專利名稱：具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種由天然藥用原料的提取物為藥用有效成分所構(gòu)成的具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物。雖然其可特別優(yōu)先，但卻并非僅限用于在燒燙傷方面的治療。
因炎癥、外傷、燒燙傷等多種原因造成皮膚、粘膜的外部感染及損傷，在日常生活和醫(yī)療上都是極為常見的。在各種抗感染和對損傷的康復(fù)治療中，特別是對燒燙傷，尤其是對大面積和/或較深度燒燙傷地治療中，由于燒燙傷所導(dǎo)致的大量壞死組織及有多種滲出液浸潤的大面積暴露創(chuàng)面，對各種致病菌都是極好的營養(yǎng)物和培養(yǎng)基，因而控制感染的手段和效果的好壞顯得尤為突出和重要，已成為是否會進一步引起繼發(fā)的全身性感染，以及影響最終的致殘率和死亡率等治療成敗的前提和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。同時，在燒燙傷治療中對發(fā)生感染的控制及其康復(fù)治療的效果，也可以看成是對外用的抗感染及康復(fù)藥物綜合療效的一種非常嚴(yán)格的檢查和考驗。雖然目前可供外用的抗感染及康復(fù)類的化學(xué)性藥物和含中草藥成分的藥物等已有許多，也各有其特點，但在抗菌性能、適用范圍及綜合康復(fù)性能等方面也還存在有不同的局限和不足。特別是在對如燒燙傷等具有大面積易感染創(chuàng)面的治療上，現(xiàn)有的各種藥物并非都是可用和/或都有可靠療效的。
本發(fā)明的目的是提供一種具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物。其雖然可特別優(yōu)先用于對燒燙傷的抗感染及康復(fù)治療，但其所具有的抗感染及康復(fù)作用同樣也可以應(yīng)用于其它原因所致的感染及康復(fù)的治療。
本發(fā)明所說的具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物，由用40％～50％(v/v)乙醇對以牡丹皮、黃柏、忍冬藤、連翹、蒲黃、孩兒茶、五味子、冰片、虎杖為藥用原料的提取物作為藥用有效成分混合組成，以重量份計的各藥用原料的用量比例為
牡丹皮 10 份，黃 柏7 份，忍冬藤 7 份，連翹7 份，
蒲 黃 3.5份，孩兒茶3.5份，五味子 3.5份，冰片3.5份，
虎 杖 35 份。
藥物中的乙醇含量為40％～50％(v/v)，相對密度≥0.92，總固體量≥2.0％(克/毫升)。其它要求按《中華人民共和國藥典》(一九九五年版)中對“酊劑”的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。各項指標(biāo)的檢查也應(yīng)按中國藥典中的有關(guān)相應(yīng)規(guī)定進行。對各要用原料用乙醇提取時，除可用簡單的浸泡方式提取外，還可以采用常規(guī)的滲漉方式提取，并以后者更好。
以總藥物(以生藥原料計)含量為8％(w/v)的符合上述要求的本發(fā)明上述藥物進行的有關(guān)實驗結(jié)果如下 一、急性毒性試驗
1.經(jīng)口急性毒性以改良寇氏法對昆明種小白鼠經(jīng)口試驗的LD50大于20毫升/千克；對的SD大白鼠的最高劑量(20毫升/千克)組無動物死亡，其LD50和最小耐受劑量均大于20毫升/千克。
2.腹腔注射的急性毒性對昆明種小白鼠腹腔注射的LD50為11.832毫升/千克。
