一種治療膜性腎病的中藥組合物及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種治療膜性腎病的中藥組合物及其制備方法，該中藥組合物由如下重量配比的原料組成：黃芪60～120份，生地黃15～30份，熟地黃15～30份，芡實(shí)15～30份，鹿銜草15～30份，土茯苓30～90份，白花蛇舌草30～90份，丹參15～30份，生水蛭0.5～3份，荊芥6～12份，防風(fēng)6～12份；并按照一定的工藝方法進(jìn)行提取后，與藥劑學(xué)上可接受的輔料而制成的中藥口服制劑。本發(fā)明所述的中藥組合物具有培補(bǔ)脾腎，益氣養(yǎng)陰，利濕活血的功效，用于治療各種急、慢性腎炎，腎病綜合征所致的蛋白尿、水腫。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種治療膜性腎病的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療膜性腎病的中藥組合物及其制備方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 膜性腎?。―IN)是以腎小球基底膜上皮細(xì)胞下免疫復(fù)合物沉積伴基底膜彌漫性增 厚為特征的一組疾病，該病據(jù)其病因可分為特發(fā)性、家族性及繼發(fā)性。其中特發(fā)性膜性腎病 (idiopathic membranous nephropathy，IMN)是原發(fā)性腎病綜合征常見(jiàn)的病理類(lèi)型之一， 約占成人腎病綜合征的三分之一。該病自然病程差異懸殊，有自發(fā)緩解、持續(xù)蛋白尿、腎功 能惡化等不同轉(zhuǎn)歸，目前尚無(wú)有效治療方法，約30%的患者5-10年內(nèi)進(jìn)展至終末期腎功能 衰竭。
[0003] 本病屬于中醫(yī)"水腫"、"尿濁"、"虛勞"等范疇。其中以水腫、大量蛋白尿?yàn)樘卣餍?臨床表現(xiàn)，從該病的發(fā)生、發(fā)展來(lái)看，虛實(shí)病機(jī)貫穿于本病的整個(gè)過(guò)程。本病虛在腎精虧損， 因脾腎氣弱，脾氣虧虛精微不升而下泄，腎失封藏，精微外泄均可致大量蛋白尿，蛋白尿日 久加重腎精虧虛，臨床可見(jiàn)膜性腎病患者舌質(zhì)紅，尤其長(zhǎng)期使用激素類(lèi)物質(zhì)后舌質(zhì)紅或舌 邊尖紅加重，或舌質(zhì)由淡轉(zhuǎn)紅的現(xiàn)象，同時(shí)多數(shù)患者伴有腰酸肢軟，五心煩熱，口干喜飲等 腎精不足的外在表現(xiàn)。本病實(shí)在水濕、濕熱、血瘀共存。由于脾氣虛弱運(yùn)化無(wú)力，水濕內(nèi)停； 腎虛主水失職，水液內(nèi)停外泛而見(jiàn)顏面肢體水腫、胸水腹水等。水濕蘊(yùn)久化熱，以及應(yīng)用激 素均致濕熱內(nèi)生;氣虛血行無(wú)力，且水不利則病血，均可致瘀血內(nèi)生，患者出現(xiàn)高脂血癥、血 液粘稠度增加，同時(shí)膜性腎病是腎病綜合征極易出現(xiàn)血栓、栓塞等并發(fā)癥的病理類(lèi)型，如腎 靜脈血栓、下肢靜脈血栓及肺栓塞，發(fā)生率約為10 %-60 %，均說(shuō)明瘀血為患在膜性腎病病 機(jī)中的重要性?？傊罅康鞍啄蚴琼擭發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵，低蛋白血癥、高脂血癥、血液高凝 狀態(tài)等均次生于大量蛋白尿，因此，本病的治療關(guān)鍵應(yīng)著眼于大量蛋白尿?；谏鲜鰧?duì)MN 病機(jī)的認(rèn)識(shí)，對(duì)本病的治療，我們提出培、補(bǔ)、固、宣、清、通，六法并治，即"培補(bǔ)固宣清通法" 治療頂N，并根據(jù)多年經(jīng)驗(yàn)自擬培補(bǔ)固腎方治療頂N。
[0004] 中醫(yī)藥治療頂N能改善患者臨床癥狀、體征，減少尿蛋白，延緩腎衰竭進(jìn)展。近年來(lái) 隨著腎活檢術(shù)的普及，頂N發(fā)病率逐年上升。盡管目前有針對(duì)頂N的KDIG0等治療指南，但由 于本病用藥時(shí)間長(zhǎng)、患者對(duì)激素、免疫抑制劑的敏感性不一以及上述藥物的諸多副作用，以 致該病治療仍為臨床棘手，屬難治性腎病?；颊叽罅康鞍啄螂y以緩解，緩慢出現(xiàn)腎功能損害 終至腎衰竭。現(xiàn)有的西藥治療方案療效仍不滿意，免疫抑制劑的毒副反應(yīng)不可避免，此外， 幾乎所有免疫抑制劑均存在停藥或減量后的復(fù)發(fā)。
