專利名稱：：具有抗腫瘤作用的吲哚基－3－乙醛酸衍生物的制作方法吲哚-3-乙醛酰胺具有多種用途，可作為藥效學(xué)上的活性化合物和藥物化學(xué)中的合成原料。荷蘭專利申請(qǐng)6502481描述了具有抗炎與退熱活性和止痛活性的化合物。英國(guó)申請(qǐng)GB-B1028812使用吲哚基-3-乙醛酸及其酰胺的衍生物作為止痛劑、抗驚厥劑和β-腎上腺素能化合物。G.Domschke等(Ber.94,2353(1961))描述了3-吲哚基乙醛酰胺(原文如此)，它們不具有藥理學(xué)特征。E.Walton在《醫(yī)藥化學(xué)雜志》11,1252(1968)中報(bào)道了吲哚-3-基乙醛酸衍生物，它們對(duì)磷酸甘油脫氫酶和乳酸脫氫酶具有抑制作用。歐洲專利說明書EP675110描述了1H-吲哚-3-乙醛酰胺，它們是sPLA2抑制劑，用于膿毒性休克、胰腺炎的治療和變應(yīng)性鼻炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。本發(fā)明的目的是提供具有有效抗腫瘤作用的N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺，從而賦予有效的藥物價(jià)值。所述化合物作為藥物已經(jīng)公開在DE-A19636150A1中，具有平喘、抗變態(tài)反應(yīng)和免疫抑制/免疫調(diào)節(jié)作用。本發(fā)明因此涉及通式1的N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺(原文如此)在抗腫瘤劑制備中的用途，具有根據(jù)式1的活性物質(zhì)成分的抗腫瘤劑，還涉及它們?cè)谀[瘤病治療中的用途。式1其中各原子團(tuán)R、R1、R2、R3、R4和Z具有下列含義R=氫、(C1-C6)烷基，其中的烷基可以被苯環(huán)單取代或多取代，就該苯環(huán)來說，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基、芐氧基和芐基單取代或多取代，該芐基在苯基部分被(C1-C6)烷基、鹵原子或三氟甲基單取代或多取代，R進(jìn)一步是芐氧羰基(Z基)和叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))，進(jìn)而是乙?；?。R1可以是苯環(huán)，該苯環(huán)被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氰基、鹵素、三氟甲基、羥基、芐氧基、硝基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧羰基氨基和羧基或用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基單取代或多取代，或者可以是式2的吡啶結(jié)構(gòu)及其N-氧化物(原文如此)及其N-氧化物，其中的吡啶結(jié)構(gòu)選擇性地鍵合到環(huán)碳原子2、3和4上，并且可以被取代基R5和R6取代。原子團(tuán)R5和R6可以是相同或不同的，具有(C1-C6)烷基的含義和(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氨基、羥基、鹵素和三氟甲基的含義，進(jìn)一步是乙氧羰基氨基和羧基烷氧基，其中的烷基可以具有1-4個(gè)C原子。R1進(jìn)一步可以是2-或4-嘧啶基雜環(huán)，其中的2-嘧啶基雜環(huán)可以被甲基單取代或多取代，進(jìn)而是被(C1-C6)烷基、鹵素、硝基、氨基和(C1-C6)烷基氨基取代的2-、3-、4-和8-喹啉基結(jié)構(gòu)，是(原文如此)2-、3-和4-喹啉甲基，其中喹啉基和喹啉甲基的吡啶甲基部分的環(huán)碳原子可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氨基和(C1-C6)烷氧羰基氨基取代。R1在R=氫、甲基或芐基和芐氧羰基(Z原子團(tuán))、叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))和乙?；那闆r下，進(jìn)而可以是下列原子團(tuán)-CH2COOH；-CH(CH3)-COOH；-(CH3)2-CH-(CH2)2-CH-COO-；H3C-H2C-CH(CH3)-CH(COOH)-；HO-H2C-CH(COOH)-；phenyl-CH2-CH(COOH)-；(4-imidazolyl)-CH2-CH-(COOH)-；HN=C(NH2)-NH-(CH2)3-CH(COOH)-；H2N-(CH2)4-CH(COOH)-；H2N-CO-CH2-CH-(COOH)-；HOOC-(CH2)2-CH(COOH)-；R1在R是氫、Z基、BOC原子團(tuán)、乙?；蚱S基的情況下，進(jìn)而可以是天然或非天然氨基酸的酸根，例如α-甘氨酰、α-肌氨酰、α-丙氨酰、α-亮氨酰、α-異亮氨酰、α-絲氨酰、α-苯丙氨酰、α-組氨酰、α-脯氨酰、α-精氨酰、α-賴氨酰、α-天冬酰和α-谷氨酰，其中各氨基酸的氨基可以是未保護(hù)的或被保護(hù)的。氨基官能的可能的保護(hù)基團(tuán)是芐酯基(Z原子團(tuán))和叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))以及乙?