專利名稱：含有蛋白水解酶、肽醛和硼酸源的液體洗滌劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有酶的液體洗滌劑組合物。更具體地說，本發(fā)明涉及含有洗滌表面活性劑、蛋白水解酶、肽醛和硼酸的液體洗滌劑組合物。肽醛和硼酸的組合起到促進(jìn)蛋白酶抑制劑的效果的作用。
本發(fā)明的背景含有蛋白酶的液體水合洗滌劑是公知的，尤其是在洗衣和護(hù)理領(lǐng)域中。在這類含有蛋白酶的液體水合洗滌劑中經(jīng)常遇到的問題是由蛋白水解酶引起組合物中的第二種酶，如脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶或者蛋白酶本身的降解現(xiàn)象。結(jié)果，影響第二種酶或者蛋白酶本身在洗滌劑組合物中的穩(wěn)定性，并因此使洗滌劑組合物效果變差。
對(duì)于這個(gè)問題，已經(jīng)建議采用各種蛋白酶抑制劑或者穩(wěn)定劑。例如，許多文獻(xiàn)建議采用下面的化合物來促進(jìn)酶的穩(wěn)定性芐脒氫氯化物、低級(jí)脂肪醇或者羧酸、多元醇和硼化合物的混合物、芳香硼酸酯和鈣，特別是甲酸鈣。近年來，發(fā)現(xiàn)某些肽醛有穩(wěn)定蛋白酶的作用。
盡管這些化合物用于液體洗滌劑已經(jīng)獲得不同的成功，它們?nèi)源嬖趩栴}。例如，肽醛相當(dāng)昂貴，并且對(duì)配方設(shè)計(jì)師來說太復(fù)雜，尤其是用于液體洗滌劑。其它抑制劑，例如鈣離子和硼酸比較廉價(jià)，但是不能穩(wěn)定酶和肽醛。因此本發(fā)明的目的是提供一種經(jīng)濟(jì)、有效并適用于液體洗滌劑組合物的蛋白酶抑制劑體系。
為了達(dá)到這個(gè)目的，本發(fā)明建議在液體洗滌劑組合物中采用硼酸或其源和肽醛的組合物作為可逆蛋白酶抑制劑。硼酸和肽醛的同時(shí)存在對(duì)蛋白酶具有經(jīng)濟(jì)的、改進(jìn)的穩(wěn)定作用。這種新的結(jié)合使配方設(shè)計(jì)師在設(shè)計(jì)穩(wěn)定體系時(shí)增加了靈活性?？梢哉{(diào)整肽醛和硼酸的濃度產(chǎn)生最合理有效的配方，并減少由在液體洗滌劑基質(zhì)中存在的二價(jià)離子引起的產(chǎn)品穩(wěn)定性的問題。
特別是本發(fā)明允許在本發(fā)明的液體洗滌劑組合物中采用非常少量的肽醛。這是配制本發(fā)明所說的比較廉價(jià)的濃縮液體洗滌劑組合物的關(guān)鍵。
由于硼酸和肽醛的結(jié)合可有效地抑制蛋白酶，本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是甚至對(duì)蛋白水解降解非常敏感的酶現(xiàn)在也可以加入到含有蛋白酶的液體洗滌劑組合物中。
背景技術(shù)：
已經(jīng)建議使用各種蛋白酶抑制劑或者穩(wěn)定劑。例如US4566985建議使用芐脒氫氯化物；EP376705建議使用低級(jí)脂肪醇或者羧酸；EP381262建議使用多元醇和硼化合物的混合物；和EP91870072.5建議使用芳香硼酸酯。還可參見US5030378,1991年7月9日。還可參見US4261868、US4404115、US4318818和EP130756。
使用肽衍生物來抑制蛋白酶已經(jīng)公開在治療應(yīng)用中。EP293881公開了使用肽硼酸作為胰蛋白酶類絲氨酸蛋白酶的抑制劑。EP185390和US4399065公開了使用一些肽醛衍生物用于抑制血液凝結(jié)。J90029670公開了通常使用光活性α氨基醛來抑制酶。還可參見“Inhibition ofThrombin and Trypsin by Tripeptide Aldehydes”,Int.J.PeptideProtein Res.，第12卷(1978),pp.217-221；Gaal,Bacsy & Rappay,和“Tripeptide Aldehyde Protease Inhibitors May Depress in VitroProlactin and Growth Hormone Release”Endocrinology，第116卷，No.4(1985),pp.1426～1432；Rappay,Makara,Bajusz & Nagy。一些肽醛已經(jīng)公開在EP-A-473502，用于抑制與以蛋白酶為介質(zhì)的皮膚刺激。
可特別參見EP185390,WO94/04651，公開在1994年3月3日，WO94/04652，公開在1994年3月3日，EP583536，公開在1994年2月23日，EP583535，公開1994年2月3日，EP583534，公開在1994年2月23日，WO93/13125，公開在1993年7月8日，US4529525，US4537706,US4537707和US5527487。
本發(fā)明的概要本發(fā)明是液體洗滌劑組合物，含有a)有效量的洗滌劑表面活性劑；b)活性蛋白水解酶；c)含有硼酸源和二醇的硼組合物；和d)具有下面通式的肽醛Z-B-NH-CH(R)-C(O)H其中B是含有1到5個(gè)氨基酸部分的肽鏈；Z是N封端的部分，選自氨基磷酸酯[(R”O(jiān))2(O)P-]、亞磺酰胺[(SR”)2-]、氨磺酰[(R”(O)2S-]、磺酸[SO3H]、膦酰胺[(R”)2(O)P-]、氨磺酰衍生物[R”O(jiān)(O)2S-]、硫脲[(R”)2N(O)C-]、硫代氨基甲酸酯[R”O(jiān)(S)C-]、膦酸酯[R”-P(O)OH]、酰胺磷酸基[R”O(jiān)(OH)(O)P-]、氨基甲酸酯(R”O(jiān)(O)C-)、和脲[R”NH(O)C-]，其中R”分別選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基、C7-C9烷基芳基和環(huán)烷基部分，其中環(huán)烷基環(huán)可復(fù)蓋C4-C8，并含有一個(gè)或者幾個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子(優(yōu)選R”選自甲基、乙基和芐基)，R選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基和C7-C9烷基芳基部分。
優(yōu)選地，但是任選地，本發(fā)明洗滌劑組合物還含有有效量的鈣離子源。
優(yōu)選地本發(fā)明的液體洗滌劑組合物含有基于組合物重量的a)約1到約95％，優(yōu)選約8％到約70％的所說的洗滌劑表面活性劑；b)約0.0001％到約5％，優(yōu)選約0.0003％到約0.1％的活性蛋白水解酶；c)約0.00001％到約5％，優(yōu)選約0.0001％到約1％，更優(yōu)選約0.0006％到約0.5％的上述肽醛；d)硼組合物，含有約0.25％至約10％，優(yōu)選約0.5％至約5％，更優(yōu)選約0.75％至約3％重量的硼酸或可以在該組合物中形成硼酸的化合物(以硼酸為基礎(chǔ)計(jì)算)以及占組合物約1％至約15％，優(yōu)選約1.5％至約10％，更優(yōu)選約2％至約7％重量的多元醇，優(yōu)選以二醇形式；和e)約0.01％到約1％，優(yōu)選約0.05％到約0.5％的鈣離子。
可用于本發(fā)明的蛋白水解酶優(yōu)選是枯草溶菌素類蛋白酶，并可選自Alcalase、Subtilisin BPN’、蛋白酶A、蛋白酶B和它們的混合物。
硼組合物含有硼酸或硼酸離子源，選自硼氧化物，硼砂，其他堿金屬硼酸鹽，取代的硼酸；多元醇優(yōu)選是二醇，并優(yōu)選選自1,2-丙二醇。
如果使用，可用于本發(fā)明的鈣離子源優(yōu)選選自甲酸鈣、氯化鈣、乙酸鈣、硫酸鈣、二甲苯磺酸鈣和它們的混合物。
優(yōu)選地，該液體洗滌劑組合物進(jìn)一步含有有效量的一種或者幾種下面的酶脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶、和它們的混合物。優(yōu)選的第二種酶是脂肪酶并是通過由Humicola Lanuginosa進(jìn)行克隆基因，并以Aspergillus Oryzae表達(dá)基因制備。脂肪酶的使用量為每克約10到約18000脂肪酶單元，優(yōu)選每克為約60到6000單元。
在另一個(gè)優(yōu)選組合物中，第二種酶是纖維素酶，它由HumicolaInsolens產(chǎn)生，用量為整個(gè)組合物的約0.0001％到約0.1％重量的所說的纖維素酶。
本發(fā)明組合物可以含有其它洗滌劑添加劑，包括但是不限于一種或者幾種下面的物質(zhì)泡沫促進(jìn)劑、助劑、去污聚合物、聚丙烯酸酯聚合物、分散劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、顏料、香料、加工助劑、增白劑和它們的混合物。
本發(fā)明的所有百分?jǐn)?shù)和比例均是重量的，并且所有參考文獻(xiàn)在此結(jié)合作為參考，除非有其它說明。
本發(fā)明的詳細(xì)說明定義-本發(fā)明的組合物含有“有效量”或者“去污改進(jìn)量”的本發(fā)明限定的個(gè)別組分。“有效量”或者“去污改進(jìn)量”是任何能夠可測(cè)定地改進(jìn)在消費(fèi)者洗滌時(shí)從基體，即臟織物或者臟盤子上進(jìn)行污垢清洗或者去除污點(diǎn)的量。一般，此量可以在寬范圍內(nèi)變化。
“協(xié)同”或者“多于加合的”在本發(fā)明中是指當(dāng)結(jié)合鈣和肽醛時(shí)酶的穩(wěn)定性效果大于在洗滌劑組合物中只存在一種組分時(shí)所獲得的單個(gè)效果的總和。
本發(fā)明的液體水合洗滌劑組合物含有四個(gè)主要的組分(A)肽醛或者其混合物，(B)蛋白水解酶或者它們的混合物，(C)洗滌劑表面活性劑和(D)鈣離子。本發(fā)明的組合物優(yōu)選進(jìn)一步含有(E)洗滌劑相容的第二種酶或者其混合物，并可進(jìn)一步含有(F)其它任選的組分。
肽醛-本發(fā)明的洗滌劑組合物含有作為第一種主要組分的肽醛，它具有通式Z-B-NH-CH(R)-C(O)H其中B是含有1到5個(gè)氨基酸部分的肽鏈；Z是N封端的部分，選自氨基磷酸酯[(R”O(jiān))2(O)P]、亞磺酰胺[(SR”)2-]、氨磺酰[(R”(O)2S-]、磺酸[SO3H]、亞膦酰胺[(R”)2(O)P-]、氨磺酰衍生物[R”O(jiān)(O)2S-]、硫脲[(R”)2N(O)C-]、硫代氨基甲酸酯[R”O(jiān)(S)C-]、膦酸酯[R”-P(O)OH]、酰胺磷酸酯[R”O(jiān)(OH)(O)P-]、氨基甲酸酯(R”O(jiān)(O)C)、和脲[R”NH(O)C-]，其中每個(gè)R”分別選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基、C7-C9烷基芳基和環(huán)烷基部分，其中環(huán)烷基環(huán)可復(fù)蓋C4-C8，并含有一個(gè)或者幾個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子(優(yōu)選R”選自甲基、乙基和芐基)，R選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基和C7-C9烷基芳基部分。
