專利名稱：3-位環(huán)孢菌素衍生物在毛發(fā)生長中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含環(huán)孢菌素衍生物作為有效成分的一種毛發(fā)生長促進劑，特別涉及包含在3-位加以修飾的環(huán)孢菌素衍生物作為有效成分的一種毛發(fā)生長促進劑。
背景技術(shù)：
人的頭皮平均含有大約100,000-150,000根毛發(fā)。每根毛發(fā)具有三個主要生長階段生長期，退化期和毛發(fā)生長終期，之后毛發(fā)脫落。這種毛發(fā)生長循環(huán)是重復(fù)發(fā)生的，一次循環(huán)與其它循環(huán)的持續(xù)時間不同，范圍在大約3-6年之間。因此，成年人平均每天脫落大約50-100根毛發(fā)。一般而言，脫發(fā)癥是指一種現(xiàn)象，其中生長期的持續(xù)時間縮短，而退化期和毛發(fā)生長終期的毛發(fā)百分數(shù)增加，從而脫落的毛發(fā)數(shù)量過量并異常增加。
有許多理論解釋毛發(fā)的脫落，包括例如血液循環(huán)差，雄性激素機能過度，皮脂的產(chǎn)生和分泌過量，由于過氧化物，細菌等導(dǎo)致頭皮退化，遺傳因素，年齡，壓力等。然而，未揭示精確的機制。近年來因為飲食習(xí)慣的改變和現(xiàn)代社會環(huán)境等對個體造成的壓力增加，患有毛發(fā)脫落的人群趨于增多。另外，受脫發(fā)癥困擾的個體的年齡逐漸降低，而且女性脫發(fā)癥的人群逐漸增多。
治療和預(yù)防脫發(fā)癥最常使用的制品之一是一種含有米諾地爾(minoxidil)的制劑。有兩種美國食品藥物管理局正式批準(zhǔn)的毛發(fā)再生劑，米諾地爾是那些認可的毛發(fā)再生劑之一。米諾地爾最初是作為降低血壓的高血壓藥物開發(fā)的。然而，當(dāng)使用這種藥物時，觀測到毛發(fā)生長的副作用，此后這種藥物逐漸作為毛發(fā)再生劑而聞名。盡管米諾地爾作為毛發(fā)再生劑的機制尚未明了，但推斷米諾地爾通過擴張血管而增加血液流速，從而毛根獲得更多的營養(yǎng)，最終促進毛發(fā)生長。
這種血流增加的模型已經(jīng)由最近的報道間接支持，即米諾地爾增強血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)表達，VEGF是與組成毛根的主要細胞真皮乳頭中的血管舒張相關(guān)的一種生長因子。另外，除了米諾地爾在毛發(fā)重建機制中的血管生長作用之外，還報道了米諾地爾促進在體外溫育的毛發(fā)根部真皮乳頭細胞激活，及促進體外毛囊組織培養(yǎng)物中毛囊的生長。這些事實表明米諾地爾也許作為生長因子直接對毛根起作用。
另外，非那雄胺(finasteride)，由Merck公司開始銷售的保法止(Propecia)的一種主要成分，用于治療脫發(fā)癥。其抑制雄性激素睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)槎洳G酮，這是比睪酮更強的雄性激素。在1997年12月，1mg非那雄胺片劑由美國FDA許可作為毛發(fā)再生劑，僅限于治療男性型毛發(fā)脫落，目前可以商購。在臨床研究中，已經(jīng)證實具有明顯的促進毛發(fā)生長作用(trichogenous effect)。然而，有報道非那雄胺可能具有抑制男性性功能的副作用。由于非那雄胺和米諾地爾在臨床測試中均未示出出眾的作用，而且具有這樣的副作用，因此引導(dǎo)許多研究人員去開發(fā)一種新的及改良的毛發(fā)再生劑。
環(huán)孢菌素家族藥物具有免疫抑制作用。其還有效抑制病毒，真菌，原生動物等的生長，并具有各種生理作用如腎毒性，肝毒性，高血壓，牙周組織腫脹作用，促進毛發(fā)生長等副作用。環(huán)孢菌素A，一種代表性的環(huán)孢菌素，是一種具有以下化學(xué)式的環(huán)肽，其包含11個氨基酸，包括若干N-甲基氨基酸和在第8位殘基的D-丙氨酸。
其中MeBmt是N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸，Abu是L-α-氨基丁酸，Sar是肌氨酸，MeLeu是N-甲基-L-亮氨酸，Val是L-纈氨酸，Ala是L-丙氨酸，DAla是D-丙氨酸，MeVal是N-甲基-L-纈氨酸。
上述化學(xué)式I的環(huán)孢菌素A的氨基酸形式除非特別說明均是L-構(gòu)型。氨基酸的殘基編號起自MeBmt并順時針方式進行，即如結(jié)構(gòu)式I所示，1為MeBmt，11為最后的MeVal(N-甲基-L-纈氨酸)。各種衍生物包括環(huán)孢菌素A-Z根據(jù)常用方法命名(Helv.Chim.Acta，1987，7013-36)。例如，如果在環(huán)孢菌素A的2-位的Abu由L-丙氨酸，L-蘇氨酸，L-纈氨酸或L-正纈氨酸取代，則由此制備的衍生物分別稱為環(huán)孢菌素B，環(huán)孢菌素C，環(huán)孢菌素D或環(huán)孢菌素G。另外，當(dāng)環(huán)孢菌素衍生物的氨基酸殘基與環(huán)孢菌素A的那些殘基不同時，衍生物通過描述取代基而命名。例如，如果環(huán)孢菌素A的第3位氨基酸殘基肌氨酸由N-甲基-D-Abu3或N-甲基-D-Nva3取代，則由此制備的衍生物分別命名為[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A或[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A。同時，應(yīng)用常規(guī)氨基酸縮寫方法，即N-甲基-L-亮氨酸縮寫為MeLeu，N-甲基-L-異亮氨酸縮寫為MeIle，N-甲基-L-纈氨酸縮寫為MeVal，N-甲基-L-丙氨酸縮寫為MeAla，N-甲基-L-正纈氨酸縮寫為MeNva，L-亮氨酸縮寫為Leu，L-異亮氨酸縮寫為Ile，肌氨酸縮寫為Sar，L-絲氨酸縮寫為Ser，L-纈氨酸縮寫為Val，L-丙氨酸縮寫為Ala，D-丙氨酸縮寫為DAla，L-氨基丁酸縮寫為Abu，L-蘇氨酸縮寫為Thr，及L-正纈氨酸縮寫為Nva。另外，根據(jù)不同的參考文獻，在第7位氨基酸殘基用硫代替羰基氧而取代的環(huán)孢菌素衍生物，其名稱可以是環(huán)孢菌素7-硫代酰胺或[7ψ8CS-NH]環(huán)孢菌素(Helv.Chim.Acta.741953-1990，1991；J.Org.Chem.58673-677，1993；J.Org.Chem.597249-7258，1994)。
迄今為止，許多研究組已經(jīng)研究了環(huán)孢菌素作為毛發(fā)再生劑的可能性尤其已經(jīng)廣泛進行了研究包括動物毛發(fā)再生試驗，人斑禿(J.Am.Acad.Dermatol.，1990，22242-250)，人男性型禿發(fā)(J.Am.Acad.Dermatol.，1990，22251-253和Skin Pharmacol.，1994，7101-104)，及在動物模型中對化療脫發(fā)的抑制作用(Am.J.Pathol.，1997，1501433-1441)。在小鼠背上進行的對比試驗中，示出環(huán)孢菌素的毛發(fā)再生作用比米諾地爾高出大約100倍?；谶@種發(fā)現(xiàn)，已經(jīng)嘗試利用環(huán)孢菌素作為男性型禿發(fā)的治療劑，并且提請了許多專利申請。
例如，日本專利出版物Kokai Nos.Sho 60-243008，Sho 62-19512和Sho62-19513揭示了環(huán)孢菌素衍生物作為毛發(fā)再生劑的應(yīng)用。另外，歐洲專利出版物No.0414632B1揭示了一種在第8位加以修飾的環(huán)孢菌素衍生物，PCT出版物No.93/17039揭示了異環(huán)孢菌素。此外，美國專利No.5,807,820和英國專利No.2,218,334A揭示了根據(jù)環(huán)孢菌素作為毛發(fā)再生劑的用途而具有極佳經(jīng)皮吸收能力的環(huán)孢菌素。
