本發(fā)明涉及醫(yī)用止血組合物
技術領域：
，特別是涉及一種復合多糖止血組合物及其制備方法與應用。
背景技術：
：止血是醫(yī)院各科室手術中的一個重要環(huán)節(jié)，減少出血，縮短手術時間，對手術的成功和患者的安危有著重要作用。目前，在一定的手術部位，只要處理方法得當，機械止血仍然是一種簡單有效的止血方式。但是，有些術中出血無法通過合適的機械方法止血時，可直接用于出血部位的可吸收性止血材料就發(fā)揮了重要作用。因此，提供一種安全、有效、使用方便且易于加工的止血材料尤為重要?，F(xiàn)在常用的外科可吸收止血材料主要包括以下幾種：明膠類或膠原蛋白類或殼聚糖類止血海綿、氧化纖維素類止血紗布或止血膜、人工合成蛋白類止血膠、淀粉多糖類或殼聚糖類止血粉。明膠類止血海綿和膠原蛋白類止血海綿(如公開號為cn101455857a中公開的生物相容性變性淀粉海綿)可以通過吸收血液中的水分濃縮血液，還可以通過激活內(nèi)源性凝血機制而促凝，并因其具有良好的止血性能、生物相容性和可降解性，在臨床已獲得應用。但是明膠和膠原蛋白均來源于動物組織的膠原提取物，為異種蛋白；且人體對它吸收慢，在臨床上易發(fā)生過敏反應、傷口愈合慢和傷口易感染等并發(fā)癥，故臨床使用受到很大局限。而殼聚糖是甲殼質(zhì)脫乙?；某跫壯苌铮亲匀唤缰猩儆械膲A性多糖。美國hemcon公司推出的以凍干殼聚糖為基質(zhì)的止血繃帶(hemconbandage)能迅速止住大量出血，但由于殼聚糖的止血作用有限，對于廣泛出血創(chuàng)面止血效果不很理想，只能用于外部創(chuàng)傷出血的止血，不用能用于內(nèi)臟等體內(nèi)出血的止血。氧化纖維素的止血機制為：纖維素上具有酸性的羧基與血紅蛋白中鐵離子(fe3+)結(jié)合后，形成黏性膠塊封閉破損的毛細血管起到止血作用，同時對血小板有黏附和聚集作用，從而激活體內(nèi)凝血機制，加速凝血，氧化再生纖維素的止血機制與此相同。但是正常的人體組織因缺乏代謝氧化纖維素的酶而對該類產(chǎn)品吸收速度相對較慢，根據(jù)用量和使用的部位在體內(nèi)吸收的時間一般在3-6周。nagamatsu等在神經(jīng)病形成的研究中發(fā)現(xiàn)：氧化纖維素產(chǎn)生的高酸性環(huán)境會通過一種彌漫性化學機制引起其底部神經(jīng)原變性。pusateri等對氧化纖維素材料進行了改進，研制出一種鈣改性的氧化纖維素止血劑，其止血效果和不良反應均優(yōu)于前者，但仍需避免在外周神經(jīng)直接大量使用。在人工合成蛋白類止血膠方面，近年臨床應用較為廣泛的是纖維蛋白密封劑(如公開號為cn101361986a的專利申請中的變性淀粉的可吸收性或生物相容性止血材料)，是纖維蛋白原結(jié)合凝血酶的噴霧裝置。該噴霧裝置產(chǎn)品因使用時費時費力、來源有限、成本高而受限制；且來源于人、?；蜇i體內(nèi)的纖維蛋白是異體或異種蛋白，容易導致過敏反應以及動物源性感染疾病的發(fā)生；此外，蛋白類止血膠在濕潤組織創(chuàng)面上使用時粘附性較弱，不能對活動性出血進行有效的控制。美國專利us6060461和公開號為cn101584876a的專利申請中公開的淀粉多糖類或殼聚糖類止血粉，其吸水率較低，吸水后形成的凝膠粘性差，因此與血作用后形成的凝血塊與組織的粘附性差，不能對破損的組織、血管產(chǎn)生有效的粘性封堵，止血效果不理想。公開號cn101121041a的發(fā)明專利申請公開了一種變性淀粉可吸收止血材料，為醚化變性淀粉、或經(jīng)醚化和交聯(lián)的復合變性淀粉、或經(jīng)醚化和酯化的復合變性淀粉，該變性淀粉經(jīng)凝聚、制丸、篩分制得。公開號cn101361986a的發(fā)明專利申請公開了一種變性淀粉可吸收止血材料，為醚化變性淀粉，或經(jīng)醚化和交聯(lián)的復合變性淀粉，該變性淀粉經(jīng)凝聚、制丸、篩分制得。公開號為cn105688265a的發(fā)明專利申請公開了一種可吸收止血材料及其制備方法，該止血材料為醚化變性淀粉、酯化變性淀粉、或經(jīng)醚化、酯化、交聯(lián)三種方式中至少兩種復合處理的變性淀粉，該變性淀粉原料經(jīng)糊化、交聯(lián)、去溶劑處理、洗滌、干燥及篩分制得。這三種止血材料雖在吸水率方面均有一定的提高，也可被機體吸收，無毒副作用，但是由于淀粉本身的特性，單獨用其作為原料制備得到的海綿或膜狀的凍干止血產(chǎn)品松脆易碎，不利于產(chǎn)品成型和使用。因此，尋找具備超親水性、吸水率高、強粘附性，可以快速止血、植物來源無抗原性、呈中性無刺激、體內(nèi)降解速度快、包裝簡單臨床使用方便、易滅菌等功能、還可以根據(jù)傷口形狀任意裁剪、形態(tài)靈活，其制備工藝簡單、高效、適合大規(guī)模生產(chǎn)的止血材料，對于本領域的研發(fā)具有深刻意義。