專利名稱：新的2－氨基噻唑稠合的2－氨基二氫化茚和2－氨基四氫化萘及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚和2-氨基四氫化萘及其應(yīng)用。更具體來(lái)說，本發(fā)明涉及具有有價(jià)值藥理活性的2，6-二氨基噻唑并[4，5-f]二氫化茚(indan)、2，7-二氨基噻唑并[4，5-g]四氫化萘和2，7-二氨基噻唑并[5，4-g]四氫化萘的(堿性基)-N-取代和(堿性基)-N，N-二取代衍生物、其酸加成鹽、含有它們的藥物組合物、以及它們?cè)谥苽渌幬镏械膽?yīng)用。
背景技術(shù)：
有多種四氫苯并噻唑在文獻(xiàn)中是已知的。US-A-4337343描述了對(duì)循環(huán)有作用、在2-位被氫原子或烷基取代、并且在4-位、5-位或6-位被烷基氨基烷基取代的4，5，6，7-四氫苯并噻唑。US-A-4208420描述了對(duì)交感神經(jīng)系統(tǒng)有刺激作用、并且起腦血管系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑作用、在2-位被氫原子或烷基取代、并且在4-位、5-位或6-位被烷基氨基取代的4，5，6，7-四氫苯并噻唑，DE-A-2,136,233描述了具有病毒抑制特性、在2-位被氨基或任選取代的脲基或硫脲基取代的4，5，6，7-四氫苯并噻唑。
四氫苯并噻唑Pramipexol(Mirapex)是目前市售的抗帕金森氏病藥物(參見Griss等人的專利申請(qǐng)EP 186087 A1 860702；還參見Schneider和Mireau，JMC 1987，30，494-498)。
然而，現(xiàn)有技術(shù)中沒有描述過本發(fā)明所要求保護(hù)的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚和2-氨基四氫化萘(見下面式1)。
1998年6月9日在登記文檔庫(kù)中進(jìn)行了CAS ONLINE檢索，結(jié)果沒有檢索到下述結(jié)構(gòu)，這證實(shí)了要求保護(hù)的下述式1化合物是新的。下述化合物是在CAS ONLINE中檢索并且沒有檢索到的化合物(子結(jié)構(gòu)檢索；在這些檢索中，限定了二氫化茚和四氫化萘環(huán)系氫，并且僅允許2個(gè)“自由位點(diǎn)”取代基為CAS ONLINE中的任意可能取代基) 發(fā)明簡(jiǎn)述一方面，本發(fā)明涉及下述通式(式1)新的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚和2-氨基四氫化萘、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽、尤其是其與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸形成的生理可接受酸加成鹽 其中R1和R2可相同或不同，并選自氫原子、具有1-7個(gè)碳原子的烷基或鹵代烷基、具有3-7個(gè)碳原子的(烷基)環(huán)烷基、具有3-6個(gè)碳原子的鏈烯基或鏈炔基、烷基部分具有1-3個(gè)碳原子且芳基核可被取代(例如被氟、氯或溴原子或磺酰氧基(例如三氟甲基磺酸基)取代)的芳基烷基，n和m都是1(2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚；式1a) 或者n是2且m是1(2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘；式1b) 或者n是1且m是2(2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘；式1c) 通式1化合物具有有價(jià)值的藥理活性，尤其是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和/或循環(huán)的多巴胺能系統(tǒng)有作用。
另一方面，本發(fā)明涉及藥物組合物，所述組合物含有式1化合物或其生理可接受酸加成鹽作為活性物質(zhì)，并任選含有一種或多種惰性載體和/或稀釋劑。
另一方面，本發(fā)明涉及式1化合物或其生理可接受酸加成鹽在制備具有下述作用的藥物中的應(yīng)用對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和/或循環(huán)的多巴胺能系統(tǒng)有作用，例如用于治療涉及多巴胺受體的中樞神經(jīng)性神經(jīng)精神病、循環(huán)障礙、精神分裂癥、帕金森氏病、帕金森神經(jīng)功能障礙或藥物濫用、尤其是酒精和/或可卡因?yàn)E用。
另一方面，本發(fā)明涉及制備藥物組合物的方法，其特征在于，通過非化學(xué)方法將式1化合物或其生理可接受鹽與一種或多種惰性載體和/或稀釋劑混合。
發(fā)明詳述本發(fā)明化合物由上述式1或其生理可接受鹽表示。通過施用治療有效量的式1化合物，本發(fā)明化合物可用于治療患有多巴胺產(chǎn)生性中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙(例如精神分裂癥、帕金森氏病、圖雷特綜合征、MBD、血催乳素過多和藥物濫用(例如酒精或可卡因?yàn)E用))的哺乳動(dòng)物、尤其是人。
在結(jié)構(gòu)式1中，各含烴部分的碳含量是通過指出該部分具有“i-j個(gè)碳原子”來(lái)表示。因此“1-7個(gè)碳原子”烷基是指具有1-7個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基，包括兩端值，包括其異構(gòu)體，例如甲基、乙基、丙基和異丙基。
環(huán)烷基是具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。
作為基團(tuán)-NR1R2定義的實(shí)例，該基團(tuán)表示氨基、甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、異丙基氨基、正丁基氨基、異丁基氨基、叔丁基氨基、正戊基氨基、異戊基氨基、正己基氨基、正庚基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、二正丙基氨基、二正丁基氨基、甲基乙基氨基、甲基正丙基氨基、甲基異丙基氨基、乙基異丙基氨基、2，2，2-三氟乙基氨基、3，3，3-三氟丙基氨基、2-氟乙基氨基、3-氟丙基氨基、烯丙基氨基、丁烯-2-基氨基、己烯-2-基氨基、二烯丙基氨基、N-甲基烯丙基氨基、N-乙基烯丙基氨基、N-正丙基烯丙基氨基、N-正丁基烯丙基氨基、炔丙基氨基、丁烯-2-基氨基、己烯-2-基氨基、二炔丙基氨基、N-甲基炔丙基氨基、N-乙基炔丙基氨基、環(huán)丙基氨基、環(huán)丁基氨基、環(huán)戊基氨基、環(huán)己基氨基、環(huán)庚基氨基、N-甲基環(huán)己基氨基、N-乙基環(huán)己基氨基、芐基氨基、氯芐基氨基、溴芐基氨基、1-苯基乙基氨基、2-苯基乙基氨基、2-苯基正丙基氨基、3-苯基正丙基氨基、N-甲基芐基氨基、N-乙基芐基氨基、N-乙基對(duì)氯芐基氨基、N-乙基-2-苯基乙基氨基、N-烯丙基芐基氨基、N-烯丙基對(duì)氯芐基氨基、正丙基苯基乙基氨基、正丙基-2-噻吩基乙基氨基、正丙基-3-噻吩基乙基氨基。
作為“芳基烷基”的其它實(shí)例，該基團(tuán)代表其中烷基部分具有1-3個(gè)碳原子，且芳基部分可選自(取代的)苯基、1-萘基或2-萘基、2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基、2-噻吩基或3-噻吩基、2-呋喃基或3-呋喃基(furanoyl)、2-咪唑基或4-咪唑基和1-咪唑啉-2-酮的芳基烷基，為了清楚起見，下面給出2-咪唑基、4-咪唑基和1-咪唑啉-2-酮的結(jié)構(gòu)式 2-咪唑基 4-咪唑基1-咪唑啉-2-酮可藥用鹽是指適用于給予本發(fā)明化合物或可以體外和體內(nèi)接受本發(fā)明化合物的鹽，包括酸加成鹽，例如與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乳酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、馬來(lái)酸或富馬酸形成的酸加成鹽。烷基磺酸(例如CH3SO3H)也適于形成鹽。這些鹽可以是水合物形式。
