一種淫羊藿苷的用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種淫羊藿苷的用途，該淫羊藿苷可用于制備保健食品或食物添加劑。一種應(yīng)用淫羊藿苷的防止動(dòng)脈硬化的藥物組合物，該藥物組合物由以下成分及其質(zhì)量百分比組成：淫羊藿苷5~15%、銀杏黃酮1~12%、洛伐他汀1~10、吉非貝齊5~10%、膽汁酸5~10%、填充劑43~83%。
【專利說(shuō)明】
-種淫羊霍昔的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及天然藥物領(lǐng)域，具體設(shè)及一種淫羊蕾巧的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 淫羊蕾巧（Icariin)是從小築科植物淫羊蕾（Epimedium brevicornum Maxim)全 草中提取的活性成分，屬黃酬類化合物。淫羊蕾巧具有抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作 用。
[0003] 氧化低密度脂蛋白（OX-LDL)可誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)損傷，而受損的VSMC由 中膜向內(nèi)膜下遷移、增殖、合成和分泌大量細(xì)胞外基質(zhì)，PCNA即是VSMC增殖的重要標(biāo)志物之 一，其表達(dá)水平的高低可反映細(xì)胞的增殖活性。
[0004] 絲裂原活化蛋白激酶(MPK)是細(xì)胞內(nèi)促增殖和傳遞應(yīng)激信號(hào)的關(guān)鍵激酶，該家族 包括E服、JNK、p38等亞族與細(xì)胞增殖分化相關(guān)的信號(hào)通路關(guān)系密切，該信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在未 受刺激時(shí)，處于靜止?fàn)顟B(tài);在受到生長(zhǎng)因子的刺激時(shí)，在上游激酶的作用下，發(fā)生級(jí)聯(lián)憐酸 化而激活，MAPK被激活后進(jìn)入細(xì)胞核，使一些轉(zhuǎn)錄因子憐酸化，改變細(xì)胞基因的表達(dá)狀態(tài)， 參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、增殖等多種生理過(guò)程的調(diào)控，在動(dòng)脈粥樣硬化的起病和發(fā)展過(guò)程中 起著極其重要的作用。
[0005] 因此，基于已知的V S Μ C增殖調(diào)節(jié)機(jī)制，尋找藥物干預(yù)與此相關(guān)的病理過(guò)程已 經(jīng)成為目前防治屯、血管疾病的重要策略之一，如"徑基紅花黃色素 A通過(guò)影響PCNA表達(dá)和 161(斗服1/^2信號(hào)通路抑制大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖"（《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》2015年滴7期）。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明為解決上述技術(shù)問(wèn)題提供一種淫羊蕾巧一種淫羊蕾巧的用途。
[0007] 本發(fā)明為解決上述技術(shù)問(wèn)題所采取的方案為:一種淫羊蕾巧的用途，其特征在于： 該淫羊蕾巧可用于制備保健食品或食物添加劑。
[0008] -種應(yīng)用淫羊蕾巧的防止動(dòng)脈硬化的藥物組合物，該藥物組合物由W下成分及其 質(zhì)量百分比組成:淫羊蕾巧5~15%、銀杏黃酬^12%、洛伐他汀^10、吉非貝齊5~10%、膽汁酸5 ~10%、填充劑43~83〇/〇。
[0009] 作為優(yōu)選，該藥物組合物由W下成分及其質(zhì)量百分比組成：淫羊蕾巧13%、銀杏黃 酬10%、洛伐他汀7%、吉非貝齊9%、膽汁酸10%、填充劑70%。
[0010] 或者，該藥物組合物由W下成分及其質(zhì)量百分比組成:淫羊蕾巧10%、銀杏黃酬7%、 洛伐他汀10%、吉非貝齊8%、膽汁酸10%、填充劑75%。
[00川【附圖說(shuō)明】： 圖1淫羊蕾巧可劑量依賴性抑制OX-LDL誘導(dǎo)的VSMC增殖 圖2 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果 圖3細(xì)胞周期測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果 圖4淫羊蕾巧可劑量依賴性的降低OX-LDL誘導(dǎo)增殖的VSMC的PCNA蛋白表達(dá)水平 圖5淫羊蕾巧可劑量依賴性的降低0^寸化誘導(dǎo)增殖的￥51(：的6服1/^2蛋白憐酸化。
【具體實(shí)施方式】
[0012] W下結(jié)合附圖和實(shí)施例作進(jìn)一步詳細(xì)描述： 實(shí)施例1:MTT實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)方法： 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期間的VSMC接種于96孔板中，24h后給予OX-LDU50 yg/mL)刺激，刺激 2祉后給予不同劑量的淫羊蕾巧（0，10,20,40礎(chǔ)）。2祉、4化后每孔中加入20化(5111邑/111〇 MTT，置培養(yǎng)箱中，溫度37° C，解育地，棄去MTT溶液，加入DMS0( 150化/孔)溶解結(jié)晶，15min 后取出置于酶標(biāo)儀，于490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度(0D值）。給藥組細(xì)胞存活率用W下公式計(jì) 算:存活率=(處理組0D值/對(duì)照組0D值)*100%，結(jié)果如圖1、2。