3.皮膚急性毒性對SD大鼠10％體表面積的完整和破損皮膚以本發(fā)明藥物底細(xì)涂皮，使6小時內(nèi)的累計劑量達(dá)到每25毫升。試驗結(jié)果涂藥皮膚未見刺激反應(yīng)，實驗期間動物生長正常，7天觀察期內(nèi)無動物死亡，也未觀察到對大鼠的經(jīng)皮吸收毒作用。
二、局部刺激試驗
1.皮膚刺激對日爾曼家兔作脫毛區(qū)斑貼試驗，觀察3天，未見接觸藥物皮區(qū)出現(xiàn)任何異常反應(yīng)。
2.眼刺激將藥物滴于家兔眼中，6小時觀察到眼結(jié)膜輕度水腫、充血，24小時后即改變消失。
三、過敏試驗
1.豚鼠過敏試驗以2，4-二硝基氯苯作致敏劑陽性對照組，與本發(fā)明藥物的試驗試驗結(jié)果顯示，對照組的致敏率為100％，具有幾度致敏性；本發(fā)明藥物組的致敏率為0％，表明對豚鼠無致敏作用。
2.小數(shù)耳腫試驗陽性對照組耳腫率為100％，本發(fā)明藥物組仍為0％，表明對小數(shù)也無致敏作用。
以上試驗結(jié)果表明，本發(fā)明藥物的安全性高，按國際采用的六級分級標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明藥物屬于無毒物質(zhì)。且無經(jīng)皮吸收毒性，對皮膚無刺激性、無致敏作用，對眼有輕度刺激作用但反應(yīng)輕。
四、體外抑菌作用
以試管系列稀釋法使不同濃度的藥物與試驗菌株作用，培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)種于平板培養(yǎng)，觀察殺菌濃度。結(jié)果為
(1)1/16殺菌溶血性鏈球菌、金色葡萄球菌ATCC29213、白色念珠菌ATCC10231；
(2)1/8殺菌綠膿桿菌ATCC27835、大腸桿菌ATCC25922、變形桿菌ATCC6380、綠色鏈球菌、奇異變形桿菌、硝酸鹽桿菌，耐青霉素的金色葡萄球菌；
(3)1/4殺菌產(chǎn)氣桿菌；
(4)1/2殺菌枯草桿菌。
(5)以瓊脂稀釋法，1∶10稀釋濃度對以下多種耐藥株有抑菌作用醋酸鈣不動桿菌、催娩克雷伯氏菌、綠膿假單孢菌、嗜麥芽假單孢菌(Pse.Mal891129)、嗜麥芽假單孢菌(Pse.Mal891130)；1∶20稀釋濃度對甲氧苯耐藥性金黃色葡萄球菌(MRSA)有抑菌作用。
五、體內(nèi)抗菌試驗
1.對感染綠膿桿菌的小鼠燙傷皮膚痂殼菌量的影響將分為三組的昆明種小鼠分別造成燙傷模型，并在燙傷部位涂一定量的綠膿桿菌后5小時，試驗組噴以本發(fā)明的藥物，另兩組分別為空白對照和磺胺嘧啶銀(Ag-SD)藥物對照。第四天處死動物，無菌取痂殼制勻漿，作細(xì)菌計數(shù)。試驗結(jié)果本發(fā)明藥物試驗組菌量為4.29×108/克痂，空白對照組和藥物對照組的菌量分別為22.55×108/克痂和6.12×108/克痂。兩藥物組間無顯著差異，與空白對照組比較差異均有顯著性(P＜0.01)。
2.對感染白色念珠菌小數(shù)燙傷皮膚痂殼菌量的影響用上述同樣的方法，試驗結(jié)果本發(fā)明藥物組的白色念珠菌量為16.97×108/克痂，空白對照組和藥物對照組分別為37.0×108/克痂和13.88×108/克痂。兩藥物組間無明顯差異，與空白對照組相比均有顯著性差異。
以上結(jié)果說明，本發(fā)明藥物對綠膿桿菌和白色念珠菌感染，特別是對其燙傷皮膚的感染有治療效果，在本試驗條件下，療效與磺胺嘧啶銀相近。
六、對用于大鼠燙傷模型治療的有關(guān)藥效學(xué)試驗
