專利名稱:一種金霉素固體廢棄物的無害化處理方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種利用微生物對含金霉素的固體廢棄物進(jìn)行無害化處理的方法,屬于環(huán)境微生物與固體廢棄物處理技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
金霉素(Chlortetracycline)屬于四環(huán)素類抗生素,是一種廣譜性抗生素,對多種革蘭氏陽性和陰性菌、螺旋體、立克次氏體、支原體、衣原體等具有抑制作用,廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖和水產(chǎn)養(yǎng)殖等產(chǎn)業(yè)當(dāng)中。該類抗生素經(jīng)過畜禽代謝后,大部分以原形或母核的形式隨著畜禽糞便排入環(huán)境,會對環(huán)境和人體健康構(gòu)成潛在危害。畜禽糞便中殘留抗生素的環(huán)境污染及其控制日益受到關(guān)注。另一方面,金霉素在發(fā)酵生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生大量的固體廢棄物,如金霉素菌渣,它是金霉素發(fā)酵液經(jīng)過預(yù)處理后,過濾剩余的殘渣,主要由菌絲體、發(fā)酵剩余的培養(yǎng)基原料、生產(chǎn)菌中間代謝產(chǎn)物、水分以及殘留的金霉素等物質(zhì)組成。其營養(yǎng)成分豐富,尤其是蛋白質(zhì)含量較高,約占干重45-55%,同時還含有脂肪、淀粉、纖維素和多種礦質(zhì)元素等物質(zhì),是一種潛在利用價值較高的固體廢棄物。然而,由于金霉素菌渣中含有金霉素殘留等生物毒性物質(zhì),被我國列為危險固體廢棄物,只能通過焚燒或填埋方法進(jìn)行處置。目前,生產(chǎn)企業(yè)大多采用焚燒方法處置,處理成本高,難度大,棄之可惜,而且存在二次污染的潛在風(fēng)險。利用生物方法降解環(huán)境中的污染物,具有成本低、效率高、無二次污染等優(yōu)點,具有很好的發(fā)展前景。畜禽糞便中殘留的金霉素通過堆肥方法進(jìn)行生物處理已有研究報道,而針對金霉素菌渣這種高毒性和強酸性(pH值為2-3)的固體廢棄物,通過生物方法對其進(jìn)行無害化處理的相關(guān)研究,目前尚未見報導(dǎo)。在全球面臨資源和能源匱乏挑戰(zhàn)的今天,如果能找的一條安全、經(jīng) 濟(jì)、環(huán)保的生物處理金霉素固體廢棄物的方法,不僅對防治固體廢棄物中殘留金霉素的環(huán)境污染問題具有現(xiàn)實意義,而且對未來的菌渣資源化利用和循環(huán)經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有重要科學(xué)價值與應(yīng)用前景。
發(fā)明內(nèi)容
針對金霉素菌渣固體廢棄物中金霉素殘留量高、生物毒性強、降解難度大和目前所用方法處理成本高等問題,本發(fā)明旨在提供一種利用微生物對金霉素菌渣進(jìn)行無害化處理的方法。本發(fā)明所述的一種含金霉素的固體廢棄物的無害化處理方法,是以金霉素菌渣為主要原料,添加特定的適量輔料,接種金霉素降解微生物,在特定培養(yǎng)條件下,對菌渣進(jìn)行生物降解處理,使菌渣中殘留金霉素等生物毒性物質(zhì)降解而達(dá)到對菌渣無害化處理的系統(tǒng)化方法。本發(fā)明所提供的技術(shù)方案是通過以下步驟實現(xiàn)的:1、降解菌株選用與活化培養(yǎng)金霉素菌渣初始pH值為2.0-3.0,金霉素含量為0.5_2.5 % (占干基),屬于一種金霉素殘留濃度高且酸性強的固體廢棄物。因此,菌渣生物降解處理必需選用能耐受強酸性和高濃度金霉素的菌株,同時對金霉素具有降解能力的菌株。