本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

急性軟組織損傷是因皮膚以下骨骼之外的組織受外來應(yīng)力作用且達(dá)到一定的強(qiáng)度，超過軟組織承受負(fù)荷，造成的急性破壞和組織生理功能暫時紊亂而誘發(fā)的癥狀、損傷。在急性軟組織損傷的過程中有大量炎癥介質(zhì)參與。炎癥介質(zhì)是一類參與炎癥反應(yīng)并具有致炎作用的活性物質(zhì)，其作用涉及整個炎癥過程，炎癥局部的血液流變學(xué)、細(xì)胞活動、組織損傷和修復(fù)都與炎癥介質(zhì)的作用有關(guān)。炎癥調(diào)節(jié)細(xì)胞因子是一組由淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生的免疫活性因子，主要包括白細(xì)胞介素 1β(IL－1β)、白細(xì)胞介素6(IL－6)，它們共同參與機(jī)體的免疫反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)。IL－1β被稱為內(nèi)源性致熱源，是來源于巨噬細(xì)胞的一種重要的促炎性細(xì)胞因子 IL－1的主要分泌形式，屬于強(qiáng)效促炎性細(xì)胞因子，除引起發(fā)燒外，亦在周圍免疫和炎癥反應(yīng)中起重要作用。IL－6是巨噬細(xì)胞受到脂多糖刺激產(chǎn)生的，與全身性炎癥反應(yīng)如發(fā)熱、產(chǎn)生急性時相反映蛋白有關(guān)。觀察藥物對炎癥組織滲出液內(nèi)炎癥介質(zhì)含量的影響，可提示藥物的抗炎機(jī)理。

鐮葉瘤足蕨：為瘤足蕨科瘤足蕨屬植物鐮葉瘤足蕨Plagiogyria rankanensis Hayata[P.distinctissima Ching;P.adnata Bedd.]的全草或根莖。夏、秋季采收，洗凈，曬干?！拘晕丁啃粒粵??！練w經(jīng)】入膀胱、肺、肝三經(jīng)。【功能主治】發(fā)表清熱；祛風(fēng)止癢；透疹。主流行性感冒；麻疹；皮膚瘙癢；血崩；扭傷?！驹参镄螒B(tài)】 植株高30-45cm。具直立或斜升的根莖。葉簇生，二型；營養(yǎng)葉柄長14-18cm，基部三棱形，有1-2對氣囊體，向上略呈三棱形或半圓形；葉片狹長三角形或卵狀披針形，長17-25cm，基部寬8-11cm，一回羽狀分裂；羽片紙質(zhì)，15-20對，互生，長4-6cm，寬8-13mm，上下面均為綠色，漸尖頭，向上微彎呈鐮狀披針形，基部不對稱，上側(cè)沿葉軸上延，下側(cè)圓形，邊緣近全緣或有齒；葉脈羽狀，側(cè)脈單一或二叉狀。孢子葉葉柄長30-40cm；葉片一回羽狀，長14-22cm，寬4-6cm；羽片15-25對，極度收縮呈線形，長5-7cm，寬2-3mm；側(cè)脈通常二叉，伸至葉邊1/2處。孢子囊生于小脈頂部，成熟時布滿羽片下面。收載于中藥大辭典。

咸蝦花：為菊科斑鳩菊屬植物咸蝦花Vernonia patula(Ait.) Merr.[ Conyza patula Dryand.]的全草。全年均可采收，洗凈，曬干?！拘晕丁?味苦；辛；性平?！竟δ苤髦巍?清風(fēng)清熱；利濕解毒；散瘀消腫。主感冒發(fā)熱；瘧疾；關(guān)痛；高血壓；泄瀉；痢疾；風(fēng)濕痹痛；濕疹；蕁麻診；瘡癤；乳腺炎；頸淋巴結(jié)核；跌打損傷?！拘誀睢恐髑o粗4-8mm，莖枝均呈灰棕色或黃綠色，有明顯的縱條紋及灰色短柔毛，質(zhì)堅(jiān)而脆，斷面中心有髓。葉互生，多破碎，灰綠色或至黃棕色，被灰色短柔毛。小枝通常帶果序，瘦果圓柱形，有4-5棱，無毛，有腺點(diǎn)，冠毛白色，易脫落。氣微，味微苦。【化學(xué)成份】根含黃酮甙、三萜、植物甾醇、揮發(fā)油、氨基酸、有機(jī)酸。收載于中藥大辭典。