優(yōu)選R部分選自甲基、異丙基、仲丁基、異丁基、-C6H5、-CH2-C6H5和-CH2CH2-C6H5，它們可分別由氨基酸Ala、Val、Ile、Leu、PGly(苯基甘氨酸)、Phe和HPhe(一苯基丙氨酸)通過將羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)變成醛基團(tuán)產(chǎn)生。因此，雖然這些部分不是氨基酸(并且它們是由或者不是由氨基酸前體合成的)時(shí)，為了簡(jiǎn)化用于本發(fā)明的抑制劑的舉例說明，抑制劑的醛部分被說成是由氨基酸通過在同類氨基酸之后加上“H”產(chǎn)生的[如“AlaH”表示化學(xué)部分“-NHCH(CH3)C(O)H”]。
優(yōu)選的B肽鏈選自具有下面通式的氨基酸序列的肽鏈Z-A5-A4-A3-A2-A1-NH-CH(R)-C(O)H使得在存在氨基酸時(shí)，它們是下面的氨基酸A1選自Ala、Gly；A2如果存在選自Val、Ala、Gly、Ile；A3如果存在選自Phe、Leu、Val、Ile；A4如果存在是任何氨基酸，但是優(yōu)選選自Gly、Ala；A5如果存在是任何氨基酸，但是優(yōu)選是Gly、Ala、Lys。
本發(fā)明的醛可以由相應(yīng)的氨基酸來制備，因而所說氨基酸的C-末端由羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)變成醛基團(tuán)。這類醛可以通過已知的方法制備，例如如在US5015627、EP185930、EP583534和DE3200812中所記載的。
不受理論的限制，可以相信本發(fā)明的肽醛在液體洗滌劑組合物中與蛋白水解酶相連，從而抑制了所說的蛋白水解酶。通過在水中稀釋，蛋白水解的活性通過蛋白水解酶/肽醛配合物的離解而恢復(fù)。
本發(fā)明所說的蛋白酶抑制劑的N-末端用一個(gè)選自氨基甲酸酯、脲、氨磺酰、膦酰胺、硫脲、亞磺酰胺、磺酸、亞膦酰胺、硫代氨基甲酸酯、酰胺磷酸酯和膦酰胺的N-封端部分保護(hù)基團(tuán)來保護(hù)。但是，在本發(fā)明非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，所說的蛋白酶抑制劑的N-末端被甲基、乙基或者芐基氨基甲酸酯[CH3O-(O)C-；CH3CH2O-(O)C-或者C6H5CH2O-(O)C-]、甲基、乙基或者芐基脲[CH3NH-(O)C-；CH3CH2NH-(O)C-或者C6H5CH2NH-(O)C-]、甲基、乙基或者芐基氨磺酰[CH3SO2-；CH3CH2SO2-或者C6H5CH2SO2-]和甲基、乙基或者芐基酰胺磷酸酯[CH3O(OH)(O)P-；CH3CH2O(OH)(O)P-或者C6H5CH2O(OH)(O)P-]基團(tuán)所保護(hù)。
N-封端基團(tuán)的合成可以在下面的文獻(xiàn)中找到Protective Groupsin Organic Chemistry,Greene,T.,Wuts,P.,John Wiley & Sons,New York,1991,309-405頁；March,J,Advanced Organic Chemistry,Wiley Interscience,1985,445,469頁，Carey,F.Sundberg,R.AdvancedOrganic Chemistry,PartB,Plenum Press,New York,1990,686-89頁；Atherton,E.,Sheppard,R.,Solid Phase Peptide Synthesis,Pierce Chemical,1989,3-4頁；Grant,G.,Synthetic Peptide,W.H.Freeman & Co.,1992,77～103頁；Stewart,J.,Young,J.,Solid Phase Peptide Synthesis，第二版，IRL Press,1984,3,5,11,14-18,28-29頁，Bodansky,M.,Principles of Peptide Synthesis,Springer-Verlag,1988,62,203,59-69頁，Bodansky,M.,PeptideChemistry,Springer-Verlag,1988,74-81頁，Bodansky,M.Bodansky,A.,The Practice of Peptide Synthesis,Springer-Verlag,1984,9-32頁。
可用于本發(fā)明的肽醛的例子是CH3SO2Phe-Gly-Ala-Leu-H、CH3SO2Val-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Val-Ala-Leu-H、CH3CH2SO2Phe-Gly-Ala-Leu-H、C6H5CH2SO2-Val-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Leu-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Phe-Ala-Leu-H和CH3O(OH)(O)P-Leu-Gly-Ala-Leu-H。
在下面的合成實(shí)施例中公開了合成一部分肽醛中的方法。
合成實(shí)施例1四肽醛Moc-Ala-Phe-Gly-Ala-LeuH的合成(a)Ala-Leu-OMe.HCl往將3.0克(14.83毫摩爾)Ala-Leu-OH溶解在50毫升MeOH中并冷卻到0℃的溶液中滴加2.43毫升(33.36毫摩爾)亞硫酰氯。將該溶液在室溫下攪拌一夜并蒸干，定量回收所需的產(chǎn)品。
(b)Cbz-Gly-Ala-亮氨酸甲基酯往0.414克(1.98毫摩爾)Cbz-Gly-OH和0.500克(1.98毫摩爾)Ala-Leu-OMe.HCl在CH2Cl2中的溶液中加入0.607毫升TEA，緊接著加入0.355毫升DEPC。將該溶液攪拌一夜，蒸發(fā)，并將殘留物分配在EtOAc和1NHCl之間。用飽和NaHCO3和飽和NaCl連續(xù)洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得到0.650克純產(chǎn)物。
(c)Moc-Ala-Phe-OH往1.0克(4.23毫摩爾)溶解在4.23毫升1NNaOH中并冷卻到0℃的溶液中滴加0.419克(4.44毫摩爾)氯甲酸甲酯。同時(shí)，在獨(dú)立的加料漏斗中加入另外4.23毫升1NNaOH，使pH保持在9.0～9.5之間。加完后將反應(yīng)物在0℃攪拌30分鐘，在室溫下攪拌2個(gè)小時(shí)。這時(shí)將溶液冷卻到0℃，并將pH調(diào)整到9.5。用EtOAc(1X,50毫升)洗滌該堿性溶液。接著將水相(0℃)調(diào)節(jié)到pH=2.5(2NHCl)，并用EtOAc(3X,50毫升)提取、干燥(MgSO4)，并蒸發(fā)以得到1.07克純產(chǎn)品。
(d)Moc-Ala-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe往0.500克(1.22毫摩爾)Cbz-Gly-Ala-亮氨酸甲酯在10毫升MeOH中的溶液中加入0.100克10％的Pd/C。將該溶液在0.600毫升4.0MHCl/二噁烷存在情況下(在球形瓶的壓力下)氫化1個(gè)小時(shí)，通過硅藻土過濾并蒸發(fā)。將殘留物懸浮在CH2Cl2中，加入0.342毫升(2.45毫摩爾)TEA，接著加入0.359克(1.22毫摩爾)Moc-Ala-Phe-OH和0.219毫升(1.34毫摩爾)DEPC。攪拌一夜之后，蒸發(fā)溶劑，將殘留物分配在EtOAc和1NHCl中，并連續(xù)用飽和NaHCO3和NaCl洗滌。干燥，蒸發(fā)和柱層析生成0.450克純產(chǎn)品。
(e)Moc-Ala-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇通過在4毫升乙醇和2毫升THF的混合物中溶解0.182克(1.64毫摩爾)CaCl2制備一種溶液。將該混合物冷卻到-15℃，并加入0.450克(0.820毫摩爾)Moc-Ala-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe，接著加入0.124克(3.28毫摩爾)NaBH4。將反應(yīng)物攪拌2個(gè)小時(shí)，并用10毫升1NHCl驟冷。蒸發(fā)溶劑，將剩余的含水層用EtOAc分配。接著用飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌有機(jī)相。干燥(MgSO4)，蒸發(fā)和色譜得到0.256克純產(chǎn)物。
(f)Moc-Ala-Phe-Gly-Ala-LeuH通過將0.623克(1.47毫摩爾)Dess-Martin periodinane加入到1.8升CH2Cl2中，接著攪拌10分鐘制備成一種溶液。接著將該溶液冷卻到0℃，一次加入0.256克(0.490毫摩爾)EtOC-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇。反應(yīng)持續(xù)2個(gè)小時(shí)并傾入2.55克(10.47毫摩爾)Na2S2O3在30毫升飽和NaHCO3中的溶液中。攪拌10分鐘后，用EtOAc(2X,50毫升)提取該混合物。將合并的提取物干燥(MgSO4)，蒸發(fā)，在二氧化硅上層析獲得0.125克純產(chǎn)物。
合成實(shí)施例2合成三肽醛EtOC-Phe-Gly-Ala-LeuH(a)Ala-Leu-OMe.HCl往450克(2.20摩爾)溶解在4.5LMeOH中并冷卻到0℃中的溶液中滴加178.6毫升(4.95摩爾)亞硫酰氯。在室溫下將該溶液攪拌一夜，并蒸發(fā)至干燥，產(chǎn)生543克(產(chǎn)率為97.1％)所需產(chǎn)物。
(b)EtOC-Phe-Gly-OH往450克(2.03毫升)Phe-Gly溶解在2026毫升1NNaOH中并冷卻到0℃的溶液中滴加氯甲酸甲酯(3.1毫升，40.0毫摩爾)。同時(shí)，在獨(dú)立的加料漏斗中，另外加入2026毫升1NNaOH，使pH保持在9.0～9.5之間。加完之后，將反應(yīng)物在0℃攪拌30分鐘，在室溫下攪拌2小時(shí)。這時(shí)，將溶液冷卻到0℃，將pH調(diào)整到9.5。用EtOAc(1X,4L)洗滌。再將水相(0℃)調(diào)節(jié)到pH=2.5(2N,HCl)并用EtOAc(3X,8L)提取，干燥(MgSO4)，過濾，并去除溶劑，得到546克(產(chǎn)率91.3％)純產(chǎn)物。