[0005] 本申請(qǐng)的發(fā)明人在治療腎病蛋白尿方面有著豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，且在廣西中醫(yī)藥雜 志（2015年6月第38卷第3期)發(fā)表"雷根平主任醫(yī)師治療腎病蛋白尿經(jīng)驗(yàn)瑣談"的論文，在此 前并已研制成功"岐黃培補(bǔ)固腎片"，該藥的處方配比組成為：黃芪60g，生地黃30g，芡實(shí) 3〇g，荊芥l〇g，白花蛇舌草30g，丹參15g。其藥主要治療原發(fā)性腎病綜合征膜性腎病。但長(zhǎng)期 使用發(fā)現(xiàn)本方存在很多不足:生地黃寒涼，久服易傷脾胃，而致患者納差腹脹，舌苔厚膩。增 熟地黃填腎精而性溫，生、熟地黃同用不致脾胃過(guò)于寒涼而又同補(bǔ)腎精。因其滋膩，加防風(fēng) 之辛通，有風(fēng)藥化濕之功，久服未見(jiàn)舌苔厚膩之弊;芡實(shí)固精，但力顯較弱，增鹿銜草，具酸 收之性，加強(qiáng)固腎之力;丹參活血而力輕，大量蛋白尿時(shí)常常有血栓形成，其溶栓之力，降低 血小板聚集及血粘度遠(yuǎn)不及生水蛭。白花蛇舌草作用溫和，膜性腎病濕熱較重時(shí)常常需土 茯苓與白花蛇舌草聯(lián)用，效果顯著。臨床常根據(jù)尿蛋白量及血粘度指標(biāo)選用生水蛭用量。在 臨床應(yīng)用中，發(fā)現(xiàn)該藥的治療效果還不夠理想，因此，研制開(kāi)發(fā)一種更有效中藥制劑，有著 非常重大的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明目的在于提供一種療效顯著、毒副作用小的治療膜性腎病的中藥組合物及 其制備方法，該中藥組合物具有培補(bǔ)脾腎，益氣養(yǎng)陰，利濕活血的功效。
[0007] 方中黃芪培土制水，以水腫輕重而選用量之大小，生地黃、熟地黃補(bǔ)腎填精，取《內(nèi) 經(jīng)》："精不足者，補(bǔ)之以味"之意，共為君藥以治本;臣以芡實(shí)、鹿銜草固攝精微以治標(biāo);與黃 芪、生地黃、熟地黃同治蛋白尿。佐以土茯苓、白花蛇舌草清熱利濕;丹參、水蛭通利血脈;使 以荊芥、防風(fēng)宣肺，以利氣機(jī)，取下病治上之意，又具辛通之性，兼制地黃之膩。諸藥相合，共 奏培補(bǔ)脾腎，益氣養(yǎng)陰，利濕活血的功效。
[0008] 本發(fā)明技術(shù)方案提供一種用于治療膜性腎病的中藥組合物，它是由如下重量配比 的原料藥組成:黃芪60~120份，生地黃15~30份，熟地黃15~30份，芡實(shí)15~30份，鹿銜草 15~30份，土茯苓30~90份，白花蛇舌草30~90份，丹參15~30份，水蛭0.5~3份，荊芥6~ 12份，防風(fēng)6~12份。
[0009] 作為本發(fā)明的優(yōu)選，所述的中藥組合物是由如下重量配比的原料藥組成:黃芪90 份，生地黃22份，熟地黃22份，芡實(shí)22份，鹿銜草22份，土茯苓60份，白花蛇舌草60份，丹參22 份，水蛭1份，荊芥10份，防風(fēng)10份。
[0010] 本發(fā)明治療膜性腎病的中藥組合物的制備方法為:取所述重量配比的黃芪，生地 黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，土茯苓，白花蛇舌草，丹參，水蛭，荊芥，防風(fēng)，將上述原料藥進(jìn)行 干燥，并粉碎成細(xì)粉，混合均勻后，即得中藥混合物，再加入藥劑學(xué)上常用的輔料制成各種 不同口服制劑，即得。
[0011] 本發(fā)明治療膜性腎病的中藥組合物的制備方法還可以為:它是由下述工藝步驟制 備而成：
[0012] ⑴將土茯苓、水蛭粉碎成細(xì)粉；
[0013] ⑵再將黃芪，生地黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，白花蛇舌草，丹參，荊芥，防風(fēng)藥材合 并，加與藥材重量比為7~10倍量的水煎煮1~3次，每次0.5~2h，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮 干燥，并粉碎成干膏粉，備用；
[0014] (5)取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，再加 入藥劑學(xué)上常用的輔料制成各種不同口服制劑
[0015] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選，所述中藥組合物的制備工藝為：
[0016] ⑴將土茯苓、水蛭粉碎成100目細(xì)粉；
[0017] ⑵再將黃芪，生地黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，白花蛇舌草，丹參，荊芥，防風(fēng)藥材合 并，加與藥材重量比為9倍量的水煎煮2次，每次lh，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎 成干膏粉，備用；
[0018] (5)取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，再加 入藥劑學(xué)上常用的輔料制成各種不同口服制劑，即得。
[0019] 本發(fā)明所述中藥組合物可以制成顆粒劑、硬膠囊劑、片劑、滴丸或丸劑。
[0020] 顆粒劑:將所得中藥混合物，與適量的糊精、鹿糖，混勾，制粒，干燥，制成顆粒劑。 [0021 ]硬膠囊劑:將所得中藥混合物，加入適宜的輔料，制粒，裝膠囊，制成硬膠囊劑。