；?。在R1要求保護(hù)天冬酰和谷氨酰的情況下，第二、未鍵合的羧基以游離羧基或C1-C6鏈烷醇酯的形式存在，例如甲基、乙基或叔丁基的酯。進(jìn)而，R1可以是烯丙基氨基羰基-2-甲基丙-1-基。R和R1進(jìn)一步可以與它們所鍵合的氮原子共同形成式Ⅲ的哌嗪環(huán)或高哌嗪環(huán)，只要R1是氨基亞烷基，其中R7是烷基、苯環(huán)，該苯環(huán)可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵素、硝基、氨基官能和(C1-C6)烷基氨基單取代或多取代。R7進(jìn)而是二苯甲基和雙對(duì)氟二苯甲基(原文如此)。R2可以是氫和(C2-C6)烷基，其中的烷基被鹵素和苯基單取代或多取代，就該苯基來說，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基或芐氧基單取代或多取代。視為R2的(C1-C6)烷基可以進(jìn)一步被2-喹啉基和2-、3-和4-吡啶基結(jié)構(gòu)取代，它們又都可以被鹵素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基單取代或多取代。R2進(jìn)一步是芳?；渲性撛訄F(tuán)上的芳基部分是苯環(huán)，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基或芐氧基單取代或多取代。R3和R4可以是相同或不同的，是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷?；?C1-C6)烷氧基、鹵素和芐氧基。R3和R4進(jìn)而可以是硝基、氨基、(C1-C4)單或二烷基取代的氨基和(C1-C6)烷氧羰基氨基官能或(C1-C6)烷氧羰基氨基-(C1-C6)烷基官能。Z是0和S。關(guān)于原子團(tuán)R、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7的定義烷基、烷酰基、烷氧基或烷基氨基在正常情況下被理解為既有“直鏈”、也有“支鏈”烷基的含義，其中的“直鏈烷基”例如可以是甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基，“支鏈烷基”例如定義了異丙基或叔丁基?！碍h(huán)烷基”被理解為例如是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基等原子團(tuán)。定義“鹵素”代表氟、氯、溴或碘。定義“烷氧基”代表例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、異丙氧基、異丁氧基或戊氧基等原子團(tuán)?；衔镆部梢允褂盟峒映甥}的形式，例如無機(jī)酸的鹽，酸例如鹽酸、硫酸、磷酸，有機(jī)酸的鹽，酸例如乙酸、乳酸、丙二酸、馬來酸、富馬酸、葡糖酸、葡糖醛酸、檸檬酸、撲酸、甲磺酸、三氟乙酸、琥珀酸和2-羥基乙磺酸。式1化合物和它們的鹽都是生物學(xué)上有活性的。式1化合物可以以游離形式或生理學(xué)上可耐受的酸的形式給藥。給藥可以通過口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、透皮或吸入進(jìn)行。本發(fā)明進(jìn)而涉及藥物制劑，含有至少一種式1化合物或它們與生理學(xué)上可耐受的無機(jī)或有機(jī)酸的鹽，適當(dāng)情況下還含有藥學(xué)上可利用的賦形劑和/或稀釋劑或助劑。適當(dāng)?shù)慕o藥劑型例如片劑、包衣片、膠囊、輸注或安瓿溶液、栓劑、貼劑、可以吸入的粉末制劑、懸浮液、霜?jiǎng)┖蛙浉?。下列反?yīng)流程1和2和一般操作描述根據(jù)本發(fā)明的化合物的制備方法。所有化合物都是按照所述方法或相似方法制備的。按照下列流程1可以得到這樣的通式1化合物，其中Z=0，R1=芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基，R2=烷基、芳烷基和雜芳烷基流程1第1階段吲哚衍生物可以是未取代的，或者在C-2上或苯基結(jié)構(gòu)中可以是單取代或多取代的，將其溶于一種質(zhì)子、兩極性非質(zhì)子傳遞或非極性有機(jī)溶劑，例如異丙醇、四氫呋喃、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二噁烷、甲苯或二氯甲烷，滴加到一種堿在適當(dāng)溶劑中的懸浮液中，該懸浮液是在三頸燒瓶中、在N2氣氛下制得的或者以摩爾量或過量使用的，堿例如氫化鈉、氫氧化鉀粉末、叔丁醇鉀、二甲氨基吡啶或氨基鈉。然后，加入所需的烷基、芳烷基或雜芳烷基鹵化物，適當(dāng)時(shí)候加入一種催化劑，例如銅，使混合物反應(yīng)一定時(shí)間，例如30分鐘至12小時(shí)，使溫度保持在0℃與120℃之間的范圍內(nèi)，優(yōu)選為30℃至80℃，特別是在50℃與65℃之間。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物加入到水中，溶液例如用二乙醚、二氯甲烷、氯仿、甲基叔丁基醚或四氫呋喃萃取，在每種情況下所得有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥。有機(jī)相在真空中濃縮，殘余物通過研制法結(jié)晶，或者油性殘余物通過重結(jié)晶法、蒸餾法或硅膠或礬土的柱色譜法或快速色譜法純化。所用洗脫劑例如二氯甲烷與二乙醚的8∶2(vol/vol)混合物或二氯甲烷與乙醇的9∶1(vol/vol)混合物。第2階段將按照上述第1階段操作得到的N-取代的吲哚在氮?dú)夥障氯苡谝环N非質(zhì)子傳遞或非極性有機(jī)溶劑，例如二乙醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二甲苯、二氯甲烷或氯仿，加入到單摩爾高達(dá)60％過量的草酰氯在非質(zhì)子傳遞或非極性溶劑中的溶液中，該溶液是在氮?dú)夥障轮频玫?，溶劑例如二乙醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二甲苯、二氯甲烷，溫度保持在-5℃與20℃之間。反應(yīng)溶液然后在10℃與130℃之間的溫度下加熱30分鐘至5小時(shí)，優(yōu)選在20℃與80℃之間，特別是在30℃與50℃之間，溶劑然后蒸發(fā)。將以這種方式生成的“吲哚基-3-乙醛酰氯”殘余物溶于一種非質(zhì)子傳遞溶劑，例如四氫呋喃、二噁烷、二乙醚、甲苯，或者溶于一種兩極性非質(zhì)子傳遞溶劑，例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基亞砜，冷卻至10℃與-15℃之間的溫度，優(yōu)選在-5℃與0℃之間，在一種酸清除劑的存在下，用伯胺或仲胺在一種稀釋劑中的溶液處理。可行的稀釋劑是上面用于溶解吲哚基-3-乙醛酰氯的溶劑。所用酸清除劑是三乙胺、吡啶、二甲氨基吡啶、堿性離子交換劑、碳酸鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀粉末和過量的反應(yīng)所用伯胺或仲胺。反應(yīng)發(fā)生在0℃至120℃的溫度下，優(yōu)選在20-80℃下，特別是在40℃與60℃之間。反應(yīng)1-3小時(shí)并在室溫下放置24小時(shí)后，過濾酸清除劑的鹽酸鹽，濾液在真空中濃縮，殘余物從有機(jī)溶劑中重結(jié)晶或者通過硅膠或礬土柱色譜法純化。所用洗脫劑例如二氯甲烷與乙醇的混合物(95∶5，vo1/vol)。操作例按照基于流程1的第1和第2階段的一般操作，合成了下列化合物，下表詳細(xì)給出了各自的化學(xué)名稱。在第A-J頁上的表1a-j中，這些化合物的結(jié)構(gòu)和熔點(diǎn)可以從通式1和取代基R1-R4及Z找到。實(shí)施例1N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺(D24241)第1階段1-(4-氟芐基)吲哚向2.64g氫化鈉(0.11mol，礦物油懸浮液)在100ml二甲基亞砜中的混合物中加入11.72g(0.1mol)吲哚的50ml二甲基亞砜溶液?；旌衔镌?0℃下加熱1.5小時(shí)，然后冷卻，滴加15.9g(0.11mol)4-氟芐基氯。溶液加熱至60℃，放置過夜，然后倒入400ml水中，攪拌?；旌衔镉每偭繛?50ml的二氯甲烷萃取幾次，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液在真空中濃縮。殘余物在高真空中蒸餾21.0g(理論產(chǎn)率96％)熔點(diǎn)(0.5mm)140℃第2階段N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺(D24241)在0℃和N2下，向2.25ml草酰氯的25ml乙醚溶液中滴加4.75g(21.1mmol)1-(4-氟芐基)吲哚的25ml乙醚溶液?；旌衔锛訜峄亓?小時(shí)，然后蒸發(fā)溶劑。然后向殘余物中加入50ml四氫呋喃，溶液冷卻至-5℃，滴加4.66g(49.5mmol)4-氨基吡啶的200mlTHF溶液進(jìn)行處理?；旌衔锛訜峄亓?小時(shí)，在室溫下放置過夜。用吸濾法濾出鹽酸4-氨基吡啶，沉淀用THF洗滌，濾液在真空中濃縮，殘余物從乙酸乙酯中重結(jié)晶。產(chǎn)量7.09g(理論產(chǎn)率90％)熔點(diǎn)225-226℃元素分析計(jì)算值C70.77H4.32N11.25實(shí)測(cè)值C71.09H4.36N11.26實(shí)施例2，D24242N-(吡啶-4-基)-(1-甲基吲哚-3-基)乙醛酰胺實(shí)施例3,D24834N-(吡啶-3-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例4,D24835N-(吡啶-3-基)-(1-芐基吲哚-3-基)乙醛酰胺實(shí)施例5,D24836N-(吡啶-3-基)-[1-(2-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例6,D24840N-(4-氟苯基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例7,D24841N-(4-硝基苯基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例8,D24842N-(2-氯吡啶-3-