專利名稱：抗病毒化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些取代的嘌呤阿拉伯糖苷類及其生理上可接受的衍生物，特別是酯類，以及它們?cè)谥委熌承┟撗鹾颂呛怂?DNA)病毒疾病中的用途。
可引起水痘和帶狀皰疹的水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)是皰疹族內(nèi)的一種DNA病毒。水痘是在無免疫力宿主中由VZV產(chǎn)生的原發(fā)病，通常是幼童的一種輕度疾病，表現(xiàn)為發(fā)燒和癢疹。帶狀皰疹是在曾感染過水痘-帶狀皰疹病毒的人中發(fā)生的疾病復(fù)發(fā)形式，這種傳染病的臨床表現(xiàn)的特征是神經(jīng)痛和單側(cè)的并按皮區(qū)分布的水泡性皮疹。炎癥蔓延，若侵襲腦膜，可導(dǎo)致麻痹或痙攣和昏迷。
在免疫缺陷患者中病毒可以播散并引起嚴(yán)重的、經(jīng)常是致命的疾病。免疫缺陷的原因可以是由于對(duì)器官移植患者或治療惡性瘤所用的藥物，也可能是疾病，例如愛滋病(AIDS)它破壞免疫系統(tǒng)使受害者易受感染，沒有什么病比這種更危險(xiǎn)的了。
巨細(xì)胞病毒(CMV)是皰疹族的另一種病毒。幼年或青年可以受到感染，而胎兒子宮內(nèi)感染大概是感染的最普通形式，但高達(dá)90%的先天性感染在出生時(shí)無癥狀。一般認(rèn)為，懷孕母親的原發(fā)感染成為未出生胎兒的最大危險(xiǎn)，而在復(fù)能期，胎兒的感染通常是臨床無癥狀的。臨床結(jié)果可以從死亡和顯著的疾病(小頭，肝脾大，黃疸，精神發(fā)育遲緩)到發(fā)育不良，胸和耳的易感染，直到?jīng)]有任何明顯的病狀。青年人的感染可能很順利而未被注意，或者因密切接觸而表現(xiàn)為腺體熱樣疾病。
如對(duì)VZV感染所描述的免疫受損的患者，由于休眠病毒的復(fù)能，也能發(fā)生同等嚴(yán)重的感染。這類感染會(huì)引起視網(wǎng)膜炎、肺炎和胃腸失調(diào)，導(dǎo)致病態(tài)加劇和死亡。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)，下面所述以嘌呤環(huán)2-位和6-位有取代基為特征的一些嘌呤-阿拉伯糖核苷，對(duì)于人病毒感染、特別是由水痘帶狀皰疹病毒(VZV)或巨細(xì)胞病毒(CMV)所引起的感染具有強(qiáng)力的活性。
下述用于治療VZV和CMV感染的某些取代的嘌呤-阿拉伯糖核苷，特別是9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基-9H-嘌呤，9-β-D-阿糖呋喃-6-吡咯烷基-9H-嘌呤，9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氨基-9H-嘌呤和9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲氨基-9H-嘌呤，已在下述文獻(xiàn)中有過描述(J.Org.Chem.Vol273274-9(1962);CancerTreatmentRep.60(10)，1567-84，(1976);Tetrahedron40(4)，709-13，(1984);CanadaJ.Biochem.43(1)，1-15，(1965);J.Med.Chem.12，498-504，(1969);J.Biol.Chem.251(13)，4055-61，(1976);Ann.N.Y.Acad.Sci.284，81-90，(1977);EP002192;US3666856;US4371613;US3758684.)所以，本發(fā)明的第一方面是提供一種式(Ⅰ)化合物和其生理上可接受的衍生物，用于治療或預(yù)防由VZV或CMV引起的人病毒感染，
式中R1代表鹵素(如氯或碘)，C1-5烷氧基(如甲氧基或乙氧基);鹵素取代的C1-5烷氧基(如三氟乙氧基);氨基可單或雙取代有C1-5烷基(如甲基或乙基)一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-5烷基(如2-氟乙基或2，2，2-三氟乙基)、或C3-6環(huán)烷基(如環(huán)丙基)、或環(huán)狀氨基，該環(huán)含4-7個(gè)碳原子和可任意有雙鍵(如吡咯烷基)和/或另一氮原子，R2代表氫，鹵素或氨基。
本發(fā)明還包括式(Ⅰ)化合物，其中R2是氫，R1是甲氧基、哌啶子基或吡咯烷基，以及R2為氨基R1是氯，及其可作藥用的衍生物，用于醫(yī)療。
在上述式(Ⅰ┲?，烷基（烷衍O⑼榘被蚨榘被喟ㄔ諛冢┳詈檬羌諄?、乙基幌l 較好的式(Ⅰ)化合物包括這些，其中(a)R2是氫;及(b)R1是C1-5烷氧基，特別是甲氧基;或(c)R1是C1-5烷氨基，特別是二甲氨基;或(d)R1是鹵素，特別是碘。
下述化合物由于它們對(duì)VZV或CMV的強(qiáng)力的抗病毒活性，所以是本發(fā)明較好的化合物1)9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氨基-9H-嘌呤，2)9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲基氨基-9H-嘌呤，3)9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基-9H-嘌呤，4)9-β-D-阿糖呋喃-6-乙氧基-9H-嘌呤，5)9-β-D-阿糖呋喃-6-碘-9H-嘌呤，6)9-β-D-阿糖呋喃-2-氨基-6-碘嘌呤，
7)9-β-D-阿糖呋喃-6-吡咯烷基-9H-嘌呤，8)9-β-D-阿糖呋喃-2-氯-6-甲氨基-9H-嘌呤，9)9-β-D-阿糖呋喃-6-環(huán)丙氨基-9H-嘌呤，10)9-β-D-阿糖呋喃-6-乙基甲氨基-9H-嘌呤，11)9-β-D-阿糖呋喃-2-氨基-6-甲氧基-9H-嘌呤，12)9-β-D-阿糖呋喃-2-正丙氧基-9H-嘌呤。
在上述化合物中，化合物2)，3)和5)是特別好的。本發(fā)明還包括式(Ⅰ)的新化合物及其生理上可接受的衍生物，特別是上面所列的化合物4)，5)，6)，8)，9)，10)，11)和12)。
本發(fā)明的第二方面是提供通式Ⅰ(a)的新化合物，及其生理上可接受的衍生物，但除去式Ⅰ(a)化合物(其中R1是氯或氟，R2是氯，氟，氫或氨基)中的2′，3′，5′-三乙酸酯和三芐基衍生物。
式中R1代表鹵素(如氯或碘)，C1-5烷氧基(如甲氧基或乙氧基);鹵素取代的C1-5烷氧基(如三氟乙氧基)，氨基單或雙取代有C1-5烷基(如甲基或乙基)、一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-5烷基(如2-氟乙基或2，2，2-三氟乙基)、或C3-6環(huán)烷基(如環(huán)丙烷基)、或環(huán)狀氨基部分，該環(huán)含4-7個(gè)碳原子可任意有雙鍵(如吡咯烷基)和/或另一氮原子;R2代表氫，鹵素或氨基，假如當(dāng)R2為氫時(shí)則R1不代表氯，甲氧基，甲氨基，乙氨基，二甲氨基，哌啶子基或吡咯烷基，并且當(dāng)R2為氨基時(shí)，R1不代表氯或甲氨基。
本發(fā)明還包括一種用于醫(yī)療、特別是治療由VZV或CMV引起的人病毒感染的式Ⅰ(a)化合物。
此外，本發(fā)明的另一方面提供了可作藥用的式(Ⅰ)化合物的衍生物，即任何可作藥用的醚鹽，酯或這種酯的鹽，或任何其它化合物，當(dāng)用于人體后能直接或間接地提供一種式(Ⅰ)化合物或抗病毒的活性代謝物或其殘余物。
上述式(Ⅰ)化合物的可作藥用的酯類是特別優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈冊(cè)诳诜竽苁故苤握叩难獫{中有高水準(zhǔn)的母體化合物。本發(fā)明特別提供了優(yōu)選的一類新化合物，即將阿拉伯糖部分的2′-，3′-和/或5′-羥基酯化所形成的可作藥用的上述化合物3)的酯類。
特別好的式(Ⅰ)化合物的衍生物包括在阿拉伯糖基的2′-，3′-和5′-位上取代的該糖基的單-，雙-或三酯類。
這種較好的酯包括羧酸酯類，其中酯基的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(如正丙基，叔丁基，正丁基)，烷氧基烷基(如甲氧基甲基)，芳烷基(如芐基)，芳氧基烷基(如苯氧基甲基)，芳基可任意取代有鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基、硝基或氨基;磺酸酯類例如烷基磺酰基，或烷基芳磺酰基(如甲烷磺?；蚣妆交酋；?;氨基酸酯類(如L-異戊氨酰);和單-、雙-或三磷酸酯類。這些酯的可作藥用的鹽包括鈉、鉀、NR4(其中R＝H或C1-6烷基)以及酸加成鹽。在上述酯類中，烷基(烷氧基包括在內(nèi))含有1-12個(gè)碳原子，芳基較好的是苯基。
下面的酯和醚是本發(fā)明較好的新化合物13.9-(5-O-苯甲?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤14.6-甲氧基-9-〔5-O-(4-甲基苯磺酰)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤15.6-甲氧基-9-〔5-O-(甲磺酰-β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤16.9-(5-O-(4-甲基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤17.9-(5-O-(4-氯苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤18.9-(5-O-(4-甲氧基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤19.6-甲氧基-9-(5-O-苯基乙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤20.6-甲氧基-9-(5-O-苯氧基乙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤21.6-甲氧基-9-(5-O-甲氧基乙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤22.9-〔5-O-(4-硝基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤23.6-甲氧基-9-(5-O-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤
24.9-〔5-O-(4-氨基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤25.6-甲氧基-9-(5-O-丙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤26.9-(5-O-丁?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤27.9-〔5-O-(2，2-二甲基丙酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤28.9-(5-O-乙?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤29.6-甲氧基-9-〔5-O-(2-甲基丙酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤30.6-甲氧基-9-〔2-O-(2，2-二甲基丙酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤31.6-甲氧基-9-〔(2，3，5-三-O-乙?；?-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤32.6-甲氧基-9-(2-O-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤33.9-(2-O-丁酰基-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤34.6-甲氧基-9-〔2-O-(2-甲基丙?；?-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤35.9-(3-O-苯甲?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤
36.9-(2，3-脫水-β-D-來蘇糖呋喃)-6-甲氧基嘌呤37.6-甲氧基-9-〔(2-O-(4-甲氧基苯甲?；?〕-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤38.6-甲氧基-9-〔(2-O-(4-甲基苯甲酰基))-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤39.9-〔2-O-(4-氯苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤40.6-甲氧基-9-〔3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基-1，3-二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤41.6-甲氧基-9-〔2-O-(2-氨基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤42.6-甲氧基-9-〔2-(4-甲基苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤43.6-甲氧基-9-〔2-(4-甲氧基苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤44.9-〔2-(4-氯苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤45.9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲氨基-9H-嘌呤的5′-單磷酸酯
46.6-甲氧基嘌呤阿拉伯糖苷5′-單磷酸酯47.6-甲氧基嘌呤阿拉伯糖苷5′-三磷酸酯。
特別好的是上面的化合物16、24和32。
式(Ⅰ)的嘌呤核苷及其衍生物在下文中稱作本發(fā)明的化合物或活性成份。
本發(fā)明的另一個(gè)較好方面是，提供了用本發(fā)明化合物生產(chǎn)的藥物，用以治療或預(yù)防由VZV或CMV引起的人病毒感染。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療或預(yù)防人類VZV和CMV感染的方法，該方法包括受治者用本發(fā)明化合物的有效量。
上文所述方法包括抑制在哺乳動(dòng)物的宿主細(xì)胞中VZV或CMV病毒的復(fù)制，方法包括給已感染的細(xì)胞用有效的病毒復(fù)制抑制量的式(Ⅰ)化合物或其可作藥用的衍生物。
可按本發(fā)明治療的VZV和CMV感染引起的臨床狀況的例子包括上面涉及的那些。
式(Ⅰ)化合物及其可作藥用的衍生物(以下統(tǒng)稱為活性組分)可采用任何與需要治療的情況相適宜的途徑給藥，適宜的途徑包括經(jīng)口、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道、腸道外(包括皮下，肌肉，靜脈，皮內(nèi)，鞘內(nèi)和硬膜外)給藥。可以理解，較好的途徑可隨著諸如受治療者的狀況而改變。
對(duì)于以上指出的各種效用和適應(yīng)證，所需活性成份(定義如上)的量是依多種因素而定的，這些因素包括所需治療狀況的嚴(yán)重性和受治療者的特性，最終是主治醫(yī)師的判斷。盡管如此，對(duì)于這些效用和適應(yīng)證來說，合適的有效劑量的范圍一般為每千克受治療者體重每天0.1-250毫克，較好為千克體重每天0.1-100毫克，最好是每千克體重每天1-20毫克;最佳劑量約為每千克體重每天15毫克(除非另有指明所有活性成份的重量均以式(Ⅰ)母體化合物計(jì)算，對(duì)于它們的鹽和酯類的數(shù)值則按比例增加)。所需藥劑最好在全天以合適的間隔分為兩次、三次、四次或多次分劑量給藥。這些分劑量可以單位劑量形式給藥，例如每單位劑量形式含有5-1000毫克、較好的是20-500毫克、最好是100-400毫克的活性成份。
如活性成份可單獨(dú)給藥時(shí)，最好以藥物配方給予。本發(fā)明的配方包括至少一種上述定義的活性成份配以一種或多種合適的載體，并可選加其它治療成份，載體(類)必須是“合適的”意思是與配方的其它成份可配伍的，而且對(duì)受治療者無害。
這類配方包括適于口、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道、腸道外(包括皮下，肌肉，靜脈，皮內(nèi)，鞘內(nèi)和硬膜外)給藥的配方，這些配方可方便地以單位劑量形式提供，而且可用任何制藥學(xué)已知的方法制備。這些方法包括將活性成份與由一種或多種輔助成份組成的載體相結(jié)合的步驟。通常，將活性成份與液體載體或分得很細(xì)的固體載體或與這兩者均勻和緊密地結(jié)合制成配方，然后，若需要，將產(chǎn)物成型。
本發(fā)明適宜口服的配方可以成分裝的單位提供，例如各個(gè)含預(yù)定量活性成份的膠囊、扁膠囊或片劑;粉末或顆粒;溶液或水或非水液體的懸浮液;或水包油乳液或油包水乳液?；钚猿煞葸€可作為丸劑、藥糖劑或糊劑提供。
片劑可通過壓制或模制法，任意選加一種或多種輔助成份制備。壓制片是在合適的機(jī)器中壓制活性成分而成，活性成分呈自由流動(dòng)形式如粉末或顆粒，可任意混合有一種粘合劑(如聚烯吡酮(Povidone)，白明膠，羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(如淀粉乙醇酸鈉，交聯(lián)的聚烯吡酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、表面活性劑或分散劑。模制片是在合適的機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑濕潤的粉末狀化合物的混合物模壓成的。片劑可任意包衣或打上記號(hào)，而且可以，例如與不同比例的如羥丙基甲基纖維素配方，使其中的活性成份能緩慢或有控制地釋放，以達(dá)到所需要的釋放圖。
對(duì)于眼或其它外部組織，例如嘴和皮膚的感染，配方最好成局部用軟膏或乳霜膏應(yīng)用，含有活性成份量為例如0.075-20%W/W，較好的是0.2-15%W/W，最好是0.5-10%W/W。當(dāng)配制軟膏時(shí)，活性成份可用石蠟基底也可用與水相混的軟膏基底。另外，活性成份與水包油霜基底配制成乳膏。
需要的話，乳膏的水相可包括，諸如，至少30%W/W的一種多元醇，即帶有兩個(gè)或多個(gè)羥基的醇，例如丙二醇、丁烷-1，3-二醇、甘露醇、山梨醇、丙三醇和聚乙二醇及其混合物。局部用配方最好包含一種增強(qiáng)活性物質(zhì)吸收性或穿透皮膚或其它感染區(qū)的化合物。這類皮膚穿透性增強(qiáng)劑包括二甲亞砜及有關(guān)的類似物。
本發(fā)明的乳劑的油相可由已知成份用已知方式組成。在油相僅包括一種乳化劑時(shí)，它最好是包括由至少一種乳化劑與一種脂肪或油或者與一種脂肪和油兩者構(gòu)成的混合物。最好是親水性乳化劑與起穩(wěn)定劑作用的親脂性乳化劑一起用。最好也包含油和脂肪兩者。乳化劑(類)加或不加穩(wěn)定劑(類)可構(gòu)成了所謂的乳化蠟，而該蠟與油和/或脂肪一起構(gòu)成所謂的乳化油膏基底，后者形成乳膏配方的油狀分散相。
適用于本發(fā)明配方的乳化劑和乳化穩(wěn)定劑包括Tween60，Span80，鯨蠟十八烷醇，十四烷醇，丙三醇單硬脂酸酯及月桂基磺酸鈉。
應(yīng)該根據(jù)希望達(dá)到的美容性質(zhì)去選擇合適的油或脂肪用于配方，因?yàn)樵诙喾N常用于藥用乳劑配方的油中，活性化合物的溶解度很低。所以，乳膏最好應(yīng)是一種非油脂、非染色和可洗滌的產(chǎn)品，稠度適宜避免從管子或其它容器中漏出。可用直鏈或支鏈的一元或二元烷基酯，諸如己二酸二異酯，硬脂酸異十六酯，椰子脂肪酸的丙二醇二酯，十四烷酸異丙酯，油酸癸酯，十六烷酸異丙酯，硬脂酸丁酯，十六烷酸2-乙基己酯或一種稱作克羅達(dá)摩(Crodamol)CAP的支鏈酯的混合物，后面三種是較好的酯。它們單獨(dú)使用，或根據(jù)所需性質(zhì)合并使用。另外，也能用高熔點(diǎn)的脂體，例如白軟石蠟和/或液體石蠟或其它礦物油。
適于眼睛局部應(yīng)用的配方還包括滴眼劑，其中活性成份是溶解或懸浮在合適的載體中，特別是活性成份在含水溶劑中。在這類配方中，活性成份存在的較好濃度為0.5-20%、最好的是0.5-10%、最佳為大約1.5%W/W。
適于口腔局部應(yīng)用的配方包括活性成份包含在調(diào)味基底，通常是蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠中的糖錠劑，活性成份包含在惰基底，例如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯樹膠中的錠劑;以及成份包含在適宜的液體載體中的漱口水。
直腸應(yīng)用的配方有包括例如以可可脂或水楊酸酯為合適基底的栓劑。
適于鼻用的配方(其中載體是固體)包括一種粒徑為例如20-50微米的粗粉，是用鼻腔吸入的方式給藥，即通過鼻道從接近鼻腔的盛有粉末的容器中迅速吸入。作為諸如噴鼻式滴鼻劑用的合適的配方(其中載體是液體)包括活性成份的水溶液或油溶液。
適于陰道給藥的配方有陰道栓、塞子乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或霧劑，配方中除了活性成份外還有這類技術(shù)中已知的合適的載體。
適于腸道外給藥的配方包括水性和非水性的無菌注射液類(可含有抗氧化劑、緩沖劑、制菌劑)和溶質(zhì)，這種溶質(zhì)能使配方與接受者的血液等滲;水性和非水性的注射懸浮液可包含懸浮劑和增稠劑。配方可以單劑或多劑放在容器如安瓿或小瓶中，也可以凍干(冷凍干燥)貯存，僅要求在使用之前即刻加入無菌的液體載體，例如注射用水?？蓮南惹懊枋鲞^的無菌粉末、顆粒和片劑制備臨時(shí)性注射液和懸浮液。
較好的單劑配方是那些在上面列舉的含有活性成份的日劑量或單位日分劑量其適宜的配方。
可以理解，除了上述特別提到的成份外，本發(fā)明的配方可包括在該配方類型中有關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域中常用的其它試劑，例如說，適于口服的配方可包括調(diào)味劑。
本發(fā)明還提供一種制備式Ⅰ(a)化合物，或其可作藥用的衍生物(特別是酯)的方法，該方法包括或?yàn)锳.將式(Ⅱ)的化合物與式Ⅲ化合物反應(yīng)
式Ⅱ中R1和R2定義如上
式Ⅲ中X代表嘧啶或嘌呤堿基(除式(Ⅱ)化合物外);或?yàn)锽.將式(Ⅳ)的化合物
(式中Z是離去基團(tuán)，R2定義如上)與一種能在6-位引入必需基團(tuán)的化合物進(jìn)行反應(yīng);并可任意地在反應(yīng)后或同時(shí)，當(dāng)?shù)玫降幕衔锸鞘?Ⅰ)化合物時(shí)，將它轉(zhuǎn)變成可作藥用的衍生物，或當(dāng)?shù)玫降幕衔锸强勺魉幱玫难苌飼r(shí)，將它轉(zhuǎn)變成一種不同的可作藥用的衍生物或式(Ⅰ)化合物。
就方法A)而言，X最好是一種尿嘧啶堿基。要使反應(yīng)進(jìn)行可將式Ⅱ和式Ⅲ化合物用一種酶，例如磷酸化酶，如尿苷磷酸化酶嘌呤核苷磷酸化酶或其混合物處理，最好在磷酸鹽存在下使pH為5.0-9.0，溫度為15°-90°，更好為40°-60℃。
就方法B)而言，可按照文獻(xiàn)(Reist、E、J等人，J、Org、Chem、27(1962)3274-3279)的程序進(jìn)行反應(yīng)。一種便利的離去基團(tuán)是鹵原子，例如氯。最好在有機(jī)溶劑如無水甲醇中用一種能在6-位提供必需基團(tuán)的試劑，例如一種合適的胺(在R1代表烷基或二烷基氨基時(shí))進(jìn)行反應(yīng)。
可按傳統(tǒng)方法制備式(Ⅰ)化合物的生理上可接受的酯和鹽類，例如，可將母體化合物與合適的酰鹵或酐進(jìn)行酯化反應(yīng)制備酯類。另外，可用一種合適的羧酸來置換適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)，如鹵化物，或用一種合適的羧酸或其鹽打開母體化合物的適當(dāng)?shù)拿撍塑諄碇苽漉ヮ悺?br> 下面的實(shí)施例是說明本發(fā)明，但不應(yīng)認(rèn)為這些實(shí)施例以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例19-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基-9H嘌呤將6-硫醇-9-(β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤(ReistE、J等人，J、Org、Chem、27(1962)3274-3279)(0.35毫摩爾，100毫克)和5毫升無水甲醇混合并冷卻到-10℃，同時(shí)防潮。緩慢地向懸浮液中通入氯氣，歷時(shí)2分鐘。所得溶液于-10℃攪拌5分鐘，然后在冷溶液中通入干燥氮?dú)猓瑲v時(shí)15分鐘，直到除去過量的氯氣為止。向反應(yīng)混合物中加入2毫升40%的甲胺水溶液，然后，在一個(gè)不銹鋼瓶中在115℃加熱，歷時(shí)4.5小時(shí)。將鋼瓶冷卻到0℃，并將內(nèi)容物蒸干，得到產(chǎn)率為88%的標(biāo)題化合物。從水中重結(jié)晶后，該樣品的熔點(diǎn)為201.5-202.5℃。
分析 C11H13N5O4計(jì)算值C，47.0;H，5.38;N，24.9實(shí)測(cè)值C，47.2;H，5.72;N，25.2
