專利名稱：抑制血管緊張肽原酶的二肽，其制備方法，含有這些二肽的藥劑及其應(yīng)用的制作方法
歐洲專利申請(qǐng)EPA152，255、EP-A155，809、EP-A163，237、EP-A172，346、EP-A172，347、EP-A179，352及EP-A255，082中已描述了二和三肽衍生物及它們作為血管緊張肽原酶抑制劑的應(yīng)用。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了新的肽衍生物，其可在體外和體內(nèi)高度有效地抑制血管緊張肽原酶。
本發(fā)明涉及式Ⅰ的化合物
其中R1代表式Ⅱ的殘基其中W代表-CO-、-O-CO-、-SO2-或-NH-CO-，Ra代表氫、(C1-C10)烷基，其可以是單不飽和的或二不飽和的，并且可被選自羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷酰氧基、羧基、(C1-C7)烷氧基羰基、鹵素、氨基、(C1-C7)烷基氨基、二-(C1-C7)烷基氨基、(C1-C5)烷氧基羰基氨基、(C7-C15)芳烷氧基羰基氨基和9-芴基甲氧羰基氨基的多達(dá)3個(gè)相同或不同的殘基取代;(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基、可被選自F、Cl、Br、I、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基羰基、氨基、苯胺基的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的殘基取代，其中苯胺基又可被多至2個(gè)鹵素和三氟甲基取代;(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷基，其中芳基部分可被選自F、Cl、Br、I、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基羰基、氨基、(C1-C7)烷基氨基、二-(C1-C7)烷基氨基、羧基、羧甲氧基、氨基-(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷基氨基-(C1-C7)烷基、二-(C1-C7)烷基氨基-(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基羰基甲氧基、氨基甲酰基、氨磺酰、(C1-C7)烷氧基磺酰、磺基和胍基甲基的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的殘基取代，或代表至少有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子作為環(huán)原子的5元或6元單環(huán)或9元或10元雙環(huán)雜環(huán)殘基，其可以是被選自F、Cl、Br、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C2-C8)烷氧基羰基、氨基或三氟甲基的一個(gè)或多個(gè)殘基二取代或三取代的，R4代表式Ⅲ的殘基
A代表在選自一組包括苯丙氨酸、組氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、β-2-噻吩基丙氨酸、β-3-噻吩基丙氨酸、β-2-呋喃基丙氨酸、β-3-呋喃基丙氨酸、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸、纈氨酸、丙氨酸、2，4-二氨基丁酸、精氨酸、4-氯苯丙氨酸、蛋氨酸砜、蛋氨酸亞砜、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、環(huán)己基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、間-甲基組氨酸、鄰-甲基酪氨酸、鄰-芐基酪氨酸、鄰-叔丁基酪氨酸、苯基甘氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸、正纈氨酸、β-2-苯并(b)噻吩基丙氨酸、β-3-苯并(b)噻吩基丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、正亮氨酸、半胱氨酸、S-甲基半胱氨酸、1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸、高苯丙氨酸、多巴、鄰-二甲基多巴、2-氨基-4-(2-噻吩基)丁酸、2-氨基-4-(3-噻吩基)丁酸、3-(2-噻吩基)絲氨酸、(Z)-脫氫苯丙氨酸和(E)-脫氫苯丙氨酸的氨基酸N端與R1相連且在C端與B相連的殘基，B代表定義同A的氨基酸殘基，R2代表氫、(C1-C10)烷基、(C4-C7)環(huán)烷基、(C4-C7)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C14)芳基或(C6-C14)芳基-(C1-C4)烷基，R3代表氫、(C1-C10)烷基、(C6-C14)芳基或(C6-C14)芳基-(C1-C4)烷基，X可以沒(méi)有或代表O或S，