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例9,D24843N-(吡啶-4-基)-(1-芐基吲哚-3-基)乙醛酰胺實(shí)施例10,D24848N-(吡啶-4-基)-[1-(3-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例11,D24849N-(4-氟苯基)-[1-(2-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例12,D24850N-(4-氟苯基)-[1-(3-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例13,D24851N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例14,D24852N-(吡啶-4-基)-[1-(2-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例15,D24853N-(吡啶-2-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例16，D24847N-(吡啶-4-基)-[1-(2-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例17，D24858(4-苯基哌嗪-1-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例18，D24854N-(吡啶-2-基)-(1-芐基吲哚-3-基)乙醛酰胺實(shí)施例19，D25421N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-6-乙氧羰基氨基吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例20，D25422N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-5-乙氧羰基氨基吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例21，D25423N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-6-環(huán)戊氧羰基氨基吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例22，D254204-(吡啶-4-基)哌嗪-1-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例23，D24866N-(3，4，5-三甲氧基芐基)-N-(烯丙氨基羰基-2-甲基丙-1-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例24N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-5-甲氧基吲哚-3-基]乙醛酰胺實(shí)施例25N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-5-乙氧羰基氨基甲基吲哚-3-基]乙醛酰胺按照合成流程1制備的通式1化合物的原料詳見表1。用于合成最終產(chǎn)物D24241、D24242、D24834、D24835、D24836、D24840、D24841、D24842、D24843、D24848、D24849、D24850、D24851、D24852、D24853、D24847、D24858、D24854、D25420、D25422、D25421、D25423的全部前體都是商業(yè)上可得到的。進(jìn)而，其中Z=0、R1=芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基和烯丙氨基羰基-2-甲基丙-1-基，R2=烷基、芳烷基和雜芳烷基的通式1化合物也是可以按照流程2的合成途徑得到的流程2化合物D24241、D24841、D24840和D24834(反應(yīng)流程2的第2階段，另見表1)和它們的反應(yīng)性前體D24825、D24831、D24832和D24833(反應(yīng)流程2的第1階段，另見第K頁上的表2)是按照目前的流程2得到的。N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺(D24241)第1階段N-(吡啶-4-基)-(吲哚-3-基)乙醛酰胺在0℃下，向9ml草酰氯的100ml無水乙醚溶液中滴加10g(85.3mmol)吲哚的100ml乙醚溶液?；旌衔镌诨亓飨卤３?小時(shí)。然后在-5℃下加入12g(127.9mmol)4-氨基吡啶的500ml四氫呋喃懸浮液，反應(yīng)混合物在攪拌下加熱回流3小時(shí)，在室溫下放置過夜。過濾，沉淀用水處理，干燥后的化合物在硅膠柱(硅膠60，MerckAG，Darmstadt)上純化，所用洗脫劑為二氯甲烷/乙醇(10∶1，v/v)。產(chǎn)量9.8g(理論產(chǎn)率43.3％)熔點(diǎn)250℃以上第2階段N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺(D24241)使按照第1階段得到的N-(吡啶-4-基)-(吲哚-3-基)乙醛酰胺與4-氟芐基氯按照“芐基化操作”(第5頁)反應(yīng)，分離所得化合物D24241。