一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法
【專利摘要】一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其步驟如下，取低極性溶劑、乙醇、水按體積比為10：10：1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為低極性溶劑相，下層為乙醇相，分離出上層低極性溶劑相；將南極磷蝦油溶于步驟(1)制備的乙醇相中；取所述制備的低極性溶劑相加入南極磷蝦油溶解液中進行萃取，充分混合；采用靜置或離心使混合液分層，得到上層深紅色低極性萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液；使用所述的低極性溶劑相萃取乙醇相萃取液，直至低極性溶劑相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液；將最終獲得的乙醇相萃取液減壓蒸發(fā)，獲得橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂。本發(fā)明方法利用有機溶劑萃取法從南極磷蝦油中制備高純度磷脂，磷脂含量高達85％～92％。
【專利說明】一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于保健品或化工領(lǐng)域，具體地涉及一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]南極磷蝦脂質(zhì)中富含ω-3系列的多不飽和脂肪酸，尤其是二十碳五烯酸(EPA, 20:5)、二十二碳六烯酸(DHA，22:6)分別占總脂肪酸含量的15.0% -25.3%、
9.3%-21.2%。研宄表明，南極磷蝦的ω-3系列的多不飽和脂肪酸主要存在于磷脂中，與傳統(tǒng)的甘油脂型的魚油相比，南極磷蝦磷脂在人體中具有更好的吸收性，并具有更好的生理活性。
[0003]南極磷蝦脂質(zhì)中磷脂(PL)含量達到約40%是海洋生物中唯一具有大規(guī)模開發(fā)潛力的磷脂資源。磷脂根據(jù)甘油骨架的不同可以分為磷酸甘油脂和鞘磷脂。它們都是極性月旨。其中，甘油磷脂又可以根據(jù)極性頭部集團的不同區(qū)分為磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(ΡΙ)、磷脂酰甘油(PG)、甘油磷脂酸(PA)等。磷脂是一種生命基礎(chǔ)物質(zhì)，它廣泛存在于人體的組織和體液中，不僅是構(gòu)成人體生物膜的重要組成成分，而且是膽堿和必需脂肪酸的原料來源，對維持生物膜的生理活性和機體的正常代謝起關(guān)鍵作用，是更為重要的活性脂肪酸存在形式。研宄結(jié)果顯示磷脂具有多種重要的生物活性:調(diào)節(jié)血脂，預(yù)防和改善心腦血管疾病的作用；促進神經(jīng)傳導(dǎo)，健腦益智作用；促進脂肪代謝，防止脂肪肝作用；防止老化，美化肌膚作用；調(diào)節(jié)免疫功能等。磷脂的多種生理功能使其廣泛應(yīng)用于保健食品及醫(yī)藥化工領(lǐng)域。在歐美及日本等發(fā)達國家，磷脂已經(jīng)成為很普及的營養(yǎng)保健品，例如卵磷脂膠囊、作為膳食補充劑，可用于保護肝臟改善心腦血管疾病，提高記憶等。在美國顆粒狀大豆磷脂銷量最大，是磷脂健康食品的主要品種。其食用方法很多，可以直接食川，也可將它加人到沙拉子、奶油、火腿、冰淇淋、布丁或發(fā)酵乳中混合食用，還可放人溫水或各種冷飲中飲用。在藥用輔料方面，美國藥物賦形劑手冊收載了 PC。PC可作為潤滑劑、分散劑、乳化劑、穩(wěn)定劑和增溶劑等用于肌肉和靜脈注射液、腸外營養(yǎng)制劑和局部用藥制劑，例如乳膏劑和軟膏劑等。
[0004]磷脂酰膽堿(PC)還是脂質(zhì)體的重要原料，作為雙分子層的重要組成成分，用于包裹藥物，實現(xiàn)藥物的靶向和緩釋給藥。我國國家藥品標準收載了 PC原料系從雞蛋黃中提取制得，用作降血脂藥。其片劑的適應(yīng)證為用于脂肪肝、動脈粥樣硬化等疾病的輔助治療。標準規(guī)定大豆磷脂粉的類別為腦功能改善藥。另外，國家衛(wèi)生部部頒標準也收載了大豆磷脂原料，用于乳化劑，供配制注射液或口服制劑用。磷脂獨特的潤滑和防粘連作用，使其在防治疾病方面具有潛在的臨床應(yīng)用價值，可用于治療骨關(guān)節(jié)炎、預(yù)防手術(shù)粘連等。磷脂及其衍生物已經(jīng)作為一類肺表面活性物質(zhì)用于哮喘和新生兒呼吸窘迫綜合征的治療。德國于上世紀九十年代研發(fā)的多烯磷脂酰膽堿(商品名易必生、易善復(fù)等)已廣泛應(yīng)用于肝損傷修復(fù)治療，是目前該領(lǐng)域使用量第二高的藥物。
[0005]迄今為止，已經(jīng)開發(fā)應(yīng)用的磷脂主要原料來自大豆磷脂及蛋黃磷脂，加工技術(shù)成熟，產(chǎn)品開發(fā)應(yīng)用十分廣泛。目前開發(fā)應(yīng)用的磷脂脂肪酸構(gòu)成主要是亞油酸及飽和脂肪酸。與之相比，以DHA、EPA為主的南極磷蝦磷脂具有更高的生理活性。大豆磷脂生產(chǎn)制備主要采用水合法從大豆油中分離得到油腳，再進一步從油腳純化得到磷脂。而南極磷蝦油中由于磷脂含量達到40%左右，無法通過水合法實現(xiàn)磷脂的初步分離?，F(xiàn)有技術(shù)采用超臨界CO2萃取法可以有效的實現(xiàn)甘油脂、膽固醇等與南極磷蝦磷脂分離分離，但生產(chǎn)所需設(shè)備昂貴，耗能較大。此外，現(xiàn)有技術(shù)采用丙酮法萃取法分離南極磷蝦油，獲得丙酮不溶物為磷脂，但南極磷蝦磷脂中重要組分卵磷脂(PC)可以溶于丙酮，所以無法有效制備高質(zhì)量南極磷蝦磷脂。柱層析法雖然可以有效的分離南極磷蝦油磷脂，但由于磷脂與固定相材料吸附較強，洗脫回收率會受到影響，


