本發(fā)明涉及光動力殺菌療法運用的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域及其他工業(yè)領(lǐng)域，具體涉及一種用于光動力殺菌的光敏藥物制劑及其用途，更確切地說，本發(fā)明涉及一種由光敏劑、至少一種季銨鹽類以及粘度調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、賦形劑等其它藥學(xué)上可接受的載體通過適當(dāng)?shù)闹苽浼夹g(shù)制成的光敏藥物制劑，以及其用于對目標(biāo)處理區(qū)域進行光動力殺菌時，季銨鹽類對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、真菌及寄生性原生生物等致病性微生物具有協(xié)同抗微生物作用。

背景技術(shù)：

光動力療法用于惡性腫瘤治療的療效已經(jīng)得到認(rèn)可，光動力療法也可以用于非腫瘤性疾病的治療：尤其是包括皮膚疾病、良性前列腺增生、老年性黃斑變性等以有害細胞或者無用細胞增殖為特點的疾病，近幾年來，人們也越來越關(guān)注光動力療法在治療感染性疾病方面的應(yīng)用，目前已經(jīng)證實光動力殺菌療法(PDT)是有效的體外非抗生素抗微生物途徑。

與傳統(tǒng)的抗生素治療相比，光動力殺菌療法具有以下優(yōu)勢：(1)對包括革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、真菌及寄生性原生生物在內(nèi)的大多數(shù)致病微生物均能有效殺滅；(2)作用機制特殊，不產(chǎn)生耐藥性，不論是多次治療，還是耐藥性菌株，均對光動力療法敏感；(3)對致病微生物細胞的殺滅具有靶向選擇性，不影響人體正常組織細胞；(4)無致突變性。因此，光動力殺菌療法適用于口腔、鼻腔、婦女陰道、宮頸、皮膚表面、足部等局部微生物感染性疾病尤其是由于長期化學(xué)治療已經(jīng)變成慢性疾病的微生物感染性疾病的治療。

光動力殺菌療法首先是將光敏藥物制劑作用于目標(biāo)處理區(qū)域，光敏劑在致病微生物細胞的細胞膜附近富集，接著以所述光敏劑最大吸收的波長向目標(biāo)處理區(qū)域?qū)嵤┕庹丈洌霉饽軄砑ぐl(fā)光敏劑，從而使得光敏劑能夠隨后與底物/溶劑直接相互作用產(chǎn)生氧自由基(I型反應(yīng))，或者能與分子氧相互作用，生成單線態(tài)氧(II型反應(yīng))。這些氧自由基、單線態(tài)氧等活性氧成分通過脂質(zhì)過氧化、膜損傷和細胞內(nèi)組件的損傷，從而導(dǎo)致致病菌細胞死亡。

由于季銨鹽類消毒劑副作用小、無色、無臭、刺激性小、低毒安全，故做為防腐劑和消毒劑在化妝品、消毒產(chǎn)品及藥品中得到廣泛運用，然而，早期的季銨鹽類消毒劑存在抗菌譜窄、易受陰離子活性劑、水質(zhì)、蛋白等有機物生物影響從而降低抗菌效果等缺點。雙長鏈季銨鹽、混合季銨鹽、聚合季銨鹽、殼聚糖季銨鹽等新型季銨鹽類產(chǎn)品的出現(xiàn)，不僅克服了老一代單鏈季銨鹽的缺點，同時具有抵抗陰離子型活性劑、硬水、蛋白有機物等的不利作用的優(yōu)點，在維持良好的殺菌效果的同時，拓寬了抗菌譜，在制藥、化妝品、消毒產(chǎn)品中得到廣泛運用。

季銨鹽類化合物為陽離子型抗菌劑，可以改變致病性微生物細胞細胞膜的通透性，使細胞菌體物質(zhì)外滲，阻礙其代謝而使細胞死亡。季銨鹽類消毒劑在低濃度下有抑菌作用，較高濃度時可殺滅大多數(shù)種類的細胞繁殖體與部分病毒。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種用于光動力殺菌的光敏藥物制劑，用于光動力殺菌的光敏藥物制劑包含：光敏劑、至少一種季銨鹽類以及粘度調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、賦形劑等其它藥學(xué)上可接受的載體通過適當(dāng)?shù)闹苽浼夹g(shù)制成的光敏藥物制劑，以及其用于對目標(biāo)處理區(qū)域進行光動力殺菌治療時，季銨鹽類對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、真菌及寄生性原生生物等致病性微生物具有協(xié)同抗微生物作用。

