chǎn)物。它比紫杉醇具有更高的抗癌活性和生物有效性，臨床上尤其在對(duì)乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌和前列腺癌的治療中顯示更為優(yōu)越的療效。目前正在進(jìn)行其它癌癥諸如胃腸道癌、頭頸部癌、卵巢癌和食道癌的II期或III期臨床實(shí)驗(yàn)。
但是紫杉醇和多烯紫杉醇在臨床應(yīng)用中也存在著一些問題，如紫杉醇會(huì)引起神經(jīng)損傷、肌肉疼痛或心率紊亂而多烯紫杉醇則導(dǎo)致口腔疼痛或白血球的劇烈減少。另外其它的一些不太嚴(yán)重的副作用也都存在在這兩個(gè)藥物中。因此，研究發(fā)展出與這兩個(gè)藥物不同的，同時(shí)具有更少副作用和更高藥理活性的新一代紫杉醇類似物是十分重要的。
紫杉醇(Taxol)多烯紫杉醇(Docetaxel)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明旨在提供新的紫杉醇類似物及其它們的制備方法及其應(yīng)用。
本發(fā)明提供了下面通式(1)代表的新型紫杉醇衍生物 式中R代表氫原子或者乙酰基；R1代表由單個(gè)或多個(gè)鹵素(包括氟、氯、溴、碘)取代的C3-C10的支鏈烷基；R2代表芳香基或取代芳香基；R3代表氫或鹵素取代基(包括氟、氯、溴、碘)；R4和R5代表單獨(dú)選擇的羥基保護(hù)基，包括那些能增加紫杉醇衍生物水溶性的基團(tuán)，所述的羥基保護(hù)基推薦是H或-CO-X-Y，其中X代表-(CH2)n-(n＝1-3)和-CH＝CH-；Y代表-COOH和藥學(xué)上可接受的鹽、-SO3H和藥學(xué)上可接受的鹽、-NR6R7R8和藥學(xué)上可接受的鹽，R6、R7和R8可以分別是氫、烯基和C1-C6的烷基。
我們特別發(fā)現(xiàn)當(dāng)R1為2-氟代叔丁基，R2為3-氟代苯基時(shí)具有比多烯紫杉醇更高的細(xì)胞毒活性(＞30倍)。
推薦在本發(fā)明的上述通式(1)中，R1代表的碳原子數(shù)為3～10的含有一個(gè)或多個(gè)鹵素(包括氟、氯、溴、碘)取代基的支鏈烷基，尤其是3-5的含有一個(gè)或多個(gè)鹵素(包括氟、氯、溴、碘)取代基的支鏈烷基，可以列舉例如氯代叔丁基、氟代叔丁基、二氟代叔丁基和三氟代叔丁基。R2代表的是也可以有取代基的芳香基，所述的取代芳香基上的取代基推薦為鹵素，C1～C6的烷氧基，氨基；所述的芳香基推薦為苯基。所述的鹵素是氟、氯、溴、碘；尤其推薦R2代表鹵素、甲氧基、氨基取代的芳香基?？梢粤信e例如苯基、氟代苯基、氯代苯基和甲氧基苯基。R3代表氫或鹵素取代基，可以列舉例如氟和氯取代基。
進(jìn)一步推薦R、R3、R4和R5是氫，R1是氟代叔丁基，R2是3-氟苯基；或者R、R3、R4和R5是氫，R1是二氟代叔丁基，R2是3-氟苯基；或者R、R4和R5是氫，R1是氟代叔丁基，R2是苯基，R3是氟取代基。
上述通式(1)所示的本發(fā)明的新型紫杉醇衍生物可用例如，下述方法制備，但本發(fā)明化合物的制備方法不限于這些方法。
即，使下面通式(3)所示的化合物 式中R、R2和R3的定義與前述相同，在有或沒有堿存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與下面通式(4)所示的化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R1定義與前述相同。在該制備方法中所使用的堿的例子包括例如有機(jī)堿，如三乙胺、吡啶、N，N-二異丙基乙胺、4-二甲氨基吡啶、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯和1，2，2，6，6-五甲基哌啶等，或無機(jī)堿，如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉和碳酸氫鉀等。在該制備方法中所使用的溶劑可以是任何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì)抑制反應(yīng)就可以。這樣的溶劑包括鹵代烴溶劑，如二氯甲烷、1，2-二氯甲烷和氯仿等，芳族烴類溶劑、如苯和甲苯等，非質(zhì)子傳遞性溶劑，如丙酮，乙腈、N，n-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜和六亞甲基磷酰三胺等，酯類溶劑，如乙酸甲酯和乙酸乙酯等，醚類溶劑，如四氫呋喃。乙醚和1，4-二惡烷等，有機(jī)堿溶劑，如吡啶、甲基吡啶。盧替啶和可立定等，或這些溶劑的混合物。該反應(yīng)可在冰冷卻下至200℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。