實(shí)施例29-β-D-阿糖呋喃-6-二甲氨基嘌呤6-二甲氨基嘌呤(SigmaChemicalCo、StLouis，MO)(6.4毫摩爾，1.04克)和尿嘧啶阿糖苷(Torrence，P、F、etal;J、Mecl、Che、，2213)(1979)，(316-319)(8毫摩爾，1.96克)在0.412升5毫摩爾磷酸鉀(pH＝8.0)與0.02%疊氮化鉀中混合。加入的嘌呤核苷磷酸化酶(3260單位)和尿苷磷酸化酶(810單位)，溶液在35℃攪拌。59天后，將反應(yīng)物凍干。將殘余物懸浮在250毫升水中室溫下攪拌1小時(shí)。過濾分離出固體，濾液貯存在于3℃。72小時(shí)后，收集沉淀并與前面穆吮旌?，加葰?00毫升95%的乙醇/水中，加熱至沸，并過濾。真空中除去溶劑，殘余物用30%的正丙醇/水(v/v)在BioRadP-2樹脂上進(jìn)行色譜分離，一次用一根7.5×90厘米柱，再兩次用5×90厘米柱。該操作得到0.12克6-二甲氨基嘌呤-9-β-D阿糖呋喃苷，為0.5水合物。
分析for C12H17N5O40.5H2O;
計(jì)算值C，47.36;H，5.96;N，23.01實(shí)測(cè)值C，47.23;H，5.59;N，22.75核磁共振和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例39-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基嘌呤將6-甲氧基嘌呤(SigmaChemicalCo、St、Louis，MO)(6.6毫摩爾，1克)和尿嘧啶阿糖苷(Torrence，P、F、etalJ、Med、Chem，22(3)(1979))(10.1毫摩爾，2.45克)懸浮在575毫升pH為7.8、含10%正丙醇(v/v)的10毫摩爾磷酸鉀、0.04%疊氮化鉀的溶液中。加入純的尿苷磷酸化酶(560國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(10000國際單位)(Krenitsky，T、Aetal，Biochemistry，20，3615，1981和美國專利4，381，444)溶液在35℃攪拌。30天后過濾反應(yīng)混合物。用氫氧化銨將濾液的pH值調(diào)節(jié)到10.5并在一個(gè)含強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂-甲酸酯樹脂(Dowex-1-formateresin)柱(2.5×7厘米)上進(jìn)行色譜分離。樹脂用30%正丙醇/水(v/v)洗脫。合并含產(chǎn)物的組分并真空除去溶劑。將殘余物溶解在30%的正丙醇/水(v/v)中并在BioRadP-2柱(7.5×90厘米)上進(jìn)行色譜分離。合并含產(chǎn)物的餾分凍干后得0.922克6-甲氧基嘌呤-9-β-D阿糖呋喃苷為二水合物。
分析 C11H14N4O52H2O計(jì)算值C，41.51;H，5.70;N，17.60實(shí)測(cè)值C，41.46;H，5.74;N，18.13NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例49-β-D-阿糖呋喃-6-乙氧基嘌呤將6-乙氧基嘌呤(SigmaChemicalCo、St、Louis，MO)(3.05毫摩爾，0.5克)和尿嘧啶阿糖苷(6.09毫摩爾，1.48克)懸浮在100毫升、pH＝7.4的10毫摩爾磷酸鉀、0.04%疊氮化鉀的溶液中。加入純的尿苷磷酸化酶(6000國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(8400國際單位)(Krenitsky，T、A、，etal，Biochemistry，20，3615，1981和美國專利4，381，444)于35℃攪拌懸浮液。
168小時(shí)后，另外加入18000單位的尿苷磷酸化酶和75，600單位的嘌呤核苷磷酸化酶。7天后過濾反應(yīng)混合物，并在一個(gè)根裝有Dowex-1-氫氧化物樹脂柱子(2.8×8厘米)上對(duì)濾液色譜分離。用90%甲醇/水(v/v)洗脫柱子，合并含產(chǎn)物的餾分，真空去除溶劑。將殘余物溶解在30%正丙醇和水(v/v)中并在裝有BioRadP-2的柱(5×90厘米)上色譜分離。用30%正丙醇/水(v/v)洗脫產(chǎn)物，合并含產(chǎn)物的餾分真空除去溶劑，得到0.363克6-乙氧基嘌呤-9-β-D-阿糖呋喃苷(分析表明為0.3水合物)。
分析 C12H16N4O50.3H2O計(jì)算值C，47.78;H，5.55;N，18.57實(shí)測(cè)值C，47.99;H，5.54;N，18.40NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例59-β-D-阿糖呋喃-6-碘嘌呤將6-碘嘌呤(SigmaChemicalCo、St、Louis，MO)(4毫摩爾，1克)加熱溶解在15毫升1，2-二甲氧基乙烷中。加入50毫升的尿嘧啶阿糖苷(10.1毫摩爾)在10毫摩爾磷酸鉀，0.04%疊氮化鉀中的pH＝7.4溶液。然后，加入純的尿苷磷酸化酶(6800國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(12000國際單位)并于35℃攪拌反應(yīng)混合物。21天后，另外加入4800單位的尿苷磷酸化酶和20000單位的嘌呤核苷磷酸化酶。90天后，過濾反應(yīng)混合物真空除去溶劑。將殘余物溶解在100毫升水中，用蒸汽加熱，然后過濾。用一根含XAD-2樹脂的柱子(5×3.5厘米)對(duì)濾液進(jìn)行色譜分離。柱子先用2升水再用2升乙醇洗脫。合并含產(chǎn)品的餾分真空除去溶劑。殘余物溶解在30%正丙醇/水(v/v)中并在含BioRadP-2的柱上(5×90厘米)色譜分離。用30%正丙醇/水(v/v)洗脫產(chǎn)物。合并含產(chǎn)物的餾分并真空除去溶劑。將殘余物溶解在30%正丙醇/水(v/v)中并在一根葡聚糖凝膠G-10柱(5×90厘米)上色譜分離。柱子用30%正丙醇/水(v/v)洗脫。然后，合并含產(chǎn)物的餾分，真空除去溶劑后得到0.253克的6-碘嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷(分析為1.5水合物)分析 C10H11N4O41.5H2O計(jì)算值C，29.65;H，3.48;N，13.83;I31.32實(shí)測(cè)值C，29.43;H，3.53;N，13.66;I31.20NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例69-β-D-阿糖呋喃-2-氨基-6-碘嘌呤在0.31升的10毫摩爾磷酸鉀(pH6.9)與0.02%的疊氮化鉀中，將2-氨基-6-碘嘌呤(SigmaChemicolsSt、Louis，MO)(25.5毫摩爾，6.75克)與尿嘧啶阿糖苷(61.9毫摩爾，15.1克)合并。加入純的嘌呤核苷磷酸化酶(17000單位)和尿苷磷酸化酶(2000單位)溶液在37℃攪拌。18天后，再加入5700單位的尿苷磷酸化酶。57天后，過濾反應(yīng)液，濾液在一根含XAD-2樹脂的柱(8×11厘米)上色譜分離。用乙醇/水(v/v)按下述比例分步梯度洗脫產(chǎn)物0.35升10%;1升1升20%;1升50%;0.2升95%。合并含產(chǎn)物餾分真空除去乙醇。將殘余物溶解在30%正丙醇/水(v/v)中并含BioRadP-2樹脂的7.5×9厘米柱上色譜分離。這一操作得到1.1克2-氨基-6-碘嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷，為0.5水合物。
分析 C10H12N5O40.5H2O計(jì)算值C，29.87;H，3.26;N，17.41實(shí)測(cè)值C，29.86;H，3.29;N，17.39NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例79-β-D-阿糖呋喃-6-吡咯烷基嘌呤將6-吡咯烷基嘌呤(SigmaChemicalCo，St，Louis，MO)(2.6毫摩爾，0.5克)和尿嘧啶阿糖苷(5.29毫摩爾，1.29克)懸浮在100毫升、PH＝7.4的10毫摩爾磷酸鉀、0.04%疊氮化鉀的溶液中。加入純的尿苷磷酸化酶(6000國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(8400國際單位)(Krenitsky，T.A，etalBiochemistry，203615，(1981)和美國專利4，381，444)懸浮液于35℃攪拌。20天后，過濾反應(yīng)物，濾液在一含Dowex-1-氫氧化物樹脂的柱(2.5×8厘米)上色譜分離。用90%甲醇/水(v/v)洗脫柱內(nèi)的產(chǎn)物。合并含產(chǎn)物的餾分真空除去溶劑。將殘余物溶解在50毫升的30%正丙醇和水(v/v)中并在-BiokadP-2柱(5×90厘米)上色譜分離。用30%正丙醇/水(v/v)洗脫產(chǎn)物。合并含產(chǎn)物的餾分真空除去溶劑，得到0.573克6-吡咯基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷。
分析 C14H19N5O4計(jì)算值C，52.33;H，5.96N，21.79實(shí)測(cè)值C，52.60;H，6.09;N，21.51NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致實(shí)施例89-β-D-阿糖呋喃-2-氯-6-甲氨基嘌呤將2，6-二氯-2′，3′，5′-三-0-芐基-9-(β-D-阿糖呋喃)嘌呤(Keller，F(xiàn)，etal，J.Org.Chem.，32，1644(1967);Montgomery，J.A.和Hewson，K.J.，J.Med.Chem.12，498(1967))(5.92克，10毫摩爾)在苯(35毫升每10毫升苯含0.6克甲胺的溶液)中，在一密封瓶中室溫放置4天。密封瓶在冰中徹底冷卻，啟開，將內(nèi)容物過濾，以除掉鹽酸甲胺。真空除去溶劑，得到一種油，該油與一種從同樣規(guī)模、但在125℃反應(yīng)得到的油合并?？偭繛?1.4克。薄層色譜分析(TLC)表明，它是一種原料、單和二甲氨基化合物的混合物。用30%丙酮和70%環(huán)己烷(體積)，在285克硅膠上對(duì)該油進(jìn)行色譜分離。收集原料下面流出的組分(TLC，硅膠，3∶7丙酮∶環(huán)己烷)真空除去溶劑，得到4.8克油狀的2-氯-6-甲氨基-2′3′5′-三-0-芐基-9-(B-D-阿糖呋喃)嘌呤。將該物1.1克份置于40毫升2-甲氧基乙醇中加入到在帕爾(Parr)裝置中預(yù)還原了的氯化鈀(0.87克)中。在開始15分鐘后，充滿氫氣時(shí)，于50磅/英寸2加氫處理30分鐘。通過硅藻土床過濾除去催化劑并用甲醇洗滌。然后，加入Dowex-1-(HCO3)以中和濾液。過濾除去樹脂并用甲醇洗滌。真空蒸發(fā)濾液，殘余物用氯仿研磨粗產(chǎn)物用熱水洗滌，溶于熱甲醇中，過濾，冷卻，收集固體。經(jīng)沸水結(jié)晶得到產(chǎn)物，為水合物。
產(chǎn)量44.5毫克;熔點(diǎn)224-225℃。
分析 C11H14N5O4Cl·H2O;
計(jì)算值C39.58;N20.98;H4.84實(shí)測(cè)值C39.27;N20.83;H5.16實(shí)施例99-β-D-阿糖呋喃-6-環(huán)丙氨基嘌呤由在乙腈中經(jīng)環(huán)丙胺親核取代6-氯嘌呤(SigmaChemicalsSt.Louis Mo)上的氯而制備的6-環(huán)丙氨基嘌呤(2.85毫摩爾，0.5克)和尿嘧啶阿糖苷(Torrence，P.F.et al J.Med.Chem，22(3)(1979)316-319)(5.71毫摩爾，1.39克)懸浮在100毫升pH＝4的、10毫摩爾磷酸鉀、0.04%疊氮化鉀的溶液中。加入純的尿苷磷酸化酶(6000國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(8400)(Krenitsky et al Biochemistry 20 3615，1981和美國專利4，381，444)于35℃攪拌懸浮液。120小時(shí)后，過濾反應(yīng)物，濾液在一含Dowex-1-氫氧化物樹脂的柱(2.5×10厘米)上色譜分離。用90%甲醇/水(v/v)洗脫柱子。合并含產(chǎn)物的餾分并真空除去溶劑。將殘余物溶解在30%正丙醇和水(v/v)中并在BioRad P-2(5×90厘米)柱上色譜分離。柱子用30%正丙醇/水(v/v)洗脫。從反應(yīng)物得到的沉淀用熱甲醇重結(jié)晶，得到0.0352克產(chǎn)物，分析表明為6-環(huán)丙氨基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷-水合物。重結(jié)晶時(shí)的濾液按前述，在BioRad P-2(5×90厘米)柱上色譜分離。從兩根柱子得到的含產(chǎn)物的餾分合并真空除去溶劑，得到0.342克6-環(huán)丙氨基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷，分析表明為含有0.3C3H8O的0.8水合物。
分析 C13H17N5O41H2O計(jì)算值C，48.00;H，5.89;N，21.53.
