專利名稱：：一種復(fù)合銀杏保健品及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種心腦血管保健品及制備方法，具體涉及一種含銀杏葉提取物的復(fù)合保健品及制備方法。中國目前正向老齡化國度邁進(jìn)，老年人口正以每年3％的速度增長，隨之造成各類老年性等疾病如冠心病、動脈粥樣硬化、高血壓、腦中風(fēng)等的發(fā)病率和死亡率也逐年增加，心腦血管疾病已成為威脅人類生命健康的第一殺手。隨著人們生活水平的提高，人們越來越注重生活質(zhì)量的提高，尤其對各種疾病的防治，延緩衰老已提到相當(dāng)重要的位置。銀杏又名白果，素有裸子植物“活化石”之稱，為我國特產(chǎn)。銀杏葉萃取物富含銀杏黃酮甙和銀杏內(nèi)酯以及十七種氨基酸(其中八種為人體必需氨基酸)，具有清除自由基、抗氧化、延緩衰老、拮抗血小板激活因子、改善血流動力學(xué)和血液流變學(xué)、調(diào)整血脂、保護(hù)心腦血管、提高機(jī)體耐缺氧能力等主要功能。目前人們已將銀杏作為治療心腦血管疾病的良藥，廣泛地用于這類疾病的治療。但市場上尚無功能確切的心腦血管保健品。本發(fā)明的目的是要提供一種功能確切的含銀杏的復(fù)合心腦血管保健品，根據(jù)中老年疾病發(fā)生的特點，起到調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)心腦血管、延緩衰老的作用。本發(fā)明的另一目的是提供上述復(fù)合銀杏保健品的制備方法。本發(fā)明公開的復(fù)合銀杏保健品由5～80％銀杏葉提取物(EGb)、5～80％維生素E(VE)、5～80％左旋精氨酸(L-Arg)、5～80％牛磺酸(TAu)及0～40％藥用輔料組成，并采用常規(guī)的制劑方法，制成醫(yī)學(xué)上可接受的各種口服劑型，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑及口服液等。本發(fā)明公開的復(fù)合銀杏保健品通過下述方法制得分別將5～80％銀杏葉提取物、5～80維生素E、5～80％左旋精氨酸、5～80％?；撬?、0～40％藥用輔料過80目篩，40～80℃干燥2小時，冷卻，充分混合，按常規(guī)制劑方法分別制成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑或口服液。本發(fā)明所述的各種制劑用下述常規(guī)方法制得將上述充分混合后的藥粉原料加入粘合劑，過18目篩制成顆粒，60～80℃干燥整粒，即制成顆粒劑。將該干燥后顆粒充填入空膠殼中，即制成膠囊劑。將上述充分混合后的藥粉原料加入粘合劑，制粒、壓片、干燥后即制成片劑。將上述充分混合后的藥粉原料加入增量劑、矯味劑及糖粉加水溶解、過濾、滅菌、灌封即制成口服液。將上述充分混合后的藥粉原料加入粘合劑、增量劑，用蜜泛丸，即制成丸劑。本發(fā)明所述的藥用輔料為醫(yī)學(xué)上可使用的常用藥用輔料，如增量劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味劑等。本發(fā)明所用的銀杏葉提取物，為用通常方法提取的銀杏葉浸膏干燥后的銀杏葉提取物顆粒，其主要活性成份含有銀杏黃酮甙(包括槲皮素、山奈素、異鼠李素以甙類化合物結(jié)合狀態(tài)存在)和銀杏萜內(nèi)酯(包括白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯)。該銀杏提取物黃酮甙含量大于等于24％，內(nèi)酯含量應(yīng)大于等于6％。本發(fā)明制成的口服制劑，每單位劑量含銀杏總黃酮24～40％，維生素E10～160mg，左旋精氨酸10～160mg，?；撬?0～160mg。本發(fā)明的口服制劑，推薦的最佳保健劑量為每日服用銀杏提取物60～100mg，約合銀杏總黃酮為14.4～24mg。自由基引起的脂質(zhì)過氧化作用是促使人體早衰的原因之一，血脂代謝紊亂及高血脂癥與動脈粥樣硬化、心腦血管的發(fā)生也密切相關(guān)。本發(fā)明采用的銀杏提取物(EGb)有超氧歧化酶(SOD)活性及抗自由基作用。實驗顯示EGb對氧自由基有較強(qiáng)抑制作用。EGb通過抑制NADPH-Fe3+氧化酶活性，減慢刺激細(xì)胞的“呼吸爆發(fā)”，減少中性粒細(xì)胞氧自由基的產(chǎn)生。EGb易與OH反應(yīng)，也能和2,2-二苯苦味酰偕腙肼基和阿霉?；磻?yīng)，從而較強(qiáng)地清除自由基。在大鼠的微粒體中能減少自由基誘發(fā)的通過脂質(zhì)過氧化而產(chǎn)生的NADPH-Fe3+離子。