(c)EtOC-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe往470克(1.86摩爾)EtOC-Phe-Gly-OH和546克(1.86摩爾)Ala-Leu-OMe.HCl在8升CH2Cl2的溶液中加入570毫升(4.09摩爾)TEA，接著加入310.4毫升(2.046摩爾)DEPC。將溶液攪拌一夜之后，將溶液蒸發(fā)，并用EtOAc(4升)替代。連續(xù)用2升2NHCl、飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌該溶液。接著將有機(jī)相干燥(MgSO4)、過濾并蒸發(fā)，得到916克(產(chǎn)率93％)的所需產(chǎn)物。
(d)EtOC-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇往45.10克(0.406摩爾)CaCl2的溶液中加入1升乙醇和1升THF100克(0.203摩爾)EtOC-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe，并將混合物冷卻到-15℃。往該溶液中小心地加入30.7克(0.812毫摩爾)NaBH4，接著攪拌2個(gè)小時(shí)。然后將反應(yīng)用100毫升0.1NHCl驟冷。將該溶液轉(zhuǎn)移到4升1NHCl中并用EtOAc(3X,2.75升)提取。用4升飽和NaHCO3洗滌合并EtOAc層，干燥(MgSO4)和蒸發(fā)。用醚(4升)研制(兩次)，生成69.2克(產(chǎn)率73.4％)產(chǎn)物。
(e)EtOC-Phe-Gly-Ala-LeuH通過將165.4克(0.39摩爾)Dess-Martin perioninane加入到1.8升CH2Cl2中，接著攪拌10分鐘制備一種溶液。接著將該溶液冷卻到0℃并一次加入60克(0.13摩爾)EtOC-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇。將反應(yīng)持續(xù)105分鐘并傾入到由6升水、393克NaHCO3和431.7克(1.74摩爾)Na2S2O3構(gòu)成的溶液中。攪拌10分鐘之后，進(jìn)行相分離，完成用CH2Cl2的另外2次提取(每次1.5升)。干燥(MgSO4)合并的提取物，蒸發(fā)，并(2X,1L)醚研制，產(chǎn)生51.7克(產(chǎn)率86.2％)產(chǎn)物。
合成實(shí)施例3合成二肽醛Moc-Gly-Ala-LeuH(a)Ala-Leu-OMe.HCl往將3.0克(14.83毫摩爾)Ala-Leu-OH溶解在50毫升MeOH中并冷卻到0℃的溶液中滴加2.43毫升(33.36毫摩爾)亞硫酰氯。在室溫下攪拌該溶液一夜并蒸發(fā)至干燥，生成定量產(chǎn)率的所需產(chǎn)物。
(b)Cbz-Gly-Ala-亮氨酸甲基酯往0.414克(1.98毫摩爾)Cbz-Gly-OH和0.500克(1.98毫摩爾)Ala-Leu-OMe.HCl在CH2Cl2中的溶液中加入0.607毫升TEA，接著立即加入0.355毫升DEPC。將該溶液攪拌一夜并蒸發(fā)。將殘留物分配在EtOAc和1NHCl之間，用飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，生成650毫克純產(chǎn)物。
(c)Moc-Gly-Ala-亮氨酸甲基酯往2.0克(4.90毫摩爾)Cbz-Gly-Ala-亮氨酸甲基酯溶解在20毫升MeOH中的溶液中加入0.200克10％Pd/C。在將反應(yīng)物充分放氣并通過硅藻土過濾去除催化劑之后，在存在2.45毫升(9.81毫摩爾)4.0MHCl/二噁烷的情況下氫化2個(gè)小時(shí)。蒸發(fā)MeOH，生成1.45克純產(chǎn)物，它懸浮在45毫升CH2Cl2中并冷卻到0℃。往該溶液中加入1.45毫升(3.25毫摩爾)TEA，接著加入0.362毫升氯甲酸甲酯。攪拌一夜之后，蒸發(fā)CH2Cl2，將殘留物分配在EtOAc和1NHCl之間。分離有機(jī)相并用NaHCO3和NaCl洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)，并用色譜提純，生成0.820克所需產(chǎn)物。
(d)Moc-Gly-Ala-亮氨酸醇往0.168克(1.51毫摩爾)CaCl2在25毫升乙醇和15毫升THF的溶液中加入0.250克Moc-Gly-Ala-亮氨酸甲酯。將該溶液冷卻到-15℃并一次加入0.114克(3.02毫摩爾)NaBH4。將反應(yīng)物攪拌2個(gè)小時(shí)之后，用20毫升1NHCl驟冷，在rotovape上濃縮，并用EtOAc(2X,50毫升)提取。用飽和NaHCO3和NaCl洗滌合并的提取物，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。在二氧化硅上提純，生成0.167克純產(chǎn)物。
(e)Moc-Gly-Ala-LeuH溶液是通過將0.418(0.989毫摩爾)Dess-Martin periodinane加入到5毫升CH2Cl2中，接著攪拌10分鐘制備的。接著，一次加入0.100克(0.330毫摩爾)Moc-Gly-Ala-亮氨酸醇，將反應(yīng)物攪拌2個(gè)小時(shí)，并傾入25毫升含有1.72克(6.93毫摩爾)Na2S2O3的飽和NaHCO3溶液中。再攪拌10分鐘之后，將溶液用EtOAc(3X,50毫升)提取，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。在二氧化硅上的色譜生成0.016克所需產(chǎn)物。
合成實(shí)施例4合成N-(甲基磺?；?-Phe-Gly-Ala-LeuH(a)N-Ms-Phe-Gly-OH在獨(dú)立的加料漏斗中往2.0克(9.0毫摩爾)Phe-Gly-OH溶解在9毫升1NNaOH中并冷卻到0℃的溶液中同時(shí)加入0.766毫升(9.9毫摩爾)甲磺酰氯和9毫升1NNaOH。加完之后，將反應(yīng)物在0℃攪拌15分鐘，在室溫?cái)嚢?個(gè)小時(shí)。這時(shí)，將溶液冷卻到0℃,pH調(diào)整到9.5，周EtOAc(1X,50毫升)洗滌。將水相(0℃)調(diào)整到pH=2.5(2NHCl)，并用EtOAc(3X,50毫升)提取，干燥(MgSO4)、過濾并去除溶劑，生成2.0克純產(chǎn)物。
(b)N-Ms-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇溶液是通過將0.500克(1.67毫摩爾)N-Ms-Phe-Gly-OH溶解在15毫升THF中，冷卻到-15℃并加入0.366毫升(3.33毫摩爾)NMM，接著加入0.216毫升(1.67毫摩爾)氯甲酸異丁酯制備的。將該溶液攪拌5分鐘并將0.374克(1.67毫摩爾)Ala-亮氨酸醇。HCl加入到10毫升THF和微量DMF的混合物中。在0℃持續(xù)攪拌15分鐘，在室溫持續(xù)攪拌2個(gè)小時(shí)。用5毫升1NHCl驟冷該溶液，用EtOAc(3X,50毫升)提取，用飽和NaHCO3和飽和NaCl洗滌合并的提取物。接著干燥(MgSO4)生成的有機(jī)相，過濾，蒸發(fā)和在二氧化硅上進(jìn)行層析，生成0.260克所需的物質(zhì)。
(c)N-Ms-Phe-Gly-Ala-LeuH溶液是通過往5毫升CH2Cl2中加入0.337克(0.798毫摩爾)Dess-Martin periodinane并攪拌10分鐘來制備。往該溶液中一次加入0.125克(0.266毫摩爾)N-Ms-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇。持續(xù)反應(yīng)直至TLC表明轉(zhuǎn)化完全，這時(shí)，將溶液傾入25毫升含有1.8克(5.586毫摩爾)Na2S2O3的飽和NaHCO3中。攪拌10分鐘后，用EtOAc(3X,50毫升)提取該混合物。干燥(MgSO4)合并的提取物，蒸發(fā)，二氧化硅色譜生成0.048克產(chǎn)物。
合成實(shí)施例5合成醛蛋白酶抑制劑將Moc-Leu-OH-L-亮氨酸(5.0克，38.2毫摩爾)溶解在38毫升1NNaOH中并冷卻到0℃。滴加氯甲酸甲酯(3.1毫升，40.0毫摩爾)，同時(shí)，在獨(dú)立的加料漏斗中加入1NNaOH，使pH保持在9.0～9.5。加完并且pH穩(wěn)定在9.0-9.5后，用200毫升EtOAc洗滌該溶液，再將水相酸化至pH=2。用EtOAc(2X,100毫升)提取該混合物，干燥(MgSO4)，過濾并去除溶劑，生成7.15克純產(chǎn)物。
Moc-Leu-亮氨酸醇-往3.5克(18.52毫摩爾)Moc-Leu-OH在100毫升THF中并冷卻到-15℃的溶液中加入2.04毫升(18.52毫摩爾)N-甲基嗎啉，接著立即加入2.4毫升(18.52毫摩爾)氯甲酸異丁酯。攪拌10分鐘之后，在25毫升THF中加入2.37毫升(18.52毫摩爾)亮氨酸醇，將反應(yīng)物在-15℃攪拌0.5個(gè)小時(shí)，在室溫下攪拌1個(gè)小時(shí)。接著用100毫升水稀釋該混合物并蒸發(fā)THF。將剩余的水相分配在EtOAc和1NHCl之間，用NaHCO3洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，生成5.33克純產(chǎn)物。
Moc-Leu-LeuH-制備含有4.4克(10.41毫摩爾)懸浮在10毫升CH2Cl2中的Dess-Martin periodinane的溶液并攪拌10分鐘。往該溶液中加入1.0克(3.47毫摩爾)Moc-Leu-亮氨酸醇并將該溶液在室溫下攪拌2個(gè)小時(shí)，接著傾入100毫升含有18克(72.87毫摩爾)Na2S2O3的飽和NaHCO3中。將該溶液攪拌10分鐘并用EtOAc(2X,125毫升)提取，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)溶劑。用二氧化硅層析生成0.550克純產(chǎn)物。
合成實(shí)施例6按照下面的步驟合成其它肽醛。由提供商處購(gòu)買一些中間產(chǎn)物，這可以在下面的步驟中看出。按照Martin,J.Org.Chem.,1983,48,4155的步驟合成Dess-Martin periodinane。
Ⅰ.Z-Gly-Ala-Leu-OMe-往Z-Gly-Ala-OH(20.0克，0.071M)和Leu-OMe.HCl(12.9克，0.071M)在250毫升二氯甲烷中的溶液中在10分鐘內(nèi)滴加21.9毫升(0.157M)三乙基胺(TEA)。這次加入之后加入11.9毫升(0.078M)二乙基氰基膦酸酯(DECP)。將混合物攪拌一夜并去除溶劑。將殘留物溶解在乙酸乙酯中，用1NHCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。用MgSO4干燥該溶液，過濾并去除溶劑。用TLC回收29.0克單一的產(chǎn)物。13C NMR(CDCl3)15.93,18.60,21.77,22.69,24.72,40.80,44.20,48.70,50.87,52.13,65.28,66.84,127.92,128.00,128.41,136.36,156.76,,169.31,172.58,173.24。