實(shí)測(cè)值C，48.05;H，5.89;N，21.55.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例109-β-D-阿糖呋喃-6-乙基(甲基)氨基嘌呤6-乙基(甲基)氨基嘌呤是在乙腈中用乙基(甲基)胺苯核取代6-氯嘌呤(SigmaChemicals，st.LouisMO)上的氯制備的。將6-乙基(甲基)氨基嘌呤(2.8毫摩爾，0.5克)和尿嘧啶阿糖苷(5.6毫摩爾，1.38克)懸浮含10%正丙醇(v/v)的575毫升、pH＝7的10毫摩爾磷酸鉀、0.04%疊氮化鉀的溶液中。加入純的尿苷磷酸化酶(6000國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(8400國際單位)(KrenitskyetalBiochemistoy203615，1981和美國專利4，381，444)并于37℃攪拌溶液。19天之后，過濾反應(yīng)物濾液在一含Dowex-1-氫氧化物樹脂的2.5×13厘米柱上色譜分離。用90%甲醇/水(v/v)洗脫樹脂。合并含產(chǎn)物的餾分，真空除去溶劑。將殘余物溶解在30%正丙醇/水(v/v)中并在BioRadP-2柱(7.5×90厘米)上色譜分離。合并含產(chǎn)物的餾分，凍干后得到0.680克的6-乙基(甲基)氨基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷。
分析 C13H19N5O4計(jì)算值C，50.48;H，6.19;N，22.64實(shí)測(cè)值C，50.36;H，6.25;N，22.52NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致實(shí)施例119-β-D-阿糖呋喃-2-氨基-6-甲氧基嘌呤在有氫化鈉的四氫呋喃中用甲醇親核取代2-氨基-6-氯嘌呤(SigmaChemicalsStLouisMO)上的氯制備2-氨基-6-甲氧基嘌呤。后者(6.4毫摩爾，1.05克)與3.5毫升尿嘧啶阿糖苷(7.04毫摩爾，1.75克)在10毫摩爾磷酸鉀和7%正丙醇(v/v)溶液中混合，pH調(diào)節(jié)到6.75。加入純的嘌呤核苷磷酸化酶(18000單位)和尿苷磷酸化酶(1020單位)溶液于37℃溫孵。26天之后，過濾反應(yīng)物，濾液用濃氫氧化銨調(diào)節(jié)到pH10.5以后，在Dowex-1-甲酸酯柱(2×7厘米)上色譜分離。柱子用7%正丙醇/水(v/v)洗脫，合并含產(chǎn)物的餾分真空除去溶劑。用25毫升水萃取殘余物，通過離心使濾液與固體分離。上層清液室溫靜置后形成2-氨基-6-甲氧基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷結(jié)晶，真空干燥，得到0.327克產(chǎn)物。
分析 C11H15N5O5計(jì)算值C，44.44;H，5.09;N，23.56實(shí)測(cè)值C，44.49;H，5.13;N，23.52NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例129-β-D-阿糖呋喃-6-正丙氧基嘌呤將6-正丙氧基嘌呤(5.6毫摩爾，1克，SigmaChemicals，St.LouisMO)與10毫摩爾磷酸鉀和7%正丙醇(v/v)的545毫升尿嘧啶阿糖苷溶液(10.1毫摩爾)混合。加入純的尿苷磷酸化酶(680國際單位)和嘌呤核苷磷酸化酶(12000國際單位)反應(yīng)物于35℃攪拌58天之后，過濾反應(yīng)物，濾液于3℃放置20小時(shí)。所得沉淀用離心分離收集，再溶解在30%正丙醇/水(v/v)中，用濃氫氧化銨調(diào)節(jié)PH值到10.5后，在Dowex-1-甲酸酯樹脂柱(2.5×5厘米)上色譜分離。柱子用30%正丙醇/水(v/v)洗脫合并含產(chǎn)物的餾分，真空除去溶劑。殘余物溶解在正丙醇中并在含BoRadp-2的柱(5×90厘米)上色譜分離。柱子用30%正丙醇/水(v/v)洗脫。合并含產(chǎn)物的餾分真空除去溶劑，殘余物溶解在水中并在一含BioRadp-2的柱(5×90厘米)上色譜分離。柱子用水洗脫。合并含產(chǎn)物的餾分，凍干后得到0.758克的6-正丙氧基嘌呤-9-β-D-阿拉伯呋喃糖苷，經(jīng)分析為-水合物。
分析C13H18N4O51.0H2O計(jì)算值C，47.56;H，6.14;N，17.06實(shí)測(cè)值C，47.63;H，6.13;N，17.11NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例139-(5-苯甲酰-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)溶解在無水二甲基乙酰胺(5.0毫升)中，冷卻到4℃，加入苯甲酰氯(0.155克，1.1毫摩爾)。在氬氣下，將混合物攪拌24小時(shí)，并緩慢升到室溫。然后，室溫下加入第二份1.1當(dāng)量的苯甲酰氯并再繼續(xù)攪拌24小時(shí)。傾入50毫升冰水使反應(yīng)停止，再用CHCl3(3×30毫升)提取，有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)。蒸發(fā)后的殘余物在硅膠柱(25.0克，2.5×15厘米)上用閃式色譜法純?，腺n煙荻任狢HCl3到CHCl3∶丙酮/1∶1。合并Rf值為0.21(硅膠，CHCl3∶丙酮/1∶1)的含產(chǎn)物的餾分，得到92毫克所需化合物熔點(diǎn)202-204℃;
分析計(jì)算值C18H18N4O6C，55.96;H，4.70;N，14.50.
實(shí)測(cè)值C，56.04;H，4.74;N，14.40.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致實(shí)施例146-甲氧基-9-〔5-0-(4-甲苯磺酰)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將新鮮重結(jié)晶的4-甲苯磺酰氯(0.312克，1.63毫摩爾)和實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.308克，1.09毫摩爾)懸浮在無水乙腈(25毫升)中，在冰浴中冷卻到3℃，加入吡啶(5.0毫升)以溶解核苷。在氬氣下，于3℃攪拌溶液1小時(shí)，然后在-15℃保持42小時(shí)。用5%NaHCO3(3毫升)使反應(yīng)終止，蒸發(fā)到大約10毫升，再與95%乙醇共蒸發(fā)。殘余物吸收在最小量的硅膠上并加到有CH2Cl2MeOH(15∶1)的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×15厘米)中。用該溶劑(450毫升)洗脫，接著用CH2Cl2∶MeOH(10∶1，550毫升)洗得到三種紫外光吸收物質(zhì)。將含有Rf＝0.42物質(zhì)的餾分合并，并在三塊順序的硅膠制備色譜板上進(jìn)一步純化，第一塊板用CH2Cl2∶MeOH(10∶1)，后兩塊板用丙酮∶CH2Cl2(1∶1)，得到88毫克所需物質(zhì)為透明玻璃狀物。
熔點(diǎn)177-181℃;
分析計(jì)算值 C18H20N4O7S.0.15H2OC，49.23;H，4.66;N，12.76.
實(shí)測(cè)值C，49.28;H，4.71;N，12.71.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例156-甲氧基-9-(5-0-甲磺酰-β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.600克，2.13毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(40毫升)中并加入無水吡啶(8毫升)。反應(yīng)瓶在-3℃的冰/鹽浴中冷卻并加入甲磺酰氯(0.16毫升，2.13毫摩爾)。25分鐘后，用H2O(3毫升)對(duì)溶液急冷，并濃縮到10毫升，然后分幾次加入乙醇共蒸發(fā)，始終保持溫度在38℃以下。用真空泵除去殘余吡啶。殘余物加到一根由CH2Cl2∶MeOH(15∶1)均衡的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×1.5厘米)上。柱子先用150毫升該溶劑、再用CH2Cl2∶MeOH(10∶1，450毫升)洗脫。從那些含Rf＝0.34物質(zhì)的餾分(硅膠，CH2Cl2∶MeOH(10∶1))得到0.488克白色泡沫狀產(chǎn)物(57%)熔點(diǎn)177-181℃(分解);
分析計(jì)算值 C12H16N4O7S·0.5H2OC，39.02;H，4.64;N，15.17實(shí)測(cè)值C，39.02;H，4.66;N，15.08.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例169-(5-0-(4-甲基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將從實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(10.1毫升)中，加入吡啶(2.3毫升)使完全溶解，接著，加入4-甲基-苯甲酰氯(0.170克，1.1毫摩爾)。在氬氣下，于室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)，加入異丙醇(5毫升)使反應(yīng)終止，然后蒸干，接著與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)。殘余物用硅膠(25.0克，2.5×15厘米)閃式色譜純化，分步梯度為CHCl31∶1的CHCl3∶丙酮。合并含Rf＝0.41產(chǎn)物的餾分ü杞?，CHCl3∶丙酮/1∶1)，得到132毫克所需化合物熔點(diǎn)127-128℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O6·0.5H2OC，55.74;H，5.17;N，13.69.
實(shí)測(cè)值C，55.48;H，5.36;N，13.64.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例179-(5-0-(4-氯苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將從實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(10.0毫升)中，加入吡啶(2.3毫升)使完全溶解，接著加入4-氯苯甲酰氯(0.193克，1.1毫摩爾)。在氬氣下，室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)，加入異丙醇(5毫升)使反應(yīng)終止，并蒸干，接著與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)。殘余物用硅膠閃式色譜(柱)(25.0克，2.5×15厘米)純化，分步梯度為從CHCl3∶到CHCl3∶丙酮(1∶1)。合并含Rf＝0.37產(chǎn)物的餾分，得到105毫克所需化合物熔點(diǎn)122-124℃;
分析計(jì)算值 C18H17C1N4O6.0.5H2OC，50.30;H，4.22;N，13.04.
實(shí)測(cè)值C，50.20;H，4.28;N，12.94.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例189-(5-0-(4-甲氧基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將從實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(10.0毫升)中，加入吡啶(2.3毫升)使完全溶解，接著加入4-甲氧基苯甲酰氯(1.1毫摩爾)。在氬氣下，室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)，加入異丙醇(5毫升)使反應(yīng)終止，然后蒸干，接著與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)。之后，通過硅膠(25.0克，2.5×15厘米)閃式色譜，分步梯度為CHCl3到CHCl3∶丙酮(1∶1)對(duì)殘余物進(jìn)行純化。合并含Rf＝0.30產(chǎn)物的餾分(硅膠，CHCl3∶丙酮(1∶1))，得到110毫克所需化合物熔點(diǎn)195-197℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O7.0.25H2OC，54.22;H，4.91;N，13.31.
實(shí)測(cè)值C，54.22;H，4.94;N，13.30NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例196-甲氧基-9-(5-0-苯乙酰基-β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤將實(shí)施例3的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.300克，1.06毫摩爾)懸浮在乙腈(25毫升)中，接著加入無水吡啶(5毫升)。在冰浴中把溶液冷卻到3℃并加入苯乙酰氯(0.20毫升，1.5毫摩爾)。于3℃攪拌1小時(shí)后，將溶液冷卻到-15℃歷時(shí)40小時(shí)。用5%NaHCO3(3毫升)將反應(yīng)物急冷，濃縮到10毫升，然后分幾次加入乙醇蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2Cl2∶MeOH(15∶1)中并加到一裝有同樣溶劑的硅膠閃式色譜柱(25.0克，2.5×15厘米)上，用500毫升該溶劑，再用CH2Cl2∶甲醇(15∶1，500毫升)洗脫。從Rf＝0.38的餾分(硅膠，10∶1 CH2Cl2∶甲醇)得到0.128克粗品，雜有較高Rf的雜質(zhì)。進(jìn)一步純化是用制備色譜板，用CH2Cl2∶MeOH(10∶1)，接著第二塊板用丙酮∶CH2Cl2(1∶1)，得到0.102克白色泡沫狀的所需產(chǎn)物熔點(diǎn)74-75℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O6.0.1H2OC，56.74;H，5.06;N，13.93.
實(shí)測(cè)值C，56.74;H，5.11;N，13.90.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例206-甲氧基-9-(5-0-苯氧基乙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤把實(shí)施例3的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.322克，1.14毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(25毫升)中，再加入無水吡啶(5毫升)。在冰浴中將溶液冷卻到3℃并加入苯氧基乙酰氯(0.24毫升，1.7毫摩爾)。于3℃攪拌2小時(shí)，用5%NaHCO3(2毫升)熄滅反應(yīng)，濃縮到10毫升，分幾次加入乙醇進(jìn)行蒸發(fā)。用硅膠閃式色譜法(25.0克，2.5×15厘米)，以CH2Cl2∶甲醇(15∶1)為洗脫液純化殘余物。用400毫升該溶劑洗脫、再用10∶1 CH2Cl2∶甲醇(500毫升)和9∶1 CH2Cl2∶甲醇(300毫升)洗脫后，得到0.213克粗產(chǎn)物。用甲醇重結(jié)晶，得到0.101克(20%)的白色晶體性物質(zhì)熔點(diǎn)193-195℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O7.0.05H2OC，54.69;H，4.85;N，13.43.
實(shí)測(cè)值C，54.69;H，4.89;N，13.40.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例216-甲氧基-9-(5-0-甲氧基乙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤把從實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.300克，1.06毫摩爾)懸浮在乙腈(25毫升)中，接著加入無水吡啶(5毫升)。溶液在冰/鹽浴中冷卻到-3℃并加入甲氧基乙酰氯(0.10毫升，1.1毫摩爾)。在冰/鹽浴中攪拌2小時(shí)，用5%NaHCO3(2毫升)熄滅反應(yīng)，濃縮到10毫升，然后分幾次加入乙醇進(jìn)行蒸發(fā)。將殘余物加到一個(gè)裝有10∶1CH2Cl2∶MeOH的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×15厘米)上。用500毫升該溶劑洗脫，接著用9∶1 CH2Cl2∶MeOH(300毫升)洗脫，得到0.086克粗產(chǎn)物。該物質(zhì)用MeOH和H2O重結(jié)晶，得到0.035克(9.3%)白色結(jié)晶熔點(diǎn)137-139℃;
分析計(jì)算值 C14H18N4O7.0.5H2OC，46.28;H，5.27;N，15.42.
實(shí)測(cè)值C，46.33;H，5.27;N，15.37.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例229-〔5-0-(4-硝基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(10.0毫升)中，加入吡啶(2.3毫升)使完全溶解，接著加入4-硝基苯甲酰氯(0.205克，1.1毫摩爾)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物24小時(shí)(在氬氣下)，加入異丙醇(5毫升)熄滅反應(yīng)，蒸干，接著與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)。然后，在硅膠(25.0克，2.5×15厘米)上用CHCl3到CHCl3∶丙酮(1∶1)分步梯度快速色層分離以純化殘余物。合并含Rf＝0.37(硅膠，CHCl3∶丙酮(1∶1))產(chǎn)物的餾分，得到105毫克所需化合物熔點(diǎn)202-203;
分析計(jì)算值 C18H17N5O8C，50.12;H，3.97;N，16.24.
實(shí)測(cè)值C，50.21;H，4.02;N，16.16.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例236-甲氧基-9-(5-0-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.852克，3.01毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(75毫升)中，并加入干燥吡啶(15毫升)。溶液在冰/水浴中冷卻并加入戊酰氯(0.4毫升，3.31毫摩爾)。兩小時(shí)后，加入3毫升甲醇使反應(yīng)熄滅，蒸發(fā)成一透明的粘性油。用CHCl3到CHCl3∶MeOH(9∶1)的分步梯度，在硅膠上經(jīng)快速色層分離以純化殘余物。得到330毫克產(chǎn)物混雜有相應(yīng)的2′-酯(見實(shí)施例32)和一種低Rf的未知物。殘余物進(jìn)一步純化是用反相制借高壓柱色譜HPLC(Autech C18，10毫米×25厘米，10微米粒徑，70%H2O∶30%CH3CN，4.0毫升/分鐘)，用同一溶劑制備1.0毫升注射量的10毫克/毫升溶液。殘余物與丙酮共蒸發(fā)，得到260毫克白色脆性泡沫(24%)熔點(diǎn)85-95℃;
分析計(jì)算值 C16H22N4O6.0.05(CH3)2CO.0.55H2OC，51.16;H，6.22;N，14.78.
實(shí)測(cè)值C，50.98;H，6.03;N，14.63.
實(shí)施例249-〔5-0-(4-氨基苯甲?；?β-D-阿糖呋喃)〕-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例22得到的9-(5-0-(4-硝基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.350克，0.81毫摩爾)懸浮在乙醇(100.0毫升)中并加入10%的鈀碳(0.100克)。將系統(tǒng)交替抽空和充氫后，反應(yīng)物在帕爾(Parr)裝置上50磅/時(shí)震搖3小時(shí)。然后，混合物通過硅藻土過濾并將濾液蒸干。將蒸干后的殘余物懸浮在甲醇中，過濾，得到所需化合物為白色固體(0.285克，88%)
熔點(diǎn)198-200℃分析計(jì)算值C18H19N5O6·0.3H2OC，53.15;H，4.86;N，17.32實(shí)測(cè)值C，52.96;H，4.64;N，17.07。
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例256-甲氧基-9-(5-O-丙?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.847克，3.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(30.0毫升)中，加入吡啶(9.0毫升)使完全溶解。冷卻到5℃后，加入丙酰氯(0.305克，3.3毫摩爾)在氬氣下將混合物攪拌過夜，溫度保持在13℃。在用異丙醇(5毫升)熄滅反應(yīng)并蒸干后，再與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)，然后用CHCl3到CHCl3∶丙酮(1∶1)的分步梯度，在硅膠上(25.0克 2.5×15厘米)，閃式色譜純化殘余物。合并含有Rf＝0.38產(chǎn)物的餾分(硅膠，CHCl3∶丙酮/1∶1)，該物再一次在硅膠上用中壓色譜法(串連柱，1.5×25.0厘米和1.5×100.0厘米;CHCl3∶丙酮(3∶1))純化，得0.114克所需化合物為白色固體。
熔點(diǎn)62-64℃;
分析計(jì)算值C14H18N4O6·0.5CH3OHC，50.68;H，5.76;N，15.25實(shí)測(cè)值C，50.72;H，5.80;N，15.28。
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例269-(5-O-丁酰基-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.847克，3.0毫摩爾)懸浮在無水乙腈(30.0毫升)中并加入吡啶(9毫升)以完全溶解。冷卻到5℃后，加入丁酰氯(0.352克，3.3毫摩爾)混合物在氬氣下攪拌過夜。用異丙醇(5毫升)熄滅反應(yīng)并蒸干后，再與乙醇(2×10毫升)共蒸發(fā)。肅HCl3到CHCl3∶丙酮(1∶1)的分步梯度，在硅膠(25.0克，2.5×15厘米)上快速色譜分離來純化殘余物。合并含Rf＝0.38(硅膠，CHCl3∶丙酮/1∶1)產(chǎn)物的餾分。該物質(zhì)再次純化是在硅膠上用中壓色譜法(串連柱，1.5×25.0厘米和1.5×100.0厘米;CHCl3∶丙酮(2∶1))，得到267毫克所需的化合物，為白色固體。
熔點(diǎn)108-110℃;
分析計(jì)算值 C15H20N4O6C，51.13;H，5.72;N，15.90.
實(shí)測(cè)值C，51.21;H，5.73;N，15.81.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例279-〔5-O-(2，2-二甲基丙?；?-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.850克，3.01毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(75毫升)中，加入無水吡啶(15毫升)。溶液在冰浴中冷卻到3℃加入2，2-二甲基丙酰氯(0.41毫升，3.3毫摩爾)。于3℃攪拌6小時(shí)，反應(yīng)用MeOH(2ml)熄滅，濃縮到10毫升，再幾次加入乙醇共蒸發(fā)。將殘余物加到一個(gè)裝填有CH2Cl2∶MeoH(10∶1)的硅膠閃式柱(20.0克，2.5×12.0厘米)上。用300毫升該溶劑洗脫得到0.464克原料和0.553克粗產(chǎn)物。再用閃式色譜法(硅膠，2.5×10厘米)純化，用CH2Cl2到MeOH∶CH2Cl2(1∶9)梯度洗脫提，得到0.419克(38%)的透明玻璃狀物;
熔點(diǎn)73-76℃;
分析計(jì)算值 C16H22N4O6.0.5H2OC，51.19;H，6.18;N，14.93.
實(shí)測(cè)值C，51.43;H，6.06;N，14.91.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例289-(5-0-乙?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.850克，3.01毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(75毫升)中，再加入無水吡啶(15毫升)。溶液在冰浴中冷卻到3℃，加入乙酰氯(0.24毫升，3.4毫摩爾)。在鹽浴中攪拌半小時(shí)后，用甲醇(2毫升)熄滅反應(yīng)，濃縮到10毫升，然后幾次加入乙醇并蒸發(fā)。用快速色譜法在硅膠(25.0克，2.5×15厘米)上用CH2Cl2∶MeOH(10∶1，300毫升)洗脫以純化殘余物，得到0.710克粗產(chǎn)物。經(jīng)第二根柱子(25.0克，2.5×15厘米)用CH2Cl2∶MeOH(15∶1)洗脫，得到0.610克的透明玻璃狀物，其中仍含有少量較高Rf的雜質(zhì)。產(chǎn)物進(jìn)一步提純是用制備色譜板和CH2Cl2∶MeOH(9∶1)，接著，把板上刮下的所需部分碎屑放入裝有CH2Cl2的閃式柱(20.0克，2.5×12厘米)上并用含MeOH的CH2Cl2梯度洗脫，得到所需的白色泡沫狀產(chǎn)物(0.308克，31%)熔點(diǎn)64-67℃;
分析計(jì)算值 C13H16N4O6.0.5H2OC，46.85;H，5.14;N，16.81.
實(shí)測(cè)值C，47.04;H，5.12;N，16.72.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例296-甲氧基-9-〔5-O-(2-甲基丙酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.500克，1.77毫摩爾)懸浮在干燥乙腈(25毫升)中，接著加入無水吡啶(5毫升)。溶液在冰浴中冷卻到3℃，加入異丁酰氯(0.21毫升，2.0毫摩爾)。于3℃攪拌3小時(shí)后，用MeOH(2毫升)熄滅反應(yīng)，濃縮到10毫升，然后幾次加入乙醇共蒸發(fā)。將殘余物加到一個(gè)裝填有CH2Cl2∶MeOH(10∶1)的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×15厘米)上。用300毫升該溶劑洗脫，得到0.167克原料和0.221克粗產(chǎn)物。用制備色譜板及CH2Cl2∶MeOH(9∶1)進(jìn)一步純化產(chǎn)物，然后把板上的刮屑放在一個(gè)裝有CH2Cl2的硅膠閃式柱中。閃式柱用含有CH3OH的CH2Cl2梯度洗脫，得到0.127克透明玻璃狀物(20%)熔點(diǎn)68-71℃.
分析計(jì)算值 C15H20N4O6.0.25H2O.0.05 MeOHC，50.43;H，5.82;N，15.63.
實(shí)測(cè)值C，50.49;H，5.83;N，15.62.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例306-甲氧基-9-〔2-O-(2，2-二甲基丙酰基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(298.5毫克，1.06毫摩爾)、4-二甲基氨基吡啶(1毫克，10微摩爾)、乙腈(20毫升)和吡啶(5毫升)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口閥、磁攪拌器、冷凝器和加熱套的三頸圓底燒瓶中。加入三甲基乙酐(0.22毫升，1.06毫摩爾)并將溶液加熱到40℃保持26小時(shí)。此時(shí)，加入2毫升水將反應(yīng)熄滅并蒸發(fā)成一透明油。用CHCl3到CHCl3∶MeOH(9∶1)的分步梯度，在硅膠上經(jīng)快速色譜法純化殘余物。該物質(zhì)經(jīng)制備色譜板用CHCl3∶MeOH(9∶1)進(jìn)一步純化并與四氯化碳和丙酮共蒸發(fā)，得到90毫克的白色脆性泡沫。
分析計(jì)算值 C16H22N4O6.0.05(CH3)2CO.0.45 CCl4C，45.47;H，5.13;N，12.78.
實(shí)測(cè)值C，45.67;H，5.27;N，12.67.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例31
6-甲氧基-9-〔(2，3，5-三-0-乙?；?-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(1.009克，3.57毫摩爾)、4-二甲氨基吡啶(0.0098克，80微摩爾)、三乙胺(0.59毫升，4.2毫摩爾)和無水乙腈(52毫升)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口、磁攪拌器和干冰/丙酮浴的三頸圓底燒瓶中。在乳狀液冷卻到-20℃后，加入乙酐(2.4毫升，25.4毫摩爾)，溶液立刻澄清，5分鐘后，反應(yīng)用MeOH(5毫升)熄滅，蒸發(fā)成透明的粘油。用CHCl3和MeOH的梯度在硅膠上進(jìn)行快速色譜分離，得到一透明粘性油狀物。將該物溶于最小量丙酮中、用水稀釋并冷凍干，分離出(1.03克(71%)產(chǎn)物為白色粉末。
分析計(jì)算值 C17H20N4O8C，50.00;H，4.94;N，13.72.
實(shí)測(cè)值C，49.80;H，5.09;N，13.50.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例326-甲氧基-9-(2-0-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤方法1將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(283毫克，1.0毫摩爾)、乙腈(20毫升)和吡啶(5毫升)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口閥和磁攪拌器的三頸圓底燒瓶中。加入戊酐(0.2毫升，1.0毫摩爾)在20℃將溶液攪拌3小時(shí)。反應(yīng)用水(2毫升)熄滅并揮發(fā)成透明油，然后用CHCl3到CHCl3∶MeOH(9∶1)的分步梯度，在硅膠上經(jīng)閃式色譜法進(jìn)行純化，得到110毫克2′-酯，摻雜有5′-酯(見實(shí)施例23)和一種低Rf物質(zhì)。該物質(zhì)用硅膠制備色譜板，及CHCl3∶MeOH(9∶1)進(jìn)一步純化并與丙酮共蒸發(fā)，得到70毫克的2′-酯為透明玻璃狀物。
分析計(jì)算值 C16H22N4O6.0.5(CH3)2COC，53.16;H，6.37;N，14.17.
實(shí)測(cè)值C，52.89;H，6.37;N，13.96.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
方法2將實(shí)施例40得到的6-甲氧基-9-〔3，5-0-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H嘌呤(2.5克，4.8毫摩爾)加入到一個(gè)250毫升圓底燒瓶中，同時(shí)加入4-二甲氨基吡啶(0.06克，0.47毫摩爾)。加入干燥乙腈(30毫升)和三乙胺(2.65毫升)，在一恒定加料漏斗中裝入乙腈(20毫升)和戊酐(1.13毫升，5.7毫摩爾)。在氬氣流下，將反應(yīng)混合物于3℃冰浴中冷卻。緩慢加入戊酐溶液，歷時(shí)2小時(shí)。然后用甲醇(10毫升)處理反應(yīng)混合物并在減壓下濃縮。殘余物溶于CHCl3(200毫升)中，并用H2O(2×50毫升)萃取。合并水層，用CHCl3(25毫升)反萃取合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，過濾，濃縮得3.44克粗產(chǎn)物。
將粗產(chǎn)物6-甲氧基-9-〔2-0-戊酰基-3，5-0-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤溶解在四氫呋喃(120毫升)和H2O(3毫升)中。溶液在冰浴中冷卻到3℃并加入氟化四丁銨在四氫呋喃中的1.0M溶液(6.0毫升)。1.5小時(shí)后，加入飽和的氯化銨溶液(2毫升)并將反應(yīng)混合物直接移入裝有氯仿的硅膠清洗柱(5.0×8.0厘米)中。柱子用氯仿(200毫升)再用1∶1丙酮∶氯仿(400毫升)洗脫，所有含產(chǎn)物的餾分合并并濃縮。最后的純化是在硅膠閃式柱(5.0×15厘米)上，用含丙酮的CHCl3分步梯度洗脫完成的。得到1.17克(67%)摻雜有戊酸的透明粘性玻璃狀物分析計(jì)算值 C16H22N4O6.0.2C5H10O2C，52.79;H，6.25;N，14.48.
實(shí)測(cè)值C，52.97;H，6.38;N，14.60.
實(shí)施例339-(2-O-丁?；?β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(283毫克，1.0毫摩爾)、乙腈(20毫升)和干燥吡啶(5毫升)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口、磁攪拌器的三頸圓底燒瓶中冷卻到4℃。加入丁酐(170微升，1.0毫摩爾)并在氬氣下于5℃攪拌6小時(shí)。這時(shí)，加入2毫升水熄滅反應(yīng)并揮發(fā)成一透明油。經(jīng)閃式色譜法，用CHCl3到1∶1CHCl3∶丙酮分步梯度來純化反應(yīng)混合物。該物質(zhì)再用制備色譜板，用9∶1CHCl3∶MeOH在硅膠上進(jìn)一步純化，得到90毫克2′-酯為透明油狀物分析計(jì)算值 C15H20N4O6.0.3H2OC，50.36;H，5.80;N，15.66.
實(shí)測(cè)值C，50.36;H，5.81;N，15.66.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例346-甲氧基-9-〔2-O-(2-甲基丙?；?-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(290.0毫克，1.03毫摩爾)、乙腈(20毫升)和吡啶(5毫升)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口、磁攪拌器、冷凝器和加熱套的三頸圓底燒瓶中。加入異丁酐(170微升，1.0毫摩爾)并將溶液于30℃加熱4小時(shí)。這時(shí)，加入2毫升水使反應(yīng)熄滅并蒸發(fā)成透明油。通過閃式色譜法，在硅膠上用CHCl3到CHCl3∶MeOH(9∶1)分步梯度純化殘余物。通過制備色譜板，在硅膠上用CHCl3∶MeOH(9∶1)對(duì)含Rf＝0.54產(chǎn)物的餾分(硅膠，CHCl3∶MeOH，20∶1)進(jìn)一步純化，得到90.0毫克透明玻璃狀的2′-酯分析計(jì)算值 C15H20N4O6.0.1C3H6OC，51.31;H，5.80;N，15.64.
實(shí)測(cè)值C，51.41;H，5.81;N，15.72.
NMR和質(zhì)譜與該結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例359-(3-O-苯甲酰-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤將9-(2，3-脫水-β-D-來蘇糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(制法見實(shí)施例36)(0.264克，1.0毫摩爾)溶解在無水乙醇(20.0毫升)中，加熱回流，并在氬氣下加入苯甲酸銨(0.209克，1.5毫摩爾)。在24小時(shí)和35小時(shí)后，分別再加入1.5毫摩爾的苯甲酸銨?；亓?8小時(shí)，將反應(yīng)物蒸干。蒸干后的殘余物用閃式色譜法，在硅膠上(25.0克，2.5×15厘米)用CHCl3∶丙酮/3∶1純化。合并含Rf＝0.52產(chǎn)物的餾分(硅膠，CHCl3∶丙酮/1∶1)，得到138毫克所需化合物熔點(diǎn)180-182℃;
分析計(jì)算值 C18H18N4O6C，55.96;H，4.70;N，14.50.
實(shí)測(cè)值C，55.90;H，4.71;N，14.44NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例369-(2，3-脫水-β-D-來蘇糖呋喃)-6-甲氧基嘌呤將三苯膦(5.902克，22.5毫摩爾)溶解在1，4-二噁烷(138毫升)中并加熱到70℃。向其中加入實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(4.234克，15.0毫摩爾)，攪拌混合物10分鐘，并在10分鐘內(nèi)滴加偶氮二羧酸二乙酯(3.919克，22.5毫摩爾)于1，4-二噁烷(50毫升)的溶液。在70℃攪拌反應(yīng)物1小時(shí)，冷卻到室溫并蒸發(fā)成一種濃稠的棕色油。通過閃式色譜法在硅膠上(188.0克，5.0×21.0厘米)用CHCl3∶丙酮(5∶1，3.6升)和CHCl3∶丙酮(3∶1，2.0升)洗脫來純化這物質(zhì)。合并含Rf＝0.24物質(zhì)的餾分(硅膠，CHCl3∶丙酮，1∶1)并蒸干。再經(jīng)閃式色譜法在硅膠(250.0克，5.0×28.0厘米)上用EtOAC洗脫純化殘余物，得到2.452克(62%)所需物為白色泡沫
熔點(diǎn)144-145.5℃;
分析計(jì)算值 C11H12N4O4.0.25C3H6O.0.05 CHCl3C，49.78;H，4.80;N，19.68.
實(shí)測(cè)值C，49.80;H，4.95;N，19.87.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例376-甲氧基-9-〔(2-O-(4-甲氧基苯甲?；?)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將6-甲氧基-9-〔2-(4-甲氧基苯甲酰基)-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤(制備法見下面實(shí)施例43)(0.86克，1.3毫摩爾)溶解在THF(40毫升)中并加入水(1毫升)。將溶液冷卻到3℃加入氟化四丁銨在THF中的1.0M溶液(6.3毫升)。30分鐘之后，再加入5毫升水，將反應(yīng)物體積減少一半，直接置入一裝有CH2Cl2的硅膠閃式柱中(25.0克，2.5×15厘米)。柱子用CH2Cl2(200毫升)、再用CH2Cl2∶MeOH(20∶1，400毫升)洗脫，合并含Rf＝0.20物質(zhì)的所有餾分(硅膠，CH2Cl2∶MeOH(20∶1))，得到0.570克白色泡沫。最后的純化是在一裝有CHCl3的硅膠閃式柱(5.0×1.5厘米)上完成的。用含丙酮的氯仿分步梯度洗脫，提供0.325克(60%)的白色泡沫狀產(chǎn)物熔點(diǎn)71-75℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O7.0.3 CHCl3.0.25 C3H6OC，51.60;H，4.71;N，12.00.
實(shí)測(cè)值C，51.56;H，4.70;N，11.95.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例386-甲氧基-9-〔(2-O-(4-甲基苯甲酰基))-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將6-甲氧基-9-〔2-(4-甲基苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤(制法見下面實(shí)施例42)(0.85克，1.3毫摩爾)溶解在THF(40毫升)和H2O(1毫升)中。將溶液冷卻到3℃并加入氟化四丁銨在THF中的1.0M溶液(5.0毫升)。30分鐘后，再加入5毫升H2O，并將反應(yīng)液體積減少到一半，直接移至一裝有CH2Cl2的硅膠閃式柱(20.0克，2.5×12厘米)中。柱子用CH2Cl2(200毫升)再用CH2Cl2∶MeOH(15∶1，400毫升)洗脫，合并含Rf＝0.20物質(zhì)的全部餾分(硅膠，CH2Cl2∶MeOH(20∶1))。將粗產(chǎn)物加到裝有丙酮∶CH2Cl2(1∶1)的第二根硅膠閃式柱(25.0克，2.5×18厘米)。用同樣的溶劑洗脫，得到0.633克產(chǎn)物。再經(jīng)過制備色譜板(硅膠，丙酮∶CH2Cl2(1∶1))和閃式色譜法(25.0克，2.5×15厘米)對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)一步純化。柱子用含丙酮的CHCl3分步梯度洗脫，得到0.234克(47%)的白色玻璃狀物熔點(diǎn)69-73℃;
分析計(jì)算值 C19H20N4O6.0.4 C3H6O.0.25 CHCl3C，54.17;H，5.03;N，12.36.
實(shí)測(cè)值C，54.00;H，5.08;N，12.30.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例399-〔2-0-(4-氯苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤將9-〔2-(4-氯苯甲酰基)-3，5-0-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤(制法見下面實(shí)施例44)(1.07克，1.7毫摩爾)溶解在THF(40毫升)和H2O(1毫升)中。溶液冷卻到3℃并加入氟化四丁銨在THF中的1.0M溶液(4.5毫升)。30分鐘之后，再加入5毫升水并將反應(yīng)混合物立刻移至裝有CH2Cl2的硅膠閃式柱(20.0克，2.5×12厘米)中。柱子用CH2Cl2(200毫升)，接著用CH2Cl2∶MeOH(20∶1，400毫升)洗脫，合并含Rf＝0.20(硅膠，CH2Cl2∶MeOH(20∶1))物質(zhì)的全部餾分。將粗產(chǎn)物加到一裝有丙酮∶CHCl3(1∶1)的硅膠閃式柱中(30.0克，2.5×18厘米)。用同樣的溶劑洗脫，得到0.269克產(chǎn)物。再經(jīng)過制備色譜板(硅膠，丙酮∶CHCl3(2∶3))和閃式色譜法(25.0克，2.5×15厘米)對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)一步純化。柱子用含丙酮的CHCl3分步梯度洗脫。把該產(chǎn)物溶于無水乙醚中并用石油醚(40-60℃)沉淀，沉淀物凍干即制備成分析樣品，得到0.082克(12%)白色粉末熔點(diǎn)76-81℃;
分析計(jì)算值 C18H17N4O6Cl.1.20H2O.0.35C3H6OC，49.45;H，4.68;N，12.11.
實(shí)測(cè)值C，49.78;H，4.38;N，11.88.
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例406-甲氧基-9-〔3，5-0-(1，1，3，3-四異丙基-二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(1.0克，3.54毫摩爾)、和咪唑(0.965克，14.2毫摩爾)溶解在干燥二甲基甲酰胺(10毫升)中，溶液冷卻到3℃。然后，加入1，3-二氯-1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷(1.35毫升，3.90毫摩爾)，混合物在氬氣下攪拌3小時(shí)。用H2O(1毫升)使反應(yīng)熄滅并減壓濃縮。將殘余物分配在醋酸乙酯(150毫升)和H2O(50毫升)之間，并將醋酸乙酯層干燥(MgSO4)、過濾和濃縮。將粗產(chǎn)物溶解在醋酸乙酯中并通過閃式色譜法在裝有醋酸乙酯的硅膠(25.0克，2.5×15厘米)上純化。Rf＝0.70的餾分(硅膠，醋酸乙酯)提供1.48克(80%)所需物質(zhì)為白色固體。
UV最大值EtOH∶248.4nm。
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例416-甲氧基-9-〔2-O-(2-氨基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例3得到的9-(β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤(0.283克，1.0毫摩爾)、乙腈(15毫升)、靛紅酸酐(0.189克，1.1毫摩爾)碳酸氫鈉(84毫克，1.0毫摩爾)加入到一個(gè)裝配有溫度計(jì)、氬氣入口閥、磁攪拌器、冷凝器和加熱套的三頸圓底燒瓶中。懸浮液回流3.5小時(shí)，然后加入第二份等量的靛紅酸酐。再回流一小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻到室溫，過濾，濾液蒸發(fā)成泡沫玻璃狀物。經(jīng)閃式色譜法在硅膠上用CHCl3到9∶1CHCl3∶MeOH的分步梯度純化殘余物，得到53.1毫克脆性玻璃狀的2′-酯熔點(diǎn)91-93℃分析計(jì)算值 C18H19N5O5.0.3H2O.0.2CH4OC52.90;H4.98;N16.95實(shí)測(cè)值C53.23;H4.98;N17.21NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例426-甲氧基-9-〔2-(4-甲基苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例40的6-甲氧基-9-〔3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤(1.0克，1.9毫摩爾)，加入到一個(gè)裝有4-二甲氨基吡啶(0.02克，0.16毫摩爾)、乙腈(25毫升)及三乙胺(0.4毫升)的100毫升圓底燒瓶中，溶液在冰浴中于3℃冷卻5分鐘。加入甲苯甲酰氯(0.30毫升，2.3毫摩爾)并于3℃攪拌混合物3小時(shí)。然后，再加入三乙胺(0.5毫升)和甲苯甲酰氯(0.5毫升)并將混合物升到室溫。7小時(shí)之后，混合物用甲醇(2毫升)處理減壓濃縮，殘余物加到一個(gè)裝有CH2Cl2的硅膠閃式柱中(2.5×15厘米)。柱子用CH2Cl2∶MeOH(10∶1，400毫升)洗脫，得到0.90克(74%)的所需產(chǎn)物
分析計(jì)算值C31H46N4O7Si2C57.92;H7.21;N8.71實(shí)測(cè)值C57.69;H7.43;N8.40NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例436-甲氧基-9-〔2-(4-甲氧基苯甲?；?-3，5-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤將實(shí)施例40得到的6-甲氧基-9-〔3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤(1.0克，1.9毫摩爾)加入到一個(gè)裝有4-二甲氨基吡啶(0.02克，0.16毫摩爾)、乙腈(25毫升)及三乙胺(0.4毫升)的100毫升圓底燒瓶中，然后加入甲氧基苯甲酰氯(0.35毫升，2.5毫摩爾)。在室溫4小時(shí)之后，反應(yīng)物用甲醇(2毫升)處理并減壓濃縮。將殘余物加到一個(gè)裝有CH2Cl2∶MeOH(20∶1)的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×15厘米)中。用同樣的溶劑洗脫，得到0.930克(74%)所需產(chǎn)物分析計(jì)算值C31H46N4O8Si2.0.35H2OC55.97;H7.08;N8.42實(shí)測(cè)值C56.02;H7.01;N8.32實(shí)施例449-〔2-(4-氯苯甲?；?-3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-6-甲氧基-9H-嘌呤將實(shí)施例40得到的6-甲氧基-9-〔3，5-O-(1，1，3，3-四異丙基二硅氧烷-1，3-二基)-β-D-阿糖呋喃〕-9H-嘌呤(1.0克，1.9毫摩爾)加入到一個(gè)裝有4-二甲氨基吡啶(0.02克，0.16毫摩爾)、乙腈(25毫升)及三乙胺(0.4毫升)的250毫升圓底燒瓶中，溶液在冰浴中3℃冷卻5分鐘。加入4-氯苯甲酰氯(0.31毫升，2.5毫摩爾)并從冰浴中取出反應(yīng)混合物。室溫8小時(shí)之后，溶液用MeOH(3毫升)處理并減壓濃縮。殘余物溶解在CH2Cl2中并加到一個(gè)裝有同樣溶劑的硅膠閃式柱(25.0克，2.5×15厘米)中。柱子先用CH2Cl2(200毫升)，然后再用CH2Cl2∶MeOH(20∶1，400毫升)洗脫，得到1.05克(82%)薄層色譜(硅膠，CH2Cl2∶MeOH(20∶1)，Rf＝0.44)顯示均一的產(chǎn)物分析計(jì)算值C30H43N4O7ClSi2C54.32;H6.53;N8.45實(shí)測(cè)值C54.48;H6.72;N8.28實(shí)施例459-β-D-阿糖呋喃-6-二甲胺-9H-嘌呤的5′-單磷酸酯9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲胺-9H-嘌呤的5′-單磷酸酯的合成是用水痘帶狀皰疹病毒(VZV)的胸苷激酶(TK)催化，把腺苷5′-三磷酸酯(ATP)的末端磷酸酯基轉(zhuǎn)移到9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲胺-9H嘌呤的5′-OH基上而成的。(Fyfe，MoleeularPharmac21，432，1982)將50毫微摩爾9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲胺-9H嘌呤、55毫微摩爾ATP(Sigma Chemicals，St Louis，MO)、55毫微摩爾MgCl2及0.005國際單位的VZV TK加到0.5毫升0.02M的三(羥甲基)氨基乙烷-Hcl緩沖液(pH＝7.5)中。在21℃，將溶液溫孵2.5小時(shí)，然后通過“Centricon 10”濾器(一種10K分子量的YM膜，Amicon Inc，Danvers MA)以除去蛋白質(zhì)。該產(chǎn)物的特微為在陰離子交換薄層色譜上其紫外光吸收點(diǎn)以單磷酸酯典型的Rf移動(dòng)。
實(shí)施例466-甲氧基嘌呤阿糖苷5′單磷酸酯將核苷，6-甲氧基嘌呤阿糖苷(1.5克，4.9毫摩爾)溶解在15毫升磷酸三乙酯和4.8毫升三乙胺中。溶液冷卻到-10℃。攪拌，加入0.91毫升磷酰氯。10分鐘之后，再加入0.3毫升磷酰氯。再過10分鐘后，加入100毫升冰冷的0.5M三乙胺水溶液以終止反應(yīng)。上述全部試劑都從Aldrich購得。
通過離子交換色譜法在QAE-葡萄糖(Pharmacia)上分離最后反應(yīng)混合物的組分。用梯度為50mM到1M的碳酸氫銨溶液洗脫上述組分。6-甲氧基嘌呤阿糖苷5′-單磷酸酯僅約為從柱子洗脫出物質(zhì)的10%。為了從化合物中除去無機(jī)的正磷酸鹽，用BioRadAG-1XB樹脂以100mM-750mM碳酸氫銨分步梯度的離子交換色譜法。含該化合物的餾分在真空中蒸發(fā)一次，以除去過量的碳酸氫銨，然后凍干。
得到的6-甲氧基嘌呤阿糖苷5′-磷酸酯產(chǎn)率為3%(0.14毫摩爾，50毫克)。紫外光譜(pH＝7，最大值250nm，最小值221nm)和堿/磷酸根之比(1.00/1.08)與化合物的結(jié)構(gòu)一致。用堿性磷酸酶和5′-核苷酸酶可將該化合物分裂成核苷。
實(shí)施例476-甲氧基嘌呤阿糖苷5′-三磷酸酯將實(shí)施例46得到的6-甲氧基嘌呤阿糖苷5′-單磷酸酯(36毫克，93微摩爾)溶解在2毫升六甲基磷酰胺中。加入羰基二咪唑(82毫克，506微摩爾)在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。加入甲醇(0.032毫升，800微摩爾)混合物攪拌20分鐘。加入已溶解在1.5毫升六甲基磷酰胺中的焦磷酸三丁銨(220毫克，470微摩爾)并在室溫?cái)嚢杌旌衔?8小時(shí)，加入50毫升水使反應(yīng)終止。上述試劑除非另有標(biāo)明都是由Aldrich購買的，通過離子交換色譜法在QAE葡萄糖A-25(Pharmacia)上用50mM-800mM的碳酸氫銨分步梯度洗脫來純化5′-三磷酸酯。含該化合物的餾分在真空中蒸發(fā)一次以除去過量的碳酸氫銨，然后再溶解在水中并在-20℃冷凍貯存。
得到的6-甲氧基嘌呤阿糖苷5′-三磷酸酯，產(chǎn)率為60%(57微摩爾，30毫克)。紫外光譜(pH7，最大值250nm，最小值223nm)和堿/磷酸根之比(1.00/3.10)與該化合物的結(jié)構(gòu)一致。用堿性磷酸酶可將該化合物分裂成核苷，用磷酸二酯酶1可分裂成單磷酸酯。
實(shí)施例486-二甲氨基-9-(2-O-戊酰-β-D-阿糖)-9H--嘌呤將6-二甲氨基嘌呤阿糖苷(0.501克，1.67毫摩爾)溶解在20毫升吡啶和20毫升DME中。使溶液冷至4℃緩慢加入溶解在5毫升吡啶和5毫升DMF中的戊酐(0.43毫升，2.17毫摩爾AldrichChemicalCo.，Milwaukee，WI)。將溶液溫至40℃，2小時(shí)后，真空除去溶劑。殘余物在硅膠閃式柱(4.8×20厘米)上，用1.50毫升下述各種二氯乙烷∶甲醇v/v的混合物100∶0，98∶2，96∶4，94∶6，92∶8，90∶10，行閃式色譜分離。收集含產(chǎn)物的餾分并冷凍干燥，得到0.195克的6-二甲氨基-9-(2-O-戊酰-β-D-阿糖)-9H-嘌呤薄層色譜(TLC)RF0.55(硅膠，9∶1/二氯甲烷∶甲醇)。
分析C17H25N5O5.0.5H2O計(jì)算值C52.57;H6.75;N18.03;
實(shí)測(cè)值C52.61;H6.77;N17.99NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例496-二甲氨基-9-(2，3，5-三乙?；?β-D-阿糖)-9H-嘌呤將6-二甲氨基嘌呤阿糖苷(3.00克，10.0毫摩爾)溶解在保持4℃的20毫升乙腈和45毫升吡啶中。向反應(yīng)混合物中滴加在7毫升乙腈中的乙酰氯(2.85毫升，40.08毫摩爾AldrichChemicalCo.，Milwaukee，WI)。5小時(shí)后，真空45℃以下將溶劑除去，殘余物用高真空泵，干燥24小時(shí)。然后，干燥的殘余物在硅膠柱上(4.8×25厘米)，用9∶1/二氯甲烷∶甲醇閃式色譜分離。收集含產(chǎn)物的餾分并凍干，得到0.445克的6-二甲氨基-9-(2，3，5-三乙酰-β-D-阿糖)-9H-嘌呤薄層色譜，RF為0.61(硅膠，9∶1/二氯甲烷∶甲醇)。
分析計(jì)算值C18H23N5O7C51.30;H5.50;N16.62實(shí)測(cè)值C51.40;H5.55;N16.54。
NMR和質(zhì)譜與結(jié)構(gòu)一致。
實(shí)施例50片劑配方下面的配方A和B是將各成分與聚烯吡酮溶液用濕法制成顆粒。再加入硬脂酸鎂并壓制而制備的。
配方A毫克/片毫克/片(a)活性成份250250(b)乳糖B.P.21026(c)聚烯吡酮B.P.159(d)淀粉乙醇酸鈉2012(e)硬脂酸鎂53500300
配方B毫克/片毫克/片250250(a)活性成份150-(b)乳糖6026(c)微晶纖維素PH101159(d)聚烯吡酮B.P.2012(e)淀粉乙醇酸鈉53(f)硬脂酸鎂500300配方C毫克/片活性成份100乳糖200淀粉50聚烯吡酮B.P.5硬脂硬鎂4359將前述成份(C)用濕法造粒，然后壓制制備成片劑。在另一種制劑中，可用聚乙烯基吡咯烷酮代替聚烯吡酮B、P、。
下面的配方D和E是將混合的成分直接壓制制備的。配方E中的乳糖是直接壓制型的。(DairyCrest-“Zeparox”)。
配方D毫克/膠裹活性成份250預(yù)膠化的淀粉NF15150400配方E毫克/膠裹活性成份250乳糖150微晶纖維素100500配方F(控制釋放型配方)該配方是將下述成分用聚烯吡酮溶液濕法造粒、然后加入硬脂酸鎂并壓制制備的。
毫克/片(a)活性成份500(b)羥丙基甲基纖維素112(MethocelK4MPremium)(c)乳糖B.P.53(d)聚烯吡酮B.P.28(e)硬脂酸鎂7700
藥物在約6-8小時(shí)釋放，12小時(shí)后完全釋放。
實(shí)施例51膠裹配方配方A膠裹配方是將上述實(shí)施例50中的配方D的成份混合，然后裝入一個(gè)兩半部的硬質(zhì)膠裹中制成。配方B(在下)按類似方式制備。
配方B毫克/膠裹(a)活性成份250(b)乳糖B.P.143(c)淀粉乙醇酸鈉25(d)硬脂酸鎂2420配方C毫克/膠裹(a)活性成份250(b)聚乙二醇4000B.P.350600膠裹的制備是將聚乙二醇4000B.P.熔融，活性成份分散在熔體中，把熔體裝入兩半部的硬質(zhì)膠裹中。
配方D毫克/膠裹活性成份250
卵磷脂100花生油100450膠裹的制備是把活性成份分散在卵磷脂和花生油中，把該分散物裝入軟質(zhì)彈性膠裹中。
配方E(控制釋放型膠裹)下面的控制釋放型膠裹配方的制備是用擠出機(jī)擠壓成份a、b、c，然后將擠出物團(tuán)成球狀并干燥。之后，干燥的球粒用釋放控制膜(d)包衣并裝入兩片的硬質(zhì)膠裹中。
毫克/膠裹(a)活性成份250(b)微晶纖維素125(c)乳糖B.P.125(d)乙基纖維素13513實(shí)施例52眼藥水活性成份0.5氯化鈉(分析純)0.9乙基汞硫代水揚(yáng)酸鈉0.001純水到100mlpH調(diào)節(jié)到7.5
實(shí)施例53注射液配方活性成份0.200無菌無熱原磷酸鹽緩沖液(pH9.0)到10毫升將活性成份溶解在大部分的磷酸鹽緩沖液中(35-40℃)，然后加到一定的體積并通過無菌微孔濾器過濾到一個(gè)無菌的10毫升色琥珀玻璃小瓶(1型)中并用無菌罩封口，再上面密封。
實(shí)施例54肌內(nèi)注射液活性成份0.20克芐醇0.10克乙醇糖醛751.45克注射用水適量到3.00毫升將活性組分溶解在乙醇糠醛(glycofurol)中。加入芐醇并溶解，再加水到3毫升。然后，混合液通過無菌微孔濾器過濾并密封在無菌的3毫升琥珀色玻璃小瓶(1型)中。
實(shí)施例55糖漿懸浮液活性成份0.25克山梨醇液1.50克甘油2.00克可分散的纖維素0.075克苯甲酸鈉0.005克調(diào)味劑桃(Peach)17.42.31690.0125毫升純水適量到5.00毫升將苯甲酸鈉溶解在部分純水中并加入山梨醇溶液。加入活性成份并使分散。在甘油中分散增稠劑(可分散的纖維素)。將這兩種分散液混合并加純水到所需體積。可額外剪切懸浮液，以實(shí)現(xiàn)所需的進(jìn)一步增稠。
實(shí)施例56栓劑毫克/栓劑活性成份(63μm)＊250硬脂肪，BP(WitepsolH15-DynamitNoBel)17001950＊使用粉末狀的活性成份，其中至少90%的顆粒的粒徑為63微米或更小。
將1/5的甘油三酯(WitepsolH15)在最高溫度為45℃蒸汽套鍋中熔化。用一個(gè)配有刻頭的銀聲波器(Silverson)將活性成份通過-200微米篩并加到熔融的基底中，直至成為一均勻分散體?；旌衔锉３衷?5℃，剩下的WitepsolH15加入到懸浮液中并攪拌以確保均勻混合。將全部懸浮液通過250微米的不銹鋼濾網(wǎng)，在連續(xù)攪拌下，冷卻到40℃。在溫度38℃-40℃時(shí)，把2.02克的混合物裝填到適宜的塑料模具中。將栓劑冷卻到室溫。
實(shí)施例57陰道栓毫克/陰道栓活性成份63微米250
無水右旋糖380馬鈐薯淀粉363硬脂酸鎂71000直接混合上述成份，直接壓制所得的混合物制備成陰道栓。
實(shí)施例58抗病毒毒性和生物藥效率試驗(yàn)抗水痘帶狀皰疹病毒活性的測(cè)定按以下改進(jìn)的ELISA方法(Berkowitz，F(xiàn)，F(xiàn)，and，Levin，M，J，(1985)Antimicrcb，AgentsandChemother，28207-210)評(píng)價(jià)化合物對(duì)VZV(Oka株)復(fù)制的抑制效果。感染是在藥物存在的情況下，而不是在藥物加入之前開始的。在藥物和病毒伴隨未感染的細(xì)胞(人二倍體的成纖維細(xì)胞，MRC-5株)3天溫孵后，在戊二醛固定前將該96-孔板以200×g離心5分鐘以沉淀分離的細(xì)胞。本ELISA程序用一種堿性磷酸酶一共軛的抗體IgG作為第二抗體。按別處描述的方法測(cè)定結(jié)合的堿性磷酸酶對(duì)磷酸對(duì)-硝基苯酯的分裂速率(Tadepalli，S.M.，Quinn琑.P.，andAverett，D.R.1986.Antimicrob.AfentsandChemother.2993-98)。未感染細(xì)胞的使用是為了取得空白反應(yīng)速率，該速率要從有病毒存在時(shí)得到的速率中扣除。這種測(cè)定法適用于檢查那種開始每孔受到15-3600傳染性粒子感染的，培養(yǎng)物的子代病毒。
未感染哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長抑制性的測(cè)定通過標(biāo)準(zhǔn)數(shù)目的細(xì)胞在不同稀釋度化合物中暴露3天，測(cè)定細(xì)胞數(shù)的方法(Rideout，J.L，Krenitsky，T.A.，
Koszalka，G.W.，Cohn，N.K.，Chao，E.Y.Elion，G.B.，Latter，V.S.，andWilliams，B.B，(1982)J.MedChe.251040-1044)，測(cè)定候選化合物仰制D98細(xì)胞(人)和L細(xì)胞(鼠)生長能力。然后，將細(xì)胞數(shù)與不存在化合物時(shí)得到的細(xì)胞數(shù)加以比較。細(xì)胞計(jì)數(shù)即可在單細(xì)胞層受胰蛋白酶作用后進(jìn)行直接粒子計(jì)數(shù)，也可以通過分光光度法測(cè)定被細(xì)胞吸收的活性染色的量來完成。兩種方法均可得到可比較的結(jié)果。
數(shù)據(jù)分析從50%對(duì)照值(IC50)中得到的化合物的濃度，可以從化合物濃度對(duì)對(duì)照值(百分率)的對(duì)數(shù)曲線直接內(nèi)插，或由按同樣算法分析數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)程序來計(jì)算，在這些計(jì)算中，對(duì)照數(shù)據(jù)的采用范圍在20%-80%。
實(shí)施例 VZV(IC50μm) 細(xì)胞毒性(與100μm的對(duì)照百分率)D-98細(xì)胞L細(xì)胞13938721856930.896724610797515050636147ACV2010050
生物藥效率鑒定和數(shù)據(jù)徑胃管，用管飼法將實(shí)施例3化合物剖量10毫克/千克或?qū)嵤├?6、24、32化合物摩爾當(dāng)量劑量給予兩只朗-伊文思(Long-Evans)大鼠。將動(dòng)物放置在代謝籠子里并在服藥后0-24小時(shí)和24-48時(shí)收集尿。尿樣用反相HPLC分析。結(jié)果以48小時(shí)內(nèi)尿中回收的實(shí)施例3化合物的劑量%表示。
實(shí)施例%劑量34.9/2.51611.7247.93215.9
權(quán)利要求
1.一種制備式Ⅰ(a)化合物及其生理上可接受的衍生物(但不包括式Ⅰ(a)化合物中R1為氯或氟R2為氯、氟、氫或氨基的2′，3′，5′，-三乙酸酯和2′，3′，5′-三芐基衍生物)的方法，
式中R1代表鹵素，C1-5烷氧基；鹵素取代的C1-5烷氧基；氨基單或雙取代有C1-5烷基、一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-5烷基、或C3-6環(huán)烷基、或?yàn)榄h(huán)狀氨基部分，該環(huán)含4-7個(gè)碳原子和可任意有雙鍵和/或另一個(gè)氮原子；R2代表氫，鹵素或氨基，當(dāng)R2為氫時(shí)，R1不代表氯、甲氧基、甲氨基、乙氨基、二甲氨基、哌啶子基或吡咯烷基；當(dāng)R2為氨基時(shí)，R1不代表氯或甲氨基，該方法包括方法A和方法B中任一種A、將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)
式Ⅱ中R1和R2定義如上
式Ⅲ中X代表嘧啶或嘌呤堿基(不是式(Ⅱ)化合物)；B、將式(Ⅳ)化合物
(式中Z是離去基團(tuán)，R2定義如上)與一種能在6-位引入必需基團(tuán)的化合物反應(yīng)；并可任意地在反應(yīng)之后或同時(shí)，當(dāng)?shù)玫降幕衔锸鞘?Ⅰ)化合物時(shí)，將它轉(zhuǎn)變成其可作藥用的衍生物，或當(dāng)?shù)玫降幕衔锸强勺魉幱玫难苌飼r(shí)，將它轉(zhuǎn)變成一種不同的可作藥用的衍生物或式(Ⅰ)的化合物。
2.一種制備式Ⅰ(b)化合物的可藥用衍生物的方法，
式中R1代表鹵素原子，C1-5烷氧基;鹵素取代的C1-5烷氧基;氨基單或雙取代有C1-5烷基、一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-5烷基、或C3-6環(huán)烷基、或是環(huán)狀氨基部分該環(huán)含4-7個(gè)碳原子和可任意含有雙鍵和/或另一氮原子;R2代表氫，鹵素或氨基;所述衍生物中，2′，3′，5′-三乙酸酯和2′，3′，5-三芐基衍生物(其中R1為氯或氟、R2為氯、氟、氫或氨基)除外，所述方法包括(1)，通過下述A和B中任一種方法制備式Ⅰ(b)化合物A、將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng);
(式中R1和R2定義如上)，
式Ⅲ中X代表嘧啶或嘌呤堿基(不是式(Ⅱ)的化合物);或B、將式(Ⅳ)化合物
(式中Z是離去基團(tuán)，R2定義如上)與能在6-位上引入必需基團(tuán)的化合物反應(yīng);和(2)，在反應(yīng)后或同時(shí)，當(dāng)?shù)玫降幕衔锸鞘舰?b)化合物時(shí)，將它轉(zhuǎn)變成其可作藥用的衍生物;或當(dāng)?shù)玫降幕衔锸强勺魉幱玫难苌飼r(shí)，將它轉(zhuǎn)變成式Ⅰ(b)化合物的一種不同的可作藥用的衍生物。
3.按照權(quán)利要求2的化合物票阜椒?，其咒\勺饕┯玫難萇鍤且恢矚ィ∽賊人狨?，其中酯基的非赳債部焚|(zhì)侵繃椿蛑Я賜榛?，烷氧烷基，芳o(jì)榛佳躉榛?，匪E扇我餿〈新彼?、C1-4烷基或C1-4烷氧基、硝基或氨基;磺酸酯，例如烷基磺酰，或烷基芳磺酰;氨基酸酯;和單一、雙-或三-磷酸酯。
4.按照權(quán)利要求2制備9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基-9H-嘌呤的生理上可接受的衍生物的方法。
5.按照權(quán)利要求2的化合物制備方法，其中可作藥用的衍生物是一種酯，選自9-(5-0-(4-甲基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤;9-(5-0-(4-氨基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤;6-甲氧基-9-(2-0-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤。
6.一種制備含式(Ⅰ)化合物的藥物配方的方法，
其中R1代表鹵原子，C1-5烷氧基;鹵素取代的C1-5烷氧基;氨基單或雙取代有C1-5烷基、一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的C1-5烷基、或C3-6環(huán)烷基或?yàn)榄h(huán)狀氨基部分該環(huán)含4-7個(gè)碳原子和可任意含有雙鍵和/或另一氮原子;R2代表氫、鹵素或氨基，該方法包括(1)通過下述A和B任一種方法制備所述的式(Ⅰ)化合物，A、使式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng);
式中R1和R2定義如上
式Ⅲ中X代表嘧啶或嘌呤堿(不是式(Ⅱ)的化合物)或B、使式(Ⅳ)化合物
(式中Z是離去基團(tuán)，R2定義如上)與一種能在6-位上引入必需基團(tuán)的化合物反應(yīng);而且可任意在反應(yīng)后或反應(yīng)同時(shí)，當(dāng)?shù)玫降幕衔锸且环N式(Ⅰ)化合物時(shí)，將它轉(zhuǎn)變成其可作藥用的衍生物或當(dāng)?shù)玫降幕衔锸且环N可作藥用的衍生物時(shí)，將它轉(zhuǎn)變成一種不同的可作藥用的衍生物或式(Ⅰ)化合物;(2)將得到的式(Ⅰ)化合物與至少一種藥用賦形劑結(jié)合，形成所述的藥物配方。
7.按照權(quán)利要求6的制備藥物配方的方法，其中式(Ⅰ)化合物是9-β-D-阿糖呋喃-6-甲氧基-9H-嘌呤。
8.按照權(quán)利要求6的制備藥物配方的方法，其中式(Ⅰ)化合物是9-β-D-阿糖呋喃-6-二甲氨基-9H-嘌呤。
9.按照權(quán)利要求6的制備藥物配方的方法，其中式(Ⅰ)化合物選自9-(5-0-(4-甲基苯甲?；?-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤;9-(5-0-(4-氨基苯甲酰基)-β-D-阿糖呋喃)-6-甲氧基-9H-嘌呤;和6-甲氧基-9-(2-0-戊?；?β-D-阿糖呋喃)-9H-嘌呤。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于某些取代的嘌呤阿拉伯糖苷類及其可作藥用的衍生物特別是酯類；以及它們對(duì)治療和預(yù)防水痘帶狀皰疹病毒和巨細(xì)胞病毒感染的用途。本發(fā)明還包括藥物配方以及這些化合物的制備方法。
文檔編號(hào)A61K31/7042GK1031233SQ88103820
公開日1989年2月22日 申請(qǐng)日期1988年5月27日 優(yōu)先權(quán)日1987年5月30日
發(fā)明者托馬斯·安東尼·克蘭尼斯基, 喬治·沃爾特·科紹卡, 琳達(dá)·阿丁頓·瓊斯, 德夫龍·倫道夫·艾夫列特, 阿倫·雷·穆爾曼 申請(qǐng)人:惠爾康基金會(huì)集團(tuán)公司