EGb能明顯抑制燒傷家兔在鈣載體A2318刺激下的過氧化陰離子(O-2)和白三烯(LTB4)的產(chǎn)生，并能降低缺氧大鼠血漿及紅細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子含量，使血清總SOD活性升高。EGb還可清除羥自由基和二苯基三硝基苯肼(DPPH)，一種穩(wěn)定的自由基。并清除用于微粒體P450孵育阿霉素產(chǎn)生的阿霉素自由基。另外EGb有消除DPPH自由基損傷心肌收縮功能與血管內(nèi)皮依賴性舒張功能，這一作用可能是EGb保護(hù)心臟，對抗心肌缺血再灌注損傷時釋放自由基造成心肌損傷的部分機(jī)制。由于EGb具有親水性和親脂性兩種成份的特點，所以它的功效要較任何單一成分要優(yōu)。EGb中黃酮類化合物是一種很強(qiáng)的抗氧化劑，為O-2捕捉劑和1O2淬滅劑，可使類脂過氧化受抑。EGb能明顯降低脂質(zhì)過氧化作用，有提高血清銅鋅SOD活力和降低血粘度作用。發(fā)現(xiàn)EGb在多種實驗性病理模型上均有抗脂質(zhì)過氧化作用，可抑制環(huán)孢霉素A誘導(dǎo)的人體微粒體脂質(zhì)過氧化?；颊叻﨓Gb一個月后，血漿和紅細(xì)胞過氧化脂含量明顯降低。用銀杏葉的乙醇提取物總黃酮(1.9mg/ml)給大白鼠腹腔注射5mg/(kg.d)，40天后，血清甘油三酯含量明顯降低(P＜0.05)。臨床上，EGb可應(yīng)用于高膽固醇血癥，膽固醇含量平均下降38.66％，同時升高血清磷脂，改善血清膽固醇及磷脂的比列。本發(fā)明采用的VE是一種基本營養(yǎng)素，系公認(rèn)強(qiáng)效抗氧化劑，可結(jié)合飲食中的硒，防止過氧化酶的不飽和鍵結(jié)合在細(xì)胞膜上，保護(hù)紅細(xì)胞免于溶血。VE主要作用于脂質(zhì)雙層中，可直接抵御自由基對膜的攻擊，同時是超氧自由基的中間受體，有效抑制單氧活性和通過細(xì)胞外非酶機(jī)制清除自由基。VE對氧敏感，易被氧化，故在體內(nèi)可保護(hù)其它易被氧化的物質(zhì)(如不飽和脂肪酸，維生素A)，減少過氧化脂質(zhì)的生成。實驗發(fā)現(xiàn)，VE明顯降低血清脂質(zhì)氧化物(LPO)水平，相反可明顯提高血漿超氧化物歧化酶(SOD)活力。給60歲以上老人服用VE檢測顯示，體內(nèi)有害自由基明顯減少。本品配方中加入適量VE，強(qiáng)化了EGb的清除自由基，抗脂質(zhì)過氧化功能，并且補(bǔ)充保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷，保護(hù)臨界細(xì)胞結(jié)構(gòu)，有助于生物膜的穩(wěn)定性，從而達(dá)到延緩衰老的作用。實驗發(fā)現(xiàn)VE可明顯降低大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平，相反可升高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平。VE可顯著降低高脂血癥兔的血中膽固醇含量，并抑制Cu2+誘導(dǎo)LDL氧化修飾，且主動脈弓表面細(xì)胞損傷減輕約32％，提示VE具有保護(hù)早期主動脈受損，可能降低血膽固醇或抑制LDL氧化修飾形成ox-LDL有關(guān)。本發(fā)明采用的左旋精氨酸(L-Arg)是體內(nèi)合成NO的唯一底物，NO有較強(qiáng)的抗氧化作用，其在人體內(nèi)生理功能的研究是近10余年生物醫(yī)學(xué)的重大成就之一。而體內(nèi)NO是在一氧化氮合成酶(NOS)催化下由L-Arg分子合成的。高脂血癥時，發(fā)現(xiàn)機(jī)體血漿和動脈粥樣硬化血管壁的L-Arg相對不足，補(bǔ)充L-Arg可增加血管壁L-Arg的含量。促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞NO的釋放，并明顯抑制低密度脂蛋白(LDL)的氧化修飾作用。另一方面，外源性L-Arg直接對抗內(nèi)、外源氧自由基所致的血管內(nèi)皮損傷，抑制血管組織脂質(zhì)過氧化，降低血中脂質(zhì)過氧化物(MDA)的含量。在上述配方基礎(chǔ)上加入合成NO的唯一底物L(fēng)-Arg，其作用角色是其它成份不可替代的。L-Arg能減少高脂血癥動物的白細(xì)胞粘附和浸潤，逆轉(zhuǎn)高血脂血癥患者及實驗性動脈粥樣硬化(AS)動物外周血管內(nèi)皮依賴性舒張功能的降低，并減輕其形態(tài)損傷。