[0022] 片劑:將所得中藥混合物，與適量淀粉、糊精混勻，制粒，壓制成片劑。
[0023] 滴丸劑:將所得中藥混合物，與適量基質(zhì)，滴制成滴丸劑。
[0024] 丸劑:將所得中藥混合物，與適量的水、蜂蜜、羥甲基纖維素鈉制成丸劑。
[0025]本發(fā)明所用藥物的藥性如下：
[0026]黃苗:性味，甘，溫。歸經(jīng)，歸肺、脾經(jīng)。功能主治:補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生 肌。用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難 潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴;慢性腎炎蛋白尿，糖尿病。
[0027] 生地黃:性味，甘，寒。歸經(jīng)，功能主治:清熱涼血，養(yǎng)陰，生津。用于熱病舌絳煩渴， 陰虛內(nèi)熱，骨蒸勞熱，內(nèi)熱消渴，吐血，衄血，發(fā)斑發(fā)疹。
[0028] 熟地黃:性味，甘，微溫。歸經(jīng)，歸肝、腎經(jīng)。功能主治：滋陰補(bǔ)血，益精填髓。用于肝 腎陰虛，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精，內(nèi)熱消渴，血虛萎黃，心悸怔忡，月經(jīng)不調(diào)，崩漏下 血，眩暈，耳鳴，須發(fā)早白。
[0029] 芡實(shí)：性味，甘、澀，平。歸經(jīng)，歸脾、腎經(jīng)。功能主治：益腎固精，補(bǔ)脾止瀉，祛濕止 帶。用于夢(mèng)遺滑精，遺尿尿頻，脾虛久瀉，白濁，帶下。
[0030] 鹿銜草:性味，甘、苦，溫。歸經(jīng)，歸肝、腎經(jīng)。功能主治:祛風(fēng)濕，強(qiáng)筋骨，止血。用于 風(fēng)濕痹痛，腰膝無(wú)力，月經(jīng)過(guò)多，久咳勞嗽。
[0031] 土茯苓:性味，甘、淡，平。歸經(jīng)，歸肝、胃經(jīng)。功能主治：除濕，解毒，通利關(guān)節(jié)。用于 濕熱淋濁，帶下，癰腫，瘰疬，疥癬，梅毒及汞中毒所致的肢體拘攣，筋骨疼痛。
[0032] 白花蛇舌草:性味，甘、淡，涼。歸經(jīng)，胃、大腸、小腸經(jīng)。功能主治:清熱解毒，利尿消 月中，活血止痛。用于腸癰（闌尾炎），瘡癤腫毒，濕熱黃疸，小便不利等癥;外用治瘡癤癰腫，毒 蛇咬傷。
[0033] 丹參:性味，苦，微寒。歸經(jīng)，歸心、肝經(jīng)。功能主治:祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩。 用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕積聚，胸腹刺痛，熱痹疼痛，瘡瘍腫痛，心煩不眠；肝脾腫大， 心絞痛。
[0034] 水蛭:性味，咸、苦，平;有小毒。歸經(jīng)，歸肝經(jīng)。功能主治：破血，逐瘀，通經(jīng)。用于癥 瘕痞塊，血瘀經(jīng)閉，跌撲損傷。
[0035] 荊芥：性味，辛，微溫。歸經(jīng)，歸肺、肝經(jīng)。功能主治：解表散風(fēng)，透疹。用于感冒，頭 痛，麻疹，風(fēng)疹，瘡瘍初起。炒炭治便血，崩漏，產(chǎn)后血暈。
[0036] 防風(fēng):性味，辛、甘，溫。歸經(jīng)，歸膀胱、肝、脾經(jīng)。功能主治:解表祛風(fēng)，勝濕，止痙。用 于感冒頭痛，風(fēng)濕痹痛，風(fēng)疹瘙癢，破傷風(fēng)。
[0037] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果：
[0038]本申請(qǐng)的發(fā)明人經(jīng)過(guò)多年臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)的療效顯著的中藥組合物，所選藥材配伍 相宜，以中醫(yī)藥君臣佐使的配伍理論為指導(dǎo)，將上述諸藥相配，發(fā)揮協(xié)同增效的作用，使得 全方具有培補(bǔ)脾腎，益氣養(yǎng)陰，利濕活血的功效。并且全方具有標(biāo)本兼治、療效顯著，毒副作 用小的特點(diǎn)，對(duì)各種急、慢性腎炎，腎病綜合征所致的蛋白尿、水腫的患者具有顯著療效。藥 理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明中藥組合物對(duì)大鼠24h尿蛋白定量、血清ALB、TP、TC、TG均有明顯的改 善，其臨床總有效率可達(dá)到80%以上，且臨床療效優(yōu)于對(duì)照組(培補(bǔ)固腎方），適于在臨床上 大規(guī)模推廣。
