專利名稱:免疫增強(qiáng)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的蘑菇提取物超微粒體(超微粒子化體)，新型蘑菇來源成分的超微粒體(優(yōu)選將蘑菇用水提取得到的成分進(jìn)行超微?；幚?或新型β-葡聚糖超微粒體，含有這些新型超微粒體的組合物(該超微粒體分散體等)，以這些超微粒體或組合物為有效成分的免疫增強(qiáng)劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑(免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑)、醫(yī)藥組合物(特別是抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥及抗過敏性疾病劑等用于治療因免疫功能異常而引起的疾病的藥劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑)。)、以及飲食品(保健食品、功能性食品等)和可作為其有效成分使用的超微粒體或含有該超微粒體的組合物的制備方法。
本發(fā)明的免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑可以醫(yī)藥品(醫(yī)藥組合物)、飲食品(保健食品、功能性食品等)等各種形式使用，尤其對需增強(qiáng)或調(diào)節(jié)免疫功能而進(jìn)行疾病的治療、改善、防止發(fā)展和預(yù)防患者伴隨有免疫功能異常的其它疾病等、或者針對健康人通過增強(qiáng)或調(diào)節(jié)免疫功能而預(yù)防伴隨有免疫功能異常的各種疾病、通過改善免疫功能而改善輕微的疾病等有用。
本發(fā)明還包括對腫瘤、感染癥、病毒性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、過敏性疾病、消化系統(tǒng)疾病(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等)的治療、改善、防止發(fā)展和預(yù)防等有用的免疫增強(qiáng)方法或免疫調(diào)節(jié)方法，以上述新型超微粒體作為其有效成分用于上述免疫增強(qiáng)劑、免疫調(diào)節(jié)劑和各種藥劑、飲食品等、以及醫(yī)藥品的制備。
背景技術(shù)：
由于蘑菇或其成分中含有各種藥效成分，所以已經(jīng)有含有某種蘑菇加工成粉末的制品或其熱水提取物的健康食品。但是，以往的制品沒有有效利用其各種成分。
因此，期待與以往的制品相比，能以醫(yī)藥品、或保健食品和功能性食品的形式，有效利用蘑菇或其類似原料的各種成分，以維持改善動(dòng)物特別是人的健康，作為醫(yī)藥品用于各種疾病的治療、改善等。
發(fā)明的目的本發(fā)明的目的是提供以簡便的制備手段有效利用蘑菇或其類似原料的各種成分，特別是有效利用藥效成分的飲食品(保健食品、功能性食品等)或醫(yī)藥品(醫(yī)藥組合物)。
發(fā)明公開為了解決上述課題，本發(fā)明者對已有產(chǎn)品中各種成分的利用進(jìn)行了深入調(diào)查，發(fā)現(xiàn)，蘑菇的各種成分在動(dòng)物體內(nèi)不能有效吸收，結(jié)果在體內(nèi)得不到有效利用。進(jìn)一步進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)將蘑菇來源的成分，尤其是將蘑菇的水提取物、優(yōu)選熱水提取物，制備成粒徑更細(xì)小的超微粒子(超微粒體化)，例如，以分散到水中(分散化)測定時(shí)所得粒子的平均粒徑表示，優(yōu)選平均粒徑為10μm以下，更優(yōu)選1μm以下，更進(jìn)一步優(yōu)選0.01-1μm的膠束化(ミセル化)狀態(tài)時(shí)，顯著改善粘膜的吸收，結(jié)果可以增強(qiáng)或調(diào)節(jié)免疫功能。進(jìn)一步還發(fā)現(xiàn)，超微粒體化的β-葡聚糖(包括蘑菇來源的β-葡聚糖，以及非蘑菇來源的β-葡聚糖)具有同樣的活性和作用。
基于以上各種發(fā)現(xiàn)，完成了本發(fā)明。尤其可以期待，在體內(nèi)通過粘膜(特別是小腸)吸收而刺激增強(qiáng)粘膜免疫(增強(qiáng)全身免疫)，從而達(dá)到抗腫瘤效果和艾滋等病毒和細(xì)菌等引起的感染性疾病的治療、改善效果。因此，可以期待，該超微粒體可作為免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑使用，特別是以醫(yī)藥組合物、飲食品(保健食品等)等形式使用。
也就是說，本發(fā)明的實(shí)施方案之一是，以將選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分進(jìn)行超微粒體化為特征的超微粒體，例如將蘑菇來源的成分和β-葡聚糖進(jìn)行超微粒體化為特征的超微粒體。另外，本發(fā)明的先行技術(shù)有，裝入脂質(zhì)體的β-葡聚糖(參照國際專利公開號WO 01/85141號公報(bào))，但是，本發(fā)明將選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分進(jìn)行超微粒體化，沒必要用先行技術(shù)中所必需的將β-葡聚糖裝入脂質(zhì)體的操作，及通過凝膠柱等分離沒有裝入脂質(zhì)體內(nèi)的β-葡聚糖和脂質(zhì)體的操作，從用更簡便的工序制備這一點(diǎn)來講，與先行技術(shù)明顯不同。因此，本發(fā)明不包含先行技術(shù)中記載的以將有效成分β-葡聚糖裝入脂質(zhì)體為特征而構(gòu)成的脂質(zhì)體形式。
本發(fā)明中，“蘑菇來源的成分”指蘑菇產(chǎn)生的成分的總稱。
對于蘑菇來源的成分，只要是包含在蘑菇內(nèi)的成分或者蘑菇產(chǎn)生的成分即可沒有特殊限制。例如，蘑菇的提取物或者蘑菇的水提取物等包含數(shù)種包含在蘑菇內(nèi)的成分均可。另外，如特公昭42-12000號公報(bào)、特公昭46-37873號公報(bào)、特開平10-287584號公報(bào)等記載的蘑菇菌絲體培養(yǎng)法中，培養(yǎng)液中產(chǎn)生出的培養(yǎng)產(chǎn)物也可以。β-葡聚糖這樣的單一成分也可以。另外，β-葡聚糖含有物也可以。
另外，本發(fā)明中所使用的β-葡聚糖可以是上述蘑菇來源的成分，也可以是不包含在蘑菇來源成分中的β-葡聚糖。
不包含在蘑菇來源成分中的β-葡聚糖有，例如酵母來源的成分(啤酒酵母等)、真菌來源的成分、細(xì)菌來源的成分、植物來源的成分等。
對于蘑菇的提取物而言，從多多獲取本發(fā)明中的有效成分這一點(diǎn)來講，優(yōu)選水的提取物(包括用水、熱水、包含水的溶液等提取的提取物)。蘑菇的水提取物，只要是用水從蘑菇提取出的成分或含有這些成分的物質(zhì)即可，例如可舉出，用濾紙(對所使用的濾紙的種類沒有特殊限制，可根據(jù)需要進(jìn)行選擇)等對用水從蘑菇提取出的提取液進(jìn)行過濾而得的濾液，其中所包含的成分(固態(tài)或水溶液狀態(tài)等)，該濾液中其后用水提取出的成分的一部分以微粒子(粒徑100μm以上的凝集物的析出物等)的分散狀態(tài)存在的水提取物等。這樣的水提取物其后提供到本發(fā)明中的超微粒化工程中。將含有這些成分的水溶液叫做蘑菇水提取物含有水溶液，不過這些成分沒有必要一定完全溶解在水溶液中。
另一方面，對供于進(jìn)行超微粒子化的起始物質(zhì)β-葡聚糖而言，可使用與上述蘑菇提取物時(shí)同樣的β-葡聚糖提取物(β-葡聚糖抽提成分)?？墒褂靡阎奶崛》椒?，例如用水或熱水提取的方法(參照Biol.Pharm.Bull.，23(7)，866，2000)和酶處理法等(參照特開平5-268905號，特開平10-287584號公報(bào))，作為β-葡聚糖的提取方法。將含有β-葡聚糖提取物的水溶液叫做β-葡聚糖提取物含有水溶液，不過β-葡聚糖提取物沒有必要一定完全溶解。
將選自上述蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分進(jìn)行超微粒子化時(shí)，優(yōu)選該成分在水溶液中形成凝集體。更優(yōu)選，該凝集體至少具有50μm(50μm以上)的粒徑。
將超微粒體分散到水中進(jìn)行測定時(shí)，上述本發(fā)明的超微粒子化粒子的平均粒徑優(yōu)選10μm以下，更優(yōu)選1μm以下，更進(jìn)一步優(yōu)選0.01-1μm左右。應(yīng)用粒度分布測定儀可容易求出其平均粒徑。
以下示例幾個(gè)這樣超微粒體的例子。
(1)優(yōu)選在水溶液中從選自上述蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分中得到的、用分散劑處理后的狀態(tài)或經(jīng)分散化狀態(tài)的超微粒體。
