專利名稱：大環(huán)內(nèi)酰胺類化合物和它們作為藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的大環(huán)化合物、它們的制備方法、它們作為藥物的用途和包含它們的藥物組合物。
更具體地講，本發(fā)明涉及下式化合物 其中R1為CH(Re)C(=O)N(Ra)Rb或(CH2)kN(Rc)Rd，其中k為0、1或2，Ra和Rb，獨(dú)立為氫或任選取代的(C1-8)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基或雜芳基(C1-4)烷基基團(tuán)，Rc和Rd，獨(dú)立為氫或任選取代的(C1-8)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基、雜芳基(C1-4)烷基、苯并二氫吡喃-4-基、異苯并二氫吡喃-4-基、苯并二氫噻喃-4-基、異苯并二氫噻喃-4-基、1，1-二氧代-1λ*6*-苯并二氫噻喃-4-基、2，2-二氧代-2λ*6*-異苯并二氫噻喃-4-基、1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-異喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-萘-1-基、1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[e][1，2]噻嗪-4-基、2，2-二氧代-1，2，3，4-四氫-2λ*6*-苯并[c][1，2]噻嗪-4-基、1，1-二氧代-3，4-二氫-1H-1λ*6*-苯并[c][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，2-二氧代-3，4-二氫-2H-2λ*6*-苯并[e][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，3，4，5-四氫-苯并[b]氧雜環(huán)庚二烯-5-基或1，3，4，5-四氫-苯并[c]氧雜環(huán)庚二烯-5-基基團(tuán)，或者Ra和Rb，或Rc和Rd，與它們連接的氮一起，形成任選取代的吡咯烷基、1-哌啶基、4-嗎啉基或哌嗪基基團(tuán)；以及
Re為任選取代的(C1-8)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、(C3-7)環(huán)烷基或(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基；R2為氫或(C1-4)烷基；R3為氫、(C1-6)烷基或任選取代的(C1-6)烷基OC(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基OC(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、芳基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、雜芳基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、(C1-4)烷基C(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基C(＝O)NH、芳基C(＝O)NH、芳基(C1-4)烷基C(＝O)NH、雜芳基C(＝O)NH或雜芳基(C1-4)烷基C(＝O)NH基團(tuán)；U為鍵、CF2、CF2CF2、CHF、CHFCHF、亞環(huán)丙-1，2-基、(C1-3)亞烷基氧基、(C1-8)亞烷基、NRg或芳環(huán)或雜芳環(huán)，該環(huán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素、(C1-4)烷氧基、羥基或(C1-4)烷基，因此Z和V彼此在鄰或間-位，其中Rg為氫、(C1-8)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；V為CH＝CH、亞環(huán)丙-1，2-基、CH2CH(OH)、CH(OH)CH2或CRhRhCRhRh，其中每個(gè)Rh獨(dú)立為氫、氟或(C1-4)烷基；W為(C1-6)亞烷基、O、S、S(＝O)2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、N(Rf)C(＝O)、C(＝O)NRf或NRf，其中Rf為氫或(C1-4)烷基；X為任選取代的(C1-4)烷叉基、(C1-4)亞烷基、(C3-7)亞環(huán)烷基、哌啶-二基、吡咯烷-二基、苯并噻唑-4，6-二基、苯并唑-4，6-二基、1H-苯并三唑-4，6-二基、咪唑并[1，2-a]吡啶-6，8-二基、苯并[1，2，5]二唑-4，6-二基、苯并[1，2，5]噻二唑-4，6-二基、1H-吲哚-5，7-二基、1H-吲哚-4，6-二基、1H-苯并咪唑-4，6-二基或1H-吲唑-1，6-二基基團(tuán)或任選取代的芳環(huán)或雜芳環(huán)，Y和C(＝O)NR2彼此在間位，Y為鍵、O、S(＝O)2、S(＝O)2NRg、N(Rg)S(＝O)2、NRg、C(Rg)OH、C(＝O)NRg、N(Rg)C(＝O)、C(＝O)N(Rg)O或ON(Rg)C(＝O)，其中Rg為氫、(C1-8)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；Z為O、CH2、CF2、CHF、亞環(huán)丙-1，2-基或鍵；以及
n為0-5，包含于大環(huán)中的環(huán)原子的數(shù)目為14、15、16或17，為游離堿形式或酸加成鹽形式。
由于式I化合物和它們的鹽中存在不對(duì)稱碳原子，所以這些化合物可以以光學(xué)活性形式或光學(xué)異構(gòu)體的混合物如外消旋混合物形式存在。所有的光學(xué)異構(gòu)體和它們的混合物，包括外消旋混合物，均包含于本發(fā)明。
鹵素意指氟、溴、氯或碘。
烷基、烷氧基或環(huán)烷基基團(tuán)或部分上的任選的取代基，或者當(dāng)Ra和Rb，或Rc和Rd，與它們連接的氮一起形成取代的吡咯烷基、1-哌啶基、4-嗎啉基或哌嗪基基團(tuán)時(shí)，所提到的取代基可以為1-3個(gè)獨(dú)立選自下列的基團(tuán)羥基、羥基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷硫基、(C1-4)烷氧基羰基、(C1-4)烷基羰基氧基、(C1-4)烷基羰基、(C1-4)烷基磺酰基、氰基、氧代和(C3-7)環(huán)烷基。
任選在下列基團(tuán)上被取代苯并二氫吡喃-4-基、異苯并二氫吡喃-4-基、苯并二氫噻喃-4-基、異苯并二氫噻喃-4-基、1，1-二氧代-1λ*6*-苯并二氫噻喃-4-基、2，2-二氧代-2λ*6*-異苯并二氫噻喃-4-基、1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-異喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-萘-1-基、1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[e][1，2]噻嗪-4-基、2，2-二氧代-1，2，3，4-四氫-2λ*6*-苯并[c][1，2]噻嗪-4-基、1，1-二氧代-3，4-二氫-1H-1λ*6*-苯并[c][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，2-二氧代-3，4-二氫-2H-2λ*6*-苯并[e][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，3，4，5-四氫-苯并[b]氧雜環(huán)庚二烯-5-基或1，3，4，5-四氫-苯并[c]氧雜環(huán)庚二烯-5-基、苯并噻唑-4，6-二基、苯并唑-4，6-二基、1H-苯并三唑-4，6-二基、咪唑并[1，2-a]吡啶-6，8-二基、苯并[1，2，5]二唑-4，6-二基、苯并[1，2，5]噻二唑-4，6-二基、1H-吲哚-5，7-二基、1H-吲哚-4，6-二基、1H-苯并咪唑-4，6-二基、1H-吲唑-1，6-二基、芳基或雜芳基環(huán)或基團(tuán)，所述取代基為1-4個(gè)、特別是1-3個(gè)獨(dú)立選自下列的基團(tuán)羥基、(C1-8)烷基、(C1-6)烷氧基、S(＝O)2(C1-4)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基、氰基、硝基、三氟甲基、鹵素、芳基、雜芳基和任選取代的氨基甲?；?br> 當(dāng)Rc和/或Rd為取代的芳基或雜芳基，任選的取代基可以進(jìn)一步為1-3個(gè)選自下列的基團(tuán)芐基氧基、苯氧基、S(＝O)2NH2、N(H)S(＝O)2(C1-3)烷基、羧基、(C1-4)烷氧基羰基、(C1-4)烷基氨基甲?；?、(C1-4)烷基磺酰基、(C1-4)烷基羰基氧基、(C1-4)烷基羰基、羥基(C1-4)烷基和任選取代的氨基。
在烷叉基、亞烷基、亞烷氧基、亞環(huán)烷基、哌啶-二基或吡咯烷-二基基團(tuán)或部分上的任選的取代基可以為1-3個(gè)獨(dú)立選自下列的基團(tuán)羥基、羥基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷硫基、(C1-4)烷氧基羰基、(C1-4)烷基羰基氧基、(C1-4)烷基羰基、(C1-4)烷基磺?；⑶杌?、氧代、羧基、氨基甲?；?C3-7)環(huán)烷基。
在氨基基團(tuán)上的任選的取代基可以為1或2個(gè)獨(dú)立選自下列的基團(tuán)(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基羰基、芳基(C1-4)烷氧基羰基和雜芳基(C1-4)烷氧基羰基。
在氨基甲?；系娜芜x的取代基可以為1或2個(gè)選自下列的基團(tuán)(C1-4)烷基和(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基。
芳基為萘基，或優(yōu)選苯基。
雜芳基為芳族5-或6-元環(huán)，其中1、2或3個(gè)環(huán)原子為獨(dú)立選自O(shè)、N和S的雜原子，如噻唑基、唑基，或優(yōu)選為吡啶基。
具有多于1個(gè)碳原子的非環(huán)碳基團(tuán)或部分為直鏈或支鏈。
除非特別指出，含碳基團(tuán)、部分或分子包含1-8個(gè)、優(yōu)選1-6個(gè)、更優(yōu)選1-4個(gè)、最優(yōu)選1-2個(gè)碳原子。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物，其中(1)R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb，且Ra、Rb和Re具有前文所述一個(gè)定義；(2)R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb，Rb和Re具有前文所述一個(gè)定義且Ra為氫；(3)R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb，Ra和Re具有前文所述一個(gè)定義且Rb為(C1-8)烷基、優(yōu)選(C1-5)烷基，更優(yōu)選n-丁基；(4)R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb，Ra和Rb具有前文所述一個(gè)定義且Re為(C1-8)烷基、優(yōu)選(C1-4)烷基，更優(yōu)選甲基；
(5)R1為(CH2)kN(Rc)Rd且Rc、Rd和k具有前文所述一個(gè)定義；(6)R1為(CH2)kN(Rc)Rd，Rc和Rd具有前文所述一個(gè)定義且k為o；(7)R1為(CH2)kN(Rc)Rd，k和Rd具有前文所述一個(gè)定義且Rc為氫；(8)R1為(CH2)kN(Rc)Rd，k和Rc具有前文所述一個(gè)定義且Rd為任選取代的芳基(C1-4)烷基、雜芳基(C1-4)烷基或苯并二氫吡喃-4-基基團(tuán)，優(yōu)選任選取代的苯基(C1-4)烷基、吡啶基(C1-4)烷基或苯并二氫吡喃-4-基基團(tuán)，更優(yōu)選任選取代的苯基(C1-2)烷基、吡啶基(C1-2)烷基或苯并二氫吡喃-4-基基團(tuán)，更優(yōu)選苯基(C1-2)烷基、吡啶基(C1-2)烷基或苯并二氫吡喃-4-基基團(tuán)，任選被1-4個(gè)獨(dú)立選自(C1-8)烷基、(C1-4)烷氧基、(C3-7)環(huán)烷基和鹵素的基團(tuán)取代，優(yōu)選苯基(C1-2)烷基被1或2個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基取代(C1-8)烷基、(C1-4)烷氧基和(C3-7)環(huán)烷基，優(yōu)選3-(C1-8)烷基芐基，更優(yōu)選3-異丙基芐基，優(yōu)選3-(C1-4)烷氧基芐基，更優(yōu)選3-甲氧基芐基，優(yōu)選3-(C3-7)環(huán)烷基芐基，更優(yōu)選3-環(huán)丙基芐基，優(yōu)選2-(3，4-二(C1-4)烷氧基苯基)乙基，更優(yōu)選2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基，優(yōu)選吡啶基(C1-2)烷基被鹵素或(C3-7)環(huán)烷基單取代，優(yōu)選未取代的2-(吡啶-4-基)乙基，優(yōu)選5-鹵代吡啶-3-基甲基，更優(yōu)選5-溴吡啶-3-基甲基，優(yōu)選5-(C3-7)環(huán)烷基吡啶-3-基甲基，更優(yōu)選5-環(huán)丙基吡啶-3-基甲基，優(yōu)選2-(C3-7)環(huán)烷基吡啶-4-基甲基，更優(yōu)選2-環(huán)丙基吡啶-4-基甲基，優(yōu)選苯并二氫吡喃-4-基被1-4個(gè)、更優(yōu)選被1-3個(gè)獨(dú)立選自下列基團(tuán)的取代基取代(C1-8)烷基，更優(yōu)選(C1-4)烷基，優(yōu)選2，2，6-三(C1-4)烷基苯并二氫吡喃-4-基，更優(yōu)選2，2-二甲基-6-異丙基-苯并二氫吡喃-4-基；(9)R2為氫；(10)R3為氫、(C1-6)烷基或任選取代的(C1-6)烷基OC(＝O)NH、(C1-4)烷基C(＝O)NH或雜芳基C(＝O)NH基團(tuán)，優(yōu)選氫、(C1-4)烷基或未取代的(C1-6)烷基OC(＝O)NH、(C1-4)烷基C(＝O)NH或吡啶基C(＝O)NH基團(tuán)，
更優(yōu)選氫、(C1-2)烷基或未取代的(C1-4)烷基OC(＝O)NH、(C1-2)烷基C(＝O)NH或吡啶基C(＝O)NH基團(tuán)，優(yōu)選氫，優(yōu)選乙基，優(yōu)選叔-丁氧基羰基氨基，優(yōu)選乙?；被?，優(yōu)選吡啶-4-基羰基氨基；(11)U為鍵、(C1-3)亞烷氧基、(C1-8)亞烷基、NH或芳族環(huán)，所述環(huán)任選被(C1-4)烷基取代，Z和V彼此位于鄰-或間-位，優(yōu)選鍵、(C1-3)亞烷氧基、(C1-8)亞烷基、NH或1，2-或1，3-亞苯基基團(tuán)，所述基團(tuán)任選被(C1-4)烷基取代，更優(yōu)選鍵、(C1-3)亞烷氧基、(C1-6)亞烷基、NH、未取代的1，2-亞苯基或1，3-亞苯基，任選被(C1-4)烷基單取代，優(yōu)選鍵，優(yōu)選CH2，優(yōu)選CH2CH2，優(yōu)選CH2CH2CH2，優(yōu)選CH(CH3)CH2，優(yōu)選CH2CH(CH3)，優(yōu)選CH(CH3)，優(yōu)選CH(CH2CH3)，優(yōu)選CH(CH2CH2CH3)CH2，優(yōu)選OCH2CH2CH2，優(yōu)選NH，優(yōu)選未取代的1，2-亞苯基，優(yōu)選未取代的1，3-亞苯基，優(yōu)選5-甲基-1，3-亞苯基；(12)V為CH＝CH或優(yōu)選CH2CH2；(13)W為(C1-6)亞烷基，優(yōu)選(C1-4)亞烷基，更優(yōu)選(C1-2)亞烷基，優(yōu)選CH(CH3)；(14)X為任選取代的(C1-4)亞烷基或任選取代的芳環(huán)或雜芳環(huán)，Y和C(＝O)NR2互相位于間位，優(yōu)選未取代的(C1-4)亞烷基或1，3-亞苯基或2，4-亞吡啶基基團(tuán)，所述基團(tuán)可以被下列基團(tuán)任選取代(C1-4)烷基、(C1-6)烷氧基、S(＝O)2(C1-4)烷基或雜芳基，更優(yōu)選未取代的(C1-3)亞烷基或1，3-亞苯基或2，4-亞吡啶基基團(tuán)，所述基團(tuán)任選被下列基團(tuán)單取代(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、S(＝O)2(C1-4)烷基或唑基，優(yōu)選CH2，優(yōu)選CH2CH2，優(yōu)選CH2CH2CH2，優(yōu)選CH2CH(CH3)，優(yōu)選CH(CH3)，優(yōu)選未取代的1，3-亞苯基，優(yōu)選5-甲基-1，3-亞苯基，優(yōu)選5-甲氧基-1，3-亞苯基，優(yōu)選5-乙氧基-1，3-亞苯基，優(yōu)選5-異丙氧基-1，3-亞苯基，優(yōu)選5-甲基磺?；?1，3-亞苯基，優(yōu)選5-唑-2-基-1，3-亞苯基，優(yōu)選6-甲基-2，4-亞吡啶基，優(yōu)選6-甲氧基-2，4-亞吡啶基，優(yōu)選6-乙氧基-2，4-亞吡啶基；(15)Y為O、S(＝O)2、N(Rg)S(＝O)2、NRg、C(＝O)NRg、N(Rg)C(＝O)或ON(Rg)C(＝O)，其中Rg為氫、(C1-8)烷基或(C3-7)環(huán)烷基，優(yōu)選O、S(＝O)2、N(Rg)S(＝O)2、NH、C(＝O)NRg、N(Rg)C(＝O)或ON(Rg)C(＝O)，其中Rg為氫、(C1-4)烷基或環(huán)丙基，優(yōu)選O，優(yōu)選S(＝O)2，優(yōu)選N(CH3)S(＝O)2，優(yōu)選NH，優(yōu)選C(＝O)NH，優(yōu)選C(＝O)NCH3，優(yōu)選N(H)C(＝O)，優(yōu)選N(CH3)C(＝O)，優(yōu)選N(CH2CH3)C(＝O)，優(yōu)選N(CH2CH2CH3)C(＝O)，優(yōu)選N(環(huán)丙基)C(＝O)，優(yōu)選ON(CH2CH3)C(＝O)；(16)Z為O、CH2或鍵，優(yōu)選O，優(yōu)選CH2，優(yōu)選鍵；(17)n為0-4，優(yōu)選0，優(yōu)選1，優(yōu)選2，優(yōu)選3，優(yōu)選4；(18)大環(huán)的環(huán)原子的數(shù)目為14；(19)大環(huán)的環(huán)原子的數(shù)目為15；(20)大環(huán)的環(huán)原子的數(shù)目為16；(21)大環(huán)的環(huán)原子的數(shù)目為17。
在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及下文所述實(shí)施例中的一個(gè)或多個(gè)式I化合物，它們?yōu)橛坞x堿形式或酸加成鹽形式。
另一方面，本發(fā)明涉及制備式I化合物和它們的鹽的方法，該方法包括通過復(fù)分解(metathesis)使下式化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、U、W、X、Y、Z和n如式I定義，該反應(yīng)在催化劑如釕、鎢或鉬絡(luò)合物存在下進(jìn)行，任選經(jīng)過還原、氧化或功能化產(chǎn)生的碳-碳雙鍵，然后再回收得到的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
該反應(yīng)可以根據(jù)常規(guī)方法進(jìn)行，例如可以采用實(shí)施例中所述方法進(jìn)行。
反應(yīng)混合物的處理及得到的化合物的純化可以根據(jù)已知方法進(jìn)行。
根據(jù)已知方法，采用游離堿可以制備酸加成鹽，反之亦然。
可以采用另外的常規(guī)方法制備式I化合物，所述方法是本發(fā)明的進(jìn)一步的方面，如實(shí)施例所述。
例如，式I化合物，其中R1為(CH2)kN(Rc)Rd且k為0，可以通過使下式化合物 其中R2、R3、U、V、W、X、Y、Z和n如式I定義，與式HN(Rc)Rd(IV)的胺反應(yīng)，其中Rc和Rd如式I定義，并且將這樣得到的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物回收制備。
例如式I化合物，其中R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb，可以通過使下式化合物 其中R2、R3、Re、U、V、W、X、Y、Z和n如式I定義，與式HN(Ra)Rb(VI)的胺反應(yīng)，其中Ra和Rb如式I定義，并且將這樣得到的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物回收制備。
式II、III、IV、V和VI的起始原料是已知的或可以自已知的化合物，根據(jù)常規(guī)方法如實(shí)施例中所述方法制備。
式I化合物和它們的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，下文中意指本發(fā)明藥物，當(dāng)在體外及動(dòng)物體內(nèi)測(cè)試時(shí)，呈現(xiàn)出有價(jià)值的藥理學(xué)性質(zhì)，因此可以用作藥物。
本發(fā)明藥物為天冬氨酸蛋白酶的抑制劑，可以用于治療涉及此類酶的紊亂。特別是它們可以抑制β-分泌酶，開且可以抑制β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生以及隨后的聚集為低聚體和纖維。
測(cè)試1人類BACE抑制于室溫、6nM濃度，在100mM含0.1％CHAPS的乙酸鹽緩沖液(pH4.5)中，將重組體BACE(細(xì)胞外域，表達(dá)于桿狀病毒并用標(biāo)準(zhǔn)方法純化)與各種濃度測(cè)試化合物一起溫育1小時(shí)。將合成肽底物Mca-Ser-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Lys(DNP)加至終濃度3μM，于于325nm處激發(fā)并于400nm處發(fā)射在微板分光熒光計(jì)上以1分鐘間隔記錄熒光增加20分鐘。由BACE活性抑制百分比與測(cè)試化合物濃度函數(shù)計(jì)算IC50值。
測(cè)試2人類BACE-2抑制于室溫、2.5nM濃度，在100mM乙酸鹽緩沖液(pH 4.5，含0.1％CHAPS)中，將重組體BACE-2(細(xì)胞外域，表達(dá)于桿狀病毒并用標(biāo)準(zhǔn)方法純化)與各種濃度的測(cè)試化合物一起溫育1小時(shí)。將合成肽底物Mca-Ser-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Lys(DNP)加至終濃度3μM，于325nm處激發(fā)并于400nm處發(fā)射，在微板分光熒光計(jì)上以1分鐘間隔記錄熒光增加20分鐘。由BACE-2活性抑制百分比與測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值。
測(cè)試3人類組織蛋白酶D抑制于室溫下，在100mM甲酸鈉緩沖液(pH 3.1)中，將重組體組織蛋白酶D(以原組織蛋白D形式表達(dá)于桿狀病毒，用標(biāo)準(zhǔn)方法純化，通過在甲酸鈉緩沖液pH 3.7中培養(yǎng)活化)與各種濃度的測(cè)試化合物一起溫育1小時(shí)。將合成肽底物Mca-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(DNP)-D-Arg-NH2加至終濃度2μM，于325nm處激發(fā)并于400nm處發(fā)射，在微板分光-熒光計(jì)上以1分鐘間隔記錄熒光的增加20分鐘。由組織蛋白酶D活性抑制百分比與測(cè)試化合物濃度的函數(shù)計(jì)算IC50值。
測(cè)試4淀粉狀肽1-40的細(xì)胞釋放抑制中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞用淀粉狀前體蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)染。細(xì)胞在96孔微滴量板上以密度8000個(gè)細(xì)胞/孔鋪板并在包含10％FCS的DMEM細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)24小時(shí)。將各種濃度的測(cè)試化合物加至細(xì)胞中，在測(cè)試化合物存在下培養(yǎng)細(xì)胞24小時(shí)。收集上清液，淀粉狀肽1-40的濃度用夾心ELISA確定。化合物的效力可以由抑制淀粉狀肽釋放的百分比測(cè)試化合物的濃度函數(shù)計(jì)算。
在至少一個(gè)上文所述測(cè)試中，本發(fā)明藥物顯示出的活性為濃度小于20μM。
因此，本發(fā)明藥物可以用于如治療和/或預(yù)防與β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)和血管紊亂，如神經(jīng)變性疾病如阿爾茨海默氏病、唐氏綜合征、記憶和認(rèn)知損傷、癡呆、淀粉狀蛋白神經(jīng)病、腦部炎癥、神經(jīng)和腦損傷、血管淀粉樣變性病或者伴有淀粉樣變性病的腦出血。
某些本發(fā)明藥物也可以抑制BACE2(β-點(diǎn)APP裂解酶2)或組織蛋白酶D，胃蛋白酶-型天冬氨?；鞍酌负挺?分泌酶的密切同源體。由于BACE2和CathD表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的較強(qiáng)的潛在致瘤性和轉(zhuǎn)移性密切相關(guān)，因此這些抑制劑可以用于抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。
當(dāng)然，對(duì)于上文所述適應(yīng)癥，適當(dāng)?shù)膭┝咳Q于例如所使用的化合物、宿主、給藥方式以及所治療紊亂的性質(zhì)和嚴(yán)重性。然而，通常情況下，在動(dòng)物中可以取得滿意療效的日劑量為約0.1-約100、優(yōu)選自約1-約50mg/kg動(dòng)物體重。在大體積的哺乳動(dòng)物，例如人類中，推薦的日劑量為約10-約2000、優(yōu)選約10-約200mg本發(fā)明化合物，例如，以分至多至每日4次的劑量給藥或以緩釋形式給藥。
