一種用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體及其制備方法，屬于藥物制劑領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 尼莫地平（Nimodipine，NM)是一種選擇性擴張腦血管作用較強的二氫吡啶類鈣 離子拮抗劑，臨床藥理學(xué)和治療研究證明，尼莫地平對蛛網(wǎng)膜下腔出血、偏頭痛、腦卒中、突 發(fā)性耳聾、由慢性腦血管疾患所致的腦功能紊亂等疾病有良好的治療效果。但因匪水溶性 差且存在嚴重的首過效應(yīng)，其片劑、膠囊劑等口服制劑生物利用度低，平均生物利用度僅為 5~20%，為了維持療效，患者需大劑量、頻繁用藥，這不僅增加了藥物的毒副作用，且口服 后尼莫地平轉(zhuǎn)運入腦的濃度易受生理因素變化的影響，臨床效果波動較大，難以保證藥效 的有效發(fā)揮。其注射劑又存在藥物易解離的穩(wěn)定性問題、以及因水溶性差需添加增溶劑產(chǎn) 生的刺激性問題，患者順應(yīng)性較差，而更為主要的是注射劑需要一定的醫(yī)療操作條件，在患 者腦卒中發(fā)作時，往往在到達醫(yī)院前無法及時施用藥物，或用藥時已經(jīng)錯過了最佳時機，造 成機體無法恢復(fù)的損傷。
[0003] 因此開發(fā)鼻腔給藥制劑具有現(xiàn)實意義。但鼻腔給藥系統(tǒng)存在的兩大問題是藥物對 鼻粘膜的毒性和藥物的有效吸收。除了選擇低毒性的制劑材料以減少刺激，還要選擇合適 的劑型以提高藥物在鼻腔內(nèi)的吸收。近年來，隨著鼻腔給藥系統(tǒng)的發(fā)展，劑型的種類也多種 多樣，常規(guī)劑型有氣霧劑、噴霧劑、滴鼻劑、粉劑，還有新發(fā)展的制劑如凝膠劑、乳劑、微粒、 微球、納米粒、脂質(zhì)體等。
[0004] 已報導(dǎo)的匪鼻腔給藥劑型有納米乳、冷凍干燥脂質(zhì)體、納米粒、微乳、凝膠等。中 國專利申請CN 200510023273(公開號CN1679561A)公開了一種鼻腔用尼莫地平凝膠劑， 含尼莫地平和親水凝膠，以及其它藥劑學(xué)上有效的輔料，其中尼莫地平的濃度為0. 1-15% (w/w)，即每g凝膠中含尼莫地平l-150mg，以過200目篩微粉或分子形式分散在親水凝膠 基質(zhì)中；所述的親水凝膠選自卡波普、纖維素類衍生物、殼聚糖、聚乙烯醇、聚氧乙烯、海藻 酸鈉或黃原膠中的一種或數(shù)種，其中，卡波普其濃度為〇. 02-2. 0% (w/w)，纖維素衍生物其 濃度為0.1-10% (w/w)，殼聚糖濃度為0.2-10 % (w/w);聚乙烯醇的濃度為0.2-15% (w/ w);聚氧乙烯的濃度為0.5-10% (w/w);海藻酸鈉的濃度為0.2-7% (w/w);黃原膠的濃度 為0.2-6% (w/w);所述的纖維素類衍生物選自甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或羥丙基甲基 纖維素。可加入其它藥劑學(xué)上有效的輔料，如PH調(diào)節(jié)劑、保濕劑和防腐劑等，所述的鼻用凝 膠劑將尼莫地平均勻分散在親水凝膠基質(zhì)中制備而成。但是，已有文獻報道以及我們的試 驗研究均顯示尼莫地平對鼻粘膜具有較強的刺激性，由于尼莫地平在凝膠劑中仍主要以其 原型藥物狀態(tài)存在，當(dāng)與敏感的鼻粘膜接觸時，藥物仍會直接暴露于黏膜組織和細胞，故凝 膠劑的制備并不能有效地降低或避免藥物的鼻刺激性。如何使尼莫地平既具有良好的鼻粘 膜吸收性能、又能克服其刺激性，是尼莫地平能否開發(fā)鼻腔給藥制劑的關(guān)鍵。另外，凝膠劑 制劑本身對藥物吸收的改善作用也比較有限。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種用藥方便、毒副作用小且生物利用度高的尼 莫地平脂質(zhì)體，這種脂質(zhì)體主要用于制備各種尼莫地平鼻腔給藥制劑。
[0006] 本發(fā)明的要解決的另一個技術(shù)問題是提供這種尼莫地平脂質(zhì)體的制備方法。