(2)將分散劑混合到含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分的水溶液中時(shí)所得，含有平均粒徑為10μm以下的粒子的超微粒體。
(3)上述(1)或(2)的超微粒體，進(jìn)行微粉碎化處理時(shí)可得到，含有平均粒徑為1μm以下的粒子。
(4)上述(3)的超微粒體，平均粒徑為0.01-1μm。
(5)上述(1)-(4)任一項(xiàng)的超微粒體，含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分的水溶液為，用濾紙等從蘑菇的水或熱水提取液過濾后而得到的蘑菇水提取物含有水溶液。
(6)上述(5)的超微粒體，蘑菇提取物含有水溶液，是用濾紙等從蘑菇的水或熱水提取液過濾后，對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻而得到的凝集物含有水溶液。
(7)上述(1)-(6)任一項(xiàng)的超微粒體，含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分的水溶液為β-葡聚糖的水溶液或含有β-葡聚糖的水溶液。
β-葡聚糖既可以是蘑菇來源成分中包含的成分，也可以是其中不包含的成分。
對含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分的水溶液沒有特殊限制，只要是含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖的成分的水溶液即可，這些成分沒有必要完全溶解在水溶液中。例如，可以是蘑菇提取物含有水溶液或蘑菇水提取物含有水溶液，也可以是含有蘑菇菌絲體培養(yǎng)產(chǎn)物的培養(yǎng)液。另外，蘑菇來源成分以外的成分沒必要僅為水，因此可以是至少含有水和選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分的溶液。同樣，對包含β-葡聚糖(成分)的水溶液也沒有特殊限制，只要是含有β-葡聚糖的水溶液即可，β-葡聚糖沒必要完全溶解到水溶液中，可使用β-葡聚糖含有水溶液。如前所述，該β-葡聚糖既可是蘑菇來源的成分，也可是蘑菇來源的成分中不包含的物質(zhì)。因此，可使用前面所講的β-葡聚糖提取成分。
關(guān)于分散劑的使用量，以含有選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液中所含全糖(糖的總量)為1，按重量比計(jì)，優(yōu)選最多混合該分散劑100(100以下)份，更優(yōu)選10以下，更進(jìn)一步優(yōu)選0.05-5左右。
對水溶液中所含選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分的含量沒有特殊限制，從溶解度考慮，優(yōu)選全糖的濃度最多50mg/ml(50mg/ml以下)，更優(yōu)選0.5-50mg/ml左右，以此來設(shè)定水溶液中所含選自蘑菇來源的成分和β-葡聚糖中的成分的含量。
對分散劑的種類沒有特殊限制，包括表面活性劑、高分子、糖類、糖醇類、甘油酯、酸、堿、鹽類等。其中，優(yōu)選以表面活性劑為代表的乳化劑，更優(yōu)選使用卵磷脂。
本發(fā)明的超微粒體，可應(yīng)用乳化劑達(dá)到膠束化狀態(tài)使用。
對于微粉碎化處理方法沒有特殊限制，優(yōu)選濕式粉碎法，有高壓乳化機(jī)、媒質(zhì)磨、超聲波等。例如，若用高壓乳化機(jī)可制備出如前所述的1μm以下的超微粒子(超微粒體)。此時(shí)，所采用的乳化壓，優(yōu)選300kgf/cm2以上，更優(yōu)選500kgf/cm2，更進(jìn)一步優(yōu)選800kgf/cm2以上，隨處理次數(shù)的增加可降低乳化壓。
所講超微粒體，優(yōu)選將分散劑混合到用濾紙等將蘑菇的水或熱水提取液或β-葡聚糖提取液過濾后所得的蘑菇提取物或β-葡聚糖提取物含有水溶液中，優(yōu)選進(jìn)行攪拌而得的。如此，可得到所含粒子的平均粒徑為10μm以下的超微粒體。
此時(shí)，作為蘑菇提取物含有水溶液，可使用用濾紙等將蘑菇的水或熱水提取液過濾后，對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻所得的凝集物含有水溶液，或使用保持過濾后的狀態(tài)原樣，在對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻時(shí)得到前述凝集物的那樣的水溶液。對于β-葡聚糖進(jìn)行同樣的處理，可制備、使用上述同樣的水溶液。
作為免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑用時(shí)，上述超微粒體的水溶液或分散化物的形態(tài)可以是，例如上述有效成分經(jīng)超微粒子化的水溶液或分散化物(上述蘑菇提取物的分散劑處理等)的形態(tài)，或是希望達(dá)到膠束化狀態(tài)。其中，使用蘑菇提取物或β-葡聚糖的分散劑處理物是簡便的。如此，具有經(jīng)超微粒子化的各種形態(tài)的物質(zhì)也包含在本發(fā)明的超微粒體中。
從有效提取有效成分這一點(diǎn)來看，上述熱水提取物，例如蘑菇的熱水提取物優(yōu)選將蘑菇粉碎后用熱水進(jìn)行提取。
上述超微粒體可以通過動(dòng)物，尤其是人的小腸粘膜吸收，可達(dá)到免疫增強(qiáng)效果或免疫調(diào)節(jié)效果。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是免疫增強(qiáng)劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑(免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑)，其特征在于，它含有上述任一所述的超微粒體。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是醫(yī)藥組合物(藥劑，醫(yī)藥品)，其特征在于，它含有上述任一所述的超微粒體。此時(shí)，也可含有制劑學(xué)上允許的載體、增量劑(或稀釋劑)等。
另外，上述免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑可以飲食品形態(tài)使用。
上述藥劑的具體例包括，抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑，抗糖尿病藥及抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是飲食品，其特征在于，它含有上述任一所述的超微粒體(本發(fā)明的超微粒體)。超微粒體的含有量無限制，但保健食品等飲食品中，用全糖換算，希望含該超微粒體為0.01-80重量％左右，優(yōu)選0.05-20重量％左右。
所講飲食品包括食品和飲料。本發(fā)明的飲食品可用于保健食品、功能性食品、保健飲料、功能性飲料等。特別適于癌癥、細(xì)菌感染性疾病、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、過敏性疾病、消化系統(tǒng)疾病(過敏性腸道癥候群(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等)等疾病患者使用。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是超微粒體含有組合物，即含有超微粒體的水溶液(分散體等)，其特征在于，它含有上述本發(fā)明的超微粒體處于分散化的水溶液。
該分散體等可用于與上面同樣的醫(yī)藥組合物(醫(yī)藥品)。此時(shí)，也可包含制劑學(xué)上允許的載體或增量劑。
該分散體等可用于與上面同樣的飲食品。該情況下，用全糖換算，飲食品中可含0.05-5重量％的該組合物。
本發(fā)明的飲食品可用于保健食品、功能性食品、保健飲料、功能性飲料等。特別適于癌癥、細(xì)菌感染性疾病、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、過敏性疾病、消化系統(tǒng)疾病(過敏性腸道癥候群(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等)等疾病患者使用。
關(guān)于組合物的成分含量，每100g組合物，優(yōu)選含糖1-20000mg左右，更優(yōu)選含10-1000mg左右；優(yōu)選含分散劑1-20000mg左右，更優(yōu)選含10-1000mg左右。