研究顯示家兔額外補(bǔ)充L-Arg可縮小冠狀動脈斑塊面積和降低斑塊內(nèi)膽固醇含量。給30例冠心病高血脂患者口服L-Arg，一個月后同樣發(fā)現(xiàn)患者血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、脂蛋白(a)明顯降低(P＜0.01)，而高密度脂蛋白膽固醇含量升高(P＜0.05)。本發(fā)明采用的牛磺酸TAu具有抗脂質(zhì)過氧化損傷和延緩衰老的作用。在以D-半乳糖制成的代謝紊亂衰老模型動物中，發(fā)現(xiàn)衰老伴有脂質(zhì)過氧化損傷、胸腺萎縮及組織?；撬岷拷档汀Ｅ；撬嶙饔煤颗cSOD和胸腺指數(shù)呈正相關(guān)，與脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA)和褐脂質(zhì)呈負(fù)相關(guān)。在離體大鼠心臟缺血-再灌注模型上再灌注，并給予牛磺酸，能明顯抑制再灌注時MDA的產(chǎn)生，并使谷胱肽增多，增加對氧自由基的清除，減輕其對心肌的損傷。?；撬岬木哂星宄杂苫怪|(zhì)過氧化損傷效應(yīng)，與牛磺酸劑量呈依賴性關(guān)系。牛磺酸對AS及有關(guān)心腦血管病也有防治作用。用高脂、高膽固醇喂飼家兔造成AS的模型上，觀察到給TAu后明顯減少AS斑塊的形成，組織中甘油三酯(TG)、血清磷脂(PL)和膽固醇脂含量分別降低57％、52％和44％(P＜0.01)，血清TG、膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)分別降低43％、42％和46％，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)則升高1.36倍(P＜0.01)。臨床上，給30例高脂血癥患者應(yīng)用TAu，血清TC、TG亦明顯下降，而HDL-C則增加。綜合上述可知，本發(fā)明基礎(chǔ)功能原料EGb有清除體內(nèi)各種自由基，對抗脂質(zhì)過氧化的作用。而VE直接作用于脂質(zhì)雙層中，抑制單氧活性和通過細(xì)胞外非酶機(jī)制清除自由基，抗氧化，且有助于細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，保護(hù)內(nèi)皮免受損傷，強(qiáng)化配合了EGb功能。L-Arg除自身抑制血管組織的脂質(zhì)過氧化外，也是作為體內(nèi)NO的唯一合成前體，故在配方中的角色是其它成份無法替代的。另一功能配方成份TAu，可使谷胱甘肽增多，增加對氧自由基清除。四種功能原料，互補(bǔ)強(qiáng)化，從而達(dá)到充分發(fā)揮本品延緩衰老的作用。另外本發(fā)明配方原料中EGb、VE、L-Arg和TAu都有共同降低血脂含量(特別是包括膽固醇和甘油三酯的含量)，調(diào)節(jié)血脂代謝的作用。同時EGb可升高血清磷脂，進(jìn)一步改善血清膽固醇及磷脂的比例；VE可抑制LDL氧化修飾，減輕細(xì)胞內(nèi)皮的損傷；另外脂蛋白(a)是一種新的含載脂蛋白B的脂蛋白，其濃度升高與冠心病發(fā)病率密切相關(guān)，系冠心病的獨立危險因素之一，而L-Arg還可明顯補(bǔ)充降低脂蛋白(a)含量。四種功能原料強(qiáng)化互補(bǔ)，從而更顯著、更完善地發(fā)揮本品調(diào)理血脂的作用。用本發(fā)明的復(fù)合銀杏保健品進(jìn)行保健食品功能學(xué)評價測試，證明具有調(diào)節(jié)血脂、延緩衰老的作用。一、調(diào)節(jié)血脂作用1．樣品性狀及處理樣品為本發(fā)明的復(fù)合銀杏膠囊(雙基膠囊)，內(nèi)容物為黃棕色粉末，以水調(diào)制成各劑量，供試。2．實驗動物Wistar大鼠，雄性，體重90～110g。由上海醫(yī)科大學(xué)動物房提供。3．劑量設(shè)計樣品人體推薦劑量為每天6.7mg/kg，本實驗設(shè)低、中、高三個劑量組，分別為34、67、200mg/kg，分別相當(dāng)于人體推薦劑量的5、10、30倍，對照組飲用蒸餾水。4．高脂高營養(yǎng)飼料每100g基礎(chǔ)飼料中加膽固醇4g，膽鹽0.5g，豬油10g，白糖10g，雞蛋1只，奶粉20g。5．實驗方法和結(jié)果取大白鼠40只，以普通飼料喂飼5天后，稱重，取尾血，測血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白的正常值，然后根據(jù)基礎(chǔ)血脂水平將大鼠隨機(jī)分為四組，每組10只，分別為樣品三劑量組和對照組，按劑量設(shè)計給予樣品，同時各組均喂飼高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)28天后，稱重，取鼠眼血測各項血脂指標(biāo)。