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術中存在的技術缺陷，第一方面，提供一種止血快、粘附性強的復合多糖止血組合物，其原料包括質(zhì)量百分含量如下的組分：可吸收性復合淀粉20％-99％，成型劑0.1％-60％，增塑劑0.001％-20％；優(yōu)選可吸收性復合淀粉50％-80％，成型劑0.1％-40％，增塑劑0.1％-15％；更優(yōu)選可吸收性復合淀粉50％-75％，成型劑10％-40％，增塑劑2％-10％；最優(yōu)選可吸收性復合淀粉70％，成型劑25％，增塑劑5％。所述可吸收性復合淀粉是由多種變性淀粉原料與交聯(lián)劑分別經(jīng)微交聯(lián)反應得到相應數(shù)量種類的微交聯(lián)變性淀粉后，再將得到的多種微交聯(lián)變性淀粉混合得到。所述變性淀粉原料為醚化淀粉、酯化淀粉、氧化淀粉中一種或幾種；所述醚化淀粉優(yōu)選羧甲基淀粉、羥乙基淀粉、羥丙基淀粉和陽離子淀粉中一種或幾種；更優(yōu)選羧甲基淀粉和/或羥乙基淀粉；所述酯化淀粉優(yōu)選淀粉磷酸酯、淀粉黃原酸酯、淀粉醋酸酯、辛烯基琥珀酸淀粉鈉中一種或幾種；更優(yōu)選淀粉磷酸酯；所述氧化淀粉優(yōu)選過氧化氫氧化淀粉、高碘酸氧化淀粉、次氯酸鈉氧化淀粉、高錳酸鉀氧化淀粉和高鐵酸鉀氧化淀粉中一種或幾種。所述交聯(lián)劑為戊二醛、京尼平、碳化二亞胺、乙酸酐、四硼酸鈉、環(huán)氧氯丙烷、三偏磷酸鈉、三氯氧磷中的一種；優(yōu)選環(huán)氧氯丙烷、京尼平、三氯氧磷、三偏磷酸鈉中一種或幾種，更優(yōu)選環(huán)氧氯丙烷或京尼平，最優(yōu)選環(huán)氧氯丙烷。所述微交聯(lián)具體為：將1重量份的變性淀粉原料加入10-100重量份的蒸餾水中攪拌，制成變性淀粉液；調(diào)節(jié)變性淀粉液的ph值至8-11，溫度至30℃-80℃，加入0.01-20重量份的交聯(lián)劑攪拌0.5-48小時使變性淀粉原料與交聯(lián)劑發(fā)生微交聯(lián)反應；然后依次經(jīng)洗滌、脫水、干燥，得到微交聯(lián)變性淀粉。所述成型劑為羧甲基殼聚糖、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、透明質(zhì)酸鈉、瓊脂、硫酸軟骨素中一種或幾種。所述增塑劑為乙二醇、丙二醇、乳酸、乳酸鈉、山梨糖醇、聚乙二醇中一種或幾種。第二方面，本發(fā)明提供一種制備上述復合多糖止血組合物的方法，先將可吸收性復合淀粉溶于水，再加入成型劑混合，再加入增塑劑，混合得到料液；將料液倒入凍干模具中，先預凍再真空冷凍干燥，滅菌后得到海綿狀的復合多糖止血組合物。包括以下步驟：(1)微交聯(lián)變性淀粉的制備：稱取若干種變性淀粉原料，分別加入蒸餾水中，制成變性淀粉液；變性淀粉原料與蒸餾水的質(zhì)量比為1：(10-100)；用氫氧化鈉溶液分別調(diào)節(jié)各變性淀粉液的ph值至8-11，溫度至30℃-80℃，分別加入交聯(lián)劑攪拌，使各變性淀粉原料與交聯(lián)劑發(fā)生微交聯(lián)，微交聯(lián)時間為0.5-48小時，交聯(lián)劑的加入質(zhì)量為各變性淀粉原料質(zhì)量的0.01％-20％；然后依次經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水、30℃-60℃干燥2-48h，分別得到若干種微交聯(lián)變性淀粉；(2)可吸收性復合淀粉液的制備：將步驟(1)得到的若干種微交聯(lián)變性淀粉分別溶于蒸餾水中，得到微交聯(lián)變性淀粉溶液；再將若干種的微交聯(lián)變性淀粉溶液混合，得到可吸收性復合淀粉液；或?qū)⒉襟E(1)得到的若干種微交聯(lián)變性淀粉混合后溶于蒸餾水中，得到可吸收性復合淀粉液；微交聯(lián)變性淀粉與蒸餾水的質(zhì)量比為1：(5-100)；(3)配制成型劑溶液：稱取成型劑，加入2-100倍成型劑質(zhì)量的蒸餾水，混合得到成型劑溶液；(4)混合：將步驟(3)得到的成型劑溶液加入到步驟(2)得到的可吸收性復合淀粉液中攪拌；再加入增塑劑，攪拌后得到料液；(5)凍干：將步驟(4)得到的料液倒入凍干模具中，先在冷凍干燥機內(nèi)-60℃—-20℃下預凍0.5h-24h；然后在冷凍干燥機內(nèi)繼續(xù)真空冷凍干燥，真空度小于20p，溫度為-50℃—-20℃，時間為4h-72h；滅菌，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。第三方面，本發(fā)明提供一種止血材料，包括上述復合多糖止血組合物，所述復合多糖止血組合物作為止血功能組分。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供的復合多糖止血組合物具有的分子結(jié)構可以快速吸附血液中的水，使血小板、紅細胞和凝結(jié)蛋白(凝血酶和纖維蛋白原)濃縮，該脫水過程會加速正常的凝血速度，更快速地發(fā)揮止血作用。