[0013] 實(shí)施例 2:Weste;rnblot 實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)方法： 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期間的VSMC接種于6孔板中，24h后給予OX-LDU50 yg/mL)刺激，24h后 給予不同劑量的淫羊蕾巧(〇，1〇,20,4〇41)，置培養(yǎng)箱中，溫度37°(：，解育2地，收集細(xì)胞， 制成westblot實(shí)驗(yàn)樣品，經(jīng)BCA試劑盒蛋白定量后，加5X上樣緩沖液煮沸5 min后，即可進(jìn) 行SDS-PAGE。配制10% SDS-PAGE分離膠，插入梳齒，每孔中加入變性蛋白20 yg，在Marker加 樣孔中加入10 μ1的Marker。接通電源，穩(wěn)壓120 V，45 min進(jìn)行電泳，待蛋白樣品中的漠酪 藍(lán)泳至距分離膠下緣1 cm時(shí)，停止電泳。制作Ξ明治，轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)加入預(yù)冷的轉(zhuǎn)移緩沖液，恒 流180 mA轉(zhuǎn)膜2 h。取出PVDF膜在室溫封閉2~3 hsE服l/2，p-E服1/2，PCNA等蛋白一抗稀 釋液，與PVDF膜4 °C搖床解育過(guò)夜。洗液沖洗3次，每次10 min，辣根酶標(biāo)記山羊抗兔二抗 (1:5000)稀釋，常溫下與PVD刊莫搖床2 h。洗液沖洗3次，每次10 min,按照ECL試劑盒說(shuō)明書 進(jìn)行操作，將發(fā)光液均勻地滴在PVDF膜上，反應(yīng)1 min，最后將膜放入凝膠成像系統(tǒng)檢測(cè)，結(jié) 果如圖4、5。。
[0014] 實(shí)施例3:細(xì)胞周期測(cè)試 實(shí)驗(yàn)方法： 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期間的VSMC接種于6孔板中，24h后給予OX-LDU50 yg/mL)刺激，24h后 給予不同劑量的淫羊蕾巧(0，10，20，40 μΜ)，置培養(yǎng)箱中，溫度37° C，解育2地，收集細(xì)胞到 15ml的管中，離屯、，lOmLPBS洗細(xì)胞，沉淀細(xì)胞并重懸，共2次，70%冰乙醇固定，加入PCB溶液 室溫低滲處理后，離屯、去上清，加入RNaseA消化后，加入PI，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，結(jié) 果如圖1、3。
[0015] 其中，MTT染色及流逝細(xì)胞周期結(jié)果顯示，淫羊蕾巧對(duì)OX-LDL引起的VSMC增殖具有 顯著的抑制作用。Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，淫羊蕾巧可W劑量依賴性的降低OX-LDL刺激 后增殖的￥51如勺口〔臟蛋白表達(dá)水平，并可劑量依賴性的降低6服1/^2蛋白憐酸化。
[0016] 實(shí)施例4 一種應(yīng)用淫羊蕾巧的防止動(dòng)脈硬化的藥物組合物，分別稱取淫羊蕾巧52g、銀杏黃酬 35g、洛伐他汀28g、吉非貝齊38g、膽汁酸37g、填充劑llOg，混合均勻制成藥物1000份，每份 0.3g〇
[0017] 對(duì)比實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)方法： 取兩只動(dòng)脈硬化的大鼠，分別使用淫羊蕾巧(對(duì)照組)和淫羊蕾巧組合物(實(shí)驗(yàn)組)進(jìn) 行喂藥，淫羊蕾巧組合物由W下成分及其質(zhì)量百分比組成:淫羊蕾巧13%、銀杏黃酬10%、洛 伐他汀7%、吉非貝齊9%、膽汁酸10%、填充劑70%。并在37 °C溫度下，解育24h，通過(guò)解剖發(fā)現(xiàn)， 結(jié)果如下表1: 表1對(duì)比實(shí)驗(yàn)_^
^^^ 雖然本發(fā)明已W實(shí)施例公開如上，但其并非用W限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，任何熟悉本' 領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和范圍內(nèi)所做的更動(dòng)和潤(rùn)飾，均應(yīng)屬于本發(fā)明所 附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種淫羊藿苷的用途，其特征在于:該淫羊藿苷可用于制備保健食品或食物添加劑。2. -種應(yīng)用淫羊藿苷的防止動(dòng)脈硬化的藥物組合物，其特征在于：該藥物組合物由以 下成分及其質(zhì)量百分比組成：淫羊藿苷5~15%、銀杏黃酮1~12%、洛伐他汀1~10、吉非貝齊5~ 10%、膽汁酸5~10%、填充劑43~83%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于:該藥物組合物由以下成分及其質(zhì)量 百分比組成:淫羊藿苷13%、銀杏黃酮10%、洛伐他汀7%、吉非貝齊9%、膽汁酸10%、填充劑70%。
【文檔編號(hào)】A23L33/00GK105920057SQ201610386886
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年6月3日
【發(fā)明人】胡彥武, 任立群, 夏廣清, 孫仁爽, 關(guān)穎麗, 于俊林, 秦汝蘭, 武子敬, 張立秋, 薛長(zhǎng)松, 李成華
【申請(qǐng)人】通化師范學(xué)院