產(chǎn)率理論上的41％熔點(diǎn)224-225℃元素分析計(jì)算C70.77H4.32N11.25實(shí)測(cè)C70.98H4.40N11.49通式1化合物按照流程2制備的一般操作第1階段吲哚衍生物可以是未取代的，或者在C-2上或苯環(huán)中可以是取代的，將其溶于一種溶劑，例如上述用于溶解草酰氯的溶劑，在-5℃與+5℃之間的溫度下滴加到單摩爾高達(dá)60％過量的草酰氯在一種非質(zhì)子傳遞或非極性溶劑中的溶液中，該溶液是在氮?dú)夥障轮苽涞模軇├缍颐?、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、二噁烷或二氯甲烷。反應(yīng)溶液然后在10℃與120℃之間的溫度下加熱1至5小時(shí)，優(yōu)選為20℃與80℃之間，特別是在30℃與60℃之間，然后蒸發(fā)溶劑。將(吲哚-3-基)乙醛酰氯殘余物溶解或懸浮在一種非質(zhì)子傳遞溶劑中，例如四氫呋喃、二噁烷、二乙醚、甲苯，或者是一種兩極性非質(zhì)子傳遞溶劑，例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基亞砜，冷卻至-10℃與+10℃之間的溫度，優(yōu)選為-5℃至0℃，在一種酸清除劑的存在下，用伯胺或仲胺在一種稀釋劑中的溶液處理。可行的稀釋劑是上面用于溶解“吲哚基-3-乙醛酰氯”的溶劑。所用酸清除劑是三乙胺、吡啶、二甲氨基吡啶、堿性離子交換劑、碳酸鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀粉末和過量的反應(yīng)所用伯胺或仲胺。反應(yīng)發(fā)生在0℃至120℃的溫度下，優(yōu)選在20-80℃下，特別是在40℃與60℃之間。反應(yīng)1-4小時(shí)并在室溫下放置24小時(shí)后，混合物過濾，沉淀用水消化，用吸濾法濾出，在真空中干燥。所需化合物通過有機(jī)溶劑重結(jié)晶法或者通過硅膠或礬土柱色譜法純化。所用洗脫劑例如二氯甲烷與乙醇的混合物(10∶1，vol/vol)。第2階段將按照上述第1階段操作得到的“吲哚-3-基乙醛酰胺”溶于一種質(zhì)子、兩極性非質(zhì)子傳遞或非極性有機(jī)溶劑，例如異丙醇、四氫呋喃、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二噁烷、甲苯或二氯甲烷，滴加到一種堿在適當(dāng)溶劑中的懸浮液中，該懸浮液是在三頸燒瓶中、在N2氣氛下制得的或者以摩爾量或過量使用的，堿例如氫化鈉、氫氧化鉀粉末、叔丁醇鉀、二甲氨基吡啶或氨基鈉。然后，加入所需的烷基、芳烷基或雜芳烷基鹵化物，該鹵化物是未經(jīng)稀釋的或用一種稀釋劑稀釋過，該稀釋劑例如也用于溶解“吲哚-3-基乙醛酰胺”，適當(dāng)時(shí)候加入一種催化劑，例如銅，使混合物反應(yīng)一定時(shí)間，例如30分鐘至12小時(shí)，使溫度保持在0℃與120℃之間的范圍內(nèi)，優(yōu)選在30℃與80℃之間，特別是在50℃與70℃之間。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物加入到水中，溶液例如用二乙醚、二氯甲烷、氯仿、甲基叔丁基醚、四氫呋喃或正丁醇萃取，在每種情況下所得有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥。有機(jī)相在真空中濃縮，殘余物通過研制法結(jié)晶，或者油性殘余物通過蒸餾法或硅膠或礬土的柱色譜法或快速色譜法純化。所用洗脫劑例如二氯甲烷與二乙醚的8∶2(vol/vol)混合物或二氯甲烷與乙醇的9∶1(v/v)混合物。按照基于合成流程2的第1和第2階段的這種一般操作，合成了化合物D24241、D24841、D24840和D24834，它們也已經(jīng)按照反應(yīng)流程1的合成操作制備過，詳見表1。這些化合物的有關(guān)前體可以從第K和L頁上的表2找到?；衔镌谙铝兴幚砟Ｐ椭酗@示出良好的、依賴于劑量的抗腫瘤作用吲哚、特別是D-24851和D-24241首先在XTT增殖試驗(yàn)/細(xì)胞毒性試驗(yàn)中是清晰可見的(表3和表3a)。在該試驗(yàn)系統(tǒng)中，研究了物質(zhì)對(duì)腫瘤細(xì)胞系增殖行為的作用。在此過程中，測(cè)定了這些物質(zhì)的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)方法描述在Scudiero等1988《癌癥研究》48，4827中。研究當(dāng)中使用下列腫瘤細(xì)胞系KB細(xì)胞系口腔上皮癌，L1210細(xì)胞系小鼠淋巴性白血病，LNCAP細(xì)胞系前列腺癌，和SK-0V-3細(xì)胞系卵巢癌。大量不同的吲哚在全部四種腫瘤細(xì)胞系中都是活性的。D-24851和D-24241顯示出最強(qiáng)的作用，D-24851更強(qiáng)于D-24241(表3和4)。利用D-24851和D-24241在裸鼠中空纖維和L1210(小鼠)測(cè)定中進(jìn)行了進(jìn)一步的對(duì)比研究，兩種化合物都觀察到了依賴于劑量的強(qiáng)抗腫瘤作用(表3和5)。在中空纖維測(cè)定中，兩種化合物的活性幾乎是同樣強(qiáng)的，而對(duì)于L1210，D-24851的活性在口服和腹膜內(nèi)給藥后明顯強(qiáng)于D-24241。與市場(chǎng)上可得到的抗腫瘤物質(zhì)相比，D-24851在多數(shù)情況下，在白血病模型中的活性都明顯強(qiáng)于已知的對(duì)比物(表5)。D-24851與市場(chǎng)上可得到的抗腫瘤物質(zhì)相比更大的優(yōu)點(diǎn)是化合物的低毒性(表3和5)。LD50值為1000mg/kgp.o.和＞1000mg/kgi.p.，因此化合物具有更寬的治療范圍。進(jìn)而，在D-24851給藥后，沒有觀察到DNA的斷裂。在血細(xì)胞生成試驗(yàn)中，D-24851的腹膜內(nèi)給藥也沒有改變?nèi)魏嗡芯康难褐笜?biāo)。在大鼠Dunning腫瘤的進(jìn)一步的化療模型中，在D-24851反復(fù)口服給藥后，觀察到腫瘤生長(zhǎng)的停滯，在某些動(dòng)物中甚至觀察到腫瘤消退。在裸鼠的KB試驗(yàn)中，在兩種吲哚D-24851和D-24241給藥后同樣觀察到了抗腫瘤作用(表3、3a和4)。在利用腫瘤細(xì)胞系L1210、即小鼠淋巴性白血病所進(jìn)行的研究中，在D-24851腹膜內(nèi)或口服給藥后，見到存活時(shí)間明顯地、依賴于劑量地延長(zhǎng)了，劑量為100和147mg/kg多次(圖1a和圖1b)。實(shí)驗(yàn)證明治療范圍更寬，因此，活性物質(zhì)可以以高于商業(yè)上可得到的腫瘤藥物的劑量給藥。本發(fā)明的范圍不希望受到下列細(xì)節(jié)的限制，不過據(jù)說，每日大約20mg至500mg的劑量是口服可行的。在以注射劑或輸液方式靜脈內(nèi)給藥的情況下，可以給以250mg/天或以上，這因患者的體重和各自的耐受性而異。表3根據(jù)實(shí)施例13的組合物D-24851D-24851N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺表3a進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果在D-24851以7×100mg/kg和7×147mg/kgp.o.給藥后，觀察到腫瘤生長(zhǎng)停滯，在某些動(dòng)物中甚至觀察到腫瘤消退。結(jié)晶形式經(jīng)過試驗(yàn)與原始形式相比沒有差異。D-24851不導(dǎo)致DNA的斷裂。在血細(xì)胞生成試驗(yàn)中，D-24851的腹膜內(nèi)給藥沒有改變?nèi)魏嗡芯康难褐笜?biāo)。表4根據(jù)實(shí)施例1的D-24241N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺<tablesid="table2"num="003"><table>模型Result.SK-OV-3KBL1210LNCapMCF-7ToxXTT(μg/ml)EC50≈0.17≈0.02≈0.17＞31.61×ip(mg/kg)LD50≈1581×peros(mg/kg)LD50＞1000腹膜內(nèi)中空纖維4×15.8mg/kgip％INH4643無作用皮下中空纖維4×15.8mg/kgip％INH816833Invivo1×14.7mg/kgip％ILS無作用1×30mg/kgperos％ILS無作用1×464mg/kgperos％ILS444×30mg/kgperos％ILS無作用6×30mg/kgperos％ILS無作用14×30mg/kgperos％ILS無作用19×50mg/kgperos％ILS502×46.4mg/kgip％WHI224×21.5mg/kgip％WHI無作用2×215mg/kgpo％WHI47</table></tables>表5D-24851及D-24241與標(biāo)準(zhǔn)化合物的抗腫瘤作用比較物質(zhì)Tox.L1210XTTmg/kgmg/kgEC50(μg/ml)D-24851≈1000i.p.4×147i.p.KB≈0.01794％ILSL1210≈0.017SKOV3≈0.03LNCAP≈0.03D-24241≈158i.p.19×50p.o.KB≈0.0250％ILSL1210≈0.07SKOV3≈0.17LNCAP＞31.6米托蒽醌16i.v.1×4.64i.v.KB-0.174144％ILSL1210＜0.0003SKOV3～0.174LNCAP～0.0175-氟尿嘧啶----1×147i.p.--72％ILS4×68.1i.p.83％ILS甲氨蝶呤---1×53.7i.p.KB～0.00739％ILSL1210n.d.SKOV3＞31.6LNCAPn.d.依托泊苷158.0i.p.1×46.4i.p.----＞68.1i.v.56％ILSRatjadone～16.01×1.47i.p.KB＜0.003i.p.22％ILSL1210＜0.003-30.0i.v.SKOV3＜0.003LNCAP＜0.003EpothiloneB≈100.0i.p.1×10i.p.KB-0.000244％ILSL1210-0.0017SKOV3-0.0031LNCAP-0.014紫杉酚≈158i.p.1×14.7i.v.KB＜0.00322％ILSL1210＜0.0031×46.4i.v.SKOV3＜0.00361％ILSLNCAP＜0.003長(zhǎng)春新堿≈3.0i.v.1×1.0i.p.KB＜0.00129％ILSL12100.004SKOV30.003LNCAP0.004阿霉素≈27.0i.V.1×14.7i.v.KB0.15111％ILSL12100.174SKOV30.089LNCAP0.17順鉑≈16.0i.p.1×3.16i.p.L12100.30≈73.0p.o.38.9％ILS-25-卡鉑≈158.01×100i.p.