然而，特別優(yōu)選的通式1化合物是定義如下的通式1化合物、其酸加成鹽、尤其是生理可接受酸加成鹽其中R1代表氫原子、具有1-3個(gè)碳原子的烷基或F-烷基或烯丙基，R2代表氫原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的鹵代烷基、烯丙基、炔丙基、苯基乙基、2-噻吩基乙基、3-噻吩基乙基、環(huán)丙基甲基。
依據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明新化合物可通過方案1-4(下文中)中描述的方法制得。
可通過常規(guī)方法將具有至少一個(gè)手性中心的通式1化合物拆分成其對(duì)映體，例如通過手性相柱色譜法拆分，通過將非對(duì)映異構(gòu)鹽分級(jí)結(jié)晶來(lái)拆分，或通過將它們分別與旋光性輔助酸例如酒石酸、O，O-二苯甲?；剖帷⒄聊X酸、樟腦磺酸或α-甲氧基苯基乙酸形成共軛物來(lái)通過柱色譜法拆分。還可能形成式1非對(duì)映異構(gòu)胺(見方案1和2)，并通過色譜法和/或分級(jí)結(jié)晶來(lái)分離這些非對(duì)映異構(gòu)體。
藥物組合物是通過將式1化合物或其可治療用酸加成鹽與可藥用載體混合而制得的。確切劑量和給藥頻率取決于所治療具體病癥、所治療的病癥的嚴(yán)重程度、具體患者的年齡、體重、一般身體狀況、以及個(gè)體可能正在接受的其他治療，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。因此，可以以治療或藥理有效量將本發(fā)明化合物與可藥用載體、稀釋劑或緩沖劑給藥來(lái)減緩與診斷出的生理病癥有關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)障礙?？蓪⒈景l(fā)明化合物對(duì)人或其它脊椎動(dòng)物靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、局部給藥、經(jīng)皮給藥例如通過皮膚貼劑給藥、頰給藥或口服給藥。
本發(fā)明組合物可呈適于對(duì)人或其它脊椎動(dòng)物給藥的單位劑型，例如片劑、膠囊劑、丸劑、粉劑、粒劑、無(wú)菌非腸道給藥用溶液劑或懸浮劑、口服溶液劑或懸浮劑、含有適當(dāng)量本發(fā)明化合物的水包油和油包水型乳劑、栓劑和流體懸浮劑或溶液劑。對(duì)于口服給藥，可制備固體或流體單位劑型。為了制備固體組合物例如片劑，可將本發(fā)明化合物與常規(guī)組分例如滑石、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硅酸鋁鎂、硫酸鈣、淀粉、乳糖、阿拉伯蝕、甲基纖維素和具有類似功能的藥物稀釋劑或載體混合。膠囊劑可通過將本發(fā)明化合物與惰性藥物稀釋劑混合、并將所得混合物填充到具有適當(dāng)尺寸的硬明膠膠囊中來(lái)制得。軟明膠膠囊劑可通過用機(jī)械裝置將本發(fā)明化合物與可藥用植物油、輕質(zhì)液狀凡士林或其它惰性油的漿液裝入膠囊中而制得。
可制備液體單位劑型或口服給藥，例如糖漿劑、酏劑和懸浮劑?？蓪⑦@些劑型與糖、芳香調(diào)味劑和防腐劑一起溶于含水載體中來(lái)形成糖漿劑。懸浮劑可借助于懸浮劑例如阿拉伯蝕、西黃蓍蝕、甲基纖維素等用含水載體制得。
可用本發(fā)明化合物與無(wú)菌載體制備非胃腸道給藥用液體單位劑型。為了制備溶液劑，可將本發(fā)明化合物溶于注射用水中，過濾滅菌，然后填充到合適的瓶或安瓿中并密封?？蓪⑤o料例如局麻劑、防腐劑和緩沖劑溶于載體中。填充到瓶中后，可將組合物冷凍，并真空除去水。然后可在瓶中稱出該凍干粉末的量，并在使用前重新配制。
本發(fā)明化合物及其生理可接受酸加成鹽具有有價(jià)值的藥理活性，尤其是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有作用，特別是對(duì)多巴胺受體(自身受體和/或突觸后受體)具有刺激作用，或抑制多巴胺受體的作用，從而具有部分激動(dòng)劑特性。對(duì)于哺乳動(dòng)物CNS中的多巴胺受體有高內(nèi)在效力的本發(fā)明化合物適于治療帕金森氏病，既可以單獨(dú)治療，也可以與例如L-DOPA和卡比多巴進(jìn)行聯(lián)合治療。本發(fā)明化合物還是抗血催乳素過多(hyperprolacinergic)藥物。對(duì)于哺乳動(dòng)物CNS中的多巴胺受體有低內(nèi)在效力的本發(fā)明化合物(部分激動(dòng)劑，反激動(dòng)劑(inverseagonist)和/或?qū)箘?適于治療精神障礙例如精神分裂癥。
下述實(shí)施例是為了進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明合成本發(fā)明要求保護(hù)的某些化合物的下述詳細(xì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(還見在各實(shí)施例后面提供的方案1-4)并不是對(duì)本發(fā)明的限制。
將含有4種硝基異構(gòu)體的油狀粗產(chǎn)物溶于甲醇(約50mL)，加入NH4HCOO(2當(dāng)量＞＞＞2×5×66.06＝660mg；取1.0g)和10％Pd/C；約100mg)。將該混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在室溫過夜后沒有發(fā)生任何還原，但是回流約3小時(shí)后，這些硝基異構(gòu)體已經(jīng)轉(zhuǎn)化成胺異構(gòu)體。GC/MS(100-10℃/分鐘-320)表明有4種異構(gòu)體Rt＝10.26分鐘M+在m/e＝246(小)，基峰在m/e＝146(M-100)。觀察到另一顯著峰在m/e＝217(M-29)。其它產(chǎn)物具有相同MS，但是GC保留時(shí)間Rt分別為10.42和11.02分鐘。
乙酰化(Ac2O和吡啶)后給出了下述GC/MS保留時(shí)間Rt分別為13.16、14.00和14.38。GC/MS(100-10℃/分鐘-320)表明有3種(或者可能是4種，如果其中一個(gè)峰有重疊)具有類似光譜的異構(gòu)體M+在m/e＝288(小)，基峰在m/e＝259(M-29)。觀察到其它顯著峰在m/e＝146和188。
將兩種或兩種以上NH2-DPAT異構(gòu)體(對(duì)于GC(100-10℃/分鐘-280)，一個(gè)主峰在Rt＝12.48分鐘；樣品上的2-4個(gè)主峰已經(jīng)被乙?；疪t＝14.98分鐘(14％)，Rt＝15.86分鐘(30％)和Rt＝16.57分鐘(51％))的混合物(660mg；Mw＝246.＞＞＞2.68mmol)溶于HOAc(10mL)，加入KSCN(Mw＝97.18；2×2.68×97.18＝521mg)。在室溫用15分鐘向該混合物中加入Br2(1×2.68×160/3.11＝138μL，在2mL HOAc中)。
該反應(yīng)進(jìn)行得很好，2小時(shí)后，加入水和NaOH(S)以將反應(yīng)堿化，用EtOAc萃取該混合物，然后用二氯甲烷萃取。合并有機(jī)層，干燥并過濾，將溶劑減壓蒸發(fā)，獲得了油狀物(約0.97g)。
GC/MS(100-10℃/分鐘-320)表明有4種異構(gòu)體(或者如果一個(gè)或多個(gè)峰中有重疊的話，也許有更多(最多6種))，除了一個(gè)以外其它都具有類似光譜Rt＝15.45分鐘，M+在m/e＝303(小)，基峰在m/e＝72。其它顯著峰在m/e＝274(M-29)和176(M-100)。該光譜在色譜圖方面與其它峰有幾分差異Rt＝16.27分鐘，M+在m/e＝303(小)，基峰在m/e＝203(M-100)。另一顯著峰在m/e＝274(M-29)。在GC/MS色譜圖中具有該質(zhì)譜的其它峰在Rt＝16.40分鐘和Rt＝16.50分鐘。
用二氧化硅(約100g，用二氯甲烷洗脫，二氯甲烷∶甲醇的比例依次為20∶1、10∶1和5∶1)通過色譜法純化粗產(chǎn)物(油狀物)。餾分體積約為10mL，溶劑快速通過該柱。
合并Fr 14-18并蒸發(fā)19mg；沒有NMR；GC/MS表明除了原料DPAT以外沒有任何值得關(guān)注的峰。
合并Fr 19-24并蒸發(fā)17mg；沒有NMR；GC/MS表明除了原料DPAT以外沒有任何值得關(guān)注的峰。
合并Fr 25-28并蒸發(fā)20mg；NMR表明在δ＝7.0ppm有一個(gè)單峰。另一個(gè)單峰(δ＝7.2ppm)是CHCl3。這值得注意，因?yàn)檫@些收集餾分的GC/MS光譜顯現(xiàn)出溴化產(chǎn)物的大峰(m/e＝388)。
合并Fr 37-46并蒸發(fā)80mg；NMR表明起初可以解釋為AB光譜，但是該雙峰不向右傾斜(屋頂效應(yīng))，下述其它餾分也會(huì)出現(xiàn)這種情況。因此進(jìn)行二維實(shí)驗(yàn)(500MHz機(jī)器)。該實(shí)驗(yàn)表明質(zhì)子間有偶合(因此雙峰在δ＝7.2和7.0處；J＝8Hz)。然而，該光譜在δ＝7.28和7.24處還包含2個(gè)單峰(其強(qiáng)度是推定雙峰的10-20％)。這表明在合并餾分37-46中的化合物混合物可能含有下述兩個(gè)要求保護(hù)的產(chǎn)物中的一個(gè) 通過仔細(xì)觀察餾分(37-46)中的GC/MS峰(Rt＝16.36分鐘)發(fā)現(xiàn)，該峰是裂開的。TLC(使用二氧化硅的TLC，用二氯甲烷∶甲醇5∶1洗脫，施加濃溶液)也表明有2個(gè)點(diǎn)。從這兩種技術(shù)獲得的結(jié)果可支持上述兩種“直環(huán)(straight ring)”異構(gòu)體的混合物。
將Fr 43選出(9mg)，并分別進(jìn)行GC/MS和NMR(300MHz)。GC/MS表明Rt＝16.43分鐘，M+在m/e＝303，基峰在m/e＝203。另一個(gè)顯著峰在m/e＝294(M-29)。該GC/MS峰沒有裂開，因此Fr 43可能含有上述兩種“直環(huán)”異構(gòu)體中的一種。
取出Fr 37-46(10mg)并溶于23mg HOAc，用水稀釋至總體積為1.2mL。以10mg/kg的劑量給一只大鼠在頸部區(qū)域皮下注射，約5分鐘后該大鼠表現(xiàn)出了5-HT行為綜合癥。下唇縮進(jìn)也非常突出，并持續(xù)了約4小時(shí)。因此，F(xiàn)r 37-46中的異構(gòu)體混合物含有一種或幾種藥理活性化合物，可能是上述“直環(huán)”異構(gòu)體中的一種或兩種。
合并Fr 47-55并蒸發(fā)141mg；GC/MS表明主峰在Rt＝16.30分鐘，M+在m/e＝303，基峰在m/e＝203。另一顯著峰是m/e＝274(M-29)。NMR表明在AB光譜中有明顯偶合(0-質(zhì)子；δ＝7.06(d，J＝8Hz)和δ＝6.86(d，J＝8Hz))。
合并Fr 62-66并蒸發(fā)51mg；沒有進(jìn)行GC/MS；NMR表明在AB光譜中有明顯偶合(0-質(zhì)子；δ＝7.06(d，J＝8Hz)和δ＝6.92(d，J＝8Hz))。
備注為了使上述“多目標(biāo)合成”的效率更高，對(duì)于一種或幾種產(chǎn)物(異構(gòu))混合物NO2-DPAT、NH2-DPAT或2-氨基噻唑-DPAT應(yīng)當(dāng)使用半制備和/或制備HPLC?？梢砸哉嗷蚍聪喾绞竭M(jìn)行。
獲得上述“直環(huán)”異構(gòu)體的另一方法是，使用已知的6-氨基-2-(N，N-二丙基氨基)四氫化萘(CAS RN 83343-17-3)和已知的7-氨基-2-(N，N-二丙基氨基)四氫化萘(對(duì)于R-對(duì)映體、(-)-對(duì)映體、(+)-對(duì)映體和外消旋混合物分別使用CAS RNs 200350-40-9，129462-30-2，129462-29-9和83343-37-7)作為原料，按照上述方法和在該實(shí)驗(yàn)部分中其它地方(例如見下文中化合物22的合成)所述方法，在HOAc中與KSCN和Br2進(jìn)行反應(yīng)。
將LiAlH4懸浮在無(wú)水乙醚中，將該懸浮液在冰上冷卻。滴加6-氨基-2-(N-α-甲基芐基-N-丙酰基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(18)在無(wú)水乙醚中的溶液。加入完成后，將該混合物在冰冷卻下攪拌1小時(shí)，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)，之后加熱回流2小時(shí)。冷卻至室溫后，通過小心地加入水、4N NaOH和水(加入順序如此)來(lái)中止反應(yīng)。將該混合物加熱回流直至所有沉淀物變成白色(10分鐘)，冷卻至室溫，經(jīng)硅藻土過濾。用硫酸鈉將濾液干燥，并減壓濃縮。6-氨基-2-(N-正丙基氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(20)將6-氨基-2-((N-α-甲基芐基-N-正丙基)氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(19)和甲酸銨溶于甲醇，加入10％Pd/C(在N2下)。將該反應(yīng)混合物在50℃加熱1小時(shí)。經(jīng)硅藻土濾除Pd/C，將溶劑減壓蒸發(fā)。把殘余物再溶于乙腈中，通過過濾除去固體，將溶劑蒸發(fā)，獲得了產(chǎn)物。6-氨基-2-((N-丙酰基-N-正丙基)氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(21)按照將15轉(zhuǎn)化成16所采用的方法，將6-氨基-2-(N-正丙基氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(20)轉(zhuǎn)化成21。6-氨基-2-(N，N-二正丙基氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(22)將6-氨基-2-((N-丙酰基-N-正丙基)氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(21)溶于無(wú)水乙醚，用1小時(shí)滴加BH33(在THF中的溶液)。加入完成后，將該反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，小心地加入水。然后加入10％HCl，將所有揮發(fā)性溶劑減壓蒸發(fā)。用10％NaOH將剩余水溶液堿化，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。
方案2 試劑(a)α-甲基芐基胺，cat.p-TosOH，甲苯，Δ；(b)H2，Pd/C 10％，MeOH；(c)鄰苯二甲酸酐，HOAc，Δ；(d)丙酰氯，Et3N，CH2Cl2；(e)丙酰氯，Et3N，CH2Cl2；(f)H2NNH2·H2O，EtOH，Δ；(g)KSCN，Br2，HOAc，室溫；(h)分離非對(duì)映異構(gòu)體和可能的區(qū)域異構(gòu)體；(i)LiAlH4，Et2O，室溫；(j)HCO2NH4，Pd/C 10％，MeOH，Δ；(k)丙酰氯，Et3N，CH2Cl2；(l)在THF中的BH3，Et2O，Δ。
mp 116-118℃；1H-NMR(CDCl3，200MHz)1.13(t，J＝7.6，3H)，2.15(q，J＝7.6，2H)，2.78(dd，J1＝16.2，J2＝4.3，2H)，3.31(dd，J1＝16.2，J2＝7.0，2H)，4.71-4.80(m，1H)，5.87(brs，1H)，7.15-7.32(m，4H)；13C NMR 9.5，29.5，40.0(2C)，50.2，124.7(2C)，126.6(2C)，140.8(2C)，173.6；MS(EIPI)m/e 189(M+).C12H15NO·°H2OC74.42(74.70)，H8.01(7.85)，N7.24(7.28).5-氨基-2-丙酰胺基二氫化茚(25)將酰胺24(1.0g，5.5mmol)溶于硝基甲烷(18mL)，并在冰上冷卻。用30分鐘滴加由0.74mL濃硝酸、1.6mL水和10mL濃硫酸組成的硝化混合物。加入完成后，將該反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，同時(shí)緩慢地溫?zé)嶂潦覝亍Ｓ帽兄乖摲磻?yīng)，用乙酸乙酯萃取該反應(yīng)混合物。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌一次，用硫酸鎂干燥，并減壓濃縮，獲得了黃色固體(1.2g，95％)，該黃色固體主要由5-硝基-2-丙酰胺基二氫化茚(82％，依據(jù)GC測(cè)定)組成。
將該硝基化合物(1.2g，含有4.3mmol 5-硝基-2-丙酰胺基二氫化茚)和甲酸銨(1.4g，22.2mmol)溶于55mL甲醇中。(在氮?dú)夥障?將該混合物用10％Pd/C(0.56g)處理，然后在50℃攪拌45分鐘。冷卻至室溫后，經(jīng)硅藻土濾除Pd/C，將甲醇減壓蒸發(fā)。用二氧化硅通過MPLC純化殘余的粉紅色固體(開始用100％己烷洗脫，最后用100％乙酸乙酯洗脫)，獲得了22，為白色固體(0.67g，76％)。mp127-128℃；1H-NMR(CDCl3，200MHz)1.08(t，J＝7.7，3H)，2.10(q，J＝7.6，2H)，2.62(dt，J1＝16.1，J2＝4.2，2H)，3.14(dd，J1＝16.2，J2＝7.1，2H)，3.61(s，2H)，4.59-4.67(m，1H)，6.12(d，J＝7.3，1H)，6.45-6.51(m，2H)，6.94(d，J＝7.8，1H)；13C NMR 9.6，29.4，38.9，40.0，50.5，111.5，113.7，125.1，130.5，142.2，145.4，173.6；MS(EIPI)m/e204(M+).元素分析計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C12H16N2C70.59(70.37)，H7.84(7.82)，N13.73(13.67).5-氨基-2-N-正丙基氨基二氫化茚(26)將酰胺25(0.62g，3.0mmol)溶于8mL無(wú)水乙醚，用1小時(shí)滴加BH3(16mL 1M的THF溶液)。加入完成后，將該反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，小心地加入1.6mL水。然后加入3.2mL 10％HCl，將所有揮發(fā)性溶劑減壓蒸發(fā)。用10％NaOH將剩余水溶液堿化，并用乙酸乙酯萃取(220mL)。合并有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。獲得了23，為澄清油狀物(0.52g，90％)。
1H-NMR(CDCl3，200MHz)0.92(t，J＝7.3，3H)，1.43-1.61(m，2H)，2.58-2.71(m，4H)，3.00-3.11(m，2H)，3.52-3.65(m，3H)，6.49(d，J＝7.8，1H)，6.55(s，1H)，6.96(d，J＝7.8，1H)；13C NMR 11.6，23.2，38.9，39.9，50.0，59.8，111.5，113.4，125.0，131.6，142.9，145.0；MS(EIPI)m/e 190(M+).將部分產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成二鹽酸鹽，并用乙醇重結(jié)晶，獲得了白色結(jié)晶。熔點(diǎn)238-242℃。C12H18N2·2HCl的元素分析計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C54.96(54.59)，H7.63(7.66)，N10.69(10.46)。6-氨基-2-N-正丙基氨基噻唑并[4，5-f]二氫化茚(20)按照將17轉(zhuǎn)化成18所采用的方法，將化合物26(0.48g，2.5mmol)轉(zhuǎn)化成20(0.29g，46％)。將該產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成二鹽酸鹽，并用甲醇/乙醇重結(jié)晶，獲得了白色固體。
mp 285-290℃；1H-NMR(D2O，200MHz)0.81(t，J＝7.3，3H)，1.48-1.60(m，2H)，2.92(t，J＝7.7，2H)，2.96-3.08(m，2H)，3.26-3.38(m，2H)，3.95-4.08(m，1H)，7.15(s，1H)，7.40(s，1H)；13C NMR 9.9，19.1，34.9，35.2，47.5，57.9，109.7，118.3，121.9，136.1，136.2，139.5，169.2；IR(KBr，cm-1)2967，2805，2658，1651，1459；MS(EIPI)m/e 247(M+).元素分析計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C13H17N3S1·2HCl·？H2OC47.37(47.78)，H6.07(6.07)，N12.75(12.88).方案3 試劑(a)丙酰氯，NaHCO3，H2O，EtOAc；(b)HNO3/H2SO4/H2O，MeNO2，0℃；(c)NH4CO2，Pd/C 10％，MeOH，50℃；(d)在THF中的BH3，Et2O，室溫→回流；(e)KSCN，Br2，AcOH。
mp 191-192℃；1H-NMR(CDCl3，200MHz)1.04(t，J＝7.3，3H)，1.70-1.82(m，2H)，3.01-3.20(m，4H)，3.29-3.48(m，2H)，4.00-4.11(m，1H)，7.18-7.30(m，4H)；13C NMR 9.7，19.3，35.5(2C)，47.6，58.0，124.2(2C)，127.0(2C)，138.6(2C).HRMS計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C12H17N175.1361(175.1364).2-(N-正丙基-N-丙?；?氨基二氫化茚(28)按照將23轉(zhuǎn)化成24所采用的方法，將化合物27(0.75g，4.3mmol)轉(zhuǎn)化成28。用二氧化硅通過MPLC純化該產(chǎn)物(開始用100％己烷洗脫，最后用已烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脫)，獲得了28，為澄清油狀物(0.73g，74％)。
1H-NMR(CDCl3，200MHz)0.83(t，J＝7.3，3H)，1.16(t，J＝7.3，3H)，1.49-1.63(m，2H)，2.35-2.46(m，2H)，3.03-3.22(m，6H)，4.65-4.83(m，？H)，5.08-5.25(m，？H)，7.16-7.19(m，4H).HRMS計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C15H21NO 231.1623(231.1614).5-氨基-2-(N-正丙基-N-丙?；?氨基二氫化茚(29)將化合物28(0.70g，3.0mmol)轉(zhuǎn)化成5-硝基-2-(N-正丙基-N-丙酰基)氨基二氫化茚，然后按照將24轉(zhuǎn)化成25所采用的方法，將其還原成29。用二氧化硅通過MPLC純化該產(chǎn)物(開始用100％己烷洗脫，最后用己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脫)，獲得了29，為淺黃色油狀物(0.49g，66％)。
1H-NMR(CDCl3，200MHz)0.83(t，J＝7.3，3H)，1.15(t，J＝7.3，3H)，1.48-1.65(m，2H)，2.32-2.43(m，2H)，2.93-3.01(m，4H)，3.05-3.21(m，2H)，3.61(br s，2H)，4.60-4.77(m，？H)，5.10-5.28(m，？H)，6.50(d，J＝7.6，1H)，6.54(s，1H)，6.96(d，J＝7.6，1H)；13C NMR(CD3OD，200MHz)8.6，10.0，22.4，26.3，35.9，36.0，43.9，57.1，111.4，114.3，124.2，130.4，141.5，145.4，175.0.HRMS計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C15H22N2O246.1732(246.1720).5-氨基-2-(N，N-二正丙基氨基)二氫化茚(30)按照將25還原成26所采用的方法，將化合物29(0.43g，1.8mmol)轉(zhuǎn)化成30(0.39g，96％)。
1H-NMR(CDCl3，200MHz)0.88(t，J＝7.3，6H)，1.42-1.57(m，4H)，2.47-2.55(m，4H)，2.77-3.00(m，4H)，3.55-3.67(m，1H)，6.49(d，J＝7.8，1H)，6.54(s，1H)，6.95(d，J＝7.8，1H)；13CNMR 11.7(2C)，19.7(2C)，35.4，36.5，53.2(2C)，63.3，111.3，113.4，124.8，131.8，142.9，144.9.HRMS計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C15H24N2232.1939(232.1936).6-氨基-2-(N，N-二正丙基氨基)噻唑并[4，5-f]二氫化茚(22)和5-氨基-2-(N，N-二正丙基氨基)噻唑并[4，5-e]二氫化茚(31)按照將7轉(zhuǎn)化成8所采用的方法，將化合物30(0.35g，1.5mmol)轉(zhuǎn)化成22和31的混合物。用二氧化硅通過MPLC將產(chǎn)物分離(開始用己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脫，最后用乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1洗脫)，獲得了22，為淺黃色固體(0.18g，41％)，和31，為淺黃色固體(0.11g，25％)。221H-NMR(CD3OD，200MHz)0.94(t，J＝7.3，6H)，1.57-1.66(m，4H)，2.70-2.78(m，4H)，2.92-3.25(m，4H)，3.65-3.88(m，1H)，7.20(s，1H)，7.37(s，1H)；13C NMR 10.3(2C)，17.8(2C)，35.1，35.4，52.5(2C)，63.3，113.1，116.0，129.1，134.0，138.4，150.8，168.2；IR(KBr，cm-1)2967，2632，1638；MS(EIPI)m/e 289(M+).將該化合物轉(zhuǎn)化成二鹽酸鹽，并用100％乙醇重結(jié)晶，獲得了灰白色固體，熔點(diǎn)273-275℃(分解)。元素分析計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)C16H23N3S·2HCl·1/2H2OC51.89(52.02)，H6.49(6.82)，N11.35(11.28)。311H-NMR(CD3OD，200MHz)0.89(t，J＝7.3，6H)，1.46-1.57(m，4H)，2.49-2.57(m，4H)，2.72-3.18(m，4H)，3.52-3.78(m，1H)，7.06(d，J＝8.1，1H)，7.18(d，J＝8.1，1H)；13C NMR 10.6(2C)，18.7(2C)，35.6，35.8，52.6(2C)，62.9，115.7，121.4，126.0，133.4，134.7，150.8，167.5；IR(KBr，cm-1)2966，2717，2633，1637，1458；MS(EIPI)m/e 289(M+).將該化合物轉(zhuǎn)化成二鹽酸鹽，并用100％乙醇重結(jié)晶，獲得了灰白色固體，熔點(diǎn)233-237℃(分解)。C16H23N3S的HRMS計(jì)算值(實(shí)測(cè)值)289.1613(289.1619)。方案4 試劑(a)丙酰氯，NaHCO3，H2O，EtOAc；(b)在THF中的BH3，Et2O，室溫→回流；(c)丙酰氯，Et3N，CH2Cl2；(d)HNO3/H2SO4/H2O，MeNO2，0℃；(e)NH4CO2，Pd/C 10％，MeOH，50℃；(f)在THF中的BH3，Et2O，室溫→回流；(g)KSCN，Br2，AcOH；(h)用二氧化硅柱色譜法分離異構(gòu)體。藥理學(xué)特征可通過一種或幾種下述方法確定本發(fā)明化合物的藥理特征。這些方法的組合可用于評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的親和力與內(nèi)在效力。下述方法只是舉例說明，并不是限制本發(fā)明的藥理范圍。DA受體結(jié)合可在使用例如在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)K-1細(xì)胞中表達(dá)的人多巴胺(DA)D2L、D3或D4.2受體的常規(guī)體外結(jié)合測(cè)試模型中測(cè)試本發(fā)明化合物。在拮抗劑結(jié)合實(shí)驗(yàn)中，通過測(cè)定本發(fā)明化合物從D2L、D3或D4.2受體中置換[3H]-螺哌隆的能力來(lái)確定其親和力。在激動(dòng)劑結(jié)合實(shí)驗(yàn)中，使用[3H]-N-0437(5-羥基-2-(N-正丙基-N-(2-噻吩基乙基)氨基)四氫化萘)或[3H]-NPA(N-丙基去甲阿撲嗎啡)作為放射性配體來(lái)測(cè)定對(duì)于D2L DA受體的親和力。用[3H]-NPA獲得的親和力數(shù)據(jù)與用[3H]-N-0437獲得的親和力數(shù)據(jù)相當(dāng)。內(nèi)在活性(體外方法)可用至少兩種不同的體外功能測(cè)試來(lái)確定本發(fā)明化合物的內(nèi)在效力i)促有絲分裂測(cè)試(Lajiness等人，JPET，1993，267，1573-1581，Chio等人，分子藥理學(xué)(Mol.Pharmacol.)1994，45，51-60)。在用人DA D2或D3受體轉(zhuǎn)染的CHO-L6細(xì)胞中測(cè)定[3H]-胸腺嘧啶脫氧核苷攝取，ii)c-AMP法(Pugsley等人，JPET，1995，274，898-911)。在6-OH-DA損傷大鼠中的對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)可在用6-OH-DA單側(cè)損傷的大鼠中評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物(Ungerstedt和Arbuthnott，腦研究(Brain Res.)1970，24，485-493)。在該模型中，通過腦內(nèi)注射神經(jīng)毒素6-OH-DA將黑質(zhì)紋狀體DA系統(tǒng)一側(cè)(左側(cè)或右側(cè))的DA神經(jīng)元選擇性地完全變性。這使突觸后的過敏性在受損側(cè)逐步出現(xiàn)。通過系統(tǒng)給予DA激動(dòng)劑，大鼠開始對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)，即轉(zhuǎn)向未損傷一側(cè)。這種激起的轉(zhuǎn)動(dòng)行為是化合物DA(D1和/或D2)激動(dòng)劑特性的測(cè)定手段。在大鼠紋狀體中微透析使用重280-320g的雄性Wistar大鼠(得自Harlan，Zeist，TheNetherlands)，如運(yùn)動(dòng)活性實(shí)驗(yàn)所述將其飼養(yǎng)?；旧先缟纤?Westerink，分析化學(xué)趨勢(shì)(Trends in Anal.Chem.)1992，11，176-182)在自由運(yùn)動(dòng)的動(dòng)物中進(jìn)行聯(lián)機(jī)腦微透析。簡(jiǎn)言之，局部施用choral水合物(400 mg/kg ip.)及10％利多卡因?qū)⒋笫舐樽?。然后將大鼠固定在立體定位支架(kopf)上。放置門齒桿，以使腦殼保持水平位置。將腦殼暴露，并鉆孔。在該實(shí)驗(yàn)中使用Y形插管，露出3mm長(zhǎng)端部。透析管(ID0.22mm；OD0.31mm)是用聚丙烯腈甲代烯丙基磺酸酯共聚物制得的(AN 69，Hospal，Bologna，意大利)。將透析膜植入到紋狀體內(nèi)，其坐標(biāo)是依據(jù)Paxinos和Watson(1982)的腦圖譜相對(duì)于前囟點(diǎn)計(jì)算的A+1，L3，D6。用尖針頭取出硬膜。將兩個(gè)錨螺釘放置在近旁的不同骨板上。在插入腦中之前，依次用超純水、甲醇、超純水和林格溶液(1.2mM Ca2+)灌注透析探針。在立體定位引導(dǎo)下，將透析探針放置在鉆孔中。用磷酸鹽(phosphatine)牙科用粘固粉(輔助(associated)牙用產(chǎn)品LTD，Kemdent Works，Purdon，Swinden，Wiltshire SN 59HT)將探針粘固在該位置上。
植入插管17-56小時(shí)后，在清醒的大鼠中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。用林格溶液(147mM NaCl，4mM KCl，1.2mM CaCl2，1.1mM MgCl2)以2升/分鐘的速度(CMA/102微透析泵)灌注紋狀體。實(shí)驗(yàn)后，將大鼠處死，并取出腦。把腦取出后，將其保存在4％仲甲醛溶液中，直至將其切片以控制透析探針的定位。
采用電化學(xué)檢測(cè)法，通過HPLC定量測(cè)定多巴胺、DOPAC和5-HIAA。使用HPLC泵(LKB，Pharmacia)與對(duì)Ag/AgCl參比電極在625mV工作的EC-檢測(cè)器(Antec，Leiden)聯(lián)接。分析柱是Supelco SupelcosilLC-18柱(15cm，4.6mm，3μm)。流動(dòng)相由4.1克/升乙酸鈉(Merck)、85毫克/升辛磺酸(Aldrich)、50毫克/升EDTA(Merck)、8.5％甲醇(Labscan)和超純水的混合物組成(用冰醋酸將pH調(diào)節(jié)至4.1)。統(tǒng)計(jì)學(xué)用序列的Friedman重復(fù)測(cè)量方差分析(Friedman RepeatedMeasures Analysis of Variance on Ranks)通過post-hoc測(cè)試Dunnetts法分析微透析數(shù)據(jù)。
用微透析法評(píng)定22在體內(nèi)對(duì)大鼠紋狀體中DA周轉(zhuǎn)的作用。抑制大鼠中D-苯丙胺誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)過度基本上按Arnt，J.歐洲藥理學(xué)雜志(Eur.J.Pharmacol.)1995，283，55-62)所述進(jìn)行運(yùn)動(dòng)過度測(cè)試。使用重200-250g的雄性Wistar大鼠(得自Harlan，Zeist，The Netherlands)。在實(shí)驗(yàn)前將大鼠成組飼養(yǎng)，使其能任意攝取食物和水，在早晨7.00開始光照，在下午19.00關(guān)燈。用AUTOMEX II活性監(jiān)測(cè)器(Columbus Instruments，Columbus，Ohio，USA)測(cè)定運(yùn)動(dòng)活性。以1mL/kg的體積皮下給予實(shí)驗(yàn)藥物，15分鐘后，給予0.5mg/kg或2mg/kg D-苯丙胺(Sigma，St.Louis，MO，USA)。將藥物溶于鹽水中。給予0.5mg/kgD-苯丙胺后，將大鼠置于固定在活性監(jiān)測(cè)器上的有機(jī)玻璃籠子中，等待5分鐘后開始測(cè)定。以15分鐘的間隔記錄60分鐘活性。

在單側(cè)損傷的狨中的對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)動(dòng)物在本實(shí)驗(yàn)中使用分別重270-450克的6只普通狨(CallitrixJacchus，3只雌性，3只雄性)。將動(dòng)物成對(duì)培養(yǎng)，都在溫度控制(25±1℃)與濕度(50％相對(duì)濕度)控制的環(huán)境中飼養(yǎng)，并采用12小時(shí)晝夜周期(從早晨6點(diǎn)到下午6點(diǎn)給予光照)。在早晨讓狨接受強(qiáng)化乳溶液和面包，下午接受新鮮水果。猴子能隨時(shí)自由地?cái)z取水。
該實(shí)驗(yàn)得到了動(dòng)物倫理學(xué)委員會(huì)(Animal Ethics Committee)，Uppsala大學(xué)的批準(zhǔn)。6-OHDA損傷在80mg/kg氯胺酮(Ketalar，50mg/ml，Parke-Davis)和4.5mg/kg賽拉嗪(Rompurvet.20mg/ml Bayer AG)麻醉下，將動(dòng)物置于Kopf立體定位裝置中。在麻醉誘導(dǎo)前，將動(dòng)物用去甲丙咪嗪(25mg/kg i.m.)預(yù)處理。在手術(shù)期間維持無(wú)菌條件。用抗壞血酸(Research Biochemicals Inc.，Natick，MA)將6-OHDA HBr溶于鹽水至濃度為4mg/ml，并依據(jù)Annet等人報(bào)道的方法(1992)大腦內(nèi)注射到黑質(zhì)紋狀體束的5個(gè)位點(diǎn)內(nèi)。依據(jù)Stephan等人的神經(jīng)圖譜(1980)的腦坐標(biāo)如下前-后(AP)+6.5，內(nèi)側(cè)-外側(cè)(ML)-1.2，背側(cè)-腹側(cè)(DV)+7.0，DV+6.0，ML-2.2，DV+7.5，DV+6.5，ML-3.2，DV+7.5。將毒素注射到腦右側(cè)，除了最內(nèi)側(cè)位點(diǎn)注射3μl以外，其它所有位點(diǎn)都注射2μl。動(dòng)物很快地從手術(shù)中恢復(fù)。
大腦內(nèi)注射至少16個(gè)月后開始實(shí)驗(yàn)。開始實(shí)驗(yàn)前2周，測(cè)試動(dòng)物對(duì)阿撲嗎啡的反應(yīng)。將鹽酸阿撲嗎啡(Apomorphini hydrochloridum1/2 AQ，Apoteksbolaget)以0.15mg/ml的濃度溶于無(wú)菌水。將動(dòng)物單獨(dú)置于具有不銹鋼柵欄門(46.6×62cm)的鋁制觀測(cè)籠子(46.5×46.5×62cm)中，以0.2mg/kg的劑量皮下(s.c.)注射阿撲嗎啡后觀測(cè)60分鐘。在以后的測(cè)試中只使用對(duì)阿撲嗎啡表現(xiàn)出對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)的動(dòng)物。藥物在實(shí)驗(yàn)前，猴子已用其它部分藥物治療過。但是在開始本實(shí)驗(yàn)前至少1個(gè)月，這些猴子不接受任何藥物。在本實(shí)驗(yàn)中使用的所有藥物溶液都是在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天配制的，每只猴子每周只進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)。
多巴胺模擬劑將鹽酸阿撲嗎啡(Apomorphini hydrochloridum1/2 AQ，Apoteksbolaget)以0.2mg/kg的濃度溶于滅菌水，在實(shí)驗(yàn)時(shí)皮下注射到頸部。
將化合物22以三種不同劑量皮下注射到每只猴子的頸部(0.3、1.0和3.0mg/kg)。在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用0.9％鹽水配制化合物22。將化合物22單獨(dú)或與阿撲嗎啡一起皮下注射到頸部。行為評(píng)價(jià)(轉(zhuǎn)動(dòng)行為)行動(dòng)評(píng)價(jià)都在單獨(dú)的觀測(cè)籠子中進(jìn)行?；\子大小為62×46.5×46.5cm，并且在前面有不銹鋼柵欄。給予每種藥物后，每分鐘目測(cè)觀察來(lái)計(jì)數(shù)同側(cè)和對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)，觀察60分鐘。為了評(píng)分，僅計(jì)數(shù)全轉(zhuǎn)。在給藥和觀測(cè)前，先讓動(dòng)物對(duì)籠子習(xí)慣10分鐘。統(tǒng)計(jì)分析用重復(fù)測(cè)量的差異單邊分析(ANOVA)分析數(shù)據(jù)。當(dāng)所得F值涉及p＜0.05時(shí)，用成對(duì)t-檢驗(yàn)比較各組?？山邮艿娘@著性水平是p＜0.05。表1.用或未用0.2mg/kg阿撲嗎啡預(yù)處理的、通過化合物22誘導(dǎo)的對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)?；衔?2的劑量以mg/kg級(jí)非胃腸道給藥。狨體重NaCl 22(0.3) 22(0.3) 22(1.0) 22(1.0) 22(3.0) 22(3.0)編號(hào) 克 ApoNaCl Apo NaCl Apo NaCl Apo4(D24)460 2180157 000 050(Z9)380 47200000 030(D14) 430 76200011 0 021(D21) 290 1114 01179 34 1825 0 134921(D21) 290 - ---1242 - -61(F8)340 1144 58 1494 223 1396 57180535(F3)256 1344 41 1194 92 815 15909在單側(cè)損傷的狨中的同側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)可用合適劑量的(+)-苯丙胺將6-OH-DA損傷的狨預(yù)處理以誘導(dǎo)一定程度的同側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)。本發(fā)明的一些化合物可影響該作用。未損傷一側(cè)的完整DA神經(jīng)元由于給予的(+)-苯丙胺劑量的刺激而釋放DA。釋放的DA將到達(dá)這些神經(jīng)系統(tǒng)的正常敏感性突觸后DA受體，并誘導(dǎo)同側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)行為，該同側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)的強(qiáng)度可能比DA激動(dòng)劑(例如全激動(dòng)劑阿撲嗎啡)誘導(dǎo)的對(duì)側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)小，因?yàn)閾p傷一側(cè)的DA受體比未損傷一側(cè)的DA受體更敏感。采用手工評(píng)分來(lái)定量表示這種同側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)行為。用MPTP處理的Rhesus猴子帕金森氏病模型神經(jīng)毒素1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)的發(fā)現(xiàn)(Langston等人，科學(xué)219，979(1983))給帕金森氏病提供了動(dòng)物模型。MPTP在人和猴子中誘發(fā)的不可逆神經(jīng)學(xué)綜合征在其臨床、病理、生化和藥理特征方面基本上與自發(fā)性帕金森氏病相似(Markey等人，自然311，464(1984))。這種相似性的原因是，MPTP選擇性地破壞腦黑質(zhì)中的小組多巴胺能神經(jīng)細(xì)胞，而自然發(fā)生的帕金森氏病中的變性過程也破壞這些細(xì)胞。甚至有人認(rèn)為，自發(fā)性帕金森氏病的病因是在機(jī)體中形成了MPTP或類似化合物(Snyder，S.H.，自然311，514(1984))。可能作為MPTP特殊代謝的結(jié)果，迄今為止，僅在猴子和人中證實(shí)了MPTP-帕金森氏病圖象的臨床影響。因此，在Rhesus猴子中建立起的該MPTP模型非常適于測(cè)定抗帕金森氏病藥物的活性。某些本發(fā)明化合物具有潛在的抗帕金森氏病作用。用MPTP處理的狨帕金森氏病模型雄性普通狨代表另一這種模型(Ekesbo等人，神經(jīng)報(bào)告(Neuroreport)1997，8，2567-2570)。將雄性普通狨(實(shí)驗(yàn)時(shí)體重為350-385g)在普通籠子中飼養(yǎng)，提供溫度(26±1℃)和濕度(50％相對(duì)溫度)控制環(huán)境和1212小時(shí)光照/黑暗周期(在06.00-18.00小時(shí)提供光照)。猴子可以自由攝取水和新鮮橙汁，每天給予一次粥和面包。所有動(dòng)物用MPTP×HCl處理5天(2.0mg/kg/天，溶于0.9％鹽水中，s.c.)，每天注射1次。用MPTP連續(xù)處理3天后，中斷2天以使動(dòng)物補(bǔ)充體液。MPTP處理第5天后，發(fā)生了伴有運(yùn)動(dòng)不能、運(yùn)動(dòng)過慢和僵硬的嚴(yán)重PD-狀綜合征。通過包括下述項(xiàng)目的可見無(wú)能分級(jí)體系給運(yùn)動(dòng)功能障礙程度評(píng)分警覺性；對(duì)刺激的反應(yīng)；運(yùn)動(dòng)控制；注意力和眼睛運(yùn)動(dòng)；姿勢(shì)；平衡性；能動(dòng)性；發(fā)聲和震顫。對(duì)于每只猴子，在每天早晨進(jìn)行無(wú)能等級(jí)評(píng)定。用MPTP處理的狨L-DOPA/卡比多巴誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)障礙最后一次注射MPTP×HCl后的那天，開始給予左旋多巴/卡比多巴(15/7.5mg/kg，每天給藥2次)，并持續(xù)于整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間。左旋多巴溶液是在含有5％葡萄糖的鹽水中新制備的，左旋多巴/卡比多巴濃度為1.6/0.8mg/ml，并且是i.p.給藥。注射左旋多巴后，在所有動(dòng)物中在5-10分鐘內(nèi)觀察到了帕金森特征的逆轉(zhuǎn)。將姿勢(shì)標(biāo)準(zhǔn)化后，能動(dòng)性和發(fā)聲明顯提高，所有動(dòng)物看上去都非常不安，并且似乎被驅(qū)動(dòng)著運(yùn)動(dòng)。攀爬是顯著特征，在籠子四壁垂直和水平攀爬，并且在天花板上頭朝下爬動(dòng)，并且經(jīng)常伴有固定地拍擊或接觸籠子?xùn)艡诤退谋凇?br> 用左旋多巴處理8-10天后，在測(cè)試動(dòng)物中出現(xiàn)了峰值劑量運(yùn)動(dòng)障礙性運(yùn)動(dòng)，并且在隨后的日子里變得更加嚴(yán)重和普遍。給予左旋多巴后2周，每一動(dòng)物都表現(xiàn)出具有高度再現(xiàn)性的特異反應(yīng)性運(yùn)動(dòng)障礙模式。誘導(dǎo)抗帕金森作用后不久這些運(yùn)動(dòng)障礙性運(yùn)動(dòng)就很明顯，并包括嚴(yán)重的手臂運(yùn)動(dòng)障礙、雙向伸出、揮動(dòng)和遠(yuǎn)側(cè)顫動(dòng)。偶爾看見后肢舞蹈病和偏身舞蹈性顫搐。張力障礙性運(yùn)動(dòng)少見，但是當(dāng)存在時(shí)，它是在左旋多巴給藥前、期間和之后發(fā)生的。張力障礙通常以具有持續(xù)頸后傾的頸張力障礙形式出現(xiàn)。對(duì)于每一動(dòng)物和每一測(cè)試藥物以及給藥劑量，通過現(xiàn)場(chǎng)目測(cè)觀察以及隨后用錄像帶觀察來(lái)評(píng)價(jià)運(yùn)動(dòng)障礙和運(yùn)動(dòng)功能障礙的程度。用特別設(shè)計(jì)的運(yùn)動(dòng)障礙評(píng)分系統(tǒng)給運(yùn)動(dòng)障礙評(píng)分。
所有評(píng)定都由培訓(xùn)過的觀察者進(jìn)行。測(cè)試潛在抗藥物濫用作用的模型最近，許多研究指出，基底前腦邊緣系統(tǒng)內(nèi)酒精與多巴胺傳遞的相互作用可能對(duì)于酒精需求增加特別重要。尤其是，電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指出，在大鼠中系統(tǒng)給予酒精選擇性地刺激了突出到依狀核腹部區(qū)(VTA)的含多巴胺細(xì)胞的活動(dòng)(firing)(Pulvirenti L，Koob GF，1994，多巴胺激動(dòng)劑、部分激動(dòng)劑和精神刺激成癮性，藥理學(xué)趨勢(shì)(TrendsPharmacol.Sci.)15，374-379)。Bono等人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，急性和慢性給予部分多巴胺激動(dòng)劑都顯著降低酒精攝取(Bono G，Balducci C，Richelmi P，Koob GF，Pulvirenti L，1996，多巴胺部分受體激動(dòng)劑降低大鼠酒精攝取，歐洲藥理學(xué)雜志(Eur.J.Pharmacol)296，233-238)。已經(jīng)有人提出多巴胺部分受體激動(dòng)劑降低大鼠中乙醇需求增加特性，這種作用與以前用可卡因觀察到的結(jié)果相似。Pulvirenti和Koob的實(shí)驗(yàn)(Bono G，Balducci C，Richelmi P，Koob Gf，Pulvirenti L，1996，多巴胺部分受體激動(dòng)劑降低大鼠酒精攝取，歐洲藥理學(xué)雜志(Eur.J.Pharmacol)296，233-238)中使用的部分激動(dòng)劑以高親和力與多巴胺受體結(jié)合，但是具有低的內(nèi)在活性。結(jié)果是，在高多巴胺能氣氛條件下這些化合物起拮抗劑作用。在低多巴胺氣氛條件下，例如在去神經(jīng)之后或神經(jīng)遞質(zhì)功能耗盡期間，部分受體激動(dòng)劑表現(xiàn)出激動(dòng)劑特性。本發(fā)明化合物可在抑制藥物濫用的藥理模型(見下文)中表現(xiàn)出作用，并且可能是用于治療藥物濫用的潛在臨床治療劑。材料和方法將在開始訓(xùn)練時(shí)重100-120g的雄性白化Wistar大鼠(CharlesRiver)單獨(dú)飼養(yǎng)，并提供標(biāo)準(zhǔn)的12小時(shí)光照-黑暗周期(從早晨700-下午700提供光照)。開始3天(22小時(shí)/天)不給大鼠提供水，以促使它們?cè)诿刻?小時(shí)的提供酒精期間喝酒精。在隨后的整個(gè)訓(xùn)練和測(cè)試期間大鼠可以隨意攝取食物和水。所有訓(xùn)練和測(cè)試都在飼養(yǎng)籠子中進(jìn)行。通過由Samson(1986)描述、并由Rassnick等人(1992)改進(jìn)的蔗糖褪色技術(shù)的變型訓(xùn)練動(dòng)物喝酒精。在本實(shí)驗(yàn)中，將糖精加到乙醇溶液中以提高酒精溶液的可口性并克服酒精的討厭味道。開始訓(xùn)練大鼠從含有水或0.2％(w/v)糖精強(qiáng)化的兩瓶的任一瓶中飲用，訓(xùn)練3天，每天時(shí)間為120分鐘。然后給大鼠提供每天120分鐘的下述自由選擇條件其中一瓶裝水，另一瓶裝0.2％(w/v)糖精+酒精，酒精每天輪換。在訓(xùn)練的4-10天中，訓(xùn)練大鼠從含有水或乙醇5％(w/y)+糖精0.2％(w/v)的兩瓶的任一瓶中飲用。在訓(xùn)練的10-12天，給大鼠提供裝水或酒精5％(w/v)的兩個(gè)瓶子。以后將酒精濃度提高到8％，給大鼠提供3天的酒精-糖精溶液，提供1天的不含糖精的8％酒精。然后在糖精存在下加入10％酒精，并用該濃度訓(xùn)練3天。然后逐漸降低糖精濃度，在不存在水或食物的缺乏、并且酒精溶液中不含甜味劑的情況下，每天給動(dòng)物提供10％酒精或水的自由選擇。整個(gè)訓(xùn)練期間通常需要20-30天。在訓(xùn)練結(jié)束時(shí)，達(dá)到了穩(wěn)定的基線攝取，定義為連續(xù)3天攝取量的±20％。所有訓(xùn)練和測(cè)試的持續(xù)時(shí)間都是每天120分鐘，在早晨900-下午1200之間進(jìn)行。酒精溶液是用100％乙醇制得的，并且用自來(lái)水稀釋至5，8和10％濃度(w/v)。自由基捕獲特性本發(fā)明化合物可具有自由基捕獲/抗氧化特性，這種特性可用(非酶促)脂質(zhì)過氧化分析測(cè)定。在該分析中，通過將Fe2+和抗壞血酸鹽加到大鼠肝臟微粒體制備物中來(lái)誘導(dǎo)經(jīng)Fenton反應(yīng)的自由基生成。這些自由基引發(fā)稱為脂質(zhì)過氧化的過程，這種脂質(zhì)過氧化可通過自由基捕獲劑來(lái)抑制(Haenen和Bast，F(xiàn)EBS Lett.1983，159，24-28)。
權(quán)利要求
1.具有通式1的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚和2-氨基四氫化萘，及其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽 其中R1和R2可相同或不同，并選自氫原子、具有1-7個(gè)碳原子的烷基或鹵代烷基、具有3-7個(gè)碳原子的(烷基)環(huán)烷基、具有3-6個(gè)碳原子的鏈烯基或鏈炔基、烷基部分具有1-3個(gè)碳原子且芳基核可被取代的芳烷基；n和m是1或2。
2.權(quán)利要求1的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚及其酸加成鹽，其中所述2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚具有通式1a所示結(jié)構(gòu) 其中R1和R2的定義同權(quán)利要求1。
3.權(quán)利要求2的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽，其中R1是正丙基，且R2是H、(C1-C7)烷基或鹵代(C1-C7)烷基，尤其是正丙基。
4.權(quán)利要求2的2-氨基噻唑稠合的2-氨基二氫化茚、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽，其中R1是正丙基，且R2是芳基乙基、尤其是2-噻吩基乙基。
5.權(quán)利要求1的2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘，該化合物具有通式1b所示結(jié)構(gòu)
6.權(quán)利要求1的2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘及其酸加成鹽，其中所述2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘具有通式1c所示結(jié)構(gòu) 其中R1和R2的定義同權(quán)利要求1。
7.權(quán)利要求5和6的2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽，其中R1是正丙基，且R2是H、(C1-C7)烷基或鹵代(C1-C7)烷基、尤其是正丙基。
8.權(quán)利要求5和6的2-氨基噻唑稠合的2-氨基四氫化萘、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽，其中R1是正丙基，且R2是芳基乙基、尤其是2-噻吩基乙基。
9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物，其中酸加成鹽是與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸形成的生理學(xué)可接受酸加成鹽。
10.藥物組合物，其中含有權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物或其生理可接受酸加成鹽作為活性物質(zhì)，并任選含有一種或多種惰性載體和/或稀釋劑。
11.權(quán)利要求1-8的化合物或其生理可接受酸加成鹽在制備用于治療涉及多巴胺受體的中樞神經(jīng)性神經(jīng)-精神病和/或用于治療循環(huán)障礙的藥物中的應(yīng)用。
12.權(quán)利要求1-8的化合物或其生理可接受酸加成鹽在制備適合治療精神分裂癥的藥物中的應(yīng)用。
13.權(quán)利要求1-8的化合物或其生理可接受酸加成鹽在制備適用于治療帕金森氏病或帕金森神經(jīng)功能障礙的藥物中的應(yīng)用。
14.權(quán)利要求1-8的化合物或其生理可接受酸加成鹽在制備用于治療藥物濫用、尤其是酒精和/或可卡因?yàn)E用的藥物中的應(yīng)用。
15.制備藥物組合物的方法，其特征在于，通過非化學(xué)方法將權(quán)利要求1-8的化合物或其生理可接受酸加成鹽混入一種或多種惰性載體和/或稀釋劑中。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(1)所示2－氨基噻唑稠合的2－氨基二氫化茚和2－氨基四氫化萘、其對(duì)映異構(gòu)體和酸加成鹽:其中R
文檔編號(hào)A61P25/30GK1307569SQ9980805
公開日2001年8月8日 申請(qǐng)日期1999年7月1日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月1日
發(fā)明者黑肯·威爾赫姆·維克斯特羅姆, 坡·艾利克·安德倫, 坡·阿維德·埃米爾·卡爾森, 德克·迪杰克斯特拉, 拉爾斯·谷恩, 利奧納得·亞歷山大·范維列特 申請(qǐng)人:黑肯·威爾赫姆·維克斯特羅姆