專利名稱：：治療皰疹的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療皰疹的藥物組合物。皮膚的單純性皰疹引起表皮的疼痛性斑疹和水泡，斑疹和水泡最終破裂而導致皮膚損害。皰疹主要由單純性皰疹病毒(HSV)1型引起，但也可由HSV2型引起，HSV2型通常引起生殖器皰疹。相反，生殖器皰疹由HSV1型引起的約占30％。口的感染被稱作唇皰疹，也可被稱作感冒瘡(單純皰疹)。顏面的其它部位如眼和鼻，也可被感染。此被稱作面部單純性皰疹。感染還可出現(xiàn)在身體的其它部位?；旧?，大約70-90％的人感染HSV。然后這些人成為這種病毒的攜帶者。一個人一旦感染HSV，此病毒將在其體內(nèi)潛伏。在潛伏狀態(tài)下，病毒位于神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)細胞體內(nèi)。由于特殊的刺激如流感感染或其它呼吸疾病、胃腸感染、緊張、疲勞、行經(jīng)、妊娠、變態(tài)反應、日照和發(fā)熱，潛伏的病毒可被激活。從神經(jīng)節(jié)出發(fā)沿著確定的神經(jīng)通路到達皮膚表面，并在那里繁殖，導致癥狀的出現(xiàn)。復發(fā)形式的皰疹在約40％感染個體中發(fā)生。本來適當無害的單純性皰疹感染可導致非常嚴重的感染例如角膜炎和腦炎。因此在感染部位有效地破壞病毒病灶是很重要的。目前最頻繁應用的抗HSV感染的藥物是阿昔洛韋，例如它以商品名Zovirax進行銷售。阿昔洛韋是一種鳥嘌呤類似物，它干擾此病毒的DNA聚合酶，因此抑制病毒DNA的復制。雖然此病毒不能進行繁殖，但病毒本身并未被殺死。因此此病毒可退回至神經(jīng)節(jié)，從而再一次進入潛伏期。HSV-1的傳播是通過直接接觸唾液或皮膚上的感染灶而產(chǎn)生。阿昔洛韋也不能阻斷這種傳播。另一個難題是繼發(fā)細菌感染的發(fā)生，例如由葡萄球菌和/或鏈球菌引起的膿皰病。由于這些皰疹感染難題的存在，盡管它們可能或不可能伴隨出現(xiàn)，還是很明顯地需要一種藥物制劑，此制劑可減少甚至阻止?jié)摲捌鋫鞑ズ屠^發(fā)細菌感染的發(fā)生。按照本發(fā)明，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一種藥物組合物可解決上述難題，此組合物由一種作為第一成分的季銨化合物和/或一種作為第二成分的抗病毒劑和/或一種作為第三成分的植物提取物組成，這三種成分在一種藥物可接受的基質(zhì)中是彼此相容的。為了打破此病毒的潛伏、復發(fā)和重新潛伏的惡性循環(huán)，必須殺死病毒本身。因為死的病毒不能退回至神經(jīng)節(jié)，所以在初次或復發(fā)感染的情況下由此可使?jié)摲^少再生，甚至沒有潛伏再生。因此本發(fā)明組合物的最重要的成分是一種殺病毒物質(zhì)，依靠它殺死此病毒。抗病毒劑可細分為許多種(Colgate，S.M.和Molyneux，R.J.，生物活性的天然產(chǎn)物，410，CRC出版公司，(1993))，以Ia至Vb的分類組命名?，F(xiàn)在本發(fā)明已發(fā)現(xiàn)為了最大程度地處理HVS感染，IVb組中的一種或多種物質(zhì)必須與Va組中的一種或多種物質(zhì)結(jié)合最好。IVb組中的物質(zhì)具有殺病毒活性，而Va組中的化合物具有抑制病毒和抗病毒活性。