Ⅱ.Moc-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe-將Z-Gly-Ala-Leu-OMe(29.0克，0.071M)溶解在300毫升MeOH和將35毫升4.0MHCl溶解在二噁烷中。往該溶劑混合物中分批加入5.8克10％Pd/C。將懸浮液用吸氣器脫氣并通過球形瓶通入H2。將懸浮液保持在H2的正壓下并攪拌一夜。將懸浮液通過硅藻土和燒結(jié)玻璃漏斗過濾并用MeOH充分洗滌。去除溶劑并用醚來研制殘留物。過濾懸浮液，并在真空下干燥濾餅?；厥?0.2克非白色粉末。將粗產(chǎn)品和Moc-Phe-OH(15.3克，0.068M)溶解在500毫升CH2Cl2，并滴加29.9毫升TEA(0.143M)，再滴加11.7毫升(0.072M)DECP。將混合物攪拌一夜并去除溶劑。將殘留物溶解在EtOAc中，用1NHCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)有機(jī)相，過濾，去除溶劑，生成21.3克產(chǎn)物。13C NMR(CDCl3)16.66,16.83,20.01,22.46,23.41,25.40,40.11,41.72,43.75,49.39,51.37,52.87,56.42,65.92,77.39,77.55,77.81,78.24,127.42,128.96,129.19,130.09,137.41,157.62,169.00,172.63,173.24,174.00。
Ⅲ.Moc-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇-將Moc-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe(21.3克，44.5毫摩爾)溶解在400毫升EtOH和250毫升THF的混合物中。將溶液冷卻到0℃，并加入9.88克(89.0毫摩爾)CaCl2。5分鐘后均化懸浮液，并在5分鐘內(nèi)分批加入6.73克(178.0毫摩爾)NaBH4。將溶液在0℃攪拌2個(gè)小時(shí)，并用1NHCl小心地驟冷反應(yīng)物。在真空下去除EtOH和THF，用500毫升EtOAc提取剩余的水相混合物。用飽和NaHCO3、鹽水洗滌有機(jī)相，并用MgSO4干燥有機(jī)相。過濾并去除溶劑，生成20.0克非白色晶體物質(zhì)。經(jīng)二氧化硅層析(3.5％MeOH/CH2Cl2)生成13.0克純產(chǎn)物。Rf=0.3(10％MeOH/CH2CL2),13C NMR(CDCl3)17.50,22.23,23.12,24.84,37.22,39.76,43.96,49.88,50.93,52.48,58.22,65.27,98.46,98.54,127.04,128.68,129.10,136.62,157.85,170.71,173.85,174.45。
Ⅳ.Moc-Phe-Gly-Ala-Leu-H-將29.9克(70.7毫摩爾)DESS-Martinperiodinane懸浮在500毫升CH2Cl2中并攪拌10分鐘。將Moc-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇(10.6克，23.5毫摩爾)溶解在100毫升CH2Cl2中并以中速加入到periodinane懸浮液中。攪拌混合物1個(gè)小時(shí)并傾入150毫升含有123克Na2S2O3的NaHCO3中。將混合物攪拌15分鐘并用EtOAc提取。干燥并過濾有機(jī)相，接著去除溶劑。經(jīng)二氧化硅層析(3.5％MeOH/CH2Cl2)生成5.1克純白固體，它是甲氧基半縮醛和醛的混合物。13C NMR(CDCl3,CD3OD)17.62,17.94,21.53,21.71,22.99,23.30,23.39,24.54,37.05,37.70,37.92,38.24,42.87,49.83,51.79,52.14,52.40,56.75,57.19,98.40,99.18,127.00,128.60,129.06,136.44,157.27,169.19,169.67,172.73,173.40,200.43。
Ⅴ.Moc-Phe-OH-將L-苯基丙氨酸(5.0克，30.2毫摩爾)溶解在30毫升1NNaOH并冷卻到0℃。滴加氯甲酸甲酯(2.53毫升，31.8毫摩爾)，同時(shí)在獨(dú)立的加料漏斗中加入30毫升1NNaOH。加完之后，用200毫升EtOAc洗滌溶液并酸化水相至pH=2。用EtOAc(2X,100毫升)提取混合物，干燥(MgSO4)，過濾并去除溶劑，生成6.0克產(chǎn)物。13CNMR(CDCl3)37.75,52.57,54.64,128.63,129.35,135.74,156.77,175.76。
Ⅵ.Mac-Phe-OH，往1.00克(2.34毫摩爾)Phe-OBn.PTSA在Et2O的溶液中在室溫下加入0.36毫升(2.57毫摩爾)TEA。接著加入10毫升MeOH，再將0.14毫升(2.34毫摩爾)異氰酸甲酯滴加到4毫升Et2O中。將反應(yīng)混合物傾入50毫升水中并進(jìn)行相分離。用MgSO4干燥有機(jī)相，過濾并去除溶劑，生成0.66克產(chǎn)物(產(chǎn)率96％)。13C NMR(CDCl3)27.05,38.47,53.45,54.64,65.90,127.43,127.85,128.48,129.28,130.27,135.23,136.22,158.17,173.08。往粗產(chǎn)物(2.11毫摩爾)在25毫升MeOH的溶液中加入0.120克Pd/C并使懸浮液脫氣。在H2正壓下用球形瓶攪拌懸浮液1.5個(gè)小時(shí)。通過硅藻土過濾懸浮液，用MeOH洗滌濾餅。去除溶劑，生成0.430克產(chǎn)物。13CNMR26.50,37.92,54.28,126.69,128.28,129.28,136.65,159.36,175.33。
Ⅶ.Mac-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇-往0.200克Mac-Phe-OH(0.900毫摩爾)和0.253克Gly-Ala-Leu-OMe.HCl(0.818毫摩爾，按照上述化合物Ⅱ的步驟通過氫化Ⅰ生成的)在15毫升DMF中的溶液中加入0.250毫升TEA(1.80毫摩爾)，接著0.147毫升DECP(0.900毫摩爾)。將混合物攪拌一夜并去除溶劑。將殘留物溶解在EtOAc中并連續(xù)用0.3NHCl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將溶液干燥，過濾并去除溶劑，生成0.300克產(chǎn)品。將粗產(chǎn)物(0.628毫摩爾)溶解在17毫升EtOH中并冷卻至0℃。往該溶液中一次加入0.095克NaBH4。45分鐘之后，用水驟冷溶液并用EtOAc提取。用MgSO4干燥有機(jī)相，過濾并去除溶劑。在4％MeOH/CH2Cl2上的層析生成0.200克純產(chǎn)物。13C NMR(CD3OD)16.84,21.05,22.60,24.51,25.66,37.41,39.73,42.67,49.65,56.63,64.33,126.63,128.32,128.96,137.12,160.01,170.45,173.60,175.03。
Ⅷ.Mac-Phe-Gly-Ala-Leu-H-往Dess-Martinperiodinane(0.565克，1.33毫摩爾)在15毫升CH2Cl2中的懸浮液中加入Mac-Phe-Gly-Ala-亮氨酸醇(0.200克，0.445毫摩爾)在CH2Cl2中的懸浮物，并將生成的懸浮液攪拌0.5個(gè)小時(shí)。將混合物傾入含有2.32克Na2S2O3的飽和NaHCO3中，并將溶液攪拌10分鐘，接著用EtOAc提取。用MgSO4干燥有機(jī)相，過濾并去除溶劑。將殘留物進(jìn)行二氧化硅層析，生成0.081克產(chǎn)物。13C NMR(10％CD3OD在CDCl3中)17.18,17.43,21.35,21.55,23.26,23.34,24.40,24.47,26.36,26.60,37.25,37.38,38.60,42.86,42.97,51.77,51.93,54.94,56.75,57.00,98.7,99.32,126.87,128.49,128.91,136.51,159.53,159.55,169.93,170.39,173.63,173。85,174.70。
Cbz=羧苯甲氧Gly=甘氨酸Ala=丙氨酸Leu=亮氨酸Phe=苯丙氨酸OMe=甲基酯TEA=三乙基胺DECP=二乙基氰基膦酸酯TLC=薄層色譜MeOH=甲醇Pd/C=活性炭載鈀EtOH=乙醇THF=四氫呋喃Mac=甲基氨基羰基
Moc=甲氧基羰基Etoc=乙氧基羰基Ms=甲磺酰基蛋白水解酶-本發(fā)明液體洗滌劑組合物的另一種主要組分是活性蛋白水解酶。也包括蛋白水解酶的混合物。蛋白水解酶可以是動(dòng)物的、植物的或者微生物(優(yōu)選)源的。用于本發(fā)明洗滌劑組合物的蛋白酶包括(但是不限于)胰蛋白酶、枯草溶菌素、糜蛋白酶和彈性類蛋白酶。優(yōu)選用于本發(fā)明的是枯草溶菌素類蛋白水解酶。特別優(yōu)選的是由Bacillus subtilis和/或Bacillus licheniformis制備的細(xì)菌絲氨酸蛋白水解酶。蛋白酶一般在這類液體洗滌劑組合物中的含量要足夠使每克組合物具有0.005到0.1Anson unit(AU)的活性。
合適的蛋白水解酶包括Novo Industri A/S Alcalase(優(yōu)選的)、Esperase、Savinase(Copenhagen,Denmark),Gist-brocades’Maxatase、Maxacal和Maxapem15(蛋白工程Maxacal)(Delft,Netherlands)，和枯草溶菌素BPN和BPN’(優(yōu)選的)，它們是可工業(yè)上提供的。優(yōu)選的蛋白水解酶也可以是改性的細(xì)菌絲氨酸蛋白酶，例如由Genencor International,Inc.(SanFrancisco,California)生產(chǎn)，記載在歐洲專利251446,1987年4月28日(特別是17、24和98頁)，并且它被稱為“蛋白酶B”，和US5030378，Venegas,1991年7月9日，它是指改性的細(xì)菌絲氨酸蛋白水解酶(Genencor International)，它在本發(fā)明中被稱為“蛋白酶A”(與BPN’相同)。特別是參見US5030378的第2和3欄的完整說明，包括蛋白酶A和其變異體的氨基酸序列。優(yōu)選的蛋白水解酶選自Alcalase(NovoIndustri A/S)、BPN’、蛋白酶A和蛋白酶B(Genencor)，和它們的混合物。蛋白酶B最為優(yōu)選。
