專利名稱：一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，具體地說是一種以一種新型腦神經(jīng)營養(yǎng)因子為主料，以中藥為輔料的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，本發(fā)明還涉及上述藥物的制備方法。
神經(jīng)系統(tǒng)疾病是人的指揮中樞發(fā)生故障的疾病，是嚴(yán)重危害人類健康的常見多發(fā)病。據(jù)有關(guān)資料報(bào)導(dǎo)，我國腦神經(jīng)疾病發(fā)病率占人口的18.4‰，弱智兒童發(fā)病率占22.2‰，老年病的發(fā)病率占老年人口的10％，偏頭痛發(fā)病率占人口的3.5％。再加上外傷、腫瘤、腦卒中，我國神經(jīng)系統(tǒng)疾病的總?cè)藬?shù)有上億人口，并有逐年增加的趨勢。
目前，流行的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床用藥是西藥中的腦活素，這是近10年來發(fā)展起來的一種能夠營養(yǎng)神經(jīng)，激活神經(jīng)生長的較好的藥物，但該藥物療效進(jìn)展緩慢，其價(jià)格昂貴，來源困難，還不能滿足目前神經(jīng)系統(tǒng)疾病臨床治療的需要。
本發(fā)明人長期從事藥物的研究，從博大浩瀚的祖國醫(yī)學(xué)寶庫中吸取營養(yǎng)，力求發(fā)揮中、西藥各自的長處，做到標(biāo)本兼治。在多年的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床發(fā)現(xiàn)，中成藥中含有三七、紅花，麝香等成分的藥物對營養(yǎng)神經(jīng)，興奮神經(jīng)具有一定的作用。將它們與西藥中的神經(jīng)營養(yǎng)因子，特別與腦神經(jīng)營養(yǎng)因子結(jié)合的藥物?？纱蟠蟾纳圃兄委熒窠?jīng)系統(tǒng)疾病的西藥的治療效果，本發(fā)明的目的在于提供一種以腦神經(jīng)營養(yǎng)因子為核心，輔以中草藥成分，在改善現(xiàn)有治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的前提下，又能大大的降低藥物的成本。
本發(fā)明還提供了制備上述治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物的方法。
本發(fā)明的一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑，其特征在于它是由下述原料制成的藥劑(以下均為重量比)干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 0.5-3.5三七 0.1-8紅花 0.35-20麝香酮 0.05-4檸檬酸鹽緩沖劑 5-300 氯化鈉 0.045-4。
制備上述的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑優(yōu)選原料配方為，干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 0.5-2.5三七 0.1-5紅花 0.35-17.5 麝香酮 0.05-2.5檸檬酸鹽緩沖劑 5-250 氯化鈉 0.045-2.25。
制備上述的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑最佳原料配方為，干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 2.5三七 5紅花 17.5 麝香酮 2.5檸檬酸鹽緩沖劑 250氯化鈉 2.25。
所述的腦神經(jīng)營養(yǎng)因子是由新鮮羊腦制得的腦神經(jīng)營養(yǎng)因子。
所述的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所述的劑型。
所述藥劑最好是注射液。