[0039] 以下是對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的藥理研究試驗(yàn)，在研究中，為了簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作，節(jié)省研 究費(fèi)用，遵循平行對(duì)照的實(shí)驗(yàn)原則，摒除各個(gè)藥物組因劑型本身帶來(lái)的療效差異，從而更加 科學(xué)的突出本發(fā)明技術(shù)方案的創(chuàng)造性，我們以其中一個(gè)最為接近的技術(shù)方案的中間品組為 代表進(jìn)行研究，然這對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員完全可以由此推導(dǎo)，理解本申請(qǐng)中其它參數(shù)點(diǎn)技 術(shù)方案的有益效果，因此本發(fā)明技術(shù)內(nèi)容和藥效結(jié)果決不限于此范圍。
[0040] 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0041 ] 1材料與方法
[0042] 1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、模型制備及分組
[0043]選用雄性清潔級(jí)SD大鼠50只，體質(zhì)量（160 ± 20) g，陜西中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心 提供。50只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，隨機(jī)分為造模組40只和正常組10只。參照border方法造模 組大鼠每周3次尾靜脈注射陽(yáng)離子化牛血清白蛋白（C-BSA)復(fù)制膜性腎病模型，對(duì)照組尾靜 脈注射等容積0.9%氯化鈉注射液，連續(xù)注射4周后確認(rèn)造模成功后將造模成功大鼠分為5 組:正常組、模型組、對(duì)照組、治療1組，治療2組，每組為10只。
[0044] 1.2實(shí)驗(yàn)藥物、主要試劑與儀器
[0045] "對(duì)照組藥物"制備方法如下：
[0046]取黃芪60g，生地黃30g，芡實(shí)30g，荊芥10g，白花蛇舌草30g，丹參15g，用藥材8倍量 的水，進(jìn)行煎煮2次，合并濾液，過(guò)濾后，臨用前，加蒸餾水配制成混懸藥液，即得。
[0047] "治療1組藥物"的制備方法如下：
[0048]取黃芪90g，生地黃22g，熟地黃22g，芡實(shí)22g，鹿銜草22g，土茯苓60g，白花蛇舌草 60g，丹參22g，水蛭lg，荊芥10g，防風(fēng)10g;將上述原料藥進(jìn)行干燥，并粉碎成100目細(xì)粉，混 合均勻后，臨用前，加蒸餾水配制成混懸藥液，即得。
[0049] "治療2組藥物"的制備方法如下：
[0050] ⑴將土茯苓60g，水蛭lg，粉碎成100目細(xì)粉；
[00511⑵再將黃芪90g，生地黃22g，熟地黃22g，芡實(shí)22g，鹿銜草22g，白花蛇舌草60g，丹 參22g，荊芥10g，防風(fēng)10g，藥材合并，加與藥材重量比為9倍量的水煎煮2次，每次lh，濾過(guò)， 合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎成干膏粉，備用；
[0052]⑶取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，加蒸餾水配制成混懸藥 液，即得。
[0053] 牛血清白蛋白（BSA):美國(guó)Sigma公司，羊抗大鼠PAI-1多克隆抗體。SABC試劑盒:北 京中山生物技術(shù)有限公司；電熱恒溫水浴箱:H-l，W21-600,天津太斯特設(shè)備廠;全自動(dòng)生化 分析儀:Hitachi，7170A型，日本日立;切片機(jī)，ELCIA;HPIAS-1000型全自動(dòng)彩色病理圖像分 析系統(tǒng)，武漢千屏影像技術(shù)有限公司。
[0054] 1.3給藥方法
[0055]正常組和模型組的大鼠從造模結(jié)束第1天起，每日每只大鼠以每次5mL劑量的生理 鹽水灌胃給藥。
[0056]對(duì)照組從造模結(jié)束第一天起，每日每只大鼠以灌胃的形式給"對(duì)照組藥物"水煎劑 濃縮成25. Og/kg，原液每毫升含生藥2.0g，連續(xù)4周。治療1組、治療2組從造模結(jié)束第1天起， 用蒸餾水配成混懸液，分別給予"治療1組藥物"和"治療2組藥物"，按25. Og/kg的劑量給藥， 每次5mL。
[0057] 1.4檢測(cè)指標(biāo)與方法生化指標(biāo)測(cè)定：
[0058] 用自動(dòng)生化分析儀分別測(cè)定血清標(biāo)本中的白蛋白（Alb)，總蛋白（TP)、甘油三酯 (TC)、總膽固醇(TG);24h尿蛋白定量:采用雙縮脲法測(cè)定24h尿蛋白量;免疫熒光觀察:采用 間接免疫熒光法檢測(cè)lgG和補(bǔ)體C3;電鏡觀察：日立H7500型透射電鏡觀察腎小球基底膜、足 突的改變情況;腎組織PAI-1免疫組織化學(xué)檢測(cè)，采用SABC法（以PBS替代一抗的方法作為陰 性對(duì)照），光鏡觀察。腎實(shí)質(zhì)及問(wèn)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)棕褐色顆粒為陽(yáng)性。