對超微粒體含有組合物沒有特殊限制，只要是含有蘑菇來源成分、β-葡聚糖等的超微粒體的組合物即可。優(yōu)選含有蘑菇來源成分或β-葡聚糖的超微粒體及分散劑的水溶液，更優(yōu)選將分散劑混合到含有該成分的水溶液中而制備出的超微粒體及超微粒體處于分散化的水溶液等。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是超微粒體的制備方法，其特征在于，將選自蘑菇來源成分及β-葡聚糖中的成分，即蘑菇來源成分或β-葡聚糖實(shí)行超微粒體化工序，例如，對蘑菇進(jìn)行水提取處理后，將所得水提取物進(jìn)行超微粒體化工序的制備超微粒體的方法。
特別是，用濾紙將蘑菇的水或熱水提取液過濾后，向所得蘑菇提取物含有水溶液中混合分散劑，優(yōu)選通過攪拌，可制備出所含粒子的平均粒徑為10μm以下的超微粒體。該情況下，如前所述，作為提取物含有水溶液，可使用用濾紙將蘑菇的水或熱水提取液過濾后，對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻所得的凝集物含有水溶液，或使用保持過濾后的狀態(tài)原樣，在對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻時(shí)得到前述凝集物的那樣水溶液。對于β-葡聚糖也可同樣制備。
超微粒體化的工序可包括，將分散劑混合到如前所述的含有選自蘑菇來源成分及β-葡聚糖中的成分，如含有蘑菇來源成分的水溶液中，制備出平均粒徑為10μm以下的粒子的工序；還可包括通過微粉碎化處理，如通過高壓乳化機(jī)處理的工序等而制備出平均粒徑為1μm以下的粒子的工序。
通過這些方法，可獲得優(yōu)選具有免疫增強(qiáng)活性和/或免疫調(diào)節(jié)活性的超微粒體(超微粒子)。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是超微粒體含有組合物的制備方法，其特征在于，將選自蘑菇來源成分及β-葡聚糖中的成分，例如蘑菇來源成分，提供到超微粒體化工序。
該方法可按照上述超微粒體的制備方法進(jìn)行。作為超微粒體化的工序，可同樣采用將分散劑混合到含有選自蘑菇來源成分及β-葡聚糖的成分的水溶液中，制備出平均粒徑為10μm以下的粒子的工序；以及通過微粉碎化處理，如通過高壓乳化機(jī)處理而制備出平均粒徑為1μm以下的粒子的工序。另外，作為選自蘑菇來源成分及β-葡聚糖中的成分，可使用將蘑菇進(jìn)行水或熱水提取后所得的水或熱水提取物；作為含有蘑菇來源成分的水溶液，可采用用濾紙將蘑菇的水或熱水提取物進(jìn)行過濾后所得的蘑菇提取物含有水溶液。對于β-葡聚糖提取物，也可同樣制備。
通過這些方法，可獲得優(yōu)選具有免疫增強(qiáng)活性和/或免疫調(diào)節(jié)活性的分散體等。
以上方法中，關(guān)于平均粒徑的測定值，與前面同樣，用分散到水中進(jìn)行測定時(shí)粒子的平均粒徑表示。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是免疫增強(qiáng)方法或免疫調(diào)節(jié)方法，其特征在于，將上述本發(fā)明的超微粒體攝取或施用到體內(nèi)。對腫瘤、感染癥、病毒性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、過敏性疾病、消化系統(tǒng)疾病(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等)等疾病的治療、改善、防止進(jìn)展、預(yù)防等極其有用。
對于攝取或施用方案，可采用上述免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑等，或上述抗腫瘤劑、抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥及抗過敏性疾病劑、抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)。特別優(yōu)選使用上述醫(yī)藥組合物和飲食品的形式。
本發(fā)明的其它實(shí)施方案是關(guān)于上述新型超微粒體在上述免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑的使用；或上述新型超微粒體在上述抗腫瘤劑、抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥及抗過敏性疾病劑、抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等的使用，及上述超微粒體在醫(yī)藥品制備中的應(yīng)用。
關(guān)于免疫增強(qiáng)劑、免疫調(diào)節(jié)劑，或上述抗腫瘤劑、抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥及抗過敏性疾病劑、抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等如前述說明，此外如前所述，作為其優(yōu)選的例子可舉出，其醫(yī)藥組合物的形式或者用于飲食品的形式。
附圖簡述[
圖1]圖1表示實(shí)施例1中香菇提取物及膠束化香菇提取物的粒度分布。
實(shí)施例1中香菇提取物的乳化劑處理“膠束化”中，香菇提取物(左圖1-a)及膠束化香菇提取物(本發(fā)明品)(右圖1-b)的粒度分布圖。橫軸表示粒徑(μm)，縱軸(左)用棒狀圖表示粒子的頻度(％)，縱軸(右)用曲線表示粒子的頻度累積(％)。
圖2表示實(shí)施例2中β-葡聚糖溶液和膠束化β-葡聚糖的粒度分布。
該圖表示實(shí)施例2中β-葡聚糖的乳化劑處理“微粒化”過程中，β-葡聚糖溶液(左圖2-a)及膠束化β-葡聚糖(本發(fā)明品)(右圖2-b)的粒度分布。橫軸表示粒徑(μm)，縱軸(左)以棒狀圖表示粒子的頻度(％)，縱軸(右)以曲線表示粒子的頻度累積(％)。
實(shí)施方案以下，對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行說明。以優(yōu)選的、代表性的例子為主對本發(fā)明進(jìn)行說明，但這代表本發(fā)明的優(yōu)選代表例，本發(fā)明并不限定于這些代表例。
(超微粒體；蘑菇提取物、β-葡聚糖提取物超微粒體等)首先，以蘑菇提取物超微粒體的制備為中心進(jìn)行說明，以此來說明本發(fā)明的超微粒體。
本發(fā)明中對蘑菇的種類沒有特殊限制。對抽提所使用的部位也沒有特殊限制。可使用供食用的蘑菇。代表性的種類如下所示，但并不限定于此。
另外，本發(fā)明中的蘑菇是能形成子實(shí)體的菌類。
Lentinus edodes(香菇)Pleurotus ostreatus(傘菌)Pholiota nameko(蕈樸)Flammulina velutipes(火菇)Tricholoma matsutake(松菌)Lyophyllum shimeji(ホンシメジ)Schizophyllum commune(スエヒロタケ)Crepidotus variabilis(チャヒラタケ)Lyophytlum ulmarium(シロタモギタケ)Grifola umbellata(チエレイマイタケ)G.frondosa(マイタケ)Coriolus versicolor(カヮラタケ)Fomes fomentarius(ツリガネタケ)Volvavella volvacea(フクロタケ)Auricularia aurcula-judae(キクラゲ)Ganoderma lucidum(マンネンタケ)G.applanatum(コフキサルノコシカケ)Fomitopsis pinicola(ツガサルノコシカケ)Dictyophora indusiata(キヌガサタケ)Sparassis crispa(ハナビラタケ)Agaricus blazei(ァガリクスタケ；姬マツタケ)Peziza vesiculosa(オオチャフンタケ)
對蘑菇的部位沒有特殊限制，可以是上面所講的子實(shí)體、菌絲體等。生蘑菇的各成分依蘑菇的種類而不同，例如香菇的子實(shí)體中水分約占90％(重量)，糖質(zhì)占約5％(重量)，蛋白占約2％(重量)，纖維質(zhì)占約1％(重量)，其它約占2％(重量)。因此，本發(fā)明中，有效成分是除去水分后的成分中經(jīng)水(熱水)提取出的成分的超微粒體。
另一方面，對β-葡聚糖沒有特殊限制，可采用蘑菇來源的成分、酵母來源的成分、真菌來源的成分、細(xì)菌來源的成分、植物來源的成分等。
獲得蘑菇來源的成分或β-葡聚糖的提取物無特殊困難。例如，應(yīng)用熱水等水對蘑菇進(jìn)行提取。其間，將粉碎后的物品進(jìn)行熱水提取的話提取工序較容易。使用熱水時(shí)，溫度采用60-100℃左右。抽提工序后，用濾紙(對所使用的濾紙沒有特殊限制，可根據(jù)需要選擇)進(jìn)行過濾而得的濾液是含有微粒子的懸濁液，再有隨后進(jìn)行濃縮、冷卻等得到含凝集物的溶液，無論前者還是后者，均包括在本發(fā)明的提取物中。
