專利名稱：治療腸應(yīng)激綜合癥的異噁唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物腸應(yīng)激綜合征(IBS)的方法以及它們合適的藥用組合物。
腸應(yīng)激綜合征(IBS)是包括改變的腸習(xí)性、下腹部疼痛且沒(méi)有可檢出的病理學(xué)變化的運(yùn)動(dòng)原疾病。由其癥狀識(shí)別IBS，所述癥狀明顯地受心理學(xué)因素和緊張的生活環(huán)境所影響。
IBS是最常遇到的胃腸道疾病之一。涉及到胃腸道臨床癥狀的20%～50%病人患IBS。約14%在其他方面明顯健康的人有IBS癥狀。它是很難解釋的疾病之一，部分原因是因?yàn)樗皇且环N疾病，而是由許多相似表現(xiàn)的癥狀組成的一種綜合征。
IBS的主要癥狀(改變的腸習(xí)性、下腹部疼痛和腫脹)表現(xiàn)為腸的運(yùn)動(dòng)力增加和胃酸分泌過(guò)多。
胃腸道的活動(dòng)是通過(guò)分布的副交感神經(jīng)和交感神經(jīng)由中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)調(diào)節(jié)的，并由存在于腸道的腸外周神經(jīng)系統(tǒng)(ENS)調(diào)節(jié)。
ENS具有很好的組織結(jié)構(gòu)，甚至在沒(méi)有中樞輸入的情況下，它仍包括協(xié)調(diào)該器官作用必不可少的所有成分。參見(jiàn)Goyal，R.K.″NeurologyoftheGut″，gastrointestinalDisorders，Ed.，Sleisenger和Fordtran，Saunders(1983)，pp97-114。
5-羥色胺(5-HT)直接或間接地與許多生理現(xiàn)象(包括食欲、焦慮和抑郁)有關(guān)，見(jiàn)R.A.GlennonJ.Med.Chem.30，1(1987)。在CNS和外周組織(包括胃腸道、肺、心臟、血管和各種其他的平滑肌組織)中均發(fā)現(xiàn)了5-HT受體。
現(xiàn)已認(rèn)識(shí)到，有多種類型的5-HT受體。這些受體可分成5-HT1、5-HT2、5-HT3和5-HT4，而5-HT1受體至少可進(jìn)一步分成以下亞類5-HT1A、5-HT1B、5-HT1C和5-HT1D。
在CNS中，5-HT受體位于突觸后接受血清素激活輸入的神經(jīng)元上，以及位于突觸前的5-HT釋放神經(jīng)元上。據(jù)信，突觸前的受體具有對(duì)突觸裂隙中5-HT濃度敏感的功能，因此可調(diào)節(jié)5-HT的進(jìn)一步釋放。
“激動(dòng)劑”通常是指在受體上具有模擬內(nèi)源神經(jīng)介質(zhì)作用的化合物。
直接作用的5-羥色胺激動(dòng)劑是指在5-羥色胺受體上結(jié)合和模擬5-羥色胺作用的化學(xué)物質(zhì)。
間接作用的5-羥色胺激動(dòng)劑是指在突觸裂隙中增加5-羥色胺濃度的化學(xué)物質(zhì)。間接的5-羥色胺激動(dòng)劑包括5-羥色胺特定攝取載體的抑制劑、從貯存顆粒中釋放5-羥色胺的因子、增加5-羥色胺形成的因子(5-羥色胺前體)以及阻止5-羥色胺降解的單胺氧化酶(MAO)抑制劑，結(jié)果增加了有效5-羥色胺的量。
已知5-羥色胺在胃腸道中具有許多作用。人靜脈輸注5-HT或5-HTP(5-羥色氨酸)可抑制自生的和組胺所引起的胃分泌物的容積和酸性，同時(shí)增加粘液的生成。參見(jiàn)HandbookofExperimentalPharmacology，Vol.XIX，″5-hydroxytryptamineandRelatedIndolealkylamines″，Erspamer，V.，sub-ed.，springer-Verlog，紐約，1966，pp.329-335。在一個(gè)或幾個(gè)5-HT受體位置的結(jié)合是否要求完成上述抑制反應(yīng)或涉及哪些受體是不知道的。
已知在胃腸道平滑肌中的5-HT受體可作為引起該組織收縮的媒介。大白鼠(fundus)和豚鼠回腸廣泛地用于體外5-HT激動(dòng)劑和拮抗劑的研究。胃腸道的腸嗜鉻細(xì)胞是體內(nèi)5-HT生成的主要位置。
在腸內(nèi)的運(yùn)動(dòng)力也明顯地受膽堿能受體的影響。已知乙酰膽堿可通過(guò)作用于蕈毒堿受體而增加胃腸的運(yùn)動(dòng)力。但是，已知至少有5種不同的蕈毒堿受體(M1-M5)。參見(jiàn)BarryB.WolfeIntheMuscarinicReceptors.Ed.ByJ.H.Brown，TheHumanaPress，N.J.1989，pp125-150。在調(diào)整胃腸運(yùn)動(dòng)力中上述受體的有關(guān)作用是不知的，因?yàn)檫@些受體的有選擇的激動(dòng)劑和拮抗劑尚未確定。在IBS中，起蕈毒堿拮抗劑作用的化合物如雙環(huán)胺是有效的治療劑，但是它顯示出嚴(yán)重的副作用。
目前IBS的治療受藥物的限制，現(xiàn)有藥物僅限于能治療一小部分比例的患者。例如，抗膽堿能藥物可減輕痙攣狀態(tài)，因此可減輕一些下腹部疼痛。另一方面，組胺H2受體拮抗劑可抑制胃酸分泌，因此可減輕消化不良的癥狀。現(xiàn)在還沒(méi)有能夠有效地減輕大部分IBS癥狀的治療劑。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，通過(guò)直接作用于5HT-受體，5HT1A激動(dòng)劑可抑制胃酸分泌，因此可減輕消化不良的癥狀。我們發(fā)現(xiàn)了一系列上述激動(dòng)劑化合物，結(jié)合試驗(yàn)也表明這些化合物對(duì)M1-膽堿能受體具有親和性，并且在體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)它們具有鎮(zhèn)痙的作用。因此，本發(fā)明化合物可特別有效的用于治療IBS和與其有關(guān)的大部分癥狀。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一組化合物，它們既是直接作用的5-HT1A激動(dòng)劑，又是M1-膽堿能受體有選擇性的藥物。由于上述兩個(gè)特征對(duì)于使腸習(xí)性正常和減輕IBS的下復(fù)部疼痛和腹部腫脹是重要的，所以具有上述合并作用的所述藥物可以使胃腸道運(yùn)動(dòng)力正常，因此它們可用于治療IBS和與其有關(guān)的許多癥狀。本發(fā)明的另一目的是提供適用于權(quán)利要求所述方法的新組合物。
熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員將從下面的敘述和后附的權(quán)利要求中可明白本發(fā)明的其他目的、特征以及優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明提供了治療哺乳動(dòng)物腸應(yīng)激綜合征(IBS)的方法，該方法包括給需要治療IBS的哺乳動(dòng)物服用有效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或溶劑化物， 其中R為氫、C1～C3烷基、烯丙基或-CH2 ;
R1為氫、C1～C3烷基、烯丙基、-CH2 或-(CH2)n-X;
n為1～5;
X為任意取代的苯基、C1～C3烷氧基或C1～C3烷硫基;
R2和R3獨(dú)立地為氫、C1～C3烷基、C1～C3烷氧基、C1～C3烷硫基、鹵素、CN或苯基;或者R2和R3一起為-(CH2)p-;
p為3～6;
Y為-CH2-、-O-、-SOm-;
m為0、1或2。