[0059] 1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
[0060] 應(yīng)用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X 土 s)表示，組間參 數(shù)資料經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，組間參數(shù)資料經(jīng)配對(duì)T檢驗(yàn)，P〈0.05為有顯著差異。
[0061 ] 2結(jié)果
[0062] 2.1各組大鼠24h尿蛋白定量、血清TP、ALB、TC、TG的測(cè)定見(jiàn)表1。
[0063] 表1各組24h尿蛋白定量、血清ALB、TP、TC、TG的比較（X 土 S )
[0066] 注:與治療前比較*P〈0.05;與對(duì)照組治療后比較AP〈0.05。
[0067]由表1可見(jiàn)，造模后除正常組外，其他4組(模型組、對(duì)照組、治療1組、治療2組)均出 現(xiàn)明顯的蛋白尿，血清TP、ALB、TC、TG出現(xiàn)異常(P〈0.05)，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)造模成功。給藥第4周 末，對(duì)照組、治療1組及治療2組大鼠的尿蛋白定量、血清TC、TG水平顯著低于模型組，有顯著 性差異(P〈〇.05);治療1組和2組對(duì)大鼠尿蛋白定量、血清TC、TG水平改善優(yōu)于對(duì)照組。對(duì)照 組、治療1組及治療2組大鼠的血清TP、ALB水平明顯升高，與模型組比較，有顯著性差異(P〈 0.05)。與對(duì)照組比較，治療1組及治療2組的大鼠尿蛋白定量、血清TP、ALB、TC、TG水平有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義(P〈〇.〇5)。
[0068] 2.2免疫熒光觀察
[0069] 正常組幾乎無(wú)免疫復(fù)合物沉積，模型組、對(duì)照組、治療1組和治療2組有不同程度的 IgG和C3呈細(xì)顆粒狀沿毛細(xì)血管攀及部分系膜區(qū)沉積。模型組熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，對(duì)照組、 治療1組和治療2組的IgG和C3明顯減少。免疫熒光結(jié)果顯示，與模型組比較，對(duì)照組、治療1 組和治療2組的沉積顯著減少。
[0070] 2.3電鏡觀察
[0071]結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正常組大鼠的腎小球基底膜無(wú)增厚，上皮下無(wú)電子致密物沉積，足細(xì)胞 次級(jí)突起無(wú)融合;模型組大鼠腎小球基底膜增厚，呈波浪狀，足細(xì)胞次級(jí)突起消失，足突彌 漫融合，上皮下可見(jiàn)多數(shù)電子致密物沉積，不同部位的電子致密物部分溶解吸收，基底膜可 見(jiàn)不規(guī)則蟲(chóng)噬狀，腎小管細(xì)胞間隙增寬，可見(jiàn)脂滴，腎間質(zhì)纖維組織增生。對(duì)照組、治療1組 和治療2組的大鼠腎小球基底膜增厚較模型組明顯減輕，偶有足突融合，上皮下可見(jiàn)少數(shù)電 子致密物沉積，腎小管大致正常，腎間質(zhì)纖維組織增生明顯減輕。
[0072] 2.4各組大鼠PAI-1腎組織免疫組化觀察見(jiàn)表2。
[0073] 表2各組PAI-1的表達(dá)（X 士S)
[0076] 注:與正常組比較，AP〈0 ? 05;與對(duì)照組比較，*P〈0 ? 05。
[0077] PAI-1主要表達(dá)于腎小球和腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)，在正常組中有微量表達(dá)，模型組、 治療1組及治療2組大鼠腎組織中的表達(dá)較正常組增強(qiáng)(P〈0.05)，而治療1組及治療2組較模 型組明顯減輕(P〈〇.05);治療1組及治療2組調(diào)節(jié)PAI-1數(shù)值與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 〈0.05 )，提示本發(fā)明中藥組合物可以抑制膜性腎病大鼠PAI-1的過(guò)度表達(dá)。
[0078]本實(shí)驗(yàn)采用C-BSA建立大鼠膜性腎病模型，并應(yīng)用免疫組化的方法觀察PAI-1在該 模型中的表達(dá)，研究結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物能夠抑制膜性腎病腎組織中PAI-1的表 達(dá)，同時(shí)對(duì)24h尿蛋白定量、血清ALB、TP、TC、TG均有明顯的改善，證實(shí)本發(fā)明中藥組合物在 治療膜性腎病上具有顯著的優(yōu)勢(shì)。