本發(fā)明中選用微生物為小刺青霉、桔青霉、哈刺木霉和草酸青霉等金霉素降解菌種,尤其以桔青霉LJ318、哈刺木霉LJ245,草酸青霉LJ302和小刺青霉LJ220作為優(yōu)選菌株,這些菌株均已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)。菌株活化使用馬丁氏培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,活化條件為:溫度28-30°C,150-180r/min震蕩培養(yǎng)24_48h,然后轉(zhuǎn)接到更大容器中繼續(xù)培養(yǎng),如此操作2-4代。2、菌渣原料預(yù)處理本發(fā)明所述新鮮菌渣初始含水量為< 80% (重量比),新鮮菌渣的外形呈不規(guī)則的大塊顆粒狀,生物處理前,需將菌渣破碎成l_5mm大小的顆粒,可根據(jù)需要選擇高溫或不經(jīng)過高溫處理。3、輔料選擇與預(yù)處理選擇麥片、麩皮、糠皮、木屑、秸桿等農(nóng)副產(chǎn)品作輔料,121°C滅菌20_30min。4、原輔材料混合以破碎后的金霉素新鮮菌渣為主要原料,添加少量輔料共同組成發(fā)酵底物,金霉素菌渣所占比例為87.5-95.0% (按濕基量計算),輔料添加比例為菌渣重量的5.0-12.5%,輔料種類可選擇1-3種。5、接種與發(fā)酵處理按原料重2-15%的接種量,將活化后的菌液(I種或多種)接種到菌渣培養(yǎng)底物中,攪拌均勻,放入發(fā)酵容器或設(shè)備中。發(fā)酵容器或設(shè)備的溫度設(shè)置為18-35°C,優(yōu)選28-30°C,相對濕度為90-95%。根據(jù)菌渣發(fā)酵進(jìn)展情況,進(jìn)行攪拌或通空氣處理,并定期取樣,測定金霉素殘留量、PH值以及水分等指標(biāo)。生物發(fā)酵處理后的金霉素菌渣中粗蛋白含量為54-61% (占干基),粗灰分含量為12-15% (占干基),水分含量為14-30%。菌渣pH值可由發(fā)酵前的2.0-3.0上升為發(fā)酵后的7.1-8.4,菌渣中金霉素降解率最高可達(dá)98%以上。6、菌渣的生物毒性測定本發(fā)明采用生物指示法測定菌渣毒性,選用微生物作為毒性測試菌,以金黃色葡萄球菌和藤黃微球菌作為優(yōu)選菌種,采用比濁法對菌渣的生物毒性進(jìn)行測定。發(fā)現(xiàn)添加
0.1-30.0mg/ml的原菌渣提取液,培養(yǎng)16h時,對測試菌生長的抑制率在80%以上,而添加
0.1-30.0mg/ml發(fā)酵處理后的菌渣提取液,在相同培養(yǎng)條件下,對測試菌生長沒有抑制作用,甚至對測試菌的生長具有一定的促進(jìn)作用。本發(fā)明提供的利用微生物發(fā)酵生物降解菌渣中金霉素殘留的方法,操作簡便,能耗低,發(fā)酵過程容易控制,綠色環(huán)保。本發(fā)明的有益效果:1、利用本發(fā)明提供的方法,可降解菌渣中殘留的金霉素等生物毒性物質(zhì),減少金霉素殘留對環(huán)境造成的污染與危害。2、用本發(fā)明提供的方法處理金霉素菌渣,不需要對酸性極強的新鮮菌渣進(jìn)行pH值調(diào)節(jié),可直接對新鮮菌渣進(jìn)行生物降解處理。通過生物發(fā)酵過程,使菌渣pH值由處理前的2.0-3.0提高到處理后的7.1-8.4,即由強酸性轉(zhuǎn)變到中性到微堿性,減少了新鮮菌渣對容器的酸性腐蝕,同時使處理后的菌渣便于儲存、運輸和資源再利用。3、用本發(fā)明提供的方法處理金霉素菌渣,其處理后菌渣含水量由原菌渣的60-80 %變?yōu)樘幚砗蟮?4-30 %,起到了固廢減量化的目的。 4、本發(fā)明提供的利用生物降解處理菌渣的方法,與目前采用的焚燒與填埋處理菌渣方法相比,具有成本低、反應(yīng)條件溫和、操作簡單、能耗低、發(fā)酵過程容易控制、綠色環(huán)保、降解金霉素效率高等優(yōu)點。菌渣經(jīng)生物降解處理后,其金霉素含量大幅度降低。處理后的金霉素菌渣有望作為一種新的潛在蛋白質(zhì)資源進(jìn)行資源回用和深度開發(fā)利用。5、本發(fā)明提供的生物降解方法可望應(yīng)用于四環(huán)素和土霉素菌渣的生物降解處理,以及畜禽糞便和周邊土壤污染環(huán)境的生物修復(fù)處理,對于發(fā)酵制藥行業(yè)其他菌渣的處理也具有較好的借鑒價值。