發(fā)明揭示因此，本發(fā)明是考慮到上述與環(huán)孢菌素A的副作用相關(guān)的問題而作出的。本發(fā)明的一個目的是提供一種毛發(fā)生長促進劑，其包含一種環(huán)孢菌素衍生物作為有效成分，其具有極佳的毛發(fā)生長促進能力。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，可以通過提供毛發(fā)生長促進劑而實現(xiàn)上述及其它目的，所述毛發(fā)生長促進劑包含由以下式1表示的環(huán)孢菌素3-位類似物作為有效成分，其是通過合成各種其衍生物并評價它們的毛發(fā)生長促進作用而制備的，目的是揭示一種新的促進毛發(fā)生長的制劑。
其中A代表N-甲基-(4R)-4-(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸，(2S，3R，4R，6E)-3-巰基-4-甲基-2-(甲基氨基)-6-辛烯酸或(2S，4R，6E)-3-氧代(oxo)-4-甲基-2-(甲基氨基)-6-辛烯酸；B代表L-氨基丁酸(Abu)，L-丙氨酸(Ala)，L-蘇氨酸(Thr)，L-纈氨酸(Val)或L-正纈氨酸(Nva)；C代表由通式1表示的D-氨基酸，[通式1]CH3NH-CH(R)-COOH其中R選自以下一組氫，用選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基組分，以及由以下通式2表示的-X-R′，[通式2]-X-R′其中X是氧或硫，及R′選自氫，用選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基組分；D表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-纈氨酸；E表示L-纈氨酸或L-正纈氨酸；F表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；G表示L-丙氨酸或L-丙氨酸硫代酰胺([7ψ8CS-NH]，NH-CHCH3-CS-)；H表示由通式3表示的D-氨基酸，[通式3]-NH-CH(CH2R)-COOH其中R是氫或者由通式4表示的-X-R′，[通式4]
-X-R′其中X是氧或硫，及R′選自氫，由選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基組分；I表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；J表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；K表示N-甲基-L-纈氨酸或L-纈氨酸。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種毛發(fā)生長促進劑，其包含具有極佳毛發(fā)生長促進作用的一種3-位環(huán)孢菌素類似物作為有效成分，由以下式2表示。
其中MeBmt表示N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸；A′表示L-氨基丁酸，L-丙氨酸，L-蘇氨酸，L-纈氨酸或L-正纈氨酸；B′表示N-甲基-D-氨基丁酸，N-甲基-D-正纈氨酸，D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰(hexa-4-ynoyl)，D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰(pent-4-ynoyl)，D-2-甲硫基-肌氨酸，N-甲基-O-丙烯基-D-絲氨酸或N-甲基-D-絲氨酸；C′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-纈氨酸；D′表示L-纈氨酸或L-正纈氨酸；E′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；F′表示L-丙氨酸或L-丙氨酸硫代酰胺([7ψ8CS-NH]，NH-CHCH3-CS-)；
G′表示D-丙氨酸或D-絲氨酸；H′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；I′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；及MeVal表示N-甲基-L-纈氨酸。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種毛發(fā)生長促進劑，其包含具有極佳毛發(fā)生長促進作用的由下式3表示的3-位環(huán)孢菌素類似物作為有效成分。
其中MeBmt表示N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸；A”表示L-丙氨酸，L-蘇氨酸，L-纈氨酸或L-正纈氨酸；B″表示N-甲基-D-氨基丁酸，N-甲基-D-正纈氨酸，D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰，D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰，D-2-甲硫基-肌氨酸，N-甲基-O-丙烯基-D-絲氨酸或N-甲基-D-絲氨酸；MeLeu表示N-甲基-L-亮氨酸；Val表示L-纈氨酸；Ala表示L-丙氨酸；DAla表示D-丙氨酸及MeVal表示N-甲基-L-纈氨酸。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面，提供了一種毛發(fā)生長促進劑，其包含3-位環(huán)孢菌素類似物的組合物，可以以液體配方，噴霧劑(spray)，凝膠，糊劑，乳劑(emulsion)，霜劑(cream)，護發(fā)劑(hair conditioner)或洗發(fā)香波(shampoo)等形式配制。
附圖簡述本發(fā)明的上述及其它目的，特征和其它優(yōu)點通過以下詳細描述并結(jié)合附圖將更加明了，其中

圖1是[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖2是[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖3是[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖4是[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖5是[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖6是[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖7是[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖8是[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖9是[D-2-(甲硫基)-Sar3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖10是[D-2-(甲硫基)-Sar3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖11是[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖12是[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜；圖13是[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的1H-NMR圖譜；圖14是[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的13C-NMR圖譜。
實施本發(fā)明的最佳模式在后文，結(jié)合各種實施例對本發(fā)明進行了詳細描述。所提供的這些實施例只是例證了本發(fā)明，本發(fā)明非限于這些實施例。
