本發(fā)明屬于中醫(yī)藥檢測(cè)，具體涉及一種新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、新蒲飲是青蒲飲(由青木香、蒲公英、黃連、白芍、甘草組成)，棄用馬兜鈴科有腎毒性的青木香，化裁而來。全方由川黃連、蒲公英、連翹、木香、檳榔、百合、浙貝母、生甘草組成，主治清熱燥濕、健脾益胃，理氣活血。新蒲飲方中黃連為君藥，除濕泄熱、瀉火解毒。蒲公英、連翹為臣藥，協(xié)同君藥清熱燥濕，化瘀散結(jié)；木香、檳榔、百合、浙貝母共奏行氣導(dǎo)滯，養(yǎng)陰生??；生甘草調(diào)和藥性之效。諸藥合用，可清熱燥濕、健脾益胃，理氣活血。經(jīng)過臨床試驗(yàn)表明，新蒲飲聯(lián)合奧美拉唑治療幽門螺桿菌相關(guān)性胃炎脾胃濕熱證取得了較好的臨床療效，并且能有效的改善患者臨床癥狀,與西藥相比副作用少、安全性更好。

2、中藥復(fù)方，不同的提取方法，得到的有效成分含量具有較大區(qū)別，直接影響到臨床療效。目前還沒有新蒲飲提取工藝優(yōu)化報(bào)道，并且目前新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法較少，本發(fā)明采用高效液相色譜法，建立新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，對(duì)新蒲飲的質(zhì)量評(píng)價(jià)以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定具有重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、發(fā)明目的：本發(fā)明選用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，建立以小檗堿、菊苣酸、連翹苷、甘草苷及干膏率為主的質(zhì)量控制體系，確定以加水倍量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)作為關(guān)鍵工藝參數(shù)，應(yīng)用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化新蒲飲的提取工藝，并結(jié)合ahp-熵權(quán)法確定各評(píng)價(jià)指標(biāo)的綜合權(quán)重系數(shù)，進(jìn)行綜合評(píng)分優(yōu)選出最佳的提取工藝。

2、本發(fā)明另外一個(gè)目的是采用高效液相色譜法，建立精密度和準(zhǔn)確度高，穩(wěn)定性和重復(fù)性好的質(zhì)量檢測(cè)方法。

3、技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

4、一種新蒲飲的提取方法，包括如下步驟：

5、取新蒲飲處方藥材黃連3～9份、蒲公英15～45份、連翹10～30份、木香10～30份、檳榔10～30份、百合30～90份、浙貝母10～30份、生甘草9～27份，第一次加藥材重量8～12倍體積的水浸泡45min，然后煎煮提取1～2h，第二次加6～8倍量的水，煎煮提取1～2h，合并二次煎煮提取液，過濾，即得。

6、作為優(yōu)選方案，以上所述的新蒲飲的提取方法，包括如下步驟：

7、取新蒲飲處方藥材黃連3～9份、蒲公英15～45份、連翹10～30份、木香10～30份、檳榔10～30份、百合30～90份、浙貝母10～30份、生甘草9～27份，第一次加藥材重量12倍體積的水浸泡45min，然后煎煮提取1.5h，第二次加8倍量的水，煎煮提取1.5h，合并二次煎煮提取液，過濾，即得。

8、一種新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括如下步驟：

9、(1)供試品溶液的制備：

10、取新蒲飲處方藥材黃連、蒲公英、連翹、木香、檳榔、百合、浙貝母、生甘草，加水浸泡，然后煎煮提取，合并煎煮提取液，過濾，取濾液置容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，超聲，過濾，取續(xù)濾液，離心，取上清液，得供試品溶液；

11、(2)混合對(duì)照品溶液的制備：

12、取小檗堿、菊苣酸、連翹苷、苷草苷對(duì)照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，制得混合對(duì)照品溶液；

13、(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

14、分別精密吸取步驟(2)的混合對(duì)照品溶液2、5、10、15、20μl進(jìn)樣測(cè)定，每份平行測(cè)定2次，以峰面積的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)y，對(duì)照品含量的對(duì)數(shù)含量的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；

15、(4)供試品溶液的測(cè)定

16、吸取步驟(1)的供試品溶液10μl，按色譜條件進(jìn)樣，每份平行測(cè)定2次，測(cè)定峰面積，并按步驟(3)的對(duì)照品的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品中指標(biāo)成分的含量。

17、作為優(yōu)選方案，以上所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，供試品溶液的制備方法為：