圖1為金霉素高效降解菌株對菌渣中金霉素的降解率曲線。圖2為添加菌渣提取液培養(yǎng)16h對金黃色葡萄球菌生長的抑制率曲線。
具體實施例方式本發(fā)明的具體實施方式
由以下實例加以說明,但本發(fā)明不局限于這些實施例。實施例1金霉素新鮮菌渣的主要成分測定對金霉素新鮮菌渣的初始含水量、pH值和金霉素殘留量進(jìn)行了測定,由測定結(jié)果得知金霉素新鮮菌渣初始含水量彡80% (60-80% )(重量比),pH為2.0-3.0,金霉素含量為0.5-2.5% (占干基)。含水量測定方法:采用105°C烘干法。pH值測定方法:采用酸度計測定。金霉素含量測定方法:采用高效液相色譜(HPLC)法。具體操作為:準(zhǔn)確稱取
2.0OOOg菌渣,研磨,加20mL丙酮提取液,超聲30min,用0.22 μ m濾膜過濾。利用高效液相色譜儀測定濾液中金霉素含量并計算出的降解率。HPLC 條件為:填充劑:十八烷基硅烷鍵合硅膠;流動相:乙二酸溶液(0.01mol/L):乙腈:甲醇體積比為10: 3: 2 ;流速:1.0ml/min ;柱溫:35°C ;進(jìn)樣量=IOyL ;檢測波長:375nm。實施例2 —種金霉素菌渣生物處理方法該方法主要包括如下步驟:1、降解菌株選擇與菌株活化培養(yǎng) 根據(jù)金霉素新鮮菌洛pH值低和金霉素殘留量高的特征,選用哈茨木霉(Hypocrealixii),草酸青霉(Penicillium oxalicum),桔青霉(Penicillium citrinum)和小刺青霉(Penicillium spinulosu)等金霉素降解菌種,以哈刺木霉(Hypocrea lixii)LJ245 (CGMCC N0.5753),桔青霉(Penicillium citrinum) LJ318 (CGMCC N0.5850),草酸青霉(Penicillium oxalicum)LJ302(CGMCC N0.7019)和小刺青霉(Penicillium spinulosu)LJ220 (CGMCC N0.5754)作為優(yōu)選菌株。配制馬丁氏培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基,對菌株進(jìn)行活化培養(yǎng),培養(yǎng)條件為28-30°C,150-180r/min震蕩培養(yǎng)24_48h,然后轉(zhuǎn)接到體積更大容器中繼續(xù)培養(yǎng),如此操作2-4代。馬丁氏培養(yǎng)基配制:蛋白胨6.0g,葡萄糖 10.0g, KH2PO4L 0g, MgSO4.7H200.5g,溶于IOOOml蒸懼水中,分裝,115°C滅菌15_20min。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基配制:將馬鈴薯洗凈去皮,稱取200g切成小塊,加水1000ml,煮沸20-30分鐘,用紗布過濾,加入20g葡萄糖,補足水分至IOOOml,分裝,115 °C滅菌15_20min。2、菌渣原料預(yù)處理金霉素新鮮菌渣原料外形為不規(guī)則的大塊顆粒,在生物處理之前,需將菌渣破碎成l-5mm大小的小顆粒。3、輔料選擇與預(yù)處理選擇麥片、麩皮、糠皮、木屑、秸桿等農(nóng)副產(chǎn)品等作輔料,121°C滅菌20_30min。4、原輔材料混合以破碎后的金霉素新鮮菌渣為主要原料,添加少量輔料共同組成發(fā)酵底物,金霉素菌渣所占比例為87.5-95.0 % (按濕基量計算),輔料添加比例為菌渣重量的