本發(fā)明的化合物可以通過任何便利的途徑給藥，特別是腸內(nèi)，優(yōu)選口服，例如以片劑或膠囊形式給藥，或者腸胃外，例如以注射溶液或懸浮液的形式給藥。
因此，本發(fā)明也提供了的本發(fā)明化合物作為藥物，例如用于治療β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了包含本發(fā)明化合物與至少一種藥用載體或稀釋劑的藥物組合物。這類組合物可以以傳統(tǒng)方法制備。單位劑量形式包含，例如，約1-約1000、優(yōu)選約1-約500mg本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明化合物可以單獨(dú)或與其它有效治療上文所述紊亂的藥物聯(lián)合給藥。
所述藥物組合可以為單位劑量形式，每單位劑量包含預(yù)定量的兩種化合物以及適當(dāng)?shù)乃幱幂d體或稀釋劑。該組合也可以為一種包裝產(chǎn)品，其中含有兩種單獨(dú)的成分，如用于將兩種活性成分同時(shí)或分別給藥的藥包或給藥工具，其中這些藥物是分開的。
另外本發(fā)明也提供了本發(fā)明化合物用于生產(chǎn)治療任何與β-淀粉狀蛋白生成和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂的藥物中的用途。
再一方面，本發(fā)明進(jìn)一步提供了對(duì)需要這種治療的宿主治療任何與β-淀粉狀蛋白生成和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂的方法，所述方法包括給予所述宿主治療有效量的本發(fā)明的化合物。
下列實(shí)施例用于闡述但不用于限制本發(fā)明。
實(shí)施例縮寫aq. 水溶液BOC 叔-丁氧基羰基CDCl3氘化氯仿conc.濃的DBU 二氮雜雙環(huán)十一碳烯DCM 二氯甲烷DIPEA二異丙基乙胺DMPU N，N’-二甲基亞丙基脲d6-DMSO 氘化二甲基亞砜EDC.HCl 1-乙基-3-[3-(二甲基氨基)丙基]-碳二亞胺鹽酸鹽ES 電子噴霧Et2O 乙醚EtOAc 乙酸乙酯EtOH乙醇h小時(shí)
HCl鹽酸HMDS1，1，1，3，3，3-六甲基二硅胺烷HOBt羥基苯并三唑HPLC高壓液相層析LC 液相層析LHMDS 六甲基二硅氨化鋰MeCN 乙腈min 分鐘Mp 熔點(diǎn)MS 質(zhì)譜PL-CHO 聚合物負(fù)載的苯甲醛(3mmol/g)PPTS對(duì)-甲苯磺酸吡啶-Rf 保留因子(薄層層析)rt 室溫TBME叔-丁基甲醚TFA 三氟乙酸THF 四氫呋喃實(shí)施例1(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(3-甲基-芐基氨基)-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮于65℃，將67mg(0.2mmol)3(S)，4，14(R)-三甲基-16(R/S)-環(huán)氧乙基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮的92mg(0.76mmol)3-甲基-芐基胺溶液加熱2h?；旌衔镉肈CM稀釋，加入961mg PL-CHO(2.88mmol)和1滴冰乙酸，于室溫下?lián)u動(dòng)混合物4h。濾出樹脂，蒸發(fā)濾液。經(jīng)制備性薄層層析或HPLC純化殘留物，得到濃的褐色油狀物。
Rf(DCM/甲醇/乙酸＝90/9/1)0.36MS(EI)[MH]+＝460.0起始原料可以采用下述方法制備a)(3S，14R)-3，4，14-三甲基-16-環(huán)氧乙基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮于0℃，向718mg(1.91mmol)(3S，14R)-16-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮的3.8ml THF溶液中滴加入2.3ml 1M NaOH，于0℃，攪拌反應(yīng)混合物2h。加入水，混合物用DCM萃取，合并的有機(jī)層用飽和的氯化銨和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，為褐色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.52MS(EI)[MH]+＝339.3，[MNa]+＝361.3b)(3S，14R)-16-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮于室溫、氫氣氛下，在332mg 10％Pd/C存在下將1.24g(3.32mmol)(E)-(3S，14R)-16-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六碳-10-烯-2，5-二酮的33ml EtOH溶液攪拌1h。再加入催化劑(332mg)，繼續(xù)氫化4h。濾出催化劑并蒸發(fā)濾液。殘留物經(jīng)硅膠層析(DCM/甲醇95/5)純化，得到目標(biāo)化合物，為褐色泡沫(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.40MS(LC/MS)[MH]+＝375.0/377.0，[MNa]+＝396.9/398.9c)(E)-(3S，14R)-16-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六碳-10-烯-2，5-二酮于1小時(shí)內(nèi)，將1.38g(3.44mmol)庚-6-烯酸{(S)-1-[(R)-1-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基-酰胺的17ml DCM溶液滴加至146mg[1，3-雙-(2，4，6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基叉基)二氯代(苯基亞甲基)-(三環(huán)己基膦)釕](Grubbs II催化劑)的340ml DCM回流溶液中。再回流混合物1小時(shí)，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠層析(DCM/甲醇95/5)純化，得到所需產(chǎn)物，為褐色泡沫(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.39d)庚-6-烯酸{(S)-1-[(R)-1-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基-酰胺于-78℃，將3.15g(5mmol)庚-6-烯酸{(S)-1-[(R)-1-(2-氯代-乙?；?-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基-酰胺的110ml乙醇溶液加至378mg(10mmol)硼氫化鈉的30ml乙醇懸浮液中。在加入過程中，溫度保持在-75℃以下，再攪拌混合物1小時(shí)。于-78℃，反應(yīng)用25ml 1M HCl淬滅，混合物溫?zé)嶂潦覝亍Ｕ舭l(fā)乙醇，加入50ml 1M HCl，混合物用EtOAc萃取。有機(jī)層用1M HCl和半飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠層析(環(huán)己烷/EtOAc 70/30至50/50)純化得到所需產(chǎn)物，為棕色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝50/50)0.30MS(LC/MS)[MH]+＝400.9/402.9，[MNa]+＝422.9/424.9e)庚-6-烯酸{(S)-1-[(R)-1-(2-氯代-乙?；?-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲酰基]-乙基}-甲基-酰胺于-78℃，將1.9g(5.0mmol)(R)-2-[(S)-2-(庚-6-烯?；?甲基-氨基)-丙?；被鵠-4-甲基-辛-7-烯酸甲酯的37ml THF溶液冷卻，并加入1.45ml(20mmol)氯碘甲烷。滴加入LDA(15.9ml，25mmol)的1.57M THF溶液，使反應(yīng)混合物的溫度保持于-68℃以下，再繼續(xù)攪拌混合物30min。小心將反應(yīng)用7.46ml冰乙酸(130mmol)淬滅，溫度保持于-65℃以下。于-78℃，攪拌15min后，將混合物溫?zé)嶂?℃，加入75ml半飽和氯化鈉水溶液?；旌衔镉肨BME萃取，用1M碳酸氫鈉、1M亞硫酸鈉和水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝50/50)0.45MS(LC/MS)[MNa]+＝420.9/422.9f)(R)-2-[(S)-2-(庚-6-烯酰基-甲基-氨基)-丙?；被鵠-4-甲基-辛-7-烯酸甲酯于0℃，向2.63g(20.5mmol)6-庚烯酸和4.12g(26.1mmol)HOBt的100ml DCM溶液中加入4.29g(22.37mmol)EDC.HCl，10分鐘后再加入5.04g(18.64mmol)(R)-4-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-辛-7-烯酸甲酯。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌3天。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入186ml 0.5M HCl，分離水層。水層用DCM/乙醇8∶2萃取兩次，合并的有機(jī)層用1M碳酸氫鉀、水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠層析(DCM/甲醇98/2)純化，得到產(chǎn)物，為褐色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.73
MS(EI+)[MNa]+＝403.31H-NMR(400MHz，d6-DMSO)8.09-8.00(m，1H)，5.83-5.68(m，2H)，5.04-4.89(m，4H)，4.37-4.26(m，1H)，3.61(s，1.5H)，3.60(s，1.5H)，2.85-2.69(m，3H)，2.34-2.23(m，2H)，2.09-1.93(m，4H)，1.75-1.60(m，1H)，1.55-1.08(m，7H)，1.18(d，3H)，0.89-0.79(m，3H)g)(R)-4-甲基-2-((S)-2-甲基氨基-丙酰基氨基)-辛-7-烯酸甲酯于0℃，向7.84g(22.4mmol)[(S)-1-((R)-1-氰基-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲酰基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔-丁酯的67ml甲醇溶液中緩慢加入138ml的6.5MHCl的Et2O(896mmol)溶液。于室溫下，攪拌混合物1h?；旌衔镉帽±鋮s并加入水。加入89.7g(896mmol)碳酸氫鉀將反應(yīng)混合物的pH調(diào)節(jié)至pH 8?；旌衔镉肈CM萃取三次，合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。得到產(chǎn)物，為褐色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.22MS(EI)[MH]+＝271.01H-NMR(400MHz，d6-DMSO，2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)8.08(d，0.5H)，8.02(d，0.5H)，5.81-5.68(m，1H)，5.02-4.88(m，2H)，4.42-4.38(m，1H)，3.62(s，1.5H)，3.61(s，1.5H)，2.99-2.89(m，1H)，2.19(s，1.5H)，2.18(s，1.5H)，2.11-1.89(m，3H)，1.75-1.61(m，1H)，1.58-1.12(m，4H)，1.10(d，1.5H)，1.08(d，1.5H)，0.88(d，1.5H)，0.84(d，1.5H)h)[(S)-1-((R)-1-氰基-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲酰基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯于0℃，向5.01g(24.64mmol)BOC-N-甲基-(L)-丙氨酸和4.95g(31.36mmol)HOBt的100ml DCM溶液中加入5.15g(26.88mmol)EDC.HCl，10分鐘后再加入3.41g(22.4mmol)(R)-2-氨基-4-甲基-辛-7-烯腈。于室溫下攪拌17h后，將混合物冷卻至0℃，加入224ml 0.5M HCl，分離各層。水層用DCM/乙醇＝80/20萃取兩次，合并的有機(jī)層用1M碳酸氫鉀、水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到產(chǎn)物，為淡黃色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.66
MS(EI)[MNa]+＝360.41H-NMR(400MHz，d6-DMSO，2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)8.58(d，0.5H)，8.51(d，0.5H)，5.82-5.71(m，1H)，5.04-4.91(m，2H)，4.79-4.71(m，1H)，4.55-4.45(br m，0.5H)，4.32-4.15(br m，0.5H)，2.78(s，1.5H)，2.75(s，1.5H)，2.12-1.94(m，2H)，1.91-1.79(m，1H)，1.65-1.14(m，5H)，1.39(s，9H)，1.25(br d，3H)，0.89(d，1.5H)，0.85(m，1.5H)i)(R)-2-氨基-4-甲基-辛-7-烯腈將6.22g(116.3mmol)氯化銨和5.58g(85.7mmol)氰化鈉的36.8ml濃氫氫化銨溶液和20ml甲醇冷卻至0℃，用10分鐘吹入氨。于0℃，加入7.34g(52.6mmol)(R)-3-甲基-庚-6-烯醛的50ml甲醇溶液。于室溫下攪拌混合物2天。蒸發(fā)過量氨，將混合物冷卻至0℃，加入105ml 0.5M HCl酸化?；旌衔镉靡颐严礈靸纱尾⒑喜⒌挠袡C(jī)層再用105ml 0.5M HCl洗滌。合并酸性水溶液層，加入6M氫氧化銨水溶液調(diào)節(jié)pH至8，并用DCM萃取兩次。合并的DCM層再用水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到產(chǎn)物，為褐色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(DCM/甲醇＝98/2)0.29MS(EI)[MH]+＝153.11H-NMR(400MHz，d6-DMSO)5.84-5.70(m，1H)，4.98(d，1H)，4.90(d，1H)，5.67(br d，1H)，2.24(br s，2H)，2.12-1.90(m，2H)，1.70-1.53(m，2H)，1.48-1.32(m，2H)，1.27-1.12(m，2H)，0.91-0.83(m，3H)j)(R)-3-甲基-庚-6-烯醛于0℃，向9.06g(52.6mmol)(R)-7，7-二甲氧基-5-甲基-庚-1-烯)的50ml氯仿溶液中加入26.3ml TFA/水(1∶1)，并于8℃，攪拌混合物17h。再將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入15.5g(184mmol)碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至約8.5。加入水后，混合物用DCM萃取兩次。合并的有機(jī)提取物用水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。得到產(chǎn)物，為揮發(fā)性淡黃色油狀物，并且可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)9.77(t，1H)，5.88-5.73(m，1H)，5.09-4.93(m，2H)，2.44(dd，1H)，2.30-2.22(m，1H)，2.19-2.01(m，3H)，1.52-1.29(m，2H)，0.99(d，3H)
k)(R)-7，7-二甲氧基-5-甲基-庚-1-烯于0℃，向1.96g(5.5mmol)甲基三苯溴化的5mlTHF懸浮液中加入617mg(5.5mmol)叔-丁氧化鉀。于室溫下，攪拌混合物15min，然后冷卻至0℃，并滴加入1.59g(5mmol)(R)-6，6-二甲氧基-4-甲基-己醛的2.5mlTHF溶液。于室溫?cái)嚢?h，將反應(yīng)混合物傾至15ml冰-水中，并用乙醚萃取。合并的有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)溶劑。殘留物溶于10ml己烷并攪拌30min。濾出沉淀的三苯膦氧化物，將濾液直接傾至層析柱上。硅膠層析純化(n-己烷/乙醚95/5)得到產(chǎn)物，為無色油狀物。
Rf(n-己烷/乙醚＝70/30)0.361H-NMR(400MHz，CDCl3)5.74-5.60(m，1H)，4.89(d，1H)，4.82(d，1H)，4.35(t，1H)，3.20(1，3H)，3.18(s，3H)，2.05-1.85(m，2H)，1.58-1.41(m，2H)，1.36-1.21(m，2H)，1.19-1.05(m，1H)，0.79(d，3H)l)(R)-6，6-二甲氧基-4-甲基-己醛將17.7g(88.2mmol)(R)-8，8-二甲氧基-2，6-二甲基-辛-2-烯和3.7g(44.1mmol)碳酸氫鈉的265ml DCM/甲醇(4∶1)的混合物冷卻至-78℃，向混合物中吹入臭氧。1h 20min后，淡黃色溶液變?yōu)榈{(lán)色，于-78℃，加入34.8g(132mmol)三苯膦。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?0min。蒸發(fā)溶劑并將殘留物溶于176ml己烷并攪拌30min。過濾除去沉淀的三苯膦氧化物并蒸發(fā)溶劑。得到產(chǎn)物，為淡黃色油狀物，并且可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(n-己烷/乙醚＝70/30)0.24m)(R)-8，8-二甲氧基-2，6-二甲基-辛-2-烯于室溫下，將18.39g(119.2mmol)(R)-3，7-二甲基-辛-6-烯醛(R-香茅醛)、30.1ml(275mmol)原甲酸三甲酯、315mg(3.93mmol)硝酸銨和180mg(0.715mmol)PPTS的60ml甲醇的溶液攪拌17h?；旌衔飪A至300ml飽和的碳酸氫鈉水溶液中并用乙醚萃取兩次。合并的有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)溶劑。得到產(chǎn)物，為淡黃色油狀物，并且可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(n-己烷/乙醚＝90/10)0.361H-NMR(400MHz，CDCl3)5.11(t，1H)，4.48(t，1H)，3.30(s，3H)，3.33(s，3H)，2.08-1.92(m，2H)，1.70(s，3H)，1.69-1.55(m，2H)，1.60(s，3H)，1.43-1.31(m，2H)，1.14-1.27(m，1H)，0.93(d，3H)下列化合物可以通過類似方法獲得，采用3-甲氧基-芐基胺、2-吡啶-4-基-乙基胺、2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基胺或3-異丙基-芐基胺取代3-甲基-芐基胺實(shí)施例1a(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(3-甲氧基-芐基氨基)-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物Rf(DCM/甲醇95∶5)0.33MS(LC/MS)[MH]+＝476.0實(shí)施例1b(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(2-吡啶-4-基-乙基氨基)-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物Rf(DCM/甲醇/NH3＝90∶10∶1)0.25MS(LC/MS)[MH]+＝461.0實(shí)施例1c(3S，14R)-16-{2-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-1-羥基-乙基}-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物Rf(DCM/甲醇/NH390∶9∶1)0.30MS(LC/MS)[MH]+＝520.0實(shí)施例1d(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(3-甲基-芐基氨基)-乙基]-3，14-二甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例1制備，在步驟h中采用Boc-N-(L)-丙氨酸取代Boc-N-甲基-(L)-丙氨酸。
非對(duì)映異構(gòu)體的混合物L(fēng)C(Atlantis dC-18，19×100mm，5μM，10％MeCN+10％H2O(2min)10-100％ MeCN+10％H2O(12min)，100％ MeCN+10％H2O(3min)20ml/min)11.1minMS(LC/MS)[MH]+＝446.3實(shí)施例1e(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(3-甲氧基-芐基氨基)-乙基]-3，14-二甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物L(fēng)C(Atlantis dC-18，19×100mm，5μM，10％MeCN+10％H2O(2min)10-100％MeCN+10％H2O(12min)，100％MeCN+10％H2O(3min)20ml/min)3.8minMS(LC/MS)[MH]+＝462.3實(shí)施例1f(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，14-二甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物L(fēng)C(Atlantis dC-18，19×100mm，5μM，10％MeCN+10％H2O(2min)10-100％MeCN+10％H2O(12min)，100％MeCN+10％H2O(3min)20ml/min)11.9minMS(LC/MS)[MH]+＝474.4實(shí)施例1g(3S，14R)-16-[1-羥基-2-(2-吡啶-4-基-乙基氨基)-乙基]-3，14-二甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮非對(duì)映異構(gòu)體的混合物L(fēng)C(Atlantis dC-18，19×100mm，5μM，10％MeCN+10％H2O(2min)10-100％MeCN+10％H2O(12min)，100％MeCN+10％H2O(3min)20ml/min)10.7minMS(LC/MS)[MH]+＝447.3實(shí)施例2(3S，14R，16S)-16-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例1制備，在步驟b中，采用純的非對(duì)映異構(gòu)體(3S，14R，16S)-6-((S)-2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮取代非對(duì)映異構(gòu)體混合物(3S，14R)-16-(2-氯代-1-羥基-乙基)-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮，在最后一個(gè)步驟中，采用3-異丙基-芐基胺取代3-甲基-芐基胺，并將處理過程進(jìn)行如下修改將34mg(0.1mmol)3(S)，4，14(R)-三甲基-16(S)-(S)-環(huán)氧乙基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮的57mg(0.38mmol)3-異丙基-芐基胺溶液加熱至80℃8小時(shí)。通過與甲苯一起重復(fù)蒸發(fā)除去過量的3-異丙基-芐基胺。經(jīng)制備性薄層層析或HPLC純化殘留物，得到濃的無色油狀物。