【具體實(shí)施方式】
[0079]以下是本
【發(fā)明內(nèi)容】
的具體實(shí)施例，用于闡述本申請(qǐng)文件中所要解決技術(shù)問(wèn)題的技 術(shù)方案，有助于本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本
【發(fā)明內(nèi)容】
，但本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)現(xiàn)并不限于這些 實(shí)施例。
[0080] 實(shí)施例1
[00811取黃芪90g，生地黃22g，熟地黃22g，芡實(shí)22g，鹿銜草22g，土茯苓60g，白花蛇舌草 60g，丹參22g，水蛭lg，荊芥10g，防風(fēng)10g;將上述原料藥進(jìn)行干燥，并粉碎成100目細(xì)粉，混 合均勻后，即得中藥混合物，與適量的糊精、蔗糖，混勻，制粒，干燥，制成l000g顆粒劑。 [0082] 實(shí)施例2
[0083]取黃芪120g，生地黃30g，熟地黃15g，芡實(shí)15g，鹿銜草30g，土茯苓90g，白花蛇舌草 30g，丹參30g，水蛭3g，荊芥6g，防風(fēng)12g，將上述原料藥進(jìn)行干燥，并粉碎成100目細(xì)粉，混合 均勻后，即得中藥混合物，與適量淀粉、糊精混勻，制粒，壓制成1000個(gè)片劑。
[0084] 實(shí)施例3
[0085]取黃芪60g，生地黃15g，熟地黃30g，芡實(shí)30g，鹿銜草15g，土茯苓30g，白花蛇舌草 90g，丹參15g，水蛭0.5g，荊芥12g，防風(fēng)6g，上述原料藥進(jìn)行干燥，并粉碎成100目細(xì)粉，混合 均勻后，即得中藥混合物，加入碳酸鈣，硬脂酸鎂，制粒，裝膠囊，制成1000個(gè)硬膠囊劑。 [0086] 實(shí)施例4
[0087]⑴將土茯苓60g，水蛭lg，粉碎成100目細(xì)粉；
[0088]⑵再將黃芪90g，生地黃22g，熟地黃22g，芡實(shí)22g，鹿銜草22g，白花蛇舌草60g，丹 參22g，荊芥10g，防風(fēng)10g，藥材合并，加與藥材重量比為9倍量的水煎煮2次，每次lh，濾過(guò)， 合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎成干膏粉，備用；
[0089] ⑶取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，加入 適量的蜂蜜，水，攪拌均勻后，制成1 〇〇〇個(gè)丸劑。
[0090] 實(shí)施例5
[0091]⑴將土茯苓90g，水蛭3g，粉碎成100目細(xì)粉；
[0092]⑵再將黃芪120g，生地黃30g，熟地黃15g，芡實(shí)15g，鹿銜草30g，白花蛇舌草30g，丹 參30g，荊芥6g，防風(fēng)12g，藥材合并，加與藥材重量比為7倍量的水煎煮3次，每次0.5h，濾過(guò)， 合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎成干膏粉，備用；
[0093]⑶取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后與PEG4000基質(zhì)熱熔，攪 拌均勻，并進(jìn)行滴制，制成1000個(gè)滴丸。
[0094] 實(shí)施例6
[0095]⑴將土茯苓30g，水蛭0 ? 5g，粉碎成100目細(xì)粉；
[0096]⑵再將黃芪60g，生地黃15g，熟地黃30g，芡實(shí)30g，鹿銜草15g，白花蛇舌草90g，丹 參15g，荊芥12g，防風(fēng)6g，藥材合并，加與藥材重量比為10倍量的水煎煮1次，每次2h，濾過(guò)， 合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎成干膏粉，備用；
[0097] ⑶取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，，加入 微晶纖維素，淀粉，制粒，裝膠囊，制成1000個(gè)硬膠囊劑。
[0098] 為了進(jìn)一步驗(yàn)證本發(fā)明成品制劑的療效，我們將上述具體實(shí)施例1，4中制備的成 品顆粒劑和丸劑藥物進(jìn)行了相應(yīng)的臨床試驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
[0099] 2臨床觀察及療效
[0100] 2.1-般資料：