兩種類型物質(zhì)的結(jié)合，抑制病毒的復制并將已存在的病毒殺死。為了確保HVS感染所造成損害的繼發(fā)感染得到預防，此繼發(fā)感染是由其它微生物如細菌引起的，建議在第一種成分和/或第二種成分中具有消毒特性。為了減輕疼痛和炎癥的相關(guān)癥狀，最好還使用一種植物提取物。此提取物除具有抗炎特性外，最好還具有一種潤滑作用。根據(jù)本發(fā)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可用一種已知的方法從IVb組中選擇具有消毒活性且因此可用于此藥物組合物的產(chǎn)物。在此所用的方法為Colgate和Molyneux所述的終點滴定技術(shù)(EPTT)(supra.p.413)，應用這種方法可檢測產(chǎn)物的殺病毒活性。此活性用病毒滴度減小表示，這是通過在體外將皰疹病毒懸浮液與所試驗產(chǎn)物的稀釋液在37℃孵育5分鐘而測定的。一個好的產(chǎn)物可提供的最小滴度減小為103。根據(jù)本發(fā)明，從對已知消毒劑進行的一般性篩選中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多產(chǎn)物顯示有很高的活性，甚至在25℃下，這些消毒劑對單純皰疹病毒1型和2型病毒株(臨床分離株)具有殺病毒作用。因為皮膚上的溫度通常低于37℃，甚至低于34℃，所以這是非常有利的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)濃度分別為50-200μg/ml和100-200μg/ml的季銨化合物溴棕三甲銨和氯化苯甲烴銨在25℃試驗5分鐘所示的滴度減小至少為103。其它已知的消毒劑，諸如醇類、酚類、過氧化物、雙胍、醛、氯化物等，它們所顯示的最小活性為5倍以下。僅僅汞化合物和所確定的重金屬化合物具有較好的活性。然而由于這些化合物具有很高的毒性，所以它們在所需的應用中不適合。原則上可應用所有的季銨化合物，其通式為其中R1、R2、R3和R4可以相同或者不同，并且可代表一個脂基或芳基，其中R1、R2、R3或R4中的至少一個為含8個或更多碳原子的脂肪鏈；并且其中X為一個低分子量的無機陰離子或者為一個高分子量的有機陰離子。A.Dauphin和J.C.Darbord在“Hyginehospitalièrepratique”，Editionsmedicalesinternationales，巴黎(1988)中對適宜季銨化合物進行了全面評述。首選溴棕三甲銨。季銨化合物可較好地溶解于水和乙醇中，但不能任意與其它產(chǎn)物相結(jié)合。因此對第二成分的一個重要要求是它必須與第一成分相容。陰離子產(chǎn)物、脂肪酸鹽、硝酸鹽、重金屬、氧化產(chǎn)物、橡膠、蛋白質(zhì)等與季銨化合物不相容。因此這些產(chǎn)物不適宜應用于本發(fā)明的組合物中。第二成分最好為非致畸的并且可在大劑量下沒有毒性。而且第二成分最好具有較好的皮膚滲透性。只要它們與第一成分相容，諸如阿昔洛韋、BVDU、3FT和碘苷等已知的抗病毒產(chǎn)物可以用作第二成分。另外還可以應用具有抗病毒活性的無毒天然產(chǎn)物。還可以用本來已知的EPTT方法(Colgate和Molyneux，supra，414頁)對此第二成分的適合性進行試驗。在此所用的為VERO細胞。