另外，本發(fā)明中所講的提取物，可以是上述用水(熱水等)進(jìn)行抽提工序中水中所含有的成分(沒必要一定完全溶解)，因此，例如抽提工序中后用濾紙等進(jìn)行過濾而得的濾液以及通過濃縮、冷卻等從提取液中析出的微粒子成分(凝集物等)屬于所講提取物的范疇。
另外，作為抽提溶劑，除上述單獨(dú)使用水以外，可使用其它的有機(jī)溶劑，但優(yōu)選單獨(dú)使用水或使用除水以外含有少量有機(jī)溶劑的混合液，當(dāng)然用該含有水的溶液進(jìn)行抽提也屬于本發(fā)明中的水抽提范疇。若含有酸、堿、無機(jī)物，只要在對蘑菇的提取物量不帶來負(fù)面影響的范圍內(nèi)，也可適量添加。
將提取成分再進(jìn)行超微粒化工序可制備出具有免疫增強(qiáng)活性或免疫調(diào)節(jié)活性作用的超微粒體。
以下，對本發(fā)明的超微粒體的優(yōu)選制造例進(jìn)行更詳細(xì)的說明。
用熱水從蘑菇抽提出的物質(zhì)(提取物)，例如提取工序后趁熱過濾(硅藻土過濾等)，然后將之冷卻或濃縮冷卻，此時(shí)可析出平均粒徑在100μm以上的凝集物。考慮該凝集物是提取浸膏(エキス)中的β-葡聚糖樣多糖和肽聚糖等凝集生成的。例如，95℃下，將生香菇的粉碎物抽提3-15小時(shí)，觀察硅藻土過濾所得的濾液，可以見證微粒子分散到濾液中的懸濁液。測定該粒子的粒徑可以驗(yàn)證它是中位徑約250μm的凝集物，其粒子的成分是β-葡聚糖、肽聚糖等。
該狀態(tài)下(含有平均粒徑呈現(xiàn)100μm以上的凝集物的提取物)經(jīng)口攝取時(shí)，提取浸膏中的有效成分通過腸道粘膜不能高效吸收，在生物體內(nèi)不能有效利用。本發(fā)明的超微粒體可以使所講提取物中的有效成分通過腸道粘膜高效吸收，可在粘膜固有層誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。
也就是說，趁熱過濾蘑菇的水(熱水等)提取物，冷卻或濃縮冷卻時(shí)得到凝集物，在含有上述凝集物的蘑菇提取液中應(yīng)用分散劑等，分散析出的凝集物，可制備出平均粒徑優(yōu)選10μm以下，更優(yōu)選1μm以下，更優(yōu)選0.01-1μm左右的粒徑極其微小的超微粒體。
將蘑菇提取浸膏的有效成分和析出的凝集物超微?；梢赃@樣實(shí)現(xiàn)向包含蘑菇提取浸膏的有效成分的溶液中加入分散劑，使析出的凝集物分散化，將所含蘑菇提取物的有效成分包埋到微膠囊中，或者用分散劑將析出的凝集物分散化，將之包埋到微膠囊中。
通過測定抗腫瘤活性、NK(Natural Killer)活性、遲發(fā)超敏反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)外細(xì)胞因子的測定、抗體的產(chǎn)生量等，可容易地驗(yàn)證有無免疫增強(qiáng)作用。
進(jìn)行超微?；姆椒o特殊困難，例如使用攪拌機(jī)和勻漿器，例如使用適當(dāng)?shù)姆稚┻M(jìn)行超微粒化。再者，可通過高壓乳化機(jī)、媒質(zhì)磨、超聲波等微粉碎化處理進(jìn)行超微?；?。
對于使用分散劑處理時(shí)的分散劑沒有特殊限制，只要是保持分散到液體中這以性質(zhì)的分散劑即可，例如表面活性劑、高分子、糖類、等醇類、甘油酯、酸、堿、鹽類等。優(yōu)選可作為乳化劑使用的分散劑。更優(yōu)選可食用的乳化劑，例如卵磷脂、溶血卵磷脂、膽酸等。此外，本發(fā)明的說明書中，應(yīng)用乳化劑進(jìn)行分散化處理時(shí)特別表現(xiàn)膠束化，但本發(fā)明并不限于此，用乳化劑以外的分散劑進(jìn)行膠束化也屬于本發(fā)明的范疇。
本發(fā)明中的微?；ば蚴谦@得有效成分的工序，例如可作為提取工序等工序的前工序、后工序、及同時(shí)工序中的至少任一工序?qū)嵤?br> 本發(fā)明的超微粒體可使用，將超微粒體分散到水中進(jìn)行測定時(shí)，優(yōu)選平均粒徑10μm以下，更優(yōu)選1μm以下，更優(yōu)選0.01-1μm左右的微粒體。作為免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑使用時(shí)，用分散劑處理液(分散化液)、特別是用乳化劑處理的膠束化狀態(tài)對于消化、吸收來說是優(yōu)選的，但干燥狀態(tài)的超微粒體也可作為免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑使用。
本發(fā)明中所使用的超微粒體的測定方法，可利用常規(guī)的粒子、特別是分散化狀態(tài)的粒子的測定方法。例如，使用粒度分布儀，通過激光衍射·散射式粒度分布測定方法進(jìn)行測定。
(免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑)如全面的若干說明所講，本發(fā)明的超微粒體可作為免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑(本發(fā)明的免疫增強(qiáng)劑/免疫調(diào)節(jié)劑)的有效成分使用?？墒褂米鳛楸景l(fā)明的醫(yī)藥組合物和飲食品可使用的載體和增量劑(或稀釋劑)。具體而言，可作為醫(yī)藥組合物和飲食品(保鍵食品等)使用。
可容易地驗(yàn)證有無免疫增強(qiáng)作用或免疫調(diào)節(jié)作用，例如通過測定抗腫瘤活性、NK活性、遲發(fā)超敏反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)外細(xì)胞因子量、抗體的產(chǎn)生量等。
(醫(yī)藥組合物)由于本發(fā)明的醫(yī)藥組合物含有上述超微粒體，優(yōu)選分散劑處理液(分散化液體)，特別優(yōu)選用乳化劑的膠束化成分，作有效成分，所以是用于增強(qiáng)或調(diào)節(jié)免疫、特別是增強(qiáng)或調(diào)節(jié)全身免疫，伴隨免疫功能異常的疾病的治療、改善、防止進(jìn)展和其它疾病的預(yù)防等的藥劑。例如用于抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑，抗糖尿病藥，抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等，對這些疾病進(jìn)行治療和預(yù)防。
該藥劑所適用的對象有動(dòng)物、特別是人，需要增強(qiáng)或調(diào)節(jié)免疫功能尤其是全身免疫功能的人。
本發(fā)明的藥劑的特征之一是即便經(jīng)口施用也顯現(xiàn)優(yōu)良效果，使用蘑菇來源成分及β-葡聚糖時(shí)，例如使用蘑菇，特別時(shí)食用蘑菇等的提取物混合物時(shí)，特別在安全性上顯現(xiàn)其優(yōu)點(diǎn)。因此，對施用狀態(tài)無特殊限制。可采用經(jīng)口施用、非經(jīng)口施用(皮下、肌肉內(nèi)施用、經(jīng)鼻施用、氣霧施用等)各種實(shí)施方案?？珊啽愕剡m用于廣大需求免疫增強(qiáng)作用和/或免疫調(diào)節(jié)作用的患者。因?yàn)榘踩院瓦m于經(jīng)口施用，為了預(yù)防、改善上述疾患，可以后面的健康食品、功能性食品、健康飲料、功能性飲料等形式使用。
本發(fā)明中，可與其它藥劑成分(醫(yī)藥活性物質(zhì))一起使用，例如混合或整合在一起使用，該情況下，只要含有本發(fā)明的目的成分即上述有效成分、表現(xiàn)目的活性即上述藥理活性(免疫增強(qiáng)活性或免疫調(diào)節(jié)活性)就屬于本發(fā)明藥劑的范疇。
此外，可包含藥理學(xué)上允許的各種制劑用物質(zhì)(作為輔助劑等)?？筛鶕?jù)制劑的劑型適當(dāng)選擇制劑用的物質(zhì)，例如包括賦形劑、稀釋劑、添加劑、崩解劑、結(jié)合劑、被覆劑、潤滑劑、滑行劑、潤澤劑、風(fēng)味劑、甜味劑、乳化劑、可溶化劑等。制劑用物質(zhì)的具體例有，碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、甘露醇及其它糖類、滑石、牛乳蛋白、明膠、淀粉、纖維素及其衍生物、動(dòng)物及植物油、聚乙二醇，及溶劑如無菌水、一元或多元醇，如甘油等。
本發(fā)明的制劑可制備成如前所述的公知的或?qū)砟荛_發(fā)的各種醫(yī)藥制劑形式，例如經(jīng)口施用、腹腔內(nèi)施用、經(jīng)皮施用、吸入施用等各種施用形式?？蛇m當(dāng)應(yīng)用公知的或?qū)砟荛_發(fā)的方法將本發(fā)明的制劑制備成這些類型的醫(yī)藥制劑。
作為這些類型的醫(yī)藥制劑的形態(tài)有，例如適當(dāng)?shù)墓虘B(tài)或液態(tài)，如顆粒、粉劑、被衣片劑、片劑、(微)膠囊、栓劑、糖漿、汁、懸濁液、乳濁液、滴劑、注射用溶液、延長活性物質(zhì)釋放的制劑等。
