案中，所述復(fù)雜傷口為糖尿病性足潰瘍。在另一 個(gè)特別的實(shí)施方案中，所述藥物用于治療靜脈潰瘍、褥瘡性潰瘍或燒傷。
[0059] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物用于治療諸如成人呼吸窘迫的疾病。用 本發(fā)明的囊泡制備的藥物還可用于治療消化道損傷，例如潰瘍性結(jié)腸炎、十二指腸潰瘍和 末端結(jié)腸炎。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物用于治療眼損傷。
[0060] 也是本發(fā)明一部分的為美容產(chǎn)品，其特征在于，所述美容產(chǎn)品包含EGF囊泡、陽(yáng)離 子型表面活性劑和膽固醇或其衍生物，和至少一種在美容學(xué)或皮膚藥學(xué)上可接受的賦形 劑。在本發(fā)明的該方面，所述陽(yáng)離子型表面活性劑、膽固醇（或其衍生物）和EGF是在藥學(xué) 和美容學(xué)上可接受的。
[0061] 本發(fā)明的EGF囊泡可以配制成各種美容學(xué)或皮膚藥學(xué)形式（固體的、液體的和半 固體的均可），例如但不限于：注射液、霧化液體或"噴霧劑"、凝膠、霜?jiǎng)?、多重乳狀液、水?分散液、乳狀化妝品、香膏劑、洗劑、泡沫劑、精華液、軟膏劑、透皮貼劑、擦巾、貯庫(kù)制劑、發(fā) 膏劑、粉劑、條狀物、吸入制劑等，在所有情況下，包括持久制劑和漂洗制劑。
[0062] 通常，本發(fā)明的美容組合物或皮膚藥物組合物可以包含賦形劑，例如但不限于：增 溶劑或溶劑、表面活性劑、PH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、稀釋劑、基質(zhì)系統(tǒng)、絡(luò)合劑、增粘劑、分散劑、 潤(rùn)濕劑、膠凝性聚合物、增稠劑、軟化劑、穩(wěn)定劑、氣味吸收劑、螯合劑、植物提取物、精油、海 洋提取物、來(lái)自生物發(fā)酵程序的試劑、礦物鹽、細(xì)胞提取物和陽(yáng)光過(guò)濾物質(zhì)（針對(duì)紫外線A 和/或B具有活性的有機(jī)或無(wú)機(jī)性質(zhì)的光防護(hù)試劑）、色素或著色劑、香料、防腐劑、滲透增 強(qiáng)劑等，以及其混合物，條件是它們與本發(fā)明的組合物的其余組分在物理和化學(xué)上是相容 的。可以為了慣常的目的和以典型的量使用這些賦形劑，而不影響本發(fā)明的組合物的特征， 如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的那樣（另外的例子可以被發(fā)現(xiàn)描述在CTFA Cosmetic Ingredient Handbook,第12版（2008)中）。這些額外的助劑的性質(zhì)可以是合成的或天然來(lái)源的，例如 植物提取物，或者來(lái)自生物發(fā)酵程序。
[0063] 因此，本發(fā)明的目標(biāo)還在于上面所描述的EGF囊泡用于制備美容產(chǎn)品的用途。在 本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述美容產(chǎn)品為用于預(yù)防皮膚的衰老和老化的產(chǎn)品。
[0064] 實(shí)施方式/實(shí)施例的詳細(xì)描述
[0065] 下面的實(shí)施例為了舉例說(shuō)明目的而給出，而不應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明的限制。
[0066] 實(shí)施例1.借助于壓縮流體技術(shù)的"膽固醇：DPPC:EGF"囊泡的合成