按照本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn)棓酸鹽在體外具有較好的抗病毒活性。這樣濃度為100μg/ml的棓酸丙酯的滴度減小系數(shù)為104。濃度為25μg/ml時，在VERO細胞中的傳染性顆粒的減小系數(shù)是103。濃度為100μg/ml的棓酸乙酯的滴度減小系數(shù)為104而且濃度為25μg/ml的系數(shù)為102。因此棓酸乙酯的活性略微較小?？梢酝ㄟ^第一和第二成分的混合物對HSV-1的試驗測定這兩個成分的相容性。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在25℃試驗5分鐘以后棓酸丙酯和溴棕三甲銨(2∶1)的混合物仍具有103的殺病毒作用，在此其濃度為250μg的棓酸丙酯比125μg的溴棕三甲銨。這同樣適用于棓酸乙酯和溴棕三甲銨。在體外BVDU或阿昔洛韋和溴棕三甲銨分別稀釋至5μg/ml和0.1μg/ml以后，溴棕三甲銨和BVDU或阿昔洛韋的混合物仍繼續(xù)顯示抗病毒活性。最好此藥物組合物還含有一種植物提取物，以此可減輕疼痛和炎癥反應的影響。在這里此提取物還不能影響第一和第二成分的活性。為達到此目的，將不同的植物提取物與溴棕三甲銨和棓酸丙酯或者與氯化苯甲烴銨和棓酸丙酯一起試驗，以觀察殺病毒活性是否仍存在以及這些成分是否相容。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)春黃菊和金盞花的提取物在體外仍是可用的。蘆薈、紫錐花根、三色紫羅蘭、番瀉葉、滇荊芥和/或山楂的提取物在殺病毒活性繼續(xù)保持的同時，也能減輕炎癥反應或疼痛。然而特殊的植物提取物可造成某些季銨化合物的殺病毒活性的明顯下降。例如已經(jīng)發(fā)現(xiàn)10％北美金縷梅可使氯化苯甲烴銨(0.5％)的殺病毒和抗菌活性完全失效。洋蘇草和大芒殼提取物可使0.1％氯化苯甲烴銨的抗皰疹和細菌活性減小4至8倍。但是，已發(fā)現(xiàn)溴棕三甲銨與第二成分和春黃菊、金盞花、洋蘇草、大芒殼和番瀉葉中的一種提取物的組合在體外仍保持其抗單純皰疹病毒及細菌的活性。因此必須提前測定所用植物提取物的相容性。這種測定為一般技術(shù)人員所掌握的。適宜的植物提取物選自例如，馬栗樹；蘆薈；AnagallisarvensisL；白花春黃菊；牛蒡；鐵線連馬兜鈴；山金車；歐水蘇；金盞花；辣椒(方形)；番木瓜樹；CarlinaacaulisL；丁香；紫草；狹葉紫錐花；紫色紫錐花；佩蘭cannabinumL；漢葒魚腥草；水楊梅urbanumL；GlechomahedraceaL；北美金縷梅；金絲桃perforatumL；土木香；胡桃；檜oxycedrusL；熏衣草；散沫花；排草nummeraliaL；千屈草salicariaL；錦葵；歐夏至草；德甘菊；洋薄荷；妥魯香樹；番櫻桃communisL；洋橄欖樹；扁桃；榅桲；橡樹；肥皂草；覆盆子；洋蘇草；石鹼草；洋菝葜；苦茄；新疆一支黃花；越南安息香；安息香benzoides；安息香西門肺草；胡蘆巴；旱金蓮；小蕁麻；大蕁麻；三色堇。本發(fā)明的藥物組合物由一個或多個具有殺病毒和抗菌活性的季銨化合物和/或一個與季銨化合物相容并抑制病毒復制的抗病毒產(chǎn)物，和/或一個同樣與上述兩種產(chǎn)物相容并可減輕皰疹感染相關(guān)影響(諸如疼痛、瘙癢、腫脹和麻刺感等)的植物提取物的組合物組成，此藥物組合物對皰疹感染提供全面的治療。