光敏劑可以是任何公開的光敏劑，尤其是結(jié)構(gòu)中帶有正電荷官能團的光敏劑或者陽離子型光敏劑，比如亞甲基藍、甲苯胺藍及其衍生物等。光敏劑的最大吸收波長應(yīng)在600nm-700nm范圍內(nèi)，濃度不大于2％，光敏劑的種類、量及濃度可根據(jù)應(yīng)用需要進行適當(dāng)調(diào)整。

至少一種季銨鹽類在光敏藥物制劑中的作用之一在于做為防腐劑，抑制光敏藥物制劑中微生物生長；作用之二在于對目標(biāo)處理區(qū)域進行光動力殺菌時具有協(xié)同抗微生物作用。季銨鹽可以是任何公開的季銨鹽類化合物，比如苯扎溴銨、苯扎氯銨、雙長鏈季銨鹽、殼聚糖季銨鹽、復(fù)合型季銨鹽或其組合，濃度為0.001％-2％。季銨鹽類化合物的種類、量及濃度可根據(jù)應(yīng)用需要進行適當(dāng)調(diào)整。

藥學(xué)上可接受的載體是指粘度調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、賦形劑等其它藥學(xué)上可接受的載體，藥物可接受的載體優(yōu)選列于美國藥典、日本藥局方、中國藥典的藥用輔料。藥學(xué)上可接受的載體應(yīng)與光敏劑、季銨鹽類具有良好的相容性。

用于光動力殺菌的光敏藥物制劑可以是包括液體制劑、凝膠劑、軟膏劑、乳膏劑、氣霧劑、噴霧劑在內(nèi)的所有臨床可接受的藥物劑型。藥物劑型的PH值應(yīng)該在5.0-7.0的范圍內(nèi)。

本發(fā)明還提供了用于光動力殺菌的光敏藥物制劑的用途：以適當(dāng)?shù)姆绞较蚰繕?biāo)處理區(qū)域應(yīng)用光敏藥物制劑，以所述光敏劑最大吸收的波長向目標(biāo)處理區(qū)域應(yīng)用光，從而殺滅目標(biāo)處理區(qū)域內(nèi)的革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、真菌及寄生性原生生物等致病微生物。

目標(biāo)處理區(qū)域是口腔、鼻腔、婦女陰道、宮頸、足部、皮膚粘膜表面等。目標(biāo)處理區(qū)域應(yīng)存在革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、真菌及寄生性原生生物等致病性微生物引起的局部感染?？梢愿鶕?jù)目標(biāo)處理區(qū)域存在的局部感染的性質(zhì)及程度實施多次光動力殺菌。

附圖說明

圖1亞甲基藍凝膠劑A和亞甲基藍凝膠劑B的紫外吸收光譜圖

具體實施方式

具體實施例一：

亞甲基藍凝膠劑A：0.01％w/v亞甲基藍及其它合適的藥學(xué)上可接受的載體。

亞甲基藍凝膠劑B：0.01％w/v亞甲基藍、0.2％雙長鏈季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍凝膠劑A一致。

凝膠劑C：0.2％雙鏈季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍凝膠劑A一致。

凝膠劑空白：不含有亞甲基藍和雙鏈季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍凝膠劑A一致。

亞甲基藍單體可以被光化學(xué)激發(fā)為高量子產(chǎn)率的三倍體形式，從而進一步將能量傳遞給分子氧，得到單線態(tài)氧，而單線態(tài)氧被認(rèn)為是光動力殺菌過程中主要的活性氧成分。亞甲基藍二聚體等聚合物不產(chǎn)生單線態(tài)氧，沒有抗微生物活性。665-670nm范圍內(nèi)的吸收峰為亞甲基藍單體的特征吸收峰。600-610nm處的第二峰為亞甲基藍二聚體的特征吸收峰。按照中國藥典附錄分光光度法對上述樣品在200nm-800nm范圍內(nèi)進行紫外掃描，紫外掃描結(jié)果(附圖1)表明：亞甲基藍凝膠劑A與亞甲基藍凝膠劑B相比，亞甲基藍凝膠劑A中亞甲基藍單體含量更低，季銨鹽類能夠抑制亞甲基藍二聚體的形成。

首先對接種有大腸桿菌(10⁷-10⁸CFU/ml)的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基依次給予光敏藥物制劑，接著進行適當(dāng)條件的光照處理，對處理前后各營養(yǎng)培養(yǎng)基的菌落數(shù)進行考察，分別考察各光敏藥物凝膠劑的殺菌效果。