式Ⅰ化合物迄今未被用于治療IBS。因此，本發(fā)明的另一具體實(shí)例是提供適用于治療IBS的藥物組合物，該藥物組合物包括式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其溶劑化物，以及與其混合的一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
用于式Ⅰ的一般化學(xué)術(shù)語(yǔ)具有它們常用的含義。例如術(shù)語(yǔ)“烷基”代表有指定碳原子數(shù)的直鏈或支鏈的烷基。C1～C3烷基是指甲基、乙基、正丙基和異丙基;
-CH2 為環(huán)丙基甲基。
鹵素是指溴、氯、氟和碘。
任意取代的苯基意指含有1或2個(gè)取代基的苯基，取代基系選自C1～C3烷基、C1～C3烷氧基、C1～C3烷硫基、鹵素、NO2和CN。
腸應(yīng)激綜合征是目前用本發(fā)明方法治療該病的最合適和最精確的術(shù)語(yǔ)。術(shù)語(yǔ)IBS強(qiáng)調(diào)該病表現(xiàn)為過(guò)敏的運(yùn)動(dòng)原疾病，它不是單一的疾病而是一綜合征，并且它涉及腸的許多方面。對(duì)于該疾病，通常應(yīng)用的其他許多術(shù)語(yǔ)如神經(jīng)過(guò)敏的、不穩(wěn)定的或痙攣性的結(jié)腸或結(jié)腸炎都是不合適、不精確的，或者是既不合適也不精確。
國(guó)際工作小組報(bào)告的定義是IBS為功能性的胃腸疾病，其表現(xiàn)為(1)下腹部疼痛和/或(2)排糞紊亂的癥狀(急迫、緊張、未完全排空的感覺(jué)、糞便形狀改變[粘稠性]以及改變的大便頻率/次數(shù)，或(3)腫脹(腹部腫脹)。
近來(lái)的修正提出以下的準(zhǔn)則;下腹部疼痛或不適，排糞緩和或大便的頻率或粘稠性改變，并具有以下3項(xiàng)或3項(xiàng)以上(1)大便頻率改變;(2)大便形狀改變(硬或松軟/稀薄);(3)大便排出改變(緊張或急迫，未完全排空的感覺(jué));(4)排出粘液;(5)腫脹或感到下腹部腫脹。參見(jiàn)Schuster，M.M.，GastroenterologyclinicsofHealthAmerica，20，269-278(1991)。
因此，應(yīng)該理解，本發(fā)明化合物可治療腸應(yīng)激綜合征，現(xiàn)在和以后的定義無(wú)論如何均是以其癥狀或癥侯群表現(xiàn)的。
有助于將IBS和器質(zhì)性疾病相區(qū)別的癥狀是(1)明顯的下腹部疼痛，(2)通過(guò)排糞減輕下腹部疼痛，(3)隨疼痛開(kāi)始，頻繁地排糞，(4)隨疼痛開(kāi)始排出松軟的糞便。參見(jiàn)M.M.，GastrointestinalDiseases，Ed.，Sleisengerandfordtran，Saunders(1983)，880～895。
如以上所述，實(shí)施本發(fā)明方法有效的化合物包括上述定義式Ⅰ的化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。由于式Ⅰ化合物是胺類，因此在性質(zhì)上它們是堿性，所以可與許多無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸中的任一酸反應(yīng)，結(jié)果生成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。由于所述化合物的游離胺在室溫下通常為油狀物，因此，為了容易處理和給藥，最好將該游離胺轉(zhuǎn)變成它們相應(yīng)的藥學(xué)上適用的酸加成鹽，因?yàn)槠渌峒映甥}在室溫下通常是固體。為了生成上述的鹽，通常應(yīng)用的酸有無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，有機(jī)酸例如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對(duì)溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸等。因此，上述藥學(xué)上適用的鹽其實(shí)例有硫酸鹽、焦硫酸鹽、酸式硫酸鹽、亞硫酸鹽、酸式亞硫酸鹽、磷酸鹽、磷酸-氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、2-丁炔-1，4-二羧酸鹽、3-己炔-2，5-二羧酸鹽、苯甲酸鹽、氯代苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、羥基乙酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、扁桃酸鹽等。優(yōu)選的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽是與無(wú)機(jī)酸(如鹽酸和氫溴酸)生成的鹽，以及與有機(jī)酸(如馬來(lái)酸)生成的鹽。
此外，一些上述的鹽可以與水或有機(jī)溶劑(如乙醇)生成溶劑化物。所述溶劑化物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
由于本發(fā)明化合物具有極好的調(diào)整哺乳動(dòng)物中5-HT1A和蕈毒堿(M1)受體的作用，因此它們可用于治療IBS。優(yōu)選的式Ⅰ化合物是下述類別的化合物，其中(a)R為C1～C3烷基或-CH2 ;
(b)R1為C1～C3烷基或-CH2 ;
(c)R為丙基;
(d)R2和R3獨(dú)立地為氫或C1～C3烷基;
(e)R2和R3一起為-(CH2)p;
(f)Y為氧或-(CH2)-。
特別優(yōu)選是式Ⅰ化合物是下述的化合物，其中(a)R為丙基;
(b)R2和R3獨(dú)立地為氫或甲基。
最優(yōu)選的式Ⅰ化合物是(a)8-(異噁唑-5-基)-2-(二正丙基)氨基-1，2，3，4-四氫萘;
(b)8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘;
(c)8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘。
應(yīng)該理解，上述類別可以組合形成另外更好的類別。
本發(fā)明化合物具有不對(duì)稱碳原子，該碳原子在下式中用星號(hào)標(biāo)明， 因此，每個(gè)本發(fā)明化合物可以作為單獨(dú)的d-和l-立體異構(gòu)體形式存在，也可以作為上述異構(gòu)體的外消旋混合物形式存在。這樣，本發(fā)明化合物不僅包括dl-外消旋物，而且還包括它們各自的具有旋光活性的d-和l-異構(gòu)體。
下面進(jìn)一步解釋包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物8-(異噁唑-5-基)-2-(二丙氨基)四氫萘，8-(異噁唑-5-基)-2-(丙氨基)四氫萘，8-(異噁唑-5-基)-2-(二甲氨基)四氫萘，
