甘露糖醒酸和聚古羅糖醒酸具有強(qiáng)的提高免疫力和活性，而 且，褐藻酸性多糖可W通過免疫活性增強(qiáng)淋己巨隧細(xì)胞的吞隧能力（酸性憐酸酶ACP)。運(yùn) 些多聚糖醒酸能夠增強(qiáng)甘露糖受體結(jié)合能力和巨隧細(xì)胞的吞隧能力，為本發(fā)明研究主動(dòng)祀 向淋己系統(tǒng)的核磁共振造影劑提供了可能。
[0012] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0013] 一種多聚糖醒酸為載體的活體染色造影劑，其具有W下結(jié)構(gòu)帶有簇基的多聚 糖醒酸為載體，所述載體上的6位簇基通過烷基、芳基或雜環(huán)基團(tuán)為連接臂，分別與甘露糖 受體MBP識(shí)別基團(tuán)配體A、順磁性金屬馨合物配體B或活體染劑配體C結(jié)合，具有W下通式：
[0014]
陽〇1引其中：叫是整數(shù)、n2、和n4是正整數(shù)；X為0、N或S;linker為烷基、芳香基或雜 環(huán)基；配體A為甘露糖受體MBP識(shí)別基團(tuán)；配體B為順磁性金屬馨合物；配體C為活體染劑。
[0016] 優(yōu)選的，所述的配體A的摩爾含量占所述的多聚糖醒酸原有簇基的0-30%，配體B 的摩爾含量占所述的多聚糖醒酸原有簇基的0-40%，配體C的摩爾含量占所述的多聚糖醒 酸原有簇基的1-30%，其中配體A的摩爾含量、配體B的摩爾含量、配體C的摩爾含量W及 多聚糖醒酸原有簇基中未反應(yīng)簇基的摩爾含量總和為100%。
[0017] 優(yōu)選的，所述的多聚糖醒酸載體為聚甘露糖醒酸PM、聚古羅糖醒酸PG、聚葡 萄糖醒酸、聚半乳糖醒酸及它們的嵌段共聚物并包括其相應(yīng)的簇酸鹽形式，分子量為 10〇-1〇8〇日。
[0018] 優(yōu)選的，與多糖6位簇基通過酷胺鍵結(jié)合的Linker為原子數(shù)目1到20的烷基、芳 香基或雜環(huán)基結(jié)構(gòu)，再與甘露糖受體MBP識(shí)別基團(tuán)配體A、順磁性金屬馨合物配體B或者活 體染劑配體C結(jié)合。
[0019] 優(yōu)選的，所述多聚糖醒酸的糖醒酸環(huán)簇基還W酷胺鍵連接有甘露糖受體MBP識(shí)別 基團(tuán)配體A，為a或P構(gòu)型的甘露糖及其衍生物，具體結(jié)構(gòu)如下：
[0020]
陽02U 其中，R為控基、簇基、氨基、徑基、面素。
[0022] 優(yōu)選的，所述順磁性金屬馨合物配體B由金屬馨合劑與順磁性金屬離子馨合而 成，金屬馨合劑為含氨基的金屬馨合劑，結(jié)構(gòu)如下：
[0023]
[0024] 或金屬馨合劑為不含氨基的金屬馨合劑，結(jié)構(gòu)如下： 陽0巧]
[0026] 所用順磁性金屬離子為Gd、Mn、化、Fe、Co、化、La、Tc、Dy或化的二價(jià)或S價(jià)離子。
[0027] 優(yōu)選的，所述的活體染劑配體C為甲苯胺藍(lán)、伊文思藍(lán)或?qū)Π被嫉健?br>[0028] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開一種制備多聚糖醒酸為載體的活體染色造影劑的 方法，包括W下步驟：
[0029] 第一步：將多聚糖醒酸和酷化試劑溶解于溶劑中，隨后依次加入烷基二胺類化合 物、活體染劑攬拌反應(yīng)1-2地，反應(yīng)完畢，澤滅反應(yīng)，溶液經(jīng)透析袋透析，除去小分子雜質(zhì)，得 到中間體，活體染劑、烷基二胺類化合物、酷化試劑、多聚糖醒酸所有簇基的投料摩爾比值 為 0-0. 999 :0. 001-100 :0.001-100 :1。
[0030] 第二步：將上步所述中間體和酷化試劑溶解于去離子水中，加入金屬馨合劑攬拌 反應(yīng)l-24h，反應(yīng)完畢澤滅反應(yīng)，澤滅反應(yīng)，向其加入金屬離子的水溶液，經(jīng)透析、冷凍干燥 處理后得到最終產(chǎn)品，所述金屬馨合劑、酷化試劑、金屬離子與多聚糖醒酸所有簇基的投料 摩爾比值為 0. 001-100 :〇. 001-100 :〇. 001-100 :1 ;
[0031] 優(yōu)選的，兩步酷化反應(yīng)的溶劑為水或DMS0、DMF極性非質(zhì)子溶劑，反應(yīng)溫度在0至 150°C之間。
