頭孢拉定通過抑制t-lak細(xì)胞起源的蛋白激酶(topk)預(yù)防和/或治療topk活性異常增高的 ...的制作方法
【專利說明】頭孢拉定通過抑制T-LAK細(xì)胞起源的蛋白激酶(TOPK)預(yù)防和/或治療TOPK活性異常増高的皮膚炎癥
[0001]本發(fā)明屬于藥物新的藥理作用和疾病防治領(lǐng)域。具體涉及頭孢拉定抑制T-LAK細(xì)胞起源的蛋白激酶(TOPK)的生物活性，以及頭孢拉定通過抑制TOPK活性異常增高預(yù)防和/或治療炎癥和腫瘤的應(yīng)用，包括紫外線(UV)誘發(fā)的光線性皮膚病，如日曬傷和慢性光化性皮炎。
【背景技術(shù)】
[0002]臨床流行病學(xué)調(diào)查顯示，人體長期暴露在太陽光紫外線(SUV)下可產(chǎn)生皮膚炎癥和皮膚腫瘤，嚴(yán)重威脅人類健康。太陽光中的紫外線輻射根據(jù)波長的大小可以分為三類，波長為315?400nm的長波紫外線(UVA)，波長為280?315nm的中波紫外線(UVB)，和波長為200?280nm的短波紫外線(UVC)。但是經(jīng)過臭氧層時，幾乎全部的UVC，多達(dá)90%的UVB和10%的UVA都被吸收(Bode AM,and Dong Z.Mitogen-activated protein kinase activat1n inUV-1nduced signal transduct1n.2003；Sc1.STKE:RE2.doi:10.1126/stke.2003.167.re2)。長時間的UVA暴露，會產(chǎn)生過氧化物，造成DNA的損傷，UVB則可引起皮膚細(xì)胞DNA光加合物丁烷嘧啶二聚體的形成，影響皮膚細(xì)胞損傷后的修復(fù)，引起DNA的突變，導(dǎo)致皮膚癌的發(fā)生(Kielbassa C, Roza L, and Epe B.Wavelength dependence ofoxidative DNA damage induced by UV and visible light.Carcinogenesis.1997；18:811-816.(101:10.1093八&^(^11/18.4.811)(3因此，仍^和1^8被認(rèn)為是引起皮膚光損傷以及皮膚癌的主要因素。到達(dá)地球表面的紫外線主要是UVA(占到達(dá)地表SUV總量的95%)和少量的UVB(占到達(dá)地表SUV總量的5% K雖然，人們對于UVA及UVB作用機(jī)理做了大量研究，但是，人們對紫外線誘導(dǎo)的病理變化理解還不夠充分。紫外線輻射可導(dǎo)致氧化應(yīng)激，引起一系列的皮膚炎癥，諸如光線性皮膚病、銀肩病，甚至是皮膚癌(Svobodova A，Walterova D，andVostalova J.Ultrav1let light induced alterat1n to the skin.B1med Pap MedFac Univ Palacky Olomouc Czech Repub.2006; 150:25-38) D 因此，如若可以抑制引起光損傷的炎癥信號通路，就可以有效的防治紫外線輻射導(dǎo)致的皮膚光損傷。p38、JNK通路是細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯的主要通路(Kaminska B.MAPK signaling pathways as moleculartargets for ant1-1nflammatory therapy—from molecular mechanisms totherapeutic benefits.B1chim.B1phys.Acta.2005;1754:253-262.do1:10.1016/j.bbapap.2005.08.017；Schindler JF?Monahan JB，Smith WG.p38 pathway kinases asant1-1nflammatory drug targets.J Dent Res.2007;86:800—811.do1:10.1177/154405910708600902；Huang P，Han J，Hui L.MAPK signaling in inflammat1n-associated cancer development.Protein Cell.2010；I:218-226.doi:10.1007/s13238-010-0019-9)，紫外線輻照可激活此通路，導(dǎo)致皮膚炎癥的發(fā)生(Hwang BM?Noh EM，Kim JS，Kim JM，You YO?Hwang JK?Kwon KB，Lee YR.Curcumin inhibits UVB-1nduced matrixmetalloproteinase-1/3 express1n by suppressing the MAPK-p38/JNK pathways inhuman dermal fibroblasts.Exp Dermatol.2013；22:371-374.doi:10.1111/exd.12137)0