表1樣品對大鼠體重的影響由上表可見，樣品各組動物生長良好，各劑量組體重增長與對照組相比，均無顯著性差異。表2樣品對高脂血癥大鼠血脂的影響*P＜0.05與對照組比較由上表可見，對于喂飼高脂高營養(yǎng)飼料的大鼠，同時經(jīng)口給予不同劑量的樣品28天，可抑制大鼠血清膽固醇和甘油三酯的升高，增加高密度脂蛋白，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，高劑量組膽固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白與對照組相比，均有顯著性差異。表3對正常大鼠血脂水平的影響<tablesid="table3"num="003"><table>劑量動物數(shù)(只)膽固醇(％)甘油三酯(％)高密度脂蛋白(mmol/L)對照低劑量中劑量高劑量10101010-1.4-8.0-19.45-1.0-5.9-22.4+0.06+0.12+0.33</table></tables>由上表可見，樣品高劑量組的膽固醇和甘油三酯分別下降了19.45％和22.4％。高密度脂蛋白上升了0.33mmol/L(12.7mg/dL)。二、抗氧化作用功能試驗1、樣品性狀及處理樣品為本發(fā)明的復(fù)合銀杏膠囊(雙基膠囊)，內(nèi)容物為黃棕色粉末，以水調(diào)制成各劑量，供試。2、劑量設(shè)計本品人體推薦劑量為每日6.7mg/kg。本實驗設(shè)低、中、高三劑量組，分別為34、67、200mg/kg，分別相當(dāng)于人體劑量的5倍、10倍和30倍。另設(shè)一老齡對照組。3、實驗功能Wistar大白鼠，20月齡，雌性，由上海醫(yī)科大學(xué)實驗動物部提供。4、實驗方法與結(jié)果各劑量組給以樣品，對照組飲用蒸餾水，連續(xù)30天。第31天，4組動物摘眼球取血，離心，取血清。測定如下生化指標(biāo)血中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量和血中超氧化物歧化酶(SOD)活力。表4血中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量<tablesid="table4"num="004"><table>劑量動物數(shù)(只)MDA含量(nmol/ml)對照低劑量中劑量高劑量101010107.79±0.636.64±0.865.78±1.14*4.33±0.98*</table></tables>*與對照組相比，P＜0.05由上表可見，樣品中、高劑量組與對照組相比，均存在顯著性差異。表5血中超氧化物歧化酶(SOD)活力*與對照組相比，P＜0.05由上表可見，樣品高劑量組與對照組相比，存在顯著差異。5、果蠅生存試驗(1)樣品性狀及處理樣品為雙基膠囊內(nèi)容物，為黃棕色粉末，加入玉米粉培養(yǎng)基配成所需樣品含量的培養(yǎng)基供試。(2)劑量設(shè)計設(shè)三個劑量組，分別給予含0.0026％、0.013％、0.065％的培養(yǎng)基，每組用果蠅200只，雌雄各半。普通對照組給予普通玉米粉培養(yǎng)基。(3)實驗動物OregonK野生型黑果蠅(Drosophilamelanogaster)。(4)實驗方法與結(jié)果收集八小時內(nèi)新羽化的果蠅成蟲，乙醚麻醉下區(qū)分雌雄隨機(jī)分組，分別稱重后進(jìn)行試驗，普通對照組給予普通玉米培養(yǎng)基，試驗組分別給予含不同濃度樣品的培養(yǎng)基。實驗條件氣溫25℃±1℃，相對濕度60-80％，每四天更換新鮮配制的培養(yǎng)基一次，每兩天觀察記錄果蠅生存數(shù)和死亡數(shù)，直到全部果蠅死亡為止。計算出半數(shù)死亡時間平均壽命和平均最高壽命等三個指標(biāo)。表6對果蠅生存試驗的影響a由壽命最長的10只果蠅計算得出*與對照組相比壽命延長，有顯著差異(P＜0.05)。由上表可見，樣品高劑量組的雌、雄果蠅的半數(shù)死亡時間、平均壽命和平均最高壽命與對照組相比，均存在顯著性差異。實驗結(jié)果表明樣品能降低喂飼高脂高營養(yǎng)飼料大鼠的血清膽固醇和甘油三酯含量，升高高密度脂蛋白；降低血中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量，增高血中超氧化物歧化酶(SOD)活力；果蠅生存試驗可明顯延長果蠅的半數(shù)死亡時間，平均壽命和平均最高壽命。