此組合物的殺病毒活性殺死病毒，由此潛伏將較少發(fā)生或完全不發(fā)生。其抗病毒活性抑制病毒的復制并以此抑制病毒的繁殖。其抗菌活性阻止繼發(fā)細菌感染。最后其炎癥抑制活性阻止炎癥發(fā)生并且減輕疼痛和瘙癢。最好本發(fā)明組合物的成分包括在一種藥物可接受的基質(zhì)中。此基質(zhì)的應用并不減小這三種成分的活性。為了試驗基質(zhì)是否適宜，可測定第一成分的殺病毒活性和消毒活性。例如可以用一種一般技術(shù)人員所掌握的方法對革蘭氏陰性病菌(例如綠膿桿菌或大腸桿菌)在25℃試驗5分鐘以測定其消毒活性。適宜基質(zhì)的實例為不同分子大小的聚乙二醇或其混合物、脂肪酸酯類或其混合物及是否與乳化和/或護膚成分混合?；旌嫌谢驘o乳化和/或護膚成分的聚乙二醇和/或脂肪酸酯類的混合物也適宜。本發(fā)明藥物組合物可采用粉劑、懸浮液、溶液、噴霧劑、乳劑、軟膏或霜劑并且可適用于局部應用?？梢酝ㄟ^將以游離酸或鹽形式存在的活性成分與藥物可接受的中性賦形劑(諸如水或非水溶劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、洗滌劑、添加劑)結(jié)合制備此組合物，另外如果需要還可結(jié)合染色劑、香料和/或調(diào)味劑。根據(jù)治療的性質(zhì)和應用的方式，藥物組合物中活性成分的濃度可在0.001％至100％(w/v)之間變化。在此推薦軟膏形式。例如本發(fā)明組合物包含10-90％的一種非水基質(zhì)、1-20％的一種醇、0.1-5％的一個或多個季銨化合物、和/或0.01-2％的一個或多個抗病毒劑、和/或0.5-10％的一個或多個植物提取物。所用植物提取物的量與其活性和提取物中活性成分的濃度密切相關(guān)。本發(fā)明優(yōu)選組合物包含20-60％，優(yōu)選52％的PEG400；10-40％，優(yōu)選26％的PEG4000；2-20％，優(yōu)選9％的甘油；0.5-1.8％，優(yōu)選1％的溴棕三甲銨；0.2-3％，優(yōu)選1％的十六烷醇；5-15％，優(yōu)選8％的春黃菊提取物和0.2-1％，優(yōu)選0.25％的棓酸丙酯。本發(fā)明將通過所提交的附帶實施例得到進一步地闡明，但是在此并不是要對本發(fā)明進行任何限制。實施例實施例1I.抗皰疹劑的制備應用下列組分A.聚乙二醇40052％聚乙二醇400026％甘油9％溴棕三甲銨1％膽堿鹽酸鹽(任選)2％十六烷醇1％B.春黃菊提取物8％棓酸丙酯1％通過在75℃下融化A中組分和溶解B中組分，制備一種軟膏。然后，在慢慢冷卻的同時，將融化后所得的A中組分的混合物混勻，并在A混合物固化前加入B混合物。繼續(xù)攪拌，直至總混合物完全冷卻。此混合物被命名為93J12。聚乙二醇400和4000從市售商品名為Macrogol400-Purna和Macrogol4000的藥品中得到。甘油為p.a.品質(zhì)，來自Merck(4094)。溴棕三甲銨A11936由PharmachemicNV提供。膽堿鹽酸鹽(C1897)由Sigma提供。十六烷醇為HenkelKGaA的市售藥品，商品名為Lanette16。液體春黃菊提取物來自Conforma。酸丙酯P3130來自Sigma。