n可以是2、3或4，且R7代表羥基或氨基，或代表至少有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子的5元雜環(huán)殘基，其可以被選自F、Cl、Br、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C2-C8)烷氧基羰基、氨基或三氟甲基的一個(gè)或多個(gè)殘基取代，其中不包括噁唑啉，及其生理上可耐受的鹽。
在各種情況下，被R2、羥基和R3取代的碳原子均可有R、S或R，S構(gòu)型。
烷基可以是直鏈或分支的。此同樣適于由其衍生的殘基，如烷氧基、烷基硫(代)、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；头纪榛?。
其中的環(huán)烷基也可以是指被烷基取代的殘基，如4-甲基環(huán)己基或2，3-二甲基環(huán)戊基。
(C6-C14)芳基可以是苯基、萘基、聯(lián)苯基或芴基，其中最好是苯基。此同樣適于由之衍生的殘基，如芳氧基、芳?；⒎纪榛头纪檠趸?。芳烷基可以是指與(C1-C6)烷基相連的未取代或取代的(C6-C14)芳基殘基，如芐基、α-和β-萘甲基、鹵芐基和烷氧芐基，但芳烷基并不只限于上述化合物。
至少有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子作為環(huán)原子并代表Ra的5元或6元單環(huán)或9元或10元雙環(huán)雜環(huán)殘基可以是指Katritzky and Lagowski，Chemie der Heterocyclen〔Heterocyclic Chemistry〕，Berlin，Heidelberg 1968，PP3-5中限定的雜環(huán)，如單環(huán)雜環(huán)有噻吩、呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、1，2，4-三唑、噻唑、四唑、異噻唑、噁唑和異噁唑以及由之衍生的完全或部分氫化的雜環(huán)。雙環(huán)雜環(huán)可以是苯并噻吩、苯并呋喃、吲哚、異吲哚、吲唑、苯并咪唑、喹啉、異喹啉、2，3-二氮雜萘、喹唑啉、喹喔啉和噌啉，以及由之衍生的完全或部分氫化的雜環(huán)。
代表R的至少有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子的5元雜環(huán)殘基具體的是指噻吩、呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、1，2，4-三唑、噻唑、四唑、異噻唑、噁唑、異噁唑及由之衍生的完全或部分氫化的雜環(huán)，其中不包括噁唑啉。
式Ⅰ中的氨基酸A或B彼此是由酰胺鍵連接的，它們是L、D或D、L構(gòu)型，但最好是L構(gòu)型的天然或非天然α氨基酸。
式Ⅰ化合物的鹽具體是指醫(yī)藥上可利用的或無(wú)毒性的鹽。
可以由含有酸性基團(tuán)(如羧基)的式Ⅰ化合物，與堿金屬或堿土金屬如Na、K、Mg和Ca，以及與生理上可耐受的有機(jī)胺如三乙胺和三-(2-羥乙基)胺形成所說(shuō)的鹽。
含有堿性基團(tuán)如氨基基團(tuán)或胍基基團(tuán)的式1化合物可與無(wú)機(jī)酸如鹽酸、硫酸或磷酸，以及與有機(jī)羧酸或磺酸如乙酸、檸檬酸、苯甲酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸和對(duì)位甲苯磺酸形成鹽。
R1最好代表(C2-C11)烷?；绻秕；?、甲?；?、乙?；?、新戊酰基、異戊?；虍惗□；?被取代的(C2-C11)烷?；?-羥丙?；?、2-羥基-3-甲基丁酰基或適當(dāng)被保護(hù)的氨基-(C2-C11)烷?；?-氨基丁酰基、5-氨基戊酰基、6-氨基己?；?、4-N-叔丁氧基羰基氨基丁?；?、5-N-叔丁氧基羰基氨基戊酰基或6-N-叔丁氧基羰基氨基己?；蚨?(C1-C7)烷基氨基-(C2-C11)烷?；缍谆被阴；?(C4-C9)環(huán)烷基羰基如環(huán)丙基羰基、環(huán)丁基羰基、環(huán)戊基羰基或環(huán)己基羰基;(C6-C10)芳基-(C2-C11)烷?；绫揭阴！⒈奖；虮蕉□?、2-(2，6-二氯苯胺基)-苯乙酰、2-(N-芐基-2，6-二氯苯胺基)苯乙酰;可被鹵素、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基或(C1-C7)烷氧基羰基取代的苯甲?；?，如4-氯苯甲酰、4-甲基苯甲酰、2-甲氧基羰基苯甲酰或4-甲氧基苯甲酰、吡咯基-2-羰基、吡啶基-3-羰基、芐基磺酰;(C2-C11)烷氧基羰基如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基;被鹵素取代的(C2-C11)烷氧基羰基如2，2，2，-三氯乙氧基羰基或1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙氧基羰基;或(C6-C14)芳基-(C2-C7)烷氧基羰基如芐氧基羰基或9-芴基甲基羰基。