為開發(fā)一種新的具有毛發(fā)生長促進作用的制劑，本發(fā)明人化學(xué)合成了各種3-位環(huán)孢菌素類似物，并檢測了它們的毛發(fā)生長促進作用。因此，本發(fā)明提供了一種包含環(huán)孢菌素衍生物作為有效成分的毛發(fā)生長促進劑。
實施例1合成3-位環(huán)孢菌素類似物烷化環(huán)孢菌素A的通用方法如下。在-78℃氮氣氛下將四氫呋喃(THF)與二異丙基胺((i-Pr)2NH)混合并添加于己烷中的n-丁基鋰(BuLi)溶液，隨后攪拌30分鐘。向由此制備的LDA(二異丙基酰胺鋰)中加入于THF中的環(huán)孢菌素A，攪拌1小時，并加入親電子試劑。
1-1合成[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A化合物1根據(jù)上述通用方法，在-78℃向10當(dāng)量的LDA溶液中加入于50mlTHF中的1.0g環(huán)孢菌素A。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，并加入0.4ml乙基碘。在該溶液的溫度達到室溫后，將溶液進一步攪拌24小時并加入20ml水，隨后濃縮。向殘渣中加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)，隨后進行HPLC，得到0.1g的題述化合物。
該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)測定1H-NMR，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖1和2。
1-2合成[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A化合物2根據(jù)上述通用方法，在-78℃向10當(dāng)量的LDA溶液中加入于50mlTHF中的1.0g環(huán)孢菌素A。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，并加入0.41ml乙基碘。在該溶液的溫度達到室溫后，將溶液進一步攪拌24小時并加入20ml水，隨后濃縮。殘渣中加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)，隨后進行HPLC，得到0.12g的題述化合物。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖3和4。
1-3合成[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A化合物3根據(jù)上述通用方法，在-78℃向10當(dāng)量的LDA溶液中加入于50mlTHF中的1.0g環(huán)孢菌素A。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，并加入0.73ml 1-溴-2-丁炔。在該溶液的溫度達到室溫后，將溶液進一步攪拌24小時并加入20ml水，隨后濃縮。殘渣加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)，隨后進行HPLC，得到0.13g的題述化合物。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖5和6。
1-4合成[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A化合物4根據(jù)上述通用方法，應(yīng)用THF(200ml)，(i-Pr)2NH(3.2ml)，BuLi(8ml)，于50ml THF中的環(huán)孢菌素A(3.76g)和炔丙基溴(3.57g)進行烷化。在該溶液的溫度達到室溫后，將溶液進一步攪拌24小時并加入40ml水，隨后濃縮。殘渣加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)，隨后進行HPLC，得到題述化合物3(0.18g)和化合物4(0.08g)。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖7和8。
1-5合成[D-2-(甲硫基)-Sar3]環(huán)孢菌素A化合物5根據(jù)上述通用方法，應(yīng)用THF(100ml)，(i-Pr)2NH(1.6ml)，BuLi(4.0ml)，于30ml THF中的環(huán)孢菌素A(1.0g)和甲基二硫化物(Me2S2)(1.5ml)進行烷化。將該溶液在0℃攪拌14小時，并加入20ml水，隨后濃縮。向殘渣中加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1～96∶4)，隨后進行HPLC，得到題述化合物5(0.36g)和化合物6(0.05g)。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖9和10。
1-6合成[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A化合物6根據(jù)上述通用方法，將[D-甲基絲氨酸3]環(huán)孢菌素A(0.62g，0.5mmol)，四丁基氯化銨(0.11g，0.5mmol)和芳基溴(0.24g，2.0mmol)溶解于二氯甲烷(50ml)中，然后加入30％NaOH(1.5ml)，并將混合物攪拌2小時。在加入50ml二氯甲烷后，將該溶液用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝97∶3)，隨后進行HPLC，得到0.4g題述化合物。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖11和12。
1-7合成[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A化合物7根據(jù)上述通用方法，在-78℃向10當(dāng)量的LDA溶液中加入于50mlTHF中的1.0g環(huán)孢菌素A。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時，并加入2.0g低聚甲醛。在該溶液的溫度達到室溫后，將溶液進一步攪拌24小時并加入20ml水，隨后濃縮。向殘渣中加入乙醚(Et2O)，用水和飽和氯化鈉溶液依次洗滌，并經(jīng)過無水MgSO4干燥。在濃縮后，將殘渣進行硅膠柱色譜(100g硅膠，二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)，隨后進行HPLC，得到0.3g的題述化合物。該化合物的分子量通過FAB MS(ZMS AX 505H)分析測定。為證實分子結(jié)構(gòu)，在600MHz(Bruker)進行核磁共振(NMR)1H-NMR測定，及在150MHz(Bruker)進行13C-NMR測定，圖譜分別示于圖13和14。
制備實施例1生發(fā)劑(hair tonic)1-1準(zhǔn)備含有[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表1所示。發(fā)現(xiàn)表1的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表1生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3乙醇 40.0 40.040.0[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0乙酸維生素E0.1 0.1 0.1水楊酸 0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3Tween 20 0.5 0.5 0.5香料 典型的 典型的 典型的色料(colorant) 典型的 典型的 典型的水 余量 余量余量1-2制備含有[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表2所示。