[0007] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0008] -種用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體，由以下用量的尼莫地平環(huán)糊精包合物和藥 用輔料組成：尼莫地平環(huán)糊精包合物〇. 〇25g、磷脂0. 1~I. 5g、膽固醇0. 015~0. 8g、PBS 緩沖液10~25mL、膜軟化劑0. 013~0. 8g ;其中尼莫地平環(huán)糊精包合物由尼莫地平與環(huán)糊 精組成，尼莫地平與環(huán)糊精的質(zhì)量比為1 :1~1 :1〇。
[0009] 優(yōu)選的所述用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體，由以下用量的尼莫地平環(huán)糊精包合 物和藥用輔料組成：尼莫地平環(huán)糊精包合物0. 〇25g、磷脂0. 15g、膽固醇0. 03g、PBS緩沖液 15mL、膜軟化劑0.075g;其中尼莫地平環(huán)糊精包合物由尼莫地平與環(huán)糊精組成，尼莫地平 與環(huán)糊精的質(zhì)量比為1 :1~1 :3。
[0010] 所述膜軟化劑為聚氧乙烯氫化菌麻油40 (Cremophor RH40)、聚山梨酯-80、山梨糖 醇甘油酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯中的一種或幾種。
[0011] 優(yōu)選的所述膜軟化劑為聚氧乙烯氫化菌麻油40 (Cremophor RH40)。
[0012] 所述的環(huán)糊選自α-環(huán)糊精及其衍生物、β-環(huán)糊精及其衍生物（如羥丙 基-β-環(huán)糊精（ΗΡ-β-⑶)）、Y-環(huán)糊精及其衍生物中的一種或幾種，優(yōu)選β-環(huán)糊精。
[0013] 所述用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體，尼莫地平的濃度為2-9% w/v(每mL脂質(zhì)體 中含尼莫地平20-90 μ g)。
[0014] 一種用于鼻腔給藥的尼莫地平脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：
[0015] (1)飽和水溶液法制備尼莫地平環(huán)糊精包合物（NM-CD);
[0016] (2)薄膜分散法制備尼莫地平包合物柔性納米脂質(zhì)體。
[0017] 所述步驟（1)飽和水溶液法制備尼莫地平-環(huán)糊精包合物是指：按尼莫地平：環(huán) 糊精為1:1~1:10的重量比分別稱取尼莫地平和環(huán)糊精，在40~65°C將尼莫地平溶解于 適量無水乙醇、將環(huán)糊精加入蒸餾水制成飽和水溶液；將尼莫地平乙醇溶液分別逐滴緩慢 加入環(huán)糊精飽和水溶液中，40-65°C水浴攪拌1~5小時；4°C保存過夜，抽濾，水洗，再用適 量無水乙醇洗去殘留尼莫地平，40°C干燥1小時，即得尼莫地平-環(huán)糊精包合物（NM-⑶）。
[0018] 所述步驟（2)薄膜分散法制備尼莫地平包合物柔性納米脂質(zhì)體是指：將磷脂 0. 1~I. 5g、膽固醇0. 015~0. Sg加至梨形瓶，超聲溶于適量的無水乙醇中，形成脂質(zhì)溶 液，45°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，至瓶壁形成一層薄膜，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)lOmin，使乙醇蒸發(fā)完全； 步驟（1)得到的尼莫地平-環(huán)糊精包合物0. 〇25g及膜軟化劑0. 013~0. 8g加入10~25mL PBS緩沖液，于50°C攪拌lh，將藥物的PBS溶液趁熱倒入梨形瓶中，反復(fù)振蕩洗脫膜材，水化 完全后，均質(zhì)勻化即得得尼莫地平-環(huán)糊精包合物柔性納米脂質(zhì)體（NM-⑶-FNL)。
[0019] 優(yōu)選的所述步驟（1)中尼莫地平與環(huán)糊精的重量比為1:3,水浴溫度為50°C，水浴 攪拌3小時。
