專利名稱：1,5－苯并二氮雜類衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在醫(yī)療領(lǐng)域中十分重要的苯并二氮雜類衍生物。具體來說，本發(fā)明涉及新的1，5-苯并二氮雜類衍生物，其可對(duì)抗胃泌素受體和/或CCK-B(縮膽囊素-B)受體，并且涉及用于預(yù)防和/或治療其中上述受體參與的疾病的藥物。
這些CCK和胃泌素具有五個(gè)相同的C-末端氨基酸，并且都通過受體表現(xiàn)其作用。CCK受體分為外周CCK-As和中樞CCK-Bs，外周CCK-As分布在胰腺、膽囊、腸道等中，中樞CCK-Bs分布在腦中。胃泌素受體和CCK-Bs在受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)中顯示出類似的特性并具有高度同源性，因而可以將它們稱作“CCK-Bs/胃泌素受體”。此類受體，如胃泌素受體或CCK-B受體的拮抗劑化合物可以用來治療和/或預(yù)防胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎、胰腺炎、佐林格-埃利森(Zollinger-Ellison)綜合征、竇性G細(xì)胞增生、基底粘膜增生、膽囊炎、膽石絞痛、蠕動(dòng)疾病、過敏性腸綜合征、某些類型的腫瘤、進(jìn)食疾病(eating disorder)、住院病(hospitalitis)、恐慌癥(panicdisorder)、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合征、藥物依賴和脫癮。它們也被認(rèn)為具有如鎮(zhèn)靜止痛誘導(dǎo)作用和增強(qiáng)阿片類藥物誘導(dǎo)的鎮(zhèn)靜止痛的作用[《日本藥理學(xué)協(xié)會(huì)通報(bào)》(Bulletin of japanese Pharmacological Society)，106，171-180(1995)；《未來藥物學(xué)》(Drugs of the Future)，18，919-931(1993)；《美國生理學(xué)雜志》(American Journal ofPhysiology)，269，G628-G646(1995)；《美國生理學(xué)雜志》，259，G184-G190(1990)；《歐洲藥理學(xué)雜志》，261，257-263(1994)；《藥理學(xué)趨勢》(Trends in Pharmaeological Science)，15，65-66(1994)]。
作為胃泌素受體拮抗劑，丙谷胺已被公認(rèn)為一種胃潰瘍和胃炎治療藥。然而，丙谷胺對(duì)胃泌素受體或CCK-B受體的親和力低，并因此其治療作用弱。此外，有報(bào)導(dǎo)稱某些苯并二氮雜類衍生物如L-365718(Divazepide，JP 61-63666 A)和L-365260(JP 63-238069 A)表現(xiàn)出CCK-A受體拮抗作用和CCK-B受體拮抗作用。另外，具有強(qiáng)CCK-B拮抗作用的化合物被公開能夠抑制五肽胃泌素刺激的酸分泌(WO 94/438，WO 95/18110)。然而，這些化合物在對(duì)生物體給藥時(shí)不是完全令人滿意。因此，迄今仍然未提供適合臨床應(yīng)用的胃泌素受體或CCK-B受體拮抗劑。
能夠和胃泌素受體或CCK-B受體強(qiáng)有力結(jié)合的化合物可以在消化道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有效預(yù)防和/或治療其中各受體分別參與的疾病。因此極其需要此類化合物。
所以，本發(fā)明提供下式(1)代表的1，5-苯并二氮雜類衍生物 其中R1代表低級(jí)烷基，R2和R3可以相同或不同并代表氫原子或低級(jí)烷基，R4代表環(huán)己基或苯基，和n代表1至3的整數(shù)；或其鹽。
本發(fā)明還提供一種含有1，5-苯并二氮雜類衍生物(1)或其鹽作為有效成分的藥物。
本發(fā)明也提供一種藥物組合物，其中含有1，5-苯并二氮雜類衍生物(1)或其鹽以及可藥用載體。
本發(fā)明還提供作為藥物的1，5-苯并二氮雜類衍生物(1)或其鹽。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種治療胃泌素受體和/或CCK-B受體參與其中的疾病的方法，它包括給藥1，5-苯并二氮雜類衍生物(1)或其鹽。
所以，式(1)中R1、R2和R3表示的低級(jí)烷基實(shí)例可以包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、異戊基、叔戊基、1，2-二甲基丙基、新戊基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、異己基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1-甲基-1-乙基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，2，2-三甲基丙基、庚基、1-甲基己基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、1-乙基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、1-丙基丁基、1-甲基庚基、2-甲基庚基、3-甲基庚基、4-甲基庚基、5-甲基庚基、6-甲基庚基、1-乙基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、1-丙基戊基、2-丙基戊基、3，3，4-三甲基戊基、3，4，4-三甲基戊基、1，1，2，2-四甲基丁基、2，2，3，3-四甲基丁基、和1，1，3，3-四甲基丁基。其中，優(yōu)選碳數(shù)為1至4的烷基，特別優(yōu)選甲基。