R2最好是異丁基、芐基或環(huán)己基甲基。
R3是好是氫、異丙基或異丁基。
優(yōu)選的氨基酸A和B分別是苯丙氨酸、組氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、β-2-噻吩基丙氨酸、β-3-噻吩基丙氨酸、β-2-呋喃基丙氨酸、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸、2，4-二氨基丁酸、精氨酸、正纈氨酸、4-氯苯丙氨酸、蛋氨酸砜、蛋氨酸亞砜、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、環(huán)己基丙氨酸、間-甲基組氨酸、鄰-甲基酪氨酸、鄰-芐基酪氨酸、鄰-叔丁基酪氨酸、苯基甘氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸、正亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸、高苯丙氨酸、2-氨基-4-(2-噻吩基)丁酸、(Z)-脫氫苯丙氨酸或(E)-脫氫苯丙氨酸。
X最好不存在。
n最好代表2或3，特別是2。
R7最好代表有一個(gè)或兩個(gè)雜原子的5元雜環(huán)殘基，且可以是被(C1-C7)烷基取代的。具體地說(shuō)，R7最好是2-咪唑基、2-N-甲基咪唑基、2-N-乙基咪唑基、2-N-正丙基咪唑基和2-N-異丙基咪唑基。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備式Ⅰ化合物的方法，其包括使具有末端羧基基團(tuán)的片段或其反應(yīng)性衍生物與具有游離氨基基團(tuán)的相應(yīng)片段偶聯(lián)，必要時(shí)可除去為保護(hù)其他功能性基團(tuán)而暫時(shí)引入的一個(gè)或多個(gè)保護(hù)性基團(tuán)，并根據(jù)需要將如此制得的化合物轉(zhuǎn)化為其生理上可耐受的鹽。
具有末端羧基基團(tuán)的式Ⅰ化合物的片段可有下示通式
具有末端氨基基團(tuán)的式Ⅰ化合物的片段可有下示通式
文獻(xiàn)中已描述過(guò)適于制備酰胺鍵的方法，如可參見(jiàn)Houben-Wey1，MethodenderorganischenChemie〔MethodofOrganicChemistry〕，Vol.15/2;Bodanszkyetal.，PeptideSynthesis，Znded.(Wiley&Sons，NewYork1976)或Gross，Meienhofer，ThePeptides。Analysis，Synthesis，biology(AcademicPress，NewYork1979)。但最好使用下述方法使用N-羥基琥珀酰亞胺的活性酯方法，即以其作為酯組分與碳化二亞胺如二環(huán)己基碳化二亞胺偶聯(lián)，或與丙膦酐偶聯(lián)，以及使用新戊酰氯的混合酸酐方法。
可由適當(dāng)?shù)幕钚驭涟被衢_(kāi)始，制備用作起始化合物的式Ⅴc的活性胺
其中R2、R3和R4的定義如上文所述，它們的不對(duì)稱中心得以保留。為此目的，可按已知方法制備N(xiāo)端被保護(hù)的氨基酸醛并在3-羥基丁醛加合之后轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的雜芳基烷基結(jié)構(gòu)單元。除去保護(hù)性基團(tuán)后即得到式Ⅴc的氨基醇?？墒褂靡阎姆蛛x方法如分級(jí)結(jié)晶法或?qū)游龇ǖ玫脚cOH攜帶中心有關(guān)的非對(duì)映體混合物。借助HPLC檢測(cè)非對(duì)映體的純度，并按已知方法經(jīng)轉(zhuǎn)化為Mosher衍生物(H.S.Mosher et al.，J.Org.Chem.，34，2543(1969))以檢測(cè)對(duì)映體的純度。
可按B.Castro等人(Synthesis1983，676)所述方法制備N(xiāo)端保護(hù)的氨基酸醛。
可在對(duì)堿無(wú)反應(yīng)性的溶劑如醚、THF、甲苯、DMF、DMSO或二甲氧乙烷中將3-羥基丁醛類似物加成到N端保護(hù)的氨基酸酐上(最好是N-叔丁氧基羰基和芐氧基羰基保護(hù)基團(tuán))。
可用于雜芳基烷基組分去質(zhì)子化的堿包括堿金屬醇化物如鄰-叔丁醇鉀或甲醇鈉，堿金屬氫化物如氫化鈉或氫化鉀，有機(jī)金屬堿如正丁基鋰、S-丁基鋰、甲基鋰或苯基鋰，氨基鈉及有機(jī)含氮堿的堿金屬鹽如二異丙基氨基化鋰。
可按文獻(xiàn)中介紹的方法(如D.H.Richetal.，J.Org。Chem。43，3624(1978)制備被取代的4-氨基-3-羥基丁酸。