II.M-VDB培養(yǎng)基的制備和組成應用下列組分氯化鈉(NaCl)6.77gD-半乳糖0.80g丙酮酸鈉0.20g氯化鉀(KCl)0.40g氯化鎂(MgCl2.6H2O)2.0g氯化鈣(CaCl2.2H2O)0.20g磷酸二氫鈉(NaH2PO4.H2O)0.14g琥珀酸鈉1.0g琥珀酸0.75gL-谷氨酰胺(+)0.30g氨基酸BEM1000x10ml維生素BEM100x10ml酚紅儲液1ml(即在一種0.05NNaOH水溶液中含1％酚紅)通過將各組分溶于960ml蒸餾水，然后用NaOH(10N)調(diào)整PH值至7.4，并用一個0.2μ過濾膜過濾至無菌容器而制備一種用于細胞培養(yǎng)的維持培養(yǎng)基。然后加入2％新生牛血清(用于VERO細胞)或2％胎牛血清(用于其它細胞)。實施例2抗病毒活性1.組分的抗病毒活性在本實施例中使用的是來自美國型培養(yǎng)收集液(登記號CCL26)的VERO細胞。VERO細胞在介質(zhì)199(Gibco)中用Earles鹽和5％小牛血清培養(yǎng)。使用的病毒源為在M-VDB中用100μg/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素和2％小牛血清培養(yǎng)的單純皰疹病毒1(HVS-1，特征臨床分離菌)。將100μl在M-VDB中HSV-1的10-1至10-6的稀釋液系，排列在一個顯微滴度盤(平底96井)中培養(yǎng)的VERO細胞的單分子層上。使病毒吸附細胞60至90分鐘。然后，將在M-VDB中試驗產(chǎn)物的稀釋液系加入感染細胞中。為檢查此產(chǎn)物的細胞毒性，用相同的方法將產(chǎn)物的稀釋液加入未感染細胞中。在37℃的溫室中孵育5天后，用顯微方法評價其致細胞病變作用(CPE)。產(chǎn)物的抗病毒活性用樣品的最高無毒濃度的減小系數(shù)(RF)表示。減小系數(shù)(RF)是對照組中病毒濃度與產(chǎn)物稀釋液中活病毒濃度的比。RF≥102被認為具有顯著意義。用棓酸丙酯的實驗結(jié)果顯示于表1中。表1試驗產(chǎn)物試驗濃度病毒滴度減小系數(shù)溶于DMSO并用M-100μg/ml104VDS稀釋的棓酸丙酯同上50μg/ml104同上25μg/ml103同上10μg/ml1從上表可以看出棓酸丙酯對HSV-1的抗病毒活性直至25μg/ml的濃度時仍具有顯著意義。通過將含有106cfuHSV-1的病毒懸浮液與一種體積相同濃度不同的試驗產(chǎn)物溶液混合而測定殺病毒活性。在控制溫度下孵育此混合物一定時間。將每種混合物10-1至10-6的稀釋液系放置在VERO的一個單分子層上。在37℃下孵育5天后評價CPE。結(jié)果用RF表示。滴度減小再次≥102被認為具有顯著意義。在34℃15分鐘對HSV-1的殺病毒活性顯示于表2中。表2試驗產(chǎn)物試驗濃度減小系數(shù)棓酸丙酯500μg/ml1溴棕三甲銨500μg/ml105250μg/ml105125μg/ml105100μg/ml10550μg/ml1010μg/ml1棓酸丙酯/溴棕三甲銨(2/1)500/250105棓酸丙酯/溴棕三甲銨(2/1)250/125105從上表可以看出棓酸丙酯不具有殺病毒活性，而溴棕三甲銨直至100μg/ml的濃度仍具有殺病毒活性。盡管棓酸丙酯過量(2/1)，棓酸丙酯和溴棕三甲銨的混合物仍具有殺病毒活性。2.試驗混合物的抗病毒成分用相似的方法，測定實施例1制備的混合物的抗病毒活性。