8-(異噁唑-5-基)-2-[二(環(huán)丙基甲基)氨基]四氫萘，8-(異噁唑-5-基)-2-(二烯丙基氨基)四氫萘，8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-(二丙氨基)四氫萘，8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-(丙氨基)四氫萘，8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-(二甲氨基)四氫萘，8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-[二(環(huán)丙基甲基)氨基]四氫萘，8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-[(二烯丙基)氨基)]四氫萘，8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-(二丙氨基)四氫萘，8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-(丙氨基)四氫萘，8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-(二甲氨基)四氫萘，8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-[二(環(huán)丙基甲基)氨基]四氫萘，8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-(二烯丙基氨基)四氫萘，8-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-2-(二丙氨基)四氫萘，8-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-2-(丙氨基)四氫萘，8-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-2-(二甲氨基)四氫萘，8-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-2-[二(環(huán)丙基甲基)氨基]四氫萘，8-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-2-(二烯丙基氨基)四氫萘，8-(4，5，6，7-四氫苯并[C]異噁唑-1-基)-2-(二丙氨基)四氫萘，8-(4，5，6，7-四氫苯并[C]異噁唑-1-基)-2-(丙氨基)四氫萘，8-(4，5，6，7-四氫苯并[C]異噁唑-1-基)-2-(二甲氨基)四氫萘，8-(4，5，6，7-四氫苯并[C]異噁唑-1-基)-2-[二(環(huán)丙基甲基)氨基]四氫萘，5-(4，5，6，7-四氫苯并[C]異噁唑-1-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃，5-(異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃，5-(3-甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃，5-(4-甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃，5-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃，5-(異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫噻喃，5-(3-甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫噻喃，5-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫噻喃，5-(3，4-二甲基異噁唑-5-基)-3-(二丙氨基)苯并二氫噻喃。
本發(fā)明化合物可以按本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員熟知的方法進(jìn)行制備。本發(fā)明化合物可以用許多一般的反應(yīng)得到。下面提供一般的反應(yīng)式，在各反應(yīng)式中，各基團(tuán)的含義如下R2和R3氫、C1～C3烷基、鹵素、OH、C1～C3烷氧基、C1～C3烷硫基、NH2、CN、苯基、或(-CH2-)p;
Rc氫或C1～C3烷基;
X鹵素、SRc、ORc或N(Rc)2;
Ar式Ⅰ化合物的其余部分，即

前面的敘述提出了其中雜芳環(huán)上有或沒(méi)有取代基的化合物的合成方法。有關(guān)引入、互變和除去雜芳環(huán)上取代基的方法的一般反應(yīng)請(qǐng)參見(jiàn)RichardC.Larocke，ComprehensiveOrganicTransformations，VCHPublishers，Inc.，紐約(1989)。
式Ⅰ化合物的旋光活性異構(gòu)體也是本發(fā)明涉及的內(nèi)容。所述旋光活性異構(gòu)體可以由上面方法所述的它們各自的光學(xué)活性前體進(jìn)行制備，或者通過(guò)拆分外消旋混合物制得。所述方法敘述在歐洲專利申請(qǐng)498，590號(hào)中。
在制備本發(fā)明化合物中作為起始原料的化合物是已知的，或者可以由本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員應(yīng)用一般的方法容易地合成。
本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽通常可以按下法制得使本發(fā)明的式Ⅰ堿與等摩爾量或過(guò)量的酸反應(yīng)。反應(yīng)物通常在可溶性的溶劑(如乙醚或苯)中結(jié)合，然后所述鹽在約1小時(shí)～10天內(nèi)由溶液中析出，再經(jīng)過(guò)濾進(jìn)行分離。
提供下面的制備方法，以便敘述制備式Ⅰ化合物的一般方法。它們的其他制備方法對(duì)本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員來(lái)講是明白的。因此，提供下面的制備方法只是為了更詳細(xì)地解釋本發(fā)明，無(wú)論如何不應(yīng)看作是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。
制備12-(二正丙氨基)-8-(異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將2-(二正丙氨基)-8-乙?；?1，2，3，4-四氫萘(0.3克，1.1毫摩爾)和三(二甲氨基)甲烷(0.32克，2.2毫摩爾)的甲苯溶液加熱回流5小時(shí)，并于60℃保持18小時(shí)。加入另一等分的三(二甲氨基)甲烷(0.16克，1.1毫摩爾)，反應(yīng)液再于60℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)液濃縮，得到2-(二正丙氨基)-8-[1-氧代-3-(二甲氨基)-丙-2-烯-1-基]-1，2，3，4-四氫萘(0.39克)，為粘稠的橙色油狀物。
向2-(二正丙氨基)-8-[1-氧代-3-(二甲氨基)-丙-2-烯-1-基]-1，2，3，4-四氫萘(0.75克，2.29毫摩爾)的乙酸(5ml)溶液中加入鹽酸羥胺(0.32克，4.6毫摩爾)，反應(yīng)液于室溫?cái)嚢?。將反?yīng)液濃縮，殘余物溶于水中。加入濃氫氧化銨溶液使該溶液堿化，并用乙醚萃取。萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并濃縮，得到粘稠的淡橙色油狀物。按一般方法制備馬來(lái)酸鹽。從乙醇/乙醚中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為米色結(jié)晶(0.24克)。m.p.136～138℃。該鹽用乙醇重結(jié)晶，得到無(wú)色結(jié)晶(155毫克)m.p.139～141℃。
分析理論值C，66.65;H，7.29;N，6.76;
實(shí)測(cè)值C，66.86;H，7.33;N，6.79.