對體重200～250克的SD大鼠48只隨機分為6組，每組8只，雌雄各半，背部脫毛后在麻醉下于90℃水浴浸燙15秒鐘，造成10％面積的III度燙傷模型，燙傷后的動物單籠飼養(yǎng)，且保持定期消毒，墊料高壓滅菌后定期更換。試驗組動物在燙傷后20分鐘開始用本發(fā)明的藥物均勻噴灑在燙傷部位，對照組動物則不作任何治療處理。各組又按觀察時間分別分為24小時、3天和6天三個亞組。
試驗中對各組動物的血液白細(xì)胞變化的檢查結(jié)果可參見表1。
表1不同試驗觀察期動物的白細(xì)胞變化
WBC(×10’/L)試驗組
試驗前 試驗后 降低的 降低量 差異顯著性
X(S) X(S) 動物數(shù) ×109/L t值Δ對照組 24h16.2(5.36) 8.3(3.02) 7/7 7.9 3.252(P＜0.01)
3 d14.5(3.05) 6.6(1.73) 8/8 7.9 4.786(P＜0.001)
6 b13.8(1.70)10.5(3.66) 5/7 3.3 1.816(P＜0.05)噴藥組 24h17.9(2.47) 9.6(2.52) 8/8 8.3 7.920(P＜0.001)
3 d13.3(3.84) 9.0(2.01) 7/8 4.3 2.698(P＜0.05)
6 b13.(3.88) 14.1(3.18) 1/7 -0.7 0.5 (P＜0.05)Δ以配對資料比較的t試驗計算
由表1結(jié)果可看出，試驗組的白細(xì)胞恢復(fù)速度明顯較對照組快，這對提高燙傷動物的非特異免疫功能、增強抗感染能力有重要作用。
對各組動物的一般性觀察明顯可見，燙傷后數(shù)分鐘，燙傷部位處即顯現(xiàn)皮膚腫脹、蒼白、失去光澤，與非燙傷區(qū)形成明顯邊界。數(shù)小時后，部分動物的燙傷區(qū)出現(xiàn)暗紅色漸成為棕褐色的皮下片狀出血斑。觀察可見，試驗組的皮下出血一般較對照組輕，結(jié)果可參見表2。
表2燙傷6天后出血斑出現(xiàn)情況的觀察結(jié)果
由表2的結(jié)果顯示出，在對燙傷的治療中，使用本發(fā)明藥物的試驗組動物的皮下出血較輕，水腫消退較快。對皮膚含水量的測定和血色素的含量對比及組織切片觀察等也均顯示，試驗組的恢復(fù)較對照組快，皮膚組織充血、水腫及炎性滲出等反應(yīng)比對照組輕，說明本發(fā)明藥物可具有減輕燙傷早期炎性反應(yīng)及減少其繼發(fā)損傷的作用。病理檢查結(jié)果還顯示，試驗組的3天觀察組動物的皮膚表皮再生速度較對照組明顯活躍；6天觀察組動物的肉芽組織增生、肌化壞死組織較對照組多見，也說明本發(fā)明藥物可有促進稍燙傷創(chuàng)面修復(fù)的功能。
七、進一步在燒燙傷的臨床治療中使用的有關(guān)結(jié)果
使用對象的燒燙傷成因包括有熱力燒傷、電燒傷、化學(xué)燒傷、瀝青燒傷等，燒燙傷創(chuàng)面深度包括有II°或II°與淺III°的混合創(chuàng)面，燒傷面積為1％～40％，且未使用其它藥物治療。治療時，對創(chuàng)面作常規(guī)外科清創(chuàng)后，試驗組使用本發(fā)明藥物以噴霧形式對創(chuàng)面給藥，一天三次，連用時間不超過4周，創(chuàng)面愈合停止用藥；對照組使用2％磺胺嘧啶銀霜劑(Ag-SD)，一天一次，連用三天。兩組均采用暴露療法。其它治療方法兩組按同樣的常規(guī)方式進行。
1.創(chuàng)面的細(xì)菌情況見表3所示。
表3創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)的發(fā)生率檢測結(jié)果