本發(fā)明的組合物可以形成凝膠和粘附性基質(zhì)為后續(xù)的止血提供機械屏障，且其超親水性和強粘附特性可以降低再出血的幾率；此外，由于本發(fā)明組合物降解速度較快，提高了患者的使用安全性。本發(fā)明的復合多糖止血組合物具有以下特點：1.止血時間短：對于大量出血傷口，1-2min施壓即可止血；2.吸水性和粘附性強；3.體內(nèi)48-72小時內(nèi)即可降解；4.生物相容性好，組織反應輕。因此，本發(fā)明的復合多糖止血組合物有望成為比較理想的外科止血材料。附圖說明圖1所示為本發(fā)明實施例1制備的復合多糖止血組合物的電鏡掃描照片。具體實施方式本發(fā)明提供的復合多糖止血組合物是將兩種或兩種以上的多次變性淀粉在成型劑和增塑劑的作用下，經(jīng)真空冷凍干燥復合而成的一種止血材料。多次變性淀粉是在現(xiàn)有變性淀粉的基礎上進行處理：將現(xiàn)有變性淀粉進行微交聯(lián)處理，變性淀粉在交聯(lián)劑的作用下進行低交聯(lián)度地交聯(lián)，使其粘度、溶脹度均有所改善；然后將兩種或兩種以上的微交聯(lián)變性淀粉混合，可以進一步提高其吸水倍率、吸水速率及其粘附性；再與成型劑、增塑劑混合后經(jīng)預凍和真空冷凍干燥，得到質(zhì)地柔軟、易貼附傷口、方便臨床操作的止血產(chǎn)品。本發(fā)明使用的變性淀粉，是將淀粉采用兩種或兩種以上的復合變性處理方法獲得的淀粉衍生物，復合變性處理主要是通過氧化反應、酯化反應、醚化反應、交聯(lián)反應等組合實現(xiàn)的。本發(fā)明中的變性淀粉為多次變性，提高了吸水性和粘附性，解決了單一淀粉的性能不足；再將若干種多次變性淀粉進行復合得到可吸收性復合淀粉，進一步提高了變性淀粉的吸水率，最后與成型劑、增塑劑混合配制、凍干得到質(zhì)地柔軟、易貼附傷口、方便臨床操作的止血產(chǎn)品。本發(fā)明提供了一種生物相容性好的復合多糖止血組合物，包括質(zhì)量百分含量如下的組分：可吸收性復合淀粉20％-99％，成型劑0.1％-60％，增塑劑0.001％-20％；優(yōu)選可吸收性復合淀粉50％-80％，成型劑0.1％-40％，增塑劑0.1％-15％；更優(yōu)選可吸收性復合淀粉50％-75％，成型劑10％-40％，增塑劑2％-10％；最優(yōu)選可吸收性復合淀粉70％，成型劑25％，增塑劑5％。其中，可吸收性復合淀粉是以變性淀粉原料經(jīng)處理得到。變性淀粉原料為醚化淀粉、酯化淀粉、氧化淀粉中一種或幾種。醚化淀粉為羧甲基淀粉、羥乙基淀粉、羥丙基淀粉和陽離子淀粉中一種或幾種；優(yōu)選羧甲基淀粉和/或羥乙基淀粉。酯化淀粉為淀粉磷酸酯、淀粉黃原酸酯、淀粉醋酸酯、辛烯基琥珀酸淀粉鈉中一種或幾種；優(yōu)選淀粉磷酸酯。氧化淀粉為過氧化氫氧化淀粉、高碘酸氧化淀粉、次氯酸鈉氧化淀粉、高錳酸鉀氧化淀粉和高鐵酸鉀氧化淀粉中一種或幾種。成型劑可以解決純淀粉止血海綿易碎的問題，可以為羧甲基殼聚糖、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、透明質(zhì)酸鈉、瓊脂、硫酸軟骨素中一種或幾種。增塑劑為乙二醇、丙二醇、乳酸、乳酸鈉、山梨糖醇、聚乙二醇中一種或幾種。增塑劑分子可以進入多糖分子之間，在范德華力的作用下削弱多糖分子之間的作用力，增大了多糖分子之間的距離和活動空間，增加組合物的塑性和韌性，使得到的產(chǎn)品更加柔軟，解決了目前多糖海綿硬而脆的缺點。加入增塑劑后，組合物的抗張強度可達到不小于1kpa。復合多糖止血組合物的形狀包含但不限于片狀、塊狀、柱狀、絮狀、層狀或膜狀，以滿足不同手術下的需要。本發(fā)明還提供了一種制備上述復合多糖止血組合物的方法，包括以下步驟：(1)微交聯(lián)變性淀粉的制備：稱取兩種或兩種以上的變性淀粉原料，分別加入蒸餾水中，不斷攪拌，制成變性淀粉液；變性淀粉原料與蒸餾水的質(zhì)量比為1：(10-100)。用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)各變性淀粉液的ph值至8-11，調(diào)節(jié)變性淀粉液的溫度至30℃-80℃，向各變性淀粉液中分別加入交聯(lián)劑，強力攪拌，發(fā)生微交聯(lián)反應，反應時間為0.5-48小時，交聯(lián)劑的質(zhì)量為各變性淀粉原料質(zhì)量的0.01wt％-20wt％(優(yōu)選0.1wt％-8wt％)；然后依次經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水、30℃-60℃干燥2-48h，得到若干種微交聯(lián)變性淀粉；變性淀粉原料可以是醚化淀粉，具體為羧甲基淀粉、羥乙基淀粉、羥丙基淀粉和陽離子淀粉；可以是酯化淀粉，具體為淀粉磷酸酯、淀粉黃原酸酯、淀粉醋酸酯、辛烯基琥珀酸淀粉鈉；可以是氧化淀粉，具體為過氧化氫氧化淀粉、高碘酸氧化淀粉、次氯酸鈉氧化淀粉、高錳酸鉀氧化淀粉和高鐵酸鉀氧化淀粉。