另一種優(yōu)選的被稱“蛋白酶D”的蛋白酶是指具有自然界未發(fā)現(xiàn)的氨基酸序列的羰基水解酶變異體，它是由前體羰基水解酶通過在所說羰基水解酶上等同于+76位置的位置，還優(yōu)選結(jié)合一個(gè)或幾個(gè)等同于選自根據(jù)解淀粉芽孢桿菌枯草溶菌素序列編排的+99、+101、+103、+104、+107、+123、+27、+105、+109、+126、+128、+135、+156、+166、+195、+197、+204、+206、+210、+216、+217、+218、+222、+260、+265和/或+274的氨基酸殘基位置用不同的氨基酸代替多個(gè)氨基酸殘基來制備，如Genencor International在1995年4月20日公開的WO95/10615中所述。
有效的蛋白酶還記載在下面的PCT公開中WO95/30010,1995年11月9日，The Procter & Gamble Company；WO95/30011,1995年11月9日，The Procter & Gamble Company和WO95/29979,1995年11月9日，The Procter & Gamble Company中。
鈣-任何水溶性鈣鹽都可以用作鈣離子源，包括醋酸鈣、甲酸鈣、二甲苯磺酸鈣和丙酸鈣。二價(jià)離子，例如鋅離子和鎂離子可以代替全部或者部分鈣離子。因此，在本發(fā)明的液體洗滌劑組合物中，鈣離子源可以部分地用另一種二價(jià)離子源來取代。
可用于本發(fā)明的鈣是酶可接受的。因此，要求保護(hù)的組合物基本上不含多價(jià)螯合劑，例如能夠形成可溶于組合物的鈣配合物的多元酸。但是，可以采用少量的多價(jià)螯合劑，如多元酸或者多元酸的混合物。酶可接受的鈣被定義為可有效用于酶組分的鈣離子的量。從實(shí)際出發(fā)，酶可接受的鈣是在不含有任何貯存螯合劑的組合物中可溶解的鈣，如螯合劑與鈣的配位平衡常數(shù)在20℃等于或者大于1.5。
硼酸-本發(fā)明的組合物含有0.25％到約10％，優(yōu)選約0.5％到約5％，更優(yōu)選約0.75％到約3％重量的硼酸或者能夠在組合物中形成硼酸的化合物(基于硼酸計(jì)算)。優(yōu)選硼酸，盡管其它化合物，如氧化硼、硼砂和其它堿金屬硼酸鹽(如原-、偏-、焦硼酸鈉、五硼酸鈉)也是適用的。取代的硼酸(如苯基硼酸、丁烷硼酸和對(duì)溴苯基硼酸)可以用來取代硼酸。
本發(fā)明的組合物也可以含有含有碳、氫和氧原子的多元醇，特別是二醇。它們優(yōu)選地含有約2到約6個(gè)羥基。實(shí)例包括丙二醇(特別是1,2-丙二醇，它是優(yōu)選的)、乙二醇、甘油、山梨醇、甘露糖醇、葡萄糖和它們的混合物。多元醇一般的含量為組合物的約1％到約15％，優(yōu)選約1.5％到約10％，更優(yōu)選約2％到約7％重量。
洗滌劑表面活性劑-有效量，一般是約1到95，優(yōu)選約8到70重量％洗滌劑表面活性劑也是本發(fā)明的另一個(gè)重要的組分。洗滌劑表面活性劑可以選自陰離子、非離子、陽離子、兩性、兩性離子表面活性劑和它們的混合物。通過選擇洗滌劑表面活性劑的種類和量，連同本發(fā)明公開的其它輔助組分，可以配制本發(fā)明的洗滌劑組合物以用于洗衣或者其它不同的清潔用途，特別是包括洗盤。根據(jù)特別是所需的最終用途，可以在寬范圍內(nèi)選擇所用的特別表面活性劑。
本發(fā)明的效果在含有對(duì)酶不利，例如某些洗滌助劑和表面活性劑的組分的組合物中是特別明顯的。它們包括(但是不限于)陰離子表面活性劑，例如烷基醚硫酸鹽線性烷基苯磺酸鹽、烷基硫酸鹽等。合適的表面活性劑在下面描述。
陰離子表面活性劑-一類可以采用的陰離子表面活性劑包括磺酸烷基酯鹽。由于它們可以由可重復(fù)使用的、非石油的原料制備而是所希望的。磺酸烷基酯鹽表面活性劑組分的制備可以按照公開在技術(shù)文獻(xiàn)中的已知方法進(jìn)行。例如，C8-C20羧酸的線性酯可以采用SO3氣體按照“The Journal of the American Oil Chemists Society”,52(1975)，pp.323-329的方法進(jìn)行磺化。合適的原料包括由如牛脂、棕櫚和椰子油等生成的天然脂肪物質(zhì)。
優(yōu)選的磺酸烷基酯鹽表面活性劑，特別是用于洗衣用途的，含有具有下面結(jié)構(gòu)通式的磺酸烷基酯鹽表面活性劑

其中R3是C8-C20烴基，優(yōu)選烷基，或者它們的結(jié)合，R4是C1-C6烴基，優(yōu)選烷基，或者它們的結(jié)合，M是可溶性成鹽陽離子。合適的鹽包括金屬鹽，如鈉、鉀和鋰鹽，和取代的或者未取代的銨鹽，如甲基-、二甲基-、三甲基-和季銨陽離子，如四甲基銨和二甲基基啶鎓，以及由醇胺，如一乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺產(chǎn)生的陽離子。優(yōu)選地是R3是C10-C16烷基，R4是甲基、乙基或者異丙基。特別優(yōu)選地是磺酸甲基酯鹽，其中R3是C14-C16烷基。
烷基硫酸鹽表面活性劑是另一類可用于本發(fā)明的重要的陰離子表面活性劑。除了在與多羥基脂肪酸酰胺(參見下文)結(jié)合使用時(shí)具有優(yōu)良的全面的清潔能力，包括在各種范圍的溫度、洗滌濃度和洗滌時(shí)間提供良好的清潔脂/油的效果，還可獲得烷基硫酸鹽的溶解，以及在液體洗滌制劑中的改進(jìn)的配制能力，指下面通式的水溶性鹽或者酸ROSO3M，其中R優(yōu)選是C10-C24烴基，優(yōu)選帶有C10-C20烷基部分的烷基或者羥烷基，更優(yōu)選C12-C18烷基或者羥烷基，M是H或者陽離子，如堿金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰)、取代的或未取代的銨陽離子，如甲基、二甲基-和三甲基銨和季銨陽離子，如四甲基銨和二甲基哌啶鎓和由鏈烷醇胺，如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺和它們的混合物等生成的陽離子，等等。通常，C12-16的烷基鏈優(yōu)選較低的洗滌溫度(如低于約50℃)，C16-C18烷基鏈優(yōu)選較高的洗滌溫度(如高于約50℃)。
烷基烷氧基化的硫酸鹽表面活性劑是另一類有效的陰離子表面活性劑。這些表面活性劑是通式一般為RO(A)mSO3M的水溶性鹽或者酸，通式中的R是未取代的C10-C24烷基或者含有C10-C24烷基部分的羥烷基，優(yōu)選C12-C20烷基或者羥烷基，更優(yōu)選C12-C18烷基或者羥烷基，A是乙氧基或者丙氧基單元，m大于零，一般在約0.5到6之間，更優(yōu)選約0.5到約3之間，M是H或者陽離子，它們可以是例如金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂等)、銨或者取代的銨陽離子。烷基乙氧基化的硫酸鹽和烷基丙氧基化的硫酸鹽在本發(fā)明中是可考慮的。取代的銨陽離子的具體例子包括甲基-、二甲基-、三甲基-銨和季銨陽離子，如四甲基銨、二甲基哌啶鎓和由鏈烷醇銨，如一乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺生成的陽離子，以及它們的混合物。代表性的表面活性劑是C12-C18烷基聚乙氧化物(1.0)硫酸鹽、C12-C18烷基聚乙氧化物(2.25)硫酸鹽、C12-C18烷基聚乙氧化物(3.0)硫酸鹽和C12-C18烷基聚乙氧基化物(4.0)硫酸鹽，其中M通常選自鈉和鉀。
其它陰離子表面活性劑-可用于洗滌目的的其它陰離子表面活性劑也可以包含在本文中的組合物中。它們包括皂、C9-C20線狀烷基苯磺酸鹽、C8-C22伯-或仲鏈烷磺酸鹽、C8-C24烯屬磺酸酯、通過磺化堿土金屬檸檬酸鹽的熱解產(chǎn)物制備的磺化的聚羧酸(如記載在英國(guó)專利1082179中)、烷基甘油磺酸鹽、脂肪?；视突撬猁}、脂肪油基甘油硫酸鹽、烷基苯酚氧化乙烯醚硫酸鹽、石蠟磺酸鹽、烷基磷酸鹽、羥乙磺酸鹽(isothionates)，如?；u乙磺酸鹽、N-?；；撬猁}、甲基牛磺酰胺(tauride)的脂肪酸酰胺、氨基琥珀酸烷基酯和磺基琥珀酸烷基酯、磺基琥珀酸單酯(特別是飽和和不飽和的C12-C18一酯)、磺基琥珀酸的二酯(特別是飽和和不飽和的C6-C14二酯)、N-?；“匪猁}、烷基聚糖的硫酸鹽，例如烷基聚苷的硫酸鹽(非離子未硫酸化的化合物在下面描述)、支鏈化的伯烷基硫酸鹽、烷基聚乙氧基羧酸鹽，例如通式為RO(CH2CH2O)kCH2COO-M+，其中R是C8-C22烷基，k是從0到10的整數(shù)，M是可溶性的成鹽陽離子，用羥基乙磺酸酯化和用氫氧化鈉中和的脂肪酸的鹽(例如包括鈉鹽、鉀鹽、銨鹽和取代的銨鹽，如一、二和三乙醇胺鹽)。樹脂酸和氫化的樹脂酸也是適用的，例如松香、氫化松香，和存在于妥爾油中或者由其制備的樹脂酸和氫化的樹脂酸。其它的例子在Surface Active Agents and Detergents(Schwartz、Perry和Berch的第Ⅰ和Ⅱ卷)中給出。這些類型的表面活性劑通常公開在US3929678，1975年12月30日，Laughlin等的第23欄、58行到第29欄23行(其在此結(jié)合作為參考)。
非離子洗滌表面活性劑-合適的非離子洗滌劑表面活性劑公開在US3929678,Laughlin等，1975年12月30日的第13欄第14行到第16欄第6行，其在此結(jié)合作為參考。代表性的非限定性的有效的非離子表面活性劑如下。
烷基酚的聚環(huán)氧乙烷、聚氧化丙烯和聚氧化丁烯的縮合物。通常，聚環(huán)氧乙烷縮合物是優(yōu)選的。這些化合物包括含有含約6到約12個(gè)碳原子的直鏈或者支鏈化鏈構(gòu)型的烷基的烷基酚與烯化氧的縮合產(chǎn)物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，乙烯化氧以等于每摩爾烷基酚約5到約25摩爾環(huán)氧乙烷的量存在。工業(yè)上可提供的這類非離子表面活性劑包括IgepalCO-630，由GAF Corporation出售；和TritonX-45、X-114、X-100和X-102，全部都由Rohm & Hass Company提供。這些化合物一般是指烷基酚烷氧化物(如烷基酚乙氧化物)。