以上所示制劑形態(tài)的本發(fā)明的藥劑中當(dāng)然均含有能發(fā)揮藥效的有效量的上述成分。
本發(fā)明藥劑的施用量要根據(jù)疾病的種類、嚴(yán)重程度、制劑的形式等適當(dāng)選擇。例如經(jīng)口施用時(shí)，以總糖換算，優(yōu)選每天給患者施用1mg-50g左右、更優(yōu)選10mg-10g左右、更進(jìn)一步優(yōu)選50mg-5g左右的有效成分超微粒體。嚴(yán)重情況下，可進(jìn)一步增加用量。施用的次數(shù)、時(shí)間，既可以數(shù)日1次，也可以1日1次，但通常1日數(shù)次，例如分2-4次，餐前、中間或餐后施用。優(yōu)選餐前施用。另外，靜脈施用時(shí)，可施用上述經(jīng)口施用量的十分之一到百分之一左右。
(飲食品)特別指出，本發(fā)明的飲食品作為保健食品和功能性食品使用時(shí)，可參考上述經(jīng)口施用制劑，添加作為保健食品和功能性食品所必要的成分(包含不同蘑菇的提取物等)、添加劑進(jìn)行制備。當(dāng)然可適當(dāng)添加作為飲食品使用的食用或營養(yǎng)成分等。以總糖換算，通常優(yōu)選含有0.01-80重量％左右、更優(yōu)選含0.05-20重量％左右的上述超微粒體。
使用可作為飲食品使用的調(diào)味劑和甜味劑，可以作為溶液飲料的形態(tài)使用，也可以以片劑、顆粒劑、膠囊劑、膠凍、冰激凌、冰凍形態(tài)等使用。
作為預(yù)防用，無論健康者，還是各種疾病的患者，從重癥患者到輕癥患者，均可應(yīng)用該飲食品，并不特別限于伴隨免疫功能異常的疾病患者，可使用它以實(shí)現(xiàn)全身的免疫增強(qiáng)或免疫調(diào)節(jié)作用。對人以外的動(dòng)物而言，可以飼料、醫(yī)藥品和醫(yī)藥組合物的形式使用。
(超微粒體含有組合物)本發(fā)明為，選自蘑菇來源成分和及β-葡聚糖中的成分的超微粒體分散化地存在于水溶液中，通過上述對超微粒體或其各種用途和制備方法的說明，可以容易地理解、實(shí)施本發(fā)明。當(dāng)然，與超微粒體同樣，其組合物也可用于上述各種用途，尤其是醫(yī)藥組合物和飲食品，上述說明也適用于該發(fā)明。
如上所述，本發(fā)明的其它實(shí)施方案是免疫增強(qiáng)方法或免疫調(diào)節(jié)方法，其特征在于，在生物體內(nèi)施用或攝取上述本發(fā)明的超微粒體；再者為，上述新型超微粒體在所講免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑中的使用；或者上述超微粒體在所講抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑，抗糖尿病藥，抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等中的使用，及在醫(yī)藥品制備中的使用。
上述任何對免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑的說明，對抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑，抗糖尿病藥，抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等的說明，和對醫(yī)藥組合物、飲食品的說明，或以后面的適宜的實(shí)施方案(實(shí)施例)為基礎(chǔ)，或必要時(shí)參考眾所周知的技術(shù)，可容易地實(shí)施本發(fā)明。
如前所述，本發(fā)明(本發(fā)明品)不僅可用于人，而且可用于其它動(dòng)物，例如作為家畜業(yè)等中動(dòng)物(牛、豬、羊、馬、鳥等)、寵愛的動(dòng)物(寵物狗，貓等)或水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中魚類等(硬骨魚類、甲殼類等)的飼料，或作為添加到飼料中的添加劑或醫(yī)藥品或醫(yī)藥組合物應(yīng)用。
優(yōu)選實(shí)施方案以下，列舉制造例、實(shí)施例和比較例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不限定于這些實(shí)施例。
(實(shí)施例1)(香菇提取方法)每1kg香菇(生香菇換算)加大約4L水，用膠體磨等進(jìn)行粉碎(粉碎后液體量約6L)，用回流等在不蒸發(fā)水分的條件下加熱回流，95℃煮沸15小時(shí)，將所得提取液過濾。將濾液在60℃減壓濃縮，得到約1L的濃縮物。用苯酚硫酸法進(jìn)行糖分析，得到糖總量為20mg/ml的提取浸膏(也叫做香菇提取浸膏，香菇浸膏)。
(香菇浸膏的乳化劑處理(膠束化))將ツル一レシチン工業(yè)公司的卵磷脂(SLP-PC70)加到去離子水中，制備與香菇提取浸膏總糖濃度相同濃度的卵磷脂溶解液。接著，向卵磷脂溶解液中加入等量的上述香菇提取浸膏，用特殊機(jī)化公司的2M-2型ァヂホモ攪拌機(jī)在真空下攪拌(真空度60cmHg，錨式攪拌機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)50rpm，均勻攪拌機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)15000rpm)，制備預(yù)膠束化液。用三和機(jī)械(株)的高壓乳化機(jī)H11型手控2段式對所得預(yù)乳化液進(jìn)行高壓乳化處理(乳化壓1500kgf/cm2)，制備出中位徑100nm左右的香菇提取浸膏膠束化液(膠束化香菇浸膏，本發(fā)明品)。用(株)崛場制作所制的LA910粒度分布計(jì)，應(yīng)用激光衍射·散射式粒度分布測定法進(jìn)行中位徑的測定。
香菇提取浸膏及膠束化香菇浸膏的粒度分布測定結(jié)果如圖1所示。結(jié)果顯示，香菇提取浸膏中的成分中，中位徑約120μm，對之進(jìn)行乳化劑處理(膠束化)后，可得到中位徑約0.09μm的超微粒體。
(實(shí)施例2)(β-葡聚糖溶液的制備)按千原等的方法(Cancer Res.，30，2776(1970))從生香菇中進(jìn)行β-葡聚糖的制備。即，用熱水抽提生香菇的子實(shí)體后，乙醇分級沉淀，通過十六烷基三甲基氫氧化銨(cethyltrimethyl ammoniumhydroxide)進(jìn)行分級沉淀，用醋酸進(jìn)行分級溶出，用堿性蘇打進(jìn)行分級溶出，通過反復(fù)除蛋白質(zhì)的操作，得到白色粉末。將所得白色粉末懸濁到蒸餾水中，勻漿后，用高壓鍋進(jìn)行高壓高溫處理(121℃，20分)，制備出2mg/ml的β-葡聚糖溶液。
(β-葡聚糖的乳化劑處理(膠束化))將ツル-レシチン工業(yè)公司的卵磷脂(SLP-PC70)加到去離子水中，制備8mg/ml的卵磷脂溶解液。接著，向卵磷脂溶解液中加入等量的上述β-葡聚糖溶液，用三和機(jī)械(株)的高壓乳化機(jī)H11型手控2段式進(jìn)行高壓乳化處理(乳化壓1500kgf/cm2)，制備出中位徑100nm左右的β-葡聚糖膠束化液(膠束化β-葡聚糖，本發(fā)明品)。用(株)崛場制作所制的LA910粒度分布計(jì)，應(yīng)用激光衍射·散射式粒度分布測定法進(jìn)行中位徑的測定。β-葡聚糖溶液及膠束化β-葡聚糖的粒度分布測定結(jié)果如圖2所示。結(jié)果顯示，β-葡聚糖溶液中的β-葡聚糖形成凝集物，媒質(zhì)粒子徑約120μm，對之進(jìn)行乳化劑處理(膠束化)后，可得到媒質(zhì)粒徑約0.09μm的超微粒體。
(實(shí)施例3)(應(yīng)用S180皮下移植模型的實(shí)施例)(實(shí)驗(yàn)方法)以腹水的形式采取Sarcoma 180腫瘤細(xì)胞，該細(xì)胞在ICR小鼠(雌性，4周齡)腹腔內(nèi)移植傳代，用生理鹽水調(diào)成3×107/ml。用25G注射器將該細(xì)胞稀釋液移植到ICR小鼠(雌性，4周齡)的右腰背部皮下，0.1ml/只。
次日，根據(jù)體重進(jìn)行分組(7只/組)，進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記后，開始施用香菇提取浸膏(香菇浸膏)及香菇提取浸膏膠束化液(膠束化香菇浸膏)。1日1次經(jīng)口施用，施用5次后休息2天，共進(jìn)行10次。每次的施用量是，按總糖換算10mg/kg的組施用1mg/ml的液體，0.2ml/只；按總糖換算100mg/kg的組施用10mg/ml的液體，0.2ml/只。
表1和表2中表示施用組的情況，香菇浸膏和膠束化香菇浸膏后的括弧內(nèi)的數(shù)字是按總糖量換算的施用量，單位是mg/kg。另外，實(shí)施例中，將使用乳化劑進(jìn)行超微?；幚淼奈镔|(zhì)稱為膠束化香菇浸膏。
每周測定一次腫瘤直徑和體重。根據(jù)腫瘤直徑，用以下公式計(jì)算腫瘤的重量。
腫瘤重量(mg)＝腫瘤短徑(mm)2×腫瘤長徑(mm)÷2另外，根據(jù)腫瘤重量和體重可算出宿主的重量。
宿主重量(g)＝體重(g)-腫瘤重量(g)根據(jù)腫瘤重量可計(jì)算出腫瘤增殖抑制率。
腫瘤增殖抑制率(％)＝(1-施用組的腫瘤重量÷無處置組的腫瘤重量)×100通過各周腫瘤增殖抑制率和腫瘤移植后第35天的腫瘤生長例數(shù)，評價(jià)在該模型中的藥效。膠束化香菇浸膏的腫瘤增殖抑制效果示于表1和表2。
腫瘤重量(g)


Day 16腫瘤移植后的天數(shù)16日t-檢驗(yàn)Student’st-檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行t-檢驗(yàn)。
M檢驗(yàn)Mannwhitney-U檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行順位和檢驗(yàn)。
N.S.無顯著性差異；p＜0.01有顯著性差異。
膠束化香菇浸膏的施用組中，在施用期間，與對照組相比，逐漸抑制腫瘤增殖，在Day 16(終止施用2天后)，按總糖換算膠束化香菇浸膏10mg/kg的經(jīng)口施用組中，p＜0.01，顯著抑制腫瘤增殖。
腫瘤增殖抑制效果


*腫瘤移植后天數(shù)16天以上結(jié)果表明，與以前的產(chǎn)品相比，本發(fā)明品的超微粒體可達(dá)到期望的藥效。
(實(shí)施例4)(β-葡聚糖的定量)為了對香菇提取物中的β-葡聚糖進(jìn)行定量，將(實(shí)施例2)中純化的β-葡聚糖溶解到氫氧化鈉溶液(1→25)中，甲醇沉淀，如此重復(fù)2次，在甲醇和丙酮中洗凈后，進(jìn)行減壓干燥(40℃，15小時(shí))，得到氮0.03％以下，強(qiáng)熱殘余成分1.5％以下的標(biāo)準(zhǔn)β-葡聚糖。
用佐佐木等的方法(Gann，67(2)191-5(1976))先對經(jīng)純化的標(biāo)準(zhǔn)β-葡聚糖進(jìn)行定量。即，分別用氫氧化鈉溶液(2g/dl)調(diào)制香菇提取浸膏及標(biāo)準(zhǔn)β-葡聚糖，加入剛果紅溶液(10mg/dl)和磷酸(2.5g/dl)，利用由β-葡聚糖引起的剛果紅的極大吸收波長的移動(dòng)，用分光光度計(jì)測定535nm的吸光度。由此，對香菇提取浸膏中的β-葡聚糖進(jìn)行定量。
應(yīng)用對β-葡聚糖量進(jìn)行定量了的香菇提取浸膏，用與(實(shí)施例1)同樣的方法，制備β-葡聚糖的濃度達(dá)0.2mg/ml的膠束化香菇浸膏(卵磷脂濃度0.8mg/ml)。用同樣的方法，對β-葡聚糖溶液進(jìn)行卵磷脂乳化處理使?jié)舛冗_(dá)0.2mg/ml，得到膠束化β-葡聚糖溶液。
(實(shí)施例5)(膠束化β-葡聚糖的腫瘤增殖抑制效果)用與上面實(shí)施例3同樣的方法檢測前面制備的膠束化香菇浸膏，膠束化β-葡聚糖及β-葡聚糖溶液的腫瘤增殖抑制效果。即，以腹水的形式采取Sarcoma 180腫瘤細(xì)胞，該細(xì)胞在ICR小鼠(雌性，4周齡)腹腔內(nèi)移植傳代，用生理鹽水調(diào)成3×107/ml。用25G注射器將該細(xì)胞稀釋液移植到ICR小鼠(雌性，4周齡)的右腰背部皮下，0.1ml/只。
次日，根據(jù)體重進(jìn)行分組(7只/組)，進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記后，開始施用膠束化香菇浸膏，膠束化β-葡聚糖及β-葡聚糖。1日1次經(jīng)口施用，施用5次后休息2天，共進(jìn)行10次。每次的施用量是，按β-葡聚糖換算1mg/kg的組施用β-葡聚糖的濃度為0.2mg/ml的液體，0.1ml/只。
表3和表4中表示施用組的情況，微?；愎教崛∥铮⒘；?葡聚糖及β-葡聚糖后的括弧內(nèi)的數(shù)字是按β-葡聚糖量換算的施用量，單位是mg/kg。另外，實(shí)施例中，將使用乳化劑進(jìn)行超微?；幚淼奈镔|(zhì)稱為微?；愎教崛∥铩⑽⒘；?葡聚糖。
腫瘤重量(g)


Day 16腫瘤移植后的天數(shù)16日t-檢驗(yàn)Student’s t-檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行t-檢驗(yàn)。
M檢驗(yàn)Mannwhitney-U檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行順位和檢驗(yàn)。
N.S.無顯著性差異；p＜0.01有顯著性差異。
膠束化香菇浸膏和膠束化β-葡聚糖的施用組，即實(shí)施超微?；幚淼氖┯媒M中，在施用期間，與無處置組相比，逐漸抑制腫瘤增殖，在Day 16(終止施用2天后)，按β-葡聚糖換算1mg/kg的經(jīng)口施用組中，p＜0.01，顯著抑制腫瘤增殖。
腫瘤增殖抑制效果


*腫瘤移植后天數(shù)16天以上結(jié)果表明，與以前的產(chǎn)品(β-葡聚糖溶液)相比，本發(fā)明品的超微粒體(膠束化香菇浸膏和膠束化β-葡聚糖)可達(dá)到期望的藥效。
(實(shí)施例6)(腸道粘膜免疫活化病理組織學(xué)檢測)為了檢測膠束化香菇浸膏的腸道粘膜免疫的活化作用，用與實(shí)施例3同樣的方法進(jìn)行檢測。即，以腹水的形式采取Sarcoma 180腫瘤細(xì)胞，該細(xì)胞在ICR小鼠(雌性，4周齡)腹腔內(nèi)移植傳代，用生理鹽水調(diào)成3×107/ml。用25G注射器將該細(xì)胞稀釋液移植到ICR小鼠(雌性，4周齡)的右腰背部皮下，0.1ml/只。
次日，根據(jù)體重進(jìn)行分組(7只/組)，進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記后，開始施用僅乳化劑(卵磷脂)、向乳化劑中添加了香菇提取浸膏的產(chǎn)物(未進(jìn)行超微粒化(膠束化))、膠束化香菇浸膏。1日1次經(jīng)口施用，施用5次后休息2天，共進(jìn)行10次。每次的施用量是，乳化劑卵磷脂2mg/ml、0.1ml/只； 向乳化劑中添加了香菇提取浸膏的產(chǎn)物，按β-葡聚糖換算1mg/kg的施用組，β-葡聚糖0.2mg/ml(卵磷脂濃度2mg/ml)的施用液，0.1ml/只；膠束化香菇浸膏，按β-葡聚糖換算1mg/kg的施用組，β-葡聚糖0.2mg/ml(卵磷脂濃度2mg/ml)的施用液，0.1ml/只，按β-葡聚糖換算3mg/kg的施用組，0.3ml/只。
施用終止后第2天，分別從各組小鼠及正常小鼠(3只)切出淋巴集結(jié)區(qū)附著的小腸，用10％的福爾馬林固定后，石蠟包埋，制成石蠟切片，脫臘后進(jìn)行蘇木精嗜紅染色，顯微鏡下觀察腸粘膜固有層中單核細(xì)胞(免疫細(xì)胞)的浸潤情況。
表5中表示施用組的情況，香菇提取浸膏及膠束化香菇浸膏后的括弧內(nèi)的數(shù)字是按β-葡聚糖量換算的施用量，單位是mg/kg。另外，實(shí)施例中，將使用乳化劑進(jìn)行超微粒化處理的物質(zhì)稱為膠束化香菇浸膏。
腸粘膜固有層中單核細(xì)胞的浸潤像數(shù)(相對于絨毛數(shù)的比例(％))


顯微鏡下測定絨毛數(shù)(100-300根/檢測標(biāo)本)，并測定粘膜固有層中單核細(xì)胞的浸潤數(shù)，計(jì)算每根絨毛的浸潤像的比例(％)。
*1正常小鼠的粘膜固有層中未觀察到單核細(xì)胞浸潤。
*2僅向乳化劑(卵磷脂)中添加香菇提取浸膏，未進(jìn)行超微?；?膠束化)處理。
t-檢驗(yàn)Student′s t-檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行t-檢驗(yàn)。
N.S.無顯著性差異；p＜0.1，有傾向；p＜0.01有顯著性差異。
顯微鏡下觀察正常小鼠、荷瘤無處置組、乳化劑(卵磷脂10mg/ml經(jīng)口施用組)處置組、向乳化劑中添加香菇浸膏按β-葡聚糖換算為1mg/kg的經(jīng)口施用組、膠束化香菇浸膏按β-葡聚糖換算1mg/kg和3mg/kg的施用組的小腸的病理組織，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與無處置組相比，在膠束化香菇浸膏施用組中，1mg/kg的施用組，小腸粘膜的固有層中有單核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞)的浸潤趨勢(p＜0.1)，在3mg/kg的施用組，小腸粘膜的固有層中單核細(xì)胞的浸潤顯著(p＜0.01)。膠束化香菇浸膏施用組以外的各組，與無處置組相比，未見到差異。因此，可以認(rèn)為經(jīng)口施用膠束化香菇浸膏可誘導(dǎo)(活化)腸道粘膜中的免疫反應(yīng)。
以上結(jié)果表明，與以前的產(chǎn)品(香菇提取浸膏)相比，本發(fā)明品的超微粒體(膠束化香菇浸膏)可達(dá)到期望的藥效。