小石蝴蝶：為苦苣苔科石蝴蝶屬植物小石蝴蝶Petrocosmea minor Hemsl.的全草。7-9月采收，洗凈，曬干。種子小，橢圓形，光滑?！拘晕丁课段⑿?；性平?！竟δ苤髦巍可L(fēng)熱;健脾消積。主感冒發(fā)熱；小兒疳積。【原植物形態(tài)】小石蝴蝶 無莖多年生小草。根莖短粗，向下密生纖維狀須根。葉基生，15-40片;內(nèi)面的葉具短柄或無柄，外面葉具柄，長達(dá)4cm，密被形燕尾服的柔毛;葉片橢圓狀鞭形、橢圓形或近圓形，長1-2.5cm，寬8-15mm，先端微尖，基部寬楔形或楔形、橢圓形，全緣或具不明顯的波狀小圓齒，葉上面綠色，下面淡綠色，兩面密被開展的柔毛?；?-5條，每花序有1(-2)花;花序梗長3.5-7.5cm，被開展短柔毛;苞片狹線形，長約3mm，密被柔毛;花萼5裂達(dá)基部，裂片線狀披針形，外面被柔毛;花冠紫色，外面被短柔毛，冠筒短，長2.5-3.5cm，冠桅二唇形，上唇卵狀三角形，先端微裂或近全緣，下唇3裂，裂片近等大，先端圓形;能育雄蕊2，花絲寬絨形，密被褐色短毛，花藥長約5mm，退化雄蕊2;子房密被貼伏短柔毛，花柱長約7mm，通?；勘欢谭^小，點(diǎn)狀。蒴果長圓形，長達(dá)10mm，被短柔毛，室背形為2瓣。種子小，橢圓形，光滑。花期8-9月，果期10-11月。收載于中藥大辭典。

橙花叔醇（Nerolidol）：CAS號7212-44-4，分子式C₁₅H₂₆O，分子量222.37?！境煞謥碓础可?Zingiber officinale。

假荊芥屬苷（Nepetin-7-glucoside）：CAS號569-90-4，分子式C₂₂H₂₂O₁₂，分子量478.40?！境煞謥碓础坷笾Σ?Salvia plebeian.。

鱗葉甘草素C （Glepidotin C）：CAS號87440-56-0，分子式C₂₀H₂₀O₅，分子量340.38?！舅幚碜饔谩靠咕??！境煞謥碓础慷箍泼乐薷什軬lycyrrhiza lepidota。

3個原料藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

假荊芥屬苷（Nepetin-7-glucoside）

橙花叔醇（Nerolidol） 鱗葉甘草素C （Glepidotin C）。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服背景技術(shù)的不足，提供一種有效防治風(fēng)濕病的藥物組合物及其制備方法。

本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

制成該防治風(fēng)濕病的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：

鐮葉瘤足蕨800-810重量份 咸蝦花750-758重量份 小石蝴蝶740-750重量份 橙花叔醇65-70重量份 假荊芥屬苷30-40重量份 鱗葉甘草素C 20-24重量份。

優(yōu)選的用于防治風(fēng)濕病的藥物組合物，是由如下重量份的原料藥組成：

鐮葉瘤足蕨805重量份 咸蝦花754重量份 小石蝴蝶745重量份 橙花叔醇68重量份 假荊芥屬苷35重量份 鱗葉甘草素C 22重量份。

一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。

一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成的防治風(fēng)濕病藥物。

一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：

原料藥的組成和重量份為：鐮葉瘤足蕨800-810重量份 咸蝦花750-758重量份 小石蝴蝶740-750重量份 橙花叔醇65-70重量份 假荊芥屬苷30-40重量份 鱗葉甘草素C 20-24重量份；

制備方法：

（1）按原料藥配比取咸蝦花、小石蝴蝶、鐮葉瘤足蕨、橙花叔醇、假荊芥屬苷、鱗葉甘草素C ，混勻，用重量百分比濃度30%乙醇作為溶劑，在27.5℃溫浸提取，提取次數(shù)為33次，每次提取時間為17小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的65倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.04，濾過，藥液通過X-5大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度13%乙醇溶液洗脫X-5大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度13%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度57%乙醇作為溶劑，加熱回流提取6次，每次提取時間為0.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量82倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.18，濾過，藥液通過GDX-501大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度64%乙醇溶液洗脫GDX-501大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度64%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