制備22-(二正丙氨基)-8-(3-溴異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備向2-(二正丙氨基)-8-碘-1，2，3，4-四氫萘(4.3克，12.1毫摩爾)和三乙胺(100ml)的溶液中加入碘化亞銅(Ⅰ)(228毫克)、氯化雙(三苯膦)-鈀(Ⅱ)(841毫克)和三甲基甲硅烷基乙炔(1.7ml)。該混合物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)液倒入水中并用乙醚萃取。萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到5克粗品。經(jīng)快速層析純化，用20∶1二氯甲烷甲醇作為溶劑，得到4.33克2-(二正丙氨基)-8-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)-1，2，3，4-四氫萘，用于下步反應(yīng)。
2-(二正丙氨基)-8-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基)-1，2，3，4-四氫萘(4.3克)和氟化四乙銨(12.1毫摩爾)的四氫呋喃(150ml)溶液于室溫?cái)嚢?8小時(shí)并回流6小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，殘余物溶于二氯甲烷中。該溶液用水洗滌，經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到3.6克棕色油狀物。經(jīng)快速層析純化，用20∶1二氯甲烷∶甲醇作為溶劑，得到2-(二正丙氨基)-8-乙炔基-1，2，3，4-四氫萘(1.1克，總產(chǎn)率為36%)。
將2-(二正丙氨基)-8-乙炔基-1，2，3，4-四氫萘(900毫克;3.5毫摩爾)置于含1ml水的90ml乙酸乙酯中，并于室溫?cái)嚢?。加入Br2CNOH(715.8毫克)的10ml乙酸乙酯溶液，混合物于室溫?cái)嚢?天，隨后加入150毫克碳酸鉀和250毫克Br2CNOH?；旌衔镌贁嚢?小時(shí)，然后將其倒入水中，并用乙酸乙酯洗滌。將乙酸乙酯洗滌液合并，經(jīng)干燥和濃縮，得到1.0克殘余物。殘余物經(jīng)快速柱層析純化，用20∶1 CH2Cl2∶MeOH作為溶劑。將合適的級(jí)分合并，得到約120毫克物質(zhì)。加入乙醚，形成固體并經(jīng)過(guò)濾除去。濾液含有所需的產(chǎn)物，然后將其轉(zhuǎn)變成馬來(lái)酸鹽。從乙酸乙酯和己烷的混合液中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(84毫克)。m.p.113～114℃。
分析理論值C，55.99;H，5.92;N，5.68;
實(shí)測(cè)值C，55.77;H，5.90;N，5.48.
制備32-(二正丙氨基)-8-(4-甲基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將2-(二正丙氨基)-8-溴-1，2，3，4-四氫萘(8.5克，27.4毫摩爾)溶于80ml四氫呋喃(THF)中并冷卻至-78℃，然后加入25.7ml正丁基鋰(1.6M己烷溶液)。混合物于-78℃攪拌1小時(shí)，然后加入2.4ml(32.9毫摩爾)丙醛。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒌谷胨?，用二氯甲烷萃取。萃取液?jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到9.1克黃色油狀物。
油狀物置于硅膠柱上進(jìn)行層析，用含微量氫氧化銨的3%甲醇的二氯甲烷混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到6.5克(82.0%)2-(二正丙氨基)-8-)1-羥丙-1-基)-1，2，3，4-四氫萘，為澄清的油狀物。
將前面的產(chǎn)物溶于250ml二氯甲烷中，加入17.0克(78.7毫摩爾)氯鉻酸吡啶鎓(PCC)和30克4A分子篩。混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入250ml乙醚和硅藻土。將混合物倒入硅膠柱中并用乙醚洗脫。加入甲醇以溶解由于向反應(yīng)液加入乙醚而析出的棕色泥狀物。將該物質(zhì)加入柱上，并用10%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫。濃縮洗脫液，得到棕色油狀物，再經(jīng)硅膠柱層析純化，依次用2∶1己烷∶乙醚和單一的乙醚為溶劑。將含產(chǎn)物的級(jí)分合并并濃縮，得到4.7克2-(二正丙氨基)-8-丙酰-1，2，3，4-四氫萘。
將2-(二正丙氨基)-8-丙酰-1，2，3，4-四氫萘(1.5克;5.2毫摩爾)溶于50ml甲苯中，并加入2.2ml三(二甲氨基)甲烷?；旌衔锛訜岬?0℃過(guò)液。然后將混合物蒸發(fā)，殘余物溶于15ml乙酸中。加入鹽酸羥胺(730毫克;10.4毫摩爾)，混合物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜?；旌衔锏谷胨?，用氫氧化銨將pH調(diào)節(jié)至11，所得的混合物用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到1.5克橙色油狀物。
油狀物置于硅膠柱上，用含微量氫氧化銨的2∶1己烷和乙醚的混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到1.0克(61.3%)標(biāo)題化合物的游離堿。
按一般方法將50毫克游離堿轉(zhuǎn)變成其馬來(lái)酸鹽，用乙醇和乙醚的混合液重結(jié)晶，得到55毫克白色結(jié)晶，m.p.118℃。
分析C24H32N2O5理論值C，67.27;H，7.53;N，6.54;
實(shí)測(cè)值C，66.99;H，7.60;N，6.35.
制備42-(二正丙氨基)-8-(4-乙基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘的制備將2-(二正丙氨基)-8-溴-1，2，3，4-四氫萘(5.0克，16.1毫摩爾)溶于50mlTHF中，混合物冷卻至-78℃，隨后加入21.0ml正丁基鋰(0.92M的己烷溶液)。將混合物攪拌30分鐘，并加入1.85ml(21.0毫摩爾)丁醛。使混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^(guò)夜，然后將其倒入水中并用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到6.4克殘余物。殘余物置于硅膠柱上，用含微量氫氧化銨的2%甲醇的二氯甲烷混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到4.8克2-(二-正丙氨基)-8-(1-羥基丁-1-基)-1，2，3，4-四氫萘，為粘稠的油狀物。
將油狀物(4.0克;13.2毫摩爾)溶于200ml二氯甲烷中，并加入4 分子篩(30克)。攪拌混合物，并加入10.0克(46.2毫摩爾)pCC。在室溫下繼續(xù)攪拌3小時(shí)，然后將混合物倒入硅膠柱上，依次用乙醚和含微量氫氧化銨的3%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，得到產(chǎn)物，為棕色油狀物。
油狀物置于硅脫柱上，用含微量氫氧化銨的3%甲醇和二氯甲烷的混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到油狀物，當(dāng)將其溶于乙醚時(shí)形成棕色沉淀。濾除沉淀，濾液經(jīng)蒸發(fā)得到3.0克2-(二正丙氨基)-8-丁酰-1，2，3，4-四氫萘，為淡棕色油狀物。
將叔丁醇鉀(0.82克;7.3毫摩爾)懸浮于100ml四氫呋喃(THF)中。向混合物中加入甲酸乙酯(1.0克);13.3毫摩爾)和2-(二正丙氨基)-8-丁酰-1，2，3，4-四氫萘(1.0克;3.3毫摩爾)的THF溶液。所得的混合物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。加入羥胺(1.2克;16.6毫摩爾)，隨后加入足量的水以溶解固體。所得的混合物pH為6，于室溫?cái)嚢?0小時(shí)，隨后將其倒入水中，并用氫氧化銨調(diào)節(jié)pH至12。然后混合物用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物溶于100毫克甲苯中，加入100毫克對(duì)甲苯磺酸。再將混合物回流1.5小時(shí)，隨后將其倒入水中并用二氯甲烷萃取。二氯甲烷萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。
殘余物置于硅膠柱上，用含微量氫氧化銨的2∶1己烷∶乙醚混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到0.9克標(biāo)題化合物。MS(FD)∶327(100)。
制備52-(二正丙氨基)-8-(3-甲基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將叔丁醇鉀(450毫克;4.0毫摩爾)懸浮于THF中，加入0.7ml(7.3毫摩爾)乙酸乙酯和0.5克(1.8毫摩爾)2-(二正丙氨基)-8-乙?；?1，2，3，4-四氫萘的THF溶液。所應(yīng)用的THF總量為30ml。然后混合物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，隨后加入640毫克(9.2毫摩爾)鹽酸羥胺。反應(yīng)混合物再于室溫?cái)嚢?4小時(shí)。將混合物倒入水中，并用氫氧化銨將pH從6調(diào)至12。然后混合物用3∶1氯仿∶異丙醇的混合液萃取。萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到450毫克固體。固體溶于甲苯中;加入小量的對(duì)甲苯磺酸;并將混合物回流2小時(shí)。然后混合物倒入水中;用氫氧化銨將pH調(diào)節(jié)至12;混合物用二氯甲烷萃取。二氯甲烷萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到390毫克棕色油狀物。
油狀物置于硅膠柱上，用含2%甲醇和微量氫氧化銨的二氯甲烷溶液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到210毫克(35%)標(biāo)題化合物的游離堿。
按標(biāo)準(zhǔn)方法，將上述化合物轉(zhuǎn)變成馬來(lái)酸鹽，并用乙醇和乙醚的混合液重結(jié)晶，得到200毫克標(biāo)題化合物，m.p.125.5～127.5℃。MS(FD)∶313(100)。
分析C24H31N2O5理論值C，67.27;H，7.53;N，6.54;
實(shí)測(cè)值C，67.52;H，7.29;N，6.48.