發(fā)現(xiàn)表2的組合物I具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表2生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分組合物1 組合物2 組合物3乙醇 40.0 40.040.0[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0乙酸維生素E 0.1 0.1 0.1水楊酸0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3Tween 20 0.5 0.5 0.5香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水余量 余量余量1-3制備含有[D-2(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表3所示。發(fā)現(xiàn)表3的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表3生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分組合物1 組合物2組合物3乙醇 40.040.0 40.0[D-2-(甲基氨基)己-4-炔3]環(huán)孢菌素A0.1 1.0 8.0乙酸維生素E 0.1 0.1 0.1水楊酸0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3Tween 20 0.5 0.5 0.5香料 典型的 典型的典型的色料 典型的 典型的典型的水余量余量 余量1-4制備含有[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表4所示。發(fā)現(xiàn)表4的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表4生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分組合物1 組合物2 組合物3乙醇 40.040.040.0[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0乙酸維生素E 0.1 0.1 0.1水楊酸 0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3Tween 20 0.5 0.5 0.5香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量余量余量1-5制備含有[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表5所示。發(fā)現(xiàn)表5的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表5生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3乙醇 40.0 40.0 40.0[D-2-(甲硫基)-Sar3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.08.0乙酸維生素E0.1 0.10.1水楊酸 0.3 0.30.3L-薄荷醇 0.3 0.30.3Tween 20 0.5 0.50.5香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量 余量 余量1-6制備含有[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表6所示。發(fā)現(xiàn)表6的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表6生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2組合物3乙醇 40.0 40.0 40.0[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.08.0乙酸維生素E 0.1 0.10.1水楊酸 0.3 0.30.3L-薄荷醇 0.3 0.30.3Tween 20 0.5 0.50.5香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量 余量 余量1-7制備含有[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的生發(fā)劑將各個成分混合并攪拌，并將混合物完全溶解以制備三種促進毛發(fā)生長的生發(fā)劑，組合物如下表7所示。發(fā)現(xiàn)表7的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)生發(fā)劑相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表7生發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2組合物3乙醇 40.040.0 40.0[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.08.0乙酸維生素E0.1 0.10.1水楊酸 0.3 0.30.3L-薄荷醇 0.3 0.30.3Tween 20 0.5 0.50.5香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量余量 余量制備實施例2發(fā)乳(hair cream)2-1制備含有[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N發(fā)乳，組合物如下表8所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表8的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表8發(fā)乳配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3石蠟 5.0 5.0 5.0Cetostearyl alcohol 5.5 5.5 5.5礦脂 5.5 5.5 5.5甘油一硬脂酸酯3.0 3.0 3.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚(polyoxyethyleneoctyldodecylether)3.0 3.0 3.0對羥苯甲酸丙酯0.3 0.3 0.3[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0甘油 7.0 7.0 7.0一縮二丙二醇(dipropylenelycol)20.020.020.0聚乙二醇 5.0 5.0 5.0水 不包括香料和色料的余量香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的2-2制備含有[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N發(fā)乳，組合物如下表9所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表9的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表9發(fā)乳的配方(單位重量％)成分組合物1 組合物2 組合物3石蠟 5.0 5.0 5.0Cetostearyl alcohol 5.5 5.5 5.5礦脂 5.5 5.5 5.5甘油一硬脂酸酯 3.0 3.0 3.