步驟(1)中稱取的兩種或兩種以上變性淀粉原料可以是醚化淀粉、酯化淀粉和氧化淀粉三類中的一類或幾類，即變性淀粉原料可以選自醚化淀粉中的兩種或兩種以上、酯化淀粉中的兩種或兩種以上或氧化淀粉中的兩種或兩種以上，也可以選自任兩類或者三類中的兩種或兩種以上物質(zhì)作為變性淀粉原料；換句話說，變性淀粉原料可以是醚化淀粉、酯化淀粉和氧化淀粉中任意兩種或兩種以上，可以都是三類中一類，也可以是不同類。交聯(lián)劑選自：甲醛、戊二醛、京尼平、碳化二亞胺、乙酸酐、四硼酸鈉、氯化鋁、n-羥甲基丙烯酰胺、環(huán)氧氯丙烷、三偏磷酸鈉或三氯氧磷。優(yōu)選環(huán)氧氯丙烷、三氯氧磷或三偏磷酸鈉。變性淀粉原料分子之間與少量交聯(lián)劑發(fā)生化學低度交聯(lián)反應形成空間網(wǎng)狀結(jié)構。交聯(lián)是淀粉的醇羥基與交聯(lián)劑的多元官能團形成二醚鍵或酯鍵，這種鍵合作用能使兩個或兩個以上的淀粉分子“架橋”而形成多維空間網(wǎng)絡結(jié)構，加強了淀粉顆粒之間的結(jié)合作用。根據(jù)淀粉分子與交聯(lián)劑的交聯(lián)程度分為：微交聯(lián)(低度交聯(lián))、中度交聯(lián)和高度交聯(lián)。交聯(lián)度較低(微交聯(lián))時(交聯(lián)劑的量占變性淀粉原料質(zhì)量的百分比＜20％)，由于淀粉鏈的羥基上的氫鍵被取代，小基團被大基團取代，空間阻礙分子間的結(jié)合力，空隙增大，結(jié)晶區(qū)受到破壞，水的滲透力增加，吸水率增大，黏度呈上升趨勢,微交聯(lián)后，變性淀粉表現(xiàn)出良好的吸水性及溶液粘度較大。中度交聯(lián)時(交聯(lián)劑的量占變性淀粉原料質(zhì)量的百分比為20％-50％)，淀粉分子間的鍵合作用變大，分子質(zhì)量增大，分子間強度增強，淀粉顆粒不易膨脹，或只能部分膨脹，吸水率降低，黏度下降。交聯(lián)度較高(高度交聯(lián))時(交聯(lián)劑的量占變性淀粉原料質(zhì)量的百分比＞50％)，交聯(lián)鍵幾乎完全阻止顆粒在水中膨脹，其表現(xiàn)為很低的吸水率及很低的粘度值。(2)可吸收性復合淀粉的制備：將步驟(1)得到的若干種微交聯(lián)變性淀粉分別溶于蒸餾水中，得到微交聯(lián)變性淀粉溶液，再將若干種的微交聯(lián)變性淀粉溶液混合均勻，得到可吸收性復合淀粉液；每種微交聯(lián)變性淀粉溶液的混合比例沒有限制；微交聯(lián)變性淀粉與蒸餾水的質(zhì)量比為1：(5-100)；(3)配制成型劑溶液：稱取成型劑，加入質(zhì)量為2-100倍成型劑質(zhì)量的蒸餾水，在攪拌下溶解，得到成型劑溶液。(4)混合：將步驟(3)得到的成型劑溶液加入到步驟(2)得到的可吸收性復合淀粉液中，攪拌均勻；再加入增塑劑，強力攪拌后得到料液。(5)凍干：將步驟(4)得到的料液倒入凍干模具中，先在-60℃—-20℃下預凍0.5h-24h，然后再置于冷凍干燥機內(nèi)真空度小于20pa，-50℃—-20℃真空冷凍干燥4h-72h；裝于包裝內(nèi)，輻射滅菌或環(huán)氧乙烷滅菌處理，即得到海綿狀的復合多糖止血組合物，可直接用作止血產(chǎn)品。以下結(jié)合具體實施例，更具體地說明本發(fā)明的內(nèi)容，并對本發(fā)明作進一步闡述，但這些實施例絕非對本發(fā)明進行限制。實施例1(1)稱取3g羧甲基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.2g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羧甲基淀粉。稱取3g羥乙基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.2g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羥乙基淀粉。(2)稱取0.5g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.5g微交聯(lián)羥乙基淀粉，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液；(3)稱取羥乙基纖維素0.35g，加入到30ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.07g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冷凍干燥機中預凍6h，然后再置于-40℃、真空度小于20pa的條件下冷凍干燥24h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，先測定其厚度，用質(zhì)構儀測出斷裂時所受的力f，規(guī)定拉伸速率為10mm/min，負載5kg，計算抗張強度：p＝f/s，s為試樣斷裂時斷裂面的面積，測得其抗張強度為36.2kpa。