Rf(DCM/甲醇/14N NH3＝90/9/1)0.5MS(EI)[MH]+＝4881H-NMR(400MHz，d6-DMSO，主要構(gòu)象異構(gòu)體)8.90(br s，1H)，7.67(d，1H)，7.42-7.25(m，4H)，5.58(br s，1H)，4.92(q，1H)，4.10(br t，2H)，3.78-3.69(m，1H)，3.64-3.52(m，1H)，2.94-2.84(m，2H)，2.81(s，3H)，2.75-2.63(m，1H)，2.11-2.02(m，1H)，1.70-1.59(m，1H)，1.45-1.11(m，23H)，1.04(d，3H)，0.74(d，3H)起始原料可以如下文所述方法制備a)庚-6-烯酸{(S)-1-[(1S，3R)-1-((S)-2-氯代-1-羥基-乙基)-3-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基-酰胺向冰冷的141mg(1.1mmol)庚-6-烯酸、221mg(1.1mmol)HOBt.H2O、230mg(1.2mmol)EDC.HCl和327mg(1.0mmol){1(S)-[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基氨基甲酰基]-乙基}-甲基氨基鹽酸鹽的12ml的DCM溶液中加入0.172ml(1.0mmol)DIPEA。于室溫下，攪拌混合物17h。用冰冷卻后，加入10ml 0.5M HCl并分離各層。有機(jī)層用1M碳酸氫鉀、水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(環(huán)己烷/EtOAc 70/30)，得到產(chǎn)物，為黃色固體。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝60/40)0.24MS(EI-)399[MH]-1H-NMR(400MHz，d6-DMSO，主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)7.31(d，1H)，5.85-5.70(m，2H)，5.28(d，1H)，5.04-4.78(m，5H)，3.88-3.73(m，1H)，3.63-3.46(m，2H)，3.43-3.34(m，1H)，2.82(s，3H)，2.31(t，2H)，2.07-1.93(m，4H)，1.57-1.12(m，9H)，1.18(d，3H)，0.79(d，3H)b){1(S)-[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基氨基鹽酸鹽將814mg(2.08mmol){1(S)-[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-甲基-氨基甲酸叔-丁酯的4ml DCM溶液冷卻至0℃，加入6.3ml 5M HCl的Et2O(31.3mmol)。于室溫下，攪拌混合物1.5h。蒸發(fā)溶劑得到產(chǎn)物，為淡褐色粉末，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝60/40)0.0MS(EI+)291[MH]+1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)8.97(br，1H)，8.78(br，1H)，8.35(d，1H)，5.83-5.71(m，1H)，5.47(d，1H)，5.03-4.88(m，2H)，3.98-3.86(m，1H)，3.79-3.69(m，1H)，3.62-3.53(m，2H)，3.51-3.43(m，1H)，2.46(s，3H)，2.10-1.95(m，2H)，1.56-1.17(m，5H)，1.38(d，3H)，0.85(d，3H)c){1(S)-[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基氨基甲酰基]-乙基}-甲基-氨基甲酸叔丁酯向冰冷的519mg(2.55mmol)Boc-N-甲基-(L)-丙氨酸、513mg(3.25mmol)HOBt.H2O、534mg(2.78mmol)EDC.HCl和566mg(2.32mmol)1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基鹽酸鹽的12mlDCM溶液中加入0.399ml(2.32mmol)DIPEA。于室溫下攪拌混合物17h。用冰浴冷卻后，加入23ml 0.5M HCl并分離各層。有機(jī)層用1M碳酸氫鉀、水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(環(huán)己烷/EtOAc70/30)，得到產(chǎn)物，為黃色油狀物。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝60/40)0.39MS(EI-)389[MH]-1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)7.43(br，1H)，5.82-5.71(m，1H)，5.30(d，1H)，5.01-4.87(m，2H)，4.44(br，1H)，3.83-3.74(m，1H)，3.51-3.46(m，2H)，3.41-3.35(m，1H)，2.72(s，3H)，2.09-1.93(m，1H)，1.50-1.13(m，9H)，1.39(s，9H)，0.79(d，3H)d)1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基氨基鹽酸鹽將709mg(2.32mmol)[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯的5ml DCM溶液冷卻至0℃，加入7.0ml 5M HCl的Et2O(35mmol)。于室溫下攪拌混合物1.5h。蒸發(fā)溶劑得到產(chǎn)物，為淡褐色粉末，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝80/20)0.0MS(LC/MS)205.9[MH]+e)[1(S)-(2-氯代-1(S)-羥基-乙基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔丁酯將224mg(5.91mmol)硼氫化鈉的65ml乙醇溶液冷卻至-78℃，滴加入1.41g(2.96mmol)[1(S)-(2-氯代-乙?；?-3(R)-甲基-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯的18ml乙醇溶液，使內(nèi)部溫度保持于-75℃以下。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?7h。將混合物冷卻至-78℃，并滴加入14.8ml 1M HCl。蒸發(fā)乙醇并將殘留物溶于1M HCl和EtOAc，分離各層并將水層用EtOAc萃取，合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(環(huán)己烷/EtOAc80/20)，得到產(chǎn)物，為淺棕色無定形固體。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝80/20)0.25MS(EI-)304[MH]-1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)6.57(d，1H)，5.82-5.71(m，1H)，5.21(d，1H)，5.02-4.87(m，2H)，3.58(d，1H)，3.50-3.38(m，3H)，2.06-1.92(m，2H)，1.53-1.15(m，5H)，1.38(s，9H)，0.82(d，3H)f)[1(S)-(2-氯代-乙酰基)-3(R)-甲基-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔丁酯于-78℃，將844mg(2.96mmol)2(S)-叔-丁氧基羰基氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸甲酯的30mlTHF溶液冷卻，加入0.86ml(11.8mmol)氯碘甲烷。滴加入LDA(9.3ml，14.8mmol)的1.59M THF溶液，使反應(yīng)混合物的溫度保持于-75℃以下，再攪拌混合物1h。使溫度保持于-65℃以下，將反應(yīng)小心用4.41ml(76.89mmol)冰乙酸淬滅。于-78℃，攪拌15min后，將混合物溫?zé)嶂?℃，加入44ml半飽和氯化鈉水溶液。混合物用TBME萃取，有機(jī)層用1M碳酸氫鈉和1M亞硫酸鈉洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝80/20)0.44MS(LC/MS)[MNa]+＝325.9g)2(S)-叔-丁氧基羰基氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸甲酯向冰冷的1.15g(4.25mmol)2(S)-叔-丁氧基羰基氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸的5ml DMF溶液中加入850mg(8.49mmol)碳酸氫鉀和0.422ml(6.79mmol)MeI。于室溫下攪拌混合物2天。將甲苯和水加至混合物中，分離各層并將水層用甲苯/異丙醇(85/15)萃取兩次。合并的有機(jī)層用半飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(環(huán)己烷/EtOAc90/10)，得到產(chǎn)物，為無色油狀物。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝80/20)0.39[α]D25+3.06°(c＝1.09，CHCl3)MS(EI)[MH]+＝286，[MNa]+＝3081H-NMR(400MHz，d6-DMSO)7.19(d，1H)，5.82-5.70(m，1H)，5.03-4.89(m，2H)，4.04-3.95(m，1H)，3.60(s，3H)，2.10-1.90(m，2H)，1.68-1.44(m，2H)，1.42-1.27(m，2H)，1.38(s，9H)，1.25-1.15(m，1H)，0.83(d，3H)h)2(S)-叔-丁氧基羰基氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸將11.3g凍干2(S)-氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸(包括磷酸鹽)的113ml水和23ml THF溶液冷卻至0℃，加入1.04g(9.825mmol)碳酸鈉和1.61g(7.369mmol)Boc2O?；旌衔餃?zé)嶂潦覝夭嚢?9h。用冰浴冷卻后，加入162ml 0.5M HCl將混合物酸化。混合物用EtOAc萃取兩次，合并的EtOAc層用半飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到產(chǎn)物，為粉紅色油狀物，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(DCM/甲醇＝95/5)0.26MS(LC/MS)[MH]-＝270.1i)2(S)-氨基-4(R)-甲基-辛-7-烯酸剩余水相的pH再調(diào)節(jié)至pH8，加入CoCl3×6H2O(5mg，0.021mmol)和125mg?；D(zhuǎn)移酶Amano(ACV12502)。于室溫下攪拌混合物24h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)完成。凍干混合物，固體殘留物可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。對(duì)樣品進(jìn)行分析得到如下對(duì)樣品進(jìn)行分析得到如下分析數(shù)據(jù)Rf(乙腈/乙醇/水/乙酸)＝70/20/5/5)0.41[α]D20+2.05°(c＝0.95，1M HCl)MS(EI)[MH]+＝172j)2(S)-乙?；被?4(R)-甲基-辛-7-烯酸向11.26g(49.54mmol)(R)-2-乙?；被?4-甲基-辛-7-烯酸甲酯的75ml(33mM)的磷酸鹽緩沖液pH 7.5中，加入200μl Alcalase 2.5L(NovoNordisk PMN04666)。于室溫、持續(xù)攪拌下，用自動(dòng)滴定管加入1M氫氧化鈉溶液，使混合物pH保持不變。3小時(shí)后，轉(zhuǎn)化達(dá)到約50％。pH調(diào)節(jié)至8.0，混合物用DCM(3×50ml)萃取。有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥并且減壓除去溶劑，得到不需要的非對(duì)映異構(gòu)體甲酯。水溶液中的殘留酸可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。對(duì)樣品進(jìn)行分析得到如下分析數(shù)據(jù)酸Rf(乙腈/乙醇/水/乙酸)＝70/20/5/5)0.68[α]D20-5.19°(c＝0.924，甲醇)MS(EI)[MH]+＝2141H-NMR(400MHz，d6-DMSO)8.25(d，1H)，6.05-5.93(m，1H)，5.25-5.10(m，2H)，4.47-4.39(m，1H)，2.33-2.14(m，2H)，2.04(s，3H)，1.85-1.76(m，1H)，1.75-1.50(m，3H)，1.47-1.37(m，1H)，1.03(d，3H)甲酯LC(Chiralpak AD-H，250×4.6mm，己烷/乙醇95/5，1ml/min)9.01min1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)8.20(d，1H)，5.65-5.75(m，1H)，4.95(m，1H)，4.90(m，1H)，4.20(m，1H)，3.55(s，3H)，1.75(s，3H)，1.8-2.0(m，1H)，1.55(m，1H)，1.30-1.45(m，3H)，1.00-1.10(m，1H)，0.8(d，3H)k)(R)-2-乙?；被?4-甲基-辛-7-烯酸甲酯將4.92g(25.0mmol)N-((R)-1-氰基-3-甲基-庚-6-烯基)-乙酰胺的75ml甲醇溶液冷卻至0℃，加入150ml 5M HCl的Et2O，于室溫下，攪拌混合物1h。經(jīng)冰冷卻，加入350ml水，混合物經(jīng)DCM萃取三次。合并的有機(jī)層用1M碳酸氫鉀和水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(環(huán)己烷/EtOAc 70/30至60/40)，得到產(chǎn)物，為淡黃色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)。
Rf(環(huán)己烷/EtOAc＝60/40)0.16MS(EI)[MH]+＝2281H-NMR(400MHz，d6-DMSO，2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)8.21(d，0.5H)，8.18(d，0.5H)，5.82-5.68(m，1H)，5.03-4.89(m，2H)，4.32-4.22(m，1H)，3.60(s，3H)，2.10-1.89(m，2H)，1.84(s，1.5H)，1.83(s，1.5H)，1.67-1.58(m，1H)，1.53-1.08(m，4H)，0.88(d，1.5H)，0.82(d，1.5H)l)N-((R)-1-氰基-3-甲基-庚-6-烯基)-乙酰胺于0℃，向3.81g(25.0mmol)(R)-2-氨基-4-甲基-辛-7-烯腈(步驟i，實(shí)施例1)和6.45ml(37.5mmol)DIPEA的50ml DCM溶液滴加入2.31ml(32.5mmol)乙酰氯。于室溫下，攪拌混合物1h。用冰冷卻，混合物用半飽和的氯化銨水溶液淬滅?；旌衔镉肈CM萃取，萃取物用水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到產(chǎn)物，褐色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
Rf(DCM/甲醇＝98/2)0.21MS(LC/MS)[MH]+＝195.0下列化合物可以通過類似方法獲得，采用3-環(huán)丙基-芐基胺、C-(5-溴-吡啶-3-基)-甲基胺、C-(5-環(huán)丙基-吡啶-3-基)-甲基胺、C-(2-環(huán)丙基-吡啶-4-基)-甲基胺、6-異丙基-2，2-二甲基-苯并二氫吡喃-4(R/S)-基胺、3-叔-丁基-芐基胺或3-(2，2-二甲基-丙基)-芐基胺取代3-異丙基-芐基胺實(shí)施例2a(3S，14R，16S)-16-[(1R)-2-(3-環(huán)丙基-芐基氨基)-1-羥基-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(甲苯/乙醇/NH3＝90/9.9/0.1)0.24MS(EI)[MH]+＝486實(shí)施例2b(3S，14R，16S)-16-{(1R)-2-[(5-溴-吡啶-3-基甲基)-氨基]-1-羥基-乙基}-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(DCM/甲醇/NH3＝90/9/1)0.40MS(EI)[MH]+＝527實(shí)施例2c(3S，14R，16S)-16-{(1R)-2-[(5-環(huán)丙基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-1-羥基-乙基}-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(甲苯/乙醇/NH3＝90/9.9/0.1)0.16MS(EI)[MH]+＝487實(shí)施例2d(3S，14R，16S)-16-{(1R)-2-[(2-環(huán)丙基-吡啶-4-基甲基)-氨基]-1-羥基-乙基}-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(DCM/甲醇＝90/10)0.34MS(EI)[MH]+＝487實(shí)施例2e(3S，14R，16S)-16-[(1R)-2-(2，2-二甲基-6-異丙基-苯并二氫吡喃-4-基氨基)-1-羥基-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(DCM/甲醇/NH3＝97/2.7/0.3)0.17
MS(EI)[MH]+＝558實(shí)施例2f(3S，14R，16S)-16-[(1R)-2-(3-叔-丁基-芐基氨基)-1-羥基-乙基]-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(DCM/甲醇＝90/10)0.37MS(EI)[MH]+＝502實(shí)施例2g(3S，14R，16S)-16-{(1R)-2-[3-(2，2-二甲基-丙基)-芐基氨基]-1-羥基-乙基}-3，4，14-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮Rf(DCM/甲醇＝90/10)0.41MS(EI)[MH]+＝516.5實(shí)施例2h(3S，15R，17S)-17-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，4，15-三甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十七烷-2，5-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟a中采用辛-7-烯酸取代庚-6-烯酸。
Rf(DCM/甲醇＝90/10)0.34MS(EI)[MH]+＝502實(shí)施例2i(6S，9S，11R)-9-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-5，6，11-三甲基-1-氧雜-5，8-二氮雜-環(huán)十六烷-4，7-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟a中采用3-烯丙基氧基-丙酸代替庚-6-烯酸。
Rf(DCM/甲醇/NH3＝90/9/1)0.46MS(EI)[MH]+＝490實(shí)施例2j(3S，8S，14R，16S)-16-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，4，8，14-四甲基-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-2，5-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟a中采用4(R)-甲基-庚-6-烯酸(酸Ib)代替庚-6-烯酸。
Rf(DCM/甲醇＝90/10)0.43MS(EI)[MH]+＝502.5實(shí)施例3(3S，6S，8R)-6-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，8-二甲基-1，1-二氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六烷-4-酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟c中采用(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸(酸IIa)代替BOC-N-甲基-(L)-丙氨酸，隨后用常規(guī)方法進(jìn)行關(guān)環(huán)復(fù)分解(ring-closing metathesis)等。
Rf(DCM/甲醇/14N NH3＝90/9/1)0.45MS(EI)[MH]+＝509下列化合物可以通過類似方法獲得，采用2(S)-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸(酸IIb)代替實(shí)施例3的3-(己-5-烯-1-磺?；?-2(S)-甲基-丙酸。
實(shí)施例3a(3S，6S，8R)-6-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-3，8-二甲基-1，1-二氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十五烷-4-酮Rf(DCM/甲醇/Et3N＝94/5/1)0.90MS(LC-MS)[MH]+＝495；[MNa]+＝517實(shí)施例4(4S，6R)-12-乙基-4-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-6-甲基-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-2，13-二酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟c中，采用N-烯丙基-N-乙基-間苯二甲氨酸(酸IIIa)代替BOC-N-甲基-(L)-丙氨酸，隨后根據(jù)常規(guī)方法進(jìn)行關(guān)環(huán)復(fù)分解等。
Rf(DCM/甲醇＝5/1)0.56MS(LC-MS)[MH]+＝508；[MNa]+＝530實(shí)施例5(9R，11S)-11-[(1R)-1-羥基-2-(3-異丙基-芐基氨基)-乙基]-9，16-二甲基-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-13-酮目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例2制備，在步驟c中，采用2-丁-3-烯基氨基-6-甲基-異煙酸(酸IIIa)代替Boc-N-甲基-(L)-丙氨酸，隨后根據(jù)常規(guī)方法進(jìn)行關(guān)環(huán)復(fù)分解等。
Rf(DCM/甲醇＝5/1)0.4MS(LC-MS)[MH]+＝4811H-NMR(400MHz，D3COD)7.30-7.17(m，5H)，6.60(s，1H)，6.49(s，1H)，3.95-3.90(m，1H)，3.84(d，1H)，3.78(d，1H)，3.66-3.61(m，1H)，3.35-3.20(m，2H)，2.98-2.87(m，1H)，2.80-2.70(m，2H)，2.38(s，3H)，1.80-1.64(m，3H)，1.60-1.20(m，10H)，1.26(s，3H)，1.28(s，3H)，0.98(d，3H)實(shí)施例6[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲酰基-1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-6-基]-氨基甲酸叔丁酯在氫氣氛，20mg 10％Pd-C存在下，將199mg(0.35mmol)[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲酰基-1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六-10-烯-6-基]-氨基甲酸叔-丁酯的10ml THF和10ml EtOH溶液攪拌1h?；旌衔锝?jīng)硅藻土墊過濾并蒸發(fā)溶劑。得到目標(biāo)化合物為白色粉末。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.28min；MS(ES)[MNa]+＝591.4起始原料可以如下文所述方法制備a)[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲?；?1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六-10-烯-6-基]-氨基甲酸叔丁酯在氮?dú)庀?，?83mg(0.37mmol)[(3S，6S，14R，16S)-3，14-二甲基-16-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六-10-烯-6-基]-氨基甲酸叔-丁酯的1.5ml丁基胺溶液加熱至65℃兩小時(shí)。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，殘留物溶于甲苯并蒸發(fā)至干得到目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.00min；MS(ES)[MNa]+＝589.4b)[(3S，6S，14R，16S)-3，14-二甲基-16-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六-10-烯-6-基]-氨基甲酸叔丁酯在氮?dú)夥障拢?mg三環(huán)己基膦[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-基叉基][芐基次基(benzylidine)]釕(IV)二氯化物(‘Grubbs 2’催化劑)的300ml DCM回流溶液中緩慢加入210mg(0.402mmol)((S)-1-{(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基氨基甲?；鶀-己-5-烯基)-氨基甲酸叔-丁酯的50ml脫氣DCM。3h后，將混合物冷卻至室溫，用0.05ml丁基乙烯醚淬滅，與200mg活化炭一起攪拌并經(jīng)硅膠層析純化(EtOAc/己烷1∶1)得到產(chǎn)物(雙鍵異構(gòu)體的混合物)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.19min；MS(ES)[MNa]+＝516.4c)((S)-1-{(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基氨基甲?；鶀-己-5-烯基)-氨基甲酸叔丁酯于室溫下，將194mg(0.489mmol){(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-氨基甲酸叔-丁酯的2ml 4N HCl的二烷溶液放置3h，然后真空濃縮。