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚 3.0 3.0 3.0對羥苯甲酸丙酯 0.3 0.3 0.3[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A0.1 1.0 8.0甘油 7.0 7.0 7.0一縮二丙二醇 20.0 20.0 20.0聚乙二醇 5.0 5.0 5.0水 不包括香料和色料的余量香料 典型的典型的 典型的色料 典型的典型的 典型的2-3制備含有[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解。混合這兩相成分，乳化并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N發(fā)乳，組合物如下表10所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表10的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表10發(fā)乳的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3石蠟5.05.05.0Cetostearyl alcohol 5.55.55.5礦脂5.55.55.5甘油一硬脂酸酯 3.03.03.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚 3.03.03.0對羥苯甲酸丙酯 0.30.30.3[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A0.11.08.0甘油7.07.07.0一縮二丙二醇20.0 20.0 20.0聚乙二醇5.05.05.0水不包括香料和色料的余量香料典型的 典型的 典型的色料典型的 典型的 典型的2-4制備含有[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N發(fā)乳，組合物如下表11所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表11的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表11發(fā)乳的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3石蠟 5.0 5.0 5.0Cetostearyl alcohol 5.5 5.5 5.5礦脂 5.5 5.5 5.5甘油一硬脂酸酯 3.0 3.0 3.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚 3.0 3.0 3.0對羥苯甲酸丙酯 0.3 0.3 0.3[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0甘油 7.0 7.0 7.0一縮二丙二醇 20.0 20.0 20.0聚乙二醇 5.0 5.0 5.0水 不包括香料和色料的余量香料 典型的典型的典型的色料 典型的典型的典型的2-5制備含有[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫。混合入添加劑如香料和色料以制備三種發(fā)乳，組合物如下表12所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表12的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表12發(fā)乳的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3石蠟5.0 5.0 5.0Cetostearyl alcohol 5.5 5.5 5.5礦脂5.5 5.5 5.5甘油一硬脂酸酯 3.0 3.0 3.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚 3.0 3.0 3.0對羥苯甲酸丙酯 0.3 0.3 0.3[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0甘油7.0 7.0 7.0一縮二丙二醇20.020.020.0聚乙二醇5.0 5.0 5.0水 不包括香料和色料的余量香料典型的 典型的 典型的色料典型的 典型的 典型的2-6制備含有[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N發(fā)乳，組合物如下表13所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表13的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表13發(fā)乳的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3石蠟 5.05.05.0Cetostearyl alcohol 5.55.55.5礦脂 5.55.55.5甘油一硬脂酸酯 3.03.03.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚 3.03.03.0對羥苯甲酸丙酯 0.30.30.3[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 0.11.08.0甘油 7.07.07.0一縮二丙二醇 20.0 20.0 20.0聚乙二醇 5.05.05.0水 不包括香料和色料的余量香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的2-7制備含有[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的發(fā)乳將各個油相和水相成分在一個單獨的容器中混合，并將每種混合物通過加熱至80℃而完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化并冷卻至室溫。混合入添加劑如香料和色料以制備三種發(fā)乳，組合物如下表14所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
發(fā)現(xiàn)表14的組合物1具有與含有0.1％環(huán)孢菌素A的傳統(tǒng)發(fā)乳相似水平的毛發(fā)生長促進作用，這是根據(jù)后文描述的測試實施例在動物實驗中評價的。
表14發(fā)乳的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3石蠟 5.0 5.0 5.0Cetostearyl alcohol 5.5 5.5 5.5礦脂 5.5 5.5 5.5甘油一硬脂酸酯3.0 3.0 3.0聚氧乙烯辛基十二烷基醚3.0 3.0 3.0對羥苯甲酸丙酯0.3 0.3 0.3[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 0.1 1.0 8.0甘油 7.0 7.0 7.0一縮二丙二醇 20.0 20.020.0聚乙二醇 5.0 5.0 5.0水不包括香料和色料的余量香料 典型的典型的 典型的色料 典型的典型的 典型的制備實施例3香波3-1制備含有[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表15所示。
表15香波的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3POE十二烷基硫酸鈉40.0 40.040.0(30wt％ 水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.0 3.0 3.0丙二醇 2.0 2.0 2.0甲基對羥苯甲酸 0.2 0.2 0.2乙醇 2.0 2.0 2.0[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A1.0 3.0 10.0水楊酸 0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量 余量余量3-2制備含有[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表16所示。
