異長春花苷內(nèi)酰胺在制備治療腸應(yīng)激綜合征的藥物中的應(yīng)用【
技術(shù)領(lǐng)域：
】[0001]本發(fā)明涉及一種化合物的新用途，具體涉及一種化合物在治療腸應(yīng)激綜合征方面的應(yīng)用?！?br>背景技術(shù)：
】[0002]腸易激綜合征（IrritableBowelSyndrome,IBS)，也稱腸易激綜合癥、腸應(yīng)激綜合征、過敏性腸綜合征、過敏性大腸綜合征、過敏性結(jié)腸炎、結(jié)腸痙攣、黏液性結(jié)腸炎、易激結(jié)腸、應(yīng)激性結(jié)腸綜合征，是一種常見的功能性腸道疾病，臨床上以腹痛或腹部不適，伴有大便性狀改變（稀便、黏液便）和排便習(xí)慣改變（腹瀉、便秘）等為特征，可持續(xù)存在或反復(fù)發(fā)作，但檢查無明顯生態(tài)學(xué)及生化異常改變。臨床上十分常見、發(fā)病率高，嚴(yán)重干擾了患者的生活質(zhì)量和工作。IBS發(fā)病原因較為復(fù)雜，是多種因素綜合的結(jié)果，其中心理、情緒、社會及環(huán)境因素在致病過程中起著極為重要的作用，并直接受中樞神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)的制約。根據(jù)臨床表現(xiàn)不同，IBS可分為便秘型（IBS-C)和腹瀉（IBS-D)，臨床上以腹瀉型(IBS-D)最為常見，在已確診為IBS的病例中占74.1%。[0003]目前市場上治療IBS的藥物種類繁多，但是很多藥物存在不良反應(yīng)，如抗膽堿藥雖能緩解腹痛、止瀉但易引起腹脹，并且長期服用會導(dǎo)致藥物依賴，反而增加便秘的頑固性，以及藥物治療對癥不全面等。[0004]異長春花苷內(nèi)酰胺是一種吲哚類生物堿糖苷，具有一定的抗腫瘤、抗炎、解熱、止痛、鎮(zhèn)咳平喘、抗色素沉著等方面的活性，專利及期刊文獻(xiàn)已有公開。而將異長春花苷內(nèi)酰胺用于治療腸易激綜合征未見報道。研究表明，異長春花苷內(nèi)酰胺在治療腸易激綜合征方面有顯著的功效，相比目前市場上的其他藥物，具有毒副作用小、不易產(chǎn)生依賴性、藥效顯著等特點。[0005]說明書[0006]本發(fā)明提供了異常春花苷內(nèi)酰胺在制備治療腸易激綜合征藥物中的新用途。[0007]本發(fā)明所述異長春花苷內(nèi)酰胺為市售或從含有該成分的植物或中藥材或中藥飲片中提取，包括但不限于烏檀、鉤藤、長春花、蛇根木、短小蛇根草、黃長春花、風(fēng)箱樹、雞仔木、蛇根木。[0008]本發(fā)明所述異常春花苷內(nèi)酰胺的新用途，是以異長春花苷內(nèi)酰胺為有效成分加入藥學(xué)常用輔料制成臨床常用劑型。[0009]為更好地理解本發(fā)明，發(fā)明人提供了以下研究資料說明本發(fā)明的技術(shù)效果，下述試驗僅用于說明本發(fā)明但不限于本發(fā)明。[0010]試驗一：異長春花苷內(nèi)酰胺（STR)靜脈注射給藥治療腸易激綜合征[0011]一、試驗材料[0012]馬來酸曲美布汀片，天津田邊制藥有限公司；匹維溴銨片，法國蘇威制藥；大黃藥材和番瀉葉藥材均購于康濟(jì)大藥房；5-羥色胺（5-HT)ELISA試劑盒（美國R&D公司）；烏拉坦，上海化學(xué)試劑一廠；0.9%生理鹽水；墨汁。[0013]異常春花苷內(nèi)酰胺注射劑：將異長春花苷內(nèi)酰胺以注射用水為溶劑，然后加入亞硫酸鈉、氯化鈉，充分?jǐn)嚢?，使全部溶解；然后加入針用活性炭?5°c攪拌20分鐘，再用注射用水定容，以〇.45μm的濾膜過濾除炭，再用0.22μm的濾膜濾過；灌裝，充氮，壓塞，乳蓋，于12CTC滅菌20min，放冷，即得。[0014]動物：SD大鼠，SPF級，40只，雌雄各半，體重180~220g，由蘇州工業(yè)園區(qū)愛爾麥特科技有限公司提供。KM種小鼠，清潔級，40只，雌雄各半，體重18~22g，由上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供。[0015]儀器：AL104電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；一次性使用無菌導(dǎo)尿管；玻璃均漿器；LDZ5-2型低速離心機(jī)，北京京力離心機(jī)有限公司；酶標(biāo)儀，MolecularDevices。[0016]二、試驗方法[0017]1、對大黃致小鼠腹瀉模型的影響[0018]健康KM小鼠稱重后隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性對照組（馬來酸曲美布?。?、試驗組（異長春花苷內(nèi)酰胺注射劑）。除正常對照組外，各組灌胃給予大黃水煎液（lg/只），連續(xù)8d，正常對照組給予同體積的蒸餾水，最后一次灌胃大黃水煎液后，記錄各組小鼠體重及稀便率。