(實(shí)施例7)(全身免疫的活化遲發(fā)型超敏反應(yīng))為了檢測對腫瘤抗原產(chǎn)生的特異的全身免疫應(yīng)答的活化，進(jìn)行遲發(fā)型超敏反應(yīng)的評價(jià)。對遲發(fā)型超敏反應(yīng)的評價(jià)方法進(jìn)行說明。
用上述實(shí)施例3同樣的方法進(jìn)行腫瘤移植。即，以腹水的形式采取Sarcoma 180腫瘤細(xì)胞，該細(xì)胞在ICR小鼠(雌性，4周齡)腹腔內(nèi)移植傳代，用生理鹽水調(diào)成3×107/ml。用25G注射器將該細(xì)胞稀釋液移植到ICR小鼠(雌性，4周齡)的右腰背部皮下，0.1ml/只。
次日，根據(jù)體重進(jìn)行分組(7只/組)，進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記后，開始施用膠束化香菇浸膏、膠束化β-葡聚糖、β-葡聚糖溶液。1日1次經(jīng)口施用，施用5次后休息2天，共進(jìn)行9次。每次的施用量是，膠束化香菇浸膏和膠束化β-葡聚糖，向按β-葡聚糖換算1mg/kg的施用組，施用β-葡聚糖0.2mg/ml(卵磷脂濃度0.8mg/ml)的施用液，0.1ml/只。β-葡聚糖溶液，向按β-葡聚糖換算1mg/kg的施用組，施用β-葡聚糖0.2mg/ml的施用液，0.1ml/只。
無處置組、膠束化香菇浸膏施用組、膠束化β-葡聚糖施用組、β-葡聚糖溶液施用組各提供7只小鼠，正常小鼠提供3只，進(jìn)行遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTHDelayer Type Hypersensitivity)試驗(yàn)。即，在腫瘤移植后第9天(開始施用后第8天)，向右足墊注射50μl生理鹽水作為對照，向左足墊注射50μl將Sarcoma 180細(xì)胞進(jìn)行3M KCl可溶化法或凍融法(處理5×107/ml細(xì)胞懸浮液)而得到的腫瘤抗原溶液，24小時(shí)后，測定左右足的厚度，根據(jù)下面的公式算出足的腫脹程度，進(jìn)行DTH反應(yīng)的檢測。
足腫(mm)＝左足厚度(mm)-右足厚度(mm)表6中表示施用組的情況，膠束化香菇浸膏、膠束化β-葡聚糖及β-葡聚糖后的括弧內(nèi)的數(shù)字是按β-葡聚糖量換算的施用量，單位是mg/kg。另外，實(shí)施例中，將使用乳化劑進(jìn)行超微?；幚淼奈镔|(zhì)稱為膠束化香菇浸膏、膠束化β-葡聚糖。
遲發(fā)型超敏反應(yīng)足腫(mm)


*1正常小鼠由于未進(jìn)行腫瘤移植(抗原致敏)，所以未發(fā)生DTH反應(yīng)。
t-檢驗(yàn)Student′s t-檢驗(yàn)分別將各組相對于無處置組進(jìn)行t-檢驗(yàn)。
N.S.無顯著性差異；p＜0.05，有顯著性差異；p＜0.01有顯著性差異。
如表6所示，正常小鼠、無處置組、β-葡聚糖施用組基本未見到足腫脹，與此相對，膠束化香菇浸膏施用組和膠束化β-葡聚糖施用組與無處置組相比可見到顯著性的足腫脹。這些結(jié)果提示，經(jīng)口施用膠束化香菇浸膏和膠束化β-葡聚糖可誘導(dǎo)針對腫瘤抗原的全身性免疫應(yīng)答。
(實(shí)施例8)(抗過敏效果)為了檢測膠束化香菇浸膏的抗過敏效果，應(yīng)用特應(yīng)性皮膚炎模型小鼠NC小鼠進(jìn)行檢測。即，用乙醇和丙酮(4∶1)配制的抗原；三硝基氯苯(5％(w/v))150μl/只，涂到20只8周齡雄性NC小鼠的腹部及腳掌，進(jìn)行致敏，致敏4天后開始，每周1次，進(jìn)行6周，將橄欖油制備的誘發(fā)用抗原；三硝基氯苯(0.8％(w/v))150μl/只，涂到背部及兩耳(內(nèi)外兩側(cè))。施用開始是從抗原致敏前，1日1次，施用46天。使用量，對照組(10只)中以生理鹽水作為溶劑對照，0.1ml/只，經(jīng)口施用。膠束化香菇浸膏，按β-葡聚糖換算量配制成0.2mg/ml的施用液，0.1ml/只，經(jīng)口施用。該使用量，按β-葡聚糖換算，1次相當(dāng)于1mg/kg的施用量。
抗過敏效果的評價(jià)是每周1次測定體重，觀察評價(jià)(0無癥狀；1輕度；2中度；3高度)皮膚炎癥的程度1搔癢癥(pruritus/itching)；2發(fā)紅·充血(erythema/hemorrhage)；3水腫(edema)；4擦傷·組織缺損(excoriation/erosion)；5痂皮形成·干燥(scaring/dryness)。還有，抗原致敏后，第29天和46天眼底采血，收集血清，用ELISA法測定血清中的免疫球蛋白E(IgE)。
結(jié)果致敏后第46天，對照組的10只小鼠IgE量均在5.0μg/ml以上；與此相對，膠束化香菇浸膏施用組的10只小鼠中只有4只達(dá)5.0μg/ml以上，剩余6只不足5.0μg/ml，顯著性抑制了IgE的增加(Fisher概率檢驗(yàn)p＜0.05)。另外，對于皮膚炎癥的分?jǐn)?shù)，致敏后第46天，對照組的10只小鼠中9只的皮膚炎分?jǐn)?shù)總和達(dá)9分以上，與此相對，膠束化香菇浸膏施用組的10只小鼠中5只的皮膚炎分?jǐn)?shù)總和達(dá)9分以上，其余5只的皮膚炎分?jǐn)?shù)總和不滿9分，與對照組相比，抑制了皮膚的炎癥。
以上結(jié)果表明，本發(fā)明品的超微粒體(膠束化香菇浸膏)可達(dá)到期望的藥效(抗過敏效果)。
(實(shí)施例9)(抗糖尿病效果血糖值上升的抑制效果)為了檢測膠束化香菇浸膏對糖尿病的效果，應(yīng)用II型糖尿病模型小鼠db/db小鼠檢測對血糖值上升的效果。即，將5周齡、雄性db/db小鼠分成兩組，每組9只，一組以自由飲水作為對照組，一直到12周齡；另一組自由飲用膠束化香菇浸膏，一直到12周齡。膠束化香菇浸膏的濃度，以β-葡聚糖換算是0.01mg/ml(卵磷脂濃度0.1mg/ml)。各周測定飲用量，算出β-葡聚糖的經(jīng)口攝取量。
效果的判定是，每周眼底采血，測定血糖值，檢測血糖值上升的抑制效果。β-葡聚糖的經(jīng)口攝取量是6周齡-12周齡為0.15mg/mouse/day-0.36mg/mouse/day。
關(guān)于血糖值，8周齡時(shí)，對照組的血糖值為504.11±50.03mg/dl，膠束化香菇浸膏組的血糖值為406.22±75.55mg/dl，可顯著性抑制血糖值的上升(Student’s t-檢驗(yàn)p＜0.01)。
以上結(jié)果表明，本發(fā)明品的超微粒體(膠束化香菇浸膏)可達(dá)到期望的藥效(對糖尿病的血糖值上升抑制效果)。
發(fā)明的效果本發(fā)明可提供能改善動(dòng)物，特別是人的免疫狀態(tài)的免疫增強(qiáng)劑和免疫調(diào)節(jié)劑，尤其是具有良好免疫增強(qiáng)作用和/或免疫調(diào)節(jié)作用的醫(yī)藥組合物和飲食品(保健食品、功能性食品等)。還提供作為這些優(yōu)良制品的有效成分使用的新型物質(zhì)(或新型組合物)，詳細(xì)言之，提供選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中成分的超微粒體，例如對來自蘑菇的提取物進(jìn)行超微?；?，優(yōu)選水提取物的分散劑處理物(分散化物)，尤其是經(jīng)乳化劑處理的膠束化溶液。
本發(fā)明提供用于各種疾患治療、預(yù)防等的免疫增強(qiáng)方法或免疫調(diào)節(jié)方法，和所述超微粒體在所講免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑中的使用，或所述超微粒體在抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病劑，抗糖尿病藥，抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑等)等中的使用，還有在醫(yī)藥品制備中的使用。
再者，本發(fā)明中，可通過簡便的制備手段，制備蘑菇來源成分和β-葡聚糖的藥效成分，尤其是具有上述免疫增強(qiáng)作用和/或免疫調(diào)節(jié)作用的有效成分的超微粒體(或含有該成分的組合物)，本發(fā)明提供該方法。結(jié)果，可提供工業(yè)上簡便地有效利用上述有效成分的醫(yī)藥組合物和飲食品(健康食品、功能性食品等)。
因此，本發(fā)明在產(chǎn)業(yè)上，尤其在醫(yī)療、醫(yī)藥品、食品等多個(gè)領(lǐng)域極其有用。
權(quán)利要求
1.超微粒體，其特征在于，對選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分進(jìn)行超微粒化。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1的超微粒體，其中選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分為蘑菇來源成分.