軟膏2515分鐘的殺病毒活性的結(jié)果顯示于表3中。表3表明軟膏在25℃直至1/100的稀釋液對HSV-1仍具有殺病毒活性。因此，甚至在25℃下，溴棕三甲銨仍具有其全部活性。表3試驗混合物稀釋液RF93J121/21051/41051/81051/161051/321051/641051/1281051/2561實施例3抗菌活性用試驗生物白色念珠菌(ATTC10231)、大腸桿菌(ATTC8739)、綠膿桿菌(ATTC15442)和金黃色葡萄球菌(ATTC6538)測定單獨成分和最終產(chǎn)物的抗菌活性。所用培養(yǎng)基為胰大豆肉湯(TSB)、胰大豆瓊脂(TSA)和無菌磷酸鹽緩沖液(PBS)。I.成分和混合物的抗菌活性37℃下在TSB中制備每一種微生物的過夜培養(yǎng)基，以測定最小抑制濃度(MIC)。同樣在TSB中制備所用試驗混合物的1/2稀釋液系。將100μl每種稀釋液放入一個顯微滴度盤。在TSB中將此過夜培養(yǎng)基稀釋1/1000。同樣，將100μl每種細菌懸浮液加入產(chǎn)物稀釋液中。未添加細菌的產(chǎn)物稀釋液和未添加產(chǎn)物稀釋液的細菌稀釋液用作無菌性對照。顯微滴度盤在一個37℃的濕室中孵育24小時。根據(jù)懸浮液的濁度評價細菌生長。MIC值是能夠抑制微生物正常生長的最低產(chǎn)物濃度，即不產(chǎn)生任何渾濁。結(jié)果顯示于表4中。表4以上表明春黃菊提取物對一些微生物的抗菌活性非常有限，并且僅僅是在高濃度下。另一方面，棓酸丙酯和溴棕三甲銨則具有明顯的抗菌活性。我們發(fā)現(xiàn)混合物中的溴棕三甲銨保持其抗菌活性。II.試驗軟膏的抗菌活性如實施例1所述，制備軟膏的三個獨立部分，編號為94A12、94D21和94E05。制備不添加溴棕三甲銨的相同組合物，用它作為安慰劑。此安慰劑被稱作94D27。用無菌蒸餾水中1％的溴棕三甲銨作為對照。所有試驗樣本在室溫下保存。IIa.最小抑制濃度(MIC)的測定最小抑制濃度是在其以下細菌不再生長的試驗產(chǎn)物的濃度。通過將1克軟膏懸浮于9ml無菌蒸餾水而制備所用的最高試驗濃度(1/10稀釋)。將此稀釋液加入細菌中，然后將細菌培養(yǎng)24小時。所用的試驗生物為105的白色念珠菌(Ca)、106的大腸桿菌(Ec)、105的綠膿桿菌(Pa)和106的金黃色葡萄球菌(Sa)。表5顯示抑制細菌生長的稀釋液。表5此表表明所有試驗軟膏均保持抗菌活性。這些軟膏的MIC值與水中1％溴棕三甲銨的MIC值相類似。試驗濃度下的安慰劑不具有抗菌活性。IIb.殺細菌和殺真菌活性的測定用白色念珠菌(105)、大腸桿菌(106)、綠膿桿菌(105)和金黃色葡萄球菌(106)試驗其殺細菌活性。依據(jù)歐洲藥典的規(guī)定測定其殺細菌活性。這些規(guī)定要求所試驗的產(chǎn)物與微生物混合并孵育一段時間，然后稀釋此混合物并且測定哪一種稀釋液中仍發(fā)生細菌生長。將每一種微生物的稀釋液終末濃度制備至106-107cfu。以未稀釋的和在無菌蒸餾水中的1/2和1/10稀釋液試驗此軟膏。將100μl稀釋接種物加入1g軟膏或其稀釋液中并且混合。在25℃孵育15分鐘后，從100mg的此混合物中于TSB(胰大豆肉湯(Gibco))中制備1/10稀釋液系。將每個稀釋液平鋪于TSA(胰大豆瓊脂(Gibco))上。在37℃將此平皿孵育24小時。未處理的微生物培養(yǎng)基和蒸餾水中1％溴棕三甲銨作為對照。