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，剪成小塊自然分散在酒精中，然后取酒精中分散的樣品放在電鏡樣品座上，待酒精自然揮發(fā)后，樣品靠表面吸附力粘附在樣品座上，掃描觀察樣品結(jié)構，得到掃描電鏡照片，如圖1所示。從圖中可以看出，復合多糖止血組合物內(nèi)部結(jié)構呈現(xiàn)不規(guī)則孔隙，海綿狀多孔隙結(jié)構增加了對液體的吸收速率，可以快速吸附血液中的水，導致血小板、紅細胞和凝結(jié)蛋白濃縮，可加速正常的凝血，從而加快止血。實施例2步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.99g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.01g微交聯(lián)羥乙基淀粉，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羥乙基纖維素0.05g，加入到5ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.15g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-25℃條件下冰柜里預凍4h，然后再置于-35℃、真空度小于20pa的條件下真空冷凍干燥40h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為15.4kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例3步驟(1)和(2)同實施例1。(3)稱取羥乙基纖維素0.15g，加入到15ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.1g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)同實施例2，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為23.8kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例4步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.04g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.2g微交聯(lián)羥乙基淀粉，加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羧甲基殼聚糖0.72g，加入到50ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基殼聚糖溶液。(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.24g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)同實施例2，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為10.7kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例5步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.7g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.3g微交聯(lián)羥丙基淀粉，加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羧甲基殼聚糖0.4g，加入到40ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基殼聚糖溶液。(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.1g聚乙二醇400，強力攪拌1小時。(5)同實施例1，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為28.5kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例6步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.8g微交聯(lián)羥丙基淀粉和0.1g微交聯(lián)羥丙基二淀粉磷酸酯，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羧甲基殼聚糖0.3g，加入到25ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基殼聚糖溶液。