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，本發(fā)明方法利用有機溶劑萃取法從南極磷蝦油中制備高純度磷脂，磷脂含量高達85%?92%。
[0007]本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
[0008]一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其步驟如下:
[0009](I)溶劑制備:取低極性溶劑、乙醇、水按體積比為10:10:1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為低極性溶劑相，下層為乙醇相，分離出上層低極性溶劑相；
[0010](2)溶解:將南極磷蝦油溶于步驟⑴制備的乙醇相中；
[0011](3)萃取:取步驟(I)中制備的低極性溶劑相加入步驟(2)制備的南極磷蝦油溶解液中進行萃取，充分混合；采用靜置或離心使混合液分層，得到上層深紅色低極性萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液；使用步驟(I)所述的低極性溶劑相萃取乙醇相萃取液，直至低極性溶劑相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液；
[0012](4)脫溶:將步驟(3)最終獲得的乙醇相萃取液減壓蒸發(fā)，蒸出乙醇相萃取液中有機溶劑并冷凝回收，乙醇相萃取液脫溶后獲得橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂。
[0013]進一步，所述的低極性溶劑為正己烷、環(huán)己烷、石油醚或六號溶劑油。
[0014]進一步，步驟⑵所述的南極磷蝦油與乙醇相的體積比為1:4，溶解溫度30?40 0C ；
[0015]進一步，步驟(3)所述的低極性溶劑/南極磷蝦油溶解液的體積比為1:1。
[0016]進一步，步驟⑷所述的減壓蒸發(fā)條件參數(shù)為溫度30?50 °C、真空度-0.05 ?-0.1MPa0
[0017]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果
[0018]本發(fā)明采取上述方法，采用低極性溶劑、乙醇、水三種不同極性溶劑按一定比例混合，乙醇可以與多種低極性溶劑任意比混溶，同時乙醇可以與水混溶，而低極性溶劑與水不溶，由于三種溶劑相比不同，因此將三種溶劑混合后會出現(xiàn)兩相分層，獲得低極性溶劑相(含低極性溶劑和少量乙醇)和乙醇相(含乙醇、水、和少量低極性溶劑)。南極磷蝦油中主要成分為磷脂、甘油脂、膽固醇以及蝦青素等。其中磷脂為極性脂，甘油脂等為低極性脂，不同脂類在兩項溶劑中的分配比不同，其中磷脂更易溶于乙醇相，甘油脂、膽固醇等更易溶于低極性溶劑相。通過液液萃取可以實現(xiàn)磷脂與南極磷蝦油中其他脂類的有效分離，制得較高純度(85%?92%)的南極磷蝦磷脂，作為進一步加工醫(yī)藥、保健品的原料。
[0019]本發(fā)明采用的低極性溶劑及乙醇均為無毒且適用于食品及醫(yī)藥加工溶劑，均可回收使用。本發(fā)明采用的低極性溶劑可以是正己烷、環(huán)己烷、石油醚、六號溶劑油等。本發(fā)明在步驟(3)萃取過程中采用超聲或震蕩等物理方法輔助料液混合，在兩相分離過程中采用靜置分層或離心分層，可以達到很好的分離效果。本發(fā)明在萃取及脫溶過程中均在30?50°C溫度條件下，不需要高溫加熱，實現(xiàn)節(jié)能環(huán)保。本發(fā)明南極磷蝦磷脂分離純化效率高，操作簡便，生產(chǎn)成本低，對環(huán)境友好。

【具體實施方式】
[0020]下面通過實施例來對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步解釋，但本發(fā)明的保護范圍不受實施例任何形式上的限制。
[0021]實施例1
[0022]一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其步驟如下:
[0023](I)溶劑制備:取正己烷、乙醇、水按體積比為10:10:1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為正己烷相，下層為乙醇相，分離出上層正己烷相；；
[0024](2)溶解:將100克南極磷蝦油(磷脂含量39.9% )按1:4體積比溶于步驟(I)中制備的乙醇相中，溶解溫度30?40°C ;
[0025](3)萃取:取步驟(I)中制備的正己烷相加入步驟(2)制備的南極磷蝦油溶解液中進行萃取，正己烷相/南極磷蝦油溶解液的體積比為1:1，采用超聲輔助混合；采用靜置分層，得到上層深紅色低極性溶劑萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液溶液；重復(fù)使用步驟
(I)所述的正己烷相萃取乙醇相萃取液2次，直至正己烷相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液；