[0020] 所述步驟（2)薄膜分散法制備尼莫地平包合物柔性納米脂質(zhì)體是指：將磷脂 0. 15g、膽固醇0.03g加至梨形瓶，超聲溶于適量的無水乙醇中，形成脂質(zhì)溶液，45°C減壓旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，至瓶壁形成一層薄膜，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)lOmin，使乙醇蒸發(fā)完全；步驟（1)得到 的尼莫地平-β環(huán)糊精包合物0. 〇25g及膜軟化劑0. 075g加入15mL PBS緩沖液，于50°C 攪拌lh，將藥物的PBS溶液趁熱倒入梨形瓶中，反復(fù)振蕩洗脫膜材，水化完全后，探頭超 聲或高壓均質(zhì)勻化，過〇. 22 μ微孔濾膜，即得尼莫地平-環(huán)糊精包合物柔性納米脂質(zhì)體 (NM-CD-FNL)〇
[0021] 所述步驟（2)的膜軟化劑為聚氧乙烯氫化菌麻油40 (Cremophor RH40)、聚山梨 酯-80、山梨糖醇甘油酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯中的一種或幾種，優(yōu)選的膜軟化劑為聚氧 乙烯氫化菌麻油40 (Cremophor RH40)。
[0022] 本發(fā)明尼莫地平柔性納米脂質(zhì)體（Flexible nano-lipsomes, FNL)是在脂質(zhì)體基 礎(chǔ)上加入了膜軟化劑，具有高度的柔韌性和滲透性，可有效的提高藥物的生物利用度和治 療效果，尤其在鼻腔給藥上有生物粘附性強、吸收迅速、刺激性低等諸多優(yōu)勢。但其包裹脂 溶性藥物存在藥物易泄露、穩(wěn)定性差等問題，如因 FNL中膜軟化劑的作用和一些脂溶性藥 物本身對脂質(zhì)膜的干擾，致使FNL不穩(wěn)定，易發(fā)生藥物泄露；再者某些刺激性的脂溶性藥物 往往分布于FNL結(jié)構(gòu)中的親脂外層，給藥后較易于與鼻粘膜接觸，長期使用可能會產(chǎn)生造 成一定的粘膜毒性。環(huán)糊精作為藥物的載體，由于其特殊的空間結(jié)構(gòu)，能與許多藥物特別是 脂溶性藥物形成包合物，改善藥物的水溶性，可直接或間接提高藥物的鼻吸收。作為優(yōu)質(zhì)的 鼻腔給藥助溶劑或附加劑，低濃度的環(huán)糊精及其衍生物沒有嚴重的纖毛毒性，如果將脂溶 性藥物用環(huán)糊精包合，提高其水溶性，再將其制成環(huán)糊精包合物柔性納米脂質(zhì)體，使脂溶性 藥物由外部親脂層向FNL結(jié)構(gòu)內(nèi)部的水相分布，這對降低藥物從FNL中的泄漏、避免或減少 藥物直接暴露于黏膜產(chǎn)生刺激毒性非常有益，同時柔性納米脂質(zhì)體本身具有良好的吸收特 性，使得藥物能夠獲得較好的生物利用度，成為既穩(wěn)定又安全、生物利用度又高的用于制備 各種鼻腔給藥劑型的尼莫地平脂質(zhì)體。
[0023] 本發(fā)明采用飽和水溶液法制備NM-環(huán)糊精包合物，對工藝進行篩選和優(yōu)化，得到 載藥量高且操作相對簡單的制備方法。包合物中NM載藥量可達18%。
[0024] 本發(fā)明采用薄膜分散法將進一步制備尼莫地平-環(huán)糊精包合物柔性脂質(zhì)體 (NM-CD-FNL)。通過單因素考察和正交設(shè)計實驗優(yōu)選處方：包合物和磷脂質(zhì)量比為1:6,磷 脂和膽固醇質(zhì)量比為5:1，磷脂和RH40質(zhì)量比為2:1。穩(wěn)定性考察結(jié)果顯示，經(jīng)室溫及4°C 條件下放置后NM-CD-FNL的粒徑、電位、包封率變化較小，與NM-FNL相比藥物滲漏率明顯降 低，說明NM-CD-FNL可有效降低尼莫地平從柔性納米脂質(zhì)體中的泄漏。
[0025] 本發(fā)明測定匪以及NM-CD-FNL大鼠鼻腔給藥后體內(nèi)的血藥濃度，并以匪灌胃給 藥（給藥劑量為鼻腔給藥的10倍）作為對比，分析比較其藥時曲線特性及藥動參數(shù)。采用 HPLC法進行匪體內(nèi)分析，結(jié)果顯示，即使給藥劑量相較鼻給藥提高了 10倍，匪口服給藥后 血藥濃度仍很低，且吸收較慢，相對NM-⑶-FNL鼻腔給藥的生物利用度僅為13. 40%。與NM 鼻腔給藥相比，NM-⑶-FNL鼻給藥后吸收更迅速，較匪鼻腔給藥達峰時間提前10min，Cmax 和AUC均有顯著性提高，匪鼻腔給藥相對于NM-⑶-FNL鼻腔給藥的生物利用度為77. 33 %。 表明NM-CD-FNL用于