制備62-(二正丙氨基)-8-(3-苯基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘氫溴酸鹽的制備將苯乙酮肟(750毫克;5.5毫摩爾)溶于THF中，混合物冷卻至-5℃。加入正丁基鋰(12.0ml;11.1毫摩爾)，混合物于-5℃攪拌1小時(shí)。加入2-(二正丙氨基)-8-甲氧基羰基-1，2，3，4-四氫萘(0.8克;2.8毫摩爾)溶于THF的溶液(在混合物中THF的總量為100ml)，并將混合物溫?zé)嶂潦覝?。再將混合物倒入水中，并用二氯甲烷萃取。萃取液?jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到1.4克殘余物。
殘余物置于硅膠柱上，并用含微量氫氧化銨的2∶1己烷∶乙醚的混合液洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到220毫克標(biāo)題化合物的游離堿。
按照標(biāo)準(zhǔn)方法，將游離堿轉(zhuǎn)變成氫溴酸鹽，再用甲醇和乙酸乙酯的混合液重結(jié)晶，得到150毫克白色粉狀物，m.p.171.5～173℃。MS(FD)∶374(100)。
分析C25H30N2OBr理論值C，65.93;H，6.86;N，6.15;
實(shí)測(cè)值C，65.74;H，6.86;N，5.92.
制備72-(二正丙氨基)-8-(3-甲硫基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將2-(二正丙氨基)-8-[3，3-二(甲硫基)-1-氧代丙-2-烯-1-基]-1，2，3，4-四氫萘(0.64克;1.7毫摩爾)溶于甲苯和乙酸的混合液中。加入鹽酸羥胺(1.2克;1.7毫摩爾)和乙酸鈉(1.2克;14毫摩爾)在10ml水中的溶液。然后加入乙醇(10ml)使混合物變成均勻狀。將混合物加熱至100℃保持18小時(shí)，隨后加入0.6克鹽酸羥胺?；旌衔镉?00℃于攪拌4小時(shí)，并另外加入0.6克鹽酸羥胺。然后混合物于100℃攪拌2小時(shí)，再于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將混合物倒入水中，混合物的水溶液用乙醚洗滌二次，然后用10%鹽酸萃取。全并水相并將其堿化(pH12)。混合物再用二氯甲烷萃取，萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到560毫克暗黃色油狀物。
油狀物置于硅膠柱上，并用含有微量氫氧化銨的1.5～2%甲醇的二氯甲烷溶液進(jìn)進(jìn)梯度洗脫。將合適的級(jí)分合并，得到230毫克產(chǎn)物。將產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成馬來(lái)酸鹽，并用乙酸乙酯和己烷的混合液重結(jié)晶，得到210毫克標(biāo)題化合物，m.p.118～119.5℃。MS(FD)∶344(100)。
分析理論值C，62.59;H，7.00;N，6.08;
實(shí)測(cè)值C，62.84;H，7.04;N，6.02.
制備82-(二正丙氨基)-8-(4-甲氧基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘氫溴酸鹽的制備將2-(二正丙氨基)-8-溴-1，2，3，4-四氫萘(5.0克;1.61毫摩爾)溶于25ml THF，并冷卻至-78℃，隨后加入。3.22ml正丁基鋰(1M己烷溶液)。混合物于-78℃保持1.5小時(shí)。于-78℃通過(guò)插管將該溶液移入甲氧基乙酸甲酯(7.5ml，160毫摩爾)的THF溶液中。反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，倒入NaHCO3溶液中，并用CH2Cl2萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)和濃縮，得到6.8克粗品。
該物質(zhì)經(jīng)硅膠層析，用含微量氫氧化銨的4%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫產(chǎn)物。將合適的級(jí)分合并，得到1.4克2-(二正丙氨基)-8-甲氧基乙?；?1，2，3，4-四氫萘。
將2-(二正丙氨基)-8-甲氧基乙?；?1，2，3，4-四氫萘(1.0克)和三(二甲氨基)甲烷(1.5ml)的甲苯(25ml)溶液加熱回流1.5小時(shí)。濃縮反應(yīng)液，得到粗品2-(二正丙氨基)-8-(1-氧代-2-甲氧基-3-(二甲氨基)-丙-2-烯基)-1，2，3，4-四氫萘(1.2克)。
向2-(二正丙氨基)-8-(1-氧代-2-甲氧基-3-(二甲氨基)丙-2-烯基)-1，2，3，4-四氫萘(1.1克)的甲醇溶液中加入鹽酸羥胺(1.2克)，反應(yīng)液于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)液濃縮，殘余物溶于甲苯中。向溶液中加入對(duì)甲苯磺酸(660毫克)，并將反應(yīng)液加熱回流2小時(shí)。濃縮反應(yīng)液，殘余物溶于水和二氯甲烷的混合液中。將混合物倒入碳酸氫鈉溶液中，所得的混合物用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)MgSO4干燥并濃縮，得到油狀物(600毫克)。經(jīng)快速層析純化，用1∶1乙醚∶己烷為溶劑，得到160毫克標(biāo)題化合物的游離堿。將其制成氫溴酸鹽。用甲醇/乙醚兩次重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物氫溴酸鹽，為白色結(jié)晶(86毫克)。m.p.178℃。
分析理論值C，58.68;H，7.14;N，6.84;
實(shí)測(cè)值C，58.88;H，7.23;N，6.60.