制備式Ⅰ化合物所必需的初步和繼后操作，如引入或除去保護(hù)基團(tuán)都是已知的(如參見(jiàn)T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”)可按已知方法如通過(guò)含堿性基團(tuán)的式Ⅰ化合物與化學(xué)計(jì)算量的適當(dāng)?shù)乃岱磻?yīng)，制得含有成鹽基團(tuán)之式Ⅰ化合物的鹽?？墒褂帽旧硪阎姆旨?jí)結(jié)晶法或?qū)游龇ǚ蛛x使用外消旋氨基酸A或B制得的對(duì)映體混合物，特別是非對(duì)映體混合物。
根據(jù)本發(fā)明的式Ⅰ化合物表現(xiàn)有酶抑制性質(zhì)，特別是它們表現(xiàn)有抑制天然血管緊張肽原酶的作用。血管緊張肽原酶是一種天冬酰胺蛋白酶類的蛋白水解酶，它是作為各種刺激因素(血容降低、鈉缺乏、β受體刺激)作用的結(jié)果，由腎臟近端腎小球細(xì)胞分泌到血循環(huán)中的。它可將由肝臟分泌出的血管緊張素原裂解為十肽血管緊張素1。在“血管緊張素轉(zhuǎn)化酶”(ACE)的作用下血管緊張素1轉(zhuǎn)化為血管緊張素2。血管緊張素2在血壓調(diào)節(jié)中起著重要作用，因?yàn)樗赏ㄟ^(guò)血管收縮作用直接升高血壓。另外它可刺激腎上腺分泌醛固酮并通過(guò)抑制鈉排泄以這種方式增加細(xì)胞外液體積，從而導(dǎo)致血壓增加。血管緊張肽原酶的酶促活性抑制物使血管緊張素1的形成減少，導(dǎo)致血管緊張素2的形成減少。降低這種活性肽激素的濃度是血管緊張肽原酶抑制物之降血壓作用的直接原因。
可通過(guò)體外試驗(yàn)檢查血管緊張肽原酶抑制物的活性。主要是檢測(cè)各系統(tǒng)中(人血漿、豬血管緊張肽原酶)血管緊張素1形成的減少。為此，可將含有血管緊張肽原酶和血管緊張素原的人血漿與被試化合物于37℃一起保溫。然后用放射免疫試驗(yàn)法測(cè)定保溫期間形成的血管緊張素1的濃度。本發(fā)明中所述的通式Ⅰ的化合物在所用體外試驗(yàn)中當(dāng)濃度為10-5至10-10mol/L時(shí)顯示出酶抑制作用。
血管緊張肽原酶抑制物可降低鹽耗竭之動(dòng)物的血壓。因?yàn)槿搜芫o張肽原酶與其他種動(dòng)物的血管緊張肽原酶不同，故使用靈長(zhǎng)類動(dòng)物(狨、獼猴)進(jìn)行血管緊張肽原酶抑制物的體內(nèi)試驗(yàn)。靈長(zhǎng)類動(dòng)物與人的血管緊張肽原酶在結(jié)構(gòu)上基本是同源的。經(jīng)靜脈注射呋喃苯胺酸引起血管緊張肽原酶的內(nèi)源泌出。然后通過(guò)連續(xù)輸注給予試驗(yàn)化合物并檢測(cè)它們對(duì)血壓和心搏率的影響。當(dāng)劑量范圍為0.1-5mg/kg時(shí)，靜脈注射本發(fā)明的化合物是有效的。本發(fā)明所述的通式Ⅰ的化合物可用作抗高血壓劑，并可用于治療心功能不全。
因此本發(fā)明還涉及式Ⅰ化合物作為醫(yī)藥的使用及含有該化合物的醫(yī)藥制劑。其可優(yōu)先用于靈長(zhǎng)類;特別是人。
醫(yī)藥制劑含有有效量的式Ⅰ的活性化合物，同時(shí)加有一種無(wú)機(jī)或有機(jī)的、醫(yī)藥上可利用的賦形劑?？赏ㄟ^(guò)鼻內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下或鼻口途徑給藥。活性化合物的劑量依據(jù)溫血?jiǎng)游锓N、體重、年齡及給藥方式而定。
可按已知的溶解、混合、造粒或片劑包衣等加工過(guò)程制備本發(fā)明的醫(yī)藥制劑。
為了口服給藥，可將活性化合物與常用的添加劑如賦形劑、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑混合，按常規(guī)方法制成適于給藥的劑型，如片劑、糖衣片劑、硬膠囊、含水、醇或油的懸浮劑或含水、醇或油的溶液。適用的惰性賦形劑包括阿拉伯樹(shù)膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖、硬脂酰富馬酸鎂或淀粉，特別是玉米淀粉?？芍瞥筛苫驖耦w粒狀的制劑。適用的油性賦形劑或溶劑包括植物或動(dòng)物油，如葵花籽油和魚(yú)肝油。
為了皮下或靜脈內(nèi)給藥，可將活性化合物或其生理上可耐受的鹽制成溶液，懸浮液或乳液，必要時(shí)還可加入穩(wěn)定劑、乳化劑或其他輔助劑。適用的溶劑有水、生理鹽水或醇，如乙醇、丙二醇或甘油，此外還有糖溶液如葡萄糖或甘露醇溶液，或者是上述不同溶劑的混合物。
文中使用的縮寫(xiě)詞包括Ac乙酰ACHPA(3S，4S)-4-氨基-3-羥基-5-環(huán)己基戊酸BOC叔丁氧基羰基TLC薄層層析DCC二環(huán)己基碳化二亞胺DNP2，4-二硝基苯基DMF二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜
EA乙酸乙酯Etoc乙氧基羰基FAB快原子轟擊H己烷HOBt1-羥基苯并三唑Iva異戊酰基M分子峰MeOH甲醇MS質(zhì)譜MTB甲基叔丁基酯R.T.室溫M.P.熔點(diǎn)Thiβ-2-噻吩基丙氨酸THF四氫呋喃Z芐氧基羰基用于表示氨基酸的其他縮寫(xiě)詞相當(dāng)于肽化學(xué)中慣用的三字母代號(hào)(如參見(jiàn)Europ.J.Biochem，138，9-37(1984)。除特別指出者外，氨基酸都是指L構(gòu)型的。
下列實(shí)施例旨在進(jìn)一步闡明而不是限定本發(fā)明。
實(shí)施例1Iva-Phe-His-1(s)環(huán)己基甲基-2(s)-羥基-5-(2-咪唑基)-戊酰胺將70mgIva-Phe-His-1(s)-環(huán)己基甲基-2-(S)_羥基-5-(2-N-芐氧基甲基-咪唑基)-戊酰胺溶解于15ml乙醇中。加入35mg在活性炭上的10%濃度鈀和1.5ml冰乙酸后，于室溫及常壓下氫化2小時(shí)。加入20ml飽和NaHCO3溶液后，用EA將混合物提取3次。用Na2SO4干燥EA相并濃縮，得到淡黃色的題目化合物。
Rf(EA/MeOH2/1)＝0.1;MS(FAB)＝634(M+1)。
a)Iva-Phe-His-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-芐氧基甲基-咪唑基)戊酰胺200mgIva-Phe-His(DNP)-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-芐氧基甲基-咪唑基)-戊酰胺在5ml含有0.5ml苯硫酚的乙腈中室溫下攪拌3小時(shí)。真空濃縮混合物并用二異丙醚消化3次。在硅膠上層析(洗脫液EA/甲醇＝10∶1)后濃縮含產(chǎn)物部分，得到一種無(wú)色粉末。
Rf(EA/MeOH10/1)＝0.2;MS(FAB)＝754(M+1)b)Iva-Phe-His(DNP)-1(S)環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-芐氧甲基咪唑基)-戊酰胺于-5℃下將44μl異戊酰氯加到溶于10mlCH2Cl2的192mgIva-Phe-His(DNP)-OH、30μl吡啶和50μlN-乙基哌啶中。將混合物于+5至+10℃攪拌30分鐘，冷卻至-10℃并逐滴加入溶于5mlCH2Cl2的1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-芐氧基甲基-咪唑基)戊胺。不再冷卻將混合物攪拌16小時(shí)，真空濃縮并加100EA重新稀釋。該溶液用K2CO3水溶液提取3次，用H2O提取1次，用Na2SO4干燥并真空濃縮。在硅膠上層析(洗脫劑EA/甲醇＝10∶1)后，得到淡黃色粉末狀題目化合物。
Rf(EA/甲醇10/1)＝0.4;MS(FAB)＝920(M+1)c)1(S)_環(huán)己基甲基-2(S)_羥基-5-(2-N-芐氧甲基-咪唑基)-戊胺將500mg3-Boc-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-〔3-(2-N-芐氧甲基-咪唑基)丙基〕-噁唑烷溶解在15ml二噁烷中。加入溶于二噁烷的10ml12%強(qiáng)度Hcl并稍加冷卻(+10℃)。于室溫反應(yīng)3小時(shí)后，真空濃縮該混合物，在水中重新溶解殘留物，使用飽和Na2CO3水溶液將其調(diào)到PH9-10并用EA提取3次。用Na2SO4干燥并真空濃縮后得到題目化合物，其可不經(jīng)進(jìn)一步純化而直接用于下面偶聯(lián)步驟中。
d)3-Boc-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-〔3-(2-N_芐氧甲基-咪唑基)-丙基〕-噁唑烷將550mg2-甲基-N-芐氧甲基-咪唑溶解于5ml無(wú)水THF中。于-60℃氬氣環(huán)境下加入1.9ml溶于己烷中的1.5M正丁基鋰。15分鐘后，加入溶于5mlTHF的500mg3-Boc-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-(2-溴乙基)噁唑烷。加溫至室溫后，用EA將混合物提取3次，用Na2SO4干燥提取物并濃縮之。在硅膠上層析(洗脫劑EA)后得到題目化合物。
Rf(EA)＝0.3;MS(FAB)＝526(M+1)e)2-甲基-N-芐氧甲基-咪唑?qū)?g2-甲基咪唑分步加到在200ml無(wú)水丙酮中的16.8g氫氧化鉀中。5分鐘后，于室溫下逐滴加入8.5ml氯代芐氧基甲烷。15分鐘后濃縮混合物并用2NHCl調(diào)至PH1。然后用EA提取3次并棄去有機(jī)相。用KOH將水相調(diào)至PH約9-10并用EA提取3次。用Na2SO4干燥合并的EA相并濃縮。在硅膠上層析(洗脫劑EA/MeOH 10/1)后得到題目化合物。