(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.1g山梨醇溶液，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)得到的料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冰柜里預凍5h，然后再置于冷凍干燥機內(nèi)，在-40℃、真空度小于20帕的條件下冷凍干燥48h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為30.6kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例7步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.95g微交聯(lián)羥丙基淀粉和0.05g微交聯(lián)羥丙基二淀粉磷酸酯，加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羧甲基纖維素0.15g，加入到15ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基纖維素溶液。(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.2g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)同實施例1，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為25.1kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。實施例8步驟(1)同實施例1。(2)稱取0.9g微交羧甲基聯(lián)淀粉和0.1g微交聯(lián)羥丙基二淀粉磷酸酯，加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液；(3)稱取羥乙基纖維素0.15g，加入到15ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.2g聚乙二醇400，強力攪拌1小時。(5)同實施例1，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為27.9kpa，其內(nèi)部結(jié)構如實施例1。比較例1(1)稱取3g羧甲基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為85℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌52小時；再經(jīng)水洗滌、脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羧甲基淀粉。稱取3g羥乙基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為85℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌52小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羥乙基淀粉。(2)稱取0.5g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.5g微交聯(lián)羥乙基淀粉，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液；(3)稱取羥乙基纖維素0.35g，加入到50ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.07g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冷凍干燥機中預凍12h，然后再置于-40℃、真空度小于20pa的條件下冷凍干燥80h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為3.4kpa。比較例2(1)稱取3g羧甲基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為15℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌0.3小時；再經(jīng)水洗滌、脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羧甲基淀粉。