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一種過表達(dá)c5orf39基因質(zhì)粒構(gòu)建方法及其在新生血管形成中的應(yīng)用與流程

文檔序號:11873689閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.人c5orf39基因在制備抑制新生血管形成藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人c5orf39基因在制備抑制新生血管形成藥物中的應(yīng)用,其特征在于,所述的抑制新生血管形成藥物為抑制人眼底視網(wǎng)膜新生血管形成的藥物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人c5orf39基因在制備抑制新生血管形成藥物中的應(yīng)用,其特征在于,所述的抑制新生血管形成藥物為抑制腫瘤新生血管形成的藥物。

4.一種真核重組質(zhì)粒,其特征在于,所述的真核重組質(zhì)粒包含核苷酸序列SEQ ID NO.1所述的人c5orf39基因,所述的質(zhì)粒為lenti載體質(zhì)粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的真核重組質(zhì)粒,其特征在于,所述的真核重組質(zhì)粒的制備方法包括以下步驟:

a、通過PCR合成人的c5orf39基因片段;

b、將步驟a擴(kuò)增的核苷酸序列片段與真核質(zhì)粒連接,該插入片段的酶切位點(diǎn)分別為Xbar I和Sal I,再將所述的真核重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞中、涂板子、挑克隆、搖菌擴(kuò)增,使用堿裂解法抽提真核重組質(zhì)粒;

c、通過DNA測序篩選出正確插入的重組質(zhì)粒克隆。

6.一種如權(quán)利要求4或5所述的真核重組質(zhì)粒在制備抑制新生血管形成藥物中的應(yīng)用。

7.一種重組慢病毒載體,其特征在于,所述的重組慢病毒載體包含核苷酸序列SEQ ID NO.1所述的人c5orf39基因。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組慢病毒載體,其特征在于,所述的重組慢病毒載體的制備方法包括以下步驟:將權(quán)利要求4或5所述的真核重組質(zhì)粒與三種包裝質(zhì)粒MDL、REV、VSVG共轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞293T,在細(xì)胞上清液中收獲只有感染能力而無復(fù)制能力的重組慢病毒載體顆粒。

9.一種如權(quán)利要求7或8所述的重組慢病毒載體在制備抑制新生血管形成藥物中的應(yīng)用。

10.一種抑制新生血管形成的藥物,其特征在于,所述的藥物包括權(quán)利要求4或5所述的真核重組質(zhì)粒,或權(quán)利要求7或8所述的重組慢病毒載體。

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