上述治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物的制備方法，依次按下述步驟進(jìn)行(A)腦神經(jīng)營養(yǎng)因子的制備取新鮮羊腦，勻漿化后反復(fù)凍溶，再酸解、中和至PH7.4，離心吸取上清液，分離純化，合并生物活性組分，濾膜除菌，冷藏；B中成藥輔劑的制備取三七、紅花、麝香分別粉碎、分裝、減壓干餾，分別得到三七、紅花、麝香的干餾液后，混合，將其混合液蒸餾，精餾，將精餾液冷藏；再將上述干餾過的藥楂，加水煎二次、濾過、合并濾液、濃縮、加入2倍量的乙醇、攪勻、加熱回流至沸半小時(shí)、冷至室溫、放入冰箱冷藏24小時(shí)以上，傾取上清液后，回收乙醇，重復(fù)上述醇析法后，用定性濾紙濾過，濾液回收乙醇得流浸膏狀物；C成品制備將上述冷藏的中藥精餾液加入氯化鈉及檸檬酸緩沖劑(PH＝7)，在不斷攪拌下緩慢加入上述中藥輔劑流浸膏狀物，調(diào)節(jié)PH＝7.4，加入0.3％活性炭抽濾，精濾，100℃高溫滅菌30分鐘后加入上述冷藏之腦神經(jīng)營養(yǎng)因子，混勻，分裝制得本發(fā)明的治療神經(jīng)性系統(tǒng)疾病的藥物。
于新鮮羊腦制得的濃縮液順序用5微米和2微米二次濾膜除菌。
本發(fā)明的一個(gè)重要特征是本發(fā)明的藥物中含有豐富的促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長、止血、活血、止痛、促醒等功效的成分經(jīng)北京市×××××××測定，各劑量組主要成分如下
本發(fā)明的藥物的化學(xué)特性在于由總勻漿經(jīng)過酸解、中和離心獲得的上清液組分粗產(chǎn)品的生物活性組分對胰蛋白酶是敏感的，表明該藥物中肽類為主要成分。上述上清液提出物粗產(chǎn)品中存在的生物活性組分在SephadexG-50柱上洗脫下來，洗脫時(shí)間近似于細(xì)胞色素C，表明活性分子的等電位近似于細(xì)胞色素C，即約10-10.5。對所得到的生物活性組分進(jìn)行SDS-PAGE電泳，由TSK-CM-3SW柱得到的生物活性物質(zhì)的信號(hào)帶的移動(dòng)情況與標(biāo)準(zhǔn)溶菌酶相近，因而具有的大分子量約為10KD。
本發(fā)明的藥物基于下述的藥效原理1.促進(jìn)神經(jīng)營養(yǎng)腦神經(jīng)營養(yǎng)因子是一群屬于自然生成，具有對腦神經(jīng)特異作用的多肽，其主要作用在于促進(jìn)神經(jīng)元的分化(軸突和樹突的形成)，保持神經(jīng)細(xì)胞的完整性(特定傳導(dǎo)物質(zhì)的代謝)，和防止神經(jīng)細(xì)胞的退化(免于損傷的保護(hù))。腦神經(jīng)營養(yǎng)因子對中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)不同的神經(jīng)細(xì)胞具有促進(jìn)生長的功效，而此功效是隨著該因子的多少而定。本發(fā)明藥物是一種具有營養(yǎng)神經(jīng)、刺激神經(jīng)元再生的藥物，它能誘導(dǎo)神經(jīng)元的分化，保持神經(jīng)元的存活，并保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受缺血和毒性的傷害，免疫組織化學(xué)方法揭示其作用是高度特異性的。實(shí)驗(yàn)顯示，由外周注入，本發(fā)明藥物可通過血腦屏障。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明，它可以達(dá)到以下功效(1)防止自由基生成；(2)保護(hù)易受傷的海馬CA1錐狀細(xì)胞；(3)防止細(xì)胞性毒性水腫的生成；(4)穩(wěn)定腦的微循環(huán)；(5)降低急性腦缺血的死亡率。
2.調(diào)節(jié)神經(jīng)功能電生理顯示本發(fā)明藥物對海馬及皮質(zhì)細(xì)胞具有持久的電生理效應(yīng)(長期的電位增強(qiáng)效應(yīng))，而此電生理效應(yīng)通?？勺鳛榕袛鄬W(xué)習(xí)過程的依據(jù)。組織學(xué)的研究顯示，本發(fā)明藥物可以明顯促進(jìn)海馬錐狀神經(jīng)突觸的形成。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也顯示，本發(fā)明藥物可明顯改善動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力。
