本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及一種野山參皂苷的提取方法。

背景技術(shù)：

野山參就是播種后，自然生長(zhǎng)于深山密林15年以上的人參，野山參為滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥，幾乎世人皆知。野山參所含化學(xué)成分包括人參皂苷、糖類、氨基酸、維生素、蛋白質(zhì)、多肽、有機(jī)酸、脂溶性成分以及微量元素等，具有特殊的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)益價(jià)值和良好的治療作用。皂苷是野山參的最為重要的一類生理活性物質(zhì)，它具有較高的抗腫瘤活性，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、改善心血管及造血系統(tǒng)，對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒副作用，與其他化療藥物聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用。目前我國(guó)對(duì)人參皂苷的提取分離方法、制劑工藝以及臨床應(yīng)用等方面做了大量研究，而且已經(jīng)有野山參皂苷的新產(chǎn)品推向市場(chǎng)。但是現(xiàn)在主要采用加熱回流法、浸漬法等等。但傳統(tǒng)提取方法本身存在許多缺陷，如：提取收率低，有效成分損失、分解、失活，產(chǎn)物中雜質(zhì)含量高，提取時(shí)間長(zhǎng)，工藝繁瑣等，難以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)等不足。

因此，需要提供一種新的野山參皂苷的提取方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種野山參皂苷的提取方法，該方法提取效率高，皂苷純度好，提取時(shí)間短且工藝簡(jiǎn)單，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種野山參皂苷的提取方法，包括如下步驟：

1)將野山參洗凈、烘干后，經(jīng)切片、粉碎、過篩，得60～90目的野山參粉末；

2)將野山參粉末用4～5倍質(zhì)量的石油醚回流脫脂后，將野山參粉末在水中浸泡6～8h，再調(diào)節(jié)pH至8～10，得混合物；

3)將步驟2)得到的混合物經(jīng)超聲提取，減壓濃縮后，得濃縮物；

4)將濃縮物配成25～30wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.4～0.5倍，先用水以3～3.5BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用60～70％的乙醇以0.2～0.8BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液；

5)將洗脫液減壓濃縮至6～7波美度，真空干燥，得野山參皂苷粗品；

6)向得到的野山參皂苷粗品中加入正丁醇，粗品與正丁醇的質(zhì)量比為1kg:100～150L，浸泡1～1.5h后，分散均勻，過濾，減壓濃縮，得精制的野山參皂苷。

優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式中，所述的提取方法包括如下步驟：

1)將野山參洗凈、烘干后，經(jīng)切片、粉碎、過篩，得60～90目的野山參粉末；

2)將野山參粉末用4.5倍質(zhì)量的石油醚回流脫脂后，將野山參粉末在水中浸泡7h，再調(diào)節(jié)pH至9，得混合物；

3)將步驟2)得到的混合物經(jīng)超聲提取，減壓濃縮后，得濃縮物；

4)將濃縮物配成26wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.4～0.5倍，先用水以3.5BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用60～70％的乙醇以0.4～0.6BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液；

5)將洗脫液減壓濃縮至6～7波美度，真空干燥，得野山參皂苷粗品；

6)向得到的野山參皂苷粗品中加入正丁醇，粗品與正丁醇的質(zhì)量比為1kg:120L，浸泡1～1.5h后，分散均勻，過濾，減壓濃縮，得精制的野山參皂苷。

優(yōu)選地，上述步驟2)中，調(diào)節(jié)pH的方法為，加入CaO至野山參粉末的水溶液的pH值為8～10。

優(yōu)選地，上述步驟3)中，超聲提取的方法為：將步驟2)得到的混合物超聲6～10min，減壓濃縮后收集粉末；再將粉末在水中浸泡1～2h，調(diào)節(jié)pH至8～10，超聲4～5min，減壓濃縮，再收集粉末；將粉末在水中浸泡1～1.5h，調(diào)節(jié)pH至8～10，超聲4～5min，收集濾液。

更優(yōu)選地，所述超聲的溫度為40～50℃，超聲功率為100～200W。

優(yōu)選地，上述步驟4)中，乙醇的用量為大孔樹脂柱體積的5～6倍。

本發(fā)明的有益效果如下：

本發(fā)明野山參皂苷的提取方法中，提取效率高，生產(chǎn)速度快，且生產(chǎn)穩(wěn)定性高，生產(chǎn)成本低，得到的皂苷純度好，且提取操作簡(jiǎn)便省時(shí)，能耗低，不易發(fā)霉變質(zhì)，適合于工業(yè)化生產(chǎn)，具有很好的市場(chǎng)前景。

具體實(shí)施方式

為了更清楚地說明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實(shí)施例1

一種野山參皂苷的提取方法，步驟如下：

1)將野山參洗凈、烘干，再經(jīng)過切片、粉碎、過篩，得到80目的野山參粉末；

2)將得到的100kg的野山參粉末用其質(zhì)量4倍量的石油醚回流脫脂，再將脫脂后的野山參粉末在水中浸泡6h，加入CaO，至野山參粉末的水溶液pH值為8；

3)將步驟2)得到的混合物用超聲提取，提取方法為：將步驟2)得到的混合物超聲8min，減壓濃縮后收集粉末；再將粉末在水中浸泡1.5h，調(diào)節(jié)pH至8，超聲4～5min，減壓濃縮，再收集粉末；將粉末在水中浸泡1.5h，調(diào)節(jié)pH至8，超聲4～5min，收集濾液，再將濾液減壓濃縮，得濃縮物；其中超聲波的溫度為45℃，超聲功率為150W；

4)將濃縮物配成30wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，其中，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.4倍，先用水以3BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用65％的乙醇以0.3BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液；

5)將洗脫液減壓濃縮至6波美度，真空干燥，得皂苷粗品；

6)向得到的皂苷粗品中加入正丁醇，粗品與正丁醇的質(zhì)量比為1kg：110L，浸泡1h后，分散均勻，再經(jīng)過濾，減壓濃縮，得8.8kg精制的近白色粉末野山參皂苷。

實(shí)施例2

一種野山參皂苷的提取方法，步驟如下：

1)將野山參洗凈、烘干，再經(jīng)過切片、粉碎、過篩，得到80目的野山參粉末；

2)將得到的100kg的野山參粉末用其質(zhì)量4.5倍量的石油醚回流脫脂，再將脫脂后的野山參粉末在水中浸泡7h，加入CaO，至野山參粉末的水溶液pH值為9；

3)將步驟2)得到的混合物用超聲提取，提取方法為：將步驟2)得到的混合物超聲7min，減壓濃縮后收集粉末；再將粉末在水中浸泡1.8h，調(diào)節(jié)pH至9，超聲4～5min，減壓濃縮，再收集粉末；將粉末在水中浸泡1.5h，調(diào)節(jié)pH至9，超聲4～5min，收集濾液，再將濾液減壓濃縮，得濃縮物；其中超聲波的溫度為45℃，超聲功率為150W；

4)將濃縮物配成26wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，其中，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.5倍，先用水以3.5BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用68％的乙醇以0.6BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液；

5)將洗脫液減壓濃縮至7波美度，真空干燥，得皂苷粗品；

6)向得到的皂苷粗品中加入正丁醇，粗品與正丁醇的質(zhì)量比為1kg：120L，浸泡1.4h后，分散均勻，再經(jīng)過濾，減壓濃縮，得9.1kg精制的近白色粉末野山參皂苷。

實(shí)施例3

一種野山參皂苷的提取方法，步驟如下：

1)將野山參洗凈、烘干，再經(jīng)過切片、粉碎、過篩，得到90目的野山參粉末；

2)將得到的100kg的野山參粉末用其質(zhì)量5倍量的石油醚回流脫脂，再將脫脂后的野山參粉末在水中浸泡8h，加入CaO，至野山參粉末的水溶液pH值為9；

3)將步驟2)得到的混合物用超聲提取，提取方法為：將步驟2)得到的混合物超聲8min，減壓濃縮后收集粉末；再將粉末在水中浸泡1.8h，調(diào)節(jié)pH至9，超聲4～5min，減壓濃縮，再收集粉末；將粉末在水中浸泡1.5h，調(diào)節(jié)pH至9，超聲4～5min，收集濾液，再將濾液減壓濃縮，得濃縮物；其中超聲波的溫度為45℃，超聲功率為150W；

4)將濃縮物配成28wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，其中，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.5倍，先用水以3.2BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用60～70％的乙醇以0.8BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液；

5)將洗脫液減壓濃縮至7波美度，真空干燥，得皂苷粗品；

6)向得到的皂苷粗品中加入正丁醇，粗品與正丁醇的質(zhì)量比為1kg：150L，浸泡1.5h后，分散均勻，再經(jīng)過濾，減壓濃縮，得8.9kg精制的近白色粉末野山參皂苷。

對(duì)比例1

重復(fù)實(shí)施例1，區(qū)別在于，將步驟2)中的石油醚換成乙醚，其余條件不變，提取得7.2kg野山參皂苷。

對(duì)比例2

重復(fù)實(shí)施例1，區(qū)別在于，將步驟3)中的超聲提取的提取方法改為：將步驟2)得到的混合物超聲18min，收集濾液，其中超聲波的溫度為45℃，超聲功率為150W。其余條件不變，提取得到的野山參皂苷重量為6.5kg。

對(duì)比例3

重復(fù)實(shí)施例1，區(qū)別在于，將步驟4)改為“將濃縮物配成30wt％的水溶液，上大孔樹脂柱，其中，樹脂量為野山參粉末質(zhì)量的0.5倍，先用水以2.5BV/h的流速?zèng)_洗，至流出液清亮無(wú)色，再用60～70％的乙醇以1.2BV/h的速度洗脫，至TLC檢查無(wú)皂苷顯色反應(yīng)為止，收集洗脫液”，其余條件不變，提取得到的野山參皂苷重量為7.0kg。

對(duì)比例4～5

重復(fù)實(shí)施例1，區(qū)別在于，將步驟6)中的粗品與正丁醇的質(zhì)量比分別改為“1kg：200L”和“1kg：80L”，其余條件不變，提取得到的野山參皂苷重量分別為7.5kg和7.7kg。

對(duì)比例6

重復(fù)實(shí)施例1，區(qū)別在于，將步驟4)中濃縮物的水溶液的質(zhì)量濃度改為20wt％，其余條件不變，提取得到的野山參皂苷重量為7.4kg。

顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。