脂肪醇與約1到約25摩爾的環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物。脂肪醇的烷基鏈可以是直鏈或者支鏈化的伯或者仲醇，并且通常含有約8到約22個(gè)碳原子。特別優(yōu)選地是帶有含約10到約20個(gè)碳原子的烷基的醇與每摩爾醇約2到約18摩爾的環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物。工業(yè)上提供的這類非離子表面活性劑的例子包括Tergitol15-S-9(C11-C15線性仲醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)、Tergitol24-L-6NMW(C12-C14伯醇與6摩爾環(huán)氧乙烷的分子量分布窄的縮合產(chǎn)物)，它們都是由Union Carbide Corporation提供；Neodol45-9(C14-C15線性醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)、Neodol23-6.5(C12-C13線性醇與6.5摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)、Neodol45-7(C14-C15線性醇與7摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)、Neodol45-4(C14-C15線性醇與4摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，由Shell ChemicalCompany提供，和KyroEOB(C13-C15線性醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，由The Procter & Gamble Company提供。這類非離子表面活性劑通常是指“烷基乙氧化物”。
通過氧化丙烯與丙二醇的縮合反應(yīng)生成的環(huán)氧乙烷與疏水堿的縮合產(chǎn)物。這些化合物的疏水部分優(yōu)選的分子量為約1500到約1800，并且不溶于水。往該疏水部分上加上聚氧乙烯部分有提高整個(gè)分子的水溶性的趨勢(shì)，并且產(chǎn)物的液體特征保持在聚氧乙烯含量在縮合產(chǎn)物總重量的約50％的程度，這相當(dāng)于與至多約40摩爾環(huán)氧乙烷進(jìn)行縮合。這類化合物的例子包括一些工業(yè)上提供的Pluronic表面活性劑，由BASF提供。
環(huán)氧乙烷與由氧化丙烯和亞乙基二胺的反應(yīng)生成的產(chǎn)物的縮合產(chǎn)物。這些產(chǎn)物的疏水部分包括亞乙基二胺和過量氧化丙烯的反應(yīng)產(chǎn)物，并且通常分子量為約2500到約3000。疏水部分與環(huán)氧乙烷縮合至縮合產(chǎn)物含有約40％到約80％重量的聚氧乙烯，并且分子量為約5000到約11000。這類非離子表面活性劑的例子包括一些工業(yè)上提供的Tetronic化合物，由BASF提供。
半極性非離子表面活性劑是一類特殊的非離子表面活性劑，包括水溶性氧化胺，其含有一部分含約10到約18個(gè)碳原子的烷基部分和2個(gè)選自含有約1到約3個(gè)碳原子的烷基和羥烷基的部分；水溶性氧化膦，含有一部分含有約10到約18個(gè)碳原子的烷基部分和2個(gè)選自含有約1到約3個(gè)碳原子的烷基和羥烷基的部分；和水溶性亞砜，含有一部分含有約10到約18個(gè)碳原子的烷基部分和2個(gè)選自含有約1到約3個(gè)碳原子的烷基和羥烷基部分。
半極性非離子洗滌劑表面活性劑包括具有下面通式的氧化胺表面活性劑

其中R3是含有約8到約22個(gè)碳原子的烷基、羥烷基或者烷基苯基或者它們的混合物；R4是含有約2到約3個(gè)碳原子的亞烷基或者羥基亞烷基或者它們的混合物；x是0到約3；R5是含有約1到約3個(gè)碳原子的烷基或者羥烷基或者是含有約1到約3的環(huán)氧乙烷基團(tuán)的聚環(huán)氧乙烷基團(tuán)。R5基團(tuán)可以相互連接，如通過氧原子或者氮原子形成一個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)。
這些氧化胺表面活性劑可特別包括C10-C18烷基二甲基氧化胺和C8-C12烷氧基乙基二羥基乙基氧化胺。
烷基聚糖，公開在U84565647,Llenado,1986年1月21日中，它帶有含約6到約30個(gè)碳原子，優(yōu)選約10到約16個(gè)碳原子的疏水基，和聚糖，如聚糖苷，含有約1.3到約10，優(yōu)選約1.3到約3，最優(yōu)選約1.3到約2.7個(gè)糖單元的親水基團(tuán)?？梢圆捎萌魏魏?或者6個(gè)碳原子的還原糖，如葡萄糖、半乳糖，并且半乳糖醇基部分可以代替葡糖基部分(任選地疏水基連接在2-、3-、4-等位置，從而生成與葡糖苷或者半乳糖苷不同的葡萄糖或者半乳糖)。內(nèi)糖鍵可以是例如在附加的糖單元的一個(gè)位置和前一個(gè)糖單元的2-、3-、4-和/或6-位置之間。
任選地并且是不太希望地可以有連接疏水部分和聚糖部分的聚烯化氧鏈。優(yōu)選的烯化氧是環(huán)氧乙烷。疏水基團(tuán)一般包括烷基，飽和的或者不飽和的，支鏈化的或者未支鏈化的，含有約8到約18，優(yōu)選約10到約16個(gè)碳原子。優(yōu)選地是烷基是直鏈飽和的烷基。烷基可以含有至多約3個(gè)羥基和/或聚烯化氧鏈可以含有至多約10，優(yōu)選少于5個(gè)烯化氧部分。合適的烷基聚糖是辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基和十八烷基、二-、三-、四-、五-和六葡糖苷、半乳糖苷、乳糖苷、葡萄糖、果糖苷、果糖和/或半乳糖。合適的混合物包括椰子烷基、二-、三-、四-和五葡糖苷和牛脂烷基四-、五-和六葡糖苷。
優(yōu)選的烷基聚糖苷的通式為R2O(CnH2nO)t(葡糖基)x其中R2選自烷基、烷基苯基、羥基烷基、羥基烷基苯基和它們的混合物，其中烷基含有約10到約18，優(yōu)選約12到約14個(gè)碳原子；n為2或3，優(yōu)選2；t為0到約10，優(yōu)選0；x為約1.3到約10，優(yōu)選約1.3到約3，最優(yōu)選約1.3到約2.7。該葡糖基優(yōu)選由葡萄糖生成。為了制備這些化合物，首先生成醇或者烷基聚乙氧基醇，再與葡萄糖或者葡萄糖的原料反應(yīng)生成葡糖苷(連接在1-位置)。接著附加的葡糖基單元可以連接在它們的1-位置和前面的葡糖基單元2-、3-、4-和/或6-位置，優(yōu)選主要是2-位置。
具有下面通式的脂肪酸酰胺表面活性劑

其中R6是含有約7到約21(優(yōu)選約9到約17)個(gè)碳原子的烷基，并且每個(gè)R7選自氫、C1-C4烷基、C1-C4羥烷基和-(C2H4O)xH，其中x為約1到約3。
優(yōu)選酰胺是C8-C20氨酰胺、一乙醇酰胺、二乙醇酰胺和異丙醇酰胺。
陽離子表面活性劑-陽離子洗滌表面活性劑也可以加入到本發(fā)明的組合物中。陽離子表面活性劑包括銨表面活性劑，如烷基二甲基鹵化銨和具有下面通式的表面活性劑[R2(OR3)y][R4(OR3)y]2R5N+X-其中R2是在烷基鏈上含有約8到約18個(gè)碳原子的烷基或者烷基芐基，R3選自-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH(CH2OH)-、-CH2CH2CH2-，和它們的混合物；R4選自C1-C4烷基、C1-C4羥烷基、芐基、通過連接兩個(gè)R4基團(tuán)形成環(huán)結(jié)構(gòu)、-CH2CHOHCHOHCOR6CHOH-CH2OH，其中R6是己糖或者分子量小于約1000的己糖聚合物，和當(dāng)y不是0時(shí)的氫；R5與R4相同或者是烷基鏈，其中R2加上R5的碳原子的總數(shù)不大于約18；y為0到約10，y值的總數(shù)為0到約15,x是任何相容的陰離子。
其它可用于本發(fā)明的陽離子表面活性劑還記載在US4228044,Cambre,1980年10月14日，其在此結(jié)合作為參考。
其它表面活性劑-本發(fā)明的洗滌劑組合物中可以加入兩性表面活性劑。這些表面活性劑一般被描述成仲胺或者叔胺的脂族衍生物，或者雜環(huán)仲胺或者叔胺的脂族衍生物，其中脂基可以是直鏈或者支鏈的。一個(gè)脂族取代基含有至少約8個(gè)碳原子，通常為8到約18個(gè)碳原子，并且至少一個(gè)含有陰離子水溶性基團(tuán)，如羧酸根、磺酸根、硫酸根。參見US3929678,laughlin等，1975年12月30日的第19欄，18-35行，例舉兩性表面活性劑。
在本發(fā)明的洗滌劑組合物中也可以加入兩性離子表面活性劑。這些表面活性劑一般被描述成仲胺和叔胺的衍生物、雜環(huán)仲胺和叔胺的衍生物或者季銨、季膦或者叔锍化合物衍生物。參見US3929678，laughlin等，1975年12月30日的第19欄38行到第22欄48行，例舉兩性離子表面活性劑。兩性和兩性離子表面活性劑通?？膳c一種或者幾種陰離子和/或非離子表面活性劑結(jié)合使用。
多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑-本發(fā)明的液體洗滌劑組合物還可含有增強(qiáng)酶重的多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑?！霸鰪?qiáng)酶”是指組合物的配方設(shè)計(jì)師可以選擇加入到組合物中的多羥基脂肪酸酰胺的量，它可改進(jìn)洗滌劑組合物的酶清潔效果。通常，對(duì)于酶的一般量，加入約1％重量的多羥基脂肪酸酰胺會(huì)提高酶的效能。
本發(fā)明的洗滌劑組合物將含有約1％重量的多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑，優(yōu)選約3％到約30％的多羥基脂肪酸酰胺。多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑組分含有具有下面結(jié)構(gòu)通式的化合物

其中R1是H、C1-C4烴基、2-羥基乙基、2-羥基丙基或者它們的混合物，優(yōu)選C1-C4烷基，更優(yōu)選C1或者C2烷基，最優(yōu)選C1烷基(即甲基)；和R2是C5-C31烴基，優(yōu)選直鏈C7-C19烷基或者鏈烯基，更優(yōu)選直鏈C9-C17烷基或者鏈烯基，最優(yōu)選直鏈C11-C15烷基或者鏈烯基或者它們的混合物；Z是多羥基烴基，它含有帶有至少3個(gè)直接連接在鏈上的羥基的線性烴基鏈，或者烷氧基化的衍生物(優(yōu)選乙氧基化或者丙氧基化的)。Z優(yōu)選由還原糖在還原胺化反應(yīng)中來制備；更優(yōu)選Z是糖醇基部分(glycityl)。合適的還原糖包括葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖、甘露糖和木糖。作為原料可以采用高右旋糖玉米糖漿、高左旋糖玉米糖漿和高麥芽糖玉米糖漿，和上面列出的各個(gè)糖一樣。這些玉米糖漿可以生成用于Z的糖組分的混合物?？梢哉J(rèn)為這絕不意味著排除其它合適的原料。Z更優(yōu)選選自-CH2(CHOH)nCH2OH、-CH(CH2OH)(CHOH)n-1CH2OH、-CH2(CHOH)2-(CHOR’)(CHOH)-CH2OH，和其烷氧基化的衍生物，n是從3到5的整數(shù)，包括3和5,R’是氫或者環(huán)狀或者脂肪單糖。最優(yōu)選的是糖醇基，其中n是4，特別是-CH2-(CHOH)4-CH2OH。