表16香波的配方(單位重量％)成分組合物1組合物2組合物3POE十二烷基硫酸鈉40.040.0 40.0(30wt％水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.0 3.03.0丙二醇 2.0 2.02.0甲基對羥苯甲酸 0.2 0.20.2乙醇 2.0 2.02.0[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A1.0 3.010.0水楊酸 0.3 0.30.3L-薄荷醇 0.3 0.30.3香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量余量 余量3-3制備含有[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表17所示。
表17香波的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3POE十二烷基硫酸鈉 40.0 40.0 40.0(30wt％ 水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺3.03.03.0丙二醇2.02.02.0甲基對羥苯甲酸0.20.20.2乙醇 2.02.02.0[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 1.03.010.0水楊酸0.30.30.3L-薄荷醇 0.30.30.3香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水余量 余量 余量
3-4制備含有[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表18所示。
表18香波的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3POE十二烷基硫酸鈉 40.0 40.0 40.0(30wt％ 水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.0 3.0 3.0丙二醇 2.0 2.0 2.0甲基對羥苯甲酸 0.2 0.2 0.2乙醇 2.0 2.0 2.0[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 1.0 3.0 10.0水楊酸 0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3香料 典型的典型的 典型的色料 典型的典型的 典型的水 余量 余量 余量3-5制備含有[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表19所示。
表19香波的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3POE十二烷基硫酸鈉(sodium POE laurylsulfuric acid) 40.0 40.0 40.0(30wt％ 水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.0 3.03.0丙二醇 2.0 2.02.0甲基對羥苯甲酸 0.2 0.20.2乙醇 2.0 2.02.0[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A1.0 3.010.0水楊酸 0.3 0.30.3L-薄荷醇 0.3 0.30.3香料 典型的典型的 典型的色料 典型的典型的 典型的水 余量 余量 余量3-6制備含有[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表20所示。
表20香波的制備(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3POE十二烷基硫酸鈉(30wt％ 水溶液) 40.0 40.0 40.0棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.03.03.0丙二醇 2.02.02.0甲基對羥苯甲酸 0.20.20.2乙醇 2.02.02.0[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 1.03.010.0水楊酸 0.30.30.3L-薄荷醇 0.30.30.3香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量余量余量3-7制備含有[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的香波將除了香料，色料和水之外的所有各個成分混合，并將混合物攪拌加熱完全溶解。在冷卻至室溫后，將混合物與香料和色料混合。最后加入水調(diào)節(jié)總重為100％，制備三種香波，組合物如下表21所示。
表21香波的制備(單位重量％)成分 組合物1 組合物2組合物3POE十二烷基硫酸鈉40.0 40.040.0(30wt％ 水溶液)棕櫚油脂肪酸二乙醇酰胺 3.03.0 3.0丙二醇 2.02.0 2.0甲基對羥苯甲酸 0.20.2 0.2乙醇 2.02.0 2.0[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A1.03.0 10.0水楊酸 0.30.3 0.3L-薄荷醇 0.30.3 0.3香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的水 余量 余量余量制備實施例4護發(fā)劑4-1制備含有[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化，并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N護發(fā)劑，組合物如下表22所示。加入水以調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表22護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1 組合物2 組合物3鯨蠟醇 3.0 3.0 3.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯 2.0 2.0 3.0鯊烯 10.0 10.0 10[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A1.0 5.0 10.0丙二醇 2.0 2.0 2.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨(25wt％ 水溶液) 8.0 8.0 8.0甲基對羥苯甲酸 0.2 0.2 0.2水楊酸 0.3 0.3 0.3L-簿荷醇 0.3 0.3 0.3水 余量 余量 余量香料 典型的典型的 典型的色料 典型的典型的 典型的4-2制備含有[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化，并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N護發(fā)劑，組合物如下表23所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表23護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3鯨蠟醇3.03.0 3.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯2.02.0 3.0鯊烯 10.0 10.0 10.0[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A 1.05.0 10.0丙二醇2.02.0 2.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨8.08.0 8.