[0003]頭孢拉定(Cephradine，VeloSef)，別名:先鋒霉素V1、頭孢菌素VI等，為第一代半合成頭孢菌素。本品耐酸，為廣譜、高效、低毒抗生素，特點是耐β內(nèi)酰胺酶，對耐藥性金葡菌及其它多種對廣譜抗生素耐藥的桿菌等有迅速而可靠的殺菌作用，主要以原形經(jīng)尿排泄。臨床主要用于呼吸道、泌尿道、皮膚和軟組織等的感染。
[0004]Τ0ΡΚ，又名??Κ，即PDZ連接激酶及淋巴因子激活的殺傷性T淋巴細(xì)胞源性蛋白激酶，是一種絲-蘇氨酸激酶(Abe Y?Matsumoto S，Kito K，et al.Cloning and express1nof a novel MAPKK-1ike protein kinase ?lymphokine-activated killer T-cell-originated protein kinase?specificallyexpressed in the testis and activatedlymphoid celIs.J B1l Chem 2000;275:21525-21531;Gaudet S?Branton D，LueRA.Characterizat1n of PDZ—binding kinase?a mitotickinase.Proc NatlAcad Sci2000;97:5167-5172)，屬于MAPKK(Mitogen_ativated protein kinase kinase)分子家族的新成員。它是p38和JNKs的上游激酶(Abe Y，Matsumoto S，Kito K，Ueda N.Cloning andexpress1n of a novel MAPKK-1ike protein kinase，lymphokine—activated killerT~ceI1-originated protein kinase，specificalIy expressed in the testis andactivated lymphoid cells.J B1l Chem.2000；275:21525-21531.doi:10.1074/jbc.M909629199；0h SM,Zhu F，Cho YY?Lee Kff?Kang BS，Kim HG,Zykova T，Bode AM,DongZ.T-lymphokine-activated killer cell-originated protein kinase funct1ns as apositive regulator of c-Jun-NH2_kinasel signaling and H—Ras—induced celltransformat1n.Cancer Res.2007 ;67:5186-5194.do1: 10.1158/0008-5472) JOPK可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的有絲分裂，導(dǎo)致DNA的損傷，腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移以及機(jī)體炎癥的發(fā)生(Gaudet S，Branton D，and Lue RA.Characterizat1n of PDZ—binding kinase，a mitotickinase.Proc Natl Acad Sci USA.2000;97:5167-5172.do1:10.1073/pnas.090102397)。有研究表明，TOPK可參與紫外線誘導(dǎo)的DNA損傷，激活P38，磷酸化JNK(Liu K，Yu D，Cho YY，Bode AM，Ma W，Yao K，Li S，Li J?Bowden GT?Dong Z，Dong Z.Sunlight UV-1nduced skincancer relies upon activat1n of the p38asignaling pathway.Cancer Res.2013；73:2181-2188.do1:10.1158/0008-5472) J0PK可以磷酸化Serl39位點的H2AX，而磷酸化的H2AX則是檢測DNA損傷的生物標(biāo)志(Zykova TA?Zhu F，Lu C，Higgins L，Tatsumi Y，Abe Y，Bode AM?Dong Z.Lymphokine—activated killer T—cell—origihated protein kinasephosphorylat1n of histone H2AX prevents arsenite—induced apoptosis inRPMI7951 melanoma cells.Clin Cancer Res.2006;12:6884-6893.do1:10.1158/1078-0432；Kuo LJ，Yang LX.Gamma-H2AX-a novel b1marker for DNA double-strandbreaks.1n Viv0.2008;22:305-309)。因此，通過找到一種藥物阻斷TOPK途徑，可以為防治紫外線引起的DNA損傷及皮膚炎癥和腫瘤的防治提供了新的可能。
[0005]目前，人們只發(fā)現(xiàn)了兩種TOPK抑制劑，H1032和0TS514(KimDJ，Li Y，Reddy