Rf(EA/MeOH10/1)＝0.4F)3-Boc-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-(2-溴乙基)噁唑烷于20℃氬氣環(huán)境下將1.6ml偶氮羧酸二乙酯逐滴加到溶于15mlCH2Cl2中的690mg3-BOC-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-(2-羥乙基)噁唑烷、2.6g三苯膦和1.6g氫溴酸吡啶鎓中。室溫反應(yīng)16小時(shí)后加入水并用100mlCH2Cl2稀釋混合物。用飽和NaHCO3溶液將有機(jī)相洗兩次，并用飽和NaCl溶液洗1次。使用Na2SO4干燥有機(jī)相并濃縮，在少量EA中重新溶解殘留物并過(guò)濾除去PPh3。在硅膠上層析純化后得到題目化合物(洗脫劑H/EA＝15∶1)。
Rf(H/EA＝15/1);MS404(M)g)3-Boc-4(S)-環(huán)己基甲基-2，2-二甲基-5-(2-羥乙基)噁唑烷于氬氣環(huán)境下將10gBoc-ACHPA-OEt(根據(jù)J.Med.Chem.28(1985)，1779中所述方法制備)、500mg對(duì)甲苯磺酸和7.2ml二甲氧基丙烷在160ml甲苯中于80℃下加熱2小時(shí)。濃縮該混合物，于0℃將殘留物逐滴加到2gLiAH4在200mlTHF中的懸液內(nèi)。0℃反應(yīng)25小時(shí)后加入100ml5%濃度的NaHSO4溶液并用EA將混合物提取3次。用飽和NaHCO3溶液將合并的有機(jī)相洗1次。用Na2SO4干燥后濃縮該溶液并層析純化之(洗脫劑H/EA＝2/1)。
Rf(H/EA4∶1)＝0.1;MS＝342(M+1)實(shí)施例2-10所述各化合物均按與實(shí)施例1相似的方法制備。
實(shí)施例2Iva-Phe-His-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-甲基-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH3/1)＝0.1;MS(FAB)＝648(M+1)
實(shí)施例3Iva-Phe-His-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-乙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(CH2Cl2/NH4OH/MeOH 10/0.1/1＝3.35;MS(FAB)＝662(M+1)實(shí)施例4Iva-Phe-His-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-正丙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH3/1)＝0.1;MS(FAB)＝676(M+1)實(shí)施例5Iva-Phe-His-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-異丙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH3/1)＝0.1;MS(FAB)＝676(M+1)下面以2-甲基-N-正丙基咪唑?yàn)槔f(shuō)明2-甲基-N-烷基-咪唑的制備方法2-甲基-N-正丙基-咪唑10g2-甲基咪唑在40ml溴化正丙烷中加熱煮沸2小時(shí)。然后將該混合物倒入150ml5%濃度NaHSO4溶液中，用EA提取3次，用Na2SO4干燥并
縮。用乙醚重新溶解殘留物并過(guò)濾除去不溶性的起始材料，得到一種無(wú)色油狀的題目化合物。
Rf(EA/MeOH10/1)＝0.2實(shí)施例6Iva-Phe-Nva-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH5/1)＝0.1;MS(FAB)＝596(M+1)實(shí)施例7Iva-Phe-Nva-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-甲基-咪唑基)-戊酰胺Rf(CH2Cl2/MeOH/NH4OH 20/1/0.1)＝0.15;MS(FAB)＝610(M+1)實(shí)施例8Iva-Phe-Nva-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-乙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(CH2Cl2/MeOH/NH4OH 20/1/0.1)＝0.15;MS(FAB)＝624(M+1)實(shí)施例9Iva-Phe-Nva-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-正丙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH/10/1)＝0.3;MS(FAB)＝638(M+1)實(shí)施例10Iva-Phe-Nva-1(S)-環(huán)己基甲基-2(S)-羥基-5-(2-N-異丙基-咪唑基)-戊酰胺Rf(EA/MeOH/10/1)＝0.3;MS(FAB)＝638(M+1)
權(quán)利要求
1.制備式Ⅰ化合物
其中R1代表式II的殘基式Ⅱ中W代表-CO-、-O-CO-、-SO2-或-NH-CO-,Ra代表氫，(C1-C10)烷基，其可以是單不飽和或二不飽和的，且可以被選自羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷酰氧基、羧基、(C1-C7)烷氧基羰基、鹵素、氨基、(C1-C7)烷基氨基、二-(C1-C7)烷基氨基、(C1-C5)烷氧羰基氨基、(C7-C15)芳烷氧基羰基氨基和9-芴基甲氧羰基氨基的至多3個(gè)相同或不同的殘基取代；(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基、可以被選自F、Cl、Br、I、羧基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基羰基、氨基、苯胺基的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的殘基取代，其中苯胺基又可以是被至多2個(gè)鹵素和三氟甲基取代的；(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷基，其中芳基部分可被選自F、Cl、Br、I、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧羧基、氨基、(C1-C7)烷基氨基、二-(C1-C7)烷基氨基、羧基、羧甲氧基、氨基-(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷基氨基-(C1-C7)烷基、二-(C1-C7)烷基氨基-(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧羰基甲氧基、氨基甲酰基、氨磺酰基、(C-C)烷氧磺?；?、磺基和胍基甲基的一個(gè)或兩個(gè)相同或不同的殘基取代的，或者代表至少含有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子作為環(huán)原子的5元或6元單環(huán)或9元或10元雙環(huán)雜環(huán)殘基，且可以是被選自F、Cl、Br、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C2-C8)烷氧羰基、氨基或三氟甲基的一個(gè)或多個(gè)殘基二取代或三取代的，R4代表式III的殘基A代表在選自苯丙氨酸、組氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、β-2-噻吩基丙氨酸、β-3-噻吩基丙氨酸、β-2-呋喃基丙氨酸、β-3-呋喃基丙氨酸、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸、纈氨酸、丙氨酸、2，4-二氨基丁酸、精氨酸、4-氯苯丙氨酸、蛋酸硯、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、環(huán)己基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、間-甲基組氨酸、鄰-甲基酪氨酸、鄰-芐基酪氨酸、鄰-叔丁基酪氨酸、苯基甘氨酸、1-萘基丙氨酸、苯基甘氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸、正纈氨酸、β-2-苯并(b)噻吩基丙氨酸、β-3-苯并(b)噻吩基丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、正亮氨酸、半胱氨酸、S-甲基半胱氨酸、1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸、高苯丙氨酸、多巴、鄰-二甲基多巴、2-氨基-4-(2-噻吩基)丁酸、2-氨基-4-(3-噻吩基)丁酸、3-(2-噻吩基)絲氨酸、(Z)-脫氫苯丙氨酸和(E)-脫氫苯丙氨酸之氨基酸的N端與R1相連且在C端與B相連的殘基，B代表定義同A的氨基酸殘基，R2代表氫、(C1-C10)烷基、(C4-C7)環(huán)烷基、(C4-C7)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C14)芳基或(C6-C14)芳基-(C1-C4)烷基，R3代表氫、(C1-C10)烷基、(C6-C14)芳基或(C6-C14)芳基-(C1-C4)烷基，X可以沒(méi)有或代表O或S，n可以是2、3或4，且R7代表羥基或氨基，或代表至少有1個(gè)碳原子、1-4個(gè)氮原子和/或1個(gè)硫或氧原子的5元雜環(huán)殘基，其可以是被選自F、C1、Br、羥基