制備9S-(-)-8-(異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將S-(-)-8-乙?；?2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽(5.0克，18.3毫摩爾)和三(二甲氨基)甲烷(7.6ml，45.8毫摩爾)的甲苯(200ml)中的溶液加熱至80℃并保持20小時(shí)。除去溶劑，殘余物溶于乙酸(50ml)中。加入鹽酸羥胺(2.5克，36.6毫摩爾)，反應(yīng)液于室溫?cái)嚢?0小時(shí)。將反應(yīng)液倒入水中。所得的混合物用NaOH溶液堿化，并用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到暗紅色油狀物。經(jīng)快速色譜純化(1∶2，乙醚∶己烷(NH4OH)，得到4.3克(79%)所需產(chǎn)物。用馬來(lái)酸使其形成鹽，從乙醇/乙醚中結(jié)晶，得到淡黃色結(jié)晶(5.3克，m.p.127～128.5℃)。
MS(FD)∶298(100)。
OR[α]D＝-33.04°(c＝1.0，H2O);[α]365＝-57.34°(C＝1.0，H2O).
分析C19H26N2O·C4H4O4·0.2H2O理論值C，66.07;H，7.33;N，6.70;
實(shí)測(cè)值C，65.95;H，6.92;N，7.08.
制備10R-(+)-8-(異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽的制備將R-(+)-8-乙酰基-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘馬來(lái)酸鹽(5.0克，18.3毫摩爾)和三(二甲氨基)甲烷(7.6ml，45.8毫摩爾)的甲苯(200ml)溶液加熱至80℃并保持20小時(shí)。除去溶劑，殘余物溶于乙酸(25ml)中。加入鹽酸羥胺(2.5克，36.6毫摩爾)，反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?0小時(shí)。將反應(yīng)液倒入水中，并用乙醚洗滌。所得的水相用NaOH溶液堿化，并用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到5.1克粗品。經(jīng)快速色譜純化(1∶2，乙醚∶己烷(NH4OH)，得到4.6克(83%)所需的游離堿。用馬來(lái)酸使其形成鹽，并從乙醇/乙醚中結(jié)晶，得到白色固體(5.4克，m.p.127～128.5℃)。
MS(FD)∶298(100)。
分析C19H26N2O·C4H4O4·0.2H2C理論值C，66.07;H，7.33;N，6.70;
實(shí)測(cè)值C，65.71;H，6.93;N，7.14.
制備11R-(+)-8-(4-甲基-5-異噁唑基)-2-(二丙氨基)-1，2，3，4-四氫萘氫溴酸鹽的制備將R-(+)-8-丙酰-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘(20克，7.0毫摩爾)的甲苯(65ml)溶液加熱回流3小時(shí)。除去溶劑，殘余物溶于乙酸(20ml)中。加入鹽酸羥胺(0.97克，14毫摩爾)，反應(yīng)液于室溫?cái)嚢?天。將反應(yīng)液倒入水中。所得的混合物用NaOH溶液堿化，用1∶3異丙醇和氯仿的混合液萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到黃色/橙色油狀物。經(jīng)快速色譜純化(1∶1，乙醚∶己烷(NH4OH)，得到1.46克(67%)無(wú)色油狀物。使生成氫溴酸鹽，用THF/己烷結(jié)晶兩次，得到白色結(jié)晶(1.32克，m.p.167～169℃)。
OR[α]D＝+27.26°(C＝1.0，H2O);[α]365＝+40.90°(C＝1.0，H2O).
分析C20H28N2O·HBr理論值C，61.07;H，7.43;N，7.12;
實(shí)測(cè)值C，61.21;H，7.50;N，6.97.
制備125-(5-異噁唑基)-3-(二丙氨基)苯并二氫吡喃氫溴酸鹽的制備將5-乙?；?3-二丙氨基苯并二氫吡喃(500毫克，1.81毫摩爾)和三[二甲氨基]甲烷(540毫克，5.4毫摩爾)的甲苯(20ml)溶液加熱回流2小時(shí)。TLC表明有一新的、低Rf值產(chǎn)物存在。反應(yīng)液用稀NaOH溶液稀釋，并用1∶3異丙醇和氯仿混合液萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得到暗黃色油狀物。將該油狀物溶于乙酸(10ml)中，并加入固體鹽酸羥胺(480毫克，6.9毫摩爾)。反應(yīng)液于室溫?cái)嚢?7小時(shí)，用水稀釋，用NaOH堿化，用1∶3異丙醇和氯仿的混合液萃取。萃取液經(jīng)干燥(Na2SO4)并濃縮，得534毫克橙色油狀物。經(jīng)快速色譜純化(1∶1，乙醚∶己烷(NH4OH)，得到無(wú)色油狀產(chǎn)物(482毫克，88%)。將該物質(zhì)轉(zhuǎn)變成其氫溴酸鹽，并從乙酸乙酯/己烷中結(jié)晶，得到白色固體。m.p.171.5～173℃。
MS(FD)∶300(100)。
分析C18H24N2O2·HBr理論值C，56.70;H，6.61;N，7.35;
實(shí)測(cè)值C，56.71;H，6.56;N，7.54.