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸0.20.2 0.2水楊酸0.30.3 0.3L-薄荷醇 0.30.3 0.3水余量 余量 余量香料 典型的 典型的典型的色料 典型的 典型的典型的4-3制備含有[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化，并冷卻至室溫。混合入添加劑如香料和色料以制備三種護發(fā)劑，組合物如下表24所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表24護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2 組合物3鯨蠟醇3.0 3.0 3.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯2.0 2.0 3.0鯊烯 10.010.0 10.0[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 1.0 5.0 10.0丙二醇2.0 2.0 2.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨8.0 8.0 8.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸0.2 0.2 0.2水楊酸0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3水余量余量 余量香料 典型的 典型的典型的色料 典型的 典型的典型的4-4制備含有[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化，并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N護發(fā)劑，組合物如下表25所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表25護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3鯨蠟醇3.03.03.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯2.02.03.0鯊烯 10.0 10.0 10.0[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A 1.05.010.0丙二醇2.02.02.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨8.08.08.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸0.20.20.2水楊酸0.30.30.3L-薄荷醇 0.30.30.3水余量 余量 余量香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的4-5制備含有[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解?；旌线@兩相成分，乳化，并冷卻至室溫?；旌先胩砑觿┤缦懔虾蜕弦灾苽淙N護發(fā)劑，組合物如下表26所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表26護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3鯨蠟醇 3.03.03.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯 2.02.03.0鯊烯 10.0 10.0 10.0[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A1.05.010.0丙二醇 2.02.02.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨 8.08.08.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸 0.20.20.2水楊酸 0.30.30.3L-薄荷醇 0.30.30.3水 余量 余量 余量香料 典型的 典型的 典型的色料 典型的 典型的 典型的4-6制備含有[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解。混合這兩相成分，乳化，并冷卻至室溫。混合入添加劑如香料和色料以制備三種護發(fā)劑，組合物如下表27所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表27護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2 組合物3鯨蠟醇 3.03.0 3.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯 2.02.0 3.0鯊烯10.0 10.0 10.0[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 1.05.0 10.0丙二醇 2.02.0 2.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨 8.08.0 8.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸 0.20.2 0.2水楊酸 0.30.3 0.3L-薄荷醇0.30.3 0.3水 余量 余量 余量香料典型的 典型的典型的色料典型的 典型的典型的4-7制備含有[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A的護發(fā)劑在單獨的容器中將各個油相和水相成分混合，并將每種混合物通過加熱至80℃完全溶解。混合這兩相成分，乳化，并冷卻至室溫。混合入添加劑如香料和色料以制備三種護發(fā)劑，組合物如下表28所示。加入水調(diào)節(jié)至包括油相和水相成分總重為100％。
表28護發(fā)劑的配方(單位重量％)成分 組合物1組合物2組合物3鯨蠟醇 3.0 3.0 3.0自身可乳化的甘油一硬脂酸酯 2.0 2.0 3.0鯊烯 10.010.0 10.0[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A 1.0 5.0 10.0丙二醇 2.0 2.0 2.0硬脂酰二甲基芐基氯化銨 8.0 8.0 8.0(25wt％ 水溶液)甲基對羥苯甲酸 0.2 0.2 0.2水楊酸 0.3 0.3 0.3L-薄荷醇 0.3 0.3 0.3水 余量余量 余量香料 典型的 典型的典型的色料 典型的 典型的典型的測試實施例測試本發(fā)明的環(huán)孢菌素衍生物的毛發(fā)生長促進作用利用6-7周齡的雌性C57BL/6小鼠進行測試。在用電動剃須刀除去背部中間的毛發(fā)后，將小鼠稱重并隨機分配成具有均勻體重分布的測試組。使小鼠有一天的適應(yīng)期。從第二天開始，在小鼠背部每天應(yīng)用一次實施例1中通過HPLC制備的環(huán)孢菌素A和環(huán)孢菌素A衍生物(化合物1-7)，數(shù)量為100μl(濃度為0.1％w/v)，共30天。通過目測毛發(fā)再生程度確定結(jié)果。針對各個除去毛發(fā)的面積檢測并對比新毛發(fā)生長速度。
從表29中可以看出，與只應(yīng)用運載體的對照組小鼠相對比，本發(fā)明的環(huán)孢菌素衍生物具有明顯的毛發(fā)生長促進作用。另外，所述衍生物示出與環(huán)孢菌素A相似水平的毛發(fā)生長促進作用。在30天期間，對照小鼠和所有測試小鼠的背部均示出無特異性皮膚過敏。