特別優(yōu)選其中R1和R2是甲基、n是1和R3是氫原子的式(1)化合物，也就是下式(1a)的化合物 其中R4具有上述相同的含義。
本發(fā)明化合物(1)的鹽的實(shí)例是與無機(jī)酸形成的酸加成鹽，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽和氫碘酸鹽；與有機(jī)酸形成的酸加成鹽，例如甲磺酸鹽和乙磺酸鹽；無機(jī)鹽，例如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和鎂鹽；和有機(jī)鹽，例如銨鹽、吡啶鹽、三乙胺鹽、乙醇胺鹽、反式-4-氨基環(huán)己醇鹽和N，N’-二芐基乙二胺鹽。其中，特別優(yōu)選鈉鹽、反式-4-氨基環(huán)己醇鹽和N，N-二芐基乙二胺鹽。
在本發(fā)明中，包括本發(fā)明的化合物(1)和化合物(1)的各種溶劑化物，如其水合物，以及多晶型物。此外，還包括本發(fā)明化合物(1)的所有外消旋改性體、各種非對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體混合物和光學(xué)活性物質(zhì)。其中，特別優(yōu)選光學(xué)活性物質(zhì)。
本發(fā)明的化合物(1)可以鑒于其基本骨架和基團(tuán)的特征、通過應(yīng)用不同的合成方法而制備。一些代表性制備方法將在下文描述。制備方法A 其中Boc代表叔丁氧羰基，和R1、R2、R3、R4和n具有上述相同的含義。
具體而言，二碳酸二叔丁酯與2-氨基-3-芐氧羰基氨基丙酸反應(yīng)得到2-叔-丁氧羰基氨基-3-芐氧羰基-氨基丙酸，隨后其在催化劑炭載鈀和氫的存在下去芐基化為3-氨基-2-叔-丁氧羰基氨基丙酸。在堿，如碳酸鉀的存在下，2-氟硝基苯和3-氨基-2-叔-丁氧基-羰基氨基丙酸反應(yīng)得到2-叔-丁氧基-羰基氨基-3-(2-硝基苯基)氨基丙酸。將這種產(chǎn)物在催化劑炭載鈀的存在下催化還原，隨后在甲苯中加熱回流，由此得到2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜。該化合物與3-溴環(huán)己烯反應(yīng)得到2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜。在催化劑炭載鈀或氧化鉑的存在下氫化該化合物得到化合物(A)。另一方面，在硝基苯和催化劑炭載鈀或氧化鉑的存在下氫化2-氧代-3-叔-丁氧基羰基-氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜得到化合物(B)。當(dāng)溴甲基叔丁基酮與化合物(A)或(B)在堿，如碳酸鉀存在下反應(yīng)并且隨后用鹽酸或類似物質(zhì)處理脫保護(hù)，可以得到1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-3-氨基-5-環(huán)己基(或苯基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜。該化合物通過與三光氣和3-氨基苯基支鏈脂肪酸在堿，如三乙胺的存在下反應(yīng)，可以得到本發(fā)明的化合物(1)。制備方法B 其中Boc、R1、R2、R3、R4和n具有和上述相同的含義。
具體來說，化合物(A)或化合物(B)通過與鹽酸或類似物質(zhì)反應(yīng)脫保護(hù)后，與三光氣和3-氨基苯基支鏈脂肪酸在堿，如三乙胺的存在下反應(yīng)，由此得到脲基衍生物。該脲基衍生物通過在堿，如碳酸鉀存在下與溴甲基叔丁基酮反應(yīng)，得到本發(fā)明的化合物(1)。
其中R3是低級(jí)烷基的化合物(1)，通過該領(lǐng)域已知的方法用酸或堿進(jìn)行后繼水解可以將本發(fā)明的化合物(1)轉(zhuǎn)化為其中R3是氫原子的本發(fā)明化合物(1)。
如上所述制備的化合物(1)可以以游離形式或以鹽的形式分離，并且隨后純化。分離和純化通過選擇適當(dāng)?shù)某Ｒ?guī)方法如萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、重結(jié)晶、研磨和層析來進(jìn)行。此外，以游離形式分離和純化的本發(fā)明化合物(1)可以用酸或堿轉(zhuǎn)化為鹽，這可以通過將其與酸或堿混合并隨后以所屬領(lǐng)域已知的方式在加熱下溶解或類似處理來進(jìn)行。而且，本發(fā)明化合物(1)的手性異構(gòu)體可利用適當(dāng)?shù)脑匣衔镏苽?。也可以通過常規(guī)外消旋拆分方法制備，例如通過用常規(guī)手性酸將本發(fā)明的化合物(1)轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體鹽，如二苯甲?；剖猁}且隨后對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體鹽進(jìn)行光學(xué)拆分，或通過將其轉(zhuǎn)化為非對(duì)映化合物，分離并隨后進(jìn)行埃德曼(Edman)降解。
本發(fā)明的化合物(1)或其鹽可以經(jīng)口服或非腸道給藥。作為口服劑型，本發(fā)明的化合物可以通過適當(dāng)?shù)嘏c可藥用載體混合加工成固體藥物制劑如片劑、散劑和膠囊，所述可藥用載體例如是賦形劑，如乳糖、甘露糖醇、玉米淀粉和結(jié)晶纖維素；粘合劑如纖維素類衍生物、阿拉伯膠和明膠；崩解劑如羧甲基纖維素鈣；和潤滑劑，如滑石粉和硬脂酸鎂。其也可以形成為液體藥物制劑，如液體制劑、混懸液和乳液。