光敏藥物制劑樣品：亞甲基藍凝膠劑A、亞甲基藍凝膠劑B、凝膠劑C

光照射處理條件：激光器：輸出功率：220mW；激光波長：670nm；功率密度：344mW/cm²；照射時間：60秒；總能量劑量：20.6J/cm²。

凝膠劑空白組不經(jīng)光照射處理做為陰性對照組。

結(jié)果顯示：陰性對照組沒有顯示抗微生物效力；凝膠劑C組沒有顯示抗微生物活力，亞甲基藍凝膠劑B組較亞甲基藍凝膠劑A組顯示更強的抗微生物效力，這表明：低濃度條件下雙長鏈季銨鹽沒有抗微生物效力，但是，在光動力殺菌治療時，光敏劑和雙長鏈季銨鹽的組合具有更強的抗微生物活性，雙長鏈季銨鹽具有協(xié)同抗微生物作用。

具體實施例二：

亞甲基藍溶液A：0.01％w/v亞甲基藍及其它合適的藥學(xué)上可接受的載體。

亞甲基藍溶液B：0.01％w/v亞甲基藍、0.2％殼聚糖季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍溶液A一致。

溶液C：0.2％殼聚糖季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍溶液A一致。

空白溶液：不含有亞甲基藍和殼聚糖季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍溶液A一致。

按照中國藥典附錄分光光度法在200nm-800nm范圍內(nèi)進行紫外掃描，紫外掃描結(jié)果表明：亞甲基藍溶液A與亞甲基藍溶液B相比，亞甲基藍溶液A中亞甲基藍單體含量更低，殼聚糖季銨鹽抑制亞甲基藍二聚體的形成。

首先對接種有金黃色葡萄球菌(10⁷-10⁸CFU/ml)的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基依次給予光敏藥物制劑，接著進行適當(dāng)條件的光照處理，對處理前后各營養(yǎng)培養(yǎng)基的菌落數(shù)進行考察，分別考察各光敏藥物制劑的殺菌效果。

光敏藥物制劑樣品：亞甲基藍溶液A、亞甲基藍凝溶液B、溶液C

光照射處理條件：激光器：輸出功率：220mW；激光波長：670nm；功率密度：344mW/cm²；照射時間：60秒；總能量劑量：20.6J/cm²。

空白溶液組不經(jīng)光照射處理做為陰性對照組。

結(jié)果顯示：陰性對照組沒有顯示抗微生物效力；溶液C組沒有顯示抗微生物活力，亞甲基藍溶液B組較亞甲基藍溶液A組顯示更強的抗微生物效力，這表明：低濃度條件下殼聚糖季銨鹽沒有抗微生物效力，但是，在光動力殺菌治療時，光敏劑和殼聚糖季銨鹽的組合具有更強的抗微生物活性，殼聚糖季銨鹽具有協(xié)同抗微生物作用。

具體實施例三：

亞甲基藍軟膏A：0.01％w/v亞甲基藍及其它合適的藥學(xué)上可接受的載體。

亞甲基藍軟膏B：0.01％w/v亞甲基藍、0.2％聚合季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍軟膏A一致。

軟膏C：0.2％聚合季銨鹽，其它合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍軟膏A一致。

空白軟膏：不含有亞甲基藍和聚合季銨鹽，其他合適的藥學(xué)上可接受的載體與亞甲基藍軟膏A一致。

按照中國藥典附錄分光光度法在200nm-800nm范圍內(nèi)進行紫外掃描，紫外掃描結(jié)果表明：亞甲基藍軟膏A與亞甲基藍軟膏B相比，亞甲基藍軟膏A中亞甲基藍單體含量更低，聚合季銨鹽抑制亞甲基藍二聚體的形成。

首先對接種有白色念球菌(10⁷-10⁸CFU/ml)的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基依次給予光敏藥物制劑，接著進行適當(dāng)條件的光照處理，對處理前后各營養(yǎng)培養(yǎng)基的菌落數(shù)進行考察，分別考察各光敏藥物制劑的殺菌效果。

光敏藥物制劑樣品：亞甲基藍軟膏A、亞甲基藍凝軟膏B、軟膏C

光照射處理條件：激光器：輸出功率：220mW；激光波長：670nm；功率密度：344mW/cm²；照射時間：60秒；總能量劑量：20.6J/cm²。

空白軟膏組不經(jīng)光照射處理做為陰性對照組。

結(jié)果顯示：陰性對照組沒有顯示抗微生物效力；軟膏C組沒有顯示抗微生物活力，亞甲基藍軟膏B組較亞甲基藍軟膏A組顯示更強的抗微生物效力，這表明：低濃度條件下聚合季銨鹽沒有抗微生物效力，在光動力殺菌治療時，光敏劑和聚合季銨鹽的組合具有更強的抗微生物活性，聚合季銨鹽具有協(xié)同抗微生物作用。

以上實施例僅為本發(fā)明具體實施例的一部分，凡依本發(fā)明權(quán)利要求書所作的改變，所產(chǎn)生的功能作用未超出本發(fā)明權(quán)利要求書要求的范圍時，均屬于本發(fā)明的保護范圍。