優(yōu)選的一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：

原料藥的組成和重量份為：鐮葉瘤足蕨805重量份 咸蝦花754重量份 小石蝴蝶745重量份 橙花叔醇68重量份 假荊芥屬苷35重量份 鱗葉甘草素C 22重量份；

制備方法：

（1）按原料藥配比取咸蝦花、小石蝴蝶、鐮葉瘤足蕨、橙花叔醇、假荊芥屬苷、鱗葉甘草素C ，混勻，用重量百分比濃度30%乙醇作為溶劑，在27.5℃溫浸提取，提取次數(shù)為33次，每次提取時間為17小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的65倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.04，濾過，藥液通過X-5大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度13%乙醇溶液洗脫X-5大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度13%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度57%乙醇作為溶劑，加熱回流提取6次，每次提取時間為0.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量82倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.18，濾過，藥液通過GDX-501大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度64%乙醇溶液洗脫GDX-501大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度64%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。

一種防治風(fēng)濕病的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成防治風(fēng)濕病藥物。

藥物組合物防治風(fēng)濕病作用顯著。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：防治風(fēng)濕病的藥物組合物及其制備方法

防治風(fēng)濕病的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：鐮葉瘤足蕨805g 咸蝦花754g 小石蝴蝶745g 橙花叔醇68g 假荊芥屬苷35g 鱗葉甘草素C 22g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取咸蝦花、小石蝴蝶、鐮葉瘤足蕨、橙花叔醇、假荊芥屬苷、鱗葉甘草素C ，混勻，用重量百分比濃度30%乙醇作為溶劑，在27.5℃溫浸提取，提取次數(shù)為33次，每次提取時間為17小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的65倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.04，濾過，藥液通過X-5大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度13%乙醇溶液洗脫X-5大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度13%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度57%乙醇作為溶劑，加熱回流提取6次，每次提取時間為0.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量82倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.18，濾過，藥液通過GDX-501大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度64%乙醇溶液洗脫GDX-501大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度64%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實(shí)施例2：防治風(fēng)濕病的藥物組合物及其制備方法

防治風(fēng)濕病的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：鐮葉瘤足蕨800g 咸蝦花758g 小石蝴蝶740g 橙花叔醇70g 假荊芥屬苷30g 鱗葉甘草素C 24g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取咸蝦花、小石蝴蝶、鐮葉瘤足蕨、橙花叔醇、假荊芥屬苷、鱗葉甘草素C ，混勻，用重量百分比濃度30%乙醇作為溶劑，在27.5℃溫浸提取，提取次數(shù)為33次，每次提取時間為17小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的65倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.04，濾過，藥液通過X-5大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度13%乙醇溶液洗脫X-5大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度13%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度57%乙醇作為溶劑，加熱回流提取6次，每次提取時間為0.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量82倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.18，濾過，藥液通過GDX-501大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度64%乙醇溶液洗脫GDX-501大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度64%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實(shí)施例3：防治風(fēng)濕病的藥物組合物及其制備方法

防治風(fēng)濕病的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：鐮葉瘤足蕨810g 咸蝦花750g 小石蝴蝶750g 橙花叔醇65g 假荊芥屬苷40g 鱗葉甘草素C 20g；

制備方法：

（1）按原料藥配比取咸蝦花、小石蝴蝶、鐮葉瘤足蕨、橙花叔醇、假荊芥屬苷、鱗葉甘草素C ，混勻，用重量百分比濃度30%乙醇作為溶劑，在27.5℃溫浸提取，提取次數(shù)為33次，每次提取時間為17小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的65倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.04，濾過，藥液通過X-5大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度13%乙醇溶液洗脫X-5大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度13%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；

（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度57%乙醇作為溶劑，加熱回流提取6次，每次提取時間為0.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量82倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.18，濾過，藥液通過GDX-501大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度64%乙醇溶液洗脫GDX-501大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度64%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；