作為非腸道給藥的劑型，其可以形成注射用液體制劑，如通過將其與水、乙醇、甘油等混合。
本發(fā)明化合物(1)或其鹽的有效治療或預(yù)防上述疾病的劑量根據(jù)藥物劑型、給藥途徑、年齡和病癥而改變。但通常，成人的日口服劑量是1至1000mg，優(yōu)選5至500mg。作為給藥方法，優(yōu)選每天給藥1次或每天分約2或3份給藥。
由于本發(fā)明的化合物(1)或其鹽具有下文所述的強(qiáng)的胃泌素受體和/或CCK-B受體拮抗作用和優(yōu)良的酸分泌抑制作用，它適用于治療、改善和/或預(yù)防胃泌素受體和/或CCK-B受體參與其中的疾病，例如胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎、胰腺炎、佐林格-埃利森綜合征、空泡性G細(xì)胞增生(vaculating G cell hyperplasia)、基底粘膜增生、膽囊炎、膽石絞痛、蠕動(dòng)疾病、過敏性腸綜合征、某些類型的腫瘤、進(jìn)食疾病、住院病、恐慌癥、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合征、藥物依賴和脫癮；并且還可用于誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜止痛作用和增強(qiáng)阿片類藥物誘導(dǎo)的鎮(zhèn)靜止痛作用。
將(±)-2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(2-硝基苯基)-氨基丙酸(325mg)溶解在甲醇(50ml)中，然后加入10％炭載鈀(50mg)。在室溫和氫氣氛下將所得混合物攪拌1小時(shí)。過濾該反應(yīng)混合物且在減壓下濃縮濾液，由此得到(±)-2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(2-氨基苯基)-氨基丙酸。將其懸浮在甲苯(30ml)中。將該混懸液在回流下加熱3小時(shí)，同時(shí)用Dean-Stark提取器除去水。減壓下濃縮所得溶液。殘余物通過在硅膠柱上層析(氯仿∶甲醇＝20∶1)純化后，加入二異丙基醚結(jié)晶出純化的殘余物。此后通過過濾收集所得結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(210mg)。收率76％。熔點(diǎn)185-187℃1H-NMR(CDCl3)δ1.44(9H，s)，3.39-3.47(1H，m)，3.80-3.98(2H，m)，4.4 4-4.55(1H，m)，5.73(1H，brs)，6.71-6.88(3H，m)，6.97-7.03(1H，m)，7.82(1H，brs).(步驟4)(±)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(±)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(28.6g)在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中的溶液內(nèi)加入碳酸氫鈉(17.3g)和3-溴環(huán)己烯(33.2g)，隨后在50℃下攪拌1小時(shí)。使冷卻反應(yīng)混合物。然后加入冰水，用二氯甲烷提取該反應(yīng)混合物。有機(jī)層用鹽水洗滌且隨后用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑。向殘余物中加入二異丙基醚以便結(jié)晶。然后通過過濾收集所得結(jié)晶。結(jié)晶用乙醇洗滌，之后干燥，由此得到標(biāo)題化合物(30.1g)。收率82％。1H-NMR(CDCl3)δ1.41(9H，s)，1.55-2.08(6H，m)，3.23-3.37(1H，m)，3.69-3.82(1H，m)，3.87-4.12(1H，m)，4.42-4.55(1H，m)，5.47-5.54(1H，m)，5.62-6.01(2H，m)，6.90-6.99(2H，m)，7.08-7.22(2H，m)，7.47(1H，brs).(步驟5)(±)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(±)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜草(4.5g)在乙醇(200ml)中的溶液內(nèi)加入10％炭載鈀(1g)，隨后室溫及氫氣氛下攪拌2小時(shí)。過濾該反應(yīng)混合物，減壓下濃縮濾液。然后自乙醇中重結(jié)晶該殘余物，由此得到標(biāo)題化合物(3.35g)。收率74％熔點(diǎn)207-208℃1H-NMR(CDCl3)δ1.11-2.07(19H，m)，3.15-3.27(1H，m)，3.33(1H，dd)，3.68(1H，dd)，4.38-4.49(1H，m)，5.53(1H，d)，6.91-6.96(2H，m)，7.11-7.16(2H，m)，7.45(1H，brs).(步驟6)(±)-1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己烯基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(±)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(3.35g)在二甲亞砜(30ml)中的溶液內(nèi)加入溴甲基叔丁基酮(2g)、碳酸鉀(1.55g)、碘化鉀(125mg)和溴化四(正丁基)銨(120mg)，隨后室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入冰水中，之后用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機(jī)層，然后用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，殘余物通過硅膠色譜(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶3)純化，由此得到標(biāo)題化合物(2.3g)。