孵育后評價所有平皿細菌的生長。將以減小系數(shù)(Rf)表示的此試驗進行三次。結(jié)果顯示于表6中。表6</tables>上表顯示所有的試驗軟膏在稀釋液中仍保持其殺細菌活性。所有的細菌都被殺死。并發(fā)現(xiàn)安慰劑的殺細菌活性非常有限。IIc.殺真菌活性為測定其殺真菌活性，應用試驗生物絮狀表皮癬菌(RV69635)和紅毛癬菌(RV58124)。應用殺細菌活性同樣的方法測定殺真菌活性。為達到此目的，將每種微生物稀釋液的終末濃度制備至104-105cfu。以未稀釋的和在無菌蒸餾水中的1/2和1/10稀釋液試驗此軟膏。將100μl稀釋接種物加入1g軟膏或其稀釋液中并且混合。在25℃孵育15分鐘后，從100mg的此混合物中于SAB(薩布羅肉湯(Gibco))中制備1/10稀釋液系。將每個稀釋液平鋪于SABA(薩布羅瓊脂(Gibco))上。在25℃將此平皿孵育5天。未處理的微生物培養(yǎng)基和蒸餾水中1％溴棕三甲銨作為對照。孵育后評價所有平皿細菌的生長。將此試驗進行三次。以減小系數(shù)(Rf)表示的結(jié)果顯示于表7中。表7試驗混合物絮狀表皮癬菌(103)紅毛癬菌(104)94A1210210494D2110210494D271010294E05102104溴棕三甲銨1％102104</table></tables>上表顯示試驗軟膏保持其抗真菌活性，此活性與在蒸餾水中1％溴棕三甲銨的活性相似。安慰劑的抗真菌活性有限。IId.殺病毒活性按照D.VandenBerghe等在“植物生物化學中的方法”，第6卷“生物活性分析”，49-67頁，AcademicPressLimited1991中所述的微量法測定殺病毒活性。將300μl未稀釋病毒懸浮液加入300μl產(chǎn)物稀釋液中。在34℃孵育這些混合物15分鐘。向稀釋試管中提供0.9ml冷卻的病毒培養(yǎng)基，并將其置于冰浴器中。將100μl孵育混合物置于此稀釋試管中。由此制備1/10稀釋液系。將200μl的這些稀釋液置于VERO細胞上。對照為未處理病毒(＝病毒對照)和未處理細胞(＝細胞對照)。在濕性培養(yǎng)器中于37℃孵育此平皿5至7天。用微觀方法評價這些細胞的細胞毒性和致細胞病變效應(CPE)。結(jié)果用減小系數(shù)(Rf)表示。減小系數(shù)為剩余病毒濃度與原始病毒濃度的比率。將此試驗進行三次。以Rf表示的結(jié)果顯示于表8中。表8上表顯示試驗軟膏稀釋至1/50仍具有殺病毒活性。其殺病毒活性與1％溴棕三甲銨的活性相似。安慰劑沒有殺病毒活性。實施例4體內(nèi)活性試驗試驗組由15個口唇上有唇皰疹的病人組成。用含下面成分的軟膏對他們進行治療PEG40052％PEG400026％甘油9％溴棕三甲銨1％膽堿(任選)2％十六烷醇1％春黃菊提取物8％棓酸丙酯0.25％試驗結(jié)果顯示于表9中。表9試驗軟膏體內(nèi)抗-HSV活性的臨床評價</tables>在用2個男性患者進行的另一試驗中試驗此軟膏的預防作用。至試驗末，在通常所說的損傷發(fā)生的局部應用此軟膏一天一次，持續(xù)6個月。治療結(jié)果為癥狀不再復發(fā)，甚至在感冒的情況下。在治療前兩個患者之一的唇皰疹至少一月一次，同時兩個患者感冒總是伴隨有癥狀。本發(fā)明為皰疹感染的治療提供一種新的藥物組合物，特別是由HSV-1或HSV-2引起的面或唇皰疹。