綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物及其制備和純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物及其制備和純化方法，屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 綠原酸（chlorogenic acid，ChA)，又名咖啡親酸，是由咖啡酸（caffeic acid，CA) 與奎尼酸（雞鈉酸，quinic acid，QA)縮合而成的醋，屬多酷類化合物，具有廣泛的生物學(xué) 活性。其來源主要為忍冬科植物金銀花、忍冬、紅腺忍冬、山銀花或毛花柱忍冬的干燥花蕾 或帶初開的花，杜仲科植物杜仲的葉，薔薇科植物山楂的果實，千屈菜科植物千屈菜花，無 患子科植物坡柳，水龍骨科植物歐亞水龍骨根莖，馬鞭草科植物假敗醬根，十字花科植物卷 心菜莖葉，寥科植物扁蓄全草以及茜草科植物蓬子菜全草等。
[0003] 綠原酸是一種重要的生物活性物質(zhì)，具有抗菌、抗病毒、抗誘變、抗過敏，增高白血 球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、抗氧化作用，清除自由基和維持機體細(xì)胞正常的結(jié) 構(gòu)和功能、防止和延緩腫瘤突變和衰老等現(xiàn)象的發(fā)生、興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)和對心血管的保 護(hù)作用等。鑒于以上多方面的作用，普遍把綠原酸含量的高低作為衡量金銀花質(zhì)量的指標(biāo)。 現(xiàn)代科學(xué)對綠原酸生物活性的研宄也已深入到食品、保健、醫(yī)藥和日用化工等多個領(lǐng)域。
[0004] 綠原酸在化學(xué)結(jié)構(gòu)上屬于極性有機酸，極性大，水溶性強，其與鈉、鉀、鈣等金屬離 子形成的鹽也具有較大的極性和較好的水溶性，也就使得綠原酸及其鹽的膜透過性差，導(dǎo) 致給藥時生物利用度低，加之其在胃腸道中易被各種消化酶分解，更限制了 口服制劑的開 發(fā)。本發(fā)明中所涉及的綠原酸及其衍生物即包括綠原酸及其與鈉、鉀、鈣形成的鹽。
[0005] 磷酸甘油酯是一類含磷的脂質(zhì)類物質(zhì)，俗稱磷脂，是動植物細(xì)胞膜、核膜和類脂膜 的基本成分。它不是單一的物質(zhì)，主要是由為磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂 酰絲氨酸、磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油等成分組成。我們通常所說的大豆磷脂就是一種混合 磷脂，主要由磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇等組成；而卵磷脂的主要成分是磷脂 酰膽堿和不飽和脂肪酸；其主要成分為磷脂酰乙醇胺。
[0006] 磷脂具有極性基團磷酸酯基（親水頭部）和非極性脂肪酸鏈（疏水尾部）而表現(xiàn) 雙親性。但由于帶有兩條較長的脂肪鏈，親脂性大于親水性；當(dāng)磷脂的極性部分與藥物分子 通過電荷作用形成脂質(zhì)修飾物，又稱為磷脂復(fù)合物。其形成機理是磷脂中磷原子上羥基中 的氧原子有較強的得電子傾向，而磷脂酰膽堿基團中氮原子有較強的失電子傾向，因此在 一定條件下可與一定結(jié)構(gòu)的藥物復(fù)合而形成復(fù)合物。復(fù)合后其電荷被中和，兩者極性均降 低，被包裹的藥物分子與磷脂脂肪鏈間的范德華力增強；此外，由于藥物分子與磷脂發(fā)生作 用后，彼此被固定，抑制了分子間及分子內(nèi)鍵的自由轉(zhuǎn)動；同時，藥物分子插入磷脂分子中， 使得磷脂的兩條長脂肪鏈間的有序性降低。因此，可自由轉(zhuǎn)動的兩條長脂肪鏈將被固定的 磷脂極性端及藥物包裹起來形成一個具有親脂性表面的微小球囊狀結(jié)構(gòu)。有利于增強藥物 分子的親脂性，增強與細(xì)胞膜的親和力，促進(jìn)藥物吸收，降低藥物不良反應(yīng)，增加藥物在體 內(nèi)作用時的生物利用度。
[0007] 經(jīng)科技文獻(xiàn)及專利檢索，尚未發(fā)現(xiàn)利用磷脂對綠原酸及其鹽進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾的報 道。本發(fā)明即是在上述【背景技術(shù)】下開始的研宄，目的是希望通過磷脂對綠原酸及其鹽進(jìn)行 脂質(zhì)修飾，從而獲得一種脂質(zhì)修飾物，以克服其膜透過性差，給藥時生物利用度低的局限 性，同時改善了綠原酸及其鹽的溶解性能，便于后續(xù)制劑的開發(fā)和加工，尤其能夠解決其在 胃腸道中由于易被各種消化酶分解，限制口服制劑的開發(fā)等方面的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明針對綠原酸及其衍生物由于良好的極性，膜透過性差，給藥時生物利用度 低，且在胃腸道中由于易被各種消化酶分解，限制口服制劑的開發(fā)等方面的問題，制備一種 綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物，即磷脂復(fù)合物，以改善藥物的親脂性，增強其與體內(nèi)細(xì)胞 的親和力，增加藥物作用時的生物利用度，并且為后續(xù)制劑的加工成型提供更易操作的中 間體。