2.創(chuàng)周炎的變化比較如表4所示。
表4創(chuàng)周炎的變化比較
表3和表4的結(jié)果顯示，兩種藥物對創(chuàng)面均有抗感染作用。雖然對表3的結(jié)果和表4中包括消失率和減輕率在內(nèi)的總有效率而言，試驗組與對照組間均無差異，統(tǒng)計學(xué)處理均P＞0.05，但在表4的結(jié)果中也顯示出，使用本發(fā)明藥物的試驗組對創(chuàng)周炎的消失率明顯較對照組為高。
3.創(chuàng)面愈合情況
治療中顯示，淺II°的創(chuàng)面開始愈合時間，試驗組為傷后3天～7天，對照組為傷后5天～9天；創(chuàng)面完全愈合的時間，試驗組為傷后4天～11天，對照組為傷后7天～30天。深I(lǐng)I°混合有淺III°的創(chuàng)面開始愈合時間，試驗組為10天～22天，對照組10天～21天；完全愈合時間，試驗組為6天～26天，對照組為15天～40天。創(chuàng)面愈合時間的比較如表5所示。
表5創(chuàng)面愈合時間比較
治療觀察及表中所示結(jié)果可以看出，對于淺II°創(chuàng)面，試驗組比對照組的愈合時間明顯縮短，統(tǒng)計學(xué)處理P＜0.01，說明本發(fā)明藥物更有利于淺II°創(chuàng)面的愈合。對于深I(lǐng)I°混合有淺III°創(chuàng)面的愈合，兩組相比，P＞0.05，說明其在愈合時間上無差異。
此外，有關(guān)的實驗室檢查結(jié)果也顯示，本發(fā)明藥物對肝腎功能及造血系統(tǒng)無毒副作用，無過敏反應(yīng)及胃腸道毒性作用，且無對照組所用藥物Ag-SD對肝臟的一過性可逆性的毒性作用。而由上述在抗感染及康復(fù)方面所顯示的試驗結(jié)果已充分表明，本發(fā)明藥物在對包括燒燙傷在內(nèi)的外用抗感染和康復(fù)治療方面是有著積極的作用和價值的。
權(quán)利要求
1.具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物，其特征在于由用40％～50％(v/v)乙醇對以牡丹皮、黃柏、忍冬藤、連翹、蒲黃、孩兒茶、五味子、冰片、虎杖為藥用原料的提取物作為藥用有效成分，以重量份計的各藥用原料的用量比例為
牡丹皮10份， 黃柏 7 份，忍冬藤7 份，連翹7 份，
蒲 黃3.5份，孩兒茶 3.5份，五味子3.5份，冰片3.5份，
虎 杖35 份，藥物中的乙醇含量為40％～50％(v/v)，相對密度≥0.92，總固體量≥2.0％(克/毫升)。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是具有抗感染和康復(fù)功能的外用藥物,由用40%～50%(v/v)乙醇對以牡丹皮、黃柏、忍冬藤、連翹、蒲黃、孩兒茶、五味子、冰片、虎杖為藥用原料的提取物作為藥用有效成分混合組成,以重量份計的各藥用原料的用量比例為:牡丹皮10份,黃柏7份,忍冬藤7份,連翹7份,蒲黃3.5份,孩兒茶3.5份,五味子3.5份,冰片3.5份,虎杖35份。藥物中的乙醇含量為40%～50%(v/v),相對密度≥0.92,總固體量≥2.0%(克/毫升)。
文檔編號A61K31/045GK1261538SQ99114628
公開日2000年8月2日 申請日期1999年1月21日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月21日
發(fā)明者張照金 申請人:四川照金制藥有限責(zé)任公司