隨后得到的如通式(5)所示的產(chǎn)物，其中R、R1、R2和R3與前述定義相同。通式(5)所示的化合物與在有酸存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與鋅粉進(jìn)行反應(yīng)可得到通式(1)所示的化合物。該制備方法中所使用的酸包括 鹽酸、磷酸、醋酸、硫酸等。該制備方法中所使用的溶劑可以是任何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì)抑制反應(yīng)就可以。這樣的溶劑包括鹵代烴溶劑，如二氯甲烷、1，2-二氯甲烷和氯仿等，芳族烴類溶劑、如苯和甲苯等，質(zhì)子性溶劑，如醇類溶劑；非質(zhì)子傳遞性溶劑，如丙酮，乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜和六亞甲基磷酰三胺等；該反應(yīng)在冰冷卻下至100℃的溫度范圍進(jìn)行。
通式(3)所示的原料化合物的制備可以用通式(6)所示的化合物 式中R和R2的定義與前述相同，參照文獻(xiàn)方法(J.D.Bouyzat et al.，Tetrahedron Lett.1993，34(38)，6049-6052)在堿與縮合劑存在下，在無水甲苯溶劑中與下面通式(7)所示的化合物進(jìn)行反應(yīng)(Scheme1)。
通式(6)所示的原料化合物的制備可參照文獻(xiàn)方法(Ojima I.，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，3423-3428)，經(jīng)由天然紫杉樹葉中提取分離所得的10-去乙酰巴卡亭III(10-deacylbaccatin III)和巴卡亭III(baccatin III)為原料制備。
Scheme 1通式(4)所示的化合物可由R1OH(R1與前定義相同)在有機(jī)堿的催化下，在乙醚或二氯甲烷溶劑中與光氣或三光氣(雙三氯甲基碳酸酯)反應(yīng)。反應(yīng)溫度可在-100℃至50℃之間。這里的有機(jī)堿可以是三乙胺、吡啶、N，N-二異丙基乙胺、4-二甲氨基吡啶、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯和1，2，2，6，6-五甲基哌啶等。
通式(1)所代表的抗癌劑的水溶性可通過在C-2’和C-7位上引入合適的功能基來實(shí)現(xiàn)，如R4和R5。為提高水溶性，R4和R5可以單獨(dú)是氫和-CO-X-Y，這里X代表-(CH2)n-(n＝1-3)和-CH＝CH-；Y代表-COOH和藥學(xué)上可接受的鹽、-SO3H和藥學(xué)上可接受的鹽、-NR6R7R8和藥學(xué)上可接受的鹽，R6、R7和R8可以分別是氫、烯基和C1-C6的烷基。根據(jù)以上功能基制備紫杉醇水溶性衍生物已有文獻(xiàn)(Ojima et al.，WO 9732578(1997)；Kingston et al.，U.S.Patent 5059699(1991))報(bào)道，因而對(duì)于行內(nèi)人員進(jìn)行這樣的修飾是完全不困難的。
本發(fā)明的化合物可用于制備藥物，尤其是抑制腫瘤的藥物。對(duì)通式(1)所示的化合物的體外抑制腫瘤細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)表明，其對(duì)人卵巢癌細(xì)胞的半數(shù)有效抑制濃度(IC50)為小于0.1ng/ml，而作為陽性對(duì)照的多烯紫杉醇，IC50為3.8ng/ml。
本發(fā)明提供了一類新的紫杉醇衍生物及其制備方法和應(yīng)用。其中有的化合物具有比多烯紫杉醇更高的細(xì)胞毒活性(＞30倍)，因而可用于制備含有這種衍生物作為有效成分的藥物。
具體實(shí)施例方式
以下參照參考例和實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于這些例子。
實(shí)施例1如Scheme 1所示，根據(jù)文獻(xiàn)(Gunda I.Georg et al.，J.Org.Chem.，2001，66，8211-8214)4’-取代肉桂酸(R3＝H，F(xiàn))首先在氯化氫催化下定量乙酯化，然后進(jìn)行已知條件的Sharpless氨羥基化反應(yīng)(a.Sharpless，K.B.et al.，Angew.Chem.1997，109，1580-1583.Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.1997，36，1483-1486.(b)Nicolaou，K.C.Angew.Chem.1998，110，2872-2878.A ngew.Chem.，Int.Ed.1998，37，2708-2714.)，以良好收率(＞90％)。和高對(duì)映選擇性(ee＞94％)得到羥氨化產(chǎn)物3。酸水解選擇性去除氨基上的乙酰基再用叔丁氧羰基保護(hù)高收率得到4。4再和2，2-二甲氧基丙烷在對(duì)甲苯磺酸吡啶鹽催化下反應(yīng)得到全保護(hù)的惡唑啉碳酸酯5，隨后氫氧化鋰堿水解即可高收率得到C13側(cè)鏈前體(7)-1，R＝H和(7)-2，R＝F。