稱取3g羥乙基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為15℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌0.3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羥乙基淀粉。(2)稱取0.5g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.5g微交聯(lián)羥乙基淀粉，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液；(3)稱取羥乙基纖維素0.35g，加入到30ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.1g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冷凍干燥機中預凍12h，然后再置于-65℃、真空度小于20pa的條件下冷凍干燥8h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為4.8kpa。比較例3(1)稱取3g羧甲基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羧甲基淀粉。稱取3g羥丙基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥丙基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羥丙基淀粉。(2)稱取0.5g微交聯(lián)羧甲基淀粉和0.05g微交聯(lián)羥丙基淀粉，加入到50ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羥乙基纖維素2.5g，加入到100ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，再加入0.8g丙二醇，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冷凍干燥機中預凍6h，然后再置于-40℃、真空度小于20pa的條件下冷凍干燥24h，得到海綿狀的復合多糖止血組合物。取10mm×50mm規(guī)格的上述塊狀組合物，按實施例1的方法測得其抗張強度為5.2kpa。比較例4(1)稱取3g羧甲基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羧甲基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羧甲基淀粉。稱取3g羥丙基淀粉加入到100ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥丙基淀粉液，倒入反應釜，水浴溫度為60℃，調(diào)節(jié)ph值在8-11之間，加入環(huán)氧氯丙烷0.3g，強力攪拌3小時；再經(jīng)水洗滌、無水乙醇脫水，50℃鼓風干燥4小時，得微交聯(lián)羥丙基淀粉。(2)稱取0.05g微交聯(lián)羧甲基淀粉和1g微交聯(lián)羥丙基淀粉，加入到90ml的蒸餾水中，不斷攪拌，制成淀粉液。(3)稱取羥乙基纖維素0.1g，加入到5ml蒸餾水中，不斷攪拌，制成羥乙基纖維素溶液；(4)將上述步驟(2)和(3)得到的液體在攪拌條件下混合，不添加增塑劑，強力攪拌1小時。(5)將步驟(4)中得到料液倒入凍干模具中，先在-20℃條件下冷凍干燥機中預凍6h，然后再置于-40℃、真空度小于20pa的條件下冷凍干燥24h，得到粉狀的復合多糖止血組合物。本比較例得到的復合多糖止血組合物為粉末狀，無法得到抗張強度。實驗例1對實施例1-8的復合多糖止血組合物、比較例1-4及對比產(chǎn)品，進行吸水時間、吸水率及粘性功指數(shù)檢測試驗，試驗結(jié)果如表1所示。其中，對比產(chǎn)品分別為：美國medafor公司生產(chǎn)的aristatm止血粉，屬于植物淀粉類止血產(chǎn)品；美國強生公司生產(chǎn)的surgicel氧化再生纖維素，屬于氧化再生纖維素類；美國hemcon公司生產(chǎn)的殼聚糖止血海綿，屬于殼聚糖類止血產(chǎn)品；北京科勞德生產(chǎn)的膠原蛋白海綿，屬于膠原類止血產(chǎn)品。吸水時間：取1cm×1cm組合物樣品(厚度0.5cm)，平放于玻璃器皿的水面上(水溫度20℃±2℃)，且避免樣品與器皿接觸；同時用秒表測量樣品完全沉入液面所用的時間。吸水率：稱取0.025g組合物樣品(w0)，加入2ml左右的蒸餾水(加入蒸餾水后總質(zhì)量記為w1)，待樣品溶脹5min左右至吸水飽和后，收集剩余的水分，記為w2，則吸水率＝(w1－w2)/w0×100％。