殘留物溶于3mlDCM，并用187mg(0.734mmol)(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸、79mg(0.516mmol)HOBt.H2O、140mg(0.734mmol)EDC.HCl和0.27ml(1.95mmol)Et3N處理。18h后，于室溫下，混合物用EtOAc稀釋并順次用水、5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)混合物并經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶2和1∶1)得到產(chǎn)物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.94min；MS(ES)[MNa]+＝544.4d){(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯于室溫下，將1.0g(3.08mmol)[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)的6ml 4N HCl的二烷溶液放置3h并真空濃縮。殘留物溶于10ml DCM，并用582mg(3.08mmol)Boc-Ala-OH、499mg(3.26mmol)HOBt.H2O、882mg(4.62mmol)EDC.HCl和1.72ml(12.3mmol)Et3N處理，攪拌過夜。混合物用EtOAc稀釋并順次用水、5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)混合物并經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶7，1∶6和1∶3)得到快速洗脫的非對(duì)映異構(gòu)體，然后得到{(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-氨基甲酸叔-丁酯，為無色油狀物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.29min；MS(ES)MNa+＝419.4e)[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)于-78℃，氮?dú)夥障?，?.8g(12.2mmol)[(R)-3-甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)和2.2ml(18.3mmol)DMPU的50ml THF溶液用67.8ml(25.6mmol)0.41M LHMDS的THF溶液處理。50分鐘后，加入一份1.30ml(20.7mmol)甲基碘化物。然后45分鐘后將反應(yīng)用4.56ml(61mmol)丙酸淬滅，將混合物溫?zé)嶂潦覞瘢⒂肊tOAc和水稀釋。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)混合物并經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶6)得到產(chǎn)物，為無色油狀物，放置后會(huì)固化。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.04min；MS(ES)[MNa]+＝348.2f)[(R)-3-甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)將10.18g(30mmol)[(R)-3，7-二甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)的300ml DCM和100mlMeOH溶液冷卻至-75℃。加入1.26g(15mmol)NaHCO3后，將O3的O2氣流充入攪拌的混合物直到藍(lán)色持續(xù)。充入O2將過量臭氧除去。加入9.44g(36mmol)三苯膦后，將混合物溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?h。過濾混合物并真空濃縮。經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶1)得到醛，含有20％三苯膦氧化物。于室溫下，將11.8g(33mmol)甲基三苯溴化物和3.36g(30mmol)tBuOK的150ml甲苯懸浮液攪拌1h，用冰浴冷卻并用上文所述醛的70ml THF溶液處理。30min后，混合物用飽和NaHCO3水溶液淬滅。有機(jī)相經(jīng)鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠柱層析(EtOAc/己烷1∶5)得到產(chǎn)物，為固化油狀物(混合物)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.73min；MS(ES)MNa+＝334.2g)[(R)-3，7-二甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)在氫氣氛、2g阮內(nèi)鎳存在下，將20.2g(60mmol)[(R)-3，7-二甲基-1-(5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)的200ml THF溶液攪拌。當(dāng)氫終止吸收后，通過硅藻土墊小心過濾反應(yīng)混合物(阮內(nèi)鎳易引火！)。蒸發(fā)溶劑得到產(chǎn)物，為無色油狀物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.24min；MS(ES)MNa+＝362b)[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯和[(1R，3R)-3，7-二甲基-1-((R)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(混合物)于-70℃，將20.67g(128mmol)HMDS的200ml無水THF溶液冷卻，滴加入80ml 1.6M BuLi的己烷溶液(128mmol)。10min后，滴加入10.75g(128mmol)5H-呋喃-2-酮的5ml無水THF溶液。加入完成后，將混合物于-40℃溫?zé)?，以阻止沉淀形成，?70℃，通過導(dǎo)管向攪拌的溶液中加入50.1g(122mmol)[(R)-3，7-二甲基-1-(甲苯-4-磺?；?-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯的300ml無水THF溶液。于該溫度下攪拌混合物1h，將混合物直接傾至攪拌的500ml水和500ml EtOAc的混合物中。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％碳酸氫鈉水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，殘留物經(jīng)硅膠(EtOAc/己烷1∶5)層析，得到產(chǎn)物混合物，為無色油狀物，放置后固化。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，65-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.99min；MS(ES)[MNa]+＝360.2i)[(R)-3，7-二甲基-1-(甲苯-4-磺酰基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔丁酯于室溫下，將21.34g(131.4mmol)R-(+)-香茅醛、14.63g(125mmol)氨基甲酸叔丁酯、24.6g(138mmol)4-甲基-苯亞磺酸鈉和7.5ml(200mmol)甲酸的100ml乙腈混合物攪拌4天。混合物用300ml EtOAc和300ml水稀釋。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后再用水洗滌四次。加入5ml EtOH后，將溶液真空濃縮，得到目標(biāo)化合物，為無色油狀物，放置后固化。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.85min；MS(ES)[MNa]+＝432.2下列化合物可以通過類似方法獲得實(shí)施例6a(2R，4S)-N-丁基-4-((2S，5S，7R)-2，7-二甲基-3，15-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十五烷-5-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用己-5-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.32min；MS(ES)[MNa]+＝462.4實(shí)施例6b(2R，4S)-N-丁基-4-((2S，5S，7R)-2，7-二甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用庚-6-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.68min；MS(ES)[MNa]+＝476.4實(shí)施例6c(2R，4S)-N-丁基-4-((2S，5S，7R)-2，7-二甲基-3，17-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十七烷-5-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用辛-7-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.05min；MS(ES)[MNa]+＝490.4實(shí)施例6d[(3S，6S，12R，14S)-14-((1S，3R)-3-丁基氨基甲?；?1-羥基-丁基)-3，12-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十四烷-6-基]-氨基甲酸叔丁酯化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用(S)-2-叔-丁氧基羰基氨基-戊-4-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.70min；MS(ES)[MNa]+＝563.4實(shí)施例6e(2R，4S)-N-丁基-4-((2S，5S，7R)-2，7-二甲基-3，14-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十四烷-5-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用戊-4-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.02min；MS(ES)[MNa]+＝448.4實(shí)施例6f(2R，4S)-N-丁基-4-((6S，9S，11R)-6，11-二甲基-4，7-二氧代-1-氧雜-5，8-二氮雜-環(huán)十六烷-9-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用3-烯丙基氧基-丙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.92min；MS(ES)[MNa]+＝478.4實(shí)施例6g(2R，4S)-N-丁基-4-((5S，8S，10R)-5，10-二甲基-3，6-二氧代-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十五烷-8-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用烯丙基氧基-乙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.11min；MS(ES)[MNa]+＝464.4實(shí)施例6h(2R，4S)-N-丁基-4-((5S，8S，10R)-5，10-二甲基-3，6-二氧代-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十六烷-8-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟c中采用丁-3-烯基氧基-乙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.44min；MS(ES)[MNa]+＝478.4實(shí)施例6i(2R，4S)-N-丁基-4-((3S，14R，16S)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4，8-三氮雜-環(huán)十六烷-16-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用3-(烯丙基-芐基氧基羰基-氨基)-丙酸(酸Ia)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。在最后的氫化步驟中除去cbz保護(hù)基團(tuán)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.85min；MS(ES)[MH]+＝455.4，[MNa]+＝477.4實(shí)施例6j(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R)-1，2，7-三甲基-3，15-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十五烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用己-5-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.58min；MS(ES)[MNa]+＝476.4實(shí)施例6k(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R)-1，2，7-三甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用庚-6-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.09min；MS(ES)[MH]+＝468.4，[MNa]+＝490.4實(shí)施例6l(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R)-1，2，7-三甲基-3，17-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十七烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用辛-7-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.42min；MS(ES)[MH]+＝482.4，[MNa]+＝504.4實(shí)施例6m(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((5S，8S，10R)-4，5，10-三甲基-3，6-二氧代-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十六烷-8-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用丁-3-烯基氧基-乙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.48min；MS(ES)[MH]+＝470.4，[MNa]+＝492.4實(shí)施例6n(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R，13S)-1，2，7，13-四甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(R)-4-甲基-庚-6-烯酸(酸Ib)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.44min；MS(ES)[MH]+＝482.4，[MNa]+＝504.4實(shí)施例6o(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R，13R)-1，2，7，13-四甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(S)-4-甲基-庚-6-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.52min；MS(ES)[MH]+＝482.4，[MNa]+＝504.4實(shí)施例6p(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R，14R)-1，2，7，14-四甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-丁酰胺化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(R)-3-甲基-庚-6-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.57min；MS(ES)[MH]+＝482.4，[MNa]+＝504.4實(shí)施例6q(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((5S，8S，10R)-4，5，10，15-四甲基-3，6-二氧代-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十六烷-8-基)-丁酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-乙酸(酸Ic)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.93min；MS(ES)[MH]+＝484.4，[MNa]+＝506.4實(shí)施例6r(2R，4S)-N-丁基-4-((5S，8S，10R)-16-乙基-4，5，10-三甲基-3，6-二氧代-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十六烷-8-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(1-乙基-丁-3-烯基氧基)-乙酸(酸Id)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.95min；MS(ES)[MH]+＝498.3實(shí)施例6s(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((5S，8S，10R)-4，5，10-三甲基-3，6-二氧代-17-丙基-1-氧雜-4，7-二氮雜-環(huán)十七烷-8-基)-丁酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)
化合物可以用實(shí)施例6所述的類似方法制備，但在步驟d中采用L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(1-丙基-戊-4-烯基氧基)-乙酸(酸Ie)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.69min；MS(ES)[MH]+＝526.4實(shí)施例7(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((5S，8S，10R)-4，5，10-三甲基-3，6-二氧代-1，4，7-三氮雜-環(huán)十六烷-8-基)-丁酰胺化合物可以根據(jù)實(shí)施例6類似的方法制備，但在步驟d中采用[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯，L-Boc-N-甲基丙氨酸代替L-Boc-丙氨酸，在步驟c中采用(芐基-戊-4-烯基-氨基)-乙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.04min；MS(ES)[MH]+＝469.4起始原料可以如下制備a)[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)于-78℃，氮?dú)鈿夥障?，?.65g(8.9mmol)[(1S，3R)-3-甲基-1-((S)-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯和[(1R，3R)-3-甲基-1-((R)-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯和3.2ml(26.7mmol)DMPU的混合物的30ml THF溶液用17.8ml的1.0M LHMDS的THF溶液處理。50min后，加入一份0.83ml(13.3mmol)甲基碘化物。45min后，反應(yīng)用3.3ml丙酸淬滅，將混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒂肊tOAc和水稀釋。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)混合物，經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶4)得到目標(biāo)化合物，為無色油狀物(非對(duì)映異構(gòu)體混合物)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.60min；MS(ES)[MNa]+＝334.2b)[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)
于氮?dú)鈿夥障?，?0ml完全脫氣的甲苯中順次加入0.63g(0.31mmol)氫(三苯膦)銅(I)六聚體、2.9ml聚二甲基硅氧烷(polymethylhydrosiloxane)和5.7g(19.3mmol)[(R)-3-甲基-1-(5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯的甲苯(脫氣)溶液。于25℃，攪拌2h，加入6mg(0.01mmol)R(+)-2，2’-雙-(二苯基膦基)-6，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯，作為銅絡(luò)合物的加速配體。12h后，混合物用乙酸乙酯稀釋，用水、5％檸檬酸水溶液和5％NaHCO3水溶液洗滌。硅膠層析(EtOAc/己烷1∶9，然后1∶3)得到目標(biāo)化合物，為非對(duì)映異構(gòu)體混合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.28min；MS(ES)[MNa]+＝320.2c)[(R)-3-甲基-1-(5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)于氮?dú)夥障?，?7.15g(46.7mmol)((R)-1-苯磺?；?3-甲基-己-5-烯基)-氨基甲酸叔-丁酯的100ml無水THF溶液冷卻至-75℃。用10分鐘，通過導(dǎo)管采用正氮?dú)鈿鈮杭尤牒羞秽?2-甲醇鋰的THF溶液A。溶液A如下制備。于-70℃、氮?dú)鈿夥障?，?.85ml(46.7mmol)HMDS的100ml無水THF溶液冷卻，滴加入29.2ml 1.6M BuLi的己烷(46.7mmol)溶液。30分鐘后，滴加入3.92g(46.7mmol)5H-呋喃-2-酮的2ml無水THF，將溫度保持于-40℃。加入后，于-75℃，攪拌反應(yīng)混合物1.5h，然后于攪拌下，直接傾至200ml水和200ml EtOAc中。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水(2×)、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，殘留物經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶3)，得到目標(biāo)化合物，為油狀物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.20min；MS(ES)[MNa]+＝318.2d)((R)-1-苯磺?；?3-甲基-己-5-烯基)-氨基甲酸叔丁酯于+4℃，將4.72g(12.06mmol)(R)-4-異丙基-3-((R)-3-甲基-己-5-烯?；?-5，5-二苯基-唑烷-2-酮的50ml THF和125ml MeOH溶液冷卻，于25℃、攪拌下，用5.23g(60.3mmol)LiBr和3.6ml(24.1mmol)DBU處理。18h后，過濾混合物，用MTBE稀釋，用1N HCl和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4.H2O干燥。減壓濃縮濾液并用戊烷研磨。分離固體，于大氣壓下，蒸餾除去溶劑。得到(R)-3-甲基-己-5-烯酸甲酯，為無色液體。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.84-5.72(m，1H)，5.08-5.01(m，2H)，3.68(s，3H)，2.40-2.33(m，1H)，2.16-1.97(m，4H)，0.97(d，3H)產(chǎn)物(1.2g，8.44mmol)溶于2ml THF，并冷卻至-90℃。用15分鐘，滴加入1M DibalH的DCM(10.1ml)溶液。1h后，于-90℃，將混合物用0.34ml MeOH淬滅，加熱至25℃，并用5％檸檬酸水溶液洗滌。有機(jī)相小心減壓濃縮，溶于3ml MeCN并迅速用0.987g(8.44mmol)氨基甲酸叔丁酯、1.50g(8.44mmol)4-甲基-苯亞磺酸鈉和0.44ml(11.7mmol)甲酸處理。攪拌2天后，混合物用50ml EtOAc和50ml水稀釋。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。真空濃縮得到目標(biāo)化合物，為無色油狀物，放置后固化。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.94min；MS(ES)[MNa]+＝390.2e)(R)-4-異丙基-3-((R)-3-甲基-己-5-烯酰基)-5，5-二苯基-唑烷-2-酮于-40℃，向攪拌的22.35g(117mmol)CuI的400ml THF懸浮液中滴加入烯丙基氯化鎂的70ml(140mmol)2M THF溶液。1h后，將混合物冷卻至-78℃，15分鐘內(nèi)加入17.7ml(140mmol)BF3.OEt2。盡快加入41g(117mmol)(R)-3-((E)-丁-2-烯酰基)-4-異丙基-5，5-二苯基-唑烷-2-酮的100mlTHF溶液。溫度升至-40℃。繼續(xù)攪拌1h，然后將混合物用500ml 10％NH4Cl水溶液淬滅。于25℃，攪拌混合物1h，經(jīng)硅藻土過濾，用150mlTBME洗滌。有機(jī)相順次用水、10％NaHCO3水溶液、水、5％檸檬酸和水洗滌。層析(硅膠，EE/己烷1∶10)粗品產(chǎn)物，得到(R)-4-異丙基-3-((R)-3-甲基-己-5-烯酰基)-5，5-二苯基-唑烷-2-酮。D+171.7°(c＝1，DCM)1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.52-7.27(m，10H)，5.79-5.68(m，1H)，5.42(d，1H)，5.03-4.98(m，2H)，2.89-2.65(m，2H)，2.10-1.96(m，4H)，0.92(d，3H)，0.79(d，6H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))7.11min；MS(ES)[MNa]+＝414.2
下列化合物可以通過類似方法獲得實(shí)施例7a(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R，12R)-2，7，12-三甲基-3，15-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十五烷-5-基)-丁酰胺化合物可以根據(jù)類似于實(shí)施例6的方法制備，但在步驟d中，采用[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯，在步驟c中，采用(S)-4-甲基-庚-6-烯酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.61min；MS(ES)MNa+＝476.4實(shí)施例7b(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((2S，5S，7R，12S)-2，7，12-三甲基-3，15-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十五烷-5-基)-丁酰胺可以根據(jù)類似于方法制備實(shí)施例6化合物，但在步驟d中采用[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯，在步驟c中，采用(R)-4-甲基-庚-6-烯酸(酸Ib)代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸。
LCMS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.62min；MS(ES)MNa+＝476.4實(shí)施例8(2R，4S)-4-((2S，5S，7R，15S)-15-乙酰基氨基-2，7-二甲基-3，16-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-丁酰胺將45mg(0.079mmol)[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲?；?1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-6-基]-氨基甲酸叔-丁酯(實(shí)施例6)的1ml 4N HCl/二烷溶液放置3h，然后蒸發(fā)。殘留物溶于3ml THF和1ml EtOH和1ml 10％碳酸鈉水溶液，冷卻至0℃，并劇烈攪拌。加入0.112ml(1.6mmol)乙酰氯，并繼續(xù)攪拌1h。蒸發(fā)溶劑并用水和TBME/己烷攪拌殘留物30min。過濾混合物得到目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.06min；MS(ES)[MNa]+＝533.4實(shí)施例9N-[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲?；?1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-6-基]-異煙酰胺將45mg(0.079mmol)[(3S，6S，14R，16S)-16-((1S，3R)-3-丁基氨基甲?；?1-羥基-丁基)-3，14-二甲基-2，5-二氧代-1，4-二氮雜-環(huán)十六烷-6-基]-氨基甲酸叔-丁酯(實(shí)施例6)的1ml 4N HCl/二烷溶液放置3h，然后蒸發(fā)。殘留物溶于2ml THF和2ml EtOH，并順次用14mg(0.118mmol)異煙酸、13mg(0.095mmol)HOBt、22mg(0.118mmol)EDCI和0.055ml(0.4mmol)Et3N處理。24h后，混合物用EtOAc稀釋，順次用水、5％檸檬酸、水、飽和的碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。蒸發(fā)有機(jī)相，剩余的固體用EtOAc洗滌并過濾得到產(chǎn)物，為白色粉末。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.69min；MS(ES)[MNa]+＝596.4實(shí)施例10(2R，4S)-N-丁基-4-((3S，6S，8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六烷-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺在氫氣氛、在20mg 10％Pd-C存在下，將74mg(0.15mmol)(2R，4S)-N-丁基-4-(-(3S，6S，8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六-11-烯-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺的5ml MeOH溶液攪拌1h?；旌衔锝?jīng)硅藻土墊過濾并蒸發(fā)溶劑。自甲苯結(jié)晶出殘留物，分離出目標(biāo)化合物，為白色粉末。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.88min；MS(ES)[MNa]+＝511.4起始原料可以如下文所述方法制備a)(2R，4S)-N-丁基-4-((3S，6S，8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六-11-烯-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺于65℃，加熱99mg(0.21mmol)(3S，6S，8R)-3，8-二甲基-6-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-1，1-二氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六-11-烯-4-酮的1.5ml丁基胺溶液2小時(shí)。蒸發(fā)混合物，殘留物經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶1)得到目標(biāo)化合物，為白色固體。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.64min；MS(ES)[MNa]+＝509.4b)(3S，6S，8R)-3，8-二甲基-6-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-1，1-二氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六-11-烯-4-酮于氮?dú)鈿夥障?，?00ml回流的DCM中加入10mg(0.01mmol)三環(huán)己基膦[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-基叉基][芐基次基]釕(IV)二氯化物(‘Grubbs 2’催化劑)的1ml DCM溶液，隨后滴加入100mg(0.218mmol)(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-N-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-丙酰胺的5ml DCM溶液。2h后，將混合物冷卻至室溫，加入0.05ml丁基乙烯基醚和0.2g活化炭淬滅?；旌衔锝?jīng)硅膠墊處理(EtOAc/己烷1∶1)得到目標(biāo)化合物，為固體。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.87min；MS(ES)[MNa]+＝436.2c)(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-N-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-丙酰胺于室溫下，將162mg(0.5mmol)[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，實(shí)施例6，步驟f)的2ml 4N HCl的二烷溶液放置3h，真空濃縮。殘留物溶于10mlDCM，并用157mg(0.675mmol)(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸(酸IIa)、91mg(0.59mmol)HOBt.H2O、129mg(0.675mmol)EDC.HCl和0.383ml(2.75mmol)Et3N處理，并攪拌過夜。混合物用EtOAc稀釋，順次用水、5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水(4×)洗滌。蒸發(fā)混合物并經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶3，1∶2和1∶1)，得到快速洗脫的非對(duì)映異構(gòu)體，然后得到目標(biāo)產(chǎn)物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.64min；MS(ES)[MNa]+＝464.2下列化合物可以通過類似方法獲得實(shí)施例10aN-丁基-4-((8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十五烷-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用外消旋2-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸(酸IIb)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.49和4.61min(2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)；MS(ES)[MNa2-H]+＝497.2實(shí)施例10b(2R，4S)-N-丁基-4-((3S，6S，8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十四烷-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺可以在步驟c中采用2-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸(酸IId)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸獲得目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.25min；MS(ES)[MNa]+＝483.2實(shí)施例10c(2R，4S)-N-丁基-4-((3S，6S，8R)-3，8-二甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十七烷-6-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺可以在步驟c中采用(S)-3-(庚-6-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸(酸IIe)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸獲得目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.18min；MS(ES)[MNa]+＝525.4實(shí)施例10dN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((7R)-7-甲基-1，1，3-三氧代-1λ*6*-硫雜-4-氮雜-環(huán)十六烷-5-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用2-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸(酸IIf)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.22and 5.40min(2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)；MS(ES)[MNa]+＝497.2 and 497.2實(shí)施例10eN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((8R)-8-甲基-1，1，4-三氧代-1λ*6*-硫雜-5-氮雜-環(huán)十六烷-6-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-(己-5-烯-1-磺?；?-丙酸(酸IIg)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.71and 4.83min(2個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體)；MS(ES)[MNa]+＝497.2 and 497.2實(shí)施例10fN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((9R)-9-甲基-1，1，5-三氧代-1λ*6*-硫雜-6-氮雜-環(huán)十六烷-7-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-(己-5-烯-1-磺酰基)-丙酸(酸IIh)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.25和4.34min(1∶1非對(duì)映異構(gòu)體混合物)；MS(ES)[MNa]+＝497.2實(shí)施例11N-丁基-4-羥基-4-((9R)-16-甲氧基-9-甲基-13-氧代-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-2-甲基-丁酰胺于50℃，將16-甲氧基-9-甲基-11-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-13-酮(49mg，0.12mmol)的1.2ml丁基胺溶液攪拌3h。蒸發(fā)過量的丁胺，殘留物經(jīng)硅膠層析純化，得到目標(biāo)化合物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，為淡黃色粉末。
Mp 178-182℃HPLC(XTerra 4.5cm，95％CH3CN，50℃)3.98min.MS(LC/MS)[MH]+＝477.3起始原料可以如下制備a)16-甲氧基-9-甲基-11-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-13-酮于室溫、1atm氫氣、9mg Pd/C存在下，將60mg(0.15mmol)16-甲氧基-9-甲基-11-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，5，14(18)，15-四烯-13-酮的2mlMeOH溶液氫化2h。過濾并蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物，為褐色泡沫。
b)16-甲氧基-9-甲基-11-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，5，14(18)，15-四烯-13-酮用30分鐘，將90mg(0.21mmol)2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-N-[3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-異煙酰胺的6ml DCM溶液滴加至3.5mg三環(huán)己基膦[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-基亞基][芐基叉基]釕(IV)二氯化物(‘Grubbs第二代催化劑’)的6ml DCM回流溶液中，然后于回流下攪拌1h。LC/MS顯示只有少量產(chǎn)物形成，因此，加入7mg催化劑，然后于回流下將混合物攪拌18h。再加入11mg催化劑并繼續(xù)加熱4h。反應(yīng)混合物直接經(jīng)硅膠層析并用DCM/MeOH 98∶2洗脫，得到目標(biāo)化合物(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)，為綠色泡沫。
HPLC(XTerra 4.5cm，95％CH3CN，50℃)3.85min和4.45min(非對(duì)映異構(gòu)體)。MS(LC/MS)402.4c)2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-N-[3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-異煙酰胺將155mg(0.7mmol)2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-異煙酸(酸IIIb)、105mg(0.47mmol)(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯和63mg(0.42mmol)HOBt.H2O的8ml DMF溶液冷卻至0℃，用107mg(0.56mmol)EDC.HCl處理，于室溫下攪拌3h。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用0.5N檸檬酸水溶液、2M KHCO3和鹽水洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)。硅膠層析，得到目標(biāo)化合物，為無色油狀物。
HPLC(XTerra 4.5cm，95％CH3CN，50℃)4.25min.MS(LC/MS)[MH]+＝430.5下列化合物可以通過類似方法獲得實(shí)施例11aN-丁基-4-羥基-4-((9R)-16-甲氧基-9-甲基-13-氧代-2，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-(芐基氧基羰基-丁-3-烯基-氨基)-5-甲氧基-苯甲酸(酸IIIc)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.21min；MS(ES)[MNa]+＝498.4實(shí)施例11bN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((11R)-11-甲基-15-氧代-2-氧雜-14-氮雜-雙環(huán)[14.3.1]二十碳-1(19)，16(20)，17-三烯-13-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-己-5-烯基氧基-苯甲酸(酸IIId)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.04 and 6.13min(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物)；MS(ES)[MNa]+＝497.4實(shí)施例11cN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((9R)-9-甲基-13-氧代-2-氧雜-12-氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-丁-3-烯基氧基-苯甲酸(酸IIIe)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.44min；MS(ES)[MNa]+＝469.2實(shí)施例11dN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((10R)-10-甲基-14-氧代-2-氧雜-13-氮雜-雙環(huán)[13.3.1]十九碳-1(18)，15(19)，16-三烯-12-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-戊-4-烯基氧基-苯甲酸(酸IIIf)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.87min；MS(ES)[MNa]+＝483.2實(shí)施例11eN-丁基-4-((6R)-6，12-二甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-甲基-間苯二甲氨酸(酸IVa)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.35min；MS(ES)[MNa]+＝496.4實(shí)施例11fN-丁基-4-((6R)-12-乙基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-乙基-間苯二甲氨酸(酸IVb)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.64min；MS(ES)[MNa]+＝510.4實(shí)施例11gN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((6R)-6-甲基-2，13-二氧代-12-丙基-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-丙基-間苯二甲氨酸(酸IVc)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.01min；MS(ES)[MNa]+＝524.4實(shí)施例11hN-丁基-4-((6R)-12-環(huán)丙基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-環(huán)丙基-間苯二甲氨酸(酸IVd)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.68min；MS(ES)MH+＝500.4，[MNa]+＝522.4實(shí)施例11iN-丁基-4-羥基-4-((6R)-16-甲氧基-6，12-二甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-甲基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸(酸IVe)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.82min；MS(ES)[MNa]+＝526.4實(shí)施例11jN-丁基-4-((6R)-12-乙基-16-甲氧基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-乙基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸(酸IVf)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.82min；MS(ES)MH+＝518.4，[MNa]+＝540.4實(shí)施例11kN-丁基-4-((6R)-12-丙基-16-甲氧基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-烯丙基-N-丙基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸(酸IVg)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.19min；MS(ES)MH+＝532.4，[MNa]+＝554.4實(shí)施例11lN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((6R)-6-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-雙環(huán)[13.3.1]十九碳-1(18)，15(19)，16-三烯-4-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用N-丁-3-烯基-間苯二甲氨酸(酸IVh)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.34min；MS(ES)MH+＝474.4，[MNa]+＝496.4實(shí)施例11mN-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((9R)-9-甲基-2，2，13-三氧代-2λ*6*-硫雜-12-氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，在步驟c中采用3-(丁-3-烯-1-磺?；?-苯甲酸(酸IIIg)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.65min；MS(ES)[MNa]+＝517.2實(shí)施例12N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((6R)-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，并且根據(jù)類似于實(shí)施例11的方法制備，但在步驟c中采用[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(制備參見實(shí)施例7)代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(如實(shí)施例6所述)以及N-丁-3-烯基-間苯二甲氨酸(酸IVh)代替2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-異煙酸(酸IIIb)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.95min；MS(ES)[MNa]+＝482.4下列化合物可以通過類似方法制備實(shí)施例12aN-丁基-4-((9R)-3-乙基-9-甲基-2，13-二氧代-4-氧雜-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，采用N-烯丙基氧基-N-乙基-間苯二甲氨酸(酸IVi)代替N-丁-3-烯基-間苯二甲氨酸。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.14min；MS(ES)[MNa]+＝556.4實(shí)施例12bN-丁基-4-((6R)-11-乙基-15-甲氧基-6-甲基-2，12-二氧代-3，11-二氮雜-雙環(huán)[11.3.1]十七烷-1(17)，8，13，15-四烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物形式獲得，采用N-烯丙基-N-乙基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸(酸IVf)代替N-丁-3-烯基-間苯二甲氨酸。在最后一步中的氫化條件下，C＝C雙鍵未被還原。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.33min；MS(ES)[MNa]+＝524.4實(shí)施例13(2R，4S)-N-丁基-4-((10R，12S)-17-乙氧基-10-甲基-14-氧代-2，13，18-三氮雜-雙環(huán)[13.3.1]十九碳-1(18)，15(19)，16-三烯-12-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例11以單一非對(duì)映異構(gòu)體的形式制備，在步驟c中，采用2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)代替2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-異煙酸，在步驟c中采用非對(duì)映異構(gòu)體純的[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.00min；MS(ES)[MH]+＝505.2起始原料可以通過如下方法獲得a)[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔丁酯目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例6所述方法獲得，但在步驟g中采用非對(duì)映異構(gòu)純的[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯。
Rf(己烷/乙酸乙酯3∶1)0.361H-NMR(400MHz，CDCl3)5.86-5.76(m，1H)，5.08-4.95(m，2H)，4.55-4.05(m，1H)，4.37(d，1H)，2.78-2.68(m，1H)，2.49-2.66(m，1H)，2.18-2.02(m，2H)，2.01-1.92(m，1H)，1.74-1.66(m，1H)，1.59-1.26(m，4H)，1.47(s，9H)，1.31(t，3H)，0.97(t，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，40-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.94min；MS(ES)[MNa]+＝348.2b)[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔丁酯于25℃，將61.6g(0.4mol)R-(+)-香茅醛、44.46g(0.38mol)氨基甲酸叔丁酯、74.76g(0.42mol)4-甲基-苯亞磺酸鈉和22.6ml(0.6mol)甲酸在300ml乙腈中攪拌4天?；旌衔镉?00ml EtOAc和1000ml水稀釋。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液洗滌，然后再用水洗滌4次。加入20ml EtOH后，真空濃縮溶液，得到[(R)-3，7-二甲基-1-(甲苯-4-磺?；?-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯，為無色油狀物，放置后固化。
Rf(EtOAc/己烷1∶3)0.49LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.82min；MS(ES)[MNa]+＝432.2于氮?dú)鈿夥障?，將該物質(zhì)溶于500ml THF并冷卻至-75℃。通過導(dǎo)管，于正氮?dú)鈮合?，?0分鐘加入包含呋喃-2-醇鋰的THF的溶液A。溶液A可以通過下列方法制備。于-70℃、氮?dú)鈿夥障?，?8ml(0.368mol)HMDS的500ml無水THF冷卻，并滴加入230ml 1.6M BuLi的己烷溶液(0.368mol)。30分鐘后，滴加入30.92g(0.368mol)5H-呋喃-2-酮的10ml無水THF，并使溫度保持在-40℃以下。于-40℃，攪拌溶液A以避免在加入前形成沉淀。加入后，于-75℃攪拌反應(yīng)混合物1.5h，然后直接傾至攪拌的1000ml水和1000ml EtOAc的混合物中。有機(jī)相順次用5％檸檬酸水溶液、水、5％NaHCO3水溶液和水洗滌。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，殘留物經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶5)得到油狀產(chǎn)物。自己烷結(jié)晶，得到[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯和[(1R，3R)-3，7-二甲基-1-((R)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯的混合物，為白色粉末。非對(duì)映異構(gòu)體均可以通過Chiralpak AD柱(5×50cm)，采用己烷/異丙醇＝97∶3作為洗脫液進(jìn)行定量分離。分離緩慢流動(dòng)的非對(duì)映異構(gòu)體，蒸發(fā)洗脫液后，得到純的非對(duì)映異構(gòu)體[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯，為白色粉末。
Mp.58-61℃13C-NMR(100MHz，CDCl3)173.2，155.2，154.8，131.4，124.1，121.3，84.8，79.6，49.1，39.6，36.1，29.1，28.1，25.6，25.1，19.5，17.5下列化合物可以通過類似方法制備實(shí)施例13a(2R，4S)-N-丁基-4-((9R，11S)-9，16-二甲基-13-氧代-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用2-丁-3-烯基氨基-6-甲基-異煙酸(酸IIIa)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.59min；MS(ES)[MH]+＝461.4實(shí)施例13b(2R，4S)-N-丁基-4-((9R，11S)-3-乙基-16-甲氧基-9-甲基-13-氧代-2，12，17-三氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(17)，14(18)，15-三烯-11-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用2-(1-乙基-丁-3-烯基氨基)-6-甲氧基-異煙酸(酸IIIi)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.72min；MS(ES)[MH]+＝505.4實(shí)施例13c(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-16-乙氧基-12-乙基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-烯丙基-N-乙基-5-乙氧基-間苯二甲氨酸(酸IVj)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.11min；MS(ES)MH+＝532.4，[MNa]+＝554.4實(shí)施例13d(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-12-乙基-16-異丙氧基-6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-烯丙基-N-乙基-5-異丙氧基-間苯二甲氨酸(酸IVk)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.35min；MS(ES)MH+＝546.4，[MNa]+＝568.4實(shí)施例13e(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-12-乙基-6，16-二甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-烯丙基-5-甲基-N-乙基-間苯二甲氨酸(酸IVl)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.98min；MS(ES)[MH]+＝502.4，[MNa]+＝524.4實(shí)施例13f(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-12-乙基-16-甲磺?；?6-甲基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-烯丙基-N-乙基-5-甲磺酰基-間苯二甲氨酸(酸IVm)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.49min；MS(ES)[MH]+＝566.4實(shí)施例13g(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-12-乙基-6-甲基-16-唑-2-基-2，13-二氧代-3，12-二氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-烯丙基-N-乙基-5-唑-2-基-間苯二甲氨酸(酸IVn)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.82min；MS(ES)[MH]+＝555.4實(shí)施例13h(2R，4S)-N-丁基-4-((4S，6R)-13-乙基-6-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮雜-雙環(huán)[13.3.1]十九碳-1(18)，15(19)，16-三烯-4-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-丁-3-烯基-N-乙基-間苯二甲氨酸(酸IVo)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.90min；MS(ES)[MH]+＝502.4，[MNa]+＝524.4實(shí)施例13i(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((4S，6R)-6-甲基-2，14-二氧代-13-丙基-3，13-二氮雜-雙環(huán)[13.3.1]十九碳-1(18)，15(19)，16-三烯-4-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-丁-3-烯基-N-丙基-間苯二甲氨酸(酸IVp)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.27min；MS(ES)[MH]+＝516.4，[MNa]+＝538.4實(shí)施例14(2R，4S)-N-丁基-4-((10R，12S)-2，10-二甲基-1，1，14-三氧代-1λ*6*-硫雜-2，13-二氮雜-環(huán)十六烷-12-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例11以單一非對(duì)映異構(gòu)體的形式獲得，但在步驟c中，采用3-(甲基-戊-4-烯基-氨磺?；?-丙酸(酸Va)代替2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-異煙酸，并采用非對(duì)映異構(gòu)純的[(1S，3R)-3，7-二甲基-1-((S)-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.66min；MS(ES)[MNa]+＝512.4下列化合物可以通過類似方法制備實(shí)施例14a(2R，4S)-4-羥基-2-甲基-N-(3-甲基-丁基)-4-((7S，9R)-9-甲基-2，5-二氧代-1，6-二氮雜-環(huán)十五烷-7-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用N-丁-3-烯基-琥珀酰胺酸(酸Vb)代替2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸(酸IIIh)獲得。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.15min；MS(ES)[MNa]+＝462.4實(shí)施例15(2R，4S)-N-丁基-4-((5S，8S，10R)-5，10-二甲基-3，3，6-三氧代-3λ*6*-硫雜-7-氮雜-雙環(huán)[11.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯-8-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以以類似于實(shí)施例10的方法獲得，但在步驟c中采用(5S，8S，10S)-5，10-二甲基-8-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-3，3-二氧代-3λ*6*-硫雜-7-氮雜-雙環(huán)[11.3.1]十七烷-1(17)，11，13，15-四烯-6-酮代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，實(shí)施例6，步驟f)作為原料。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.34min；MS(ES)[MNa]+＝517.2起始原料可以如下制備a)(5S，8S，10S)-5，10-二甲基-8-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-3，3-二氧代-3λ*6*-硫雜-7-氮雜-雙環(huán)[11.3.1]十七烷-1(17)，11，13，15-四烯-6-酮目標(biāo)化合物可以如實(shí)施例10步驟b所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.45min；MS(ES)[MNa]+＝442.2b)(S)-2-甲基-N-[(1S，3S)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-戊-4-烯基]-3-(3-乙烯基-苯基甲磺酰基)-丙酰胺目標(biāo)化合物可以如實(shí)施例10步驟c所述方法制備，采用(S)-2-甲基-3-(3-乙烯基-苯基甲磺?；?-丙酸(酸IIi)代替(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸(酸IIa)。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.15min；MS(ES)[MNa]+＝470.2c)[(S)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-戊-4-烯基]-氨基甲酸叔丁酯目標(biāo)化合物可以如實(shí)施例6步驟e所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.09min；MS(ES)[MNa]+＝320.2
d)[(S)-3-甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-戊-4-烯基]-氨基甲酸叔丁酯于氮?dú)庀?，?.19g(6.67mmol)(R)-6-叔-丁氧基羰基氨基-4-甲基-6-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己酸、0.293g(1.46mmol)乙酸銅(II)單水合物、0.2ml吡啶和5.4g(12.0mmol)Pb(OAc)4的45ml苯的混合物回流18h。冷卻混合物至rt，加入水，有機(jī)相用水和5％NaHCO3水溶液洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(EtOAc/己烷1∶6和1∶4)得到目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.60min；MS(ES)[MNa]+＝306.2e)(R)-6-叔-丁氧基羰基氨基-4-甲基-6-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己酸將2.09g(6.67mmol)[(R)-3-甲基-6-氧代-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己基]-氨基甲酸叔丁酯、1.2g(10mol)NaH2PO4、50ml tBuOH和10ml水的混合物順次用2-甲基-2-丁烯的20ml 2M THF溶液和2.35g(20.6mmol)NaClO2(技術(shù)級(jí)，80％)處理。攪拌10min后，混合物用EtOAc和鹽水稀釋。有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到目標(biāo)化合物，為樹酯狀，可以不經(jīng)純化用于下一步驟。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.71min；MS(ES)[MNa]+＝352.2f)[(R)-3-甲基-6-氧代-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-己基]-氨基甲酸叔丁酯將5.4g(15.9mmol)[(R)-3，7-二甲基-1-(5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-辛-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(實(shí)施例6步驟g，醛的制備)在200ml DCM和10mlMeOH的混合物中的溶液冷卻至-70℃。加入0.63g(7.5mmol)NaHCO3，通入O3的O2，攪拌混合物至藍(lán)色。過量臭氧經(jīng)通入氧氣除去。加入5.0g(19mmol)三苯膦，于室溫下使混合物溫?zé)岵嚢?h。過濾混合物并真空濃縮。經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶1)，得到目標(biāo)醛。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.14min；MS(ES)[MNa]+＝336.2下列化合物可以通過類似方法制備實(shí)施例15a(2R，4S)-N-丁基-4-羥基-2-甲基-4-((5S，8S，10R)-5，10，15-三甲基-3，3，6-三氧代-3λ*6*-硫雜-7-氮雜-雙環(huán)[11.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯-8-基)-丁酰胺目標(biāo)化合物可以采用(S)-2-甲基-3-(3-甲基-5-乙烯基-苯基-甲磺?；?-丙酸(酸IIi)代替(S)-2-甲基-3-(3-乙烯基-苯基-甲磺酰基)-丙酸(酸IIj)獲得。
Rf(DCM/甲醇＝95∶5)0.36MS(LC/MS)[MNa]+＝5311H-NMR(400MHz，CDCl3)7.09(s，1H)，7.03(s，1H)，6.92(s，1H)，6.03(d，1H)，5.75(t，1H)，4.31(d，1H)，4.16(d，1H)，4.15-4.05(m，1H)，3.90(t，1H)，3.68(t，1H)，3.43-3.20(m，2H)，3.06(dd，1H)，2.83-2.50(m，4H)，2.87(s，3H)，1.82(t，1H)，1.65-1.0(m，11H)，1.48(d，3H)，1.22(d，3H)，0.95(t，3H)，0.88(d，3H)實(shí)施例16(2R，4S)-N-丁基-4-((9S，12S，14R)-9，14-二甲基-7，10-二氧代-6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十二氫-5-氧雜-8，11-二氮雜-苯并環(huán)十五碳烯-12-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例6制備，在步驟c中采用(2-烯丙基-苯氧基)-乙酸代替(2S)-叔-丁氧基羰基-2-氨基-6-庚烯酸，并在步驟d中，以[(S)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-戊-4-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(實(shí)施例15，步驟d)代替{(S)-1-[(1S，3R)-3-甲基-1-((2S，4R)-4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基氨基甲?；鵠-乙基}-氨基甲酸叔-丁酯作為起始原料。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.78min；MS(ES)[MNa]+＝512.4實(shí)施例17(2R，4S)-N-丁基-4-((5S，8S，10R)-5，10-二甲基-3，3，6-三氧代-3λ*6*-硫雜-7-氮雜-雙環(huán)[12.3.1]十八-1(18)，14，16-三烯-8-基)-4-羥基-2-甲基-丁酰胺目標(biāo)化合物可以類似于實(shí)施例10的方法制備，以[(R)-3-甲基-1-(5-氧代-2，5-二氫-呋喃-2-基)-己-5-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，實(shí)施例7步驟c)代替[(R)-3-甲基-1-(4-甲基-5-氧代-四氫-呋喃-2-基)-庚-6-烯基]-氨基甲酸叔-丁酯(非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，實(shí)施例6步驟f)在步驟c中作為起始原料。
Rf(DCM/甲醇＝95∶5)0.35
MS(LC/MS)[MNa]+＝531構(gòu)建模塊酸I R＝H，Me，Et，PrX＝鍵、-O-、-NCbz、-NBnn＝1-4m＝1-4a)3-(烯丙基-芐基氧基羰基-氨基)-丙酸于60℃，向2.5g(11.2mmol)3-芐基氧基羰基氨基-丙酸的30ml DMF和30ml THF溶液中加入1.34g(33.6mmol，60％礦物油懸浮液)NaH的混合物加熱3h。冷卻后，加入1.42ml(16.8mmol)烯丙基溴化物。于室溫下攪拌40h后，混合物用10％檸檬酸稀釋并用EtOAc萃取三次。合并的有機(jī)層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空除去揮發(fā)物。殘留物經(jīng)硅膠層析(己烷/EtOAc 3∶1)，得到目標(biāo)產(chǎn)物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.41-7.30(m，5H)，5.88-5.74(m，1H)，5.27-5.12(m，4H)，4.02-3.93(m，2H)，3.63-3.53(m，2H)，2.75-2.61(m，2H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.13min；MS(ES)[MNa]+＝286.2b)(R)-4-甲基-庚-6-烯酸該化合物可以類似于的已知的鏡像(S)-4-甲基-庚-6-烯酸的方法制備。
c)(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-乙酸于室溫、氮?dú)鈿夥障拢瑢?.5g(5.81mmol)2-甲基-3-丁-1-醇和0.348g(8.71mmol，60％礦物油懸浮液)NaH的10ml THF懸浮液攪拌3h。加入固體鈉碘代乙酸鹽(1.81g，8.71mmol)，并繼續(xù)攪拌2h。混合物用水和鹽水稀釋，用1N HCl酸化并用EtOAc萃取。有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮。于約1mbar(70-110℃)將殘留物用kugelrohr蒸餾，得到目標(biāo)化合物，為無色液體。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.85-5.76(m，1H)，5.16-5.05(m，2H)，4.17(s，2H)，3.53-3.42(m，2H)，2.60-2.50(m，1H)，1.07(d，3H)MS(neg)[M-H]-143.1d)(1-乙基-丁-3-烯基氧基)-乙酸目標(biāo)化合物可以類似于Ic的方法用己-5-烯-3-醇代替2-甲基-3-丁-1-醇制備。
MS(neg)[M-H]-157e)(1-丙基-戊-4-烯基氧基)-乙酸目標(biāo)化合物可以類似于Ic的方法用辛-7-烯-4-醇代替2-甲基-3-丁-1-醇制備。
MS(neg)[M-H]-185f)(芐基-戊-4-烯基-氨基)-乙酸目標(biāo)化合物可以通過將相應(yīng)的甲酯經(jīng)氫氧化鈉皂化制備，并作為鈉鹽使用。
酸II R＝H、Mea)(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸 實(shí)施例3實(shí)施例10，步驟c將1.62g(10mmol)(S)-3-乙酰基硫烷基-2-甲基-丙酸的20ml MeOH溶液用7.5ml 4N NaOH和1.63g(10mmol)6-溴-己-1-烯處理。于室溫下攪拌1h，混合物用50ml EtOAc稀釋并用25ml 1N HCl酸化。有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并真空濃縮得到(S)-3-己-5-烯基硫烷基-2-甲基-丙酸，為油，可以不經(jīng)純化用于下一步驟。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.03min；MS(ES)[MNa2-H]+＝247產(chǎn)物溶于20ml MeOH和10ml水，于+4℃冷卻，用7.35g(22mmol)過硫酸氫鉀制劑處理。于室溫下攪拌混合物18h，用20ml 1N HCl稀釋，用EtOAc(3×)萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)并自TBME/己烷結(jié)晶，得到目標(biāo)化合物，為白色粉末。
Mp 51-54℃LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.58min；MS(ES)[MNa]+＝257b)(S)-2-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸 實(shí)施例3a目標(biāo)化合物可以類似于IIa方法獲得，采用5-溴-戊-1-烯代替6-溴-己-1-烯。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.84-5.74(m，1H)，5.14-5.09(m，2H)，3.63-3.58(m，1H)，3.29-3.20(m，1H)，3.06-2.98(m，3H)，2.28-2.23(m，2H)，2.04-1.96(m，2H)，1.49(d，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.91min；MS(ES)[MNa]+＝243c)2-甲基-3-(戊-4-烯-1-磺?；?-丙酸實(shí)施例10a目標(biāo)化合物可以類似于IIa方法制備，采用5-溴-戊-1-烯代替6-溴-己-1-烯，外消旋3-乙?；蛲榛?2-甲基-丙酸代替(S)-3-乙?；蛲榛?2-甲基-丙酸。
d)(S)-3-(丁-3-烯-1-磺?；?-2-甲基-丙酸實(shí)施例10b目標(biāo)化合物可以類似于IIa方法制備，采用4-溴-丁-1-烯代替6-溴-己-1-烯。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.91-5.81(m，1H)，5.23-5.16(m，2H)，3.66-3.60(m，1H)，3.63(dd，1H)，3.15-3.11(m，2H)，3.02(dd，1H)，2.68-2.62(m，2H)，1.49(d，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，5-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.47min；MS(ES)[MNa]+＝229.0e)(S)-3-(庚-6-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸實(shí)施例10c目標(biāo)化合物可以通過類似于IIa的方法獲得，采用甲苯-4-磺酸庚-6-烯酯代替6-溴-己-1-烯。
f)(庚-6-烯-1-磺酰基)-乙酸實(shí)施例10d目標(biāo)化合物可以通過類似于IIa的方法獲得，采用甲苯-4-磺酸庚-6-烯酯代替6-溴-己-1-烯，巰基-乙酸代替(S)-3-乙?；蛲榛?2-甲基-丙酸。
g)3-(己-5-烯-1-磺?；?-丙酸實(shí)施例10e目標(biāo)化合物可以通過類似于IIa的方法獲得，采用3-巰基-丙酸代替(S)-3-乙酰基硫烷基-2-甲基-丙酸。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.86-5.76(m，1H)，5.10-5.01(m，2H)，3.33(t，2H)，3.08-3.01(m，2H)，2.98(t，2H)，2.18-2.10(m，2H)，2.94-2.87(m，2H)，1.63-1.55(m，2H)h)4-(戊-4-烯-1-磺?；?-丁酸實(shí)施例10f將冰冷的0.584g(6.66mmol)4-戊烯-1-醇和1.11ml(14.0mmol)吡啶的5ml DCM溶液用0.866ml(6.77mmol)苯磺酰氯處理。于0℃30分鐘后，于室溫?cái)嚢杌旌衔镞^夜?；旌衔镉肈CM稀釋，用5％檸檬酸水溶液、水和5％NaHCO3水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到苯磺酸戊-4-烯酯，為無色油狀物，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.97-7.92(m，2H)，7.72-7.66(m，1H)，7.63-7.56(m，2H)，5.76-5.66(m，1H)，5.01-4.95(m，2H)，4.08(t，2H)，2.11(q，2H)，1.79(quintet，2H)將該酯(1.11g，4.89mmol)、0.5g(4.89mmol)硫代丁內(nèi)酯和2.45ml(9.78mmol)4N NaOH的混合物攪拌7天?；旌衔镉?.5ml 4N HCl酸化并用EtOAc萃取。有機(jī)相用硫酸鈉干燥并經(jīng)硅膠層析(EtOAc/己烷1∶3，1∶2和1∶1)，得到4-戊-4-烯基硫烷基-丁酸，為無色油狀物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)5.84-5.69(m，1H)，5.06-4.93(m，2H)，2.60-2.44(m，6H)，2.20-2.11(m，2H)，1.97-1.84(m，2H)，1.72-1.60(m，2H)將該酸溶于20ml MeOH和10ml水，于+4℃冷卻并用3.52g(10.84mmol)過硫酸氫鉀制劑處理。于0℃，攪拌混合物1h，再于室溫?cái)嚢?8h?；旌衔镉?0ml 1N HCl稀釋并用EtOAc萃取。有機(jī)相用亞硫酸鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)并自EtOAc/己烷結(jié)晶，得到目標(biāo)化合物，為白色粉末。
Mp 104-107℃1H-NMR(300MHz，CDCl3)5.81-5.67(m，1H)，5.10-5.02(m，2H)，3.10-3.03(m，2H)，3.01-2.94(m，2H)，2.61(t，2H)，2.27-2.10(m，4H)，2.01-1.89(m，2H)
i)(S)-2-甲基-3-(3-乙烯基-苯基甲磺?；?-丙酸實(shí)施例15于80℃、氮?dú)夥障?，?.84g(5mmol)、5ml 1N NaOH、1.38g(10mmol)K2CO3和0.072mg Pd(PPh3)4(0.25mmol)的5ml水和50ml DME混合物加熱。冷卻后，混合物用20ml 2N HCl酸化并用150ml TBME萃取。有機(jī)相經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到目標(biāo)化合物，可以不經(jīng)純化直接用于下一步驟。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.75min；MS(API-ES)[M-H]-＝267.0起始原料可以如下制備1)(S)-3-(3-碘代-苯基甲磺酰基)-2-甲基-丙酸目標(biāo)化合物可以類似于(S)-3-(己-5-烯-1-磺酰基)-2-甲基-丙酸(IIa)制備，但采用(S)-3-(3-碘代-芐基硫烷基)-2-甲基-丙酸代替(S)-3-己-5-烯基硫烷基-2-甲基-丙酸作為原料。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.97min；MS(API-ES)[M-H]-＝367.02)(S)-3-(3-碘代-芐基硫烷基)-2-甲基-丙酸目標(biāo)化合物可以類似于(S)-3-己-5-烯基硫烷基-2-甲基-丙酸(IIa)制備，但采用1-溴甲基-3-碘代-苯代替6-溴-己-1-烯作為原料。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.11min；MS(API-ES)[M-H]-＝335.0j)(S)-2-甲基-3-(3-甲基-5-乙烯基-苯基甲磺?；?-丙酸實(shí)施例15a將乙烯基三氟硼酸鉀(247mg，1.8mmol)、三乙胺(0.21ml，1.5mmol)和[1，1′-雙(二苯基膦基-κP)二茂鐵]二氯代-鈀(24mg)加至(S)-3-(3-溴-5-甲基-苯基甲磺?；?-2-甲基-丙酸(0.5g，1.5mmol)的25ml丙醇中。于氬氣、回流下，攪拌混合物2.5小時(shí)。冷卻至室溫，混合物用EtOAc稀釋，用0.5N鹽酸水溶液和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠層析純化(flashmaster，DCM至DCM/甲醇9/1)，隨后自DCM/乙醚/己烷結(jié)晶得到目標(biāo)化合物，為灰白色晶體。
Rf(DCM/甲醇＝9∶1)0.45MS(LC-MS)[MNa]+＝305
起始原料可以如下文所述方法制備x)(S)-3-(3-溴-5-甲基-苯基甲磺?；?-2-甲基-丙酸向6.48g(21mmol)(S)-3-(3-溴-5-甲基-芐基硫烷基)-2-甲基-丙酸的70ml乙腈溶液和35ml水中加入65.7g(107mmol)過硫酸氫鉀制劑。于室溫下攪拌2.5小時(shí)，混合物用EtOAc和水稀釋得到澄清溶液。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥并蒸發(fā)溶劑。自DCM/乙醚和少量甲醇結(jié)晶，得到目標(biāo)化合物，為白色晶體。
Rf(DCM/甲醇＝95∶5)0.34MS(LC-MS)[MNa]+＝357/359xx)1-溴-3-溴甲基-5-甲基-苯向5ml(36.8mmol)5-溴-m-二甲苯和6-55g(36.8mmol)N-溴琥珀酰亞胺的35ml四氯甲烷溶液中加入0.138ml(0.74mmol)過苯甲酸叔-丁酯。用加熱燈照射混合物并于回流下攪拌3小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，過濾并蒸發(fā)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析分離(flashmaster，己烷)，得到目標(biāo)化合物，為白色晶體。
Rf(己烷)0.38MS(EI-MS)262/264/266[M+，三溴化合物的特征]xxx)(S)-3-(3-溴-5-甲基-芐基硫烷基)-2-甲基-丙酸將5.55g(21mmol)1-溴-3-溴甲基-5-甲基-苯和2.90ml(21mmol)(S)-3-乙酰基硫烷基-2-甲基-丙酸的32ml甲醇溶液在冰浴上冷卻，加入4N氫氧化鈉水溶液(15.8ml，63mmol)。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。向混合物中加入EtOAc，有機(jī)層用水和鹽水洗滌并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠過濾(flashmaster，己烷至己烷/EtOAc 4/6)，得到目標(biāo)化合物。
Rf(己烷/EtOAc＝7/3)0.361H-NMR(400MHz，CDCl3)7.30(s，1H)，7.25(s，1H)，7.08(s，1H)，3.68(s，2H)，2.79(dd，1H)，2.74-2.65(m，1H)，2.52(dd，1H)，2.35(s，3H)，1.30(d，3H)酸III R1＝烯丙基、丁-3-烯基、戊-4-烯基Y＝O、NH、NMe、SO2
X＝H、Me、OMe、OEt a)2-丁-3-烯基氨基-6-甲基-異煙酸實(shí)施例5和13a將86mg(0.33mmol)2-丁-3-烯基氨基-6-甲基-異煙酸叔-丁酯的2mlTFA溶液攪拌18h并蒸發(fā)。由此得到的目標(biāo)化合物可以不經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)7.20(s，1H)，7.00(s，1H)，5.87-5.71(m，1H)，5.21-5.10(m，2H)，3.42(t，2H)，2.58(s，3H)，2.47(q，2H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))1.23min.MS(ES)[MH]+＝207.2起始原料可以如下制備x)2-丁-3-烯基氨基-6-甲基-異煙酸叔丁酯于60℃，在嚴(yán)格的無氧氣狀態(tài)下，將200mg(0.88mmol)2-氯代-6-甲基-異煙酸叔丁酯、10mg乙酸鈀(II)(0.044mmol)、27mg(0.44mol)BINAP(R(+)-2，2-雙(二苯基膦基)-1，1-聯(lián)萘)和62mg(0.88mmol)丁-3-烯基胺的10ml甲苯的混合物加熱4h?；旌衔镉肊tOAc稀釋，用10％NaHCO3水溶液和水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析(己烷/EtOAc 9∶1)，得到目標(biāo)化合物。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)6.86(s，1H)，6.67(s，1H)，5.87-5.71(m，1H)，5.16-5.05(m，2H)，4.6(br，1H)，3.31(q，2H)，2.4-2.31(m，2H)，2.38(s，3H)，1.55(s，9H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.75minxx)2-氯代-6-甲基-異煙酸叔丁酯將0.2g(1.17mmol)2-氯代-6-甲基-異煙酸的5ml甲苯懸浮液用2滴DMF和0.17ml(2.33mmol)SOCl2處理并回流4h?；旌衔餃p壓濃縮并將殘留物溶于1.5ml DCM、0.22ml tBuOH和0.24ml Et3N，并在7mg(0.06mmol)DMAP存在下攪拌18h?；旌衔镉肈CM稀釋，用10％檸檬酸水溶液、水和10％NaHCO3水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析(己烷/EtOAc 4∶1和3∶1)得到目標(biāo)化合物，為淡黃色固體。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.65(s，1H)，7.60(s，1H)，2.82(s，3H)，1.62(s，9H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.83minb)2-丁-3-烯基氨基-6-甲氧基-異煙酸實(shí)施例11步驟c于140℃，將1.0g(5.3mmol)2-氯代-6-甲氧基-異煙酸、4.4g(53mmol，86％NMR純度)丁-3-烯基胺和85mg(0.53mmol)CuSO4的10ml H2O的混合物在加壓反應(yīng)容器中攪拌36h。反應(yīng)混合物用0.5M檸檬酸水溶液稀釋并用EtOAc萃取2次。合并的萃取物用檸檬酸溶液、水和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。經(jīng)硅膠層析得到目標(biāo)化合物，為灰白色粉末。
HPLC(XTerra 4.5cm，95％CH3CN，50℃)3.64min.MS(LC/MS)[MH]+＝223.3c)3-(芐基氧基羰基-丁-3-烯基-氨基)-5-甲氧基-苯甲酸實(shí)施例11a于40℃，將0.75g(2.38mmol)3-芐基氧基羰基氨基-5-甲氧基-苯甲酸、1.07g(2.85mmol)NaI、2.3g(7.14mmol)Cs2CO3和約1ml(10mmol)4-溴-丁-1-烯的2ml DMF的混合物加熱18h。冷卻后，反應(yīng)混合物用TBME稀釋并用水洗滌。有機(jī)相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析純化(己烷EtOAc 5∶1)得到3-(芐基氧基羰基-丁-3-烯基-氨基)-5-甲氧基-苯甲酸甲酯。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.07min.MS(ES)[MNa]+＝392.2該酯(118mg，0.32mmol)溶于2ml MeOH，并用2ml 1N NaOH處理18h?；旌衔锝?jīng)1N HCl酸化并用EtOAc萃取。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物。
LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.14min.MS(ES)[MNa]+＝378.2，[M-H+Na2]+＝400.2d)3-己-5-烯基氧基-苯甲酸實(shí)施例11b
目標(biāo)化合物可以類似于3-(9-癸烯基氧基)苯甲酸(Lin，H-C等，Macro分子1998，31，7298.)制備。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)7.73-7.10(m，4H)，5.90-5.76(m，1H)，5.08-4.95(m，2H)，4.02(t，2H)，3.14(q，2H)，1.90-1.78(m，2H)，1.66-1.54(m，2H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.33min.MS(ES)[M-H+Na2]+＝265.2e)3-丁-3-烯基氧基-苯甲酸實(shí)施例11c目標(biāo)化合物可以類似于3-(9-癸烯基氧基)苯甲酸(Lin，H-C等，Macro分子1998，31，7298.)制備。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.71(d，1H)，7.63-7.60(m，1H)，7.37(t，1H)，7.16(dd，1H)，5.97-5.87(m，1H)，5.22-5.12(m，2H)，4.09(t，2H)，2.61-2.56(m，2H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.55min.MS(ES)[MNa2-H]+＝237.0f)3-戊-4-烯基氧基-苯甲酸實(shí)施例11d目標(biāo)化合物可以類似于3-(9-癸烯基氧基)苯甲酸(Lin，H-C等，Macro分子1998，31，7298.)制備1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.71(d，1H)，7.62(s，1H)，7.37(t，1H)，7.16(d，1H)，5.92-5.82(m，1H)，5.11-5.01(m，2H)，4.04(t，2H)，2.30-2.25(m，2H)，1.96-1.90(m，2H)LC(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))5.00min.MS(ES)[MNa2-H]+＝251.0g)3-(丁-3-烯-1-磺酰基)-苯甲酸實(shí)施例11m目標(biāo)化合物可以類似于IIa的方法，采用4-溴-丁-1-烯代替6-溴-己-1-烯并用3-巰基-苯甲酸代替(S)-3-乙?；蛲榛?2-甲基-丙酸制備。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)8.71(s，1H)，8.45(d，1H)，8.22(d，1H)，7.58(t，1H)，5.82-5.72(m，1H)，5.14-5.09(m，2H)，3.29-3.22(m，2H)，2.58-2.50(m，2H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.43min；MS(ES)[MNa]+＝263.0
h)2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸實(shí)施例13目標(biāo)化合物可以通過攪拌2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸叔-丁酯的無水三氟乙酸溶液18h制備。蒸發(fā)TFA，得到目標(biāo)化合物，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
起始原料可以采用例如IIIa和IIIb所述方法制備。
x)2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸叔丁酯1H-NMR(300MHz，CDCl3)6.47(s，2H)，5.89-5.76(m，1H)，5.10-4.97(m，2H)，4.28(q，2H)，3.30(t，3H)，2.20(q，2H)，1.79-1.67(m，2H)，1.57(s，9H)，1.39(t，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.66min；MS(API-ES)[M-H]-＝305.2i)2-(1-乙基-丁-3-烯基氨基)-6-甲氧基-異煙酸實(shí)施例13b目標(biāo)化合物可以通過將2-乙氧基-6-戊-4-烯基氨基-異煙酸叔-丁酯的無水三氟乙酸溶液攪拌18h制備。蒸發(fā)TFA，得到目標(biāo)化合物，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
起始原料可以采用例如IIIa和IIIb所述方法制備。
x)2-(1-乙基-丁-3-烯基氨基)-6-甲氧基-異煙酸叔丁酯1H-NMR(400MHz，CDCl3)6.49(s，2H)，5.91-5.80(m，1H)，5.16-5.08(m，2H)，4.4(br，1H)，3.89(s，3H)，3.85-3.76(m，1H)，2.42-2.29(m，2H)，1.72-1.51(m，2H)，1.58(s，9H)，0.99(t，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))6.64minxx)1-乙基-丁-3-烯基胺，鹽酸鹽于100℃，將攪拌的23.4g(149mmol)(1-乙基-丁-3-烯基)-氨基甲酸甲酯、33.4g(0.6mol)粉末狀KOH的50ml乙二醇的混合物加熱。氣體產(chǎn)生結(jié)束后，于118℃將混合物進(jìn)一步加熱1小時(shí)，蒸餾除去甲醇。冷卻后，混合物用水稀釋，用TBME萃取兩次。合并的有機(jī)相用10％NaCO3水溶液洗滌，經(jīng)K2CO3干燥并用75ml 2N HCl萃取。水層真空濃縮，殘留物自EtOAc/TBME結(jié)晶，得到目標(biāo)化合物(鹽酸鹽)。
H-NMR(400MHz，D2O)5.76-5.64(m，1H)，5.18-5.11(m，2H)，3.19-3.11(m，1H)，2.42-2.33(m，1H)，2.25-2.16(m，1H)，1.64-1.47(m，2H)，0.86(t，3H)xxx)(1-乙基-丁-3-烯基)-氨基甲酸甲酯向冷卻的11.6g(0.2mol)丙醛、15g(0.2mol)氨基甲酸甲酯和22.92g烯丙基三甲基硅烷的200ml乙腈溶液中滴加入28.4g(0.2mol)三氟化硼醚合物。加入后，用10％Na2CO3水溶液中和混合物并用EtOAc萃取。有機(jī)相用洗滌水，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)并于1mbar蒸餾，得到目標(biāo)化合物，為無色液體。
Bp59-61℃1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.86-5.74(m，1H)，5.14-5.08(m，2H)，4.5(br，1H)，3.76-3.63(m，1H)，3.70(s，3H)，2.23-2.17(m，2H)，1.63-1.51(m，1H)，1.47-1.38(m，1H)，0.95(t，3H)酸IV R1＝H、Me、Et、Pr、cPrR2＝烯丙基、丁-3-烯基X＝H、Me、OMe、OEt、OiPr、SO2Me、唑-2-基a)N-烯丙基-N-甲基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11e將冷卻至-30℃的2.5g(13.9mmol)間苯二甲氨酸單甲酯的25ml THF溶液用2.32ml(16.9mmol)Et3N處理，隨后用2.0ml(15.3mmol)氯甲酸異丁酯處理。于-20℃30分鐘后，向白色懸浮液中加入1.4ml(13.9mmol)甲基烯丙胺。于-20℃4小時(shí)后，將混合物傾至50ml水中，并用EtOAc萃取。有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠層析純化殘留物(EtOAc/己烷1∶2)，得到目標(biāo)化合物甲酯。將該酯溶于5ml MeOH和5ml 1N NaOH。攪拌2h后，用6ml 1N HCl將混合物酸化，并用EtOAc萃取。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物，為白色固體。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.92min；MS(ES)[MNa]+＝242.2b)N-烯丙基-N-乙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11f目標(biāo)化合物可以類似于IVa所述方法，采用烯丙基-乙基-胺代替烯丙基-甲基-胺制備。
Mp.118-121℃.
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.29min；MS(ES)MH+＝234.2，MNa+＝256.2，[M-H]Na2+＝278.2起始原料可以如下獲得x)烯丙基乙基胺鹽酸鹽于10℃，將28.9g烯丙基-乙基-氨基甲酸叔-丁酯(156mmol)溶于200ml4N HCl的二烷，并緩慢溫?zé)嶂潦覝?。氣體產(chǎn)生結(jié)束后，將混合物于30℃溫?zé)?h?；旌衔餃p壓濃縮并自EtOH/TBME結(jié)晶，得到烯丙基乙胺的鹽酸鹽，為白色板狀。
Mp188.5-189℃1H-NMR(400MHz，D2O)5.85-5.74(m，1H)，5.40-5.33(m，2H)，3.52(d，2H)，2.97(q，2H)，1.15(t，3H)xx)烯丙基-乙基-氨基甲酸叔丁酯將31.44g烯丙基-氨基甲酸叔-丁酯(200mmol)的300ml DMF和30ml無水THF溶液用12g(300mmol)NaH(60％礦物油懸浮液)處理。用冷水浴使溫度保持在40℃以下。氣體產(chǎn)生結(jié)束后，反應(yīng)混合物在冰冷卻下，用24ml(300mmol)乙基碘化物處理。16h后，混合物用11水稀釋并用TBME萃取。有機(jī)層用水充分洗滌，減壓濃縮，于0.3mmHg，bp.38-39°蒸餾，得到烯丙基-乙基-氨基甲酸叔丁酯。
Rf(己烷/乙酸乙酯6∶1)0.451H-NMR(400MHz，CDCl3)5.87-5.75(m，1H)，5.19-5.12(m，2H)，3.83(br，2H)，3.16(br，2H)，1.48(s，9H)，1.11(t，3H)c)N-烯丙基-N-丙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11g目標(biāo)化合物如酸IVb所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.92min；MS(ES)[MH]+＝248.2，[MNa]+＝270.2d)N-烯丙基-N-環(huán)丙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11h將0.3g(1.37mmol)N-環(huán)丙基-間苯二甲氨酸的10ml THF溶液用142mg(3.55mmol)NaH(60％礦物油懸浮液)處理，并于25℃攪拌。2h后，加入0.27ml(3.23mmol)烯丙基溴化物，18h后，反應(yīng)用水淬滅?；旌衔镉?NHCl酸化并用EtOAc萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物，可以不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.47min；MS(ES)MH+＝246.2，MNa+＝268.2起始原料可以如下制備x)N-環(huán)丙基-間苯二甲氨酸將0.5g(2.77mmol)間苯二甲氨酸單甲酯、5ml甲苯和0.8ml SOCl2溶液用1滴DMF處理并加熱至80℃至氣體產(chǎn)生結(jié)束。冷卻后，蒸發(fā)混合物，溶于2ml DCM，并于0℃加至攪拌的5ml 10％ Na2CO3水溶液、0.21ml(3.0mmol)環(huán)丙胺和5ml DCM混合物中。1h后，分離各層，有機(jī)層用1N HCl、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物結(jié)晶(EtOAc，己烷)，得到N-環(huán)丙基-間苯二甲氨酸甲酯，為灰白色晶體。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)8.33(s，1H)，8.18(d，1H)，8.05(d，1H)，7.55(t，1H)，6.41(br，1H)，3.97(s，3H)，3.00-2.91(m，1H)，0.98-0.85(m，2H)，0.75-0.62(m，2H)e)N-烯丙基-N-甲基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11i目標(biāo)化合物可以類似于酸IVb所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.15min；MS(ES)[MH]+＝250.0，[MNa]+＝272.0f)N-烯丙基-N-乙基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11j目標(biāo)化合物可以類似于酸IVb所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.55min；MS(ES)[MH]+＝264.2，[MNa]+＝286.2g)N-烯丙基-N-丙基-5-甲氧基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11k目標(biāo)化合物可以類似于酸IVb所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.97min；MS(ES)[MH]+＝278.2，[MNa]+＝300.2h)N-丁-3-烯基-間苯二甲氨酸實(shí)施例11l目標(biāo)化合物可以類似于酸IVa所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))2.99min；MS(ES)[MH]+＝220.2，[MNa]+＝242.2i)N-烯丙基氧基-N-乙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例12a目標(biāo)化合物可以類似于酸IVb、IVc和IVi所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.10min；MS(ES)[MH]+＝294.2，[MNa]+＝316.2，[MNa2-H]+＝338.2j)N-烯丙基-N-乙基-5-乙氧基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13c將1.0g(4.45mmol)5-乙氧基-間苯二甲氨酸單甲酯、10ml甲苯和0.5mlSOCl2溶液用1滴DMF處理并加熱至80℃，直至氣體產(chǎn)生結(jié)束。冷卻后，蒸發(fā)混合物，溶于5ml DCM，并于0℃，加至攪拌的10ml 10％Na2CO3水溶液、0.81g(6.7mmol)烯丙基乙胺鹽酸鹽(參見IVb)和5ml DCM混合物中。1h后，分離各層并將有機(jī)層用1N HCl、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到N-烯丙基-5-乙氧基-N-乙基-間苯二甲氨酸甲酯。將該酯溶于20mlMeOH，用15ml 1N NaOH處理并攪拌18h。蒸發(fā)甲醇，殘留物用1N HCl酸化并用TBME萃取。有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.95min；MS(ES)[MH]+＝278.2，[MNa]+＝300.2起始原料可以如下制備x)5-乙氧基-間苯二甲氨酸單甲酯將11.0g(46.1mmol)5-乙氧基-間苯二甲氨酸二甲酯的100ml MeOH和20ml THF懸浮液用18.4ml 2N NaOH處理并攪拌過夜。濃縮澄清溶液，用部分水稀釋，用TBME洗滌。水層用2N HCl酸化并用TBME萃取。有機(jī)相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到單酯。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)8.38(s，1H)，7.84(s，2H)，4.18(q，2H)，3.98(s，3H)，1.37(t，3H)
xx)5-乙氧基-間苯二甲氨酸二甲酯向10g(47.57mmol)5-羥基-間苯二甲氨酸二甲酯和9.86g(71.36mmol)K2CO3的50ml DMF懸浮液中滴加入7.67ml(95.1mmol)乙基碘化物。加入后將混合物攪拌5h，用水稀釋并用TBME萃取。有機(jī)相用水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到目標(biāo)化合物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)8.29(s，1H)，7.77(s，2H)，4.15(q，2H)，3.95(s，6H)，1.47(t，3H)k)N-烯丙基-N-乙基-5-異丙氧基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13d目標(biāo)化合物可以類似于酸IVj所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))4.23min；MS(ES)[MH]+＝292.2，[MNa]+＝314.2l)N-烯丙基-5-甲基-N-乙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13e目標(biāo)化合物可以類似于酸IVj所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.74min；MS(ES)[MH]+＝248.2，[MNa]+＝270.2m)N-烯丙基-N-乙基-5-甲磺酰基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13f目標(biāo)化合物可以類似于酸IVj所述方法自5-甲磺?；?間苯二酸制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.03min；MS(ES)[MH]+＝312.0，[MNa]+＝334.0n)N-烯丙基-N-乙基-5-唑-2-基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13gLC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.52min；MS(ES)[MH]+＝301.2，[MNa]+＝323.2o)N-丁-3-烯基-N-乙基-間苯二甲氨酸實(shí)施例13h目標(biāo)化合物可以類似于酸IVc所述方法制備。
LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.63min；MS(ES)[MH]+＝248.2，[MNa]+＝270.2酸V X＝SO2、C＝O
R＝H、Men＝1-4m＝1-3a)3-(甲基-戊-4-烯基-氨磺?；?-丙酸實(shí)施例14于0℃，向攪拌的1.03g(12.0mmol)戊-4-烯胺、8ml DCM和5ml 10％Na2CO3水溶液的懸浮液中滴加入2.25g(12.0mmol)3-氯代磺?；?丙酸甲酯。于25℃攪拌2h后，分離相，并將有機(jī)相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。硅膠層析(EtOAc，己烷1∶2)得到3-戊-4-烯基氨磺?；?丙酸甲酯。將該酯溶于2ml DMF并在1.58g(11.5mmol)K2CO3和0.716ml甲基碘化物存在下加熱至65℃5h。混合物用EtOAc稀釋并用水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。硅膠層析(EtOAc，己烷1∶4)得到3-(甲基-戊-4-烯基-氨磺酰基)-丙酸甲酯。用LiOH的水/MeOH水解該酯，得到目標(biāo)化合物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.89-5.78(m，1H)，5.11-5.01(m，2H)，3.27(t，2H)，3.20(t，2H)，2.64(t，2H)，2.63(s，3H)，2.13(q，2)，1.77-1.69(m，2H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))3.45min；MS(ES)，[MNa]+＝258.0b)N-丁-3-烯基-琥珀酰胺酸實(shí)施例14a將0.71g(10mmol)丁-3-烯胺和1.0g(10mmol)琥珀酐的10ml DCM的混合物攪拌16h。將混合物傾至25ml 1N NaOH中，用TBME洗滌，用6ml 6N HCl酸化，用NaCl飽和并用THF/EtOAc萃取兩次。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到目標(biāo)化合物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)5.86(br，1H)，5.86-5.74(m，1H)，5.17-5.10(m，2H)，3.38(q，2H)，2.74(t，2H)，2.54(t，2H)，2.30(q，3H)LC/MS(Nucleosil C-18HD，4×70mm，3μM，20-100％MeCN(6min)，100％MeCN(1.5min))1.29min；MS(ES)，[MNa]+＝194.0。
權(quán)利要求
1.游離堿形式或酸加成鹽形式的下式化合物 其中R1為CH(Re)C(＝O)N(Ra)Rb或(CH2)kN(Rc)Rb，其中k為0、1或2，Ra和Rb，獨(dú)立為氫或任選取代的(C1-8)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基或雜芳基(C1-4)烷基基團(tuán)，Rc和Rd，獨(dú)立為氫或任選取代的(C1-8)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基、雜芳基(C1-4)烷基、苯并二氫吡喃-4-基、異苯并二氫吡喃-4-基、苯并二氫噻喃-4-基、異苯并二氫噻喃-4-基、1，1-二氧代-1λ*6*-苯并二氫噻喃-4-基、2，2-二氧代-2λ*6*-異苯并二氫噻喃-4-基、1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-異喹啉-4-基、1，2，3，4-四氫-萘-1-基、1，1-二氧代-1，2，3，4-四氫-1λ*6*-苯并[e][1，2]噻嗪-4-基、2，2-二氧代-1，2，3，4-四氫-2λ*6*-苯并[c][1，2]噻嗪-4-基、1，1-二氧代-3，4-二氫-1H-1λ*6*-苯并[c][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，2-二氧代-3，4-二氫-2H-2λ*6*-苯并[e][1，2]氧硫雜環(huán)己二烯-4-基、2，3，4，5-四氫-苯并[b]氧雜環(huán)庚二烯-5-基或1，3，4，5-四氫-苯并[c]氧雜環(huán)庚二烯-5-基基團(tuán)，或者Ra和Rb，或Rc和Rd，與它們連接的氮一起，形成任選取代的吡咯烷基、1-哌啶基、4-嗎啉基或哌嗪基基團(tuán)；以及Re為任選取代的(C1-8)烷基、(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、(C3-7)環(huán)烷基或(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基；R2為氫或(C1-4)烷基；R3為氫、(C1-6)烷基或任選取代的(C1-6)烷基OC(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基OC(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、芳基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、雜芳基(C1-4)烷基OC(＝O)NH、(C1-4)烷基C(＝O)NH、(C3-7)環(huán)烷基C(＝O)NH、芳基C(＝O)NH、芳基(C1-4)烷基C(＝O)NH、雜芳基C(＝O)NH或雜芳基(C1-4)烷基C(＝O)NH基團(tuán)；U為鍵、CF2、CF2CF2、CHF、CHFCHF、亞環(huán)丙-1，2-基、(C1-3)亞烷基氧基、(C1-8)亞烷基、NRg或芳環(huán)或雜芳環(huán)，該環(huán)任選被下列基團(tuán)取代鹵素、(C1-4)烷氧基、羥基或(C1-4)烷基，因此Z和V彼此在鄰或間-位，其中Rg為氫、(C1-8)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；V為CH＝CH、亞環(huán)丙-1，2-基、CH2CH(OH)、CH(OH)CH2或CRhRhCRhRh，其中每個(gè)Rh獨(dú)立為氫、氟或(C1-4)烷基；W為(C1-6)亞烷基、O、S、S(＝O)2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、N(Rf)C(＝O)、C(＝O)NRf或NRf，其中Rf為氫或(C1-4)烷基；X為任選取代的(C1-4)烷叉基、(C1-4)亞烷基、(C3-7)亞環(huán)烷基、哌啶-二基、吡咯烷-二基、苯并噻唑-4，6-二基、苯并唑-4，6-二基、1H-苯并三唑-4，6-二基、咪唑并[1，2-a]吡啶-6，8-二基、苯并[1，2，5]二唑-4，6-二基、苯并[1，2，5]噻二唑-4，6-二基、1H-吲哚-5，7-二基、1H-吲哚-4，6-二基、1H-苯并咪唑-4，6-二基或1H-吲唑-1，6-二基基團(tuán)或任選取代的芳環(huán)或雜芳環(huán)，Y和C(＝O)NR2彼此在間位，Y為鍵、O、S(＝O)2、S(＝O)2NRg、N(Rg)S(＝O)2、NRg、C(Rg)OH、C(＝O)NRg、N(Rg)C(＝O)、C(＝O)N(Rg)O或ON(Rg)C(＝O)，其中Rg為氫、(C1-8)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；Z為O、CH2、CF2、CHF、亞環(huán)丙-1，2-基或鍵；以及n為0-5，包含于大環(huán)中的環(huán)原子的數(shù)目為14、15、16或17。
2.制備如權(quán)利要求1定義的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物的方法，該方法包括通過復(fù)分解使下式化合物環(huán)化 其中R1、R2、R3、U、W、X、Y、Z和n如式I定義，該反應(yīng)在催化劑如釕、鎢或鉬絡(luò)合物存在下進(jìn)行，任選經(jīng)過還原、氧化或功能化產(chǎn)生的碳-碳雙鍵，然后回收得到的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
3.游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物，用作藥物。
4.游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物，用于治療與β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂。
5.藥物組合物，該藥物組合物包含作為活性成分的游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物和藥用載體或稀釋劑。
6.游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物的用途，作為用于治療與β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂的藥物。
7.游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物的用途，用于生產(chǎn)治療與β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂的藥物。
8.治療需要此類治療的宿主與β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生和/或聚集相關(guān)的神經(jīng)或血管紊亂的方法，該方法包括給予此類宿主治療有效量的游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物。
9.組合產(chǎn)品，該產(chǎn)品包括治療有效量的游離堿形式或藥學(xué)上可接受的酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物，以及第二種藥物成分，同時(shí)或順序給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I的大環(huán)化合物，其中R
文檔編號(hào)C07D255/02GK1902182SQ200480039425
公開日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2004年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月5日
發(fā)明者Y·奧貝松, C·貝特斯查爾特, R·格拉特哈爾, K·勞門, R·馬紹爾, M·廷特爾諾特-布洛姆雷, T·J·特羅克斯勒, S·J·維恩施特拉 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司