5.0-12.5%,輔料種類可選擇1-3種。5、接種與發(fā)酵處理將活化后菌液(I種或多種)按2-15%接種量接種到菌渣培養(yǎng)底物中,攪拌均勻后,放入發(fā)酵容器或設(shè)備中。發(fā)酵溫度設(shè)置為18-351:,優(yōu)選28-301:,相對濕度為90-95%。根據(jù)菌渣發(fā)酵進(jìn)展情況,進(jìn)行攪拌或通空氣處理,定期取樣測定金霉素殘留量。6、成分測定采用高效液相色譜法對菌渣中金霉素殘留量進(jìn)行測定,并計算金霉素降解率。圖1為高效降解菌株對菌渣中金霉素的降解率曲線。由圖1可知,在前7天金霉素降解速率較快,在發(fā)酵的第7天金霉素降解率可達(dá)到80%以上,在發(fā)酵30-40天,降解率在98%以上。另外,對發(fā)酵處理后菌渣中的水分和粗蛋白含量等指標(biāo)進(jìn)行了測定。由測定結(jié)果得知,發(fā)酵處理后菌渣中水分含量為14-30%,粗蛋白含量為54-61% (占干基),粗灰分含量為12-15% (占干基)。由此可知,發(fā)酵處理后菌渣是一種潛在利用價值高的蛋白質(zhì)資源。7、菌渣的生物毒性測定本發(fā)明采用生物指示法測定菌渣毒性,選用微生物作為毒性測試菌,以金黃色葡萄球菌和藤黃微球菌作為優(yōu)選菌種。根據(jù)我國2010年版《中華人民共和國獸藥典》附錄XI中介紹的抗生素微生物檢定法,采用比濁法,測定菌渣對受試菌如金黃色葡萄球菌和藤黃微球菌毒性程度。具體操作方法為:用磷酸鹽緩沖液提取菌渣,獲得菌渣提取液。在III號培養(yǎng)基中,分別加入不同梯度的菌渣提取液,并以添加相同量的磷酸鹽緩沖液做對照(CK),分別加入測試菌,在28-35°C的搖床中培養(yǎng),定期取樣測定培養(yǎng)液的吸光值(OD6J,并計算OD6tltl抑制率。抑制率計算公式為:抑制率(%)=(對照 OD600-處理 OD600) / 對照 OD600X 100圖2為添加菌渣提取液培養(yǎng)16h對金黃色葡萄球菌生長的抑制率。由圖2可知,在培養(yǎng)基中分別添加濃度為0.1-30.0mg/ml的原菌渣提取液,培養(yǎng)16h,各濃度對金黃色葡萄球菌生長均有較大抑制作用,抑制率均在80%以上;而添加0.1-30.0mg/ml發(fā)酵處理后菌渣的提取液,培養(yǎng)16h,其對金黃色葡萄球菌生長沒有抑制作用,反而表現(xiàn)出一定的促進(jìn)生長作用。III號培養(yǎng)基配方為:蛋白胨5.00g,牛肉浸出粉1.50g,酵母浸出粉3.00g,氯化鈉
3.50g,磷酸氫二鉀3.68g,磷酸二氫鉀L 32g,葡萄糖L OOg,水IOOOml。磷酸緩沖液配方:磷酸氫二鉀2.0Og,磷酸二氫鉀8.0Og,蒸餾水IOOOml。實施例3 —種金霉素菌渣生物處理方法該方法主要包括如下步驟:1、菌種制備將降解金霉素的微生物菌種如小刺青霉、桔青霉、哈刺木霉和草酸青霉等,分別接種于馬丁氏培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中,置于28-30°C,150-170r/min震蕩條件下培養(yǎng)24-48h,然后轉(zhuǎn)接入體積更大容器中繼續(xù)培養(yǎng),如此操作2-4代。馬丁氏培養(yǎng)基與馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基配制方法同實施例2。2、菌渣原料預(yù)處理將金霉素新鮮菌渣由大塊顆粒,破碎成l_5mm大小的顆粒。然后放入高壓蒸汽滅菌鍋中,在121°C處理20min-30min。以不經(jīng)過高溫處理菌渣作對照。3、輔料準(zhǔn)備等后面步驟同實施例2。采用高效液相色譜對菌渣中金霉素殘留量進(jìn)行測定。由測定結(jié)果得知,菌渣經(jīng)高溫處理后,菌渣中的金霉素含量降低。以高溫處理和未處理菌渣為主要原料,接種微生物進(jìn)行發(fā)酵處理,發(fā)現(xiàn)經(jīng)高溫處理后菌渣中金霉素殘留量低于未經(jīng)過高溫處理的菌渣。高溫處理后的菌渣經(jīng)發(fā)酵后,金霉素殘留量可降低到檢出限0.lmg/Kg以下。實施例4金霉素菌渣發(fā)酵過程中pH值變化對菌渣生物發(fā)酵過程中的pH值進(jìn)行了測定,由測定結(jié)果(見表I)得知,新鮮原菌渣的初始pH值為2.0-3.0,隨著發(fā)酵進(jìn)程,菌渣pH值可升高至7.1-8.4。表I菌渣發(fā)酵過程中pH值變化