本發(fā)明提供的復(fù)合銀杏保健品能起到調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)心腦血管、延緩衰老的作用，且功能確切，服用方便，為中老年人群提供了一種新型、可靠的保健品，對提高人們的生活質(zhì)量具有有益的效果。實施例1、將400g銀杏葉萃取物、200g維生素E、400g左旋精氨酸、600g?；撬?、350g磷酸氫鈣及150g滑石粉分別過80目篩，加水制漿，在混合機(jī)內(nèi)混合，過18～20目篩制粒，60℃～80℃干燥冷卻后經(jīng)整粒制得顆粒劑。實施例2、將實施例1制得的顆粒，裝入空殼中即制得膠囊。實施例3、將200g銀杏葉萃取物、300g維生素E、400g左旋精氨酸、500g?；撬?、450g磷酸氫鈣、150g淀粉、50g微晶纖維素、分別過80目篩，加水制漿，在混合機(jī)內(nèi)混合，過18～20目篩制粒，60℃～80℃干燥冷卻后即制得片劑。實施例4、將600g銀杏葉萃取物、300g維生素E、500g左旋精氨酸、500g?；撬峄旌暇鶆?，用蜜泛丸，即制成丸劑。權(quán)利要求1.一種復(fù)合銀杏保健品，其特征在于其中所述的復(fù)合銀杏保健品是由5～80％銀杏葉提取物、5～80％維生素E、5～80％左旋精氨酸、5～80％牛磺酸及0～40％藥用輔料制成的醫(yī)學(xué)上可接受的各種口服制劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合銀杏保健品，其特征在于其中所述的口服制劑是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑及口服液。3.一種如權(quán)利要求1所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的復(fù)合銀杏保健品是由下列方法制得的分別將5～80％銀杏葉提取物、5～80％維生素E、5～80％左旋精氨酸、5～80％?；撬帷?～40％藥用輔料過80目篩，40～80℃干燥2小時，冷卻，充分混合，按常規(guī)制劑方法分別制成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑或口服液。4.一種如權(quán)利要求1所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的顆粒劑由下述方法制得將權(quán)利要求3制得的藥粉原料加入粘合劑，過18～20目篩制成顆粒，60～80℃干燥整粒，即制成顆粒劑。5.一種如權(quán)利要求3所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的膠囊劑是將權(quán)利要求4制得的顆粒，充填入空膠囊殼中制得的。6.一種如權(quán)利要求3所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的片劑是由下述方法制得的將權(quán)利要求3制得的藥粉原料加入粘合劑，制粒、壓片、干燥后即制成片劑。7.一種如權(quán)利要求3所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的口服液是由下述方法制得的，將權(quán)利要求3制得的藥粉原料加入增量劑、矯味劑及糖粉加水溶解、過濾、滅菌、灌封即制成口服液。8.一種如權(quán)利要求3所述的復(fù)合銀杏保健品的制備方法，其特征在于其中所述的丸劑是由權(quán)利要求3制得的藥粉原料加入粘合劑、增量劑，用蜜泛丸，即制成丸劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種復(fù)合銀杏保健品。該保健品由銀杏提取物、維生素E、左旋精氨酸、牛磺酸和藥用輔料組成,可制成醫(yī)學(xué)上可接受的各種口服制劑。本發(fā)明的復(fù)合銀杏保健品具有調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)心腦血管、延緩衰老的功能,且服用方便,為中老年人群提供了一種新型、可靠的保健品,對提高人們的生活質(zhì)量具有有益的效果。文檔編號A61P9/00GK1301558SQ99127020公開日2001年7月4日申請日期1999年12月28日優(yōu)先權(quán)日1999年12月28日發(fā)明者陳維洲,張培智申請人:上海綠源實業(yè)有限公司