[0101] 收集153例膜性腎?。∕N)患者來(lái)源于2011年1月至2015年9月陜西中醫(yī)學(xué)院附屬 醫(yī)院腎內(nèi)科住院、門(mén)診病人。全部病例均符合原發(fā)性腎病綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)，153例患者隨機(jī) 分為3組，對(duì)照組30例，其中男19例，女11例;年齡18~70歲，平均年齡(40.6±22.3)歲；病程 6~80個(gè)月，平均病程（24.4± 11.5)個(gè)月。治療1組65例，其中男37例，女28例；年齡19~69 歲，平均年齡(38.1 ±19.7)歲；病程8~78個(gè)月，平均病程(21.9± 14.6)個(gè)月；治療2組58例， 其中男31例，女27例;年齡18~70歲，平均年齡(39.7± 18.3)歲；病程9~76個(gè)月，平均病程 (22.3± 12.3)個(gè)月。排除繼發(fā)性腎病綜合征、近期嚴(yán)重感染、嚴(yán)重心腦血管疾病及肝臟疾 病、妊娠和哺乳期婦女、精神病患者。三組患者的病例治療前在性別、年齡、平均年齡、病程、 平均病程、尿蛋白程度等方面比較，無(wú)顯著性差異(P>〇.05)，具有可比性。
[0102] 2.2治療方法
[0103]基礎(chǔ)治療:3組病例均予低鹽、低脂、優(yōu)質(zhì)蛋白飲食，并予以ACEI或ARB降壓、降尿蛋 白治療，血壓控制在130/80mmHg以下；并予以降脂、利尿消腫對(duì)癥治療。對(duì)于24小時(shí)尿蛋白 定量大于4.0g的中危組和高危組患者加用激素(每日40-60mg，晨起頓服，肝功能損害者換 用等量甲潑尼龍晨起頓服)及環(huán)磷酰胺(每月0.8-1.0g，分兩天靜脈滴注)治療。
[0104] 對(duì)照組:對(duì)照組的患者給予培補(bǔ)固腎方，其中黃芪60g，生地黃30g，芡實(shí)30g，荊芥 1 〇g，白花蛇舌草30g，丹參15g，每日1劑，水煎早晚溫服。連服6個(gè)月，為一個(gè)療程。
[0105] 治療1組：患者給予按照"實(shí)施例1組的技術(shù)方案"制備的中藥顆粒劑，每日早晚口 月艮2次，每次口服3個(gè)劑量單位。連服6個(gè)月，為一個(gè)療程。
[0106] 治療2組:患者給予按照"實(shí)施例4組的技術(shù)方案"制備的中藥丸劑，每日早晚口服2 次，每次口服3個(gè)劑量單位。連服6個(gè)月，為一個(gè)療程。
[0107] 2.3檢測(cè)指標(biāo)
[0108]①24小時(shí)尿蛋白定量(24U-TP);②腎功能:血清尿素氮(BUN)、肌酐(CREA);③肝功 能:血漿總蛋白（TP)、白蛋白（ALB);④血脂:總膽固醇(CH0L)、甘油三脂(TG)。
[0109] 2.4臨床療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
[0110]參照KDIG0腎小球腎炎臨床實(shí)踐指南制定。完全緩解:24小時(shí)尿蛋白定量<0.3g/d 間隔至少1周2次達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)伴有血清白蛋白及血肌酐在正常范圍；部分緩解:24小時(shí)尿 蛋白定量〈3.5g/d，且較峰值下降至少50%;間隔至少1周2次達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)血清白蛋白正 ?；蚋纳?，以及血肌酐穩(wěn)定;無(wú)效:未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)。
[0111] 2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0112] 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料采用表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P〈 〇. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0113] 2.6 結(jié)果
[0114] 2.6.1三組患者基線尿蛋白水平比較，見(jiàn)表3。
[0115] 表3三組基線尿蛋白水平比較
[0117] 2.6.2三組臨床療效比較見(jiàn)表4。
[0118] 表4三組療效比較
[0120] 注:與對(duì)照組比較，*P〈0.05。
[0121] 由實(shí)驗(yàn)結(jié)果表4,治療組1組和2組的總緩解率分別為為81.54%，87.93%，而對(duì)照 組總緩解率為73.33 %，與對(duì)照組比較，治療組1組和2組的總緩解率有顯著性差異（P〈 0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
[0122] 2.6.3三組24hU-TP、肝功能TP、ALB結(jié)果比較，見(jiàn)表5。
[0123] 表5三組TP、ALB、24h尿蛋白定量結(jié)果比較（X 土S)
[0125] 注:與治療前比較*P〈0.05，#P〈0.01;與對(duì)照組治療后比較Ap〈0.05。