（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。

實(shí)施例4：片劑的制備

取實(shí)施例1藥物組合物235g，加入淀粉348g，混勻，制粒，干燥，加微晶纖維素220g，硬脂酸鎂7g，混勻，壓制成2600片， 即得藥物組合物片劑。

實(shí)施例5：膠囊的制備

取實(shí)施例2藥物組合物170g，加入淀粉168g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊800粒，即得藥物組合物膠囊。

實(shí)施例6：滴丸的制備

稱取聚乙二醇 6000 278g水浴(80℃)加熱煮熔，加入實(shí)施例3藥物組合物14g，充分?jǐn)嚢杈鶆?，以液體石蠟為冷卻劑，置玻璃管（4*80cm）中，冷卻溫度為5℃，滴口內(nèi)外徑為7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面為2.6cm，滴速以每分65滴為最佳條件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝劑，即得藥物組合物滴丸。

實(shí)驗(yàn)例1：防治風(fēng)濕病的試驗(yàn)研究

1 材 料

1.1 動物

SPF級SD大鼠60只，雌雄各半，體重200±10g，由中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，許可證號 SCKK－(軍)2007－004。

1.2 儀器

軟組織打擊器(自制)，MULTISKAN MK3 全自動多功能酶標(biāo)儀(MH－1型MINI shaker) 。

1.3 藥物與試劑

藥物組合物為實(shí)施例1藥物組合物； 扶他林乳膠劑( 諾華制藥，批號: 國藥準(zhǔn)字 H19990921)；大鼠白細(xì)胞間介素6、大鼠白細(xì)胞間介素1β 試劑盒(上海藍(lán)基生物，生產(chǎn)批號: 20130601、20130601)。

2 方 法

2.1 動物分組、造模

適應(yīng)性飼養(yǎng) 7d 后，第 8d 大鼠左腿用8% 硫化鈉溶液去毛，隨機(jī)取 16 只大鼠作為空白對照組，其余大鼠 24h 后將其麻醉后固定于鼠板上，利用自制打擊臺以質(zhì)量200g 的實(shí)心鐵球自 25cm 高處通過與鐵球直徑相當(dāng)?shù)奶淄沧杂上侣?，砸于大鼠左小腿后?cè)，連續(xù)打擊 3 次，打擊面積約 2cm²，可見受打擊部位皮膚有細(xì)小出血點(diǎn)。造模成功的大鼠隨機(jī)分為 5 組，即藥物組合物組、扶他林乳膠劑對照組、模型組，各組 15只。

2.2 給藥方法

藥物組合物組、扶他林乳膠劑對照組造模 24h 后開始給藥，藥物組合物組(0.5g/kg)直接將藥物敷于造模處，使之覆蓋瘀斑范圍，外用膠布包扎。扶他林乳膠劑對照組將乳膠劑均勻涂布于造模處，外用紗布和膠布包扎。每天 1次，共 7 次。正常組和模型組不作任何處理。

2.3 IL－1β、IL－6 含量的測定

在造模后第 4d、第 8d 分別于各組中任取 8 只大鼠，以打擊部位為中心，沿?fù)p傷處切取肌肉組織，正常對照組在相應(yīng)位置取肌肉組織，用生理鹽水漂洗 1min，濾紙吸干，分析天平稱取 100mg，置液氮中備用。測定IL－1β、IL－6含量時每 10mg 組織加入生理鹽水0.5ml，于組織勻漿器中緩慢而均勻地研磨 1～3min，至勻漿液呈均勻一致懸濁液，倒入試管中，離心4500rpm/min，10min，收集上清液，用 ELISA 法測定，操作步驟按照試劑盒要求完成。

2.4 統(tǒng)計處理

采用 SPSS16．0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用兩樣本均數(shù) t 檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié) 果

3.1 藥物組合物對損傷組織IL－1β含量的影響

造模各組IL－1β組織勻漿液在造模后含量均高于空白對照組(P＜0.05)； 第 4d、第 8d 藥物組合物組、扶他林組與模型對照組比較均有差異性( P＜O.01)。

3.2 藥物組合物對損傷組織 IL－6 含量的影響

各組模鼠損傷局部軟組織 IL－6 含量在傷后均明顯高于空白組(P＜O.05)。藥物組合物組與扶他林組均能降低損傷局部軟組織 IL－6含量，與模型組比較 P＜O.O1。