粘性功指數(shù)：稱取1g組合物，加水至吸水飽和后形成凝水混合物粘性膠，用質(zhì)構儀測定其粘性功指數(shù)，試驗探頭為：p36r(圓柱型探頭)。測試條件為：常溫下，試驗前速度：0.5mm/s；測試速度：1mm/s；測試后速度：10mm/s；應力100g；回復距離5.0mm；接觸時間：10s；觸發(fā)類型：自動-5g。表1樣品的吸水時間、吸水率和粘性功指數(shù)實驗結(jié)果實驗例2目的：取實施例1-8的樣品，通過觀察、評價復合多糖組合物對新西蘭大白兔肝臟止血效果。方法：選取新西蘭兔66只，體重2.5-3.0kg。隨機分為空白對照組、樣品組和上市產(chǎn)品對照品組(aristatm和surgicel氧化再生纖維素)，每組6只，雌雄各半。家兔以1％戊巴比妥鈉30mg/kg左耳緣靜脈注射麻醉。在每只動物肝臟相同部位切除肝片(0.4g)，立即將組合物放置在傷口上并用醫(yī)用外科手套或紗布在海綿上施壓，阻斷血流，止血后無需將樣品拿開或揭除，而是用生理鹽水做適當浸潤沖洗即可，空白對照組用醫(yī)用紗布按壓處理，記錄下止血時間，以實施例1、實施例3、實施例4、實施例8為例，見表2。其它實施例也有類似效果，不一一贅述。試驗結(jié)果詳見表2。表2復合多糖組合物新西蘭兔肝臟止血試驗結(jié)果組別切除肝重(g)止血時間(s)空白對照組0.34±0.03497±185.4實施例10.37±0.03114±53.2實施例30.37±0.02150±65.3實施例40.37±0.03162±74.8實施例80.37±0.03145±45.8aristatm0.37±0.06183±55.2surgicel氧化再生纖維素0.35±0.05216±45.4比較例10.36±0.04262±44.2比較例20.36±0.06258±58.5比較例30.36±0.03307±42.3比較例40.36±0.03226±64.7表2結(jié)果表明，樣品組和aristatm和surgicel氧化再生纖維素對新西蘭兔肝臟出血的止血較空白對照組有顯著的止血有效性。在試驗過程中，實施例樣品組遇血后立即吸水/血、并與血液形成粘性膠狀體，具有很強的粘附性，促進凝血，對創(chuàng)面出血點破損血管的封閉效果更佳?？梢?，本發(fā)明的復合多糖組合物能明顯縮短新西蘭兔肝臟創(chuàng)面出血時間，具有良好的止血效果。實驗例3目的：取實施例1-8和比較例1-4的樣品，通過觀察、評價復合多糖組合物在新西蘭大白兔肌肉植入降解情況。方法：選取新西蘭大白兔若干只，剪去兔脊椎兩側(cè)約10cm×15cm區(qū)域兔毛，試驗時用速眠新肌肉注射麻醉，按外科常規(guī)手術要求消毒手術區(qū)域；在兔脊椎兩側(cè)約2.5cm處等距離各選4個植入點，留兩個空白對照點，每點間隔2cm，用手術刀片切開植入點，將樣品材料植入到家兔兩側(cè)的肌肉內(nèi)，分別于手術后24h、48h、72h、7天、14天處死動物，用碘酒對手術部位染色觀察樣品降解情況，并另取組織切片觀察樣品降解及組織反應情況。以實施例8為例，其它實施例的組合物有類似效果，不一一贅述。實施例8提供的產(chǎn)品動物試驗，24h取材后，碘酒染色后有不明顯的藍色；48h取材后，碘酒染色后無染色反應。取材并進行組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)24h有少量的樣品存在，而48h、72h和7天、14天試驗組均未見樣品存在；植入7天后，空白對照點周圍可見嗜中性粒細胞為主的炎癥反應；實施例8樣品點周圍可見嗜中性粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞浸潤為主的輕微炎癥反應。植入14天后，空白對照點周圍可見膠原纖維、成纖維細胞和少量淋巴細胞，嗜中性粒細胞為主的輕微炎癥反應，有疏松囊腔形成；實施例8樣品點周圍可見少量嗜中性粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞浸潤，未見纖維囊腔形成。結(jié)果表明：本發(fā)明提供的產(chǎn)品48小時即可降解，植入7天、14天后，組織反應較輕，說明本產(chǎn)品具有良好的生物相容性。比較例1、比較例2和比較例4的試驗結(jié)果為：24h取材，碘酒染色后均有不明顯的藍色；48h取材，碘酒染色后均無染色反應；進行組織切片觀察，24h均有少量的樣品存在，而48h、72h和7天均未見樣品存在。比較例3的試驗結(jié)果為：24h取材，碘酒染色后無染色反應,進行組織切片觀察，24h、48h均有少量的樣品存在，72h和7天均未見樣品存在。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出的是，對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁12