穩(wěn)定的阿達(dá)木單抗水性制劑的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】穩(wěn)定的阿達(dá)木單抗水性制劑 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及適合于阿達(dá)木單抗（包括考慮或打算作為市售阿達(dá)木單抗的"生物仿 制"或"生物改良"變體的抗體蛋白質(zhì)）的長(zhǎng)期儲(chǔ)存的水性藥物組合物，制造這些組合物的 方法，它們的施用方法，以及含有這些組合物的試劑盒。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 腫瘤壞死因子a (TNF α )是由多種細(xì)胞類(lèi)型（包括單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞）響應(yīng)于 內(nèi)毒素或其他刺激產(chǎn)生的天然存在的哺乳動(dòng)物的細(xì)胞因子。TNF α是炎性反應(yīng)、免疫反應(yīng)和 病理生理反應(yīng)的主要介體（Grell, M，et ah (1995) Cell, 83:793-802)。
[0004] 可溶性TNF α通過(guò)前體跨膜蛋白的裂解形成（Kriegler, et al. (1988) Cell 53:45-53)，并且分泌的17kDa多肽組裝成可溶性三同聚體復(fù)合物（Smith, et al. (1987)，J. Biol. Chem. 262:6951-6954 ;對(duì)于 TNF 的綜述，參見(jiàn) Butler, et al. (1986)， Nature320:584 ;01d (1986)，Science 230:630)。然后這些復(fù)合物結(jié)合存在于多種細(xì)胞上的 受體。結(jié)合產(chǎn)生一些促炎作用，包括：（i)釋放其他促炎細(xì)胞因子，如白介素（IL)_6、IL-8 和IL-1，（ii)釋放基質(zhì)金屬蛋白酶和（iii)上調(diào)內(nèi)皮粘附分子的表達(dá)，通過(guò)吸引白細(xì)胞到 血管外組織中進(jìn)一步放大炎性和免疫級(jí)聯(lián)。
[0005] 存在許多與升高的TNFa水平相關(guān)的病癥。例如，在許多人類(lèi)疾病中已經(jīng)顯示 TNFa被上調(diào)，這些人類(lèi)疾病包括慢性疾病，例如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA)，炎性腸道疾病，包括 克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎，敗血癥，充血性心臟衰竭，支氣管哮喘和多發(fā)性硬化癥。TNF a 也被稱(chēng)為促炎細(xì)胞因子。
[0006] 生理學(xué)上，TNF α還與特定感染的保護(hù)相關(guān)聯(lián)（Cerami. et al. (1988)，Immunol. Today 9:28)。TNFa由已經(jīng)被革蘭氏陰性菌的脂多糖活化的巨噬細(xì)胞釋放。照此，TNFa 似乎是涉及與細(xì)菌性敗血癥有關(guān)的內(nèi)毒素性休克的發(fā)展和發(fā)病機(jī)制的至關(guān)重要的內(nèi)源性 介體。
[0007] 阿達(dá)木單抗（Humira?，AbbVie公司）是對(duì)人TNF特異的重組人IgGl單克隆抗 體。該抗體也被稱(chēng)為D2E7。阿達(dá)木單抗由1330個(gè)氨基酸組成并且具有大約148千道爾頓 的分子量。美國(guó)專(zhuān)利第6090382號(hào)已經(jīng)描述并且要求保護(hù)阿達(dá)木單抗，其全部公開(kāi)內(nèi)容在 此通過(guò)引用并入本文中。阿達(dá)木單抗通常是通過(guò)重組DNA技術(shù)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中 產(chǎn)生，所述哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)諸如，例如，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞。阿達(dá)木單抗特異性地結(jié) 合TNF α并通過(guò)阻斷TNF與p55和p75細(xì)胞表面TNF受體的相互作用來(lái)中和TNF的生物學(xué) 功能。
[0008] 各種阿達(dá)木單抗制劑是本領(lǐng)域已知的。參見(jiàn)，例如，美國(guó)專(zhuān)利8216583和8420081。 仍然需要能夠?qū)崿F(xiàn)長(zhǎng)期儲(chǔ)存而無(wú)功效顯著損失的穩(wěn)定的阿達(dá)木單抗液體制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明提供包括能夠?qū)崿F(xiàn)長(zhǎng)期儲(chǔ)存的包含阿達(dá)木單抗的穩(wěn)定的水性制劑。
[0010] 在第一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的水性藥物組合物，其包括阿達(dá)木單 抗；包括選自多元醇和表面活性劑中的至少一種的穩(wěn)定劑；和選自檸檬酸鹽、磷酸鹽、琥珀 酸鹽、組氨酸鹽、酒石酸鹽和馬來(lái)酸鹽的緩沖劑，其中所述組合物具有約4至約8并且優(yōu)選 約5至約6的pH，并且其中，所述緩沖劑不包括檸檬酸鹽和磷酸鹽的組合，以及優(yōu)選不包括 任何檸檬酸鹽緩沖劑。在本實(shí)施方案中，穩(wěn)定劑優(yōu)選包括多元醇和表面活性劑。
[0011] 在第二個(gè)實(shí)施方案中，利用單緩沖系統(tǒng)，本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的水性藥物組合 物，其包括阿達(dá)木單抗、多元醇、表面活性劑和包括單緩沖劑的緩沖系統(tǒng)，所述單緩沖劑選 自檸檬酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組氨酸鹽、酒石酸鹽或馬來(lái)酸鹽，但不包括上述的組合；其 中，所述制劑具有約4至8并且優(yōu)選約5至約6的pH。組氨酸鹽和琥珀酸鹽特別優(yōu)選地用 作單緩沖劑。如本文所用的術(shù)語(yǔ)緩沖劑、緩沖系統(tǒng)、或緩沖劑和類(lèi)似的術(shù)語(yǔ)意在表示在制 劑中引入除了由蛋白質(zhì)本身提供的緩沖容量之外的緩沖容量的緩沖組分，因此，術(shù)語(yǔ)"緩沖 劑"等并非意在包括作為自緩沖實(shí)體的該蛋白質(zhì)自身。
[0012] 在第三個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的水性藥物組合物，其包括阿達(dá)木單 抗，包括選自多元醇與表面活性劑中的至少一種的穩(wěn)定劑，其中，所述組合物具有約4至約 8并且優(yōu)選約5至約6的pH，并且其中，所述組合物基本上不含緩沖劑。
[0013] 在第四個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的水性藥物組合物，其包括阿達(dá)木 單抗，多元醇，和選自檸檬酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組氨酸鹽、酒石酸鹽和馬來(lái)酸鹽的緩沖 劑，其中，所述組合物具有約4至約8并且優(yōu)選約5至約6的pH，并且其中，所述組合物不含 或基本上不含表面活性劑。優(yōu)選地，該組合物（i)不包含檸檬酸鹽和磷酸鹽的緩沖組合；以 及（ii)所述緩沖劑為選自組氨酸鹽和琥珀酸鹽中的至少一種；以及（iii)多元醇選自甘露 醇、山梨醇和海藻糖。
[0014] 在第五個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的水性藥物組合物，其包括阿達(dá)木 單抗，表面活性劑，以及選自檸檬酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組氨酸鹽、酒石酸鹽和馬來(lái)酸鹽 的緩沖劑，其中，所述組合物具有約4至8并且優(yōu)選約5至約6的pH，并且其中，所述組合物 基本上不含多元醇。優(yōu)選地，該組合物（i)不包含檸檬酸鹽和磷酸鹽的緩沖組合；以及（ii) 所述緩沖劑為選自組氨酸鹽和琥珀酸鹽中的至少一種，包括它們的組合。
[0015] 在上述討論的五個(gè)實(shí)施方案中的每一個(gè)中，所述組合物可以任選地進(jìn)一步包括選 自氨基酸、鹽、乙二胺四乙酸（EDTA)和金屬離子的穩(wěn)定劑。氨基酸穩(wěn)定劑可以選自甘氨酸、 丙氨酸、谷氨酸、精氨酸和蛋氨酸。鹽穩(wěn)定劑可以選自氯化鈉和硫酸鈉。金屬離子穩(wěn)定劑可 以選自鋅、鎂和鈣。優(yōu)選地，包含上述穩(wěn)定劑的阿達(dá)木單抗制劑也不包含其中磷酸鹽緩沖劑 和檸檬酸鹽緩沖劑組合存在的緩沖系統(tǒng)，并且，最優(yōu)選包含不含或基本上不含檸檬酸鹽緩 沖劑的緩沖系統(tǒng)。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，（i)存在于本實(shí)施方案的任選附加的穩(wěn)定劑 不是氯化鈉，或者包括存在量不超過(guò)約IOOmM的氯化鈉，并且包括精氨酸和甘氨酸中的至 少一種，包括這兩種氨基酸的組合；（ii)所述緩沖劑，當(dāng)存在時(shí)，不含有檸檬酸鹽，或者至 少?zèng)]有檸檬酸鹽和磷酸鹽組合，而是含有組氨酸鹽和琥珀酸鹽中的至少一種，包括它們的 組合；以及（iii)當(dāng)穩(wěn)定劑包括多元醇時(shí)，穩(wěn)定劑優(yōu)選是量超過(guò)約150mM的甘露醇。
[0016] 在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種水性的、緩沖的藥物組合物，其包括阿達(dá) 木單抗和緩沖劑，其中（i)該組合物不含或基本上不含包括檸檬酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖 劑的緩沖組合；以及（ii)該組合物顯示出長(zhǎng)期的穩(wěn)定性。