3.根據(jù)權(quán)利要求
1的超微粒體，其中選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分為β-葡聚糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求
1或2的超微粒體，其中蘑菇來源成分為蘑菇的提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求
4的超微粒體，其中蘑菇的提取物為蘑菇的水提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求
1或2的超微粒體，其中蘑菇來源成分為β-葡聚糖或包含β-葡聚糖。
7.根據(jù)權(quán)利要求
1或3的超微粒體，其中β-葡聚糖不是蘑菇來源的成分。
8.根據(jù)權(quán)利要求
7的超微粒體，其中β-葡聚糖選自酵母來源的成分、真菌來源的成分、細(xì)菌來源的成分及植物來源的成分。
9.根據(jù)權(quán)利要求
1的超微粒體，其中選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分在水溶液中形成凝集體。
10.根據(jù)權(quán)利要求
9的超微粒體，其中凝集體至少有50μm的粒徑。
11.根據(jù)權(quán)利要求
1-10任一項(xiàng)的超微粒體，當(dāng)將該超微粒體的粒子分散到水中進(jìn)行測定時(shí)，該粒子的平均粒徑為10μm以下。
12.根據(jù)權(quán)利要求
11的超微粒體，其平均粒徑為1μm以下。
13.根據(jù)權(quán)利要求
11或12的超微粒體，其平均粒徑為0.01-1μm。
14.根據(jù)權(quán)利要求
1-11任一項(xiàng)的超微粒體，向含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液中混合分散劑時(shí)可得到，它含有平均粒徑為10μm以下的粒子。
15.根據(jù)權(quán)利要求
1-14任一項(xiàng)的超微粒體，進(jìn)行微粉碎化處理時(shí)可獲得，它含有平均粒徑為1μm以下的粒子。
16.根據(jù)權(quán)利要求
14或15的超微粒體，其中含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液是，將蘑菇的水或熱水提取液過濾后所得的蘑菇提取物含有水溶液。
17.根據(jù)權(quán)利要求
16的超微粒體，其中蘑菇提取物含有水溶液是，將蘑菇的水或熱水提取液過濾后對之進(jìn)行濃縮和/或冷卻而得的凝集物含有水溶液。
18.根據(jù)權(quán)利要求
14-17任一項(xiàng)的超微粒體，其中含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液是，β-葡聚糖的水溶液或含有β-葡聚糖的水溶液。
19.根據(jù)權(quán)利要求
1-18任一項(xiàng)的超微粒體，處于用分散劑處理了的狀態(tài)或處于分散化狀態(tài)。
20.根據(jù)權(quán)利要求
14-19任一項(xiàng)的超微粒體，以含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖的成分的水溶液中所含總糖為1，以重量比計(jì)，最多混合100份分散劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求
14-20任一項(xiàng)的超微粒體，其中分散劑為乳化劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求
21的超微粒體，其中乳化劑為卵磷脂。
23.根據(jù)權(quán)利要求
1-22任一項(xiàng)的超微粒體，其處于膠束化狀態(tài)。
24.免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑，其特征在于，它含有權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體。
25.抗腫瘤劑、抗感染劑、抗病毒劑、抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥、抗過敏性疾病劑或抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑)，其特征在于，它含有權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體。
26.醫(yī)藥組合物，其特征在于，它含有權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體。還可含有制劑學(xué)上允許的載體或增量劑。
27.飲食品，其特征在于，它含有權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體。
28.根據(jù)權(quán)利要求
27的飲食品，以總糖換算，它含有0.01-80重量％的所述超微粒體。
29.超微粒體含有組合物，其特征在于，它含有將權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體處于分散化的水溶液。
30.醫(yī)藥組合物，其特征在于，它含有權(quán)利要求
29的超微粒體。還可含有制劑學(xué)上允許的載體或增量劑。
31.飲食品，其特征在于，它含有權(quán)利要求
29的超微粒體。
32.根據(jù)權(quán)利要求
31的飲食品，以總糖換算，它含有0.05-5重量％的所述組合物。
33.根據(jù)權(quán)利要求
27、28、31或32的飲食品，它可在癌癥、細(xì)菌感染性疾病、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、過敏性疾病、消化系統(tǒng)疾病(過敏性腸道癥候群(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等)等任何疾病患者中應(yīng)用。
34.根據(jù)權(quán)利要求
29的組合物，每100g中含有1-20000mg糖和1-20000mg分散劑。
35.超微粒體的制備方法，其特征在于，將選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分付之超微?；ば颉?br>36.根據(jù)權(quán)利要求
35的方法，其中超微?；ば虬?，將分散劑混合到含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液中，制備出平均粒徑為10μm以下的粒子的工序。
37.根據(jù)權(quán)利要求
35或36的方法，其中超微?；ば虬ㄖ苽涑銎骄綖?μm以下的粒子的工序。
38.超微粒體含有組合物的制備方法，其特征在于，將選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分付之超微?；ば颉?br>39.根據(jù)權(quán)利要求
38的方法，其中超微?；ば虬?，將分散劑混合到含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液中，制備出平均粒徑為10μm以下的粒子的工序。
40.根據(jù)權(quán)利要求
38或39的方法，其中超微?；ば虬ㄖ苽涑銎骄綖?μm以下的粒子的工序。
41.根據(jù)權(quán)利要求
37或40的方法，其中制備出平均粒徑為1μm以下的粒子的工序是高壓乳化機(jī)處理工序。
42.根據(jù)權(quán)利要求
35或38的方法，其中蘑菇來源成分是在用水對蘑菇進(jìn)行抽提的工序中得到的水提取物。
43.根據(jù)權(quán)利要求
36、37、39和40任一項(xiàng)中的方法，其中含有選自蘑菇來源成分和β-葡聚糖中的成分的水溶液是，將蘑菇的水或熱水提取液過濾后所得的蘑菇提取物含有水溶液。
44.免疫增強(qiáng)方法或免疫調(diào)節(jié)方法，其特征在于，將權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中的超微粒體攝取或施用到生體內(nèi)。
45.根據(jù)權(quán)利要求
44的方法，其中攝取或施用的形式是權(quán)利要求
24中記載的免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑的形式，以及權(quán)利要求
25中記載的抗腫瘤劑、抗感染劑、抗病毒劑、抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥、抗過敏性疾病劑或抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑)形式中的任一種形式。
46.根據(jù)權(quán)利要求
44或45的方法，其中攝取或施用的方式是權(quán)利要求
26-28及30-33任一項(xiàng)中記載的醫(yī)藥組合物或飲食品的形式。
47.權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體在權(quán)利要求
24中記載的免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑中的應(yīng)用。
48.權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體在權(quán)利要求
25中記載的抗腫瘤劑、抗感染劑、抗病毒劑、抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥、抗過敏性疾病劑或抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑)中的應(yīng)用。
49.根據(jù)權(quán)利要求
47或48的應(yīng)用，其中免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑、抗腫瘤劑、抗感染劑、抗病毒劑、抗自身免疫性疾病劑、抗糖尿病藥、抗過敏性疾病劑或抗消化系統(tǒng)疾病劑(過敏性腸道綜合征(IBS)、炎癥性腸道疾病(IBD)、便秘、腹瀉等的治療劑)是權(quán)利要求
26或30中記載的醫(yī)藥組合物或權(quán)利要求
27、28及31-33任一項(xiàng)中記載的飲食品形式。
50.權(quán)利要求
1-23任一項(xiàng)中記載的超微粒體在醫(yī)藥品制備中的應(yīng)用。
專利摘要
將選自來源于蘑菇的成分和β－葡聚糖中的成分，例如，將源于蘑菇的成分，特別是香菇等蘑菇提取物超微?；?，優(yōu)選將其水提取物進(jìn)行分散化處理，可以增加其粘膜的吸收性，從而發(fā)揮其免疫增強(qiáng)作用和/或免疫調(diào)節(jié)作用。該超微粒子(或含有該物質(zhì)的組合物)可用于免疫增強(qiáng)劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑或抗腫瘤劑，抗感染劑，抗病毒劑，抗自身免疫性疾病、抗糖尿病、抗過敏性疾病劑和抗消化系統(tǒng)疾病劑。因而，本發(fā)明可提供使用該超微粒子作有效成分的飲料、食品、醫(yī)藥組合物及其制備方法，優(yōu)選以前述提取物的經(jīng)分散化處理的物質(zhì)作有效成分。
文檔編號A23L1/28GKCN1505524SQ02808956
公開日2004年6月16日 申請日期2002年4月26日
發(fā)明者須賀哲也, 小笠原嘉昭, 金子有太郎, 梶浦正俊, 須賀泰世, 世, 嘉昭, 太郎 申請人:味之素株式會(huì)社導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan