專(zhuān)利名稱(chēng)：豬的胰蛋白酶(try)elisa檢測(cè)試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于檢測(cè)豬胰蛋白酶的試劑盒。
背景技術(shù)：
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)是將抗原、 抗體免疫反應(yīng)的特異性和酶的高效催化作用原理有機(jī)地結(jié)合起來(lái)的一種敏感性高、特異性 強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，可敏感地檢測(cè)體液中微量的特異性蛋白。豬胰蛋白酶是豬胰腺分泌的一種水解酶。能水解由肽鏈相連的氨基酸類(lèi)化合物， 具有酯酶活性。正常豬血清中含量甚微。人和豬的急性胰腺炎的發(fā)病機(jī)理都是由于胰腺因 胰蛋白酶的自身消化作用，對(duì)其周?chē)M織的消化，從而繼發(fā)一系列的器官的功能障礙。在正 常情況下，胰液內(nèi)的胰蛋白酶原無(wú)活性，待其流入十二指腸，受到膽汁和腸液中的腸激酶的 激活作用后乃變?yōu)橛谢钚缘囊鹊鞍酌?，方具有消化蛋白質(zhì)的作用。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ拓i的觀 察，大多數(shù)患急性胰腺炎的豬胰蛋白酶明顯增高，因此測(cè)定豬血清胰蛋白酶對(duì)診斷豬急性 胰腺炎有重要意義。目前，對(duì)于胰蛋白酶的檢測(cè)主要是測(cè)定其活性，方法主要有放射免疫分 析法(RIA)和以苯甲酰-L-精氨酸乙酯(簡(jiǎn)稱(chēng)BAEE)，對(duì)甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯(簡(jiǎn)稱(chēng) TAME)，苯甲酰-L-精氨酸-對(duì)硝基苯胺(簡(jiǎn)稱(chēng)ΒΑΡΑ)和苯甲酰-L-精氨酸-β -萘酰胺(簡(jiǎn) 稱(chēng)ΒΑΝΑ)等為底物，用紫外吸收法測(cè)定的方法。RIA技術(shù)極其敏感而又極其特異，但其卻需 要具備尖端復(fù)雜的設(shè)備，且成本也不低。同時(shí)，RIA還需要特殊的預(yù)防措施，因?yàn)槠湟玫?放射性物質(zhì)。因此，如今RIA在很大程度上已經(jīng)被ELISA所取代。采用BAEE、TAME等為底 物，用紫外吸收法測(cè)定的方法，由于血清中還有其他蛋白酶也能水解試劑中的底物，同時(shí)還 有蛋白酶的抑制物存在，這些都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，并且由于實(shí)驗(yàn)操作繁瑣，不能定量，其應(yīng) 用意義不大。因此，有必要選用一種快速、簡(jiǎn)便能夠定量且靈敏度、準(zhǔn)確度和特異性高的方 法來(lái)進(jìn)行胰蛋白酶的檢測(cè)。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種檢測(cè)豬胰蛋白酶的ELISA試劑盒，其 操作簡(jiǎn)便，成本低，穩(wěn)定性好，適合于血液及其它生物液體中胰蛋白酶的檢測(cè)。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型所采用的技術(shù)方案是一種豬的胰蛋白酶 (TRY)ELISA檢測(cè)試劑盒，包括酶標(biāo)板，所述酶標(biāo)板包括固相載體和包被層，固相載體上設(shè)置 有多個(gè)微孔，包被層附著在固相載體的微孔表面，包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗 體和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的復(fù)合層。本實(shí)用新型采用ELISA方法的試劑盒可以定量檢測(cè)血液或其它生物液體中胰蛋 白酶含量，顯著提高了胰蛋白酶檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度；并且靈敏度高，即使少量或痕量酶也能 夠檢測(cè)出；特異性高，幾乎不受體液中其他物質(zhì)，如酶抑制利、激活劑等的影響，不受藥物的 干擾，且操作簡(jiǎn)單，省時(shí)省力，特別適用于胰蛋白酶的檢測(cè)。
權(quán)利要求一種豬的胰蛋白酶(TRY)ELISA檢測(cè)試劑盒，包括酶標(biāo)板，所述酶標(biāo)板包括固相載體和包被層，其特征在于所述固相載體上設(shè)置有多個(gè)微孔，所述包被層附著在所述固相載體的微孔表面，所述包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗體和牛血清白蛋白依次涂布在所述固相載體的微孔表面上形成的復(fù)合層。
專(zhuān)利摘要本實(shí)用新型涉及檢測(cè)豬胰蛋白酶的生物技術(shù)領(lǐng)域，具體提供了一種豬的胰蛋白酶(TRY)ELISA檢測(cè)試劑盒，包括酶標(biāo)板，其中酶標(biāo)板又包括固相載體和包被層，固相載體上設(shè)置有多個(gè)微孔，包被層附著在固相載體的微孔表面，包被層是由小鼠抗豬胰蛋白酶單克隆抗體和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的復(fù)合層。本實(shí)用新型操作簡(jiǎn)便，成本低，穩(wěn)定性好，適合于血液及其它生物液體中胰蛋白酶的檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N33/577GK201716317SQ201020245770
公開(kāi)日2011年1月19日 申請(qǐng)日期2010年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月2日
發(fā)明者叢旭霞, 何峰容, 汪景, 章秀波, 童曉玲, 馬云芳 申請(qǐng)人:武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司