熔點(diǎn)155-156℃1H-NMR(CDCl3)δ1.15-2.07(28H，m)，3.13-3.24(1H，m)，3.26(1H，dd)，3.61(1H，dd)，4.11(1H，d)，4.39-4.50(1H，m)，5.17(1H，d)，5.57(1H，d)，6.92-7.03(2H，m)，7.12-7.20(2H，m)。(步驟7)
(±)-1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-3-氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(±)-1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(2.2g)在乙醇(10ml)中的溶液內(nèi)加入4N鹽酸-二噁烷溶液(10ml)。在50℃下將所得混合物攪拌30分鐘。減壓下濃縮反應(yīng)混合物，向殘余物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液中和。用二氯甲烷提取所得混合物。有機(jī)層用鹽水洗滌，之后用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑，向殘余物中加入二異丙基醚結(jié)晶。過濾收集所得結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(1.1g)。熔點(diǎn)124-125℃1H-NMR(CDCl3)δ1.11-2.08(21H，m)，3.12-3.27(2H，m)，3.40(1H，dd)，3.53-3.62(1H，m)，4.01(1H，d)，5.29(1H，d)，6.92-7.04(2H，m)，7.15-7.19(2H，m).(步驟8)(±)-1-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-甲氧羰基)乙基苯基]脲在冰冷卻下，向2-(3-氨基苯基)-2-甲基-丙酸甲酯(142mg)在無水四氫呋喃(50ml)中的溶液內(nèi)加入三光氣(81.7mg)。隨后，在15分鐘內(nèi)分5等份、每等份67μL加入三乙胺(335μL)。使所得混合物的溫度升高至室溫，在此溫度將該混合物攪拌5分鐘。在冰冷卻下向該混合物中加入(±)-1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-3-氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(250mg)。使由此得到的混合物的溫度升至室溫，隨后攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，通過過濾收集沉淀的結(jié)晶。將結(jié)晶懸浮在甲醇中，加熱所得懸浮液。使該懸浮液冷卻并通過過濾收集所得結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(250mg)。收率62％1H-NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.82(24H，m)，1.94-2.05(1H，m)，3.16-3.45(3H，m)，3.56(3H，s)，4.30-4.43(2H，m)，5.12(1H，d)，6.52(1H，d)，6.80-6.85(1H，m)，6.98-7.35(7H，m)，8.87(1H，s).(步驟9)(±)-2-[3-[3-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)脲基]苯基]-2-甲基丙酸的制備向(±)-1-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-甲氧羰基)乙基苯基]脲(250mg)在水-四氫呋喃(1∶1，10ml)的溶液中加入一水合氫氧化鋰(91mg)，隨后在加熱回流6小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻。加入1N鹽酸酸化該反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯提取反應(yīng)混合物。有機(jī)層用鹽水洗滌并用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑，通過硅膠柱層析純化殘余物(氯仿∶甲醇＝10∶1)。由此純化的殘余物用異丙醇重結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(128mg)。熔點(diǎn)215-216℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.10-1.82(24H，m)，1.94-2.05(1H，m)，3.16-3.45(3H，m)，4.30-4.43(2H，m)，5.12(1H，d)，6.52(1H，d)，6.84-6.88(1H，m)，6.98-7.39(7H，m)，8.85(1H，s)，12.20(1H，brs).MS(FAB)m/z563(MH+).