[0126] 結(jié)果表5可知，三組患者治療前24hU-TP、TP、ALB無(wú)顯著性差異(P>0.05)，治療后三 組患者24hU-TP較治療前顯著下降（？〈0.01)，了？^1^明顯升高(？〈0.05或？〈0.01)，但治療1 組和2組的24hU-TP下降數(shù)值較對(duì)照組更顯著(P〈0.05)，TP、ALB改善更明顯(P〈0.05)。
[0127] 2.6.4三組不同蛋白尿水平緩解情況比較，結(jié)果見(jiàn)表6。
[0128] 表6三組患者不同蛋白尿水平總緩解率比較
[0130] 注:與對(duì)照組比較AP〈0 ? 05，叢?〈0 ? 01。
[0131] 從表6可見(jiàn)，經(jīng)過(guò)1個(gè)療程的治療后，三組低危組、中危組、高危組患者的蛋白尿均 明顯緩解;治療1組和2組對(duì)緩解中危組、高危組蛋白尿均顯著優(yōu)于對(duì)照組(P〈0.01)。
[0132] 2.6.5三組CH0L、TG、CREA結(jié)果比較，結(jié)果見(jiàn)表7。
[0133] 表7三組CH0L、TG、CREA檢測(cè)結(jié)果比較G ±S)
[0135] 注：與治療前比較 *P〈0 ? 05，#P〈0 ? 01。
[0136] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表7顯示，三組（對(duì)照組、治療1組和治療2組）的患者在治療前CH0L、TG、 CREA均無(wú)顯著性差異(P>0.05)，治療后三組患者體內(nèi)CH0L、TG水平均較治療前顯著下降(P〈 0.01)，CREA無(wú)顯著性差異。治療1組和治療2組的患者，治療后CH0L、TG雖無(wú)顯著性差異(P> 0.05)，其臨床療效均優(yōu)于治療組。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療膜性腎病的中藥組合物，其特征在于，它是由如下重量配比的原料藥組成： 黃芪60~120份，生地黃15~30份，熟地黃15~30份，芡實(shí)15~30份，鹿銜草15~30份，土茯 苓30~90份，白花蛇舌草30~90份，丹參15~30份，水蛭0.5~3份，荊芥6~12份，防風(fēng)6~12 份。2. 如權(quán)利要求1所述的治療腎病蛋白尿的中藥組合物，其特征在于，它是由如下重量配 比的原料藥組成:黃芪90份，生地黃22份，熟地黃22份，芡實(shí)22份，鹿銜草22份，土茯苓60份， 白花蛇舌草60份，丹參22份，水蛭1份，荊芥10份，防風(fēng)10份。3. 如權(quán)利要求1或2所述的治療膜性腎病的中藥組合物，其特征在于，所述的中藥組合 物可制成顆粒劑、片劑、硬膠囊劑、滴丸或丸劑。4. 如權(quán)利要求1~3中任一所述治療膜性腎病的中藥組合物的制備方法，其特征在于， 取所述重量配比的黃芪，生地黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，土茯苓，白花蛇舌草，丹參，水蛭，荊 芥，防風(fēng)，將上述原料藥進(jìn)行干燥，并粉碎成細(xì)粉，混合均勻后，即得中藥混合物，再加入藥 劑學(xué)上常用的輔料制成各種不同口服制劑，即得。5. 如權(quán)利要求1~3中任一所述治療膜性腎病的中藥組合物的制備方法，其特征在于， 它是由下述工藝步驟制備而成： ⑴將土茯苓、水蛭粉碎成細(xì)粉； ⑵再將黃芪，生地黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，白花蛇舌草，丹參，荊芥，防風(fēng)藥材合并，加 與藥材重量比為7~10倍量的水煎煮1~3次，每次0.5~2h，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮干燥， 并粉碎成干膏粉，備用； (5)取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，再加入藥 劑學(xué)上常用的輔料制成各種不同口服制劑，即得。6. 如權(quán)利要求5中所述治療膜性腎病的中藥組合物的制備方法，其特征在于，它是由下 述工藝步驟制備而成： ⑴將土茯苓、水蛭粉碎成100目細(xì)粉； ⑵再將黃芪，生地黃，熟地黃，芡實(shí)，鹿銜草，白花蛇舌草，丹參，荊芥，防風(fēng)藥材合并，加 與藥材重量比為9倍量的水煎煮2次，每次lh，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮干燥，并粉碎成干膏 粉，備用； (5)取上述步驟⑴中的細(xì)粉，步驟⑵的干膏粉，充分混勻后，即得中藥混合物，再加入藥 劑學(xué)上常用的輔料制成各種不同口服制劑，即得。
【文檔編號(hào)】A61K35/62GK105853678SQ201610250386
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月21日
【發(fā)明人】雷根平, 李小會(huì)
【申請(qǐng)人】陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院