----i.p.41％ILS洛鉑≈841.0p.o≈34.0i.p.1×14.7i.p.----55.0％ILS環(huán)磷酰胺≈340.7i.v.1×46.4i.v.----40％ILS異環(huán)磷酰胺≈732i.p.1×316i.p.----89％ILS米替福新≈46.4i.p.noaction----≈464-1000p.o.權(quán)利要求1.通式1的N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺，用作為抗腫瘤劑，其中各原子團(tuán)R、R1、R2、R3、R4和Z具有下列含義R=氫、(C1-C6)烷基，其中的烷基可以被苯環(huán)單取代或多取代，就該苯環(huán)來說，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基、芐氧基和芐基單取代或多取代，該芐基在苯基部分被(C1-C6)烷基、鹵原子或三氟甲基單取代或多取代，R進(jìn)一步是芐氧羰基(Z基)和叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))，進(jìn)而是乙酰基。R1可以是苯環(huán)，該苯環(huán)被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氰基、鹵素、三氟甲基、羥基、芐氧基、硝基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷氧羰基氨基和羧基或用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基單取代或多取代，或者可以是式2的吡啶結(jié)構(gòu)及其N-氧化物及其N-氧化物，其中的吡啶結(jié)構(gòu)選擇性地鍵合到環(huán)碳原子2、3和4上，并且可以被取代基R5和R6取代；原子團(tuán)R5和R6可以是相同或不同的，具有(C1-C6)烷基的含義和(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氨基、羥基、鹵素和三氟甲基的含義，進(jìn)一步是乙氧羰基氨基和羧基烷氧基，其中的烷基可以具有1-4個(gè)C原子；R1進(jìn)一步可以是2-或4-嘧啶基雜環(huán)，其中的2-嘧啶基雜環(huán)可以被甲基單取代或多取代，進(jìn)而是被(C1-C6)烷基、鹵素、硝基、氨基和(C1-C6)烷基氨基取代的2-、3-、4-和8-喹啉基結(jié)構(gòu)，是2-、3-和4-喹啉甲基，其中喹啉基和喹啉甲基的吡啶甲基部分的環(huán)碳原子可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、硝基、氨基和(C1-C6)烷氧羰基氨基取代；R1在R=氫、甲基或芐基和芐氧羰基(Z原子團(tuán))、叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))和乙?；那闆r下，進(jìn)而可以是下列原子團(tuán)-CH2COOH；-CH(CH3)-COOH；-(CH3)2-CH-(CH2)2-CH-COO-；H3C-H2C-CH(CH3)-CH(COOH)-；HO-H2C-CH(COOH)-；phenyl-CH2-CH(COOH)-；(4-imidazolyl)-CH2-CH-(COOH)-；HN=C(NH2)-NH-(CH2)3-CH(COOH)-；H2N-(CH2)4-CH(COOH)-；H2N-CO-CH2-CH-(COOH)-；HOOC-(CH2)2-CH(COOH)-；R1在R是氫、Z基、BOC原子團(tuán)、乙?；蚱S基的情況下，進(jìn)而可以是天然或非天然氨基酸的酸根，例如α-甘氨酰、α-肌氨酰、α-丙氨酰、α-亮氨酰、α-異亮氨酰、α-絲氨酰、α-苯丙氨酰、α-組氨酰、α-脯氨酰、α-精氨酰、α-賴氨酰、α-天冬酰和α-谷氨酰，其中各氨基酸的氨基可以是未保護(hù)的或被保護(hù)的；氨基官能的可能的保護(hù)基團(tuán)是芐酯基(Z原子團(tuán))和叔丁氧羰基(BOC原子團(tuán))以及乙酰基；在R1要求保護(hù)天冬酰和谷氨酰的情況下，第二、未鍵合的羧基以游離羧基或C1-C6鏈烷醇酯的形式存在，例如甲基、乙基或叔丁基的酯；進(jìn)而，R1可以是烯丙基氨基羰基-2-甲基丙-1-基；R和R1進(jìn)一步可以與它們所鍵合的氮原子共同形成式3的哌嗪環(huán)或高哌嗪環(huán)，只要R1是氨基亞烷基，其中式3R7是烷基、苯環(huán)，該苯環(huán)可以被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、鹵素、硝基、氨基官能和(C1-C6)烷基氨基單取代或多取代，R7進(jìn)而是二苯甲基和雙對(duì)氟二苯甲基；R2可以是氫和(C1-C6)烷基，其中的烷基被鹵素和苯基單取代或多取代，就該苯基來說，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基或芐氧基單取代或多取代，視為R2的(C1-C6)烷基可以進(jìn)一步被2-喹啉基和2-、3-和4-吡啶基結(jié)構(gòu)取代，它們又都可以被鹵素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基單取代或多取代；R2進(jìn)一步是芳酰基，其中該原子團(tuán)上的芳基部分是苯環(huán)，它可以被鹵素、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、羧基、用C1-C6鏈烷醇酯化的羧基、三氟甲基、羥基、甲氧基、乙氧基或芐氧基單取代或多取代；R3和R4可以是相同或不同的，是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷?；?、(C1-C6)烷氧基、鹵素和芐氧基；R3和R4進(jìn)而可以是硝基、氨基、(C1-C4)單或二烷基取代的氨基和(C1-C6)烷氧羰基氨基官能或(C1-C6)烷氧羰基氨基-(C1-C6)烷基官能；Z是O和S。2.根據(jù)權(quán)利要求1的式1a的N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺，用作為抗腫瘤劑，其中R=氫，R1=4-吡啶基、4-氟苯基，R2=芐基、4-氯芐基、4-氟芐基、3-吡啶甲基、4-溴芐基，R3和R4=氫，和Z是氧。3.具有抗腫瘤作用的藥物組合物，其特征在于它含有至少一種通式1或1a化合物，也可選為它們的酸加成鹽，例如無機(jī)酸的鹽，酸例如鹽酸、硫酸、磷酸，有機(jī)酸的鹽，酸例如乙酸、乳酸、丙二酸、馬來酸、富馬酸、葡糖酸、葡糖醛酸、檸檬酸、撲酸、甲磺酸、三氟乙酸、琥珀酸和2-羥基乙磺酸，以及可能的N-氧化物。4.通式1或1a的N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺及其生理學(xué)上可耐受的酸加成鹽在抗腫瘤劑制備中的用途，該抗腫瘤劑在用于腫瘤病的治療時(shí)使用這些試劑、具體也就是下列化合物或其與生理學(xué)上可耐受的酸的鹽，或者如果可能的話，是它們的N-氧化物D24241N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺D24843N-(吡啶-4-基)-(1-芐基吲哚-3-基)乙醛酰胺D24850N-(4-氟苯基)-[1-(3-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺D24851N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺D25505N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺HC1。5.抗腫瘤劑，包含根據(jù)通式1或1a的一種或多種N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺和可選的它們的生理學(xué)上可耐受的酸加成鹽作為活性試劑，特別是根據(jù)權(quán)利要求4的一種或多種化合物。6.抗腫瘤劑，包含D24241N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺或其鹽酸鹽作為活性試劑。7.抗腫瘤劑，包含D24843N-(吡啶-4-基)-(1-芐基吲哚-3-基)乙醛酰胺作為活性試劑。8.抗腫瘤劑，包含D24850N-(4-氟苯基)-[1-(3-吡啶甲基)吲哚-3-基]乙醛酰胺作為活性試劑。9.抗腫瘤劑，包含D24851N-(吡啶-4-基)-[1-(4-氯芐基)吲哚-3-基]乙醛酰胺作為活性試劑。10.抗腫瘤劑，包含根據(jù)通式1或1a的一種或多種N-取代的吲哚-3-乙醛酰胺作為活性試劑，可選為它們的生理學(xué)上可耐受的酸加成鹽，如果可能的話，是N-氧化物，特別是根據(jù)權(quán)利要求4和6至8的一種或多種化合物，還包含藥學(xué)上可利用的賦形劑和/或稀釋劑或助劑，劑型為片劑、包衣片、膠囊、輸注或安瓿溶液、栓劑、貼劑、可以吸入的粉末制劑、懸浮液、霜?jiǎng)┖蛙浉唷Ｈ恼景l(fā)明涉及通式(1)的N－取代的吲哚－3－乙醛酰胺作為抗腫瘤劑的用途和具有抗腫瘤作用的藥物組合物,其特征是含有一定量的至少一種通式(1)的化合物,可選為它們的生理學(xué)上可耐受的酸加成鹽或其N－氧化物。本發(fā)明還包括抗腫瘤劑,包含根據(jù)通式1的一種或多種N－取代的吲哚－3－乙醛酰胺作為活性試劑,和可選它們的生理學(xué)上可耐受的酸加成鹽,如果可能的話,和其N－氧化物,還包含藥學(xué)上可利用的賦形劑和/或稀釋劑或助劑,劑型為片劑、包衣片、膠囊、輸注或安瓿溶液、栓劑、貼劑、可以吸入的粉末制劑、懸浮液、霜?jiǎng)┖蛙浉?。文檔編號(hào)A61P35/02GK1299280SQ99805923公開日2001年6月13日申請(qǐng)日期1999年3月22日優(yōu)先權(quán)日1998年4月2日發(fā)明者B·尼科爾,I·采蘭伊,J·史密德特,P·艾米格,D·萊徹特,E·昆瑟爾,K·布魯恩申請(qǐng)人:Asta藥物股份公司