(3R)-(-)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(R)-(+)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(6.08g)在無水N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中的溶液內(nèi)加入碳酸氫鈉(3.68g)和3-溴環(huán)己烯(7.06g)，隨后在50℃下攪拌1小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物。然后加入冰水，用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用鹽水洗滌且隨后用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑。通過硅膠柱層析(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶3)純化，由此得到標(biāo)題化合物(7.84g)。[α]D25(C＝1.00，CHCl3)-179°(步驟4)(R)-(-)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(3R)-(-)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-環(huán)己烯-1-基)-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜在四氫呋喃(200ml)中的溶液內(nèi)加入預(yù)還原的氧化鉑(200mg)。室溫和氫氣氛下將所得混合物攪拌2小時(shí)。經(jīng)硅藻土過濾反應(yīng)混合物，減壓下濃縮濾液。在硅膠柱上通過層析(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶3)純化殘余物。向該殘余物中加入二異丙基醚以便結(jié)晶。過濾收集所得結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(5.16g)。收率67％。[α]D23(C＝1.00，CHCl3)-184°(步驟5)(R)-(-)-2-氧代-3-氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜的制備向(R)-(-)-2-氧代-3-叔-丁氧基羰基氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(5.11g)在乙醇(15ml)中的溶液內(nèi)加入4N鹽酸-二噁烷溶液(10ml)。在50℃下將所得混合物攪拌1小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻然后減壓下濃縮。向殘余物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液中和。用氯仿提取所得混合物。有機(jī)層用鹽水洗滌并用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑，用二異丙基醚洗滌殘余結(jié)晶，隨后過濾收集所得結(jié)晶。該結(jié)晶用乙醇和二異丙醚的混合溶劑重結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(2.1g)。熔點(diǎn)180-182℃1H-NMR(CDCl3)δ1.06-2.07(12H，m)，3.17-3.32(2H，m)，3.49-3.62(2H，m)，6.90-6.99(2H，m)，7.09-7.18(2H，m)，7.45(1H，s).[α]D25(C＝1.04，CHCl3)-163°.光學(xué)純度99％ee或更高(通過液相色譜測定)(步驟6)(R)-(-)-1-(2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-叔-丁氧基羰基)乙基苯基]脲的制備在冰冷卻下，向2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙酸叔丁酯(1.88g)在無水四氫呋喃(100ml)中的溶液內(nèi)加入三光氣(890mg)。然后，在15分鐘內(nèi)分5等份、每等份690μL加入三乙胺(3.45mL)。使所得混合物的溫度升高至室溫，在此溫度將該混合物攪拌5分鐘。在冰冷卻下向該液體混合物中加入(R)-(-)-2-氧代-3-氨基-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜(2.0g)。使由此得到的混合物的溫度升至室溫，隨后攪拌1小時(shí)。減壓下濃縮該反應(yīng)混合物。向殘余物中加入水，用二氯甲烷提取。有機(jī)層用鹽水洗滌并用無水硫酸鈉干燥。隨后減壓下蒸除溶劑。用乙腈重結(jié)晶殘余物，由此得到標(biāo)題化合物(2.64g)。