[0067] 首先，在大氣壓和工作溫度（Tw= 35°C )下將12mg膽固醇和24mg DPPC在I. 2mL 乙醇中的溶液引入到體積為6mL的高壓反應(yīng)器中。添加經(jīng)壓縮的CO2，從而導(dǎo)致溶液發(fā)生體 積膨脹直至達(dá)到X ra2= 0. 7的摩爾分?jǐn)?shù)和Pw= IOMPa的工作壓力。為了得到完全均質(zhì)化 和熱平衡，將該系統(tǒng)在IOMPa和35°C下放置大約60分鐘。最后，在24mL具有所希望的濃 度（在15 μ M和40 μ M之間）的EGF水溶液上，將經(jīng)膨脹的有機(jī)溶液從工作壓力減壓至 大氣壓。在該最后一步中，將IOMPa的N2流用作活塞以用于推動(dòng)用CO 2進(jìn)行膨脹的膽固醇 和DPPC在乙醇中的溶液，目的是在減壓期間保持反應(yīng)器內(nèi)的工作壓力恒定。接著，將囊泡 轉(zhuǎn)移至嚴(yán)實(shí)封閉的容器中，該容器在5 ± 3 °C下貯存直至其使用。
[0068] 結(jié)果，獲得了以15 μ M至40 μ M的濃度摻入有EGF的"DPPC:膽固醇（I: 1) "囊 泡。物理外觀、平均大小和Z-電勢(shì)的結(jié)果顯示在表1中。平均大小、顆粒大小分布和Z-電 勢(shì)通過(guò)DLS來(lái)測(cè)定。
[0069] 可以觀察到，各種不同的囊泡制備物不具有短期穩(wěn)定性的問(wèn)題，并且它們具有相 對(duì)小的平均大小和多分散性指數(shù)（PDI)，這使得它們從藥學(xué)觀點(diǎn)來(lái)看是有吸引力的。但是， 絕對(duì)Z-電勢(shì)是非常小的（<+10mV)，大大低于被認(rèn)為允許分散系統(tǒng)的膠體穩(wěn)定性的值，其通 常是超過(guò) 30mV 的絕對(duì)值（Carrion 等人，J. Colloid. Interface Sci. 1994, 164:78-87)。該 特征表明，該囊泡系統(tǒng)的長(zhǎng)期穩(wěn)定性可能受到危及。
[0070] 表1.對(duì)于不同的組成，"膽固醇：DPPC:EGF"囊泡的各種不同變體的物理外觀、平 均顆粒大小和Z-電勢(shì)
[0071]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 囊泡，其特征在于，所述囊泡包含表皮生長(zhǎng)因子巧GF)、陽(yáng)離子型表面活性劑和膽固 醇或其衍生物。
2. 權(quán)利要求1的囊泡，其中所述陽(yáng)離子型表面活性劑為季錠類型的陽(yáng)離子型表面活性 劑。
3. 權(quán)利要求2的囊泡，其中所述季錠類型的陽(yáng)離子型表面活性劑為選自漠化嫁蠟基= 甲基錠（CTAB)、西曲漠錠和苯扎氯錠炬KC)的表面活性劑。
4. 權(quán)利要求1-3的囊泡，其中所述陽(yáng)離子型表面活性劑與所述膽固醇或其衍生物之間 的摩爾比例在10M: 1M至1M: 5M的范圍內(nèi)；并且所述EGF與所述膽固醇或其衍生物之間的摩 爾比例在0. 5 y M: 1M至100 y M: 1M的范圍內(nèi)。
5. 權(quán)利要求1-4的囊泡，其特征在于，所述囊泡具有單層結(jié)構(gòu)和大約在25和500nm之 間，優(yōu)選地在50和300nm之間的平均大小。
6. 權(quán)利要求1-5的囊泡，其中將所述EGF滲入到囊泡雙層中。
7. 權(quán)利要求1-6的囊泡，其特征在于，所述囊泡通過(guò)壓縮流體（C巧技術(shù)來(lái)獲得。
8. 權(quán)利要求7的囊泡，其中所述CF技術(shù)包括該樣的工藝過(guò)程，其包括： a) 制備EGF和陽(yáng)離子型表面活性劑的水溶液， b) 將膽固醇或其衍生物溶解在用CF使之膨脹的有機(jī)溶劑中， C)通過(guò)在得自步驟a)的溶液上將得自步驟b)的溶液減壓來(lái)合成囊泡。
9. 權(quán)利要求8的囊泡，其中所述陽(yáng)離子型表面活性劑為季錠類型的陽(yáng)離子型表面活性 劑。
10. 用于制備包含EGF、陽(yáng)離子型表面活性劑和膽固醇或其衍生物的囊泡的方法，其特 征在于，所述方法包括： a) 制備EGF和陽(yáng)離子型表面活性劑的水溶液， b) 將膽固醇或其衍生物溶解在用CF使之膨脹的有機(jī)溶劑中， C)通過(guò)在得自步驟a)的溶液上將得自步驟b)的溶液減壓來(lái)合成囊泡。
11. 權(quán)利要求10的方法，其中所述陽(yáng)離子型表面活性劑為季錠類型的陽(yáng)離子型表面活 性劑。
12. 權(quán)利要求10的方法，其中步驟b)的有機(jī)溶劑為選自下列的溶劑；一元醇、多元醇、 酬類、己二胺、己膳、己酸己醋和其混合物。