與其它藥物很大的區(qū)別在于治療性或預防性應用此藥物的大多數(shù)患者以后在相同的局部癥狀不再復發(fā)。權(quán)利要求1.治療單純性皰疹病毒感染的藥物組合物，在一種藥物可接受的基質(zhì)中含有一種季銨化合物作第一種成分，和/或一種抗病毒劑作第二種成分，和/或一種植物提取物作第三種成分，其中三種成分彼此相容。2.如權(quán)利要求1中所述的藥物組合物，其特征在于第一種成分從由溴棕三甲銨、氯化苯甲烴銨組成的物質(zhì)組中選擇。3.如權(quán)利要求1或2中所述的藥物組合物，其特征在于第二種成分從由阿昔洛韋、bromovinyldesoxuridine(BVDU)、3-氟胸苷(3FT)、idoxuridine、棓酸丙酯、棓酸乙酯、proanthocyanides和葡糖胺組成的物質(zhì)組中選擇。4.如權(quán)利要求1、2或3中所述的藥物組合物，其特征在于第三種成分選自由馬栗樹；蘆薈；AnagallisarvensisL；白花春黃菊；牛蒡；鐵線連馬兜鈴；山金車；歐水蘇；金盞花；辣椒(方形)；番未瓜樹；CarlinaacaulisL；丁香；紫草；狹葉紫錐花；紫色紫錐花；佩蘭cannabinumL；漢葒魚腥草；水楊梅urbanumL；GlechomahedraceaL；北美金縷梅；金絲桃perforatumL；土木香；胡桃；檜oxycedrusL；熏衣草；散沫花；排草nummeraliaL；千屈草salicariaL；錦葵；歐夏至草；德甘菊；洋薄荷；妥魯香樹；番櫻桃communisL；洋橄欖樹；扁桃；榅桲橡樹；肥皂草；覆盆子；洋蘇草；石鹼草；洋菝葜；苦茄；新疆一支黃花；越南安息香；安息香benzoides；安息香；西門肺草；胡蘆巴；旱金蓮；小蕁麻；大蕁麻；三色堇的提取物組成的物質(zhì)組。5.如權(quán)利要求1、2或3中所述的藥物組合物，其特征在于當?shù)谝环N成分為溴棕三甲銨時，第三種成分從由春黃菊、金盞花、鼠尾草、大芒殼、番瀉葉的提取物組成的物質(zhì)組中選擇。6.如權(quán)利要求1、2或3中所述的藥物組合物，其特征在于當?shù)谝环N成分為氯化苯甲烴銨時，第三種成分從由春黃菊、金盞花、番瀉葉的提取物組成的物質(zhì)組中選擇。7.如權(quán)利要求1至6中任一所述的藥物組合物，在一種藥物可接受的載體中含有0.1-5％的一種季銨化合物；0.01-3％的一種抗病毒劑；以及1-20％的一種植物提取物。8.如權(quán)利要求7中所述的藥物組合物，含有PEG40052％PEG400026％甘油9％溴棕三甲銨1％膽堿(任選)2％十六烷醇1％春黃菊提取物8％棓酸丙酯0.25％9.一種如權(quán)利要求1至8中任一所述的藥物組合物用于治療HSV-1感染的用途。10.一種如權(quán)利要求1至8中任一所述的藥物組合物用于治療HSV-2感染的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療單純性皰疹病毒感染的藥物組合物,它在一種藥物可接受的基質(zhì)中含有一種季銨化合物作第一種成分,和/或一種抗病毒劑作第二種成分,和/或一種植物提取物作第三種成分,其中三種成分彼此相容。文檔編號A61K31/715GK1173820SQ96191807公開日1998年2月18日申請日期1996年1月23日優(yōu)先權(quán)日1995年2月6日發(fā)明者D·A·R·宛·登·伯格申請人:生物制藥科學公司