[0032] 本發(fā)明的第=個(gè)目的在于公開另一種一種制備多聚糖醒酸為載體的活體染色造 影劑的方法，W采取W下步驟：
[0033] 第一步：將多聚糖醒酸和酷化試劑溶解于溶劑中，隨后加入甘露糖或甘露糖衍生 物攬拌反應(yīng)1-2地，反應(yīng)完畢，澤滅反應(yīng)，溶液經(jīng)透析袋透析，除去小分子雜質(zhì)，使用冷凍干 燥法處理得到中間體1，甘露糖或甘露糖衍生物、酷化試劑、多聚糖醒酸所有簇基=者的投 料摩爾比值為 0-0. 999 :0. 001-100 :1。
[0034] 第二步：將上步所述中間體1和酷化試劑溶解于去離子水中，加入帶氨基基團(tuán)的 金屬馨合劑攬拌反應(yīng)1-2地，反應(yīng)完畢澤滅反應(yīng)，澤滅反應(yīng)，溶液經(jīng)透析袋透析，除去小分子 雜質(zhì)，使用冷凍干燥法處理得到中間體2。
[0035] 第=步：將上步所述中間體2和酷化試劑溶解于去離子水中，緩慢加入活體染 劑攬拌反應(yīng)1-2地，反應(yīng)完畢澤滅反應(yīng)，澤滅反應(yīng)，溶液經(jīng)透析袋透析，除去小分子雜質(zhì)， 向其加入金屬離子的水溶液，經(jīng)透析、冷凍干燥處理后得到最終產(chǎn)品，所述金屬馨合劑、 酷化試劑、金屬離子與多聚糖醒酸所有簇基的投料摩爾比值為0.001-100:0. 001-100: 0.001-100 :1 ;。
[0036] 優(yōu)選的，S步酷化反應(yīng)的溶劑為水或DMS0、DMF極性非質(zhì)子溶劑，反應(yīng)溫度在0至 150°C之間。
[0037] 本發(fā)明的第四個(gè)目的在于公開所述的活體染色造影劑用于制備診斷淋己系統(tǒng)疾 病的試劑中的應(yīng)用。
[0038] 本發(fā)明所述造影劑，同時(shí)具有甘露糖受體識(shí)別片段，順磁性金屬馨合劑W及活體 染劑基團(tuán)，具有淋己主動(dòng)祀向性，動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)說明，它能準(zhǔn)確確定腫瘤前哨淋己結(jié)狀況， 術(shù)前淋己結(jié)顯像，有助于術(shù)中前哨淋己結(jié)定位和腫瘤精細(xì)外科手術(shù)過程中的淋己清掃術(shù)， 可W廣泛用于乳腺癌、頭頸癌、黑素瘤等術(shù)前前哨淋己結(jié)定位上。可W同時(shí)滿足活體檢查W 及核磁共振造影的要求，是優(yōu)秀的雙功能淋己祀向造影劑。
[0039] 本發(fā)明的有益效果是：
[0040] 1、W多聚糖醒酸如海洋褐藻多糖、聚古羅糖醒酸、聚甘露糖醒酸、聚葡萄糖醒酸為 載體制備的含有順磁金屬離子W及活體染劑的核磁共振造影劑，不僅在尺度上具有祀向淋 己毛細(xì)管和前哨淋己結(jié)的作用，同樣具有與淋己巨隧細(xì)胞的甘露糖受體結(jié)合作用，與目前 美國抑A批準(zhǔn)上市的核素造影劑Lymphoseek有相同的功效且可用于淋己組織活體檢查，明 顯優(yōu)于專利CN101862461.B發(fā)明造影劑HA-DTPA-Gd。
[0041] 2、大分子納米級核磁共振造影劑的關(guān)鍵點(diǎn)在于藥物的高水溶性。本發(fā)明在制備方 法上發(fā)展了一種水相進(jìn)行酷胺化反應(yīng)的方法，利用高效水相縮合劑，方便高產(chǎn)率地制備糖 基酷胺，引入馨合試劑，獲得水溶性的造影劑。
[0042] 3、本發(fā)明還發(fā)展了一種納米顆粒純化方法，采用水相透析膜方法，通過分子量控 審IJ，獲得70-80nm的水溶性造影劑。
【附圖說明】 陽0創(chuàng)圖1本發(fā)明實(shí)施例1中新西蘭兔皮下注射大分子顯影劑PM-TB-G曲TPA后的雙側(cè) 下肢淋己MR顯影圖片及動(dòng)物解剖圖。 W44] 其中，A:注射造影劑比后下肢淋己結(jié)解剖圖像；B:注射造影劑比后下肢淋己系 統(tǒng)MR圖像。
【具體實(shí)施方式】
[0045] 本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】如下：
[0046] W下結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說明。
[0047] 當(dāng)所述多聚糖醒酸為聚甘露糖醒酸時(shí)，具體分子式如下：
[0048]