表29在小鼠中對環(huán)孢菌素衍生物的毛發(fā)再生作用的評估應(yīng)用的化運載體 環(huán)孢菌素A 1234567合物毛發(fā)再生面積比率 35 91 95 91 95 96 93 94 90(％)基于上述結(jié)果，本發(fā)明的環(huán)孢菌素衍生物可以以任何形式配制，包括液體配方，噴霧劑，凝膠，糊劑，乳劑，霜劑，護發(fā)劑，洗發(fā)香波等形式。雖然司以獲得各種形式，但考慮到高度的商業(yè)需要，在此提供了生發(fā)劑，發(fā)乳，護發(fā)劑和洗發(fā)香波形式。正如在測試實施例中所證實的，與對照組相比，所述環(huán)孢菌素衍生物呈現(xiàn)極佳的毛發(fā)生長促進作用。
工業(yè)適用性從上述描述中得知，本發(fā)明提供了一種毛發(fā)生長促進劑，其包含在環(huán)孢菌素A的3-位取代的環(huán)孢菌素A衍生物作為有效成分，其呈現(xiàn)極佳的毛發(fā)生長促進作用。
權(quán)利要求
1.一種毛發(fā)生長促進劑，其包含由式1表示的環(huán)孢菌素3-位類似物作為有效成分，[式1] 其中A表示N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸，(2S，3R，4R，6E)-3-巰基-4-甲基-2-(甲基氨基)-6-辛烯酸或者(2S，4R，6E)-3-氧代-4-甲基-2-(甲基氨基)-6-辛烯酸；B表示L-氨基丁酸(Abu)，L-丙氨酸(Ala)，L-蘇氨酸(Thr)，L-纈氨酸(Val)或者L-正纈氨酸(Nva)；C表示由通式1表示的D-氨基酸，[通式1]CH3NH-CH(R)-COOH其中R選自氫，用選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基組分，及由通式2表示的-X-R′，[通式2]-X-R′其中X是氧或硫，R′選自氫和用選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基，、鏈烯基或炔基組分；D表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-纈氨酸；E表示L-纈氨酸或L-正纈氨酸；F表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；G表示L-丙氨酸或L-丙氨酸硫代酰胺([7ψ8CS-NH]，NH-CHCH3-CS-)；H表示由通式3表示的D-氨基酸，[通式3]-NH-CH(CH2R)-COOH其中R是氫或者由通式4表示的-X-R′，[通式4]-X-R′其中X是氧或硫，R′選自氫和用選自氨基、羥基、鹵素、鹵烷基、酯、烷氧基、氰基、硝基、烷基氨基和二烷基氨基的一或多個基團取代或未取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基、鏈烯基或炔基組分；I表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；J表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；K表示N-甲基-L-纈氨酸或L-纈氨酸。
2.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其中環(huán)孢菌素的3-位類似物由式2表示[式2] 其中MeBmt表示N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸；A′表示L-氨基丁酸，L-丙氨酸，L-蘇氨酸，L-纈氨酸或L-正纈氨酸；B′表示N-甲基-D-氨基丁酸，N-甲基-D-正纈氨酸，D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰，D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰，D-2-甲硫基-肌氨酸，N-甲基-O-丙烯基-D-絲氨酸或N-甲基-D-絲氨酸；C′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-纈氨酸；D′表示L-纈氨酸或L-正纈氨酸；E′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；F′表示L-丙氨酸或L-丙氨酸硫代酰胺([7φ8CS-NH]，NH-CHCH3-CS-)；G′表示D-丙氨酸或D-絲氨酸；H′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；I′表示N-甲基-L-亮氨酸，γ-羥基-N-甲基-L-亮氨酸或L-亮氨酸；MeVal表示N-甲基-L-纈氨酸。
3.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其中環(huán)孢菌素的3-位類似物由式3表示[式3] 其中MeBmt表示N-甲基-(4R)-4-[(E)-2-丁烯基]-4-甲基-L-蘇氨酸；A″表示L-丙氨酸，L-蘇氨酸，L-纈氨酸或L-正纈氨酸；B″表示N-甲基-D-氨基丁酸，N-甲基-D-正纈氨酸，D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰，D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰，D-2-甲硫基-肌氨酸，N-甲基-O-丙烯基-D-絲氨酸或N-甲基-D-絲氨酸；MeLeu表示N-甲基-L-亮氨酸；Val表示L-纈氨酸；Ala表示L-丙氨酸；Dala表示D-丙氨酸；MeVal表示N-甲基-L-纈氨酸。
4.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[N-甲基-D-Abu3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
5.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[N-甲基-D-Nva3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
6.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[D-2-(甲基氨基)己-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
7.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[D-2-(甲基氨基)戊-4-炔酰3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
8.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[D-2-甲硫基-Sar3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
9.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[N-甲基-O-丙烯基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
10.權(quán)利要求1的毛發(fā)生長促進劑，其包含[N-甲基-D-Ser3]環(huán)孢菌素A作為有效成分。
11.權(quán)利要求1-10任一項的毛發(fā)生長促進劑，其配制成選自液體配方，噴霧劑，凝膠，糊劑，霜劑，乳劑，護發(fā)劑和洗發(fā)香波的一種形式。
全文摘要
本發(fā)明揭示了一種包含環(huán)孢菌素衍生物作為有效成分的毛發(fā)生長促進劑，更特別地，本發(fā)明揭示了一種包含在3－位取代的環(huán)孢菌素A衍生物作為有效成分的毛發(fā)生長促進劑。
文檔編號C07K7/64GK1507339SQ02809675
公開日2004年6月23日 申請日期2002年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月11日
發(fā)明者金祥年, 安浩井, 李昌雨, 李珉鎬, 金正勛, 金鐘一, 金勝鎮(zhèn), 趙浩成, 李憲植, 金炯晉 申請人:Lg生活健康株式會社