[0017] 本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及表現(xiàn)出長(zhǎng)期穩(wěn)定性的水性、緩沖藥物組合物，所述 組合物包括：（i)阿達(dá)木單抗；（ii)選自組氨酸鹽緩沖劑、琥珀酸鹽緩沖劑以及它們的組合 的緩沖劑；（iii)聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性劑，或它們的組合；以及（iv)以下的一種 或者兩種：(a)選自甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸、蛋氨酸、EDTA、氯化鈉、硫酸鈉、金屬離 子以及它們的組合的穩(wěn)定劑；和（b)選自山梨醇、甘露醇和海藻糖或它們的組合的多元醇。 任選地，該制劑還可以包括糖，如蔗糖。
[0018] 在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明是一種包括阿達(dá)木單抗和緩沖劑的水性的、緩沖 的藥物組合物，其中（i)該組合物不含或基本不含多元醇；和（ii)該組合物顯示出長(zhǎng)期的 穩(wěn)定性。
[0019] 在又一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種包括阿達(dá)木單抗和緩沖劑的水性 的、緩沖的藥物組合物，其中（i)該組合物不含或基本上不含表面活性劑；和（ii)該組合物 顯示出長(zhǎng)期的穩(wěn)定性。
[0020] 發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及包括阿達(dá)木單抗的水性藥物組合物，其中：（i)該組 合物不含或基本上不含緩沖劑；和（ii)該組合物顯示出長(zhǎng)期的穩(wěn)定性。
[0021] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的阿達(dá)木單抗制劑包括，由或基本上由阿達(dá)木單抗、 作為制劑中的唯一的緩沖劑的組氨酸緩沖劑、較早引用的非表面活性劑穩(wěn)定劑中的作為唯 一的穩(wěn)定劑的甘氨酸（或精氨酸，或它們的組合）和聚山梨醇酯80組成。在該制劑中，阿達(dá) 木單抗的量為20至150mg/ml ;組氨酸緩沖劑的量多達(dá)約50mM ;甘氨酸的量多達(dá)約300mM ; 以及聚山梨醇醋80的量在約0. 01至約0. 2wt %的范圍內(nèi)。任選地，該制劑可包括多達(dá)約 IOOmM的NaCl。本發(fā)明還考慮對(duì)該制劑修飾以使組氨酸緩沖劑與檸檬酸鹽、乙酸鹽、磷酸 鹽、馬來(lái)酸鹽、酒石酸鹽緩沖劑中的一種或者多種組合。
[0022] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的阿達(dá)木單抗制劑包括，由或基本上由阿達(dá)木單抗、 作為唯一的緩沖劑的組氨酸緩沖劑、甘露醇（或山梨醇或海藻糖）和聚山梨醇酯80組成， 并且進(jìn)一步不含或者基本上不含以上引用的非表面活性劑穩(wěn)定劑（例如甘氨酸，精氨酸 等）。在此制劑中，阿達(dá)木單抗的量為20至150mg/ml ;組氨酸緩沖劑的量多達(dá)約50mM ;多 元醇的量多達(dá)約300mM ;并且聚山梨醇酯80的量在約0. 01至約0. 2wt %的范圍內(nèi)。任選 地，該制劑可以包括多達(dá)約IOOmM的NaCl。本發(fā)明還考慮對(duì)該制劑修飾以使組氨酸緩沖劑 與檸檬酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽、馬來(lái)酸鹽、酒石酸鹽緩沖劑中的一種或者多種組合。
[0023] 在方法方面，本發(fā)明涉及一種用于提高水性、緩沖的阿達(dá)木單抗制劑的長(zhǎng)期穩(wěn)定 性的方法，其包括以下的一個(gè)或者多個(gè)步驟：(a)基于表明這些緩沖劑相比于其他緩沖劑 或者緩沖劑組合在更大程度上有助于所述制劑的穩(wěn)定性的經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)，將組氨酸緩沖劑、琥 珀酸鹽緩沖劑或它們的組合加入所述制劑中；或者（b)基于表明這種穩(wěn)定劑相比于其他 穩(wěn)定劑在更大程度上有助于所述制劑的穩(wěn)定性的經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)，將甘氨酸、精氨酸或它們的組 合作為穩(wěn)定劑加入所述制劑中；或者；（c)基于表明這種緩沖劑或者緩沖劑組合相比于其 他緩沖劑在穩(wěn)定所述制劑方面表現(xiàn)不佳的經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)，基本上排除包括檸檬酸鹽緩沖劑的緩 沖劑或者緩沖劑組合（特別是包括檸檬酸鹽和磷酸鹽的緩沖劑組合）的存在。該方法可 以進(jìn)一步包括基于表明PS80相比于其他表面活性劑（包括PS20)賦予阿達(dá)木單抗制劑更 好的熱穩(wěn)定性的經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù)選