Scheme 2實(shí)施例2如Scheme 3所示，10-去乙酰巴卡亭III(10-DAB，6)(Marder-Karsenti，R.，et al.，J.Org.Chem.1997，62，6631-6637)首先與三乙基氯硅烷(TESCl)和咪唑在二甲基甲酰胺(DMF)中反應(yīng)以96％收率得到7，10，13-tri-TE S-DAB 7，然后用紅鋁(Red-Al)選擇性去除3位苯甲酸酯基，再用3-取代的苯甲酸(R＝F，OMe)在二異丙基碳化二亞胺(DIC)和對(duì)二甲氨基吡啶(DMAP)的催化下酯化3-羥基(收率＞70％)得到9(Ojima I.Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，3423-3428)。9經(jīng)常規(guī)方法用氫氟酸脫去硅烷保護(hù)基，再用氯甲酸三氯乙酯選擇性保護(hù)C7和C10羥基得到(6)。
7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟苯甲酰)-10-去乙酰巴卡亭III(6)-11H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.11(s，3H)，1.13(s，3H)，1.69(m，1H)，2.00(m，1H)，2.15(s，3H)，2.29(m，2H)，2.30(s，3H)，2.58(1H，m)，3.96(1H，d，J＝6.6Hz)，4.13，4.31(each 1H，ABq，J＝8.4Hz)，4.60，4.91(each 1H，AB q，J＝12.0Hz)，4.78(2H，AB q，J＝11.7Hz)，4.89(1H，m)，5.00(1H，d，J＝9Hz)，5.59(2H，m)，6.25(1H，s)，7.31(1H，m)，7.46(1H，m)，7.77(1H，m)，7.88(1H，m)；7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-甲氧基苯甲酰)-10-去乙酰巴卡亭III(6)-2。
1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.12(s，3H)，1.13(s，3H)，1.70(m，1H)，2.02(m，1H)，2.15(s，3H)，2.27(m，2H)，2.32(s，3H)，2.59(1H，m)，3.98(1H，d，J＝6.6Hz)，4.14，4.31(each 1H，ABq，J＝8.4Hz)，4.60，4.92(each 1H，ABq，J＝12.0Hz)，4.76(2H，ABq，J＝11.7Hz)，4.88(1H，m)，5.00(1H，d，J＝9Hz)，5.61(2H，m)，6.24(1H，s)，7.15(1H，d，J＝8.1Hz)，7.38(1H，t，J＝7.8Hz)，7.65(1H，s)，7.73(1H，d，J＝7.5Hz) Scheme 3
實(shí)施例37，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-甲氧基苯甲酰)-3’N-去叔丁氧羰基多烯紫杉醇(通式3所示)在250mL干燥三口瓶中加入2.8g化合物(6)-1(3.1mmol)，3g化合物(7)-1(9.3mmol)，1.8g DCC(8.7mmol)，200mg DMAP和150mL無水甲苯。90℃反應(yīng)0.5小時(shí)，減壓蒸干，殘余物經(jīng)硅膠柱層析，正己烷∶乙酸乙酯(3∶1)洗脫得通式(8)中R為2，2，2-三氯乙氧羰基，R2為3-氟苯基的化合物(8)-1(白色無定形粉末，3.0g，收率80％)。
1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.24(s，3H)，1.30(s，6H)，1.35(s，9H)，1.84-1.96(m，2H)，1.99(s，3H)，1.93(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.60(1H，m)，3.91(1H，d，J＝6.3Hz)，4.11，4.29(each 1H，ABq，J＝9.1Hz)，4.48(1H，d，J＝6.6Hz)，4.61，4.91(each 1H，ABq，J＝11.7Hz)，4.78(2H，s)，4.91(1H，m)，5.10(1H，m)，5.58(1H，dd，J＝7.5，10.8Hz)，5.67(1H，d，J＝7.2Hz)，6.24(1H，s)，6.29(1H，t，J＝9.0Hz)，7.25(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.97(1H，d，J＝7.6Hz)。