[0009] 本發(fā)明的綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物，包括綠原酸及其衍生物和磷酸甘油酯， 其中，綠原酸及其衍生物與磷酸甘油酯的重量比為1 : 0.5~25。其中，所述綠原酸及其衍 生物與磷酸甘油酯的質(zhì)量比優(yōu)選為I : 1~15,進(jìn)一步優(yōu)選為1 : 3~10。其中，綠原酸 及其衍生物為綠原酸、綠原酸鈉鹽、綠原酸鉀鹽和綠原酸鈣鹽中的一種或一種以上任意比 例的混合物。其中，磷酸甘油脂為磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、 磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油中的一種或一種以上任意比例的混合物。
[0010] 所述綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物的制備和純化方法，包括如下步驟：
[0011] (1)綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物的制備：
[0012] a、取綠原酸及其衍生物以及相當(dāng)于綠原酸及其衍生物重量0. 5~25倍的脂質(zhì)；
[0013] b、加入適量溶劑，所用溶劑的用量為使綠原酸及其衍生物的反應(yīng)濃度保持在一定 濃度范圍內(nèi)；
[0014] c、于適宜溫度條件下恒溫磁力攪拌回流一定時間得反應(yīng)液；
[0015] d、將步驟c所述反應(yīng)液冷凍干燥或減壓干燥，得綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物脂 月吳粗品；
[0016] (2)綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物的純化：
[0017] a、向上述步驟（1)制備得到的綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物脂膜粗品加入復(fù)溶 劑，使其充分分散得分散液；
[0018] b、將上述分散液過濾，取其濾液再次冷凍干燥或減壓干燥，即得綠原酸及其衍生 物脂質(zhì)修飾物精品。
[0019] 在上述制備和純化過程中，對反應(yīng)條件及反應(yīng)所用試劑進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)選和限 定，具體如下：
[0020] 其中，綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物的制備過程中，加入的反應(yīng)溶劑的用量為能 夠使綠原酸及其衍生物的藥物濃度在6~48mg/ml的范圍內(nèi)。
[0021] 其中，綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物制備過程中所用溶劑選自氯仿、二氯甲烷、正 己烷、乙醇、四氫呋喃、二氧六環(huán)、乙酸乙酯和丙酮中的一種或一種以上任意比例的混合溶 劑。
[0022] 其中，綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物制備過程中所述的適宜溫度范圍為10~ 65°C，優(yōu)選15~55°C，進(jìn)一步優(yōu)選為20~50°C。
[0023] 其中，綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物純化過程中所用復(fù)溶劑選自乙醚、氯仿、二氯 甲烷、乙酸乙酯和苯中的一種或一種以上任意比例的混合溶劑。復(fù)溶過濾純化的機理在于 綠原酸及其衍生物與脂質(zhì)復(fù)合后形成的脂質(zhì)修飾物能夠或易溶于所選擇的復(fù)溶劑中，而綠 原酸及其鹽在這些復(fù)溶劑中難溶或不溶或溶解度極低，經(jīng)過復(fù)溶后，游離的未被復(fù)合的綠 原酸及其鹽會形成沉淀析出，過濾后除去游離藥物即得脂質(zhì)修飾物的溶液，除去溶劑后得 到脂質(zhì)復(fù)合物精品。
[0024] 其中，在綠原酸及其衍生物脂質(zhì)修飾物的制備和純化過程中冷凍干燥或減壓干燥 的溫度為25~55 °C。
[0025] 本發(fā)明所制備得到脂質(zhì)修飾物是一種復(fù)合物，而不是新的化合物。高效液相色譜 法測定結(jié)果顯示，脂質(zhì)修飾物與綠原酸及其衍生物具有相同的保留時間。此外，脂質(zhì)修飾物 與綠原酸及其衍生物和磷脂的物理混合物在差示掃描量熱圖中存在明顯差別，脂質(zhì)修飾物 沒有明顯的吸放熱現(xiàn)象，而物理混合物有吸放熱現(xiàn)象，且吸放熱速率不均一。
[0026] 綠原酸及其衍生物與脂質(zhì)在一定條件下反應(yīng)后形成的磷脂復(fù)合物，具有以下的有 益效果：
[0027] 1、提高了藥物的親脂性，增強了藥物作用時的膜透過性，提高藥物的生物利用度。
[0028] 2、降低或消除了胃腸道中被各種消化酶分解，解決了 口服制劑開發(fā)中的諸多問題 和難題。
[0029] 3、增強了綠原酸及其衍生物在油相、乳化劑、助乳化劑等中的溶解度，便于后續(xù)制 劑的加工成型。
[0030] 本發(fā)明所制備的綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物，可以作為有效成分與藥學(xué)上可 以接受的其他藥物輔料一起制備適合臨床給藥的任何給藥形式。其中所述藥學(xué)上可以接 受的其它藥用輔料包括纖維素衍生物、淀粉類、水、小分子醇類、磷脂、膽固醇、環(huán)糊精、乳化 劑、高分子聚合物等。
[0031 ] 本發(fā)明中所制備的綠原酸及其衍生物的脂質(zhì)修飾物，可以用于制備藥劑學(xué)中傳統(tǒng) 的及臨床上使用最為廣泛的片劑、膠囊劑、注射劑、注射用凍干粉針劑及藥劑學(xué)上一些新型 給藥系統(tǒng)，如鈉米給藥系統(tǒng)。其中片劑可為普通片劑或包衣片劑，膠囊劑可為軟膠囊或硬膠 囊，尤其是可供制備明膠軟膠囊劑型。其中所述的鈉米給藥系統(tǒng)包括脂質(zhì)體、鈉米粒、聚合 物膠束和樹枝狀聚合物等具有靶向定