R’可以是例如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N-異丙基、N-丁基、N-2-羥基乙基或者N-2-羥基丙基。
R2-CO-N＜可以是例如椰子酰胺、硬脂酰胺、油酰胺、月桂酰胺、肉豆蔻酰胺、癸酰胺、棕櫚酸酰胺、牛脂酰胺等。
z可以是1-脫氧glucityl、2-脫氧fructityl、1-脫氧maltityl、1-脫氧lactityl、1-脫氧galactityl、1-脫氧mannityl、1-脫氧maltotriotityl等等。
制備多羥基脂肪酸酰胺的方法是本領(lǐng)域已知的。通常，它們可以通過烷基胺與還原糖在還原胺化反應(yīng)中反應(yīng)生成相應(yīng)的N-烷基多羥基胺，再使N-烷基多羥基胺與脂肪脂族酯或者甘油三酯在縮合反應(yīng)/胺化步驟反應(yīng)形成N-烷基、N-多羥基脂肪酸酰胺產(chǎn)物。用于制備含有多羥基脂肪酸酰胺的組合物的方法公開在例如GB809060,1959年2月18日，Thomas Hedley & Co.Ltd.,US2965576,1960年12月20日，E.R.Wilson和US2703798,Anthony M.Schwartz,1955年3月8日和US1985424,1934年12月25日，Piggott，它們均在此結(jié)合作為參考。
第二種酶-本發(fā)明的優(yōu)選組合物進(jìn)一步含有提高性能量的洗滌劑相容的第二種酶?！跋礈靹┫嗳荨笔侵概c液體洗滌劑組合物的其它組分，如洗滌劑表面活性劑和洗滌劑助劑相容。這些第二種酶優(yōu)選選自脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶和它們的混合物。術(shù)語“第二種酶”不包括上面公開的蛋白水解酶，這樣每個(gè)含有第二種酶的組合物含有至少兩種酶，包括至少一種蛋白水解酶。用在組合物中的第二種酶的量可根據(jù)酶的類型而改變。通常這些第二種酶的優(yōu)選用量是約0.0001到0.3，更優(yōu)選0.001到0.1重量％。可以采用同樣種類的酶的混合物(如脂肪酶)或者兩種或者多種(如纖維素酶和脂肪酶)。可以采用酶的提純體或者非提純體。
任何適用于液體洗滌劑組合物的脂肪水解酶都可用于這些組合物。適用于本發(fā)明的脂肪酶包括細(xì)菌或者真菌來源的。
合適的細(xì)菌脂肪酶包括由Pseudomonas群，如Pseudomonasstutzeri ATCC19.154微生物生成的那些，如公開在英國(guó)專利1372034中，其在此結(jié)合作為參考。合適的脂肪酶包括可與由微生物Pseudomonasfluorescens IAM1057生成的脂肪酶的抗體進(jìn)行陽性免疫交叉反應(yīng)的那些。這種脂肪酶和提純其的方法記載在日本專利申請(qǐng)53-20487，公開在1978年2月24日。這種脂肪酶可由Amano PharmaceuticalCo.Ltd.,Nagoya,Japan以商品名Lipase P“Amano”，在此是指“Amano-P”提供。這類脂肪酶可與Amano-P抗體采用按照Ouchterlony(Acta.Med.Scan.,133,76-79(1950))的標(biāo)準(zhǔn)和已知的免疫擴(kuò)散步驟進(jìn)行陽性免疫交叉反應(yīng)。這些脂肪酶和它們與Amano-P進(jìn)行免疫交叉反應(yīng)的方法記載在US4707291,Thom等，1987年11月17日中，其在此結(jié)合作為參考。代表性的例子是Amano-P脂肪酶，由Pseudomonas fragi FERM P1339(以商品名Amano-B提供)生成的脂肪酶、由Pseudomonas nitroreducens var.lipolyticum FERM P1338(以商品名Amano-CES提供)生成的脂肪酶、由Chromobacter viscosum，如Chromobacter viscosum var.lipolyticum NRRLB3673生成的脂肪酶，工業(yè)上由Toyo Jozo Co.Tagata,Japan提供；和由US BiochemicalCorp.,USA和Disoynth Co.,The Netherlands提供的Chromobacterviscosum脂肪酶和由Pseudomonas gladioli提供的脂肪酶。
合適的真菌脂肪酶包括可由Humicola lanuginosa和Thermomyceslanuginosus制備的那些。最優(yōu)選地是通過克隆來自Humicolalanuginosa的基因并以Aspergillus oryzae表達(dá)基因而得到的脂肪酶，如歐洲專利申請(qǐng)0258068(Novo Industri A/S)所記載的，由NovoNordisk A/S以商品名Lipalse在工業(yè)上提供。
在這些組合物中可采用每克脂肪酶約10到18000，優(yōu)選約60到6000個(gè)脂肪酶單位(LU/克)。一個(gè)脂肪酶單位是在pH穩(wěn)定的情況下每分鐘生成1毫摩爾可滴定的脂肪酸的脂肪酶的量，其中pH為9.0，溫度為30℃，基體是3.3％重量的橄欖油和3.3％阿拉伯樹膠的乳液，在5毫摩爾/升三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液中存在13毫摩爾/升Ca++，和20毫摩爾/升NaCl。
任何適用于液體洗滌劑組合物的纖維素酶都可用在這些組合物中。適用于本發(fā)明的纖維素酶包括來自細(xì)菌和真菌源的那些。優(yōu)選它們的最佳pH范圍為5到9.5?？梢圆捎眉s0.0001到0.1重量％的纖維素酶。
合適的纖維素酶公開在US4435307,Barbesgaard等，1984年3月6日，其在此結(jié)合作為參考，它公開了由Humicola insolens生成的真菌纖維素酶。合適的纖維素酶還公開在GB-A-2075028,GB-A-2095275和DE-OS-2247832中。
這類纖維素酶的例子是由Humicola insolens(Humicola griseavar.thermoidea)，特別是Humicola種DSM1800生成的纖維素酶，和由Bacillus N的真菌生成的纖維素酶或者由屬于基因Aeromonas的真菌生成的纖維素酶212，和由海洋軟體動(dòng)物(Dolabella AuriculaSolander)的肝胰臟提取的纖維素酶。
任何適用于液體洗滌劑組合物中的淀粉酶都可用在這些組合物中。淀粉酶包括，例如由B.licheniformis的特殊種屬生成的淀粉酶，這更詳細(xì)地記載在英國(guó)專利1296839(Novo)中。淀粉水解蛋白包括例如RapidaseR/Inernational Bio-Synthetics,Inc.和TermamylRNovoIndustries。
可以采用約0.0001％到0.55，優(yōu)選0.0005到0.1重量％的淀粉酶。
任選組分-洗滌劑助劑可以任選地包含在本發(fā)明的組合物中。0至約50％重量的洗滌劑助劑可用于此?？梢圆捎脽o機(jī)助劑和有機(jī)助劑。當(dāng)含有助劑時(shí)，組合物通常含有至少約1％的助劑，并可以是無機(jī)助劑或者有機(jī)助劑。液體洗衣制劑優(yōu)選含有約3％到30％，更優(yōu)選約5到20％重量的洗滌劑助劑。
無機(jī)助劑包括但是不限于聚磷酸(典型地是三聚磷酸鹽、焦磷酸鹽和玻璃態(tài)聚合偏磷酸鹽)、膦酸鹽、肌醇六磷酸鹽、硅酸鹽、碳酸鹽(包括碳酸氫鹽和倍半碳酸鹽)、硫酸鹽和硅鋁酸鹽的堿金屬、銨鹽和鏈烷醇銨鹽。也可以采用硼酸鹽助劑和含有可在洗滌劑貯存或者洗滌條件下形成硼酸鹽的物質(zhì)的助劑(本文中統(tǒng)稱為“硼酸鹽助劑”)。優(yōu)選地是本發(fā)明的組合物中采用非硼酸鹽助劑，以便在低于約50℃，特別是低于約40℃的洗滌條件下使用。
硅酸鹽助劑的例子是堿金屬硅酸鹽，特別是SiO2:Na2O的比例在1.6∶1到3.2∶1的范圍內(nèi)的那些，和層狀硅酸鹽，例如記載在US4664839,1987年5月12日，H.P.Rieck中的層狀硅酸鹽，該文獻(xiàn)在此結(jié)合作為參考。但是，其它硅酸鹽也是有效的，例如硅酸鎂，它在顆粒制劑中用作松脆劑，用作氧漂白劑的穩(wěn)定劑和作為泡沫抑制劑體系的組分。
碳酸鹽助劑的例子是堿土金屬和堿金屬的碳酸鹽，包括碳酸鈉和倍半碳酸鈉和它們與超細(xì)碳酸鈣的混合物，這公開在德國(guó)專利申請(qǐng)2321001,1973年11月15日中，其公開在此結(jié)合作為參考。
硅鋁酸鹽助劑在本發(fā)明中也是有效的。硅鋁酸鹽助劑在最常市售的重垢型顆粒洗滌劑組合物中是很重要的，并且在液體洗滌劑制劑中也是重要的助劑組分。硅鋁酸鹽助劑包括具有下面的化學(xué)通式的那些Mz(zAlO2.ySiO2)其中M是鈉、鉀、銨或者取代的銨，z是從約0.5到約2,y是1；這種物質(zhì)具有至少每克無水硅鋁酸鹽約50毫克當(dāng)量的CaCO3硬度的鎂離子交換能力。優(yōu)選的鋁-硅酸鹽是具有下面通式的沸石助劑Naz[(AlO2)z(SiO2)y].xH2O其中z和y是至少為6的整數(shù)，z與y的摩爾比例在1.0到約0.5的范圍內(nèi)，x是從約15到約264的整數(shù)。
有效的硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)是工業(yè)上可提供的。這些硅鋁酸鹽可以是晶體或者無定形結(jié)構(gòu)的，并且可以是天然生成的硅鋁酸鹽或者合成的。一種生成硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)的方法公開在US3985669，Krummel等，1976年10月12日中，其在此結(jié)合作為參考?？捎糜诒景l(fā)明的優(yōu)選的合成晶體硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)可以沸石A、沸石P(B)和沸石X的名義提供。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，晶體硅鋁酸鹽離子交換物質(zhì)具有下面的通式Na12[(AlO2)12(SiO2)12].xH2O其中x為約20到約30，尤其是約27。該物質(zhì)已知為沸石A。優(yōu)選地是硅鋁酸鹽的粒徑為直徑約0.1到10微米。
聚磷酸鹽的具體例子是堿金屬三聚磷酸鹽，焦磷酸鈉、鉀和銨，焦磷酸鈉和鉀和銨、原磷酸鈉和鉀、聚合程度在約6到約21范圍內(nèi)的聚偏磷酸鈉和肌醇六磷酸的鹽。
磷酸鹽助劑的例子是水溶性乙烷1-羥基-1,1-二磷酸鹽，特別是鈉鹽和鉀鹽，亞甲基二磷酸的水溶性鹽，如三鈉鹽和三鉀鹽，和取代的亞甲基二磷酸的水溶性鹽，如亞乙基、亞異丙基芐基亞甲基和鹵亞甲基磷酸的三鈉鹽和三鉀鹽。上述類型的磷酸鹽助劑公開在US3159581和3213030,1964年12月1日和1965年10月19日，Diehl；US3422021,1969年1月14日，Roy；和US3400148和3422137,1968年9月3日和1969年1月14日，Quimby，所說的公開在此結(jié)合作為參考。