取化合物(8)-11.5g(1.25mmol)溶于50mL 98％的甲酸中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4小時(shí)。加水200mL稀釋，碳酸氫鈉中和，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干得化合物7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-3’N-去叔丁氧羰基多烯紫杉醇(3)-1(白色無定形粉末，1.2g，收率91％)。
1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.11(s，3H)，1.20(s，3H)，1.84-1.96(m，2H)，1.83(s，3H)，1.93(s，3H)，2.24(m，2H)，2.37(s，3H)，2.58(1H，m)，3.39(1H，d，J＝4.5Hz)，3.91(1H，d，J＝7.0Hz)，4.20，4.31(each 1H，ABq，J＝8.5Hz)，4.61，4.91(each 1H，ABq，J＝11.7Hz)，4.68(1H，m)，4.78(2H，s)，4.78(1H，m)，5.30(1H，m)，5.56(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.6Hz)，7.25(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.456(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.7Hz)，7.987(1H，d，J＝7.8Hz)根據(jù)相同的方法，高收率制得了通式3所代表的化合物。
7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-甲氧基苯甲酰)-3’N-去叔丁氧羰基多烯紫杉醇(3-2)1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.24(s，3H)，1.84-1.96(m，2H)，1.85(s，3H)，1.95(s，3H)，2.25(m，2H)，2.38(s，3H)，2.59(1H，m)，3.40(1H，d，J＝4.5Hz)，3.94(1H，d，J＝7.0Hz)，4.21，4.31(each 1H，ABq，J＝8.5Hz)，4.61，4.91(each 1H，ABq，J＝12.0Hz)，4.68(1H，m)，4.78(2H，s)，4.78(1H，m)，5.30(1H，m)，5.56(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.6Hz)，7.15(1H，d，J＝8.1Hz)，7.38(1H，t，J＝7.8Hz)，7.65(1H，s)，7.73(1H，d，J＝7.5Hz)實(shí)施例4氯甲酸氟代叔丁酯(4-1)在100mL的干燥三口瓶中加入1.96g三光氣(6.7mmol)，40mL乙醚和2.2g化合物氟代叔丁醇(20mmol)，干冰浴冷至-40℃。攪拌下，吡啶(1.6g，20mmol)溶于15mL乙醚液緩慢滴入反應(yīng)瓶中。升至0℃繼續(xù)攪拌20小時(shí)?？焖俪闉V，濾液冰水洗滌，無水硫酸鈉干燥，0℃下加壓蒸去乙醚得無色液體(4-1)2mL(冰箱放置備用)。
根據(jù)相同的方法，高收率制得通式4中的化合物氯甲酸二氟代叔丁酯(4-2)氯甲酸三氟代叔丁酯(4-3)實(shí)施例57，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-1)將化合物(3-1)1.0g(0.95mmol)溶于120mL乙酸乙酯∶水(1；1)中，冰水浴下攪拌滴加氯甲酸氟代叔丁酯308mg(2mmol)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)兩小時(shí)。分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，合并有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，殘余物經(jīng)硅膠柱層析，石油謎∶乙酸乙酯(2∶1)洗脫得7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-1)(白色無定形粉末，0.8g，收率72％)。
根據(jù)相同的方法，高收率制得了化合物(5-2)、(5-3)、(5-4)。