3.調(diào)節(jié)神經(jīng)代謝腦組織切片和勻漿研究實(shí)驗(yàn)顯示本發(fā)明藥物可改善有氧性的能量代謝，此外還可提高蛋白質(zhì)合成及改善細(xì)胞離子內(nèi)的交換泵的功能，這些作用反對腦組織有特異性，而并不影響其它器官的效用，另外，在活體內(nèi)本發(fā)明藥物可明顯降低腦內(nèi)的乳酸的濃度，說明本發(fā)明藥物對局部缺血或缺氧的突發(fā)事件具有保護(hù)作用，由于腦內(nèi)的乳酸濃度降低，使氧自由基減少，因此神經(jīng)元的線粒體不易受到損害。
我們對上述本發(fā)明的藥物用動(dòng)物進(jìn)行了毒性或不良影響的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下1.急性毒性實(shí)驗(yàn)當(dāng)使用本發(fā)明藥物，大鼠口服灌胃至1200mg(藥劑量)/Kg(鼠體重)，小鼠口服灌胃3000mg/kg時(shí)，3天內(nèi)觀察，均無任何不良反應(yīng)；2.長期毒性實(shí)驗(yàn)用大鼠、小鼠、兔子分別進(jìn)行靜脈及肌肉注射本發(fā)明藥物進(jìn)行長期毒性實(shí)驗(yàn)，劑量為10、50、125mg/kg/天，連續(xù)20天，停1周后又連續(xù)用藥20天，60天后處死動(dòng)物，取血液分析，結(jié)果生化、尿樣均正常，胃未見病變。用藥組體重、腦重(用藥30天，60天)較對照組增加快，組織病理學(xué)檢查未見病變。兔子125mg/kg/天組發(fā)現(xiàn)肝功轉(zhuǎn)氨酶(主要是血清谷丙及谷草轉(zhuǎn)氨酶)升高及肝臟組織病理學(xué)的病變。而10mg/kg/天及50mg/kg/天組的兔子未發(fā)現(xiàn)對肝臟的毒性作用。而人的臨床用藥為0.3-0.6mg/kg/天(為兔子實(shí)驗(yàn)組的1/417分之一)，證明臨床實(shí)驗(yàn)安全可靠。
3生殖毒性實(shí)驗(yàn)大鼠懷孕6-17天時(shí)靜脈注射給藥劑量為5、15、45mg/kg，每天1次，除5mg/kg劑量組F1乳鼠體重略有下降外，其它無任何不良影響。在另一實(shí)驗(yàn)中，兔子懷孕6-18天時(shí)，靜脈5、15、45mg/kg，結(jié)果本發(fā)明藥物對兔子無任何不良影響。證明本發(fā)明對動(dòng)物及后代無任何影響，即無生殖毒性。
4.致癌毒性本發(fā)明藥物有促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞增殖的作用，但未發(fā)現(xiàn)任何一組有致癌性病變發(fā)生。
該藥于1995年由北京×××××批準(zhǔn)為內(nèi)部制劑，在××××××及××××××二所醫(yī)院經(jīng)3年試用1000余例病人，年齡4-87歲不等，其中創(chuàng)傷性顱腦損傷 421例其它創(chuàng)傷性腦損傷(如出血、手術(shù))213例腦梗塞197例面癱 17例神經(jīng)性耳聾5例老年癡呆 50例偏頭痛98例其它神經(jīng)性疾病21例為了說明本發(fā)明療效，特選擇下列三組，第一組為實(shí)驗(yàn)組，使用傳統(tǒng)的治療方法(胞二磷膽堿、維生素、激素等)加用本發(fā)明的藥物250ml/人/天進(jìn)行治療，第二組為對照組1用傳統(tǒng)的治療方法加用1994年12月從北京××××醫(yī)藥公司購得的由×××××生產(chǎn)的西藥腦活素20ml/人/天(按其藥物說明允許使用的最大劑量)治療，靜脈點(diǎn)滴，對照組2均單獨(dú)使用傳統(tǒng)的治療方法進(jìn)行對比；1.偏癱病人治療對比本組病人均為腦外傷或腦卒中造成的急性損傷，損傷時(shí)間均在30天以內(nèi)，年齡在15-50歲，男女各半，各用藥20天，測定其治療前后肌力，比較如下表1 偏癱病人治療對比