發(fā)酵時間(d)_2_4_7_13_18_30_40
pH 值2.0-3.0 5.2-6.3 7.1-8.3 7.4-8.4 7.7-8.3 7.6-8.2 7.3-8.2pH值的測定方法:精密稱量取樣品2.0OOOg,加入蒸餾水10ml,超聲30min,取上清液,用酸度計測定PH值。
權(quán)利要求
1.一種金霉素固體廢棄物的無害化處理方法,其特征在于,通過如下操作步驟實現(xiàn): (1)降解菌株選用與活化培養(yǎng) 根據(jù)金霉素新鮮菌渣特點,選用對金霉素具有降解能力、且能耐受強酸性和高濃度金霉素的菌株,菌株活化使用馬丁氏培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基, 活化條件為:溫度28-30°C,150-180r/min震蕩培養(yǎng)24_48h,然后轉(zhuǎn)接到更大容器中繼續(xù)培養(yǎng),如此操作2-4代。
(2)菌渣原料預(yù)處理 金霉素新鮮菌渣外形呈不規(guī)則的大塊顆粒狀,生物處理前,需將菌渣進(jìn)行破碎處理,然后,可根據(jù)需要對破碎后菌渣進(jìn)行高溫或不經(jīng)過高溫處理。
(3)輔料選擇與預(yù)處理 選擇農(nóng)副產(chǎn)品作輔料,121°C滅菌20-30min。
(4)原輔材料混合 以破碎處理后的金霉素新鮮菌渣為主要原料,添加少量預(yù)處理后的輔料共同組成發(fā)酵底物。
(5)接種與發(fā)酵處理 將活化后的菌種I種或多種接種到菌渣發(fā)酵底物中,攪拌均勻,然后放入發(fā)酵設(shè)備中進(jìn)行發(fā)酵處理,定期測定金霉素殘留量、PH值以及水分等指標(biāo)。
(6)菌渣的生物毒性測定 采用生物指示法測定菌渣毒性,以微生物作為毒性測試菌,通過比濁法測定菌渣毒性,具體操作為:在III號培養(yǎng)基中,加入用磷酸鹽緩沖液提取的菌渣提取液,并以添加相同量的磷酸鹽緩沖提取液做對照(CK),然后分別加入測試菌,在28-35°C的搖床中培養(yǎng),定期取樣測定培養(yǎng)液的吸光值(0D_),并計算抑制率: 抑制率(% )=(對照OD600-處理OD600) /對照OD600X 100 經(jīng)測定得知,添加濃度為0.1-30.0mg/ml的原菌渣提取液,培養(yǎng)16h,各濃度對測試菌生長的抑制率均在80%以上,而添加0.1-30.0mg/ml發(fā)酵處理后菌渣的提取液,培養(yǎng)16h,對測試菌的生長沒有抑制作用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(I)所述金霉素新鮮菌渣的初始PH值為2.0-3.0,金霉素含量為0.5-2.5% (占干基),含水量為60-80%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(I)所述金霉素降解微生物包括哈茨木霉(Hypocrea lixii),草酸青霉(Penicillium oxalicum),桔青霉(Penicilliumcitrinum)和小刺青霉(Penicillium spinulosu)等菌種,以桔青霉LJ318、哈刺木霉LJ245,草酸青霉LJ302和小刺青霉LJ220作為優(yōu)選菌株,這些菌株均已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC),菌種活化培養(yǎng)基: 馬丁氏培養(yǎng)基配方:蛋白胨6.0g,葡萄糖10.0g, KH2PO4L 0g, MgSO4.7H200.5g,溶于1000ml蒸餾水中。
馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基配制:將馬鈴薯洗凈去皮,稱取200g切成小塊,加水1000ml,煮沸20-30分鐘,用紗布過濾,加入20g葡萄糖,補足水分至1000ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(2)所述菌渣預(yù)處理方法中的破碎處理后的顆粒大小為l_5mm,菌渣高溫處理為121°C,20-30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(3)所述農(nóng)副產(chǎn)品輔料,主要指麥片、麩皮、糠皮、木屑、秸桿等。
6.如權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(4)所述原輔材料混合,是指以金霉素菌渣為主要原料,占比例為87.5-95.0% (按濕基量計算),輔料占比例5.0-12.5%,輔料種類可選擇1-3種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(5)所述接種與發(fā)酵處理,接種量為2_15%,發(fā)酵溫度為18-35°C,優(yōu)選28-30°C,相對濕度為90-95%。發(fā)酵期間要進(jìn)行攪拌或通空氣處理。
8.根據(jù)權(quán)利I要求所述方法,其特征在于,金霉素含量測定采用高效液相色譜法,PH值測定采用酸度計測定。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,步驟(6)所述生物毒性測定,選擇的測試微生物,以金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌菌種為優(yōu)選菌種。
III號培養(yǎng)基配方為:蛋白胨5.00g,牛肉浸出粉1.50g,酵母浸出粉3.00g,氯化鈉3.50g,磷酸氫二鉀3.68g,磷酸二氫鉀L 32g,葡萄糖L OOg,水IOOOml。
磷酸緩沖液配方:磷酸氫二鉀2.00g,磷酸二氫鉀8.00g,蒸餾水1000ml。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9所述方法,其特征在于,生物發(fā)酵處理后的金霉素菌渣中粗蛋白含量為54-61% (占干基),粗灰分含量為12-15% (占干基),水分含量為14-30%,菌渣pH值可由發(fā)酵前的2.0-3.0上升為發(fā)酵后的7.1-8.4,菌渣中金霉素降解率可達(dá)98%以上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用微生物對金霉素固體廢棄物進(jìn)行無害化處理的方法,屬于環(huán)境微生物與固體廢棄物處理技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明選用金霉素降解微生物,以金霉素菌渣為主原料,添加特定的適量輔料,通過發(fā)酵處理,使菌渣中金霉素等生物毒性物質(zhì)降解而達(dá)到菌渣無害化的效果。本發(fā)明具有成本低、反應(yīng)條件溫和、操作簡單、能耗低、發(fā)酵過程容易控制、綠色環(huán)保、降解效率高等優(yōu)點。本發(fā)明解決了金霉素菌渣的生物脫毒問題,對該固廢的無害化處理和資源化利用提供了方法與基礎(chǔ)。
文檔編號A62D101/28GK103111037SQ201310073748
公開日2013年5月22日 申請日期2013年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月8日
發(fā)明者楊正禮, 李艷菊, 張愛平, 楊世琦, 張晴雯 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境與可持續(xù)發(fā)展研究所, 李艷菊