7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-1)1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.24(s，3H)，1.35(s，6H)，1.84-1.96(m，2H)，1.79(s，3H)，1.93(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.58(1H，m)，3.39(1H，d，J＝4.5Hz)，3.91(1H，d，J＝7.0Hz)，4.20，4.31(each 1H，AB q，J＝8.5Hz)，4.25(2H，m)，4.61，4.91(each1H，AB q，J＝11.7Hz)，4.68(1H，m)，4.78(2H，s)，4.78(1H，m)，5.30(1H，m)，5.56(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.6Hz)，7.25(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.97(1H，d，J＝7.6Hz)7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟代苯甲酰)-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-二氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-2)1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.28(s，3H)，1.37(s，6H)，1.74-1.84(m，2H)，1.86(s，3H)，1.98(s，3H)，2.26(m，2H)，2.35(s，3H)，2.58(1H，m)，3.36(1H，d，J＝4.5Hz)，3.91(1H，d，J＝7.0Hz)，4.20，4.31(each 1H，ABq，J＝8.5Hz)，4.61，4.91(each 1H，ABq，J＝11.7Hz)，4.68(1H，m)，4.78(2H，s)，4.78(1H，m)，5.30(1H，m)，5.56(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.22(2H，t，J＝57.0Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.6Hz)，7.26(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.97(1H，d，J＝7.6Hz)。
7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-三氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-3)1H NM R(CDCl3，400Hz)δ1.15(s，3H)，1.26(s，3H)，1.36(s，6H)，1.84-1.94(m，2H)，1.85(s，3H)，1.94(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.58(1H，m)，3.36(1H，d，J＝4.5Hz)，3.91(1H，d，J＝7.0H z)，4.20，4.31(each 1H，ABq，J＝8.5Hz)，4.61，4.91(each 1H，ABq，J＝11.7Hz)，4.67(1H，m)，4.77(2H，s)，4.79(1H，m)，5.31(1H，m)，5.58(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.8Hz)，7.26(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.97(1H，d，J＝7.6Hz)。
7，10-二(2，2，2-三氯乙氧羰基)-2-去苯甲酰-2-(3-甲氧基苯甲酰)-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(5-4)1H NMR(CDCl3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.24(s，3H)，1.356(s，6H)，1.84-1.96(m，2H)，1.79(s，3H)，1.93(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.58(1H，m)，3.39(1H，d，J＝4.5Hz)，3.91(1H，d，J＝7.0Hz)，4.20，4.31(each 1H，ABq，J＝8.5Hz)，4.25(2H，m)，4.61，4.91(each1H，ABq，J＝11.7Hz)，4.68(1H，m)，4.78(2H，s)，4.78(1H，m)，5.30(1H，m)，5.56(2H，m)，5.70(1H，d，J＝7.2Hz)，6.23(1H，s)，6.25(1H，t，J＝8.6Hz)，7.14(1H，d，J＝8.1Hz)，7.37(1H，t，J＝7.8Hz)，7.38(5H，m)，7.64(1H，s)，7.70(1H，d，J＝7.5Hz)。