2.昏迷病人治療恢復(fù)情況對比均選用腦外傷或腦卒中而突然昏迷病人各10例，年齡20-60歲，男女均有，發(fā)病3天內(nèi)開始治療。10天前后，用國際通用的Glassgow昏迷指數(shù)計(jì)分法，給予治療前后測評表2 昏迷病人治療對比
3.偏頭痛病人治療對比各組20例，病史均為5年以上，年齡30-50歲，女多于男，入院時(shí)均有頭痛發(fā)作，治療10天，對比頭痛癥狀消失人數(shù)。
表3 偏頭痛病人治療對比
實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表明，本發(fā)明藥物對各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病有明顯的治療效果。
經(jīng)長期臨床觀察，病人的顯效率與臨床用藥劑量有很大關(guān)系，當(dāng)劑量控制在500ml(注射液)/天以下時(shí)，療效和劑量成正比(用量在5-20ml/天時(shí)效果不明顯，用量為100ml/天時(shí)可觀察到好的效果，當(dāng)用量在250-500ml/天時(shí)，效果顯著)。當(dāng)劑量超過500ml/天時(shí)，療效未見到明顯的遞增增強(qiáng)。
上述用量均為成人用量。
實(shí)施例(一)腦神經(jīng)營養(yǎng)因子的制備1.凍溶將新鮮羊腦，每批制品約300克，用3倍體積的磷酸緩沖液打成勻漿，在-20℃冰凍后，在20℃條件下熔化。以上重復(fù)5次，以加速蛋白裂解。
2.酸解凍溶后的勻漿物，用磷酸緩沖液稀釋2倍，放置80℃水浴鍋加熱，加熱過程中同時(shí)逐漸滴入5N的鹽酸，并不停給予震動(dòng)攪拌3-4小時(shí)，酸解；3.中和將酸解稀釋液，先滴入1N氫氧化鈉粗調(diào)，接近范圍后再用0.1N的氫氧化鈉將其中和至PH7.35。將中和液放置過夜自然冷卻。
4.離心將冷卻的中和液離心(15000rpm，10分鐘)吸取上清液；5.分離純化先用Sephadex G-100的柱凝膠濾過，再用Sephadex G-50的柱超濾。用分光光度計(jì)在A280處監(jiān)測，合并生物活性組分；6.除菌在除菌罐中，先后用0.5微米及0.2微米的濾膜除菌2次，用上法獲得的150ml(約0.2千克)腦神經(jīng)營養(yǎng)因子濃縮液，放置在0℃下保存。必要時(shí)可將其制備成干燥粉劑。
(二)中藥輔劑的制備取三七 0.4千克；紅花 1.4千克；麝香酮 0.2千克；檸檬酸鹽緩沖劑 20千克；氯化鈉 0.20千克；制備過程如下1.水蒸氣干餾提取揮發(fā)組分取三七、紅花、麝香分別粉碎、分裝，減壓干餾，分別得到三七、紅花、麝香的干餾液后，混合，將其混合液蒸餾，精餾(精餾液為干餾液的1/3)，冷藏；2.水煎提取水溶性成分將上述干餾過的藥楂，加水煎二次、濾過、合并濾液、濃縮至與上項(xiàng)等量。
3.醇沉除去雜質(zhì)向水煎濃縮液中加入二倍量的乙醇、攪勻、加熱回流至沸半小時(shí)、涼至室溫、放入冰箱冷藏24小時(shí)以上，傾取上清液后，回收乙醇至藥液與2，3項(xiàng)等量，重復(fù)上述醇析法后，用定性濾紙濾過，濾液回收乙醇得流浸膏狀物；(三)配液將上述冷藏的精餾液加入氯化鈉及檸檬酸緩沖劑，在不斷攪拌下緩慢加入上述流浸膏狀物調(diào)節(jié)PH＝7.4，加入0.3％活性炭抽濾，精濾，100℃高溫、30分鐘滅菌后，加入上述冷藏之羊腦制得的腦神經(jīng)營養(yǎng)因子，分裝，封口，制得每支20ml本發(fā)明藥物1000支。
權(quán)利要求
1.一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑，其特征在于它是由下述原料制成的藥劑干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 0.5-3.5三七0.1-8紅花 0.35-20 麝香酮 0.05-4檸檬酸鹽緩沖劑 5-300 氯化鈉 0.045-4。
2.一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑，其特征在于它是由下述原料制成的藥劑干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 0.5-2.5三七0.1-5紅花 0.35-17.5 麝香酮 0.05-2.5檸檬酸鹽緩沖劑 5-250 氯化鈉 0.045-2.25