收率64％熔點(diǎn)185-187℃[α]D21(C＝1.03，CHCl3)-159°(步驟7)(R)-(-)-1-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-叔丁氧基羰基)乙基苯基]脲的制備向(R)-(-)-1-(2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-叔-丁氧基羰基)乙基苯基]脲(2.6g)在二甲亞砜(50ml)的溶液內(nèi)加入溴甲基叔丁基酮(1.34g)、碳酸鉀(1.04g)、碘化鉀(62mg)和溴化四正丁基銨(73mg)，所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入冰水，隨后用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用鹽水洗滌后用無水硫酸鈉干燥。減壓下蒸除溶劑，通過硅膠柱層析純化殘余物(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2)，由此得到標(biāo)題化合物(2.8mg)。產(chǎn)率90％熔點(diǎn)159-161℃[α]D21(C＝1.2，CHCl3)-69°(步驟8)(R)-(-)-2-[3-[3-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)脲基]苯基]-2-甲基丙酸的制備向(R)-(-)-1-(1-叔-丁基羰基甲基-2-氧代-5-環(huán)己基-1，3，4，5-四氫-2H-1，5-苯并二氮雜-3-基)-3-[3-(1-甲基-1-叔丁氧基羰基)乙基苯基]脲(2.6g)在二氯甲烷(10ml)中的溶液內(nèi)加入三氟乙酸(10ml)，隨后在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓下濃縮反應(yīng)混合物，向殘余物中加入二異丙醚以便結(jié)晶。通過過濾收集所得結(jié)晶，由此得到標(biāo)題化合物(960mg)。熔點(diǎn)139-144℃[α]D23(C＝1.03，CHCl3)-111°
向2-(3-硝基苯基)-2-甲基丙酸叔丁酯(3.6g)于乙醇(100ml)中的溶液內(nèi)加入10％炭載鈀(400mg)，隨后在室溫和氫氣氛下攪拌2小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，減壓下濃縮所得濾液。在硅膠柱上通過層析(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶5)純化所得殘余物，由此得到2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙酸叔丁酯(2.87g)。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(9H，s)，1.48(6H，s)，3.62(2H，brs)，6.52-6.57(1H，m)，6.65-6.68(1H，m)，6.71-6.76(1H，m)，7.09(1H，t).實(shí)驗(yàn)1<CCK-B受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)>
由Hartley雄性豚鼠分離出大腦皮質(zhì)。將大腦皮質(zhì)與50mMtris-HCl緩沖液(pH 7.4)以50倍該大腦皮質(zhì)重量的量勻漿后，在50,000g下將該勻漿離心10分鐘。向所得沉積物加入等量同樣的緩沖液并反復(fù)離心2次。將最終獲得的沉積物用10mM HEPES緩沖液(pH6.5，此后稱作“溶劑”)均化，該HEPES緩沖液中含有氯化鎂(5mM)、EGTA(1mM)、桿菌肽(0.25mg/ml)和氯化鈉(130mM)，并且該勻漿作為受體樣品提供。
作為結(jié)合實(shí)驗(yàn)，將終濃度為1.0nM(50μL)的[3H]CCK-B溶液和受體樣品(蛋白含量800μg/管)(900μL)加入到溶劑、終濃度為1.0μM的CCK-B溶液或試驗(yàn)化合物溶液(50μL)中，隨后在25℃下反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完全后，通過Wattman GF/B濾器抽濾該反應(yīng)混合物，該濾器事先用0.1％BSA處理，并且立刻用3ml份的冰冷50mM tris-HCl緩沖液(pH 7.4)洗滌該濾器4次。向該濾器中加入ACS-II閃爍劑，在將該濾器放置約24小時(shí)后，通過液體閃爍計(jì)數(shù)器測量濾器上的放射性濃度。把CCK-B(1μM)存在下的結(jié)合記作非特異性結(jié)合，同時(shí)由完全結(jié)合減去非特異性結(jié)合所得的數(shù)值記作特異性結(jié)合，其中所述完全結(jié)合是用所述溶劑代替CCK-B來獲得。由[3H]CCK-B的特異性結(jié)合，計(jì)算化合物的結(jié)合抑制常數(shù)(Ki值)。結(jié)果是，實(shí)施例2的化合物的Ki值測定為0.74nM。試驗(yàn)2<在大鼠中對(duì)五肽胃泌素刺激的酸分泌的抑制實(shí)驗(yàn)>
采用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠。用乙醚麻醉，對(duì)各大鼠進(jìn)行手術(shù)結(jié)扎幽門竇并安放十二指腸內(nèi)插管和胃瘺管(gastric fistrlatube)。手術(shù)完畢后，將大鼠置于Barmann籠內(nèi)。經(jīng)尾靜脈連續(xù)注射15μg/kg/hr五肽胃泌素。用0.5％羧甲基纖維素鈉溶液(以下稱作“溶劑”)將試驗(yàn)化合物配成懸浮液。在開始注射五肽胃泌素1小時(shí)后，經(jīng)十二指腸內(nèi)插管給藥溶劑或試驗(yàn)化合物。用自動(dòng)滴定儀測量取樣胃液的酸度，將產(chǎn)物的酸度和胃液的量記作酸排出量?；谧栽囼?yàn)化合物給藥后的第1小時(shí)至第4小時(shí)的3小時(shí)內(nèi)的酸排出量，用以下公式確定酸排出抑制率。結(jié)果是當(dāng)以0.3mg/kg給藥時(shí)，實(shí)施例2的化合物表現(xiàn)的酸分泌抑制率是72.7％，實(shí)施例5的化合物以0.1mg/kg和0.3mg/kg給藥時(shí)，表現(xiàn)出的酸分泌抑制率分別是48.8％和79.3％。 試驗(yàn)3<CCK-A受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)>
由Hartley雄性豚鼠分離出胰腺。將胰腺與胰腺重量的40倍量的10mM PIPES緩沖液(pH 6.5，以下稱作“溶劑”)一起勻漿。該溶劑含有EGTA(1mM)、氯化鎂(30mM)、桿菌肽(0.02％)、大豆胰蛋白酶(tripsin)抑制劑(0.02％)和蔗糖(0.3M)。經(jīng)紗布過濾后，在50,000g下將該勻漿離心10分鐘。向所得沉積物中加入和沉積物相同量的所述溶劑，隨后離心。向由此獲得的沉積物中加入40倍該沉積物量的所述溶劑，且將沉積物均化。該勻漿作為受體樣品提供。
作為結(jié)合實(shí)驗(yàn)，將終濃度為0.2nM的[3H]L-364718(Divazepide)溶液(50μL)和受體樣本(蛋白含量50μg/管)(900μL)加入到所述溶劑、終濃度為1μM的L-364718溶液或試驗(yàn)化合物溶液(50μL)中，隨后在25℃下反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完全后，通過Wattman GF/B濾器抽濾該反應(yīng)混合物，該濾器事先用0.1％BSA(牛血清蛋白)處理，并且立刻用3ml份的冰冷10mM PIPES緩沖液(pH 6.5)洗滌該濾器3次。向該濾器上加入ACS-II閃爍劑，在將該濾器放置約24小時(shí)后，通過液體閃爍計(jì)數(shù)器測量濾器上的放射性濃度。把L-364718(1μM)存在下的結(jié)合記作非特異性結(jié)合，同時(shí)由完全結(jié)合減去非特異性結(jié)合所得到的數(shù)值記作特異性結(jié)合，其中所述完全結(jié)合是用溶劑代替L-364718獲得。由[3H]L-364718的特異性結(jié)合，計(jì)算化合物的結(jié)合抑制常數(shù)(Ki值)。結(jié)果是，實(shí)施例2化合物測定的Ki值為438nM。試驗(yàn)4<在具有海登海因氏小胃的長耳短腿小獵犬中對(duì)五肽胃泌素刺激的酸分泌的抑制試驗(yàn)>
采用預(yù)先形成海登海因氏小胃的長耳短腿小獵犬。連續(xù)地靜脈內(nèi)以4μg/kg/hr的量注射五肽胃泌素。在開始連續(xù)注射五肽胃泌素3小時(shí)后，將各試驗(yàn)化合物填充到明膠膠囊中且經(jīng)口給藥。用自動(dòng)滴定儀測量取樣胃液的酸度，將產(chǎn)物的酸度和胃液的量記作酸排出量。假定給藥前1小時(shí)內(nèi)的酸排出量是100％，將試驗(yàn)化合物給藥后第1小時(shí)至第4小時(shí)的3小時(shí)內(nèi)的酸排出量轉(zhuǎn)化為百分比(酸排出百分比)?；谶@種酸排出百分比，用以下公式確定各個(gè)小獵犬的酸排出抑制率。酸排出抑制率的平均值記作該化合物的酸抑制率。結(jié)果當(dāng)以1mg/kg的劑量給藥時(shí)實(shí)施例2的化合物表現(xiàn)出的酸分泌抑制率是77.9％。 藥物制劑實(shí)施例1實(shí)施例5的化合物20g乳糖 315g
玉米淀粉 125g結(jié)晶纖維素 25g將上述組分混合成均勻的混合物。隨后加入7.5％羥丙基纖維素(200ml)。利用裝有篩子的擠出制粒機(jī)(所述篩子的開孔直徑為0.5mm)將所得塊狀物制成顆粒碎片。通過Marumerizer立刻將該顆粒碎片制成球形且隨后干燥成顆粒劑。藥物制劑實(shí)施例2實(shí)施例2的化合物 20g乳糖 100g玉米淀粉 36g結(jié)晶纖維素 30g羧甲基纖維素鈣 10g硬脂酸鎂 4g將上述組分混合成均勻混合物。在單沖頭(single-punch)壓片機(jī)上，通過直徑7.5mm的沖頭將混合物壓成200mg/片的片劑。藥物制劑實(shí)施例3實(shí)施例6的化合物 100mg乙酸鈉 2mg乙酸(調(diào)至pH 5.8) 適量(q.s.)蒸餾水 適量(q.s.)總量 10ml/瓶按照上述配方，以所屬領(lǐng)域已知的方法制備注射液。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的化合物具有強(qiáng)的胃泌素受體和/或CCK-B受體拮抗作用和強(qiáng)的酸分泌抑制作用，同時(shí)高度安全。所以，它們可以廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域，用于治療、改善和/或預(yù)防胃泌素受體和/或CCK-B受體參與其中的疾病，例如胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎、胰腺炎、佐林格-埃利森綜合征、空泡性G細(xì)胞增生、基底粘膜增生、膽囊炎、膽石絞痛、腸蠕動(dòng)疾病、過敏性腸綜合征、某些類型的腫瘤、進(jìn)食疾病、住院病、恐慌癥、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合癥、藥物依賴和脫癮；并且可用于誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜止痛作用和增強(qiáng)阿片類藥物誘導(dǎo)的鎮(zhèn)靜止痛作用。
權(quán)利要求
1.式(1)所示的1，5-苯并二氮雜類衍生物或其鹽 其中R1代表低級(jí)烷基，R2和R3可以相同或不同并代表氫原子或低級(jí)烷基，R4代表環(huán)己基或苯基，以及n代表1至3的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1中所述的1，5-苯并二氮雜衍生物或其鹽，其中R1和R2是甲基，R3是氫原子，和n是1。
3.含有權(quán)利要求1或2中所述的1，5-苯并二氮雜衍生物或其鹽作為有效成分的藥物。
4.一種胃泌素受體和/或CCK-B受體拮抗劑，含有權(quán)利要求1或2中所述的1，5-苯并二氮雜衍生物或其鹽作為有效成份。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的藥物，它是一種酸分泌抑制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求3的藥物，它是適用于進(jìn)食疾病、住院病、恐慌癥、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合癥、藥物依賴、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎或佐林格-埃利森綜合征的預(yù)防劑或治療劑。
7.含有權(quán)利要求1或2中所述的1，5-苯并二氮雜類衍生物或其鹽和可藥用載體的藥物組合物。
8.權(quán)利要求1或2中所述的1，5-苯并二氮雜衍生物或其鹽作為藥物的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8中所述的應(yīng)用，其中所述藥物用于進(jìn)食疾病、住院病、恐慌癥、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合征、藥物依賴、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎或佐林格-埃利森綜合征。
10.一種治療胃泌素受體和/或CCK-B受體參與其中的疾病的方法，該方法包括施用權(quán)利要求1或2中所述的1，5-苯并二氮雜衍生物或其鹽。
11.權(quán)利要求10中所述的治療方法，其中所述疾病選自進(jìn)食疾病、住院病、恐慌癥、抑郁癥、精神分裂癥、帕金森氏綜合征、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、圖雷特氏綜合征、藥物依賴、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃炎、回流性食管炎或佐林格-埃利森綜合征。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(1)所示的1,5－苯并二氮雜類衍生物或其鹽:其中R
文檔編號(hào)A61P25/20GK1307567SQ99807986
公開日2001年8月8日 申請日期1999年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1998年6月5日
發(fā)明者篠崎勝雄, 米田智幸, 村田正和, 三浦直良, 前田清人 申請人:澤里新藥工業(yè)株式會(huì)社