優(yōu)選用于本發(fā)明目的的有機(jī)洗滌劑助劑包括各種聚羧酸鹽化合物。正如本發(fā)明所采用的，“聚羧酸鹽”是指帶有多個(gè)，優(yōu)選至少3個(gè)羧酸鹽基團(tuán)的化合物。
聚羧酸鹽助劑通常不僅可以以酸的形式加入到組合物中，還可以以中和鹽的形式加入，當(dāng)以鹽形式使用時(shí)，堿金屬，如鈉、鉀和鋰或者鏈烷醇銨的鹽是優(yōu)選的。
所包含的聚羧酸鹽助劑是各種類型的有效物質(zhì)。一個(gè)重要種類的聚羧酸鹽助劑包括醚聚羧酸鹽。許多醚聚羧酸鹽都已經(jīng)公開用作洗滌劑助劑。有效的醚聚羧酸鹽的例子包括氧二丁二酸鹽，公開在Berg.US3128287,1964年4月7日和Lamberti等，US3635830,1972年1月18日，它們都此結(jié)合作為參考。
一類可有效在本發(fā)明中用作助劑的具體醚聚羧酸鹽還包括具有下面通式的那些CH(A)(COOX)-CH(COOX)-O-CH(COOX)-CH(COOX)(B)其中A是H或者OH；B是H或者-O-CH(COOX)-CH2(COOX)；X是H或者成鹽陽離子。例如，如果在上述通式中，A和B都是H，那么該化合物是氧二丁二酸和其水溶性鹽。如果A是OH,B是H，那么該化合物是酒石酸一丁二酸(TMS)和其水溶性鹽。如果A是H,B是-O-CH(COOX)-CH2(COOX)，那么該化合物是酒石酸二丁二酸(TDS)和其可溶性鹽。這些助劑的混合物在本發(fā)明中是特別優(yōu)選的。特別優(yōu)選地是TMS和TDS以TMS和TDS的重量比為約97∶2到20∶80的混合物。這些助劑公開在US4663071,Bush等，1987年5月5日。
合適的醚聚羧酸鹽還包括環(huán)狀化合物，特別是脂環(huán)化合物，例如記載在US3923679、3835163、4158635、4120874和4102903，它們?nèi)慷冀Y(jié)合在此作為參考。
其它有效的洗滌助劑包括具有下面結(jié)構(gòu)的醚羥基聚羧酸鹽HO-[C(R)(COOM)-C(R)(COOM)-O]n-H其中M是氫或者陽離子，其中生成的鹽是水溶性的，優(yōu)選堿金屬、銨或者取代的銨陽離子，n是約2到約15(優(yōu)選n約2到約10，更優(yōu)選n是約2到約4的平均數(shù))，并且每個(gè)R相同或者不同，并選自氫，C1-4烷基或者C1-4取代的烷基(優(yōu)選R是氫)。
還有其它的醚聚羧酸鹽助劑包括馬來酐與亞乙基或者乙烯基甲基醚的、1,3,5-三羥基苯-2,4,6-三磺酸和羧基甲基氧丁二酸的共聚物。
有機(jī)聚羧酸鹽助劑也包括各種聚乙酸的堿金屬、銨和取代的銨鹽。例子是亞乙基二胺四乙酸和次氮基三乙酸的鈉、鉀、鋰、銨和取代的銨鹽。
還包括聚羧酸鹽，如苯六甲酸、丁二酸、氧二丁二酸、聚馬來酸、苯1,3,5-三酸和羧基甲基氧丁二酸和它們的可溶性鹽。
檸檬酸鹽助劑，如檸檬酸和其可溶性鹽(特別是鈉鹽)是對(duì)重垢型液體洗滌劑制劑特別重要的聚羧酸鹽助劑，也可以用在顆粒組合物中。
其它羧酸鹽助劑包括羧酸鹽化的碳水化合物，公開在US3723322,Diehl,1973年3月28日，其結(jié)合在此作為參考。
還適用于本發(fā)明的洗滌劑組合物的是3,3-二羧基-4-氧雜-1,6-己二酸鹽和相關(guān)的化合物，它們公開在US4566984,Bush,1986年1月28日，其結(jié)合在此作為參考。有效的丁二酸助劑包括C5-C20烷基丁二酸和其鹽。這類特別優(yōu)選的化合物是十二碳烯基丁二酸。烷基丁二酸通常具有通式R-CH(COOH)CH2(COOH)，即丁二酸的衍生物，其中R是烴，如C10-C20烷基或者鏈烯基，優(yōu)選C12-C16或者其中R可以被羥基、磺基、亞砜或者砜取代基取代，它們?nèi)坑涊d在上述專利中。
丁二酸鹽助劑優(yōu)選以它們水溶性鹽的形式使用，包括鈉、鉀、銨和鏈烷醇銨鹽。
丁二酸鹽助劑的具體的例子包括月桂基丁二酸鹽、肉豆蔻基丁二酸鹽、棕櫚基丁二酸鹽、2-十二碳烯基丁二酸鹽(優(yōu)選的)、2-十五碳烯基丁二酸鹽等。月桂基丁二酸鹽是優(yōu)選的助劑并公開在歐洲專利申請(qǐng)86200690.5/0200263，公開在1986年11月5日。
有效的助劑的例子還包括羧基甲基氧丙二酸、羧基甲基氧丁二酸、順-環(huán)己烷六羧酸、順-環(huán)戊烷四羧酸、水溶性的聚丙烯酸(分子量大于約2000的聚丙烯酸也可以用作分散劑)和馬來酐與乙烯基甲基醚或者乙烯的共聚物的鈉鹽和鉀鹽。
其它合適聚羧酸鹽是聚乙縮醛羧酸鹽，它公開在US4144226,Crutchfield等，1979年3月13日，其結(jié)合在此作為參考。這些聚縮醛羧酸鹽可以通過將羥乙二酸的酯和聚合反應(yīng)引發(fā)劑在聚合反應(yīng)條件下混合在一起來制備。接著將生成的聚乙縮醛羧酸鹽連接到化學(xué)穩(wěn)定的端基上來穩(wěn)定聚乙縮醛羧酸酯使不在堿性溶液中發(fā)生快速解聚反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的鹽并加入到表面活性劑中。
聚羧酸鹽助劑還公開在US3308067,Diehl,1967年3月7日，其結(jié)合在此作為參考。這類物質(zhì)包括脂肪羧酸，如馬來酸、依康酸和亞甲基丙二酸的均一和共聚物的水溶性鹽。
也可以采用其它本領(lǐng)域中已知的有機(jī)助劑。例如，可以采用帶有長(zhǎng)鏈烴基的一羧酸和其可溶性鹽。它們包括通常稱為“肥皂”的物質(zhì)。一般采用C10-C20的鏈長(zhǎng)。烴基可以是飽和的或者不飽和的。
其它任選的組分包括去污劑、螯合劑、除垢/防再沉積劑、聚合的分散劑、漂白劑、增白劑、抑泡劑、溶劑和美化劑。
本發(fā)明的洗滌劑組合物可以配制成各種組合物，例如洗衣洗滌劑和硬表面清潔劑或者洗盤組合物。
權(quán)利要求
1．一種液體洗滌劑組合物，含有a)占組合物的1％到95％重量的洗滌劑表面活性劑；b)活性蛋白水解酶；c)含硼酸源和多元醇的硼組合物；和d)具有下面通式的肽醛Z-B-NH-CH(R)-C(O)H其中B是含有1到5個(gè)氨基酸部分的肽鏈；Z是N-封端的部分，選自氨基磷酸酯[(R”O(jiān))2(O)P-]、亞磺酰胺[(SR”)2-]、氨磺酰[(R”(O)2S-]、磺酸[SO3H]、膦酰胺[(R”)2(O)P-]、氨磺酰衍生物[R”O(jiān)(O)2S-]、硫脲[(R”)2N(O)C-]、硫代氨基甲酸酯[R”O(jiān)(S)C-]、膦酸酯[R”-P(O)OH]、酰胺磷酸酯[R”O(jiān)(OH)(O)P-]、氨基甲酸酯(R”O(jiān)(O)C-)、和脲[R”NH(O)C-]，其中各R”分別選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基、C7-C9烷基芳基和環(huán)烷基部分，其中環(huán)烷基環(huán)可以是C4-C8，并含有一個(gè)或者幾個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子；并且R選自直鏈或者支鏈化的C1-C6未取代的烷基、苯基和C7-C9烷基芳基部分。
2．權(quán)利要求1的液體洗滌劑組合物，其中R部分選自甲基、異丙基、仲丁基、異丁基、-C6H5、-CH2-C6H5和-CH2CH2-C6H5。
3．權(quán)利要求2的液體洗滌劑組合物，其中所說的B肽鏈選自具有下面通式的氨基酸序列的肽鏈Z-A5-A4-A3-A2-A1-NH-CH(R)-C(O)H使得在存在氨基酸時(shí)，它們是下面的氨基酸A1選自Ala、Gly；A2如果存在選自Val、Ala、Gly、Ile；A3如果存在選自Phe、Leu、Val、Ile；A4如果存在是任何氨基酸；A5如果存在是任何氨基酸。
4．權(quán)利要求3的液體洗滌劑組合物，其中N-末端用一個(gè)選自氨基甲酸酯、脲、氨磺酰、膦酰胺、硫脲、亞磺酰胺、磺酸、亞膦酰胺、硫代氨基甲酸酯、酰胺磷酸酯和膦酰胺的N-封端部分保護(hù)基團(tuán)來保護(hù)。
5．權(quán)利要求4的液體洗滌劑組合物，其中所說的蛋白酶抑制劑的N-末端被甲基、乙基或者芐基氨基甲酸酯[CH3O-(O)C-；CH3CH2O-(O)C-或者C6H5CH2O-(O)C-]、甲基、乙基或者芐基脲[CH3NH-(O)C-；CH3CH2NH-(O)C-或者C6H5CH2NH-(O)C-]、甲基、乙基或者芐基氨磺酰[CH3SO2-；CH3CH2SO2-或者C6H5CH2SO2-]和甲基、乙基或者芐基酰胺磷酸酯[CH3O(OH)(O)P-；CH3CH2O(OH)(O)P-或者C6H5CH2O(OH)(O)P-]基團(tuán)保護(hù)。
6．權(quán)利要求1的液體洗滌劑組合物，其中所說的肽醛選自CH3SO2Phe-Gly-Ala-Leu-H、CH3SO2Val-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Val-Ala-Leu-H、CH3CH2SO2Phe-Gly-Ala-Leu-H、C6H5CH2SO2-Val-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Leu-Ala-Leu-H、C6H5CH2O(OH)(O)P-Phe-Ala-Leu-H和CH3O(OH)(O)P-Leu-Gly-Ala-Leu-H。
7．權(quán)利要求1的液體洗滌劑組合物，其中硼組合物含有硼酸或選自硼氧化物、硼砂、其他堿金屬硼酸鹽、取代的硼酸和他們的混合物的硼酸源；以及多元醇是二醇。
8．權(quán)利要求1的液體洗滌劑組合物，進(jìn)一步含有有效量的鈣離子源。
9．權(quán)利要求8的液體洗滌劑組合物含有a)8％到70％的所說的洗滌劑表面活性劑；b)0.001％到5％的活性蛋白水解酶；c)所述硼組合物含有0.25％至10％重量的硼酸或在該組合物中能產(chǎn)生硼酸的化合物和占該組合物重量1％至15％的多元醇；d)0.00001％到5％的所說肽醛；和e)0.01％至1％的鈣離子。
10．權(quán)利要求1的液體洗滌劑組合物，進(jìn)一步含有有效量的一種或多種下述的酶脂肪酶，淀粉酶，纖維素酶和他們的混合物。
全文摘要
本發(fā)明記載了含有蛋白水解酶的含水液體洗滌劑組合物，其中蛋白水解活性由肽醛和硼酸源可逆地抑制。在特別優(yōu)選的實(shí)施例中，公開了含有洗滌劑表面活性劑、蛋白水解酶、肽醛、硼酸和二醇離子的液體洗滌劑組合物。結(jié)合肽醛和硼酸起到改進(jìn)蛋白酶和其他酶的穩(wěn)定性的作用。
文檔編號(hào)C11D3/386GK1238002SQ9719988
公開日1999年12月8日 申請(qǐng)日期1997年9月19日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月24日
發(fā)明者J·M·麥基維爾, A·C·胡伯, K·L·麥基洛普, L·A·史密斯 申請(qǐng)人:普羅格特-甘布爾公司