從第10天開始，試驗組以20mg/kg的劑量注射異長春花苷內(nèi)酰胺注射劑，陽性對照組灌胃給予馬來酸曲美布汀，正常對照組、模型組給予蒸餾水，容積為10mL/kg，每天給藥一次，連續(xù)3d。最后一次給藥前再次記錄各組小鼠體重及稀便率，記錄完畢后禁食不禁水24h，最后一次給藥后30min灌胃墨汁，20min后頸部脫臼處死小鼠并迅速解剖取出腸道，用直尺記錄小腸總長度和墨汁在腸道中推進(jìn)的距離（幽門到墨汁推進(jìn)前端的距離），計算推進(jìn)率。[0019]推進(jìn)率=(墨汁推進(jìn)距離/小腸全長）X100%[0020]表1STR對大黃致小鼠腹瀉模型的影響（X土s，η=10)[0021][0022]注：與模型組比較，*Ρ<0·05,#Ρ<0·01。[0023]表1結(jié)果顯示，試驗組藥物對大黃所致小鼠腹瀉具有明顯的治療作用。與模型組比較，試驗組藥物能夠顯著促進(jìn)腹瀉小鼠體重的恢復(fù)（Ρ<〇.01)，顯著降低腹瀉小鼠的稀便率（Ρ<0.05,0.01)，顯著降低小鼠的腸推進(jìn)距離和推進(jìn)率（Ρ<0.05)，改善小鼠腸道功能。[0024]2.對番瀉葉腹瀉型腸易激綜合征大鼠的影響[0025]健康SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性對照組、試驗組，分別記錄每只動物體重，除正常對照組外，其余組第1、2周灌胃番瀉葉煎液[6gAkg/d)];第2周直到第4周，灌服完番瀉葉煎液后即用膠帶束縛前肩、前上肢胸部，限制前上肢搔抓頭面部，但不限制其活動，束縛時間2h/d。第4周開始每次束縛完畢后立即給予相應(yīng)試驗藥物，試驗組靜脈注射異長春花苷內(nèi)酰胺注射劑（20mg/kg)，陽性對照組灌胃給予馬來酸曲美布汀，正常對照組及模型組給予同體積蒸餾水；每天給藥一次，連續(xù)3d。第3周開始記錄各組動物的體重和腸道敏感性。腸道敏感性測定方法：測試前一天大鼠禁食不禁水24h，大鼠頭部固定后，將導(dǎo)尿管沿大鼠肛門插入，深度約5cm，用橡皮筋把導(dǎo)管和大鼠尾巴根部纏在一起，15min后待大鼠適應(yīng)環(huán)境，用2.5mL注射器逐漸向?qū)蚬軆?nèi)推注蒸饋水0.5~1.2mL擴(kuò)張腸道，分別觀察引起大鼠腹部抬起以及背部拱起的蒸餾水體積閾值，進(jìn)行行為評估；15min后對每一閾值重復(fù)評估，共3次，最后一次給藥前，再按上述方法記錄每只動物的體重和腸道敏感性。最后一次給藥后半小時，各組大鼠灌胃墨汁，20min后處死，打開腹腔，將消化管自幽門至盲腸部，分離取出。不加牽引平鋪于木板上，測量幽門到墨汁推進(jìn)最前端的長度，計算推進(jìn)率。剖取結(jié)腸組織，生理鹽水沖洗干凈后，稱取〇.5g，用生理鹽水制成10%勻漿，1000g離心lOmin后，取上清采用ELISA法測定5-HT。結(jié)果見表2、3。[0026]表2STR對番瀉葉腹瀉型腸易激綜合征大鼠體重的影響（X土s，η=10)[0027][0028]注：與模型組比較，*Ρ<0·05,林Ρ<0·01。[0029]表3STR對番瀉葉腹瀉型腸易激綜合征大鼠腸道的影響（X土s，η=10)[0030][0031]注：與模型組比較，*Ρ<0·05,#Ρ<0·01。[0032]表2、3數(shù)據(jù)顯示，與模型組相比，試驗組可明顯升高番瀉葉腹瀉型腸易激綜合征大鼠的體重（Ρ<〇.01)，明顯提高腸道敏感性閾值（Ρ<〇.05)，降低腸推進(jìn)率（Ρ<0.01)，并且能顯著降低結(jié)腸組織5-HT水平（P<0.05,0.01)，從而改善腹瀉型腸易激綜合征大鼠腸道運(yùn)動功能異常。[0033]試驗二：異長春花苷內(nèi)酰胺（STR)灌胃給藥治療腸易激綜合征[0034]一、試驗材料[0035]試驗材料同試驗一所述材料。[0036]二、試驗方法[0037]1、對大黃致小鼠腹瀉模型的影響[0038]健康KM小鼠稱重后隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性對照組、試驗組。除正常對照組外，各組灌胃給予大黃水煎液（lg/只），連續(xù)8d，正常對照組給予同體積的蒸餾水，最后一次灌胃大黃水煎液后，記錄各組小鼠體重及稀便率。從第10天開始，試驗組以80mg/kg的劑量灌胃給予異長春花苷內(nèi)酰胺注射劑，陽性對照組灌胃給予匹維溴銨片，正常對照組、模型組給予蒸餾水，容積為10mL/kg，每天給藥一次，連續(xù)3d。最后一次給藥前再次記錄各組小鼠體重及稀便率，記錄完畢后禁食不禁水24h，最后一次給藥后30min灌胃墨汁，20min后頸部脫白處死小鼠并迅速解剖取出腸道，用直尺記錄小腸總長度和墨汁在腸道中推進(jìn)的距離（幽門到墨汁推進(jìn)前端的距離），計算推進(jìn)率。[0039]推進(jìn)率=(墨汁推進(jìn)距離/小腸全長）X100%[0040]表4STR對大黃致小鼠腹瀉模型的影響（X土s，η=10)[0041][0042]當(dāng)前第1頁1 2