3.一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥劑，其特征在于它是由下述原料制成的藥劑干燥腦神經(jīng)營養(yǎng)因子 2.5 三七5紅花 17.5 麝香酮 2.5檸檬酸鹽緩沖劑 250 氯化鈉 2.25。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，其特征在于所述的腦神經(jīng)營養(yǎng)因子是由新鮮羊腦制得的腦神經(jīng)營養(yǎng)因子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，其特征在于所述的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所述的劑型。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，其特征在于所述的藥劑是注射液。
7.根據(jù)上述權(quán)利要求的任一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物的制備方法，依次按下述步驟進(jìn)行(A)腦神經(jīng)營養(yǎng)因子的制備取新鮮羊腦，勻漿化后反復(fù)凍溶，再酸解、中和至PH7.4，離心吸取上清液，分離純化，合并生物活性組分，濾膜除菌，冷藏；B中成藥輔劑的制備取三七、紅花、麝香分別粉碎、分裝、減壓干餾，分別得到三七、紅花、麝香的干餾液后，混合，將其混合液蒸餾，精餾，將精餾液冷藏；再將上述干餾過的藥楂，加水煎二次、濾過、合并濾液、濃縮、加入2倍量的乙醇、攪勻、加熱回流至沸半小時(shí)、涼至室溫、放入冰箱冷藏24小時(shí)以上，傾取上清液后，回收乙醇，重復(fù)上述醇析法后，用定性濾紙濾過，濾液回收乙醇得流浸膏狀物；C成品制備將上述冷藏的中藥精餾液加入氯化鈉及檸檬酸緩沖劑(PH＝7)，在不斷攪拌下緩慢加入上述中藥輔劑流浸膏狀物，調(diào)節(jié)PH＝7.4，加入0.3％活性炭抽濾，精濾，100℃高溫滅菌30分鐘后加入上述冷藏之腦神經(jīng)營養(yǎng)因子，混勻，分裝制得本發(fā)明的治療神經(jīng)性系統(tǒng)疾病的藥物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物的制備方法，其特征在于新鮮羊腦制得的濃縮液順序用5微米和2微米濾膜二次除菌。
9.根據(jù)權(quán)利要求7和8的任一種制備治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物的方法，其特征在于所述的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所述的劑型。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物的方法，其特征在于所述的藥劑是注射液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種新型治療腦神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物及其制備方法,它是以腦神經(jīng)營養(yǎng)因子為主料,以三七、紅花、麝香中草藥為輔料制成。其過程為,將腦組織勻漿化,后反復(fù)凍溶,再酸解、中和、離心吸取上清液、分離純化、合并生物活性組份,雙濾除菌、冷藏,制得腦神經(jīng)營養(yǎng)因子濃縮液;然后將三七、紅花、麝香等原料粉碎,分別干餾提取揮發(fā)性成分,再用水煎提取水溶性成分,接著濃縮、醇析法去雜質(zhì)以氯化鈉、檸檬酸鹽緩沖液配藥,滅菌,并加入腦神經(jīng)營養(yǎng)因子濃縮液,按臨床需要,分裝,封口。
文檔編號(hào)A61K38/17GK1255374SQ9912529
公開日2000年6月7日 申請日期1999年12月1日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月1日
發(fā)明者任炎午 申請人:任炎午