如以上所述，本發(fā)明化合物對(duì)5-HT1A和蕈毒堿(M1)的受體具有結(jié)合親和力。
進(jìn)行以下試驗(yàn)以便說(shuō)明本發(fā)明化合物結(jié)合5-HT1A受體的能力。用氚化的8-羥基-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘(3H-8-OH-DPAT)特定標(biāo)記的位置已被確定為5-HT1A受體。Wong等在J.Neural Transm.71∶207～218(1988)中敘述了上述的一般方法。
體外與5HT1A受體的結(jié)合用于本研究前至少3天，給購(gòu)自Harlan公司(Cumberland，IN)的雄性Sprague-Dawley大鼠(110～150克)喂以PurinaChow飼料，不限量。斷頭處死大鼠。迅速取出大腦，在4℃條件下割分大腦皮質(zhì)。
將腦組織置于0.32M蔗糖溶液中制成勻漿。先以1000xg離心10分鐘，然后以17000xg離心20分鐘，使粗提突觸體組分沉淀下來(lái)。將粉狀沉淀物混懸于100倍體積的50mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液(pH7.4)中，置于37℃溫育10分鐘，然后以50000xg離心10分鐘。該步驟重復(fù)進(jìn)行一次，最終所得粉狀沉淀物混懸于冰冷卻的50mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液(pH7.4)中。按照先前報(bào)告的方法[Wong等，J.Neural Transm.64∶251～269[(1985)]進(jìn)行3H-8-OH-DPAT的結(jié)合。簡(jiǎn)要步驟是將從大腦皮質(zhì)分離出來(lái)的突觸體膜置于2ml由50mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(pH7.4)、10mM優(yōu)降寧、0.6mM維生素C、5mM CaCl2、2nM3H-8-OH-DPAT和濃度為0.1nM～1000nM的目的化合物組成的溶液中，于37℃溫育10分鐘。采用在減壓條件下通過(guò)玻璃纖維(GFB)漏斗過(guò)濾樣品的方法終止結(jié)合反應(yīng)。濾器用5ml冰冷的緩沖液洗滌2次，并將濾器置于含10ml PCS(Amersham/Searle)閃爍液的閃爍瓶中。用液體閃爍分光計(jì)測(cè)量結(jié)合物放射性。在分離在樣品中還加入10mM未標(biāo)記的8-OH-DPAT，以確定非特異性結(jié)合。3H-8-OH-DPAT的特異性結(jié)合定義為在10μM未標(biāo)記8-OH-DPAT存在和不存在條件下測(cè)得的放射性結(jié)合量之差。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表Ⅰ和表Ⅱ。
體內(nèi)5HT1A的活性還觀察了本發(fā)明化合物在體內(nèi)對(duì)腦5-HIAA和血清皮質(zhì)酮水平的作用。給體重為150～200克的雄性Sprague-Dawley大鼠皮下注射或灌服試驗(yàn)化合物的水溶液。治療后1小時(shí)，斷頭處死大鼠，收集軀干血液。血液凝固后進(jìn)行離心，分離血清。用熒光分光光度法[Solem，J.H.;Brinck-Johnsen，T.，Scand.J.Clin.Invest.[Suppl.80]，17，1(1965)測(cè)定血清中皮質(zhì)酮濃度。迅速取出斷頭大鼠全腦，置于冰上凍結(jié)，并貯于-15℃。按Fuller，R.W.;Snoddy，H.D.;Perry，K.W.，LifeSci.40，1921(1987)報(bào)告的方法，用配備電化學(xué)檢測(cè)器的液相色譜儀測(cè)定5-HIAA濃度。結(jié)果列于表Ⅰ。
體外[3H]-哌吡二氮 的結(jié)合試驗(yàn)體外[3H]-哌吡二氮 結(jié)合試驗(yàn)采用體重為100～150克的雄性Sprague-Dawley大鼠(Harlan Sprague Dawley，Indianapolis，IN)，斷頭處死后迅速取出大腦，從大腦中割分大腦皮質(zhì)，用差速離心法制備大腦皮質(zhì)膜，洗滌2次，冷凍保存直到應(yīng)用時(shí)止。
測(cè)定所研究的藥物對(duì)3H-哌吡二氮 與受體結(jié)合的抑制作用的方法是試管中加入被研究藥物、1nM3H-哌吡二氮 (87.0Ci/mmol)，New England Nuclear，Boston，MA)以及1ml含100微克大腦皮質(zhì)膜的20mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液(pH7.4，內(nèi)含1mM MnCl2)。置于25℃溫育1小時(shí)后，將勻漿通過(guò)玻璃漏斗真空過(guò)濾(Whatman，GF/C)，濾器用2ml冷的緩沖液洗滌3次，并置于含1ml閃爍液(Ready protein +，Beckman，F(xiàn)ullerton CA)的閃爍瓶中。
用液體閃爍分光計(jì)測(cè)定濾器上捕獲的放射性。用1μM阿托品測(cè)定非特異性結(jié)合。
結(jié)果列于表Ⅱ。
胃酸抑制作用按Shay等(Shay，H.，Komarov，A.A.andGreenstein，M)報(bào)告的方法[EffectsofVagotomyintherat，Arch.Surg.59∶210～226，1949]，在幽門(mén)結(jié)扎的大鼠模型上測(cè)定胃酸抑制作用。體重約200克的雄性Sprague-dawley大鼠用前先饑餓24小時(shí)。飲水不限。在輕度乙醚麻醉?xiàng)l件下，結(jié)扎幽門(mén)，與此同時(shí)，給大鼠腹腔或皮下注射受試化合物，并讓大鼠從麻醉狀態(tài)下蘇醒。胃酸貯積2小時(shí)后，處死大鼠。取出胃內(nèi)容物，量其體積，并滴定至pH終點(diǎn)為7.0。每一個(gè)實(shí)驗(yàn)都設(shè)賦形劑的對(duì)照組，用于測(cè)定胃酸分泌的抑制百分比。
結(jié)果列于表Ⅰ。
氯化氯甲酰膽堿引起的高張力的復(fù)原使體重300～350克的雄性Sprague-Dawley大鼠饑餓24小時(shí)。將大鼠送到實(shí)驗(yàn)室，斷頭處死，迅速取出結(jié)腸，洗去結(jié)腸內(nèi)糞便。應(yīng)用Grass FT03型傳感器，將縱切成4厘米長(zhǎng)的結(jié)腸條在1克張力條件下置于器官浴中。讓結(jié)腸組織達(dá)到平衡狀態(tài)，并充以95%氧和5%二氧化碳。然后加入氯化氨甲酰膽堿。使結(jié)腸收縮，產(chǎn)生張力反應(yīng)。然后加入受試藥物溶液，觀察松弛反應(yīng)。從藥物處理前的對(duì)照期(張力反應(yīng))，計(jì)算出松弛百分比。就許多化合物來(lái)說(shuō)，所試驗(yàn)的藥物濃度都在一個(gè)以上。在這種情況下，可計(jì)算出IC50值，IC50是指將氯化氨甲酰膽鹼引起的張力反應(yīng)抑制50%所需要的藥物濃度。結(jié)果列于表Ⅱ。
下面列出的表Ⅰ和表Ⅱ表明各個(gè)本發(fā)明化合物的評(píng)價(jià)結(jié)果。
在表Ⅰ中，第1欄為被評(píng)價(jià)化合物的實(shí)例號(hào);第2和第3欄為取代基團(tuán)R2和R3;第4欄給出了IC50值，以抑制3H-8-OH-DPAT與5HT1A受體結(jié)合所需的納摩爾(nanomolar)濃度表示;第5欄給出在某一劑量或ED50劑量(以“μmoles/Kg”表示)下，體內(nèi)胃酸的抑制百分率，第6欄則給出皮下注射試驗(yàn)化合物降低腦5-HIAA水平的最小有效劑量(MED);第7欄給出皮下注射試驗(yàn)化合物使血清皮質(zhì)酮水平升高的MED值。第8樣提供的資料與第6欄相同，只是試驗(yàn)化合物的給藥途徑為口服。第6-8欄所列結(jié)果表明5-HT1A激動(dòng)劑的活性。
表Ⅱ簡(jiǎn)要說(shuō)明典型的式Ⅰ化合物對(duì)蕈毒堿(M1)受體的作用。前3欄與表Ⅰ相同。第4欄給出IC50值，以抑制3H-哌吡二氮 與蕈毒堿(M1)受體結(jié)合所需的納摩爾(nanomolar)濃度表示，第5欄顯示在體外抑制氯化氨甲酰膽堿引起的結(jié)腸平滑肌高張力的IC50值，以μM表示。

表Ⅱ式Ⅰ化合物的蕈毒堿(M1)活性 實(shí)例號(hào) R2R3放射配體氯化氨甲酰膽堿引起結(jié)合數(shù)據(jù)的大鼠結(jié)腸收縮的阻(IC50,nM) 斷(在10μm/kg或M1IC50條件下的抑制%)8-OHDPAT(Std)194029.751HH8.19HH1802.510HH1509.12BrH2204.63 H CH3190 58@104HEt5 CH3H 107 65@106PhH7507SMeH17367@108HOMe19569@10