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷基、(C2-C8)烷氧基羰基、氨基或三氟甲基的一個(gè)或多個(gè)殘基取代，其中不包括噁唑啉，及其生理上可耐受的鹽的方法，該方法包括將具有末端羧基基團(tuán)的片段或其反應(yīng)性衍生物與具有游離氨基基團(tuán)的相應(yīng)片段偶聯(lián)，除去為保護(hù)其他功能性基團(tuán)而暫時(shí)引入的一個(gè)或多個(gè)保護(hù)基團(tuán)并根據(jù)需要將如此得到的化合物轉(zhuǎn)化成其生理上可耐受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1代表(C2-C11)烷?；缯秕?、甲酰、乙酰、新戊酰、異戊酰或異丁酰;被取代的(C2-C11)烷?；?-羥丙酰、2-羥基-3-甲基丁?；蜻m當(dāng)被保護(hù)的氨基-(C2-C11)烷?；?-氨基丁酰、5-氨基戊酰、6-氨基己酰、4-N-叔丁氧基羰基氨基丁酰、5-N-叔丁氧基羰基氨基戊?；?-N-叔丁氧基羰基氨基己?；蚨?(C1-C7)烷基氨基-(C2-C11)烷?；?，如二甲基氨基乙酰基;(C4-C9)環(huán)烷基羰基如環(huán)丙基羰基、環(huán)丁基羰基、環(huán)戊基羰基或環(huán)己基羰基;(C6-C10)芳基-(C2-C11)烷?；绫揭阴?、苯丙?；虮蕉□?、2-(2，6-二氯苯胺基)-苯乙酰、2-(N-芐基-2，6-二氯苯胺基)-苯乙酰;可被鹵素、(C1-C7)烷基、(C1-C7)烷氧基或(C1-C7)烷氧基羰基取代的苯甲酰基，如4-氯苯甲酰、4-甲基苯甲酰、2-甲氧基羰基苯甲?；?-甲氧基苯甲酰、吡啶基-2-羰基、吡啶基-3-羰基、芐基磺酰;(C2-C11)烷氧基羰基如甲氧基羰基、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基;被鹵素取代的(C2-C11)烷氧基羰基如2，2，2-三氯乙氧基羰基或1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙氧基羰基;或(C6-C14)芳基-(C2-C7)烷氧基羰基，如芐氧基羰基或9-芴基甲基羰基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和/或2的方法，其中R2代表異丁基、芐基或環(huán)己基甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法，其中R代表氫、異丙基或異丁基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法，其中A和B彼此獨(dú)自地代表苯丙氨酸、組氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、β-2-噻吩基丙氨酸、β-3-噻吩基丙氨酸、β-2-呋喃基丙氨酸、賴氨酸、鳥(niǎo)氨酸、2，4-二氨基丁酸、精氨酸、正纈氨酸、4-氯苯丙氨酸、蛋氨酸砜、蛋氨酸亞砜、2-吡啶基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、環(huán)己基丙氨酸、環(huán)己基甘氨酸、間-甲基組氨酸、鄰-甲基酪氨酸、鄰-芐基酪氨酸、鄰-叔丁基酪氨酸、苯基甘氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸、正亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸、高苯丙氨酸、2-氨基-4-(2-噻吩基)丁酸、(Z)-脫氫苯丙氨酸或(E)-脫氫苯丙氨酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法，其中R7代表可被(C1-C7)烷基取代的至少有一個(gè)或兩個(gè)雜原子的5元雜環(huán)殘基。
7.按照權(quán)利要求1至6的方法之一制備的式Ⅰ之化合物作為藥物的應(yīng)用。
8.按照權(quán)利要求1至6的方法之一制備的式Ⅰ之化合物在治療高血壓中的應(yīng)用。
9.生產(chǎn)含有按權(quán)利要求1至6之一的方法制備之式Ⅰ化合物的醫(yī)藥制劑的方法，其中將該化合物與一種生理上可按受的賦形劑并根據(jù)需要加入其他輔助劑和添加劑制成適于給藥的劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的化合物其中A和B各自獨(dú)立地代表一種氨基酸，R
文檔編號(hào)A61P9/00GK1047085SQ90102269
公開(kāi)日1990年11月21日 申請(qǐng)日期1990年4月20日 優(yōu)先權(quán)日1989年4月22日
發(fā)明者阿達(dá)伯特·瓦格納, 漢思約格·吾爾巴赫, 笛特·魯波特, 沃伏剛·林梓, 泊爾瓦德·舒肯斯 申請(qǐng)人:赫徹斯特股份公司