[0026](4)脫溶:將步驟(3)最終獲得的乙醇相萃取液在40°C、真空度-0.05?-0.1MPa條件下減壓蒸發(fā)，蒸出乙醇相萃取液中有機溶劑并冷凝回收，乙醇相萃取液脫溶后獲得42克橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂、磷脂含量為86.7%。
[0027]實施例2
[0028]一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其步驟如下:
[0029](I)溶劑制備:取石油醚、乙醇、水按體積比為10:10:1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為石油醚相，下層為乙醇相，分離出上層石油醚相；；
[0030](2)溶解:將100克南極磷蝦油(磷脂含量39.9% )按1:4體積比溶于步驟(I)中制備的乙醇相中，溶解溫度30?40°C ;
[0031](3)萃取:取步驟(I)中制備的石油醚相加入步驟(2)制備的南極磷蝦油溶解液中進行萃取，石油醚相/南極磷蝦油溶解液的體積比為1:1，采用振蕩攪拌充分混合；采用離心使混合液分層，得到上層深紅色低極性萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液溶液；重復(fù)使用步驟(I)所述的石油醚相萃取乙醇相萃取液3次，直至石油醚相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液；；
[0032](4)脫溶:將步驟(3)最終獲得的乙醇相萃取液在45°C、真空度-0.05?-0.1MPa條件下減壓蒸發(fā)，蒸出乙醇相萃取液中有機溶劑并冷凝回收，乙醇相萃取液脫溶后獲得43.2克橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂、磷脂含量為89.5%。
[0033]實施例3
[0034]一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其步驟如下:
[0035](I)溶劑制備:取環(huán)己烷、乙醇、水按體積比為10:10:1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為環(huán)己烷相，下層為乙醇相；
[0036](2)溶解:將100克南極磷蝦油(磷脂含量39.9% )按1:4體積比溶于步驟(I)中制備的乙醇相中，溶解溫度30?40°C ;
[0037](3)萃取:取步驟(I)中制備的環(huán)己烷相加入步驟(2)制備的南極磷蝦油溶解液中進行萃取，環(huán)己烷相/南極磷蝦油溶解液的體積比為1:1，采用振蕩充分混合；采用離心法使混合液分層，得到上層深紅色低極性萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液溶液；重復(fù)使用步驟(I)所述的環(huán)己烷相萃取乙醇相萃取液4次，直至環(huán)己烷相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液；
[0038](4)脫溶:將步驟(3)最終獲得的乙醇相萃取液在45°C、真空度-0.05?-0.1MPa條件下減壓蒸發(fā)，蒸出乙醇相萃取液中有機溶劑并冷凝回收，乙醇相萃取液脫溶后獲得41.3克橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂、磷脂含量為92.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其特征在于其步驟如下: (1)溶劑制備:取低極性溶劑、乙醇、水按體積比為10:10:1混合，充分震蕩混合后靜置分層，上層為低極性溶劑相，下層為乙醇相，分離出上層低極性溶劑相； (2)溶解:將南極磷蝦油溶于步驟(I)制備的乙醇相中； (3)萃取:取步驟(I)中制備的低極性溶劑相加入步驟(2)制備的南極磷蝦油溶解液中進行萃取，充分混合；采用靜置或離心使混合液分層，得到上層深紅色低極性萃取液，下層橙黃色乙醇相萃取液；使用步驟(I)所述的低極性溶劑相萃取乙醇相萃取液，直至低極性溶劑相接近無色，最終獲得橙黃色乙醇相萃取液； (4)脫溶:將步驟(3)最終獲得的乙醇相萃取液減壓蒸發(fā)，蒸出乙醇相萃取液中有機溶劑并冷凝回收，乙醇相萃取液脫溶后獲得橙黃色膏狀物為南極磷蝦磷脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其特征在于所述的低極性溶劑為正己烷、環(huán)己烷、石油醚或六號溶劑油。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其特征在于步驟(2)所述的南極磷蝦油與乙醇相的體積比為1:4，溶解溫度30?40°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其特征在于步驟⑶所述的低極性溶劑/南極磷蝦油溶解液的體積比為1:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從南極磷蝦油中提取高純度磷脂的方法，其特征在于步驟(4)所述的減壓蒸發(fā)條件參數(shù)為溫度30?50°C、真空度-0.05?-0.1MPa0
【文檔編號】C11B3/00GK104498180SQ201410801886
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月20日
【發(fā)明者】王松, 冷凱良, 苗鈞魁, 劉小芳, 閆紹鵬, 劉超, 趙鑫鵬 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所