因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)例是提供經(jīng)調(diào)整5-HT1A和蕈毒堿(M1)兩受體的活性治療應(yīng)激性腸綜合癥征的方法，該方法包括給需治療IBS的哺乳動(dòng)物服用藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物。
在這里應(yīng)用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上有效量”是指能夠與5-羥色胺1A和M1兩受體結(jié)合的本發(fā)明化合物的量。當(dāng)然，服用本發(fā)明化合物的具體劑量要圍繞病例的具體情況，包括例如服用的化合物、給藥途徑和需治療的情況來(lái)確定。一般每天的劑量相當(dāng)于約0.01毫克至20毫克/公斤本發(fā)明的活性化合物。每天的劑量為約0.05-10毫克/公斤較好，理想的劑量為約0.1-5毫克/公斤。
可以通過(guò)各種途徑給予本發(fā)明化合物，包括口服、直腸給藥、經(jīng)皮給藥、皮下給藥、靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥和鼻內(nèi)給藥。
最好在服用前將本發(fā)明化合物制成制劑。因此本發(fā)明年另一實(shí)例是提供包括式Ⅰ化合物和藥用載體、稀釋劑或賦形劑的藥物制劑。
本發(fā)明的藥物制劑可以按已知方法用熟知的和容易得到的成分配制。在配制本發(fā)明的組合物中，活性成分通常與載體混合，或用載體稀釋，或封入載體內(nèi)，該載體可以是膠囊、小香囊、紙或其他包裝物內(nèi)。當(dāng)載體作為稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，該物質(zhì)可作為有效成分的載體、賦形劑或介質(zhì)。因此，組合物可以是片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小香囊劑、扁囊劑、酏劑、混懸液劑、乳劑、溶液、糖漿劑、氣溶膠劑(為固體或在液體介質(zhì)中)、含有例如直至10%(重量計(jì))活性化合物的軟膏劑、軟和硬明膠膠囊劑、栓劑、無(wú)菌注射溶液劑、無(wú)菌包裝的粉劑等等形式。
合適的載體、賦形劑和稀釋劑的實(shí)例有乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂和礦物油。該組合物還可以包含潤(rùn)滑劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、混懸劑、防腐劑、甜味劑、調(diào)味劑等等?？梢詰?yīng)用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法將本發(fā)明的組合物進(jìn)行配制，以便在患者服用之后使有效成分快速、緩釋和或遲延釋放。
最好將本發(fā)明組合物配制成單位劑量形式，每一劑量通常含有約0.1-500毫克，最好含約1-250毫克有效成分。術(shù)語(yǔ)“單位劑量形式”是指物理上獨(dú)立的單元，它是適合于人體和其他哺乳動(dòng)物應(yīng)用的單位劑量，每個(gè)單位劑量含有預(yù)先確定量的經(jīng)計(jì)算可產(chǎn)生所需治療效果的有效物質(zhì)及合適的藥用載體。
以下制劑實(shí)例僅是為了說(shuō)明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
制劑1用以下成分配制硬明膠膠囊劑量(毫克/每粒膠囊)2-(二正丙氨基)-8-(異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘鹽酸鹽250淀粉(干燥的)200硬脂酸鎂10總量460毫克將上述成分混合，并以460毫克的量裝填入硬明膠膠囊。
制劑2用以下成分壓制片劑
量(毫克/片)2-(二正丙氨基)-8-(4-甲基-異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘鹽酸鹽250微晶纖維素400二氧化硅(熏過(guò)的)10硬脂酸5總量665毫克將各成分混合并壓制成每片重665毫克的片劑。
制劑3用以下成分配制每5ml劑量含50毫克有效成分的混懸液量(毫克/混懸液)2-二烯丙氨基-8-(3-苯基異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘鹽酸鹽50毫克羥甲基纖維素鈉50毫克硫1.25ml苯甲酸溶液0.10ml調(diào)味劑適量著色劑適量加純化水至總量5ml將有效成分過(guò)45號(hào)美國(guó)篩，并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合，形成勻一的糊狀物。苯甲酸溶液、調(diào)味劑和著色劑用1份水稀釋并在攪拌下加到上述糊狀物中。加入足量的水以達(dá)到所需體積。
用以下成分配制靜脈注射劑量(毫克/靜脈注射劑)2-二烯丙基氨基-8-(異噁唑-5-基)-1，2，3，4-四氫萘鹽酸鹽100毫克等滲鹽水1000毫克通常將上述成分的溶液經(jīng)靜脈給患有抑郁癥的病人注射，注射的速度為1ml/分鐘。
權(quán)利要求
1.適用于治療哺乳動(dòng)物腸應(yīng)激綜合征的藥用組合物的制備方法，該方法包括將式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或溶劑化物與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形劑混合，式Ⅰ為 其中R為氫、C1～C3烷基、烯丙基或-CH2 ；R1為氫、C1～C3烷基、烯丙基、-CH2 或-(CH2)n-X；n為1～5；X為任意取代的苯基、C1～C3烷氧基或C1～C3烷硫基；R2和R3獨(dú)立地為氫、C1～C3烷基、C1～C3烷氧基、C1～C3烷硫基、鹵素、CN或苯基；或者R2和R3一起為-(CH2)p-；p為3～6；Y為-CH2-、-O-、-SOm-；m為0、1或2。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的化合物是其中Y為-CH2-的化合物。
3.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的化合物是其中Y為-O-的化合物。
4.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的化合物是其中Y為-SOm-的化合物。
5.按照權(quán)利要求1-4所述的方法，其中所述的化合物是其中R為C1～C3烷基或-CH2 的化合物。
6.按照權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述的化合物是其中R1為C1～C3烷基或-CH2 的化合物。
7.按照權(quán)利要求1-6中任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述的化合物是下述化合物其中R2和R3獨(dú)立地為氫、C1～C3烷基，或者R2和R3一起為-(CH2)p-。
8.按照權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述的化合物是其中R為丙基的化合物。
9.按照權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)的述的方法，其中所述的化合物是其中R1為丙基的化合物。
10.按照權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的化合物系選自8-(異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘;8-(4-甲基異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘;8-(3-甲基異噁唑-5-基)-2-二丙氨基-1，2，3，4-四氫萘。
全文摘要
本發(fā)明提供了用一系列既具有5-HT1A激動(dòng)劑活性，又具有M
文檔編號(hào)A61P25/00GK1111986SQ9310837
公開(kāi)日1995年11月22日 申請(qǐng)日期1993年7月16日 優(yōu)先權(quán)日1992年7月17日
發(fā)明者J·S·吉達(dá), J·M·肖斯 申請(qǐng)人:伊萊利利公司