一種胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液的制備方法，特別涉 及一種利用生物技術(shù)處理經(jīng)典知柏地黃丸組方的方法，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 知柏地黃丸是一種常用中成藥，是由補(bǔ)陰經(jīng)典代表方劑六味地黃丸（熟地黃山萸 肉山藥澤瀉牡丹皮和茯苓）加知母黃柏而成，加強(qiáng)了滋腎陰清相火的作用。傳統(tǒng)應(yīng)用于陰 虛火旺，潮熱盜汗，口干咽痛，耳鳴遺精，小便短赤等癥。近年來(lái)經(jīng)中醫(yī)辨證后靈活使用，對(duì) 慢性咽炎、急性尿路感染等幾種疾病也有較好療效。由于知母和黃柏具有清熱的功效，所以 知柏地黃丸較六味地黃丸在養(yǎng)陰的基礎(chǔ)上，加入了清熱的功效。
[0003] 但由于知柏地黃丸屬甘溫性，偏于補(bǔ)陰的藥，主治腎陰虛，其配方中陰柔的藥多一 些，所以吃后有時(shí)候會(huì)妨礙消化的副作用，因此不僅脾胃功能弱、消化不良者慎吃，而且長(zhǎng) 期服用會(huì)導(dǎo)致腹?jié)M、便溏、食欲不振等不適癥狀。
[0004] 中國(guó)專利文獻(xiàn)CN1709488A (申請(qǐng)?zhí)?00510031759. 7)公開(kāi)了本發(fā)明公開(kāi)了滋陰 降火的中藥制劑及其制備方法，它是主要組成成分為知母、黃柏、熟地黃、茯苓、山茱萸、牡 丹皮、山藥、澤瀉（鹽水蒸）的知柏地黃滴丸或微丸或軟膠囊。本發(fā)明的制備方法是：取山 藥、山茱萸、澤瀉（鹽水蒸）等三味粉碎成細(xì)粉，備用；取牡丹皮粉碎成細(xì)粉，備用；取其 余知母、黃柏、熟地黃、茯苓等四味加水煎煮二次，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至稠膏；加 入山藥等三味細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，再加入牡丹皮細(xì)粉，混勻，加入適當(dāng)輔料 后，制成滴丸或微丸或軟膠囊。
[0005] 雖然上述專利能夠?qū)⒅氐攸S丸中的藥效成分提取濃縮制得濃縮知柏地黃丸，但 知柏地黃丸妨礙消化的副作用并沒(méi)有減弱。
[0006] 雙歧桿菌Bifidobacterium是1899年由法國(guó)學(xué)者Tissier從母乳營(yíng)養(yǎng)兒的糞便 中分離出的一種厭氧的革蘭氏陽(yáng)性桿菌，末端常常分叉，故名雙歧桿菌。雙歧桿菌具有以下 治療效果：1、維護(hù)腸道正常細(xì)菌菌群平衡，抑制病原菌的生長(zhǎng)，防止便秘，下痢和胃腸障礙 等；2、抗腫瘤；3、在腸道內(nèi)合成維生素、氨基酸和提高機(jī)體對(duì)鈣離子的吸收；4、降低血液中 膽固醇水平，防治高血壓；5、改善乳制品的耐乳糖性，提高消化率；6、增強(qiáng)人體免疫機(jī)能， 預(yù)防抗生素的副作用，抗衰老，延年益壽。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服 液的制備方法。
[0008] 術(shù)語(yǔ)說(shuō)明
[0009] 胃蛋白酶的活力單位（U):采用中國(guó)藥典1977年版制定的檢測(cè)方法檢測(cè)的活力單 位。
[0010] 胰蛋白酶的活力單位（U):采用中國(guó)藥典1990年版制定的檢測(cè)方法檢測(cè)的活力單 位。
[0011] 本發(fā)明技術(shù)方案如下：
[0012] -種胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液的制備方法，步驟如下：
[0013] (1)將知柏地黃丸原料中的八味原料藥經(jīng)粉碎后，制得原料粉末，然后按每百克原 料粉末加入200~600克水和煉蜜，混合均勻，制得原料漿液；
[0014] (2)向步驟（1)制得的原料漿液中加入酸調(diào)pH值為1.5~2. 2,按每百克知柏地 黃丸原料加入20~60活力單位的胃蛋白酶，在溫度36~38°C，處理2~3小時(shí)，堿調(diào)pH 值為7. 8~8. 2,制得胃蛋白酶處理的漿液；
[0015] (3)向步驟（2)制得的胃蛋白酶處理的漿液中，按每百毫升加入20~50活力單位 的胰蛋白酶，在溫度36~38°C，處理2~3小時(shí)，酸調(diào)pH值至5. 5~6,制得胃、胰蛋白酶 處理的漿液；
[0016] (4)向步驟（3)制得的胃、胰蛋白酶處理的漿液中，按每百毫升接種0. 5~2g的經(jīng) 活化的雙歧桿菌，制得胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的知柏地黃丸原料如下，均為重量份：
[0018] 知母40份、黃柏40份、熟地黃160份、制山茱萸(酒萸肉）80份、牡丹皮60份、山 藥80份、茯苓60份、澤瀉60份、煉蜜7~10份。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的知柏地黃丸原料如下，均為重量份：
[0020] 知母40份、黃柏40份、熟地黃160份、制山茱萸(酒萸肉）80份、牡丹皮60份、山 藥80份、茯苓60份、澤瀉60份、煉蜜16~22份。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（2)、（3)中的酸為鹽酸。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（1)的堿為碳酸鈉。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述步驟（4)中經(jīng)活化的雙歧桿菌是指將雙歧桿菌接種于 TPY液體培養(yǎng)基中，在36~38°C培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雙歧桿菌。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的，所述TPY液體培養(yǎng)基每升組分如下：
[0025] 蛋白胨15. 0g、酵母粉2. 0g、葡萄糖20. 0g、可溶性淀粉0· 5g、氯化鈉5. Og、5wt°/〇 半胱氨酸溶液10.0 mL、西紅柿浸出液400.0 mL、吐溫801. 0g、肝提取液80.0 mL、蒸餾水 520.0 mL、pH7. 0。
[0026] 所述西紅柿浸出液的制備為本領(lǐng)域常規(guī)方法，步驟如下：
[0027] 將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水在KKTC水浴中加熱，攪拌90min， 然后用紗布過(guò)濾，調(diào)pH7. 0。
[0028] 所述肝提取液的制備為本領(lǐng)域常規(guī)方法，步驟如下：
[0029] 稱取新鮮豬肝lOOOg，切成小塊或絞碎，加蒸餾水至2000mL，混勻，置冰箱中過(guò)夜， 第二天煮沸15min，紗布過(guò)濾并擠壓收集濾液，加水定容至2000mL。
[0030] 所述雙歧桿菌為腸道益生菌，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要進(jìn)行選擇，如中 國(guó)專利文獻(xiàn)CN102946891A中的菌種保藏號(hào)為NCMB41676的雙歧桿菌，中國(guó)專利文獻(xiàn) CN101679938A中的菌種保藏號(hào)為NCMB41387的長(zhǎng)雙歧桿菌等。
[0031] 有益效果
[0032] 本發(fā)明通過(guò)將傳統(tǒng)知柏地黃丸原料經(jīng)胃、胰蛋白酶分解處理，得到了副作用較小 的胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液，該品酸甜適口，且經(jīng)實(shí)際應(yīng)用，長(zhǎng)期服用該 胃、胰蛋白酶處理的知柏地黃微生態(tài)口服液不僅能夠達(dá)到服用知柏地黃丸治療效果，并且 導(dǎo)致胃寒、阻礙消化的副作用也得到極大的降低。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明所保護(hù)范圍不限 于此。
[0034] 實(shí)施例中的TPY液體培養(yǎng)基每升組分如下：
[0035] 蛋白胨15. 0g、酵母粉2. 0g、葡萄糖20. 0g、可溶性淀粉0· 5g、氯化鈉5. 0g、5wt% 半胱氨酸溶液10.0 mL、西紅柿浸出液400.0 mL、吐溫801. 0g、肝提取液80.0 mL、蒸餾水 520.0 mL、pH7. 0 ;
[0036] 所述西紅柿浸出液的制備步驟如下：
[0037] 將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水在KKTC水浴中加熱，攪拌90min， 然后用紗布過(guò)濾，調(diào)pH