13. 權(quán)利要求10的方法，其中所述CF為選自下列的化合物：二氧化碳、己燒、丙烷、氣 氯姪和含氣姪。
14. 權(quán)利要求10-13的方法，其中CF的量與有機(jī)溶劑的量之間的比率相應(yīng)于大約0. 3 至0. 95,優(yōu)選地0. 5至0. 8的摩爾分?jǐn)?shù)。
15. 權(quán)利要求10-13的方法，其中在具有大約1至30MPa的壓力和大約10至70°C，優(yōu) 選地10至50°C的溫度的反應(yīng)器中施行所述膽固醇或其衍生物在CF中的溶解。
16. 權(quán)利要求10-15的方法，其中將所述EGF溶解在包含陽(yáng)離子型表面活性劑的水溶液 中，所述陽(yáng)離子型表面活性劑的濃度在其臨界膠束濃度之上。
17. 藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包含權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的囊泡，和 至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
18. 權(quán)利要求17的組合物，其特征在于，所述組合物可W通過(guò)全身、損傷內(nèi)、粘膜、局 部、透皮、眼途徑進(jìn)行施用，或者作為吸入制劑進(jìn)行施用。
19. 權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的囊泡用于制備藥物的用途。
20. 權(quán)利要求19的用途，其中所述藥物用于治療任何外周軟組織部位的復(fù)雜傷口。
21. 權(quán)利要求20的用途，其中所述復(fù)雜傷口為糖尿病性足潰瘍。
22. 權(quán)利要求20的用途，其中所述復(fù)雜傷口為靜脈潰瘍、媽瘡性潰瘍或燒傷。
23. 權(quán)利要求19的用途，其中所述藥物用于治療成人呼吸窘迫。
24. 權(quán)利要求19的用途，其中所述藥物用于治療消化道損傷。
25. 權(quán)利要求24的用途，其中所述藥物用于治療粘膜炎、潰瘍性結(jié)腸炎、十二指腸潰瘍 或末端結(jié)腸炎。
26. 權(quán)利要求19的用途，其中所述藥物用于治療眼損傷。
27. 美容產(chǎn)品，其特征在于，所述美容產(chǎn)品包含權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的囊泡，和至少 一種賦形劑。
28. 權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的囊泡用于制備美容產(chǎn)品的用途。
29. 權(quán)利要求28的用途，其中所述美容產(chǎn)品為用于預(yù)防皮膚的衰老和老化的產(chǎn)品。
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、陽(yáng)離子型表面活性劑和膽固醇或其衍生物的。本發(fā)明還公開(kāi)了用于基于壓縮流體(CF)技術(shù)來(lái)制備所述囊泡的方法。本發(fā)明的囊泡可用于制備藥物和美容產(chǎn)品，和用于組織工程。
【IPC分類】A61K38-18, A61K9-127, A61K8-14, A61K47-18, A61K47-28
【公開(kāi)號(hào)】CN104684575
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380048721
【發(fā)明人】H·J·桑塔納米蓮, L·本托薩魯利, E·馬蒂尼茲迪亞茲, J·A·貝蘭加阿科斯塔, I·卡布雷拉普伊赫, J·貝西納米洛
【申請(qǐng)人】遺傳工程與生物技術(shù)中心, 科學(xué)研究高級(jí)委員會(huì)
【公開(kāi)日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2013年8月2日
【公告號(hào)】CA2880404A1, EP2915541A1, US20150182590, WO2014019555A1