18、取新蒲飲處方藥材黃連3～9份、蒲公英15～45份、連翹10～30份、木香10～30份、檳榔10～30份、百合30～90份、浙貝母10～30份、生甘草9～27份，第一次加藥材重量12倍體積的水浸泡45min，然后煎煮提取1.5h，第二次加8倍量的水，煎煮提取1.5h，合并二次煎煮提取液，過濾，取濾液10ml于50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，超聲30min，過濾，取續(xù)濾液，離心10min，取上清液，得供試品溶液。

19、作為優(yōu)選方案，以上所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，步驟(2)混合對(duì)照品溶液的制備方法為：

20、取小檗堿、菊苣酸、連翹苷、苷草苷對(duì)照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，制得質(zhì)量濃度分別為3.07μg/ml、10.63μg/ml、9.70μg/ml、5.10μg/ml的混合對(duì)照品溶液。

21、作為優(yōu)選方案，以上所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，所述步驟(3)和步驟(4)的色譜條件為：

22、色譜柱hibar?purospher?star?lp?rp-18endcapped，規(guī)格250mm×4.6mm，5μm；流動(dòng)相為乙腈-0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液；梯度洗脫0～7min,10％～17％乙腈；7～14min,17％乙腈；14～19min,17％～22％乙腈；19～28min,22％～24％乙腈；28～42min,24％～35％乙腈；42～49min,35％～63％乙腈；49～50min,63％～10％乙腈；體積流量1m?l/min；檢測(cè)波長(zhǎng)237nm、277nm、330nm、345nm；柱溫25℃，進(jìn)樣體積10μl。

23、有益效果：本發(fā)明和現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

24、(1)本發(fā)明基于ahp-熵權(quán)法對(duì)質(zhì)量評(píng)價(jià)體系進(jìn)行賦權(quán)，明確5個(gè)指標(biāo)在質(zhì)量控制體系中的權(quán)重系數(shù)，以此優(yōu)化新蒲飲現(xiàn)代提取工藝為加20倍量水、提取2次(第一次為總加水量倍數(shù)的60％，第二次為總加水倍數(shù)的40％)，每次煎煮1.5h。通過驗(yàn)證試驗(yàn)證實(shí)篩選出的最佳提取工藝穩(wěn)定可行，滿足大生產(chǎn)要求，可為新蒲飲的提取應(yīng)用提供參考，所得工藝可保證工業(yè)生產(chǎn)的可行性及產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

25、(2)本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)篩出最佳的流動(dòng)相組成、梯度洗脫方式、檢測(cè)波長(zhǎng)等色譜條件，建立了新蒲飲的檢測(cè)方法。該方法具有操作方便，檢測(cè)快速，方法穩(wěn)定性好、精密度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)和控制新蒲飲的質(zhì)量。

技術(shù)特征：

1.一種新蒲飲的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新蒲飲的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

3.一種新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，供試品溶液的制備方法為：

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟(2)混合對(duì)照品溶液的制備方法為：

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟(3)和步驟(4)的色譜條件為：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述梯度洗脫條件如下：0～7min,10％～17％乙腈；7～14min,17％乙腈；14～19min,17％～22％乙腈；19～28min,22％～24％乙腈；28～42min,24％～35％乙腈；42～49min,35％～63％乙腈；49～50min,63％～10％乙腈。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于：甘草苷、連翹苷、菊苣酸和小檗堿的回歸方程為y＝2048074.5319x-469.0732，y＝813991x-500.71，y＝2471712.7709x+1200.6098，y＝3561132.1406x+1398.4878。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種新蒲飲的提取工藝及其質(zhì)量檢測(cè)方法，提取方法為取新蒲飲處方藥材黃連、蒲公英、連翹、木香、檳榔、百合、浙貝母、生甘草，第一次加藥材重量8～12倍體積的水浸泡45min，然后煎煮提取1～2h，第二次加6～8倍量的水，煎煮提取1～2h，合并二次煎煮提取液，過濾，即得。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)篩出最佳的流動(dòng)相組成、梯度洗脫方式和檢測(cè)波長(zhǎng)等色譜條件，建立新蒲飲的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法能夠提高質(zhì)量檢測(cè)效率，同時(shí)方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好、穩(wěn)定性好以及耐用性高，可為新浦飲的質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制提供科學(xué)依據(jù)。

技術(shù)研發(fā)人員：杜秋,金小晶,毛春芹,劉智群,李麗萍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南京市中醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23