專利名稱：高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制藥工業(yè)中原料藥的制備工藝，尤其是高純度原料藥的制備工藝。
背景技術(shù)：
燈盞花素系從燈盞花Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz全草中分離出的黃酮類有效成份，其中主要為燈盞花乙素(又名燈盞乙素，野黃芩苷，以下簡(jiǎn)稱乙素)，化學(xué)命名為4′5、6-三羥基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸甙，目前從市場(chǎng)上購(gòu)得的燈盞花素原料藥經(jīng)HPLC分析，乙素含量在90％左右，衍生的各種制劑在臨床上已廣泛用于治療心腦血管疾病，療效顯著，但其注射液穩(wěn)定性差，貯存時(shí)間短，臨床上個(gè)別患者用后時(shí)有冷熱反應(yīng)、皮膚瘙癢、皮疹等現(xiàn)象發(fā)生，這些現(xiàn)象的出現(xiàn)主要由于原料藥在生產(chǎn)過程中未除盡其中一些雜質(zhì)所致，這一問題自從燈盞花產(chǎn)品問世30多年來一直未能解決。
在部頒《藥品標(biāo)準(zhǔn)》記載燈盞花素注射液中對(duì)燈盞花乙素原料藥的提取，其描述僅是用活性碳處理，和加入EDTA作穩(wěn)定劑，燈盞花乙素含量達(dá)90％。有關(guān)文獻(xiàn)和專利資料中未記載對(duì)燈盞花乙素精制工藝的報(bào)道，也未報(bào)道對(duì)燈盞花乙素純度的提高及副作用的消除。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝。
本發(fā)明所述工藝系以燈盞花乙素的理化性質(zhì)以及化學(xué)結(jié)構(gòu)上的特征進(jìn)行工藝設(shè)計(jì)，燈盞花乙素在水中不溶，在甲醇、乙醇、丙酮中的溶解度也很小，故以這些溶劑進(jìn)行大量重結(jié)晶是不可行的。其中所含雜質(zhì)難以除去的原因，主要還是由于燈盞花乙素結(jié)構(gòu)上的羧基和多個(gè)羥基所致，形成一個(gè)強(qiáng)的帶電體，由于其靜電效應(yīng)，與其它一些成份易產(chǎn)生締合、絡(luò)合，故難以分開。根據(jù)這種因素，本發(fā)明采用以下特殊設(shè)計(jì)，利用結(jié)構(gòu)上的羥基制作成特殊的鹽溶液，通過系統(tǒng)篩選，發(fā)現(xiàn)某些鹽可與燈盞花乙素生成可溶性的鹽，或絡(luò)合物，這種鹽在有機(jī)溶劑中不溶，利用溶劑沉淀法進(jìn)行沉淀，達(dá)到乙素與其它雜質(zhì)分離的目的，沉淀物經(jīng)酸化離解，還原成燈盞花乙素，用HPLC分析，燈盞花乙素的純度可達(dá)到99％以上，如反復(fù)處理多次，燈盞花乙素的純度還可以提高，甚至可達(dá)到99.9％以上。
本發(fā)明所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝由以下步驟組成一、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入X調(diào)節(jié)PH至4-8，使完全溶解，所述的X為焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多聚磷酸鉀、多聚磷酸鈉、六偏磷酸鉀、六偏磷酸鈉、磷酸氫鈉銨、磷酸苯二鈉、磷酸苯二鉀、β-甘油磷酸鈉、R-甘油磷酸鈉、β-甘油磷酸鉀、R-甘油磷酸鉀、磷酸銨中的一種或幾種；二、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；三、沉淀移至含有重量百分比為10-60％溶劑的溶液中，加酸酸化至PH1-2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
在上述工藝步驟(一)中所述燈盞花素為在市售燈盞花素，所加入水的量為2倍以上，其上限可以不受限制，只是加入的水量越大，在以后的步驟中應(yīng)加入的溶劑量也隨之增大，從工業(yè)成本及可行性角度考慮，一般以2-8倍為宜；所加入的焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多聚磷酸鉀、多聚磷酸鈉、六偏磷酸鉀、六偏磷酸鈉、磷酸氫鈉銨、磷酸苯二鈉、磷酸苯二鉀、β-甘油磷酸鈉、R-甘油磷酸鈉、β-甘油磷酸鉀、R-甘油磷酸鉀、磷酸銨，可以為其中的一種或是幾種的組合，其加入的方式可以直接加入，也可以配制成水溶液加入，加入的量以最終調(diào)節(jié)的PH值為度；步驟(二)和(三)中所述的溶劑為能與水以任意比例相溶的有機(jī)溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、四氫呋喃中的一種或幾種，步驟(二)中溶劑加入的量與步驟(一)中的水量有關(guān)，系成正比關(guān)系，一般以步驟(一)中所述燈盞花素的3-15倍為宜；步驟(二)中的靜置主要是使沉淀與液相分離，時(shí)間一般為5-30小時(shí)。步驟(三)中所述的沉淀與溶液的量并不需要十分確切，一般以重量3倍以上為宜；所加入的酸，主要作用是酸化離解沉淀物，還原燈盞花乙素，以強(qiáng)酸為宜，如鹽酸、硫酸等，所述的含有重量百分比為10-60％溶劑的溶液是指溶劑的水溶液。上述過程可在常溫下進(jìn)行，也可以在所用溶劑的沸點(diǎn)溫度以下進(jìn)行，但以10-45℃為最佳。
本發(fā)明所述工藝步驟簡(jiǎn)單，易于工業(yè)化生產(chǎn)，所制備燈盞花乙素經(jīng)高壓液相層析HPLC分析，燈盞花乙素純度在99％以上，得到了意想不到的效果和商業(yè)上的成功。高純度燈盞花乙素在工業(yè)上尤其是制藥領(lǐng)域有著極其重要的價(jià)值，它解決了燈盞花素在近30年的臨床應(yīng)用中沒有解決的技術(shù)難題，即解決了注射劑的不穩(wěn)定性；消除了該產(chǎn)品存在的發(fā)冷、發(fā)熱、皮疹、皮膚瘙癢等不良反應(yīng)；降低毒性，提高了療效和使用的安全性，LD50由原來的1314mg/kg提高到1794.98mg/kg。
本發(fā)明所制得產(chǎn)物不僅可作為原料藥，還可用作對(duì)照品。


附圖為本發(fā)明實(shí)施例液相色譜圖。
使用儀器類型液相色譜 梯度方式恒流 檢測(cè)器紫外儀器型號(hào)LC-10A波長(zhǎng)(nm)335nm
柱溫(℃)32 柱型號(hào)美國(guó)(Phenomenx)型號(hào)Synergi積分方法面積歸一法分析結(jié)果表峰號(hào) 峰名 保留時(shí)間 峰高 峰面積 含量1 2.6981904.000 16062.5000.26602 9.082708.000 13517.5000.22383 12.165 289.059 6083.500 0.10074 14.082 215233.4225996348.000 99.28885 23.282 183.228 7289.000 0.1207總計(jì) 218317.70960393000.500 100.0000峰參數(shù)表峰寬 斜率 漂移 最小面積 時(shí)間變參 鎖定時(shí)間 停止時(shí)間 樣品重量10100.000 0.000 1000.000 0.000 0.000 35.09010.000具體實(shí)施方式
實(shí)施例稱市售燈盞花素原料藥1000g，加5倍重量的水，用25％焦磷酸鈉試液調(diào)PH值至7，使完全溶解，濾過，濾液加8倍丙酮沉淀，邊加邊攪拌，使沉淀完全，靜置10小時(shí)，濾過，加丙酮洗滌三次，再將沉淀物移至另一容器中，加入5倍量30％丙酮，攪勻，再加20％鹽酸調(diào)PH1-2靜置10小時(shí)，抽濾，用水洗滌至中性，再加乙醇洗一次，烘干，即為精制燈盞花乙素，經(jīng)HPLC分析乙素含量為99.2888％，如附圖所示。
檢測(cè)方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(用十八烷基鍵合硅膠為填充劑∶甲醇-0.1％磷酸溶液(40∶60)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為335nm。理論板數(shù)按燈盞乙素峰計(jì)算不應(yīng)低于5000)。取本品，按照每10mg燈盞乙素加水1ml溶解，加甲醇制成每1ml約含燈盞乙素0.4mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，作為對(duì)照溶液。取對(duì)照溶液5ul注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％。再取供試品溶液5ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2.5。測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)峰面積并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，計(jì)算出燈盞花乙素純度。
權(quán)利要求
1.一種高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于由以下步驟組成(一)、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入X調(diào)節(jié)PH至4-8，使完全溶解，所述的X為焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多聚磷酸鉀、多聚磷酸鈉、六偏磷酸鉀、六偏磷酸鈉、磷酸氫鈉銨、磷酸苯二鈉、磷酸苯二鉀、β-甘油磷酸鈉、R-甘油磷酸鈉、β-甘油磷酸鉀、R-甘油磷酸鉀、磷酸銨中的一種或幾種；(二)、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；(三)、沉淀移至含有重量百分比為10-60％溶劑的溶液中，加酸酸化至PH1-2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
2.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(一)中加入水的量為2-8倍。
3.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(二)所述的溶劑為能與水以任意比例相溶的有機(jī)溶劑。
4.按照權(quán)利要求3所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于所述的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、四氫呋喃中的一種或幾種。
5.按照權(quán)利要求1所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝，其特征在于步驟(二)中所述的溶劑加入量為3-15倍。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制藥工業(yè)中原料藥的制備工藝，尤其是高純度原料藥的制備工藝。本發(fā)明所述的高純度燈盞花乙素原料藥的制備工藝由以下步驟組成一、取燈盞花素置于容器中加入2倍重量以上的水，加入X調(diào)節(jié)pH至4－8，使完全溶解，所述的X為焦磷酸鈉、焦磷酸鉀、多聚磷酸鉀、多聚磷酸鈉、六偏磷酸鉀、六偏磷酸鈉、磷酸氫鈉銨、磷酸苯二鈉、磷酸苯二鉀、β－甘油磷酸鈉、R－甘油磷酸鈉、β－甘油磷酸鉀、R－甘油磷酸鉀、磷酸銨中的一種或幾種；二、再加入重量為三倍以上的溶劑進(jìn)行沉淀，靜置，濾過，沉淀物用溶劑洗滌；三、沉淀移至含有重量百分比為10－60％溶劑的溶液中，加酸酸化至pH 1－2，沉淀濾過，水洗至中性，干燥，即得到高純度燈盞花乙素原料藥。
文檔編號(hào)C07H17/00GK1718584SQ20041004018
公開日2006年1月11日 申請(qǐng)日期2004年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月7日
發(fā)明者張人偉, 程惠佳, 樊獻(xiàn)俄 申請(qǐng)人:樊獻(xiàn)俄