實(shí)施例63’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇取440mg化合物5-1和鋅粉800mg加入甲醇20mL，冰醋酸3mL，60℃反應(yīng)0.5小時(shí)。減壓蒸干甲醇，殘余加乙酸乙酯(60mL)稀釋，1％HCl溶液，飽和碳酸氫鈉和食鹽水依次洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱層析，二氯甲烷∶甲醇(40∶1)洗脫得化合物3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(1-1)(白色無定形粉末，250mg，81％)?；衔?1-2)、(1-3)、(1-4)的制備方法同前，原料分別用相應(yīng)的化合物(5-2)、(5-3)、(5-4)代替化合物(5-1)。
2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(1-1)1H NMR(CD3COCD3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.19(s，3H)，1.36(s，6H)，1.70(s，3H)，1.82(m，1H)，1.89(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.45(1H，m)，3.91(1H，d，J＝8.3Hz)，4.16(2H，s)，4.27(1H，m)，4.34-4.48(2H，m)，4.61(1H，m)，4.96(1H，d，J＝8.0Hz)，5.18(1H，m)，5.24(1H，s)，5.64(1H，d，J＝7.2Hz)，6.15(1H，t，J＝9.0Hz)，7.28(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.93(1H，d，J＝7.6Hz)。
2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-二氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(1-2)1H NM R(CD3COCD3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.19(s，3H)，1.35(s，6H)，1.70(s，3H)，1.82(m，1H)，1.89(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.45(1H，m)，3.91(1H，d，J＝8.3Hz)，4.16(2H，s)，4.27(1H，m)，4.62(1H，d，J＝4.2Hz)，4.97(1H，d，J＝8.5Hz)，5.18(1H，m)，5.25(1H，s)，5.64(1H，d，J＝7.2Hz)，6.13(2H，t，J＝56.8Hz)，6.15(1H，t，J＝89Hz)，7.28(1H，t，J＝7.3Hz)，7.38(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.93(1H，d，J＝7.6Hz)。
2-去苯甲酰-2-(3-氟代)苯甲酰-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-三氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(1-3)1H NM R(CD3COCD3，400Hz)δ1.12(s，3H)，1.17(s，3H)，1.33(s，6H)，1.71(s，3H)，1.83(m，1H)，1.86(s，3H)，2.24(m，2H)，2.35(s，3H)，2.46(1H，m)，3.93(1H，d，J＝8.3Hz)，4.16(2H，s)，4.27(1H，m)，4.62(1H，d，J＝4.2Hz)，4.94(1H，d，J＝8.5Hz)，5.17(1H，m)，5.27(1H，s)，5.64(1H，d，J＝7.2Hz)，6.17(1H，t，J＝8.9Hz)，7.29(1H，t，J＝7.3Hz)，7.39(2H，t，J＝7.9Hz)，7.46(3H，m)，7.63(1H，m)，7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.96(1H，d，J＝7.6Hz)。
2-去苯甲酰-2-(3-甲氧基苯甲酰)-3’N-去叔丁氧羰基-3’N-氟代叔丁氧羰基多烯紫杉醇(1-4)1H NMR(CD3COCD3，400Hz)δ1.13(s，3H)，1.19(s，3H)，1.36(s，6H)，1.70(s，3H)，1.82(m，1H)，1.89(s，3H)，2.25(m，2H)，2.37(s，3H)，2.45(1H，m)，3.91(1H，d，J＝8.3Hz)，4.16(2H，s)，4.27(1H，m)，4.34-4.48(2H，m)，4.61(1H，m)，4.96(1H，d，J＝8.0Hz)，5.18(1H，m)，5.24(1H，s)，5.64(1H，d，J＝7.2Hz)，6.15(1H，t，J＝9.0Hz)，7.14(1H，d，J＝8.1Hz)，7.37(1H，t，J＝7.8Hz)，7.38(5H，m)，7.64(1H，s)，7.70(1H，d，J＝7.5Hz)。
實(shí)施例7最終產(chǎn)物對(duì)SK-OV-3人卵巢癌細(xì)進(jìn)行了體外療效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法SRB法；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)藥物濃度分1-0.0001(g/ml)5組。根據(jù)療效評(píng)價(jià)計(jì)算抑制率.觀察在不同濃度下藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長的抑制情況。抑制率＝(對(duì)照組值-用藥組值)/對(duì)照組值×100％。

從生物活性測試結(jié)果可以看出，化合物1-1(通式1中R、R3、R4和R5是氫，R1是氟代叔丁基，R2是3-氟苯基)和1-2(通式1中R、R3、R4和R5是氫，R1是二氟代叔丁基，R2是3-氟苯基)的活性是多烯他賽(多烯紫杉醇)的34倍以上。因而它們有可能成為潛在的新一代高效抗癌劑。
權(quán)利要求
1.一種具有如下分子式的紫杉醇衍生物， 式中R代表氫原子或者乙?；籖1代表鹵素取代的支鏈烷基；R2代表芳香基或取代芳香基；R3代表氫或鹵素取代基；R4和R5代表相同或不同的羥基保護(hù)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的一種紫杉醇衍生物，其特征是所述的R2代表取代芳香基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種紫杉醇衍生物，其特征是所述的鹵素取代的支鏈烷基是C3～C10的；所述的取代芳香基上的取代基為鹵素，C1～C6的烷氧基，氨基；所述的芳香基是苯基。所述的鹵素是氟、氯、溴、碘；所述的羥基保護(hù)基是能增加紫杉醇衍生物水溶性的基團(tuán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種紫杉醇衍生物，其特征是所述的R2代表鹵素、甲氧基、氨基取代的芳香基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種紫杉醇衍生物，其特征是所述的羥基保護(hù)基是H或-CO-X-Y，其中X代表-(CH2)n-(n＝1-3)和-CH＝CH-；Y代表-COOH和藥學(xué)上可接受的鹽、-SO3H和藥學(xué)上可接受的鹽、-NR6R7R8和藥學(xué)上可接受的鹽，R6、R7和R8可以分別是氫、烯基和C1-C6的烷基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的一種紫杉醇衍生物，其中R、R3、R4和R5是氫，R1是氟代叔丁基，R2是3-氟苯基；或者R、R3、R4和R5是氫，R1是二氟代叔丁基，R2是3-氟苯基；或者R、R4和R5是氫，R1是氟代叔丁基，R2是苯基，R3是氟取代基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種紫杉醇衍生物的制備方法，其特征是使下面通式(3)所示的化合物 在有或沒有堿存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與下面通式(4)所示的化合物進(jìn)行反應(yīng) 隨后得到的如通式(5)所示的產(chǎn)物與在有酸存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與鋅粉進(jìn)行反應(yīng)可得到通式(1)所示的化合物。 式中R、R1、R2和R3的定義與權(quán)利要求1相同。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征是通式(3)所示的原料化合物的制備可以用通式(6)所示的化合物 在堿與縮合劑存在下，在無水甲苯溶劑中與下面通式(7)所示的化合物進(jìn)行反應(yīng)(Scheme1)。 式中R、R2和R3的定義與權(quán)利要求7相同。
9.權(quán)利要求1或2所述的一種紫杉醇衍生物的用途，其特征是用于制備藥物。
10.權(quán)利要求9所述的用途，其特征是用于制備抗腫瘤的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的紫杉醇衍生物，式中其中R代表氫原子或者乙酰基；R
文檔編號(hào)C07D305/00GK1709882SQ20051002753
公開日2005年12月21日 申請(qǐng)日期2005年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月1日
發(fā)明者林國強(qiáng), 徐亮, 孫遜, 楊細(xì)文 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所